La insuficiència cardíaca (IC) constitueix un problema de primera magnitud als països desenvolupats per la seva alta prevalença, morbi-mortalitat i impacte socio-econòmic. Estimar el risc individual dels pacients amb IC segueix sent un repte per l’heterogeneïtat del seu curs clínic que es veu modulat per múltiples factors i les imprecisions dels facultatius en les prediccions de risc. L’estratificació del pronòstic és important ja que condiciona el tractament i seguiment. La tesi doctoral sorgeix de la necessitat de millorar l’estratificació pronòstica en pacients amb insuficiència cardíaca crònica controlats a una Unitat d’Insuficiència Cardíaca Multidisciplinària, tot incorporant l’ús de biomarcadors (substàncies circulants en sang perifèrica) de diferents processos fisiopatològics. Els resultats de la investigació es presenten en forma de compendi de 6 articles fonamentals i 2 no fonamentals però que formen part de la mateixa línia d’investigació. Utilitzant metodologia estadística rigorosa i sobre un model de variables clíniques pronòstiques establertes, s’ha valorat el valor complementari de diferents biomarcadors en una població amb IC crònica. El primer objectiu va ser valorar el valor de biomarcadors emergents. L’ST2 (marcador de fibrosi) i troponina T d’alta sensibilitat (hs-cTnT) (marcador de lesió miocardíaca) per separat i en combinació, presentaren valor pronòstic additiu sobre els pèptids natriurètics (NT-proBNP). El model amb l’ST2 i la hs-cTnT ofereix una precisió pronòstica igual o lleugerament superior al d’un model amb tres biomarcadors incloent l’NT-pro-BNP (estratègia multimarcador). Això suggereix que potser no és tan important afegir múltiples biomarcadors, sinó identificar les combinacions amb millor rendiment. El segon objectiu fou compara entre si marcadors d’un mateix mecanismes biològic de la IC, per tal d’ estimar quins ofereixen la millor precisió pronòstica. Es van analitzar dos marcadors de lesió miocardíaca (hs-cTnT i la troponina I amb sensibilitat contemporània [sc-cTnI]), dos marcadors de fibrosi (ST2 i galectina-3) i dos de funció renal (cistatina-C i filtrat glomerular estimat). Així, s’obtingueren millors resultats amb la hs-cTnT, tot i que los dues troponines foren predictives de mortalitat. Tant l’ST2 com la galectina-3 es van associar a un augment de mortalitat global, però només l’ST2 es va associar a la mortalitat de causa cardiovascular i va aportar valor complementari sobre els factors de risc establerts. La cistatina-C i el filtrat glomerular renal estimat per Cockroft-Gault van mostrar un rendiment pronòstic similar, i quan es van associar, la cistatina només fa afegir capacitat predictiva al subgrup de pacients amb insuficiència renal moderada. La relació entre la funció renal i alguns dels nous biomarcadors no és ben coneguda, pel es va explorar el comportament de l’ST2 en pacients amb insuficiència renal. La capacitat pronòstica de l’ST2 no es va veure afectada per la funció renal i inclús va estratificar millor en el subgrup amb insuficiència renal. Finalment, s’elaborà una calculadora de risc de mortalitat accessible online (www.bcnbiohfcalculator.cat), innovadora en quant que incorpora tres biomarcadors (ST2, hs-cTnT, NT-proBNP) que milloren significativament la precisió pronòstica de les variables clíniques i aporta l’estimació de risc de mort a 1,2 i 3 anys i l’esperança de vida. Els resultats esmentats aporten informació nova en el camp dels biomarcadors i potencialment aplicable a la pràctica clínica que podria contribuir a millorar l’estratificació pronòstica individual dels pacients amb IC crònica. / Heart failure (HF) is a major health problem due to its high prevalence, morbidity and mortality and its rising healthcare costs. One of the challenges of treating heart failure is predicting disease severity. There is a great heterogeneity in the course of illness as it may be influenced bay many factors. Estimating prognosis is important as it determines the appropriate treatment and follow-up. This thesis arises from the need to improve prognostic stratification in patients with chronic HF followed up at a Heart Failure Clinic and incorporates the use of biomarkers (circulating substances in peripheral blood) reflecting different pathophysiological mechanisms of HF. The results are presented as a collection of six fundamental articles and 2 non-fundamental articles, which follow the same investigation line. Using robust statistical methodology and on top of a comprehensive model of established prognostic clinical variables we assessed the complementary value of biomarkers in risk stratification in a population with chronic IC. The first objective was to evaluate the role of emerging biomarkers. The addition of ST2 (fibrosis marker) and high-sensitivity troponin T (hs-ctnT), a marker of cardiac injury, separately and combined to a clinical model improved risk stratification, and this improvement was additive to natriuretic peptides (NT-proBNP). However, the model with ST2 and hs-cTnT (mulimarker strategy) provided prognostic accuracy equal or slightly higher than a model with three biomarkers (NT-pro-BNP), which suggests that the combination of an increasing number of biomarkers does not necessarily improve risk stratification. The second objective was to evaluate how two markers of the same biological mechanism of HF compare in terms of prognostic accuracy. For this purpose two markers of myocardial injury (hs-cTnT and sc-cTnI), two markers of fibrosis (ST2 and galectin-3) and two markers of renal function (estimated glomerular filtration rate with the Cockroft-Gault formula and cystatin-C) were assessed. Both troponins predicted mortality but hs-cTnT showed better measures of performance. ST2 and galectin-3 were both associated with increased overall mortality, but only ST2 was associated with cardiovascular mortality and provided additional value to established risk factors. Cystatin-C and estimated glomerular filtration rate showed similar long-term predictive value. When analysed in combination Cystatin-C seemed to offer improved prognostication in HF patients with moderate renal dysfunction. Thirdly, due to the scare information regarding renal function and emerging biomarkers, we explored the performance of ST2 in patients with heart and renal failure. The prognostic capacity of ST2 was not affected by renal function and performed even better in the subgroup of patients with renal failure. Finally, we developed a new mortality HF risk-calculator that incorporates three biomarkers (ST2, hs-cTnT and NT-proBNP), which significantly improved prognostic accuracy. It provides individual prediction of death at 1, 2 and 3 years and life expectancy and its available online (www.bcnbiohfcalculator.cat). The above results provide new information in the field of biomarkers and offer a new prognostic tool, which can be used in clinical practice to assist physicians to improve the prognostic stratification of individual patients with chronic IC.

Un elevat nombre de pacients que reben ventilació mecànica després del començament d’una malaltia crítica desenvolupen feblesa muscular, la qual cosa suposa un augment en la morbiditat i en els costos econòmics. La recuperació a la situació funcional prèvia pot retardar-se diversos mesos després de l’alta d’UCI. El disposar d’un mètode per a la identificació precoç d’aquesta alteració neuromuscular permetria aprofundir no només en les conseqüències d’aquesta feblesa sinó, a més, ajudar a esclarir aspectes fisiopatològics i causals així com possibles alternatives en el tractament. Des de l’any 2006 al 2011 duem a terme un estudi prospectiu, observacional, en una UCI general, per trobar un marcador clínic precoç que ajudés a identificar la presència de miopatia o neuropatia de la UCI. Realitzàrem estudis electrofisiològics seqüencials a 100 pacients intubats. A més, recollírem dades antropomètrics, clínics, analítics i farmacològics analitzant la seva relació amb les troballes en la biòpsia muscular en aquesta cohorte de pacients. Els resultats més rellevants mostraren que l’aparició d’activitat patològica (en forma de fibril·lació o ones positives), detectada mitjançant electromiograma amb agulla coaxial, s’associaren de manera molt significativa amb la pèrdua de caps de miosina observada en la histologia. La prova tingué una sensibilitat del 98% i una especificitat del 100% com a mètode diagnòstic precoç de la miopatia de la UCI en pacients sedoanalgesiats que no foren capaces de realitzar força de manera voluntària. La prevalença de miopatia fou del 61% en la nostra sèrie. L’activitat patològica en el electromiograma s’obserbava durant la primera setmana d’ingrés en un 59% dels pacients, i ho feia majoritàriament en els músculs tibial anterior i bessó. L’existència de xoc, xoc sèptic, fallada respiratòria, fallada hemodinàmica i gravetat del pacient mesurada amb els índexs de gravetat SOFA I APACHE II es va associar a un major risc de presentar alteracions en l’electromiograma d’agulla. A més, quan més gran és l’índex de gravetat SOFA o APACHE II, abans apareix la fibril·lació. La detecció d’activitat patològica espontània es va vincular amb una menor amplitud i una major durada del potencial d’acció muscular compost en l’estudi de nervis motors. La latència i velocitat no es van veure modificades respecte als estàndards de normalitat. No trobarem absència de resposta sensitiva evocada que suggerís la presència de neuropatia. L’administració de corticoids i relaxants musculars no es va associar al desenvolupament de miopatia. Tampoc trobem relació amb l’hiperglucèmia, ja que els nivells de glucèmia es van mantenir molt controlats mitjançant protocol d’insulina subcutània. En canvi, el desenvolupament d’alteracions en el electromiograma es va associar amb un temps significativament major de retirada de la ventilació mecànica i estada en UCI, així com de recuperació de la força mesurada amb l’escala MRC i de la situació funcional basal mesurada mitjançant l’escala de Barthel. Finalment, no trobarem major mortalitat en els pacients amb miopatia d’UCI. Per tot això podem concloure que la presència d’activitat espontània patològica en forma de fibril·lació i ones positives en l’estudi electromiogràfic amb agulla coaxial pot servir com a marcador fiable, precoç i senzill per a la detecció de la miopatia de la UCI en els seus estadis més inicials. / Un elevado número de pacientes que reciben ventilación mecánica tras el inicio de una enfermedad crítica desarrollan debilidad muscular, lo que supone un aumento en la morbilidad y de los costes económicos. La recuperación a la situación funcional previa puede retrasarse varios meses tras el alta de UCI. El disponer de un método para la identificación precoz de dicha alteración neuromuscular permitiría profundizar no sólo en las consecuencias de esta debilidad sino, además, ayudar a esclarecer aspectos fisiopatológicos y causales así como posibles alternativas en el tratamiento. Desde el año 2006 al 2011 llevamos a cabo un estudio prospectivo, observacional, en una UCI general, para hallar un marcador clínico precoz que ayudase a identificar la presencia de miopatía o neuropatía de la UCI. Realizamos estudios electrofisiológicos secuenciales a 100 pacientes intubados. Además recogimos datos antropométricos, clínicos, analíticos y farmacológicos analizando su relación con los hallazgos de la biopsia muscular en esta cohorte de pacientes. Los resultados más relevantes muestraron que la aparición de actividad patológica (en forma de fibrilación u ondas positivas), detectada mediante electromiograma con aguja coaxial, se asociaba de manera muy significativa con la pérdida de cabezas de miosina observada en la histología. La prueba tuvo una sensibilidad del 98% y una especificidad del 100% como método diagnóstico precoz de la miopatía de la UCI en pacientes sedoanalgesiados que no son capaces de realizar fuerza de manera voluntaria. La prevalencia de miopatía fue del 61% en nuestra serie. La actividad patológica en el electromiograma se observó durante la primera semana de ingreso en un 59% de los pacientes, mayoritariamente en los músculos tibial anterior y gemelo. La existencia de shock, shock séptico, fallo respiratorio, fallo hemodinámico y gravedad del paciente medidos con los índices de gravedad SOFA y APACHE II se asoció a un mayor riesgo de presentar alteraciones en el electromiograma con aguja. Además, cuanto mayor es el índice de gravedad SOFA o APACHE II, antes aparece la fibrilación. La detección de actividad patológica espontánea se vinculó con una menor amplitud y una mayor duración del potencial de acción muscular compuesto en el estudio de nervios motores. La latencia y velocidad no se vieron modificadas respecto a los estándares de normalidad. No encontramos ausencia de respuesta sensitiva evocada que sugiriera la presencia de neuropatía. La administración de corticoides y relajantes musculares no se asoció al desarrollo de miopatía. Tampoco hallamos relación con la hiperglucemia, ya que los niveles de glucemia se mantuvieron muy controlados mediante protocolo de insulina subcutánea. Sin embargo, el desarrollo de alteraciones en el electromiograma se asoció con un tiempo significativamente mayor de retirada de la ventilación mecánica y estancia en UCI, así como de recuperación de la fuerza medida con la escala MRC y de la situación funcional basal medida mediante la escala de Barthel. Finalmente, no encontramos mayor mortalidad en los pacientes con miopatía de UCI. Por todo esto podemos concluir que la presencia de actividad espontánea patológica en forma de fibrilación y ondas positivas en el estudio electromiográfico con aguja coaxial puede servir como marcador fiable, precoz y sencillo para la detección de la miopatía de la UCI en sus estadios más iniciales. / Al large number of patients receiving mechanical ventilation develop muscle weakness following the onset of a critical illness, which leads to an increase in morbidity and economic burdens. Recovery to previous functional status may be delayed several months after discharge from the intensive care unit (ICU). The early identification of these neuromuscular disorders may not only provide valuable insights on the consequences of this muscle weakness, but help shed light on its causal and pathophysiological aspects as well as on possible treatment alternatives. From 2006 to 2011 we conducted a prospective, observational study in a general ICU to find an early clinical marker that could help identify the presence of critical illness myopathy or neuropathy. We performed sequential electrophysiological studies of 100 patients under mechanical ventilation. In addition we collected anthropometric, clinical, analytical and pharmacological data and analyzed their association to muscle biopsy findings in this subject cohort. The main results showed that the occurrence of pathological activity (in the form of fibrillation or positive sharp waves), measured by coaxial needle electromyogram, was associated with a high level of significance with the selective loss of thick filaments (myosin heads) observed on histology. The test had a sensitivity of 98% and a specificity of 100% as a method of early diagnosis of critical illness myopathy in sedated patients who are unable to perform voluntary force. The prevalence of myopathy was of 61% in our series. The pathological electromyogram activity was detected during the first week of admission in 59% of patients, mostly in the anterior tibial and gastrocnemius muscles. The existence of shock, septic shock, respiratory failure, hemodynamic failure and patient severity was associated with an increased risk of fibrillation. Furthermore, the greater the SOFA or APACHE II severity index scores were, the earlier fibrillation appeared. The detection of pathological spontaneous activity was associated with smaller amplitude and a longer duration of the compound muscle action potential in motor nerve conduction studies. Latency and speed were unaffected compared to normal standards. We found no sensory evoked response that suggested the presence of critical illness neuropathy. Conversely, we found no association with the administration of corticosteroids or neuromuscular blockers, two commonly used drugs in the ICU which have been controversially proponed as drivers of ICU myopathy, nor with hyperglycemia, since it remained well controlled by subcutaneous insulin protocols. However, the development of alterations in the electromyogram was associated with a significantly prolonged mechanical ventilation, ICU stay, recovery of weakness measured by the MRC scale and baseline functional status as measured by the Barthel scale. Finally, we did not find higher mortality rates in ICU patients with myopathy. For all this we can conclude that the presence of pathological spontaneous activity in the form of fibrillation and positive sharp waves measured by coaxial needle electromyography may serve as a reliable and easily performed method for early detection of critical illness myopathy.

Objectivos: el objetivo principal de este estudio fue evaluar los efectos de la aplicación de melatonina y de un nuevo flavonoide (apigenina) sobre la neoformación y maduración ósea en un periodo de 30, 60 y 90 días mediante estudio histológico e histomorfométrico. Materiales y Metodos: En este estudio se han utilizado nueve perros de raza Beagle procedentes del Animalario de la Universidad de Murcia, con una edad comprendida entre los 14 y los 16 meses y con un peso aproximado de entre 16 y 18 kg. Los perros presentan mandíbulas intactas, dentición permanente totalmente erupcionada sin ningún tipo de trauma oclusal. Los especímenes mostraron buenas condiciones de salud general y oral. Resultados : Los resultados ponen de manifiesto, A los 30 dias. El hueso inmaduro en el grupo tratado con melatonina es inferior al del grupo control y la diferencia entre las medias es estadísticamente significativa (t(8)=16,222). El hueso inmaduro en el grupo tratado con apigenina es inferior al del grupo sin tratamiento y la diferencia de medias también ha resultado significativa (t(8)=19,167). Respecto a los grupos con tratamiento, el hueso inmaduro en el grupo tratado con melatonina es inferior al del grupo tratado con flavonoides y esta diferencia es estadísticamente significativa (t(8)=10,301). A los 60 dias, el hueso inmaduro en el grupo tratado con melatonina es inferior al del grupo control y la diferencia de las medias es estadísticamente significativa (t(8)=51,001). El hueso inmaduro en el grupo tratado con apigenina es inferior al del grupo sin tratamiento y la diferencia de medias que se obtiene también ha resultado significativa (t(8)=12,441. En cuanto a los grupos a los que se ha aplicado tratamiento, en el grupo tratado con melatonina el hueso inmaduro es inferior al del grupo tratado con flavonoides y la diferencia en el segundo mes también es estadísticamente significativa (t(8)=8,714). A los 90 dias , en el grupo tratado con melatonina, el hueso inmaduro es inferior al del grupo sin tratamiento. No obstante, la diferencia de las medias no es estadísticamente significativa (t(8)=2,201). En el grupo tratado con apigenina, el hueso inmaduro también es inferior al del grupo control y la diferencia de medias que se obtiene tampoco ha resultado significativa (t(8)=,619). Si comparamos los grupos con tratamiento, en el grupo tratado con melatonina el hueso inmaduro es inferior al del grupo tratado con flavonoides; sin embargo, la diferencia en el tercer mes no es estadísticamente significativa (t (8)=1,637). Conclusion: tras la aplicación de melatonina y/o apigenina se ha observado que se produjo una disminución significativa del porcentaje de hueso inmaduro a lo largo de los meses. En la apigenina la disminución es menor respecto a la melatonina. El tratamiento de melatonina favorece la neoformación y maduración ósea en mayor medida que el tratamiento con apigenina , tanto a los 30 como a los 60 días de la aplicación. La aplicación de melatonina y de apigenina en alvéolos postextracción a los 90 días no produce efectos diferentes en la neoformación y maduración ósea a la no aplicación de tratamiento. El tratamiento implantológico es una opción terapéutica y eficaz, muy demandada y con muy buenos resultados. La aplicación de melatonina, sola o combinada con otras sustancias mejora la osteointegración. Tanto la melatonina y apigenina demostraron sus ventajas en la maduración ósea, aunque El tratamiento de melatonina favorece la neoformación y maduración ósea en mayor medida que el tratamiento con apigenina. / Abstract Objectives: the main objective of this study was to evaluate the effects of melatonin and implementation of a new flavonoid (apigenin) on the new formation and bone maturation over a period of 30, 60 and 90 days by histological and histomorphometric study. Materials and Methods: in this study we have used nine Beagle dogs from the Animal Facility of the University of Murcia, with ages between 14 and 16 months and weighing approximately 16 to 18 kg. Dogs have intact jaws, fully erupting permanent teeth with no occlusal trauma. The specimens showed good general conditions and oral health. Results: the results show, 30 days. The immature bone in the group treated with melatonin smaller than the control group and the difference in means is statistically significant (t (8) = 16,222). The immature bone in the group treated with apigenin smaller than the untreated group and the mean difference has also been significant (t (8) = 19,167). With respect to the treatment groups, the immature bone in the group treated with melatonin smaller than the group treated with flavonoids and this difference is statistically significant (t (8) = 10,301). At 60 days, the immature bone in the group treated with melatonin smaller than the control group and the difference in means is statistically significant (t (8) = 51.001). The immature bone in the group treated with apigenin smaller than the untreated group and the mean difference obtained has also been significant (t (8) = 12,441. As for the groups to which has been applied treatment in the group treated with melatonin group the immature bone is less than the treaty with flavonoids and the difference in the second month group is also statistically significant (t (8) = 8,714). After 90 days, in the group treated with melatonin, the immature bone smaller than the untreated group. However, the mean difference is not statistically significant (t (8) = 2,201). In the group treated with apigenin, immature bone is also lower than the control group and the mean difference obtained did not prove significant (t (8) =, 619). Comparing the treatment groups in the group treated with melatonin immature bone smaller than the group treated with flavonoids; however, the difference in the third month is not statistically significant (t (8) = 1.637). Conclusion: after the application of melatonin and / or apigenin it has been observed that there was a significant decrease in the percentage of immature bone along months. In apigenin is decreased lower compared to melatonin. Melatonin treatment promotes neoformation of bone maturation and further treatment with apigenin, both 30 and 60 days after application. The application of melatonin and apigenin in extraction sockets 90 days does not produce different effects on the newly formed bone maturation and the non-application of treatment. Implant therapy is a therapeutic and effective, high demand and very successful option. The application of melatonin, alone or combined with other substances improving osseointegration. Both melatonin and apigenin showed its advantages in bone maturation, although melatonin treatment promotes neoformation and bone maturation greater extent than treatment with apigenin.

INTRODUCCIÓN La mucositis es uno de los efectos secundarios más frecuentes cuando un paciente es sometido a terapias contra el cáncer. Su incidencia está entre un 20-40% de los pacientes que reciben quimioterapia convencional, y un 80% de los pacientes con trasplantes de médula ósea y que han recibido radioterapia de cabeza y cuello. La complejidad del proceso de reparación de los tejidos, está influenciada por diferentes factores. La apigenina es un flavonoide natural con propiedades antiinflamatorias e antioxidantes, y posee la capacidad de neutralizar radicales libres. OBJETIVOS Objetivo general: El objetivo de este estudio fue evaluar el efecto de la administración de apigenina potásica o dexametasona sobre un modelo animal de mucositis oral inducida por el quimioterapéutico 5- Fluorouracilo. Objetivos específicos Reproducir el modelo experimental de mucositis oral en hámsters mediante la aplicación sistémica del quimioterapéutico 5- Fluorouracilo. Evaluación clínica de las lesiones orales desarrolladas y su evolución con la administración tópica de apigenina potásica o dexametasona, y estudiar los cambios producidos en los distintos tiempos de sacrificio (5, 7,10 y 14 días). Analizar mediante el estudio anatomopatológico el área de mucositis oral, y valorar los cambios orales a los 5, 7,10 y 14 días de la aplicación apigenina potásica o dexametasona. MATERIALES Y MÉTODOS Para la realización de este estudio, se utilizaron 36 hamsters Sirios que fueron divididos en 3 grupos, de los cuales se obtuvo 72 muestras: Control (50% ácido acético + 5-FU); grupo II (50% ácido acético + 5-FU + Dexametasona); grupo III (50% ácido acético + 5-FU + Apigenina Potásica). Seis animales de cada grupo fueron sacrificados en los días 5,7, 10 y 14, una vez inducida la mucositis. Las úlceras fueran clasificadas mediante un sistema de puntuaciones clínicas. El estudio histomorfométrico se realizó para cuantificar el número de células inflamatorias en las lesiones. RESULTADOS El proceso de curación en el grupo control fue más lento en comparación con los grupos tratados con Dexametasona y Apigenina. Se observan diferencia estadísticamente significativas entre el grupo tratado con Apigenina potásica con respecto a los otros dos grupos en el día 10 del experimento. El infiltrado inflamatorio era menor en el grupo de la Apigenina potásica en los días 7 y 10 del estudio, en comparación con el resto (p<0,05). No se observan diferencias estadísticamente significativas en los tres grupos durante el día 5 y 14 del experimento. CONCLUSIONES Una vez establecidos los objetivos y habiendo analizado los resultados, las conclusiones derivadas de este estudio son las siguientes: 1. La aplicación de 5-fluoruracilo y ácido acético originó, en todos los animales del estudio, la aparición de mucositis oral en el área tratada, confirmando la idoneidad del modelo animal empleado. 2. El tratamiento con apigenina potásica provocó la mejora de las lesiones ulcerosas respecto al control, tanto en la valoración clínica como en la histomorfométrica, donde existían diferencias estadísticamente significativas en el décimo día. 3. El efecto de la apigenina potásica en el modelo empleado fue similar e incluso superior en algunos aspectos y tiempos, al del corticoide dexametasona, lo que sugiere que podría tratarse de un agente de origen natural útil para el tratamiento de la mucositis oral. / INTRODUCTION Mucositis is an important side affect of cancer therapy, occurring in nearly 20% to 40% of patients receiving conventional chemotherapy, 80% of those under high-dose chemotherapy as conditioning for hematopoietic stem cell transplantation and nearly all patients receiving head and neck radiation therapy. Tissue repair complexity may be influenced by different factors. Naturally occurring flavonoids, like apigenin, have been shown to possess anti-inflammatory properties related to their antioxidant and free radical scavenging ability. PURPOSE General objective: - The aim of this study was to evaluate the effect of administration of apigenin potassium or dexamethasone on an animal model of oral mucositis induced by 5-fluorouracil chemotherapy. Specific objectives: - Replicate the experimental model of oral mucositis in hamsters by the systemic application of 5-fluorouracil chemotherapy. - Evaluate clinically the developed oral lesions and its evolution with topical administration of potassium apigenin or dexamethasone, and study the changes at different times of sacrifice (5, 7, 10 and 14 days). - Analyse by anatomopathological study the area of oral mucositis, and evaluate oral changes at 5, 7,10 and 14 days of application potassium apigenin or dexamethasone. MATERIALS AND METHODS Seventy-two male Syrian hamster were divided into three groups, and 72 samples were obtained: control (50% acetic acid + 5-FU); 50% acetic acid + 5-FU + Potassium Apigenin (KA) and 50% acetic acid + 5-FU + Dexametasone. Six animals from each group were sacrificed 5, 7, 10 and 14 days after inducing the mucositis; ulcers were assessed by imaging analysis using a scoring system (Cho, 2006). The number of inflammatory cells in the ulcerated region was quantified in all periods through histomorphometric analysis (H&E). RESULTS The healing process of the control group was slower than that of KA and Dexametasone-treated groups. There was significant difference between KA and control group in the 10-day period. Lower quantity of inflammatory cells in the KA treated group in comparison to control group in the 7- and 10-day periods was observed (p<0.05). No statistically significant difference was verified among the groups in 5- and 14-day periods. CONCLUSIONS After having established the objectives and the results analised, the conclusions of this study are: 1. Application of 5-fluorouracil and acetic acid resulted, in all animals of the study, in the occurrence of oral mucositis in the treated area, confirming the suitability of the used animal model. 2. Treatment with potassium apigenin caused the improvement of ulcerative lesions compared to the control group,in both the clinical assessment and the histomorphometry, where there were statistically significant differences on tenth day. 3. The effect of apigenin potassium in the model used was similar and even superior in some ways and times, to the steroid dexamethasone, suggesting that it could be a useful natural origin agent for the treatment of oral mucositis.

1 HIPOTESIS DE TRABAJO Está bien establecido en la literatura científica que existe una correlación directa entre el número de células CD34+ infundidas en el trasplante, el tiempo al injerto y la salida de la aplasia, por lo que es generalizada la recomendación de infundir un número mínimo de 2x106 células CD34+ /Kg de peso del receptor. Los factores conocidos que pueden afectar a la obtención de un número suficiente de células CD34+ son: la enfermedad de base, el tratamiento previo recibido, la edad o el sexo del paciente. Del mismo modo, está probado que la propia aféresis tiene un efecto movilizador de progenitores hematopoyéticos a sangre periférica, lo que sugiere que las aféresis de alto volumen (AAV), podrían aumentar la eficacia de la recolección. Sin embargo, no existen estudios sobre los factores predictivos que pudieran incidir en la eficacia de este procedimiento (AAV). Nuestra hipótesis es que las AAV son eficaces y que con ellas se consigue recuperar el 100% de los progenitores CD34+ circulantes en la SP previa al procedimiento. Esto incluye particularmente a los pacientes “malos movilizadores” (aquellos con <10 CD34+/µL circulantes en el momento pre-aféresis). Además, hipotetizamos que la eficacia de las AAV está influenciada por variables similares a las que afectan a las aféresis estándar de dos volemias. 2 OBJETIVOS 2.1 PRINCIPAL Analizar la eficacia de las AAV en el trasplante autólogo de progenitores hematopoyéticos en relación con los siguientes factores: 1. Enfermedad de base. 2. Número de líneas de tratamiento quimioterápico previas. 3. Estado de la enfermedad de base. 4. Esquema de movilización utilizado. 5. Cifra de CD34+ circulantes pre-aféresis. 2.2 SECUNDARIOS Como objetivos secundarios nos planteamos: 1. Estudiar el efecto movilizador de las aféresis de alto volumen. 2. Estudiar la cinética del injerto en los distintos grupos de pacientes. 3. Estudiar la correlación entre los progenitores hematopoyéticos circulantes y en el producto de aféresis. 4. En base a los datos obtenidos definir las variables que nos permita caracterizar aquellos pacientes que podrían beneficiarse de aféresis de alto volumen. METODOLOGÍA Se han estudiado 516 aféresis de 216 pacientes sometidos a aféresis de PH en el hospital Virgen de la Arrixaca durante los años 1996-2006, donde se analizaron los datos hematológicos tanto en los pacientes como en las bolsas de aféresis. CONCLUSIONES 1. Las aféresis con procesamiento de cuatro volemias (aféresis de alto volumen) mantienen son eficaces para recuperar al menos el 100% de los progenitores circulantes pre-proceso incluso en los pacientes malos movilizadores. 2. La eficacia de las aféresis de alto volumen no se ve afectada por el tipo de enfermedad de base, el número de líneas de tratamiento recibidas, la respuesta a la enfermedad de base en el momento de la aféresis, el esquema de movilización utilizado ni la cifra basal de CD34+. 3. El proceso de aféresis tiene efecto movilizador, ya en las aféresis de alto volumen el número de células CD34+ obtenidas tras el procesamiento de la 3ª y 4ª volemia es superior al obtenido tras las dos primeras volemias. 4. La realización de AAV no influye en la cinética del injerto y consigue rescatar para trasplante autólogo a pacientes malos movilizadores. 5. Existe una buena correlación entre el número de células CD34+ circulantes pre-aféresis y las CD34+ recolectadas. 6. Los subgrupo de pacientes que podrían beneficiarse más de las AAV serían las pacientes de sexo femenino, mayores de 49 años diagnosticados de LNH, EH, LMA y LLC tratadas con dos o más líneas de tratamiento que presenten < de 100x109/L plaquetas y 8,8 CD34+/µL pre-aféresis. / 1 WORKING HYPOTHESIS It is well established in the scientific literature that there is a direct correlation between the number of CD34 + cells infused in the transplant, time to engraftment and output aplasia, so it is generally recommended to infuse a minimum of 2x106 CD34 + / kg body weight of the recipient. Known factors that can affect obtaining a sufficient number of CD34 + cells are the underlying disease, previous treatment received, age or gender. Similarly, it is proved that the apheresis itself has a mobilizing effect on hematopoietic progenitors to peripheral blood, suggesting that the apheresis high volume (AAV), could increase the efficiency of collection. However, no studies on the predictive factors that could influence the effectiveness of this procedure (AAV). Our hypothesis is that the AAV are effective and that they are able to recover 100% of the CD34 + progenitors circulating in the SP after the procedure. This particularly includes patients' poor mobilizers "(those with <10 CD34 + / uL circulating in the pre-apheresis time). Moreover, we hypothesized that the efficacy of AAV is influenced by similar variables that affect two volemias standard apheresis. 2 OBJECTIVES 2.1 PRINCIPAL Analyze the efficiency of AAV in autologous hematopoietic stem cell transplantation in relation to the following factors: 1. Underlying disease. 2. Number of lines of prior chemotherapy. 3. Status of the underlying disease. Scheme 4. mobilization used. 5. Net circulating CD34 + pre-apheresis. 2.2 OTHERS As secondary objectives we set: 1. Study the mobilizing effect of high-volume apheresis. 2. To study the kinetics of graft in different groups of patients. 3. To study the correlation between circulating hematopoietic progenitors and the apheresis product. 4. Based on the data obtained define the variables that will allow us to characterize those patients who could benefit from high-volume apheresis. METHODOLOGY We studied 516 patients undergoing apheresis apheresis 216 PH in the hospital Virgen de la Arrixaca during the years 1996-2006 where hematologic data in both patients and apheresis bags were analyzed. CONCLUSIONS 1. apheresis with four volemias processing (apheresis high volume) are maintained effective to recover at least 100% of circulating progenitors pre-process even in poor mobilizers patients. 2. The effectiveness of high-volume apheresis is not affected by the type of underlying disease, the number of lines received treatment, the answer to the underlying disease at the time of apheresis, mobilization scheme used or basal levels of CD34 +. 3. The process of apheresis has mobilizing effect, and in high volume apheresis the number of CD34 + cells obtained after processing of the 3rd and 4th blood volume is greater than that obtained after the first two volemias. 4. The performance of AAV does not influence the kinetics of graft and autologous gets bail for mobilizing ill patients. 5. There is a good correlation between the number of CD34 + circulating cells pre-leukapheresis and harvested CD34 +. 6. The subset of patients who may benefit most from the AAV would be the female patients, older than 49 years diagnosed with NHL, HD, AML and CLL treated with two or more lines of therapy presenting <of 100x109 / L platelets and 8.8 CD34 + / uL pre-apheresis.

Los carcinomas epidermoides de cabeza y cuello (CECC) ocupan el octavo lugar entre las neoplasias del sexo masculino, presentando el Principado de Asturias una de las tasas de incidencia más altas de España. Aunque se han realizado importantes avances en su diagnóstico y tratamiento, la supervivencia se ha modificado poco en los últimos años debido a que se diagnostican en estadios avanzados. El desarrollo de metástasis en los ganglios linfáticos cervicales es el factor que más influye en la supervivencia. Los carcinomas epidermoides de laringe y faringe (CLF) son tumores sólidos que presentan un gran número de alteraciones cromosómicas. Se han diseñado modelos basados en LOH, que proponen pérdidas progresivas desde lesiones preinvasivas (9p21, 3p21, 17p13) hasta tumores avanzados (11q13, 13q21, 14q31), pero que no tienen en cuenta el papel de las ganancias cromosómicas, ni los cambios asociados al desarrollo de metástasis.Los objetivos de esta tesis han sido la detección de las alteraciones genético-moleculares asociadas al desarrollo de metástasis de los CLF relacionándolas con los datos clínico-patológicos y de seguimiento de los pacientes.Se han estudiado los cambios cromosómicos en 56 pacientes con carcinoma epidermoide de laringe-faringe mediante Hibridación Genómica Comparativa (CGH) y las alteraciones génicas de los 56 tumores primarios y las 25 correspondientes metástasis ganglionares utilizando la técnica de MLPA (Multiple Ligation-dependent Probe Amplification)Con CGH todos tumores primarios presentaron gran número de alteraciones cromosómicas, destacando las pérdidas en las regiones 3p13-24, 11q23-25, 4p15-16, 18q21-23, 5q31-35, 8p21-22, 21q22, 17p12-13, 4q31-34 y 9p21-23, las ganancias en 3q25-27, 7q21-31, 8q11-qter, 5p12-14, 11q11-13, 2q24-32, 12p11-12, 17q11-23, 6q12-15, 4q12-13 y 18p11-pter y las amplificaciones en 3q26-qter, 11q13, 11q22, 3q12-13, 8q24.3, 2q32-33, 18p11.3, 18q11.2, 1p31, 4q11-13, 5p11-14, 8p11, 13q33-34, 22q13, las 8 últimas descritas por primera vez asociadas a CLF. La amplificación en 11q13 se asoció de forma significativa con el estadio tumoral avanzado y la presencia de metástasis ganglionares, aunque no con la supervivencia.Los 56 tumores primarios de nuestra serie presentaron como alteraciones génicas más frecuentes detectada por MLPA las pérdidas en CDKN2A y MLH1 (154pb) y las ganancias en CCND1 y EMS1, mientras que en las metástasis ganglionares lo fueron las pérdidas en CTNNB1 y CDKN2A y las ganancias en CCND1 y EMS1.Los tumores primarios metastáticos presentaron un patrón génico diferente de los no metastáticos con pérdidas en los genes TP53, N33 y STK11.Las metástasis ganglionares presentaron un patrón génico diferente del grupo completo de los tumores primarios con pérdidas en CTNNB1, RB1, MFHAS1, PTPN1, NRAS, LMNA, CDH2 y RENT2 y ganancias en STK11, IGSF4 y N33.En los pacientes con tumor primario metastático y su correspondiente metástasis ganglionar la pérdida de CDKN2A y la ganancia de EMS1 fueron alteraciones génicas comunes, siendo el patrón génico metastático el de las pérdidas en CTNNB1, LMNA, MFHAS1, IGF1R, RECQL4 y RENT2 y las ganancias en CDKN2D, N33 y TP53. Los tumores con estadios avanzados se correlacionaron con pérdidas génicas en N33 y TP53 y ganancias en EMS1 y CCND1, mientras que los ganglios metastáticos lo hicieron con pérdidas en N33, TP53 y STK11. La supervivencia sólo se correlacionó con la pérdida en N33.En el grupo de pacientes estudiados hemos encontrado múltiples alteraciones cromosómicas y génicas, algunas ya descritas, pero otras nuevas, que se han asociado a las diferentes etapas del desarrollo del tumor, principalmente en la fase hacia metástasis ganglionar. Aunque los tumores primarios y las metástasis ganglionares presentan cambios genéticos comunes, existen unos patrones de alteraciones específicas asociadas a los tumores con ganglios linfáticos positivos y a las metástasis ganglionares. La adquisición de estas alteraciones podría ser el desencadenante del desarrollo de metástasis linfáticas. Estudios adicionales son necesarios para confirmar su posible valor pronóstico y aplicación terapéutica.

Hipótesis del estudio: La exposición crónica a gran altitud podría producir cambios en la morfología y función ventricular izquierda como consecuencia de la presencia de sobrecarga del ventrículo derecho. Los objetivos del presente estudio son: 1- Evaluar mediante la utilización de la ecocardiografía la presencia de alteraciones anatómicas y funcionales a nivel del ventrículo izquierdo ocasionadas por la altitud. 2- Realizar mediciones de las cámaras cardíacas así como de la performance ventricular izquierda. 3- Estudiar los parámetros de función sistólica y diastólica ventricular izquierda. 4- Estimar las presiones pulmonares de los pacientes estudiados. 5- Descartar la presencia de patología cardiovascular asociada en la población estudiada.

El primer objetivo de nuestro trabajo fue desarrollar un modelo de osteoporosis secundaria a ovariectomía en ratas Sprague-Dawley. El segundo objetivo consistió en analizar el efecto de los compuestos fenólicos: Naringenina, Eriocitrina y Citrolive®, sobre el citado modelo. Material y Métodos: Utilizamos 50 animales distribuidas en cinco Grupos (n=10): (I) Control; (II) Control ovariectomía; (III) Ovariectomía + Naringenina (1mg/kg día), (IV) Ovariectomía + Eriocitrina (1mg/kg día) y (V) Ovariectomía + Citrolive®. (1mg/kg día). La ovariectomía realizada a los Grupos (II, III, IV y V) fue bilateral y tras cuatro meses de tratamiento, los animales fueron sacrificados para extraer las muestras. Durante el experimento se pesó a los animales periódicamente y se les extrajo sangre para el estudio bioquímico. Realizamos las siguientes determinaciones: bioquímica general, distribución de la masa ósea y cuantificación de la densidad mineral mediante microtomografía computerizada, estudio anatomo-patológico del grosor de las trabéculas óseas y ionómico de los componentes químicos del hueso mediante espectrofotometría. Resultados: En el estudio bioquímico, los niveles séricos de calcio y fósforo se mantuvieron estables en todos los Grupos experimentales mientras que los niveles de fosfatasa alcalina total fueron superiores en el Grupo (III) Naringenina y con valores muy parecidos al Grupo (I) Control en el resto de Grupos tratados. No obstante, los resultados más relevantes fueron observados a nivel óseo. Así, tanto el grosor como el volumen de las trabéculas óseas de los animales tratados, eran mayores, que los de los animales ovariectomizados no tratados, Grupo (II). Además, los animales, de los tres Grupos tratados sufrieron menor pérdida de los minerales que conforman la matriz ósea que los del Grupo (II) según el estudio ionómico. Conclusiones: Consideramos, que la administración de dichos compuestos ha demostrado efectividad, aunque de grado variable, sobre el modelo de osteoporosis desarrollado. No obstante, son necesarios futuros estudios que permitan clarificar su mecanismo de acción y seguir avanzando en su posible utilización en clínica humana. / The first aim of this work was to develop an ovariectomized rat model of osteoporosis. The second objective was to analyse the effect of the phenolic compounds, Naringenia, Eriocitrin and Citrolive®, on that model. Materials and Methods: We used 50 animals distributed into 5 groups (n=10): (I) Control; (II) Ovariectomy control; (III) Ovariectomy + Naringenin (1mg/kg día), (IV) Ovariectomy + Eriocitrin (1mg/kg day) and (V) Ovariectomy + Citrolive® (1mg/kg day). Animals in groups (II, III, IV and V) were bilaterally ovareictomized. After 4 months of treatment, the animals were sacrificed to extract their femurs for analysis. Animal weight, general biochemistry, distribution of bone mass and quantification of mineral density by computerized microtomography, anatomical-pathological study of bone trabeculae and ionomic study of the chemical components of the bone by spectrophotometry, were carried out to determine the effects of the treatments on the animal model. Results: At the end of the experiment all the animals of the treated groups showed a delayed weight gain compared with the control group (I). In the biochemical study, the serum levels of calcium and phosphorus remained stable in all the experimental groups, while the total alkaline phosphate levels were highest in in group (III) Naringenina and lowest in control group (II) OVX. However, the most interesting results were observed at osseous level – both the thickness and volume of the trabeculae of the treated animals were greater than the corresponding measurements made in untreated animals that had been subjected to ovariectomy, group (II). In addition, the ionomic study showed that the animals of the three treated groups suffered lower loss of the minerals conforming the bone matrix of Group (II). Conclusion: We are of the opinion, therefore, that the administration of the mentioned compounds is effective, although to varying degrees, in the osteoporosis model developed. However, more studies are necessary to clarify their action mechanism before clinical application in humans can be considered.

Objetivos. Describir las características histológicas y endoscópicas que se presentan en pacientes diagnosticados con cáncer gástrico en el Hospital Nacional Daniel Alcides Carrión del Callao. Materiales y métodos. Se realizó un estudio tipo serie de casos que incluyó a todos los pacientes con diagnóstico histológico de cáncer gástrico durante el periodo de enero de 2009 a diciembre de 2011. La información se obtuvo de los registros del servicio de anatomía patológica del Hospital Nacional Daniel Alcides Carrión. Se consignó la edad y sexo de los pacientes, el tipo histológico, la localización endoscópica, así como la presencia de metaplasia intestinal, el grado histológico y la morfología del cáncer. Resultados. Se incluyeron 120 pacientes. La edad promedio fue de 65,4 ± 13,6 años; 59 (49%) fueron de sexo masculino. Según el tipo histológico se encontró el tipo intestinal en 68 (56%); difuso en 45 (38%), y mixto en 7 (6%). Según su localización, 23 (19%) se localizaron en fondo; 52 (43%) en el cuerpo; 39 (33%) en el antro, y 6 (5%) en el píloro. Los pacientes con cáncer gástrico de tipo intestinal presentaron una edad promedio mayor que los que tuvieron el tipo difuso (69,1 ± 10,3 versus 59,3 ± 15,3). De los pacientes con cáncer gástrico tipo intestinal, 60,3% tuvo localización proximal, en comparación a 66,6% de los pacientes con tipo difuso. Conclusión. En la población en estudio, el cáncer gástrico de tipo difuso se presenta a una edad más temprana que el de tipo intestinal, además de estar más frecuentemente localizados a nivel proximal. / Objetivos. To describe the histologic and endoscopic characteristics reported among patients diagnosed with gastric cancer in “Daniel Alcides Carrion” National Hospital in Callao. Materials and methods. We performed a case series including all patients with histological diagnosis of gastric cancer from January 2009 to December 2011. Data were obtained from the registers of the pathology service of Daniel Alcides Carrion National Hospital. Factors such as age and gender of patients, histologic type, endoscopic location, presence of intestinal metaplasia, histologic degree, and cancer morphology were evaluated. Results. 120 patients were included. Mean age was 65.4 ± 13.6 years; 59 (49%) were male. Based on the histologic type, intestinal type was found among 68 (56%); diffuse type among 45 (38%), and a mixed type in 7 (6%). Regarding the site, 23 (19%) of gastric cancers were located in the fundus; 52 (43%) in the body; 39 (33%) in the antrum, and 6 (5%) in the pylorus. Patients with gastric cancer of the intestinal type were in average older than those with a diffuse type (69.1 ± 10.3 versus 59.3 ± 15.3). 60.3% of intestinal-type gastric cancers were located proximally, versus 66.6% of diffuse-type cancers. Conclusion. Among the studied population, diffuse-type gastric cancer appears at an earlier age than the intestinal type, and its most common location is proximal.

La coexistencia de esclerosis hipocampal con una lesión extrahipocampal potencialmente epileptógena, situación conocida como patología dual, traza un reto para planificar la cirugía resectiva de epilepsia farmacorresistente. Presentamos un caso de epilepsia focal farmacorresistente asociada a patología dual (esclerosis hipocampal izquierda y gliosis frontal izquierda), abordada con estimulación eléctrica cortical directa y electrocorticografía intraoperatoria, con buenos resultados a corto plazo. / The coexistence of hippocampal sclerosis with a potentially epileptogenic extra hippocampal injury is known as dual pathology, and presents a challenge to resection surgery strategies in cases of drug-resistant epilepsy. We present a case of drug-resistant focal epilepsy associated with dual pathology (left hippocampal sclerosis and left frontal gliosis), treated by means of direct cortical electrical stimulation and intraoperative electrocorticography with good short-term results.