Made available in DSpace on 2016-09-27T13:40:00Z (GMT). No. of bitstreams: 0 Previous issue date: 2015-01-20. Added 1 bitstream(s) on 2016-09-27T13:45:08Z : No. of bitstreams: 1 000870500.pdf: 880740 bytes, checksum: d31c0424032b4482e003f89eb74fb54f (MD5) / O objetivo desta pesquisa foi avaliar um módulo de um programa de formação continuada semipresencial acerca da toxoplasmose para educadores. Para tanto, avaliamos as habilidades cognitivas de 165 profissionais de escolas municipais de educação infantil e fundamental nível I, antes e após a execução de um curso semipresencial online, no período de 2009 a 2013. Quanto ao nível de conhecimento geral sobre toxoplasmose, em todas as questões, observamos aumento significativo (p<0,0001), após o curso quando comparados com os dados iniciais. Em relação ao agente etiológico, entre 97% das pessoas que possuíam conhecimento insatisfatório antes da aplicação do curso, apenas 8% permaneceram (p<0,0001) no mesmo nível. Os sinais clínicos da toxoplasmose humana mais citados depois do curso, em ordem decrescente, foram: aborto e/ou problemas congênitos (60%) e linfadenopatia (53,9%), enquanto que em animais foram febre (29,1%) e aborto (26,7%). Os meios de transmissão mais citados pelos cursistas após a intervenção foram: o contato com fezes de gatos infectados contendo oocistos (51,5%) e, em seguida, em menor proporção, a ingestão de carnes cruas e mal cozidas (37,6%). Os meios de prevenção mais citados, após o curso, foram: evitar comer carnes cruas e mal cozidas (58,2%) e evitar o contato com fezes de animais (51,5%). Com base nos resultados obtidos nesta pesquisa, foi possível comprovar a contribuição positiva da formação continuada de docentes, por meio de recursos da Educação a Distância (EaD), para a aquisição de conhecimentos, fato inédito na literatura consultada. / The aim of this research was to evaluate a module of a semipresential continuing education program for educators about toxoplasmosis. Therefore, we evaluated the cognitive skills of 165 professionals from public schools in kindergarten and elementary level I, before and after the implementation of a semipresential online course, from 2009 to 2013. As regards the general level of knowledge about toxoplasmosis in all issues, we observed a significant increase (p <0.0001) after the course compared with the initial data. Regarding the etiologic agent, between 97% of those who had a little knowledge before application of the course, only 8% remained (p <0.0001) at the same level. Clinical signs of human toxoplasmosis most cited after the course, in descending order, were: abortion and / or congenital problems (60%) and lymphadenopathy (53.9%), while in animals were fever (29.1%) and abortion (26.7%). The means of human transmission most often cited by the course participants after the intervention were: the contact with the feces of infected cats containing oocysts (51.5%) and then, the eating of raw and undercooked meat (37.6%). The most frequently mentioned means of prevention, after the course were: avoid to eat raw and undercooked meat (58.2%) and avoid the contact with animal feces (51.5%). Based on the results obtained in this study, it was possible to prove the contribution of continuing education of teachers by means of Distance Learning (EaD) for the acquisition of knowledge, unprecedented in the literature.

Orientadora: Rosangela Zacarias Machado / Banca: Antônio Raimundo Lima Cruz Teixeira / Banca: Andrea Cristina Higa Nakaghi / Banca: Aureo Evangelista Santana / Banca: Mirela Tinucci Costa / Resumo: Poucos relatos têm sido feitos de felídeos domésticos brasileiros a respeito de erliquiose e babesiose, baseados na presença de mórulas em leucócitos e piroplasmas em eritrócitos, respectivamente, e também na presença de anticorpos anti-Ehrlichia canis. O presente estudo teve como objetivo diagnosticar, pela Reação em Cadeia pela Polimerase (PCR), os principais hemoparasitas e a frequência de anticorpos anti-Toxoplasma gondii e anti-Neospora caninum, em amostras de sangue e de soro de 200 felídeos errantes na cidade de São Luís-MA, Brasil. Dos 200 animais amostrados, 11 (5,5%) foram reagentes frente ao antígeno de E. canis, 5 (2,5%) foram reagentes frente ao antígeno de Babesia canis, 101 (50,5%) frente ao antígeno de T. gondii, e 49 (24,5%) frente ao antígeno de N. caninum, pela Reação de Imunofluorescência Indireta (RIFI). Dois (1%) dos 200 animais amostrados foram positivos pela PCR, um para E. canis e o outro para E. chaffeensis. Os amplicons foram confirmados por sequenciamento, e o DNA de E. canis encontrado mostrou 97% de identidade genética com amostras de E. canis de cães de diferentes países. Quanto ao DNA de E. chaffeensis encontrado, 97% de identidade genética foi encontrada com amostras de E. chaffeensis isoladas em diferentes países. Nenhuma das duas amostras positivas para E. canis ou E. chaffeensis foram positivas para Babesia canis vogeli ou Cytauxzoon sp. Realizou-se, também, PCR para Mycoplasma sp. em amostras de sangue dos felídeos pesquisados; das 200 amostras, 5 (2,5%) foram positivas para Mycoplasma haemofelis, 4 (2%) foram positivas para 'Candidatus Mycoplasma turicensis', e 20 (10%) para 'Candidatus Mycoplasma haemominutum', totalizando 14,5% dos animais. Destaca-se a importância da primeira detecção sorológica de Ehrlichia sp. e molecular de Ehrlichia chaffeensis em gatos... (Resumo completo, clicar acesso eletrônico abaixo) / Abstract: A few reports have been made in Brazilian domestic felines about ehrlichiosis and babesiosis. These studies are based on the presence of morulae in leukocytes and piroplasms in erythrocytes, respectively, and also in the presence of antibodies anti-Ehrlichia canis. This study aimed to diagnose, by the chain reaction Polimerase (PCR), the main hemoparasite and frequency of anti-Toxoplasma gondii and Neospora caninum antibodies in blood samples and serum, respectively of two hundred wandering felines in St. Luís island - MA, Brazil. Of 200 animals sampled, (36%) showed reacty against the antigen of E. canis, five (2.5%) were reactive against the antigen of Babesia canis, one hundred and one (50.5%) were reactive against the antigen of T. gondii, and forty-nine (24.5%) were also reactive against the antigen of N. caninum, by the Indirect Immunofluorescence Assay (IFA). Two (1%) of 200 animals sampled were positive for E. canis nPCR, and one to E. chaffeensis. The nPCR amplicons were confirmed by sequencing and the DNA of E. canis were more closed related to similarity with strains of E. canis detected in another countries, with 97% identity. The E. chaffeensis DNA was closed related to E. chaffeensis detected in another countries, with 97% identity. Neither of the two samples positive for E. canis and E. chaffeensis were positive to Cytauxzoon. Moreover, 14,5% of the animals were positive to Mycoplasma sp: five samples (2.5%) were positive for Mycoplasma haemofelis, four (2%) were positive for 'Candidatus Mycoplasma turicensis' and twenty (10%) to 'Candidatus Mycoplasma haemominutum'. This study was the first serological detection of Ehrlichia sp and molecular detection of Ehrlichia chaffeensis in Brazilian domestic cats. Besides, this is the first report of Mycoplasma sp infections in cats from São Luís-MA. / Doutor

Orientador: Antonio Carlos Paes / Banca: Helio Langoni / Banca: Rogério Giuffrida / Resumo: A toxoplasmose e a leptospirose são doenças zoonóticas que acometem animais domésticos e selvagens. Inquéritos soroepidemiológicos em quatis (Nasua nasua) são importantes para conhecimento, vigilância e controle de doenças. O objetivo deste trabalho foi verificar a soroprevalência de anticorpos anti- Leptospira spp. e anti Toxoplasma gondii, em 108 amostras de soro de quatis mantidos em vida livre, provenientes do Parque Ecológico do Tietê, São Paulo, Brasil. Para a pesquisa de anticorpos anti-Toxoplasma gondii foi utilizado o teste de aglutinação modificada (MAT) verificando soroprevalência de 18 animais (16,67%) positivos e 90 animais (83,33%) negativos (IC 95%= 0,09- 0,23). Dos 18 animais positivos a frequência dos títulos apresentados foram: 25 (n=8; 44,44%), 50 (n=3; 16,67%), 100 (n=3; 16,67%), 200 (n=1; 5,56%) e 400 (n=3; 16,67%). Para pesquisa de anticorpos anti- Leptospira spp. foi utilizado o teste de Soroaglutinação Microscópica (SAM), sendo 96 animais negativos (88,89%) e 12 animais positivos, correspondente a soroprevalência de 11,11% (IC 95%= 6,0- 19), e os sorovares reagentes encontrados foram Butembo (n=2; 16,67%); Whitcombi (n=1; 8,33%); Sentot (n=1; 8,33%); Gryppotyphosa (n=1; 8,33%); Panama (n=1; 8,33%); Hardjo bovis (n=1; 8,33%); Hardjo ctg (n=1; 8,33%); Hardjo prajitno (n=4; 33,33%) e a frequência dos títulos apresentados foi: 100 (n=5; 41,67%); 200 (n=5; 41,67%); 400 (n=2; 16,67%). Portanto o presente estudo demonstra a importância da avaliação sorológica anti- Toxoplasma gondii e anti- Leptospira spp. em quatis de vida livre, o que avalia os aspectos epidemiológicos relacionados a estas zoonoses e riscos para a saúde pública, pois mantém contato com humanos / Abstract: The toxoplasmosis and leptospirosis are zoonotic diseases that affect domestic and wild animals. Seroepidemiological surveys in coatis (Nasua nasua) is important for information, surveillance and disease control. The objective of this study was to determine the seroprevalence of antibody against Leptospira spp. and Toxoplasma gondii in 108 samples of coatis serum maintained in the wild, from the Ecological Park of Tietê, São Paulo, Brazil. For research of anti-Toxoplasma gondii antibodies we used the modified agglutination test (MAT) and 18 animals (16.67%) were soropositive and 90 animals (83.33%) negative (95% CI = 0,09- 0.23). Of the 18 positive animals positive the frequency of the antibodies were: 25 (n = 8; 44.44%), 50 (n = 3; 16.67%), 100 (n = 3; 16.67%), 200 (n = 1; 5.56%) and 400 (n = 3; 16.67%). To search the anti-Leptospira spp antibodies. It was used the Microscopic Agglutination Test test (MAT), and 96 were negative 88.89%) and 12 positive (11,11%) (95% CI = 6,0- 19). The serovars reagents Butembo (n = 2; 16.67%); Whitcombi (n = 1; 8.33%); Sentot (n = 1; 8.33%); Gryppotyphosa (n = 1; 8.33%); Panama (n = 1; 8.33%); Hardjo bovis (n = 1; 8.33%); Hardjo ctg (n = 1; 8.33%); Hardjo prajitno (n = 4; 33.33%). The frequency of the presented titles were 100 (n = 5; 41.67%); 200 (n = 5; 41.67%); 400 (n = 2; 16.67%). Therefore, this study demonstrates the importance of evaluating the serological response to anti- Toxoplasma gondii and for anti-Leptospira spp. of captive animals to assess epidemiological aspects related to these zoonoses and risks to public health because it maintains contact with humans / Mestre

Orientador: Hélio Langoni / Banca: Heitor Franco de Andrade Júnior / Banca: Antonio Carlos Paes / Resumo: O Toxoplasma gondii é um protozoário parasita de grande importância no contexto de produção animal e saúde pública, envolvendo alterações fetais e abortos na espécie humana e em animais, sendo ainda importante patógeno oportunista em pacientes imunocomprometidos. A técnica de aglutinação direta modificada (MAT) destaca-se por independer da origem dos anticorpos e permitir diferenciar os estágios da infecção toxoplásmica. Assim, padronizou-se a técnica de sedimentação espontânea, verificando-se que com 60 minutos, a parte líquida da suspensão apresentava predominantemente taquizoítos e raras células pequenas. O antígeno inativado pelo metanol (AM) permitiu a exposição de antígenos de fase aguda somente, enquanto que a formalina (AF) expõe tanto os de fase aguda como crônica. Testou-se o antígeno para três grupos experimentais: G1, ratas infectadas com 104 bradizoítos da cepa BTU10, genótipo I, via oral; G2, ratas infectadas com 104 bradizoítos da cepa BTU10, via oral, e imunodeprimidas com corticóide; G3, grupo controle. A comparação das MATs permitiu a diferenciação dos anticorpos IgG de fase aguda, dos de fase crônica. Gradativamente foi obtida a maturação dos anticorpos, sendo observada pela avidez das mesmas no teste de ELISA. Os anticorpos do grupo experimental se comportaram semelhantemente para as provas sorológicas, até a 13ª semana. A reagudização no G2 foi detectada na bioprova da musculatura antes que no cérebro. Com isso, verificou-se que a MAT-AM e a MAT-AF permitem a diferenciação dos estágios agudo e crônico, e ainda a caracterização da reagudização da infecção em pacientes imunocomprometidos. / Abstract: Toxoplasma gondii is a parasite protozoan with great importance to animal production and public health, involving foetal alterations and abortions in human and animal species, being an important opportunistic pathogen in immunocompromised patients. Modified agglutination test (MAT) has great importance to independ of the origin of antibody, and to allow differentiating the periods of the Toxoplasma infection. Thus, the protocol of spontaneous sedimentation we standardized, verifying that with 60 minutes, the liquid part of the suspension showed predominantly the presence of tachyzoites and rare small cells. The antigen inactivated with methanol (AM) allowed the exposition of antigens of acute phase only, while formalin (AF) as much the acute as chronic phase. Antigen was tested to three experimental groups: G1, rats infected with 104 bradyzoites of BTU10 strain, genotype I, orally; G2, rats infected with 104 bradyzoites of BTU10 strain, orally, and immunodepressed with corticoid; G3, control group. The comparation of MATs allows the differentiation of IgG from acute phase of the ones from chronic phase. A gradual maturation of immunoglobulins was gotten, being observed through the avidity of the same ones, and surveyed for ELISA. The antibodies of the experimental groups showed similar profile for all serological tests, until the 13th week. Reacutization of the infection in G2 was detected earlier in bioassay of musculature than brain. Thus, we verified that MAT-AM and MAT-AF allow the differentiation of the acute and chronic stages, and still the characterization of the reacutization of the infection in immunocompromised patients. / Mestre

Orientador: Alvimar José da Costa / Banca: Kátia Denise Saraiva Bresciani / Banca: Carlos Noriyuki Kaneto / Banca: Welber Daniel Zanetti Lopes / Banca: Claudio Alessandro Massamitsu Sakamoto / Resumo: Este estudo teve como objetivo pesquisar a presença de T. gondii no sêmen, testículos e epidídimos de gatos experimentalmente infectados por este coccídio. Para tanto, doze felinos machos, sem raça definida, em idade reprodutiva e sorologicamente negativos para T. gondii foram selecionados e distribuídos em três grupos experimentais, GI: inoculados com 600 cistos teciduais de T. gondii (cepa "P"), GII: inoculados com 2x105 taquizoítos (cepa "RH"), e GIII: não inoculados (grupo controle). Anteriormente à inoculação (dias -7 e 0) e no 7º, 14º, 21º, 28º, 42º, 56º e 70º dias pós-inoculação (DPI), todos felinos, foram submetidos a exames clínicos, sorológicos (RIFI) e hematológicos (hemograma e parasitemia pelo T. gondii). As colheitas de sêmen (eletroejaculação), foram realizadas nas referidas datas, sendo posteriormente realizada a pesquisa do T. gondii por meio da nested PCR e bioprova em camundongos. No 70º DPI, os doze felinos foram orquiectomizados, sendo em seus testículos e epidídimos avaliada a presença do parasito (nested PCR, bioprova em camundongos, análises histopatológicas e imunohistoquímicas). Todos os felinos inoculados com T. gondii (GI e GII), soro-converteram à infecção toxoplásmica e apresentaram picos parasitêmicos em diferentes datas experimentais pós-inoculação. Os felinos inoculados com a cepa "RH" (GII) apresentaram títulos sorológicos mais elevados que os inoculados com a cepa "P" (GI). Nestes animais (GII) também foram diagnosticados mais picos parasitêmicos e alterações clínicas que nos felídeos pertencentes ao grupo I. Em nenhuma data experimental foi diagnosticada (bioprova e nested PCR) a presença de T. gondii nas amostras seminais colhidas dos felinos (GI, GII e GIII), nem tampouco nos testículos e epidídimos colhidos destes animais (nested PCR, bioprova, análises histopatológicas e imunohistoquímicas). Tais resultados possibilitam inferir... / Abstract: This study aimed to investigate the presence of T. gondii in semen, testicles and epididymis of cats experimentally infected with this coccidia. Therefore, twelve mongrel male cats of reproductive age and serologically negative for T. gondii were selected and divided into three experimental groups, GI: inoculated with 600 tissue cysts of T. gondii ("P" strain), GII : inoculated 2x105 tachyzoites (strain "HR"), and GIII: not inoculated (control group). Prior to inoculation (days -7 and 0) and days 7º, 14º, 21º, 28º, 42º, 56º and 70º post-inoculation (PID), all cats underwent clinical, serological (IFA) and haematological (blood count and parasitemia by T. gondii) examinations. Semen samples were obtained (eletroejaculation) those dates, and later held the T. gondii search by nested PCR and bioassay in mice. On 70º PID, the twelve cats were castrated, and their testicles and epididymis were evaluated for the presence of the parasite (PCR, bioassay in mice, and histopathological and immunohistochemical analyzes). All cats inoculated with T. gondii (GI and GII), seroconverted to T. gondii infection and showed parasitemia peaks in different experimental days post inoculation. The cats inoculated with the "RH" strain (GII) had higher titers than those inoculated with the "P" strain (GI). In these animals (GII) were also diagnosed more parasitemia and clinical changes compared to those belonging to Group I. In no trial date was diagnosed (bioassay and nested PCR) the presence of T. gondii in semen samples taken from the cats (GI, GII and GIII), nor their testis and epididymis (PCR, bioassay, histopathological and immunohistochemical analyzes). These results make it possible to infer that sexual transmission in domestic cats is not an important route of infection in the spread of toxoplasmosis among cats / Doutor

Orientador: Helio Langoni / Banca: Antonio Carlos Paes / Banca: Márcio Garcia Ribeiro / Banca: Lisiane de Almeida Martins / Banca: Luiz Fernando Pita Gondim / Resumo: Toxoplasma gondii é um parasito de grande importância no contexto de produção animal e saúde pública, sendo importante patógeno oportunista em pacientes imunocomprometidos. Este estudo objetivou determinar a soroprevalência de toxoplasmose em ovinos de abatedouros do estado de São Paulo, e a variabilidade genotípica dos isolamentos obtidos. A presença de anticorpos para T. gondii foi pesquisada em 602 amostras de soro pela reação de imunofluorescência indireta (RIFI), aglutinação direta modificada (MAT), com antígeno fixado pelo metanol (AM) e formalina (AF). Bioensaio em camundongos e pesquisa do DNA do parasito pela reação em cadeia pela polimerase (PCR) do gene 529 pares de bases (pb), repetitivo 300 vezes no genoma do parasito, foi realizado com cérebro, pulmão e músculo ("pool" de diafragma e coração) dos ovinos soropositivos. Das amostras positivas à PCR realizou-se a genotipagem pelas técnicas de multilocus-, nested-PCR e polimorfismo de comprimento dos fragmentos de restrição (RFLP-PCR) em 12 loci (SAG1, 5'SAG2, 3'SAG2, alt-SAG2, SAG3, BTUB, GRA6, c22-8, c29-2, L358, PK1, Apico, CS3), adicionado de ROP18Del e ROP18UPS, além da confirmação do parasito pelo locus 18S rRNA, diferenciando de Hammondia hammondi, Neospora caninum, Sarcocystis neurona, S. moulei, S. miescheriana, S. hominis, S. capracanis e S. tenella. 66/602 (11,0%) amostras de soro foram positivas para algum teste sorológico, com maior sensibilidade da MAT-AF, utilizado como teste de triagem. Amostras teciduais de 20/66 (30,3%) animais foram positivas ao isolamento, sendo detectados cistos em 12, taquizoítos em quatro e somente sorologia positiva em outras quatro. Detectouse o DNA do parasito em amostras de 22/66 (33,3%) animais. O genótipo completo foi obtido em somente 13/22 (59,1%). Dez genótipos diferentes foram identificados, sendo seis novos genótipos... (Resumo completo, clicar acesso eletrônico abaixo) / Abstract: Toxoplasma gondii is a parasite with high importance to the animal production and public health, being important opportunistic pathogen in immunocompromised patients. This study was aimed to determine the seroprevalence of toxoplasmosis in ovines in slaughterhouses from State of de São Paulo, and the genotypic variability of the obtained isolates. T. gondii antibodies were researched in 602 serum samples by indirect fluorescent antibody test (IFAT) and modified agglutination test (MAT), with methanol- (AM) and formalin-fixed antigen (AF). Bioassay in mice and the research of DNA by polymerase chain reaction (PCR) of gene 529 base pairs (bp), 300 times repetitive in parasite genome, was assayed with brain, lung and muscle ("pool" of diaphragm and heart) from seropositive ovines. Genotyping of the PCR positive samples was performed by multilocus-, nested-PCR and restriction fragment lenght polymorphism (RFLP-PCR) in 12 loci (SAG1, 5'SAG2, 3'SAG2, alt-SAG2, SAG3, BTUB, GRA6, c22-8, c29-2, L358, PK1, Apico and CS3), added of ROP18Del and ROP18UPS, beyond the confirmation by 18S rRNA locus, to differentiate Hammondia hammondi, Neospora caninum, Sarcocystis neurona, S. moulei, S. miescheriana, S. hominis, S. capracanis and S. tenella. 66/602 (11.0%) serum samples were positive to, at least, one serological test with high sensitivity to MAT-AF, used as screening test. Tissue samples of 20/66 (30.3%) animals were positive to the isolation, being detected cysts in 12, tachyzoites in four and in other four only positive result to the serology. DNA of the parasite was detected in samples of 22/66 (33.3%) animals. The complete genotype was detected in only 13/22 (59.1%). Ten different genotypes were identified, with six new genotypes. Two samples presented type II, isolated from Polwarth (Ideal) breed, bred extensively in Santana do Livramento and Uruguaiana, RS. Two other samples, from... (Complete abstract click electronic access below) / Doutor

Orientador: Alvimar Jose da Costa / Banca: Odilon Vidotto / Banca: Carlos Noriyuki Kaneto / Banca: Katia Denise Saraiva Bresciani / Banca: Paulo Henrique Franceschini / Resumo: Avaliou-se a transmissão congênita em cabras, infectadas e reinfectadas experimentalmente por T. gondii, em três fases gestacionais. Foram selecionadas 25 fêmeas, negativas para T. gondii e, destas, 20 foram inoculadas (cepa ME 49) e 15 reinoculadas (cepa VEG) com oocistos de T. gondii. As fêmeas foram distribuídas em cinco grupos experimentais (n=5): GI - reinfectadas no 40º dia de gestação (DG), GII - 80º DG, GIII - 120º DG, GIV - infectadas não reinfectadas e GV - não infectadas. Nos dias 0 (antes da inoculação), 3, 6, 9, 15, 21 e a cada sete dias pós-inoculação (DPI) e no 3º e a cada sete dias pós-reinoculação (DPR), foram realizados exames clínicos e sorológicos (RIFI-IgG). Quando as fêmeas apresentaram títulos IgG <1024 iniciou-se o manejo reprodutivo. Após a confirmação da gestação, as ultrassonografias foram realizadas a cada 15 dias até o término do período gestacional. Após as parições, as cabras e suas crias foram eutanasiadas para colheita de tecidos para avaliação de parasitismo por T. gondii (histopatologia, bioprova e PCR). Das crias colheu-se sangue para a realização da RIFI. No 9º DPI registrou-se hipertermia em todas as cabras inoculadas (P<0,05). A soroconversão dos animais primoinfectados ocorreu no 21º DPI, com títulos (IgG) entre 1024 e 16384. No 119º DPI ocorreu a estabilização da fase crônica da toxoplasmose (IgG <1024), em todas as fêmeas infectadas. Após as reinfecções as cabras permaneceram assintomáticas. Aumentos significativos de títulos IgG (≥1024) ocorreram no 28º, 7º e 3º DPR, nos grupos I, II, III, respectivamente (P<0,05). Severos distúrbios reprodutivos foram observados apenas em cabras reinfectadas, assim como determinadas lesões histológicas (renais e hepáticas) em suas respectivas crias. Títulos de anticorpos IgG foram registrados em todas... (Resumo completo, clicar acesso eletrônico abaixo) / Abstract: We evaluated the congenital transmission in goats experimentally infected and re-infected with T. gondii in three stages of pregnancy. We selected 25 females negative for T. gondii and of these, 20 were inoculated (ME 49 strain) and re-inoculated 15 (VEG strain) with oocysts of T. gondii. The females were distributed into five experimental groups (n = 5): GI - re-infected after 40th days of gestation (DG), GII - 80th DG, GIII - 120 th DG, GIV - infected and not re-infected and GV - uninfected. On days 0 (before inoculation), three, six, nine, 15, 21 and seven days post-inoculation (DPI) and the 3rd and every seven days after reinoculation (DPR), we performed clinical and serological (IFAT -IgG). When the females had titers IgG <1024 began the reproductive management. After confirmation of pregnancy, the ultrasounds were performed every 15 days until the end of pregnancy. After parturition, the goats and their offspring were euthanized to collect tissue for assessment of parasitism by T. gondii (histopathology, bioassay and PCR). Blood's newborn was collected to perform the IFAT. In the 9th DPI was recorded hyperthermia in all inoculated goats (P <0.05). Seroconversion occurred in animal primoinfectados 21st DPI, with titers (IgG) between 1024 and 16384. At 119th DPI and then leveled off in the chronic phase of toxoplasmosis (IgG <1024) in all infected females. After the goats remained asymptomatic re-infections. Significant increases in securities IgG (≥ 1024) occurred in 28th, 7th and 3rd DPR, in groups I, II, III, respectively (P <0.05). Severe reproductive disorders were observed only in re-infected goats, as well as certain histological lesions (kidney and liver) in their offspring. IgG antibody titers were recorded in all offspring of goats re-infected. Tissue parasitism by T. gondii was diagnosed in both infected and re-infected goats... (Complete abstract click electronic access below) / Doutor

Orientador: Luiz Carlos de Souza / Banca: Helio Langoni / Banca: Paulo Francisco Domingues / Banca: Alexandre W. Biondo / Banca: Aristeu Vieira da Silva / Resumo: As zoonoses são "doenças e infecções naturalmente transmissíveis entre os hospedeiros vertebrados e o homem". Dentre estas enfermidades está à toxoplasmose, zoonose de distribuição mundial que em diversos inquéritos soroepidemiológicos observa-se uma infecção de 70 a 90% das populações. E à leptospirose, atualmente estão disponíveis dados que sugerem que é a enfermidade mais comum dos animais domésticos. O presente estudo verificou hábitos alimentares e de costumes com as zoonoses por meio de levantamento soro-epidemiológico e da ocorrência de infecção na população acadêmica de medicina veterinária de duas universidades localizadas no oeste do estado do Paraná. Foi observado uma porcentagem de 25,5% (73/286) e de 3,8% (11/286) de positividade para a toxoplasmose e leptospirose, respectivamente. Os dados epidemiológicos referentes aos questionários aplicados aos alunos foram analisados, isoladamente para ambas as enfermidades. A associação entre os resultados sorológicos e as variáveis epidemiológicas foi verificada pelos testes de Qui-quadrado ou Exato de Fischer, adotando-se um nível de significância (a) de 5%. Observou-se diferença estatística entre as variáveis conviver com animais dentro de casa, deixar a ração exposta, beber leite cru, área onde a família mora urbana ou rural, ingerir carne crua para a toxoplasmose e somente a variável conviver com animais dentro de casa para a leptospirose. Concluiu-se que a ingestão de alimentos crus, continua sendo um dos principais fatores de risco de infecção pelo Toxoplasma gondii entre a população adulta e que a convivência destes acadêmicos com as várias espécies animais, foi o fator de risco principal na população estudada em relação à leptospirose. / Abstract: The zoonoses are diseases and infections naturally transmissible between the vertebrate hosts and humans. Toxoplasmosis is a worldwide distribution zoonosis, that in many seroepidemiologic inquires had infections rates of 70% to 90% of the population. Actual data shows that leptospirosis is the most common disease of the domestic animals. This project correlated behavioral aspects of the veterinary academic population on the west region of Paraná state with the incidence and/or prevalence of toxoplasmosis and leptospirosis using a seroepidemiologic approach. There were total of 25.5% (73/286) and 3.8% (11/286) positive cases for toxoplasmosis and leptospirosis respectively. The epidemiologic data from the students' behavior inquiry were analyzed separately. The association between the serologic results and the epidemiologic data were verified by Chi-square and Fisher exact test, using a significance level (a) of 5%. There were statistical significance between the inquiry variables "live with indoor animals"; "the pet's food is exposed"; "drink raw milk"; "the family lives in urban or country areas"; "ingestion of raw meat" and toxoplasmosis. Living with indoors pets was the only variable with statistical significance for leptospirosis infections. In conclusion, ingestion of raw food continues to be one of the most important risk factors for Toxoplasma gondii infections in adult population; and living with various animal species is the main risk factor for leptospirosis. / Doutor

Toxoplasmosis is a zoonosis caused by the intracellular parasite Toxoplasma gondii, which infects different hosts including up to a third of the world s human population and may cause severe damage to the fetus in congenital infection. Maternal breastfeeding is the most natural and safe way to feed a newborn, with the ability to provide good development of the infant s immune system. All immunoglobulin isotypes are present in human breast milk, mainly in the colostrum, with systemic or local source. There are several pieces of evidence showing that breastfeeding protects the infant against a wide range of diseases, but few efforts have been directed to identifying the protecting action of human milk against parasitic infections, including T. gondii. Due to the importance of breastfeeding and to the high prevalence of toxoplasmosis, this study was conducted in order to detect and evaluate the presence of specific T. gondii IgG, IgM and IgA antibodies in paired serum and colostrum samples. The study was carried out on 289 puerperal women from Clinical Hospital of Universidade Federal de Uberlândia (mean age 24.8 years, range 14 43 years). Their serum and colostrum samples were analyzed by ELISA and immunoblotting assays against soluble antigens from T. gondii. ELISA tests showed reactivity for anti-T. gondii IgG, IgM and IgA, respectively, in 136 (47.0%), 20 (6.9%), 8 (2.8%) serum samples and in 133 (46.0%), 23 (7.9%), 8 (2.8%) colostrum samples. Also, it was observed significant correlation rates between anti-T. gondii antibodies levels in serum and colostrum samples. Immunoblotting assays showed that it was possible to detect IgG, IgM and IgA antibodies specific to different antigens of T. gondii in serum as well as colostrum. IgG present in serum and colostrum recognized more antigenic fractions compared to the IgM and IgA, and seric IgG always detected more antigenic fractions than IgG in colostrum from the same patient. In contrast, specific IgA antibodies present in colostrum recognized a higher number of antigens than IgA present in serum from the same patient. Furthermore we have shown that 60 kDa antigenic fraction may be a good marker to diagnose acute toxoplasmosis infection, because it was recognizes frequently by low avidity IgG antibodies in both samples; and 39 kDa antigenic fraction may be a marker to diagnose congenital toxoplasmosis. Our results showed a significant association between T. gondii-specific antibodies present in serum and in milk samples from the patients, demonstrating that it is possible to diagnose toxoplasmosis using human milk, a noninvasive way to obtain biological samples. / Toxoplasmose é uma zoonose causada pelo parasita intracelular obrigatório Toxoplasma gondii, que infecta diversas espécies, incluindo mais de um terço da população humana mundial e pode causar danos severos ao feto na infecção congênita. A amamentação é a forma natural e segura de alimentar o recém-nascido, com capacidade de proporcionar o desenvolvimento adequado do sistema imunológico do neonato. Todas as classes de imunoglobulinas estão presentes no leite humano, principalmente no colostro, as quais podem ser de fonte sistêmica e local. Diversos estudos documentaram que a amamentação protege a criança contra várias doenças, mas poucos esforços tem sido direcionados para identificar a ação protetora do leite humano contra doenças parasitárias, inclusive T. gondii. Devido à importância da amamentação e à alta prevalência de toxoplasmose, o objetivo desse estudo foi detectar e avaliar a presença de anticorpos IgG, IgM e IgA anti-T. gondii presentes em amostras pareadas de soro e colostro humano. Foram inclusas neste estudo 289 puérperas do Hospital de Clínicas da UFU (média de idade: 24,8 anos, intervalo: 14-43 anos). As amostras foram analisadas pelos imunoensaios ELISA e Immunoblotting contra antígenos solúveis de T. gondii. O ELISA teve reatividade para IgG, IgM e IgA específicos, respectivamente, em 136 (47,9%), 20 (6,9%), 8 (2,8%) das amostras de soro e em 133 (46,0%), 23 (7,9%), 8 (2,8%) das amostras de colostro. Também foi observada correlação significativa entre os níveis de anticorpos anti-T. gondii das amostras de soro e colostro. O Immunoblotting mostrou que foi possível detectar os três isótipos de anticorpos específicos a diferentes antígenos de T. gondii em ambas amostras. Anticorpos IgG presentes em amostras de soro e colostro reconheceram mais frações antigênicas comparado com IgM e IgA. IgG sérica detectou mais frações antigênicas do que anticorpos IgG presentes no colostro da mesma paciente. Em contraste, IgA específica presente no colostro reconheceu maior número de antígenos do que IgA presente em amostras de soro da mesma paciente. Adicionalmente, mostramos que a fração de 60 kDa pode ser um bom marcador de diagnóstico para infecção aguda, pois ela foi reconhecida frequentemente por anticorpos IgG de baixa avidez de ambas amostras; e a fração de 39 kDa pode ser um marcador de diagnóstico de toxoplasmose congênita. Nossos resultados demonstraram uma associação significativa entre anticorpos específicos a T. gondii presentes em amostras de soro e leite, evidenciando que é possível diagnosticar toxoplasmose usando leite humano, uma forma não invasiva de obter amostra biológica. / Mestre em Imunologia de Parasitologia Aplicada

Little is known about the epidemiology of N. caninum infection in humans, particularly in populations with high T. gondii infection rates. This study aimed to investigate the presence of antibodies to N. caninum in Toxoplasma-seropositive and -seronegative individuals. Serum samples from 331 individuals were tested for the presence of IgG antibodies against N. caninum and T. gondii by indirect fluorescent antibody test (IFAT), enzyme-linked immunosorbent assay (ELISA) and Western blot (WB). Serum samples were divided into 5 groups, as follows: 65 from HIV-positive patients; 62 from allograft transplantation patients; 87 from cancer patients; 53 from hemodialysis patients; and 64 from blood donors. Seroreactivity to N. caninum was confirmed by WB, and the criterion for positivity was the sera recognition of at least two out of three immunodominant antigens (17, 29 e 35 kDa) from the parasite. Seropositivity to N. caninum was predominantly seen in HIV-patients (28%), whereas significantly low seropositivity was detected in blood donors (5%). Intermediate rates were seen in cancer (13%), hemodialysis (11%), and allograft transplantation (7%) patients. Seropositivity to N. caninum in the three groups with higher seropositivity rates was significantly associated with seropositivity to T. gondii. The results of this study indicate the presence of N. caninum exposure and seroconversion in humans, particularly in HIV patients, who could have opportunistic and concurrent infections with T. gondii. These findings may bring a new concern for the unstable clinical health of HIV patients and the actual role of N. caninum infection in immunocompromised patients. / Pouco se sabe sobre a epidemiologia da infecção pelo N. caninum na espécie humana, particularmente, na população com altas taxas de infecção a T. gondii. O presente estudo teve como objetivo investigar a presença de anticorpos anti- N. caninum em pacientes imunodeprimidos. Um total de 331 amostras de soros provenientes de 5 grupos de indivíduos (65 pacientes HIV positivos, 62 pacientes transplantados, 87 pacientes apresentando neoplasias, 53 pacientes em processo de hemodiálise e 64 doadores de sangue) foi avaliado quanto a presença de anticorpos anti-N. caninum e anti-T. gondii pelos testes imunofluorescência (IFAT), imunoenzimático (ELISA) e Western blot (WB). Anticorpos IgG anti-N. caninum foram predominantemente detectados em pacientes HIV positivos (28%), enquanto que taxas de soropositividade menores foram encontradas nos demais grupos: pacientes oncológicos (13%), em hemodiálise (11%), transplantados (7%) e doadores de sangue (5%). Soropositividade para N. caninum foi significativamente associada com a soropositividade para T. gondii nos grupos de pacientes HIV positivos, oncológicos e em hemodiálise. A sororeatividade para N. caninum foi confirmada quando duas de três proteínas imunodominantes (17, 29 e 35 kDa) deste parasito foram reconhecidas nas amostras de soros pelo teste WB. Os resultados deste estudo indicaram uma maior taxa de soroconversão em pacientes imunodeprimidos quando expostos ao N. caninum, principalmente em pacientes HIV positivos. Esta soroconversão a N. caninum pode ser resultante de uma infecção oportunística e/ou recorrente, como ocorre também na infecção a T. gondii. Estes resultados revelam uma nova preocupação com pacientes imunodeprimidos que podem estar, de alguma forma, mais susceptíveis a desenvolverem infecções oportunistas por N. caninum. / Mestre em Imunologia e Parasitologia Aplicadas