Orientadores: Carlos Arturo Levi D'Ancona, Edson Antunes / Tese (doutorado) - Universidade Estadual de Campinas, Faculdade de Ciências Médicas / Made available in DSpace on 2018-08-25T05:49:51Z (GMT). No. of bitstreams: 1 Pereira_MarcyLancia_D.pdf: 636046 bytes, checksum: 9238264528136d3bd8cf921cf3ab4552 (MD5) Previous issue date: 2014 / Resumo: A hiperplasia prostática benigna (HPB) ou aumento benigno da próstata (ABP) leva a disfunção do trato urinário, que pode ser mimetizada outras espécies animais, como roedores, por meio de obstrução parcial da uretra (OPU). O óxido nítrico (NO), sintetizado a partir da L-arginina por meio de três isoenzimas (iNOS, eNOS e nNOS) vem sendo estudado por ser apontado como responsável por alterações morfológicas e funcionais decorrentes do processo obstrutivo uretral. Este trabalho teve como objetivo caracterizar as alterações vesicais crônicas em camundongos com OPU e tratados cronicamente com L-NAME (inibidor competitivo não seletivo da NOS) e aminoguanidina (inibidor competitivo seletivo para iNOS). Os animais foram divididos em 6 grupos experimentais: Sham, Sham + L-NAME, Sham + aminoguanidina, OPU, OPU + L-NAME e OPU + aminoguanidina. A realização da OPU foi feita por meio de laparotomia e ligadura parcial ao nível do colo vesical utilizando-se cateter como guia externo. Após 5 semanas do procedimento cirúrgico, os animais foram avaliados quanto a cistometria, estudos farmacológicos em banho para órgão isolado e peso vesical. Os animais OPU apresentaram disfunção vesical observada por meio de aumento de contrações não miccionais (CNM) e da capacidade vesical, além de menor resposta contrátil muscarínica e elétrica. A inibição das três isoformas de NOS levou a diminuição da capacidade vesical em animais OPU. O tratamento com L-NAME levou a aumento de CNM, prevenção ao ganho de peso vesical e aumento das respostas contráteis a estimulação muscarínica e elétrica em animais OPU. A aminoguanidina diminuiu as CNM, mas não evitou o aumento do peso da bexiga em animais OPU e não aumentou as respostas contráteis vesicais. Tais achados sugerem que as NOS constitutivas (eNOS e nNOS) parecem ter papel mais relevante na fisiopatologia da OPU crônica do que a iNOS / Abstract: Benign prostatic hyperplasia (BPH) or Benign prostatic enlargement (BPE) leads to urinary tract dysfunction, which can be seen in experimental models, like rodents, by causing bladder outlet obstruction (BOO). Nitric oxide (NO), synthetized from L-arginine by three isoforms (iNOS, eNOS and nNOS) has been studied because it can be responsible for the urinary morphofunctional alterations. This study aimed to evaluate chronic bladder function in mice with BOO and treated chronically with L-NAME (non-selective NOS inhibitor) and aminoguanidine (iNOS selective inhibitor). Animals were divided into 6 experimental groups: Sham, Sham + L-NAME, Sham + aminoguanidine, BOO, BOO + L-NAME e BOO + aminoguanidine. BOO induction was made by laparotomy and partial ligature of bladder neck with a catheter as external guide. After 5 weeks of surgical procedure, animals were evaluated and filling cystometry, tissue bath contractile studies and bladder weight. BOO animals showed increase of non voiding contractions (NVC) and bladder capacity, and also less contractile response to Carbachol and Electric Field Stimulation. Inhibition of NOS isoforms diminished bladder capacity in BOO animals. L-NAME caused more NVC, prevented bladder weight gain and leaded to augmented contractile responses at muscarinic and electric stimulation. Aminoguanidine diminished NVC, but did not avoid bladder weight gain in BOO animals and did not cause increase in contractile responses. These results suggest that constitutive NOS (eNOS and nNOS) seem to be more important in chronic BOO pathophysiology than iNOS / Doutorado / Fisiopatologia Cirúrgica / Doutora em Ciências

Orientador: José Barreto Campello Carvalheira, Marcelo Gonzarolli de Oliveira / Tese (doutorado) - Universidade Estadual de Campinas, Faculdade de Ciências Médicas / Made available in DSpace on 2018-08-20T01:22:50Z (GMT). No. of bitstreams: 1 Dias_MariliaMeira_D.pdf: 3051857 bytes, checksum: 7b4e0fbf888dc0d19226feb71ecec132 (MD5) Previous issue date: 2012 / Resumo: A S-nitrosação é uma modificação pós-traducional dinâmica e reversível de proteínas que controla importantes funções celulares através da alteração de resíduos tióis de cisteínas pelo óxido nítrico (NO). Assim como a fosforilação, a S-nitrosação é capaz de alterar a conformação, a atividade e a função de proteínas e contribui em grande parte para a influência ubíqua do NO nas vias de transdução de sinal celulares. Inúmeras evidências apontam para um papel crucial da S-nitrosação não apenas na fisiologia dos organismos, mas também em inúmeras doenças humanas, entre elas o câncer. Entretanto, trata-se de um mecanismo ainda pouco explorado de modulação de proteínas envolvidas com a progressão tumoral, como as presentes na via do mTOR. Assim, o objetivo do trabalho é analisar os mecanismos pelos quais o NO afeta a função do mTOR. A análise da S-nitrosação do mTOR foi realizada através do Biotin Switch Method e demonstra que o doador exógeno de NO, GSNO, aumenta os níveis de mTOR S-nitrosada. Além disso, a GSNO reduz a fosforilação das proteínas mTOR, p70S6K e 4EBP-1 de forma tempo- e dose-dependente. A fosforilação da proteína p70S6K, reduzida pela exposição ao NO, é restaurada pela adição do agente redutor e denitrosante DTT. Entretanto, o pré-tratamento das linhagens celulares PC-3, DU145 e MCF-7 com o inibidor da guanilil ciclase, ODQ, ou com o sequestrador de NO livre, PTIO, não reverte o efeito da GSNO na fosforilação das proteínas mTOR, p70S6K e 4EBP-1, corroborando a hipótese de que o mTORC1 é modulado por S-nitrosação. A viabilidade das linhagens tumorais humanas PC3, DU145, MDA-MB-468, MCF-7, HT-29, CACO-2 e A549 também diminui após exposição aos doadores de NO, sendo observada redução da proliferação e aumento da morte celular. As linhagens PC-3, MCF-7 e MDA-MB-468, que apresentam mutações ativadoras na cascada de sinalização PI3K-mTOR, são mais sensíveis à presença do NO. Assim, a S-nitrosação do mTORC1 é uma importante modificação pós-traducional capaz de modular a atividade quinase da proteína mTOR e reduzir a proliferação de células tumorais humanas, apresentando potenciais implicações terapêuticas / Abstract: S-Nitrosation is a dynamic and reversible post-translational modification of proteins that controls important cellular functions through the modification of cysteine thiol side chains by nitric oxide (NO). mTOR signaling pathway deregulation is involved in various cancer types and contributes to cancer cell proliferation as well as growth factor independence. The aim of this work was to analyze the mechanisms by which S-nitrosogluthatione (GSNO) affects mTOR function. S-nitrosation of mTOR was assessed by the Biotin Switch Method. GSNO was shown to S-nitrosate mTOR with a consequent time- and dose-dependent decrease in the phosphorylation of mTOR and S6K proteins, which were reversed by the addition of the denitrosating agent DTT. Pre-treatments of cells with the inhibitor of soluble guanylyl cyclase, ODQ, or with the NO scavenger, PTIO, had no effect on the GSNO-mediated decrease in phosphorylation of mTOR and its substrates p70S6K and 4EBP-1. Results also demonstrated that cancer cell line viability decreased after exposure to the NO donors GSNO and S-nitroso-N-acetyl-cysteine (SNAC), altering proliferation and increasing cell death. PC-3, MCF-7 and MDA-MB-468 cell lines, which have mutations in the PI3K-mTOR pathway, showed a greater response to GSNO. Therefore, S-nitrosation is a novel post-translational modification capable of modulating mTOR activity, with possible therapeutic implications / Doutorado / Fisiopatologia Médica / Doutor em Ciências

Orientadores: Gilberto de Nucci, Fabiola Taufic Monica Iglesias / Tese (doutorado) - Universidade Estadual de Campinas, Faculdade de Ciências Médicas / Made available in DSpace on 2018-08-21T09:35:48Z (GMT). No. of bitstreams: 1 RojasMoscoso_JulioAlejandro_D.pdf: 775214 bytes, checksum: 63d1a32bc16687d42f750db1ef690fb0 (MD5) Previous issue date: 2012 / Resumo: A enzima alvo do NO, a guanilato ciclase solúvel (GCs) é responsável em converter o trifosfato de guanosina (GTP) em monofosfato de guanosina cíclico (GMPc). É sabido que a via do NO-GCs-GMPc está alterada em diversas patologias, como no diabetes mellitus, na hipertensão arterial e pulmonar, na disfunção erétil assim como nas alterações do baixo trato urinário. O estresse oxidativo presente nestas patologias pode ser um dos responsáveis por influenciar o estado redox da GCs promovendo a oxidação da mesma e, portanto, criando um estado de refratariedade aos tratamentos usuais. O uso de nitratos orgânicos não é eficiente no tratamento destas patologias já que o uso contínuo leva à tolerância. Sendo assim, compostos que atuem na via NO-GCs-GMPc seja ativando ou estimulando a enzima GCs constituem importantes alvos no tratamento das disfunções causadas por anormalidades da via do NO. Baseado no exposto acima o objetivo do presente trabalho foi avaliar o estado redox da enzima GCs de ratos hipertensos renovasculares (2K1C) e espontaneamente hipertensos (SHR) e seus respectivos grupos controles através de curvas concentração resposta à fenilefrina (PE), acetilcolina (ACh), nitroprussiato de sódio (SNP), ao estimulador (BAY 41-2272) e ativador (BAY 60-2770) da GCs em artéria mesentérica superior isolada. Em alguns experimentos os inibidores da GCs (quinoxalin-1-one 1H[1,2,4] oxidiazolo [4,3-a]) (ODQ) ou da sintase de óxido nítrico (NOS), N (G)-nitro-Larginine methyl ester (L-NAME) foram incubados previamente ao relaxamento induzido pelo BAY 41-2272 ou BAY 60-2770. Os parâmetros de potência (pEC50) e resposta máxima (Emax) foram determinados. A pressão sistólica (PS) e o peso foram determinados semanalmente. A PS dos animais SHR mostrou elevada (188,23 ± 3,46 mm/Hg) na 8ª semana em relação ao respectivo grupo controle (118,83 ± 2,67 mm/Hg), sendo este aumento ainda maior na 16ª (203,75 ± 3,61 mm/Hg), enquanto que o peso corporal dos animais SHR apresentou-se menor na 8ª semana de vida. Nos ratos 2K1C os animais apresentaram aumento na PS de, aproximadamente, 25 e 40 % na 1ª e 8ª semana pós-clipagem, respectivamente. Os resultados funcionais mostraram que a contração a fenilefrina foi significativamente maior nos animais SHR em comparação ao controle e este efeito não foi observado nos animais 2K1C. Em animais SHR e 2K1C o relaxamento a ACh foi maior em comparação ao grupo controle, com aumento da resposta máxima e deslocamento da potência (aproximadamente 3 vezes), respectivamente. Em relação ao SNP, tanto nos animais SHR como nos 2K1C houve deslocamento da pEC50 de, aproximadamente, 67 e 5 vezes para a direita, respectivamente em relação aos respectivos grupos controles, sem alteração da Emax. O relaxamento ao estimulador da GCs, BAY 41-2272 encontrou-se deslocado para a direita nos animais SHR (2,2 vezes), sem nenhuma alteração nos ratos 2K1C. A adição de L-NAME e ODQ tanto nos animais hipertensos como normotensos diminui a potência do BAY 41-2272, sugerindo que o relaxamento desta substância é dependente do acúmulo de GMPc e atua sinergicamente com NO. Interessantemente, o ativador BAY 60-2770 induziu relaxamento nos animais SHR que foi, aproximadamente, 47 vezes mais potente em relação ao controle. Nenhuma diferença foi observada nos animais 2K1C. Diferentemente do BAY 41-2272, a presença de LNAME ou ODQ potencializou o relaxamento ao BAY 60-2770, mostrando que a oxidação da GCs ou até mesmo a ausência de NO favorecem este efeito. Em conclusão, nossos dados mostram que nas mesentéricas dos animais SHR a enzima GCs pode estar oxidada (Fe3+), uma vez que observamos diminuição e aumento da potência do BAY 41-2272 e BAY 60-2770, respectivamente. Por sua vez, nos vasos de animais 2K1C nenhuma alteração foi observada nas respostas a estas substâncias, porém, o relaxamento ao SNP encontrou-se diminuído, sugerindo diminuição da biodisponibilidade do NO. Assim, os estimuladores e ativadores da enzima GCs constituem importante ferramenta farmacológica para avaliar o estado redox da GCs / Abstract: The target enzyme NO, the soluble guanylate cyclase (sGC) is responsible to convert guanosine triphosphate (GTP) to cyclic guanosine monophosphate (cGMP). It is known that, via the NO-cGMP GCs is altered in various pathologies, such as diabetes mellitus, arterial hypertension and pulmonary in erectile dysfunction as well as changes in the lower urinary tract. The oxidative stress can be present in these conditions a significant role in influencing the redox state of sGC promoting oxidation thereof and, thus creating a state of refractory to usual treatments. The use of organic nitrates is not effective in treatment of pathologies since the continuous use leads to tolerance. Thus, compounds that act via the NO-sGC-cGMP is activating or stimulating the enzyme sGC are important targets in the treatment of disorders caused by abnormalities of the NO pathway. Based on the above the aim of this study was to evaluate the redox state of the enzyme sGC renovascular hypertensive rats (2K1C) and spontaneously hypertensive rats (SHR) and their respective controls by concentration-response curves to phenylephrine (PE), acetylcholine (ACh), sodium nitroprusside (SNP), the stimulator (BAY 41-2272) and activator (BAY 60-2770) of the sGC in superior mesenteric artery isolated. In some experiments inhibitors sGC (quinoxalin-1-one 1 H [1,2,4] oxidiazolo [4,3-a]) (ODQ) or nitric oxide synthase (NOS), N (G)-nitro-L- arginine methyl ester (LNAME), were incubated prior to the relaxation induced by BAY 41-2272 or BAY 60- 2770. The power parameters (pEC50) and maximal response (Emax) was determined. Systolic blood pressure (SBP) and weight were determined weekly. The PBS of the SHR showed higher (188.23 ± 3.46 mm/Hg) at week 8 compared to respective control group (118.83 ± 2.67 mm/Hg), and this increase was even higher at 16 (203.75 ± 3.61 mm/Hg), whereas the body weight of SHR was lower at 8 weeks of age. In rats, 2K1C animals showed an increase in PBS of approximately 25 and 40% in the 1st and 8th week after clipping, respectively. Functional results showed that the contraction to phenylephrine was significantly higher in SHR compared to control and this effect was not observed in 2K1C animals. In SHR and 2K1C relaxation to ACh was greater in the control group, with increased maximum response and power shift (approximately 3- fold), respectively. Concerning the SNP, both in SHR and in 2K1C displacement pEC50 was approximately 67 and 5 times to the right, respectively in relation to the respective control group, without changing the Emax. The relaxation of the sGC stimulator, BAY 41- 2272 was found displaced to the right in SHR (2.2 times), with no change in 2K1C rats. The addition of L-NAME and ODQ both in normotensive and hypertensive rats reduces the power of BAY 41-2272, suggesting that the relaxation of this substance is dependent on the accumulation of cGMP and acts synergistically with NO. Interestingly, the activator BAY 60-2770 induced relaxation in SHR was approximately 47 times more potent than the control. No difference was observed in 2K1C animals. Unlike BAY 41- 2272, the presence of L-NAME or ODQ potentiated relaxation to BAY 60-2770, showing that the oxidation of sGC or even the absence of NO contribute to this effect. In conclusion, our data show that in the mesenteric SHR sGC the enzyme can be oxidized (Fe3+), since we observed a decrease and increase of power of BAY 41-2272 and BAY 60-2770, respectively. In turn, in 2K1C animals vessels no change was observed in response to these substances, however, found to relax the SNP is decreased, suggesting decreased bioavailability of the NO. Thus, stimulators and activators of the enzyme sGC is an important pharmacological tool to assess the redox state of the GCs / Doutorado / Farmacologia / Doutor em Farmacologia

Orientador: José Butori Lopes de Faria / Textos em português e inglês / Tese (doutorado) - Universidade Estadual de Campinas, Faculdade de Ciências Médicas / Made available in DSpace on 2018-08-20T19:18:35Z (GMT). No. of bitstreams: 1 Faria_AlineMacedo_D.pdf: 2909540 bytes, checksum: fff73b7c4aa0615644542da6920d5af7 (MD5) Previous issue date: 2012 / Resumo: No diabetes mellitus (DM), o estresse oxidativo e a redução do óxido nítrico (NO) contribuem para a patogênese da nefropatia diabética. O desacoplamento da NO sintase endotelial (eNOS) faz com que essa sintase produza superóxido ao invés de NO. O objetivo do presente estudo foi investigar o potencial do chá verde (CV) na melhora do desacoplamento da eNOS no DM. Em ratos com DM induzido por estreptozotocina, a biodisponibilidade NO estava reduzida pelo desacoplamento da eNOS, caracterizada pela redução nos níveis de BH4 e pela redução da estrutura conformacional ativa da eNOS, avaliada pela expressão da razão dímero/monômero. O tratamento com chá verde foi capaz de reverter estas abnormalidades. Além disso, células mesangiais humanas imortalizadas (ihMCs) cultivadas sob condições de alta glicose (30mM) exibiram um aumento na produção de espécies reativas de oxigênio (ERO) e uma redução na biodisponibilidade de NO, que foram revertidos pelo CV. A produção de BH4 e a atividade da guanosina trifosfato ciclohidrolase I (GTPCH I), enzima importante na formação do BH4, diminuíram em ihMCs expostas a alta glicose e foram normalizados pelo CV. Administração exógena de BH4 nas ihMCs reverteu o aumento das ERO e declínio da produção de NO induzido pela alta glicose. Contudo, a co-administração de CV e BH4 não resultou em uma redução adicional na produção de ERO, sugerindo que a redução na produção de ERO pelo CV é um efeito secundário ao desacoplamento da eNOS. Em resumo, CV reverte a redução dos níveis de BH4, induzida pelo DM, melhorando o desacoplamento da eNOS, levando ao aumento da biodisponibilidade de NO e redução do estresse oxidativo, duas anormalidades que são envolvidas na patogêneses da nefropatia diabética / Abstract: The aim of the present study was to investigate the potential of green tea (GT) to improve uncoupling endothelial nitric oxide synthase (eNOS) in diabetic conditions. In rats with streptozotocin-induced diabetes mellitus (DM), nitric oxide (NO) bioavailability was reduced by uncoupling eNOS, characterized by a reduction in BH4 levels and an increase in the eNOS dimer/monomer ratio. GT treatment ameliorated these abnormalities. Moreover, immortalized human mesangial cells (ihMCs) exposed to high glucose (HG) levels exhibited a rise in reactive oxygen species (ROS) and a decline in NO levels, which were reversed with GT. BH4 and the activity of guanosine triphosphate cyclohydrolase I decreased in ihMCs exposed to HG and were normalized by GT. Exogenous administration of BH4 in ihMCs reversed the HG-induced rise in ROS and decline in NO production. However, co-administration of GT with BH4 did not result in a further reduction in ROS production, suggesting that reduced ROS with GT was indeed secondary to uncoupled eNOS. In summary, GT reversed the diabetes-induced reduction of BH4 levels, ameliorating uncoupling eNOS, thus increasing NO bioavailability and reducing oxidative stress, two abnormalities that are involved in the pathogenesis of diabetic nephropathy / Doutorado / Ciencias Basicas / Doutor em Clínica Médica

Made available in DSpace on 2014-06-12T18:28:49Z (GMT). No. of bitstreams: 2 arquivo1137_1.pdf: 1321687 bytes, checksum: 253b31bf70dd4ec1654c3742e9f3bb37 (MD5) license.txt: 1748 bytes, checksum: 8a4605be74aa9ea9d79846c1fba20a33 (MD5) Previous issue date: 2011 / Coordenação de Aperfeiçoamento de Pessoal de Nível Superior / A resposta imune inata em processos infecciosos é conhecida por sofrer alterações em decorrência de estados de desnutrição. Assim, o objetivo deste estudo foi de comparar a cinética da produção de óxido nítrico (ON) e a viabilidade de macrófagos alveolares (MA), após infecção celular in vitro, com Staphylococcus aureus meticilina-sensível (MSSA), e meticilina-resistente (MRSA) entre grupos de ratos nutridos (N) ou submetidos à desnutrição neonatal (D). Ratos machos Wistar (n=45) foram divididos em dois grupos distintos, de acordo com a dieta utilizada: N (ratos amamentados por mães submetidas à dieta com 17% de caseína) e D (ratos amamentados por mães submetidas à dieta nutricionalmente deficiente com 8% de caseína). Após o período de amamentação, os animais foram submetidos a um longo período de reposição nutricional, com Labina. Os MA foram coletados através da técnica do lavado broncoalveolar, após traqueostomia. O isolamento dos MA foi realizado por adesão em placas, sendo distribuídos na proporção de 106 células/mL de RPMI. Após o isolamento dos MA, foram estabelecidos quatro sistemas: controle negativo (CN), contendo apenas MA; controle positivo (CP), MA mais 10&#956;L de LPS (lipopolissacarídeo); MSSA, MA mais 100&#956;L de suspensão bacteriana (ATCC 29213) (densidade óptica de 0.15, equivalente a 10-6 CFUmL-1) e MRSA, MA mais 100&#956;L de suspensão bacteriana (ATCC 33591). As placas foram incubadas à 37ºC, com atmosfera úmida e 5% de CO2. A cada duas horas, num total de 24 horas de incubação, foram retirados 100&#956;L do sobrenadante das culturas. A quantificação do ON baseou-se na reação de Griess, através da determinação da concentração de nitritos. A leitura foi realizada em leitor de ELISA, filtro-550nm. A viabilidade dos MA foi analisada após 24 horas de incubação dos sistemas, e avaliada pela redução mitocondrial do 3-[4,5-dimetiltiazol-2-il]-2,5- brometo de difenil tetrazólico (MTT) à formazam. A quantificação do formazam solubilizado foi realizada em leitor de ELISA com filtro de 570nm. Utilizou-se teste t- Student e Mann-Whitney, admitindo-se p<0,05. A desnutrição acarretou diminuição do crescimento ponderal dos animais, da liberação de ON nos sobrenadantes das culturas e da viabilidade dos macrófagos. Houve menor produção de ON no MRSA quando comparado com MSSA, entretanto, a partir das 12h, não foi detectada diferença entre os sistemas, permanecendo até 24h. Ao avaliar a viabilidade dos macrófagos entre os sistemas, ocorreu maior redução no MRSA do grupo desnutrido. Pode-se concluir que o modelo de desnutrição neonatal adotado promoveu alteração na função das células fagocitárias, comprometendo o estresse nitrosativo e a viabilidade dos macrófagos alveolares. Além disto, há evidências de diferenças no mecanismo de evasão do sistema imune entre as cepas MSSA e MRSA

Made available in DSpace on 2014-06-12T22:56:43Z (GMT). No. of bitstreams: 2 arquivo1296_1.pdf: 1134346 bytes, checksum: 4198dab433b669547f4dadf3bb361baa (MD5) license.txt: 1748 bytes, checksum: 8a4605be74aa9ea9d79846c1fba20a33 (MD5) Previous issue date: 2009 / Universidade Federal de Pernambuco / A Síndrome da Apnéia Obstrutiva do Sono (SAOS) é considerada um transtorno respiratório relacionado ao sono, caracterizada por episódios repetitivos de completa (apnéia) ou parcial (hipopnéia) obstrução da passagem do ar na via aérea superior (VAS) durante o sono, em vigência de esforço respiratório. A fisiopatologia da obstrução da VAS na SAOS é multifatorial, levando a situação crônica recorrente de hipoxemia intermitente e reoxigenação em sono, mantendo estado de estresse oxidativo, que parece ser a chave das manifestações fisiopatológicas da SAOS, estando associada ao desenvolvimento de várias complicações sistêmicas de alta morbi-mortalidade, tais como a obesidade, diabetes tipo 2, síndrome metabólica, hipertensão arterial e doenças cárdio e cérebrovascular, transtornos neuropsiquiátricos, além do aumento do risco de acidentes de trabalho e de trânsito, podendo ter desfecho fatal. Este estudo é um ensaio clínico, aberto, transversal e comparativo, cujo objetivo geral foi avaliar a correlação entre a gravidade da SAOS, marcadores de estresse oxidativo e presença de sintomas depressivos e ansiosos em pacientes portadores da SAOS. Estudamos 38 adultos, do sexo masculino, com diagnóstico de SAOS por polissonografia de noite inteira, com idade entre 18-60 anos, divididos em 3 grupos: Grupo I: 10 indivíduos com SAOS de grau leve (IAH entre 5-14,9/hora); Grupo 2: 13 indivíduos com SAOS de grau moderado (IAH entre 15-30/hora); Grupo 3: 15 indivíduos com SAOS grave (IAH > 30/hora). Todos foram avaliados para nível de sonolência subjetiva utilizando a escala de Epworth, para sintomas depressivos e ansiosos pelas escalas de Hamilton depressão (HAM-D) e ansiedade (HAM-A) e para parâmetros do estado de estresse oxidativo, dosando radical superóxido e nitratos e nitritos séricos. Houve aumento progressivo e significativo do estado de estresse oxidativo (p < 0,05), no escore total de sintomas depressivos (p=0,001) e no escore geral dos sintomas ansiosos (p=0,004) diretamente proporcional a gravidade da apnéia, comparando os grupos leve e grave. Foram verificadas correlações positivas entre a produção de superóxido e o índice apnéia-hipopnéia (IAH) (r= 0,48), escore de sonolência de Epworth (r= 0,36) e com o escore de Hamilton-depressão (HAM-D) (r= 0,40); entre os níveis de nitritos e nitratos séricos e o SpO2mín (r= 0,44); entre o IAH e os escores HAM-D (r=0,51) e escore HAM-A (r=0,40). Foram observadas correlações negativas entre o IAH e os níveis de nitritos e nitratos séricos (r= -042), entre a produção de superóxido e a SpO2 mín (r= -0,31), entre os níveis de nitritos e nitratos séricos e os escores HAMD (r= -0,50) e HAM-A (-0,42) e entre a SpO2 mín e os os escores HAM-D (r= - 0,48) e HAM-A (r= -0,40). Conclusões: a) Indivíduos portadores de SAOS apresentam aumento na produção de radical superóxido e redução nos níveis de nitritos e nitratos séricos, sinais objetivos de um estado de estresse oxidativo. b) Quanto maior a gravidade da SAOS, maior fragmentação do sono e maior hipoxemia noturna, mais grave é o estado de estresse oxidativo e maior é a incidência de sintomas diurnos, principalmente sonolência, sintomas depressivos e ansiosos

Orientadores: Edson Antunes, Angelina Zanesco / Dissertação (mestrado) - Universidade Estadual de Campinas, Faculdade de Ciências Médicas / Made available in DSpace on 2018-07-25T01:01:21Z (GMT). No. of bitstreams: 1 Riado_SoniaRegina_M.pdf: 2336612 bytes, checksum: 055072902e1d16daa20f32c9ccb9136b (MD5) Previous issue date: 1999 / Resumo: A administração crônica do inibidor da síntese de óxido nítrico N?-nitro-L arginina metil ester (L-NAME) em ratos induz à hipertensão arterial acompanhada por hipertrofia ventricular esquerda e lesões miocárdicas. O aumento do tônus simpático, a participação do sistema renina-angiotensina e o aumento do tônus vascular têm sido implicados na gênese elou manutenção do estado hipertensivo nesse modelo experimental de hipertensão. O objetivo deste estudo foi determinar a potência de agonistas ß adrenérgicos e muscarínicos nas respostas cronotrópicas e a potência de agonistas a e ß adrenérgicos nas respostas inotrópicas de átrios de ratos tratados cronicamente com L-NAME. Estudos histológicos também foram empregados para avaliar possíveis lesões atriais induzidas pelo tratamento com L-NAME. Nossos resultados mostraram que a potência do isoproterenol, noradrenalina, BRL 37344, carbacol e pilocarpina em átrios direitos de átrios isolados de ratos tratados com L-NAME por 7, 15, 30 e 60 dias não foram afetadas quando comparadas com os valores obtidos de animais do grupo controle. Átrios esquerdos isolados de animais tratados com L-NAME por 7, 15, 30 e 60 dias também não apresentaram alterações das respostas inotrópicas aos agonistas fenilefrina e isoproterenol. A adição de L-NAME "in vitro" não afetou a freqüência basal ou as respostas cronotrópicas ao isoproterenol e noradrenalina em átrios direitos. As análises estereológicas em átrios direitos e esquerdos mostraram um aumento significativo na porcentagem de tecido conjuntivo nos animais tratados com L-NAME por 15 e 30 dias nos átrios direitos quando comparados com os grupos controle. No entanto, o porcentual de tecido conjuntivo nos átrios esquerdos mostrou-se ser similar ao grupo controle. Nossos resultados indicam que a inibição da síntese do óxido nítrico não interfere nas respostas crontrópicas e inotrópicas mediadas pelos receptores adrenérgicos e muscarínicos e que as lesões apresentadas nos átrios direitos após o tratamento crônico com L-NAME não são suficientes para alterar as respostas dessa preparação / Abstract: Chronic administration of nitric oxide synthesis inhibitors induces arterial hypertension accompanied by left ventricular hypertrophy and myocardial ischaemic lesions. Since the enhancement of sympathetic drive has been implicated in these phenomena, the current study was carried out to determine the potency of adrenergic- and muscarinic-agonists on chronotropic and inotropic responses of isolated atria from rats treated chronically with the NO inhibitor N?-nitro-L-arginine methyl ester (L-NAME). Atriallesions induced by the chronic treatment with L-NAME were also evaluated. Our results showed that the potency of isoproterenol, norepinephrine, carbachol, pilocarpine and BRL 37344 in isolated right atria from rats treated chronically with L -NAME was not affected as compared to control animais. Addition of L NAME in vitro (100 µmoI/L) affected neither basal rate nor chronotropic response for isoproterenol and norepinephrine in rat heart. Addittionally, the inotropic responses of isoproterenol and phenylephrine were not affected by L-NAME treatment. Stereological analysis of the right atria at 15 and 30 days revealed a significant increase on amount of fibrous tissues in L-NAME treated groups (27±2.3% and 28±1.3%, for 15 and 30 days, respectively; P<.05) as compared to the control group (22±1.1 %). In left atria there were no changes on the amount of fibrous tissue. Our results indicate that nitric oxide does not to interfere with ß-adrenoceptors and muscarinic receptors mediated-chronotropic and inotropic responses / Mestrado / Farmacologia / Mestre em Ciências

Memoria para optar al título de Químico Farmacéutico / La creciente resistencia a los fármacos antifúngicos es un problema de salud pública mundial. Según estadísticas de la Organización Mundial de la Salud (OMS), las infecciones por estos patógenos han aumentado por diversas causas entre las que se encuentran el aumento de pacientes inmunocomprometidos y el uso masivo de antibióticos de amplio espectro. Lo más alarmante es la alta tasa de morbilidad que exhibe este tipo de infecciones, las que se asocian con una alta tasa de resistencia a los fármacos actualmente ocupados. Uno de los mecanismos de resistencia más relevantes es la formación de biofilms, que se definen como comunidades microbianas rodeadas por una matriz de sustancias poliméricas extracelulares, la cual les otorgaría una protección mecánica frente a la acción de antimicrobianos. Una de las patologías donde la formación de biofilms está directamente asociada con el fracaso terapéutico es la estomatitis protésica, una inflamación crónica de la mucosa oral en contacto con una prótesis removible y que tiene una directa asociación con la presencia de biofilms de levaduras del género Candida. Por estas razones es de gran interés investigar novedosas estrategias farmacológicas para reducir o revertir los biofilms. Debido al escaso desarrollo de nuevas moléculas antifúngicas, es que se ha buscado potenciar el efecto de los antifúngicos convencionales con fármacos “no antimicrobianos”. En este sentido, se ha descrito que los antiinflamatorios no esteroidales (AINES), que inhiben la formación de prostaglandinas, poseen efecto antibiofilm. Esto estaría relacionado con el rol de la Prostaglandina E2 en los procesos claves involucrados en la formación de biofilms; entre ellos, la morfogénesis de Candida y la adhesión a superficies abióticas. Entre los AINES destaca la aspirina que es la que ha presentado mejor efecto antibiofilm. Otra molécula de interés como agente antimicrobiano, es el óxido nítrico (NO), cuya acción se ha ensayado con compuestos dadores de NO como el nitroprusiato de sodio o el isosorbide mononitrato. Estos han presentado efectos antibiofilm presumiblemente por los efectos antimicrobianos que presentan el NO y por su capacidad como inmunomodulador. Por estas razones en esta investigación se evaluó el efecto antibiofilm de la aspirina liberadora de óxido nítrico, cuya estructura aparece en la Figura 1; en este caso el efecto sobre los biofilms sería dual. En este trabajo se determinó la susceptibilidad a fluconazol de los aislados clínicos de C. albicans y se cuantificó el efecto antibiofilm de la aspirina liberadora de óxido nítrico. Para este efecto, se evaluaron los siguientes parámetros: adhesión, morfogénesis, morfología de los biofilms y viabilidad de los biofilms en presencia de fluconazol y aspirina liberadora de óxido nítrico. Este último fármaco fue eficaz sobre los biofilms, pero su efecto no fue sinérgico en presencia de fluconazol, confirmando que fluconazol no presenta efecto antifúngico frente a los biofilms. Estos resultados son prometedores y nuevos estudios están en progreso para confirmar su posible uso en este tipo de patologías / The growing resistance to antifungal drugs is a global public health problem. According to statistics from the World Health Organization (WHO), infections with these pathogens have increased for various reasons, among which are the increase of immunocompromised patients and the widespread use of broadspectrum antibiotics. Most alarming is the high rate of morbidity exhibiting these infections, which are associated with a high rate of resistance to drugs currently occupied. One of the most important mechanisms of resistance is the formation of biofilms, which are defined as microbial communities surrounded by a matrix of extracellular polymeric substances, which would provide them with mechanical protection against the action of antimicrobials. One of the conditions where the formation of biofilms is directly associated with treatment failure is denture stomatitis, a chronic inflammation of the oral mucosa in contact with a removable prosthesis and has a direct association with the presence of biofilms of Candida yeasts. For these reasons it is of great interest to investigate novel pharmacological strategies to reduce or reverse the biofilms. Due to the limited development of new antifungal molecules it is that they have sought to enhance the effect of conventional antifungals with "no antimicrobial" drugs. In this regard, it described those nonsteroidal anti-inflammatory drugs (NSAIDs) which inhibit the formation of prostaglandins, have antibiofilm effect. This would be related to the role of Prostaglandin E2 in the key processes involved in the formation of biofilms; including Candida morphogenesis and adherence to abiotic surfaces. Among the highlights NSAIDs aspirin presents the antibiofilm best effect. Another molecule of interest as an antimicrobial agent is nitric oxide (NO), whose action has been tested with NO donor compounds such as sodium nitroprusside or isosorbide mononitrate. These have presented antibiofilm effects presumably by antimicrobial effects of NO and its ability as an immunomodulatory agent. For these reasons in this investigation antibiofilm effect of aspirin releasing nitric oxide, was evaluated; in this case the effect on biofilms would be dual. Therefore, we evaluated fluconazole susceptibility of C. albicans clinical isolates and quantified the antibiofilm effect of aspirin releasing nitric oxide. For this purpose, adhesion, morphogenesis, morphology and viability of biofilms in the presence of fluconazole biofilms and aspirin releasing nitric oxide were evaluated. The latter drug was effective against biofilms, but its effect was not synergistic with those of fluconazole. This confirmed that fluconazole have no effect against biofilms. These results are promising and further studies are in progress to confirm their possible use in this type of pathology

Orientador: Gilberto de Nucci / Tese (doutorado) - Universidade Estadual de Campinas, Instituto de Biologia / Made available in DSpace on 2018-07-24T04:07:01Z (GMT). No. of bitstreams: 1 Faria_MoacirSerralvo_D.pdf: 3773759 bytes, checksum: c4656150c40f4346b6392ccd56e337ca (MD5) Previous issue date: 1998 / Resumo: Este estudo investigou a participação do óxido nítrico (NO) na modulação da ansiedade em ratos submetidos ao teste do labirinto em cruz elevado. A administração aguda e sistêmica de N?-nitro-L-arginina metil éster (L-NAME, 10 e 60 mg.kg-1), um inibidor da NO sintase, induziu um efeito ansíolítico, caracterizado pela elevação do tempo de permanência dos animais nos braços abertos. Essa variável não foi alterada após o tratamento crônico com a mesma droga. Ambos os tratamentos, agudo e crônico, com L-NAME promoveram inibição da NO sintase no endotélio e no sistema nervoso central, visto que os animais manifestaram elevada pressão arterial e diminuída atividade da NO sintase em tecido encefálico. O tratamento crônico com L-NAME também reduziu os níveis séricos de nitratos. É improvável que o efeito ansiolítico induzido pelo tratamento agudo com L-NAME seja decorrente da hipertensão induzida pela droga, visto que outro estado hipertensivo não relacionado com inibição da síntese de NO (hipertensão "de dois rins" de Goldblatt ou 2K1C) não alterou o comportamento exploratório dos animais no labirinto em cruz elevado. Esses resultados indicam que a inibição aguda da síntese de NO diminui o nível de ansiedade em ratos e reforçam o papel do NO como um novo neurotransmissor/neuromodulador no sistema nervoso central / Abstract: The involvement of nitric oxide (NO) in anxiety was investigated in rats, using the elevated plus maze test. Acute, but not chronic, systemic treatment with N?-nitro-L-arginine methyl ester (L-NAME, 10 and 60 mg.kg-1), an inhibitor of NO synthase, increased the time spent by the rats in the open arms. 80th the acute and chronic treatments with L-NAME inhibited NO synthase in endothelial cells and in the central nervous system, as shown by the increase in mean arterial pressure and decreased NO synthase activity in brain tissue. Chronic treatment with L NAME also decreased the serum nitrate levels. The anxiolysis induced by acute L-NAME treatment is unlikely to be due to hypertension, since two kidney-one clip hypertension in non-L-NAME-treated rats failed to significantly change exploratory behaviour in the elevated plus maze. These results indicate that acute inhibition of NO synthesis decreases anxiety in rats / Doutorado / Fisiologia / Doutor em Ciências Biológicas

Made available in DSpace on 2014-06-12T23:01:51Z (GMT). No. of bitstreams: 2 arquivo4011_1.pdf: 2870402 bytes, checksum: c19e0f034fafc4b87553561fc2b04554 (MD5) license.txt: 1748 bytes, checksum: 8a4605be74aa9ea9d79846c1fba20a33 (MD5) Previous issue date: 2008 / Conselho Nacional de Desenvolvimento Científico e Tecnológico / Restrição nutricional no aleitamento tem conseqüências em longo prazo no funcionamento dos sistemas neuro-imunológico. Receptores e transportador serotoninérgicos presentes em macrófagos alveolares (MA) estão relacionados ao seu funcionamento. No artigo Perinatal malnutrition programs sustainable alterations in nitric oxide production and cell viability in activated macrophages of the adult rat , efeitos da desnutrição perinatal sobre liberação in vitro de óxido nítrico (LNO) foram analisados em MA nos ratos adultos. Os ratos desnutridos (D) apresentaram retardo do crescimento, confirmado pelo baixo peso ao desmame, persistindo até os 90 dias de vida. Os D também apresentaram menor número de células totais e MA no lavado broncoalveolar. A LNO por MA e a viabilidade dessas células foi menor nos D. No artigo, Perinatal malnutrition programs sustained alterations in nitric oxide release by activated macrophages in response to fluoxetine in adult rats , em adultos, nutridos ou desnutridos na fase perinatal, foi avaliada LNO por MA em resposta a fluoxetina em diferentes concentrações e tempos, e também em resposta aos agonistas de receptores 5-HT1A e 5-HT1B. Na presença de fluoxetina, a LNO por MA dos controles foi menor, uma resposta relacionada à dose, mas não ao tempo. A adição de agonistas não interferiu na produção de NO por MA nos controles. A LNO por MA de D foi menor em todos os tempos analisados. A LNO não foi alterada na presença de fluoxetina ou dos agonistas por MA de D. Em conclusão, manipulação nutricional no período perinatal parece interferir com a programação da função de macrófagos e afeta sua regulação serotoninérgica, repercutindo no organismo adulto