Submitted by Erika Demachki (erikademachki@gmail.com) on 2015-11-12T18:44:31Z No. of bitstreams: 2 Dissertação - Oscar Romero Lopes Rodrigues - 2015.pdf: 1210572 bytes, checksum: 9080ec829a41c8754d39489573c4cd56 (MD5) license_rdf: 23148 bytes, checksum: 9da0b6dfac957114c6a7714714b86306 (MD5) / Approved for entry into archive by Erika Demachki (erikademachki@gmail.com) on 2015-11-12T18:46:20Z (GMT) No. of bitstreams: 2 Dissertação - Oscar Romero Lopes Rodrigues - 2015.pdf: 1210572 bytes, checksum: 9080ec829a41c8754d39489573c4cd56 (MD5) license_rdf: 23148 bytes, checksum: 9da0b6dfac957114c6a7714714b86306 (MD5) / Made available in DSpace on 2015-11-12T18:46:20Z (GMT). No. of bitstreams: 2 Dissertação - Oscar Romero Lopes Rodrigues - 2015.pdf: 1210572 bytes, checksum: 9080ec829a41c8754d39489573c4cd56 (MD5) license_rdf: 23148 bytes, checksum: 9da0b6dfac957114c6a7714714b86306 (MD5) Previous issue date: 2015-03-13 / Conselho Nacional de Pesquisa e Desenvolvimento Científico e Tecnológico - CNPq / The Laboratório de Química Farmaceutica Medicinal designed and synthesized a new piperazine derivative tert-butyl 4-((1-phenyl-1H-pyrazol-4-yl)methyl)piperazine-1-carboxylate (LQFM104) based on molecular framework of clozapine. This study aimed the pharmacological evaluation in the central nervous system of the LQFM104. Treatment with LQFM104 at doses of 25 , 50 or 100 μmol/kg (p.o.) in the open-field test did not alter in animals the number of grooming behavior, the number of fecal boluses, the total number of crossings, immobility time, number of rears, the percentage of crossings in the central area and the time spent in the center. None of groups of doses tested with LQFM104 was able to change the time spent in the chimney test. In pentobarbital-induced sleep test, the treatment with LQFM104 25, 50 or 100 μmol/kg (p.o.) did not affect sleep latency, while the sleep duration has increased by 65%, 64.4% and 78.6% respectively compared to the control group treated orally with vehicle 10 ml/kg (28.8 ± 2.9 minutes). In the standardization of apomorphine-induced climbing test, the treatment with haloperidol at dose of 2.6 μmol/kg was able to reduce the climbing behavior in 97.8%, whereas clozapine at dose of 45 μol/kg, has reduced this behavior in 78 % when compared to control (16.87 ± 2.8). The LQFM104 50 or 200 μmol/kg (p.o.) was not able to reduce the climbing behavior. In the forced swimming test just LQFM104 50 μmol/kg (p.o.) was able to reduce the immobility time in 19.8% compared to the control group ( 263.2 ± 6.7 seconds) and increased the latency to immobility in 43%, compared with the control ( 70.6 ± 6.5 seconds). Similarly, in the tail suspension test, only the LQFM104 50 μmol/kg (p.o.) increased immobility time (32.1%) compared to the control (216.1 ± 13.2 seconds). The LQFM104 50 μmol/kg (p.o.) had their antidepressant-like effects completely reversed by blocking treatment with PCPA and NAN-190. And the quantification of brain-derived neurotrophic factor the LQFM104 50 μmol/kg (p.o.) did not change these levels. The results with LQFM104 in the open-field test indicated no changes in spontaneous locomotor activity and showed no anxiogenic activity. The chimney test did not reveal impairment in motor coordination. The pentobarbital-induced sleep test increased sleep duration without reducing the latency, thus suggesting a sedative action. The forced swimming test and the tail suspension test confirmed for LQFM104 50 μmol/kg (p.o.) an antidepressant activity in mice. The blockade with NAN-190 and PCPA suggests the involvement of serotonergic system and 5-HT1A receptor. / O laboratório de Química Farmacêutica Medicinal projetou e sintetizou um novo derivado piperazínico o tert-butil 4-((1-fenil-1H-pirazol-4-il)metil)piperazina-1-carboxilato (LQFM104) baseado no arcabouço molecular da clozapina . O objetivo deste estudo foi a avaliação farmacológica no sistema nervoso central do LQFM104. O tratamento com LQFM104 nas doses de 25, 50 ou 100 μmol/kg (v.o.), no teste de campo aberto não alterou nos animais o número de comportamento de auto-limpeza, o número de bolos fecais, o número total de cruzamentos, o tempo de imobilidade, número de levantadas, a porcentagem de cruzamentos na área central e o tempo despendido no centro. Nenhum dos grupos de doses testadas com LQFM104 tiveram alterações no tempo gasto pelo teste da chaminé. No teste do sono induzido por pentobarbital, o tratamento com LQFM104 25, 50 ou 100 μmol/kg (v.o.) não afetou a latência ao sono, enquanto que a duração do sono aumentou em 65%, 64,4% e 78,6% respectivamente, em comparação com o grupo controle tratado oralmente com veículo 10 ml/kg (28,8 ± 2,9 minutos). Na padronização do teste de escalada induzido por apomorfina, o tratamento com haloperidol na dose de 2,6 μmol/kg foi capaz de reduzir o comportamento de escalada em 97,8%, e a clozapina, na dose de 45 μmol/kg, causou este comportamento reduzido em 78% quando comparado com o controle (16,87 ± 2,8). O LQFM104 nas doses de 50 ou 200 μmol/kg (v.o.) não foi capaze de reduzir o comportamento de escalada. No teste do nado forçado, apenas a dose de 50 μmol/kg (v.o.) foi capaz de reduzir o tempo de imobilidade, em 19,8% em comparação com o grupo controle (263,2 ± 6,7 segundos) e aumentou a latência para a imobilidade em 43%, em comparação com o controle (70,6 ± 6,5 segundos). De modo semelhante, no teste de suspensão pela cauda, apenas o LQFM104 50 μmol/kg (v.o.), aumentou o tempo de imobilidade (32,1%) em comparação com o controle (216,1 ± 13,2 segundos). O LQFM104 50 μmol/kg (v.o.) teve seu efeito tipo antidepressivo completamente revertido pelo bloqueio com o tratamento com PCPA e NAN-190. Na quantificação do fator neurotrófico derivado do cérebro o LQFM104 50 μmol/kg (v.o.) não alterou esses níveis. Os resultados com LQFM104 no teste de campo aberto não indicaram nenhuma alteração na atividade locomotora espontânea e não mostraram nenhuma atividade ansiogênica. O teste da chaminé não mostrou diminuição na coordenação motora. O teste de sono induzido por pentobarbital aumentou a duração do sono, sem reduzir a latência, o que sugere uma ação sedativa. O teste do nado forçado e o teste de suspensão pela cauda confirmou para LQFM104 50 μmol/kg (v.o.) uma atividade tipo antidepressiva em camundongos. O bloqueio com PCPA e NAN-190 sugerem o envolvimento de sistema serotonérgico e do receptor 5-HT1A.

Submitted by Erika Demachki (erikademachki@gmail.com) on 2014-11-10T15:39:39Z No. of bitstreams: 2 Dissertação - Elizabeth Gomes Paulino Menezes - 2009.pdf: 1425255 bytes, checksum: 6aa32c741dbfa1d3e72e004f919b5326 (MD5) license_rdf: 23148 bytes, checksum: 9da0b6dfac957114c6a7714714b86306 (MD5) / Approved for entry into archive by Erika Demachki (erikademachki@gmail.com) on 2014-11-10T15:39:55Z (GMT) No. of bitstreams: 2 Dissertação - Elizabeth Gomes Paulino Menezes - 2009.pdf: 1425255 bytes, checksum: 6aa32c741dbfa1d3e72e004f919b5326 (MD5) license_rdf: 23148 bytes, checksum: 9da0b6dfac957114c6a7714714b86306 (MD5) / Made available in DSpace on 2014-11-10T15:39:56Z (GMT). No. of bitstreams: 2 Dissertação - Elizabeth Gomes Paulino Menezes - 2009.pdf: 1425255 bytes, checksum: 6aa32c741dbfa1d3e72e004f919b5326 (MD5) license_rdf: 23148 bytes, checksum: 9da0b6dfac957114c6a7714714b86306 (MD5) Previous issue date: 2009-11-03 / In this study the antileukemic potential of grandisin, a neolignan extracted from Piper solmsianum, was investigated against K-562 lymphocytic genealogy, which demonstrates a phenotype of resistance to new drugs. The cytotoxicity of grandisin (0.018 to 2.365 μMol) was evaluated in K-562 and in normal peripheral blood lymphocytes by using Blue of Trypan and MTT({[3-(4,5-Dimethylthiazol-2-yl)-2,5-diphenyltetrazolium] bromide}) methods. In the cytotoxic activity research about grandisin on K-562 cells and lymphocytes during 24 hours by the Blue of Trypan method, the grandisin got IC50 (inhibitory concentration to fifty percent) of 1.075 and 0.375 μMol to lymphocytes and K-562, respectively. After 48 hours, the cytotoxicity in normal cells remained themselves and we noticed there was an increase in IC50 leukemic cells of 0.198 μMol and 0.200 μMol in K-562 and lymphocytes, respectively. For the MTT test, results were similar to those found during the previous experiment (IC50K-562 11,98 μMol IC50lymphocytes 0,425 μMol for a period of 24 hours and IC50K-562 0,685 IC50lymphocytes 0,851 μMol for a period of 48 hours). The research about cell death mechanisms showed the treatment in K-562 cells joined to 0.036 μMol of grandisin during 24 hours, induces to an increase of cells population in G1 stage of cell cycle and it also induces to a decline of cells population in G2 stage and S, respectively. These factors also indicate that the grandisin was induced to a cell cycle standstill in G1 stage, which is proportionated to the most antileukemic agents existing. Cell death with apoptosis signs was showed by the research about these cells morphology. Moreover, the treatment of leukemic cells with 0.072, 0.036, 0.018 μMol of grandisin during 24 hours has promoted exposure of annexin V, wich is a first indicator of apoptosis. In these cells, the activity research of 3, 6 and 9 caspases and cell death mediators Bcl2 and Bax showed that cell death happens in dependent-caspase way and with balance induction between Bcl2 and Bax. Collectively, these results introduce a new model able to induce apoptosis in a leukemic cell genealogy with important features of resistance to the process of programmed cell death. / Neste estudo, o potencial antileucêmico da grandisina, uma neolignana extraída de Piper solmsianum, foi investigado contra a linhagem leucêmica K-562, a qual apresenta fenótipo de resistência a fármacos. A citotoxicidade da grandisina (0,018 – 2,365 μMol) foi avaliada em K-562 e em linfócitos do sangue periférico normal utilizando os métodos de Azul de Tripano e MTT({brometo de [3-(4,5-dimetiltiazol-2-yl)-2,5-difeniltetrazolio]}). Na investigação da atividade citotóxica da grandisina sobre células K-562 e linfócitos por 24 horas pelo método azul de tripano, a grandisina apresentou IC50 (concentração inibitória para cinqüenta porcento) de 1,075 μMol e 0,375 μMol para linfócitos e K-562, respectivamente. Após 48 horas a citotoxicidade para as células normais se manteve e observamos aumento para as células leucêmicas IC50 0,198 μMol e 0,200 μMol para K-562 e linfócitos, respectivamente. Para o teste de MTT os resultados foram semelhantes aos encontrados no ensaio anterior (IC50K-562 11,98 μMol IC50linfócitos 0,425 μMol para 24 horas e IC50K-562 0,685 μMol IC50linfócitos 0,851 μMol para 48 horas ). A investigação dos mecanismos de morte celular demonstrou que o tratamento das células K-562 com 0,036 μMol de grandisina por 24 horas induz ao aumento da população de células em fase G1 do ciclo celular e uma diminuição da população de células em fase G2 e S, respectivamente, indicando que a grandisina induziu parada do ciclo celular em fase G1, o que condiz com a maioria dos antileucêmicos existentes. A investigação da morfologia destas células indicou morte celular com sinais de apoptose. Além disto, o tratamento das células leucêmicas com 0,072, 0,036, 0, 018 μMol de grandisina por 24 horas promoveu a externalização da anexina V, um indicador primário de apoptose. Nestas células, a investigação da atividade das caspases 6, 8 e 9 e dos mediadores do processo de morte celular Bcl2 e Bax demonstrou que a morte celular ocorre via caspase-dependente e com indução de modulação entre Bcl2 e Bax. Coletivamente estes resultados introduzem um novo modelo capaz de induzir apoptose em uma linhagem celular leucêmica com importantes características de resistência ao processo de morte celular programada.

Submitted by Cláudia Bueno (claudiamoura18@gmail.com) on 2016-04-04T18:58:10Z No. of bitstreams: 2 Dissertação - Antônio Silva Machado - 2015.pdf: 1923171 bytes, checksum: 991e35e30785c0ac34b0f9290b2fc249 (MD5) license_rdf: 23148 bytes, checksum: 9da0b6dfac957114c6a7714714b86306 (MD5) / Approved for entry into archive by Luciana Ferreira (lucgeral@gmail.com) on 2016-04-05T10:37:58Z (GMT) No. of bitstreams: 2 Dissertação - Antônio Silva Machado - 2015.pdf: 1923171 bytes, checksum: 991e35e30785c0ac34b0f9290b2fc249 (MD5) license_rdf: 23148 bytes, checksum: 9da0b6dfac957114c6a7714714b86306 (MD5) / Made available in DSpace on 2016-04-05T10:37:58Z (GMT). No. of bitstreams: 2 Dissertação - Antônio Silva Machado - 2015.pdf: 1923171 bytes, checksum: 991e35e30785c0ac34b0f9290b2fc249 (MD5) license_rdf: 23148 bytes, checksum: 9da0b6dfac957114c6a7714714b86306 (MD5) Previous issue date: 2015-03-10 / Conselho Nacional de Pesquisa e Desenvolvimento Científico e Tecnológico - CNPq / AIDS is considered an epidemic disease shaping up as a serious public health problem. Since its discovery in 1981, considerable efforts have been made to better understand the HIV infection mechanism thus, propelling the research and drug development process. According to their mechanism of action, HIV drugs can be classified into six mainly subgroups: nucleoside reverse transcriptase inhibitors (NRTIs), protease inhibitors (PI), non-nucleoside reverse transcriptase inhibitors (NNRTIs), nucleotide reverse transcriptase inhibitors (NtRTI ), entry inhibitors and integrase inhibitors. Currently, searching for safer and more effective drugs showing less collateral effects remains an encouraging pace. In this context, our work describes a synthesis of a new family of heterocyclic compounds, chemically related to delavirdine, a NNRTIs currently used in AIDS treatment. Bioisosterism strategy was applied to obtain synthetic products (54a-54h) in four steps only. Conventional heating method (A) and optimized microwave reactor (B) methodology were both compared by means of their intermediate products yields. Results showed increased yields of partial products (20a-20h [91-98%]); (29a-29h [69-88%]); (37a-37h [82-92%]) for microwave reactor methodology, as well a gain in the time spent during the procedure. All compounds (20a-20h; 29a-29h; 37a-37h e 54a-54h) were characterized by Nuclear Magnetic Resonance of Hydrogen (1H NMR), Carbon (13 C NMR) and Infrared spectroscopy (IR). / A Aids é considerada uma epidemia de cunho global, se configurando como um grave problema de saúde pública. Desde de sua descoberta em 1981, foram realizados esforços consideráveis para a melhor compreensão do mecanismo pelo qual o HIV propicia a infecção, iniciando o processo de pesquisa e desenvolvimento de fármacos. Sendo estes classificados de acordo com os seus mecanismos de ação, apresentados em 6 grupos i.e inibidores nucleosídicos da transcriptase reversa (NRTI), inibidores da protease (PI), inibidores não nucleosídicos da transcriptase reversa (NNRTI), inibidores nucleotídeos da transcriptase reversa (NtRTI), inibidores de entrada e inibidores de integrase. Logo, a busca por novos fármacos que sejam mais efetivos, seguros e com menos efeitos coletareis é de grande relevância. Neste contexto, o trabalho descreve a síntese de uma nova família de compostos heterocíclicos, planejados estruturalmente a partir do fármaco delavirdina - atualmente empregada no tratamento da AIDS, atuando como inibidor não nucleosídico da transcriptase reversa. Os compostos finais sintetizados (54a-54h) são obtidos em quatro etapas sintéticas. Estas foram planejadas e seus rendimentos comparadas a partir da estratégia de bioisosterismo. Seus intermediários foram sintetizados tanto por metodologia de aquecimento convencional (A) assim como, por reator de micro-ondas (B). Os resultados obtidos demonstraram aumento do rendimento parcial (20a-20h [91-98%]); (29a-29h [69-88%]); (37a-37h [82-92%]) e ganho de tempo na síntese dos intermediários, pela metodologia otimizada por reator de microondas. Todos os compostos (20a-20h; 29a-29h; 37a-37h e 54a-54h) foram caracterizados por meio de ressonância magnética nuclear de Hidrogênio (RMN 1H), de Carbono (RMN 13C) e espectroscopia de infravermelho (IV).

Submitted by Luanna Matias (lua_matias@yahoo.com.br) on 2015-03-16T15:45:07Z No. of bitstreams: 2 Dissertação - Daniela Medeiros Lobo de Andrade - 2014.pdf: 1412697 bytes, checksum: 19e6d4fab16722ee831616d29065c6dc (MD5) license_rdf: 23148 bytes, checksum: 9da0b6dfac957114c6a7714714b86306 (MD5) / Approved for entry into archive by Luciana Ferreira (lucgeral@gmail.com) on 2015-03-17T10:26:12Z (GMT) No. of bitstreams: 2 Dissertação - Daniela Medeiros Lobo de Andrade - 2014.pdf: 1412697 bytes, checksum: 19e6d4fab16722ee831616d29065c6dc (MD5) license_rdf: 23148 bytes, checksum: 9da0b6dfac957114c6a7714714b86306 (MD5) / Made available in DSpace on 2015-03-17T10:26:37Z (GMT). No. of bitstreams: 2 Dissertação - Daniela Medeiros Lobo de Andrade - 2014.pdf: 1412697 bytes, checksum: 19e6d4fab16722ee831616d29065c6dc (MD5) license_rdf: 23148 bytes, checksum: 9da0b6dfac957114c6a7714714b86306 (MD5) Previous issue date: 2014-09-30 / Coordenação de Aperfeiçoamento de Pessoal de Nível Superior - CAPES / Conselho Nacional de Pesquisa e Desenvolvimento Científico e Tecnológico - CNPq / The research and the use of medicinal plants as therapeutic agents has been increasing in recent years and the jabuticaba (Myrciaria cauliflora) has occupied a favorable place in this segment by presenting biological properties due to their high antioxidant activity due to the presence of phenolic compounds. The aim of this study was to investigate the phytochemical characterization of EHAJ, evaluate the antioxidant potential of HAEJ and evaluate the influence of HAEJ on hemodynamic parameters in rat (in vivo) and the mechanisms involved in variation in vascular tone caused by HAEJ in aortas isolated of rat (in vitro). The quantification of the phenolic compounds in HAEJ was performed by a method that is based on the complexation of phenolic compounds present in the solution of ferric chloride (FeCl3) as measured by a spectrophotometer and ellagic acid quantitation was performed by analysis high performance liquid chromatography (HPLC). The phytochemical characterization of HAEJ was evaluated considering only one methodologie (mass spectrometry - ESI-MS) and antioxidant activity of HAEJ was evaluated considering two different methodologies (DPPH and differential pulse voltammetry - DPV). To achieve the experimental protocols in vivo, were inserted with the animals anesthetized, catheters in the right femoral vein and artery, and flow probes around the aorta for infusion of EHAJ, check blood pressure, heart rate and aortic blood flow, respectively. Besides the pressure was checked the vasorelaxant effect of HEAJ in preparations of isolated rat aorta pre-contracted with vasopressor agents. The concentration of nitric oxide produced by the endothelial cells in the presence of HEAJ was also evaluated by flow cytometry. Intravenous infusion of HEAJ (0.12 to 0.96 mg / kg) produced dose-dependent increase in aortic blood flow hypotension. In isolated arteries pre-contracted with contractile agonist, HEAJ induced concentration-dependent relaxation which was potentiated in preparations with intact endothelium (E+) (120μg/ml) as compared with preparations devoid of endothelium (E-) (1.92 mg / mL). And preparations pretreated with L-NAME, ODQ and MDL-12,330A reduced the relaxation caused by HEAJ, whereas pretreatment with diclofenado, atropine and propranolol did not alter the activity of HEAJ. In E- preparations pretreated with TEA, 4-AP, glibenclamide and ODQ, relaxation caused by HEAJ was reduced, while the clotrimazole pretreatment with CPA and does not alter the activity of HEAJ. Furthermore, HEAJ was able to decrease phenylephrine and KCl induced contractions. These findings suggest that the hypotension associated with HEAJ induces vascular relaxation; also suggests the involvement of such pathways cGMP / sGC and cAMP / AC and finally the involvement of potassium channels and calcium channels, this relaxation. / A pesquisa e a utilização de plantas medicinais como agentes terapêuticos tem sido crescente nos últimos anos e a jabuticaba (Myrciaria cauliflora) tem ocupado um lugar favorável neste segmento por apresentar propriedades biológicas, devido a sua alta atividade antioxidante decorrente da presença de compostos fenólicos. O objetivo do presente estudo foi verificar a caracterização fitoquímica do extrato hidroalcoólico de jabuticaba (EHAJ), o potencial antioxidante, avaliar a influência do EHAJ sobre os parâmetros hemodinâmicos em ratos (in vivo) e os mecanismos envolvidos na variação do tônus vascular provocada pelo EHAJ, em aorta isolada de ratos (in vitro). A quantificação dos compostos fenólicos no EHAJ foi realizada através de um método que se baseia na complexação dos compostos fenólicos presentes na amostra, com a solução de cloreto férrico (FeCl3), medida por espectrofotômetro e a quantificação do ácido elágico foi realizada através da análise por cromatografia liquida de alta eficiência (CLAE ou HPLC). A caracterização fitoquímica do EHAJ foi avaliada considerando apenas uma metodologia (espectrometria de massa - ESI-EM) e a atividade antioxidante do EHAJ foi avaliada considerando duas metodologias diferentes (DPPH e voltametria de pulso diferencial - VPD). Para realização dos protocolos experimentais in vivo foram inseridos, com os animais anestesiados, cateteres na veia e artéria femural direita, além de sondas de fluxo em torno da aorta, para infusão do EHAJ, verificação da pressão arterial, frequência cardíaca e fluxo sanguíneo aórtico, respectivamente. Além da pressão foi verificado o efeito vasorrelaxante do EHAJ em preparações de aortas isoladas de ratos, pré-contraídas com agentes vasoconstritores. Foi avaliado também, por citometria de fluxo, o aumento da concentração de óxido nítrico produzido pelas células endoteliais, na presença do EHAJ. A infusão intravenosa do EHAJ (0,12 a 0,96mg/kg) produziu hipotensão dose-dependente e aumento do fluxo sanguíneo aórtico. Em artérias isoladas, pré contraídas com agonista contrátil, o EHAJ induziu relaxamento concentração-dependente, que foi potencializado em preparações com endotélio íntegro (E+) (120μg/ml) quando comparado com preparações desprovidas de endotélio (E-) (1,92mg/ml). Preparações E+ pré-tratados com L-NAME, ODQ e MDL-12,330A reduziram o relaxamento provocado pelo EHAJ, enquanto que o pré-tratamento com diclofenaco, atropina e propranolol, não alterou a atividade do EHAJ. Em preparações E- pré-tratados com TEA, 4-AP, glibenclamida e ODQ, o relaxamento provocado pelo EHAJ foi reduzido, enquanto que o pré-tratamento com clotrimazol e CPA, não alterou a atividade do EHAJ. Além disso, o EHAJ foi capaz de diminuir contrações induzidas por fenilefrina e KCl. Estes achados sugerem que o EHAJ induz hipotensão associada ao relaxamento vascular; sugere também a participação de vias como cGMP/sGC e cAMP/AC e por último o envolvimento de canais de potássio e canais de cálcio, neste relaxamento.

Submitted by Erika Demachki (erikademachki@gmail.com) on 2015-03-23T21:19:32Z No. of bitstreams: 2 Dissertação - Wanessa Carvalho Pires - 2014.pdf: 2557007 bytes, checksum: e5dedf168f3f361061e50ee3f6c2466e (MD5) license_rdf: 23148 bytes, checksum: 9da0b6dfac957114c6a7714714b86306 (MD5) / Approved for entry into archive by Erika Demachki (erikademachki@gmail.com) on 2015-03-23T21:20:57Z (GMT) No. of bitstreams: 2 Dissertação - Wanessa Carvalho Pires - 2014.pdf: 2557007 bytes, checksum: e5dedf168f3f361061e50ee3f6c2466e (MD5) license_rdf: 23148 bytes, checksum: 9da0b6dfac957114c6a7714714b86306 (MD5) / Made available in DSpace on 2015-03-23T21:20:57Z (GMT). No. of bitstreams: 2 Dissertação - Wanessa Carvalho Pires - 2014.pdf: 2557007 bytes, checksum: e5dedf168f3f361061e50ee3f6c2466e (MD5) license_rdf: 23148 bytes, checksum: 9da0b6dfac957114c6a7714714b86306 (MD5) Previous issue date: 2014-03-12 / Coordenação de Aperfeiçoamento de Pessoal de Nível Superior - CAPES / It is estimated that 27 million new cancer cases will occur in the world until 2030. Due to this high number of cases, researches for new chemotherapeutic agents that are efficient for the malignant neoplastic disease treatment have intensified. Ruthenium complexes have been highlighted from those metal complexes that are being contemplated for the cancer treatment, because they exhibit the characteristics of selectivity for tumor cells and thus be less toxic to normal cells. Consequently, we evaluated the cytotoxic potential of six new complexes of ruthenium (II) and two of those with promising activity were selected to assess the genotoxic potential, the mechanism of death and interference on cell cycle dynamics. The cytotoxicity of these complexes was evaluated by MTT assay showing that for all six ruthenium complexes there was a reduction of viability of the tumor cells K562 and S-180 at low concentrations and cytotoxicity at higher concentrations to normal cells L-929 and lymphocyte. The ruthenium II complexes Ru 05 and Ru 08 got the best resolutions in the MTT assay and were selected for testing genotoxicity and mechanism of death. Data indicate that the Ru 05 and 08 induced changes in cell cycle through test performed by flow cytometry, increasing the number of cells in G0/G1 phase and decreasing into the synthesis phase at 24 and 48 hours of exposure. For the complex Ru 05 there was an increase in the number of cells in sub-G1 phase, which is indicative of apoptosis and cell damage, yet, neither the complex Ru 05 nor the Ru 08 showed significant DNA damage in the Comet assay during 24 and 48 hours. Both complexes increased the number of positive cells for Annexin-V, however the complex Ru 05 had induced changes in mitochondrial membrane potential, increased expression of the gene Bax, Tp53 and Caspase 9 and decreased the amount of active anti-apoptotic Bcl2 protein in the S-180 cells, leading to a reasonable supposes that this complex may cause the triggering of the cell death by apoptosis through intrinsic caspase-dependent manner. On the other hand, the complex Ru 08 did not statistically alter the mitochondrial membrane potential. Ru 08 increased the gene expression of Caspase 3, 8, 9 and Tp53 and the amount of active Caspase-3 protein in the S-180 treated cells, and decreased the amount of anti-apoptotic Bcl2 protein, which allows inferring that this complex may be acting by the extrinsic pathway. Despite the new ruthenium complexes studied have shown a promising future as chemotherapy for cancer treatment, other specific markers are needed to understand the cascade of events which the extrinsic apoptosis pathway is being triggered, elucidating the mechanism of action in S-180 cell line. / Até 2030 estima-se que ocorrerão 27 milhões de novos casos de câncer no mundo. Em decorrência deste alto número de casos, estudos em busca de novos quimioterápicos que sejam eficientes para o tratamento do câncer têm se intensificado. Os complexos de rutênio têm-se destacado dentre os complexos de metais que têm sido estudados para o tratamento do câncer por demonstrarem características de seletividade para as células tumorais e, consequentemente, serem menos tóxicos para as células normais. Diante disso foi avaliado o potencial citotóxico de seis novos complexos de rutênio (II) e dois desses com atividade promissora foram selecionados para avaliar o potencial genotóxico, o mecanismo de morte e a interferência na cinética do ciclo celular. A citotoxicidade foi avaliada pelo teste do MTT que mostrou que todos os complexos testados apresentaram inibição da viabilidade nas células tumorais de S-180 e K562 em concentrações baixas e uma citotoxicidade em concentrações maiores para células normais de L-929 e linfócitos humanos. Os complexos de rutênio denominados Ru 05 e Ru 08 obtiveram os melhores resultados no teste de MTT e foram selecionados para os testes de mecanismo de morte celular e de genotoxicidade. Os dados indicaram que os Ru 05 e Ru 08 induziram mudanças no ciclo celular através do teste realizado por citometria de fluxo, aumentando a quantidade de células na fase G0/G1 e diminuindo na fase de síntese em 24 e 48 horas de tratamento. Para o Ru 05 houve um aumento na quantidade de células na fase Sub-G1, levando ao indicativo de morte celular por apoptose e dano celular, entretanto, nem o Ru 05 quanto o Ru 08 apresentaram dano significativo ao DNA no teste Cometa em 24 e 48 horas. Ambos os complexos induziram o aumento da quantidade de células positivas para Anexina-V pelo teste de citometria de fluxo, sugestivo de morte celular por necrose ou apoptose, no entanto, o Ru 05 induziu alteração no potencial de membrana mitocondrial, aumentou a expressão dos genes Bax, Caspase 9 e Tp53 realizado por PCR em tempo real e diminuiu a quantidade da proteína anti-apoptótica Bcl2 ativa nas células de S-180, levando a inferir que o complexo pode estar desencadeando morte celular por apoptose via intrínseca dependente de caspase. Já o Ru 08 não alterou estatisticamente o potencial de membrana mitocondrial celular, aumentou a expressão dos genes de Caspase 3, 8, 9 e Tp53, reduziu a quantidade de proteína anti-apoptótica Bcl2 ativa e aumentou a quantidade da proteína Caspase 3 ativa nas células de S-180 tratadas, permitindo inferir que esse complexo pode estar atuando pela via extrínseca. Porém, outros marcadores específicos são necessários para compreender qual a cascata de eventos da apoptose via extrínseca que está sendo necessária para efetivar esse processo de morte celular, elucidando o mecanismo de ação nas células de S-180 desses novos complexos de rutênio estudados, que se mostraram promissores quimioterápicos no tratamento do câncer.

Os antibióticos macrolídeos formam um grupo de antimicrobianos bastante seguros, extremamente úteis devido à atividade contra Mycoplasma, Chlamydia, Legionella, Bordetella, pneumococos, estreptococos e outros patógenos importantes. A comercilização do antibiótico macrolídeo roxitromicina está autorizada pela Agência Nacional de Vigilância Saitária (ANVISA). Contudo, atualmente nenhum laboratório farmacêutico disponibiliza este medicamento no mercado brasileiro, estando a roxitromicina disponível apenas para manipulação em farmácias magistrais. A literatura registra o desenvolvimento de metodologias de análise e quantificação da roxitromicina. Contudo, nenhum deles aplicáveis à forma farmacêutica cápsulas. Neste trabalho, foram desenvolvidas e validadas metodologias analíticas para análise da roxitromicina na forma farmacêutica cápsulas: Método microbiológico por difusão em ágar, utilizando sistema de bicamada e cepas de Microccocus luteus – INCQS 011 como microorganismo revelador; Método por Cromatografia Líquida de Alta Eficiência (CLAE), utilizando cromatógrafo a líquido com detector UV/Vís e coluna cromatográfica do tipo C18; e perfil de dissolução, utilizando aparelho dissolutor, aparato pá, rotação de 100 RPM e 900 mL de meio de dissolução por cuba. Os métodos foram validados de acordo com o que dispões a RDC ANVISA nº 899 de 2003. O método microbiológico mostrou-se linear (r = 0,9985), preciso (DPR= 1,53%), exato, seletivo e robusto. Da mesma maneira, o método cromatográfico demonstrou ser linear (r = 0,9995), preciso (DPR = 1,08%), exato (100,85%), seletivo e robusto. O método cromatográfico foi empregado no desenvolvimento e validação do perfil de dissolução, o qual demonstrou ser seletivo, preciso (DPR =1,96%), robusto e exato. Os métodos propostos foram aplicados e apresentaram resultados satisfatórios na análise quantitativa de roxitromicina cápsulas, além de se apresentarem como alternativas de baixo custo e fácil introdução na rotina de laboratórios analíticos. / Macrolide antibiotics are a very safe group of antimicrobials, extremely useful against Mycoplasma, Chlamydia, Legionella, Bordetella and other important pathogens. The commercialization of the macrolide antibiotic roxithromycin is authorized by the Brazilian health regulatory agency ANVISA. However, currently no pharmaceutical company makes this drug available on the Brazilian market, and roxithromycin has been commercially available as capsules by compounding pharmacies. The literature reports the development of methodologies for the analysis and quantification of roxithromycin. However, none of them apply to pharmaceutical capsules. In this work, analytical methodologies for the analysis of roxithromycin in the pharmaceutical form capsules were developed and validated: Agar Diffusion Bioassay, using bilayer system and Microccocus luteus strains - INCQS 011 as a revealing microorganism; Method by High Performance Liquid Chromatography (HPLC), using liquid chromatograph with UV / Vis detector and C18 type chromatographic column; And dissolution profile using dissolver apparatus, paddle apparatus, rotation of 100 RPM and 900 mL of dissolution medium per vessel. The methods were validated according to the provisions of the Brazilian validation guide. The microbiological method was linear (r = 0.9985), precise (RSD = 1.53%), exact, selective and robust. In the same way, the chromatographic method showed to be linear (r = 0.9995), accurate (RSD = 1.08%), exact (100.85%), selective and robust. The chromatographic method was used in the development and validation of the dissolution profile, which proved to be selective, precise (RSD = 1.96%), robust and accurate. The proposed methods were applied and presented satisfactory results in the quantitative analysis of roxithromycin capsules, in addition to being presented as low cost alternatives and easy to introduce into routine analytical laboratories.

Submitted by Rosana Moreira (rosanapsm@outlook.com) on 2018-11-19T13:16:33Z No. of bitstreams: 2 license_rdf: 0 bytes, checksum: d41d8cd98f00b204e9800998ecf8427e (MD5) Dissertacao_AvaliacaoAdesaoTratamento.pdf: 1327614 bytes, checksum: 0c11ecc934595bba6a2fefe3240f3084 (MD5) / Approved for entry into archive by Edisangela Bastos (edisangela@ufpa.br) on 2019-01-30T15:56:07Z (GMT) No. of bitstreams: 2 license_rdf: 0 bytes, checksum: d41d8cd98f00b204e9800998ecf8427e (MD5) Dissertacao_AvaliacaoAdesaoTratamento.pdf: 1327614 bytes, checksum: 0c11ecc934595bba6a2fefe3240f3084 (MD5) / Made available in DSpace on 2019-01-30T15:56:07Z (GMT). No. of bitstreams: 2 license_rdf: 0 bytes, checksum: d41d8cd98f00b204e9800998ecf8427e (MD5) Dissertacao_AvaliacaoAdesaoTratamento.pdf: 1327614 bytes, checksum: 0c11ecc934595bba6a2fefe3240f3084 (MD5) Previous issue date: 2017 / A Fibrose Cística (FC) é uma doença hereditária, que se manifesta clinicamente por sintomas digestivos e respiratórios. O diagnóstico precoce oferece a possibilidade de um melhor controle terapêutico do paciente favorecendo o prognóstico e contribuindo para uma melhor qualidade de vida. O objetivo do estudo foi demonstrar o comportamento dos pacientes frente à doença e avaliar a adesão ao tratamento com a enzima alfadornase. Foi feito um estudo prospectivo, transversal e observacional por meio de dados epidemiológicos coletados através de entrevistas com pacientes e/ou responsáveis e por análise de prontuários. Para a avaliação da adesão ao tratamento e conhecimento da doença foram aplicados os testes Morisky- Green e Batalla Martinez. Para avaliar o perfil clínico foi utilizado o escore de Shwachman-Kulczyki. Foram recrutados 51 pacientes com fibrose cística atendidos no ambulatório do Hospital Universitário João de Barros Barreto em uso de alfadornase. Participaram do estudo 47 pacientes no período de julho de 2015 a junho de 2016. A maioria dos pacientes (53,2%) tinha idade inferior a 18 anos, 56,6% eram do sexo masculino e 40,4% provenientes do interior. Pacientes em tratamento com alfadornase por mais de 5 anos, apresentaram maior adesão do que os demais com menor período de tratamento e o sexo masculino esteve associado a maior adesão, assim como a maior escolaridade e renda familiar. Após a aplicação do teste de Batalla Martinez, apenas 40,42% demonstraram conhecimento sobre a doença. Deste modo foram observados como fatores associados à baixa adesão: uso de mais de cinco medicamentos, baixa escolaridade e sexo. Por outro lado, os resultados mostram que a adesão à medicação esteve associada ao melhor escore clínico. / Cystic Fibrosis is an inherited disease, clinically manifested by digestive and respiratory symptoms. The early diagnosis offers the possibility of a better therapeutic control of the disease’s symptoms in favor of the prognosis and contributing to increasing quality of life. The aim of this study was to demonstrate the patient's behavior towards the disease and to evaluate the adherence to the treatment with the alfadornase enzyme. A cross-sectional study was carried out using epidemiological data collected through direct interviews with patients and/or their caregivers and by medical records analysis. Morisky-Green and Batalla Martinez tests were employed in order to evaluate the patient’s adhesion and knowledge of the disease, respectively. In addition, the clinical profile was assayed by Shwachman-Kulczyki score. Fifty-one (51) patients with cystic fibrosis in treatment with alfadornase were recruited at the outpatient clinic of the Hospital Universitário João de Barros Barreto. At final, forty-seven (47) patients participated in the study. Most of the patients (53.2%) were under 18 years of age, male (56.6%) and were from countryside (40.4%). Patients with long term use of alfadornase (> 5 years) show possess greater adherence than the others with a shorter treatment period. The male sex was associated with higher adherence, as well as greater education level and family income. The Batalla Martinez test demonstrates that only 40.42% of patients had some knowledgement about their disease. Thus, the factors associated with low adherence were: use of more than five medications, low education and gender. On the other way, these results shows that adherence to the medication was associated with the best clinical score.

Submitted by Rosana Moreira (rosanapsm@outlook.com) on 2018-11-19T13:45:17Z No. of bitstreams: 2 license_rdf: 0 bytes, checksum: d41d8cd98f00b204e9800998ecf8427e (MD5) Dissertacao_InvestigacaoFitoquimicaAtividade.pdf: 1641240 bytes, checksum: 643b624233be3806d4ea6f4bad257e80 (MD5) / Approved for entry into archive by Edisangela Bastos (edisangela@ufpa.br) on 2019-01-30T16:03:11Z (GMT) No. of bitstreams: 2 license_rdf: 0 bytes, checksum: d41d8cd98f00b204e9800998ecf8427e (MD5) Dissertacao_InvestigacaoFitoquimicaAtividade.pdf: 1641240 bytes, checksum: 643b624233be3806d4ea6f4bad257e80 (MD5) / Made available in DSpace on 2019-01-30T16:03:11Z (GMT). No. of bitstreams: 2 license_rdf: 0 bytes, checksum: d41d8cd98f00b204e9800998ecf8427e (MD5) Dissertacao_InvestigacaoFitoquimicaAtividade.pdf: 1641240 bytes, checksum: 643b624233be3806d4ea6f4bad257e80 (MD5) Previous issue date: 2017-12-21 / CNPq - Conselho Nacional de Desenvolvimento Científico e Tecnológico / As cascas de Luehea speciosa, família Malvaceae, são utilizadas na medicina tradicional para o tratamento de disenteria, reumatismo, tumores, bronquites, feridas de pele, emagrecimento entre outros. Porém, existem poucas informações sobre a espécie na literatura. Dessa forma, faz-se de grande interesse investigar a sua constituição química e suas possíveis atividades biológicas, visto que a comprovação cientifica promove uma alternativa de tratamento de forma segura aos usuários. Neste sentido, o presente estudo buscou a constituição química do extrato bruto seco (EBS) e das frações hexânica (FHX), diclorometano (FDM), acetato de etila (FAE) e metanólica (FME), da espécie, através de analises por cromatografia liquida de alta eficiência acoplada a espectrometria de massas - LC/MS, bem como suas atividades antioxidante, por bioautografia, e citotóxica, in vitro, frente as linhagens de células tumorais, HELA e HEP-2 e VERO. As amostras apresentaram atividade antioxidante, sendo as frações FDM e FAE com perfil mais relevante. O EBS e as frações demonstraram citotoxidade sobre todas as linhas em estudo, porém a fração FDM apresentou maior atividade citotóxica contra células tumorais. Nas análises por LC/MS, foram detectados compostos fenólicos, com características sugestivas da presença do ácido chicórico, através do m/z = 148, além do espectro de UV semelhante. Esses resultados demonstram que a espécie em estudo possui atividade antioxidante e sugerem que a amostra exerce citotoxidade contra células tumorais, apresentando-se promissora para futuros estudos. / The barks of Luehea speciosa, family Malvaceae, are used in traditional medicine to treat dysentery, rheumatism, tumors, bronchitis, skin wounds, weight loss and others diseases. However, studies give little information about the species in the literature. Thus, it is of great interest to investigate its chemical constitution and biological activities, since the scientific proof of its activity can promote, in the future, a therapeutic alternative. The present study analyzed the chemical constitution of the dry crude extract (EBS) and hexane (FHX), dichloromethane (FDM), ethyl acetate (AED) and methanolic (FME) fractions of the species by high-performance liquid chromatography (HPLC) with tandem mass spectrometric - LC/MS, as well as its antioxidant activities by bioautography and cytotoxic assays, in vitro, against HELA, HEP-2 and VERO tumor cell lines. The samples showed antioxidant activity, being the fractions FDM and AED results more relevant. The EBS and fractions demonstrated cytotoxicity on all cell lines, however the FDM fraction had greater cytotoxic activity against tumor cells. In the LC/MS analyzes, were detected phenolic compounds and suggestive characteristics of chicoric acid presence through m/z = 148, as in the UV spectrum. These results demonstrate that this species has antioxidant activity and suggest its cytotoxicity against tumor cells, being a promising species for future studies.

Submitted by Rosana Moreira (rosanapsm@outlook.com) on 2018-11-20T17:50:08Z No. of bitstreams: 2 license_rdf: 0 bytes, checksum: d41d8cd98f00b204e9800998ecf8427e (MD5) Dissertacao_FitoquimicaAtividadeAntiplasmodica.pdf: 3766420 bytes, checksum: 476b93ca65090b1164bddb2407b7487b (MD5) / Approved for entry into archive by Edisangela Bastos (edisangela@ufpa.br) on 2019-01-31T13:41:16Z (GMT) No. of bitstreams: 2 license_rdf: 0 bytes, checksum: d41d8cd98f00b204e9800998ecf8427e (MD5) Dissertacao_FitoquimicaAtividadeAntiplasmodica.pdf: 3766420 bytes, checksum: 476b93ca65090b1164bddb2407b7487b (MD5) / Made available in DSpace on 2019-01-31T13:41:16Z (GMT). No. of bitstreams: 2 license_rdf: 0 bytes, checksum: d41d8cd98f00b204e9800998ecf8427e (MD5) Dissertacao_FitoquimicaAtividadeAntiplasmodica.pdf: 3766420 bytes, checksum: 476b93ca65090b1164bddb2407b7487b (MD5) Previous issue date: 2016-11-10 / CAPES - Coordenação de Aperfeiçoamento de Pessoal de Nível Superior / Na América Latina, o uso de plantas do gênero Siparuna é indicado no tratamento de febres e malária, a atividade antiplasmódica de algumas espécies já foi comprovada, o que motivou o estudo S. poeppigii, nativa da Amazônia. Este trabalho visa analisar a fitoquímica, a atividade antiplasmódica e a citotoxicidade de extratos e frações de S. poeppigii. De folhas e cascas do caule de um exemplar coletado em Belém, Pará, foram preparados extratos em etanol (EESPC e EESPF) e a separação de alcaloides foi realizada por extrações ácido-base (SPC-B e SPF-B; SPC-C e SPF-C). Os extratos etanólicos foram submetidos a re-extrações por refluxo com solventes de polaridades crescentes resultando nas frações hexano-diclorometano (HEX-DCM), diclorometano (DCM), acetato de etila (AcOEt) e metanol (MeOH). Análises fitoquímicas por UPLC-DAD e cromatografia em camada delgada (CCD) foram efetuadas com os extratos e frações. As frações Hex-DCM, AcOEt e MeOH foram submetidas a fracionamentos cromatográficos em colunas de sílica gel (CCS). A atividade antiplasmódica dos extratos e frações foi avaliada frente à cepa W2 de P. falciparum cloroquina-resistente pelo método de quantificação da lactato desidrogenase (ρLDH), nas concentrações de 50 μg/mL e 25 μg/mL. Para as frações mais ativas determinou-se a concentração Inibitória de 50% (CI50) e a concentração citotóxica de 50% (CC50) em células HepG2 pelo método do MTT, nas concentrações de 50; 25; 12,5; 6,25; 3,12 e 1,6 μg/mL para CI50 e 1, 10, 100 e 1000μg/mL para CC50. Os dados permitiram calcular o índice de seletividade (IS) de cada fração. A prospecção por CCD foi positiva para geninas e heterosídeos flavônicos, saponinas, alcaloides, triterpenos e esteroides. A CCS de SPC-B permitiu a obtenção das frações 5-8, 43-44, 61, 67-68, 95-97 e 84-88, consideradas ativas com CI50 de 5,95; 12,44; 14,32; 22,58; 22,67 μg/mL, respectivamente. Todas as frações ativas foram não citotóxicas, sendo os melhores IS das frações 5-8 (43,32) e 95-97 (>44,11). Estas frações ativas e a Fr 16 AcOEt (obtida da CCS da Fr AcOEt), foram caracterizadas por UPLC-ESI-MS sendo identificados os alcaloides reticulina e anonaina na Fr 16 AcOEt. As frações 84-88 e 111 foram re-cromatografadas em colunas de alumina e sephadex LH20, respectivamente obtendo-se substâncias SP-1 e SP-2. A análise por UPLC-DAD das amostras EESPC, EESPF, SPC-B e SPF-B revelou predomínio de um pico no tempo de retenção (TR) 6,5 min, com max 267 e 346 nm, sugestivo de cromóforos de flavonoides. A substância SP-1 exibiu pico (74% de área) no TR 3,6 min e UV com max 255 e 276 nm, compatível com UV online da liriodenina autêntica. SP-2 exibiu pico majoritário (90%) no TR 2,6 min e max 282 nm. As frações de alcaloides SPF-B e SPC-C foram ativas, com CI50 12,41 e 6,99μg/mL. Este trabalho relata dados inéditos de fitoquímica e atividade antiplasmódica da espécie S. poeppigii bem como a identificação da liriodenina, responsável, em parte, pela atividade antiplasmódica da espécie.

Made available in DSpace on 2011-03-23T21:19:38Z (GMT). No. of bitstreams: 0 / Item created via OAI harvest from source: http://www.bdtd.ufpa.br/tde_oai/oai2.php on 2011-03-23T21:19:38Z (GMT). Item's OAI Record identifier: oai:bdtd.ufpa.br:275 / Chromoblastomycosis is a subcutaneous mycosis caused by deployment transcutaneous of several species of dematiaceous fungi, that is, melanized fungi. Considering the incidence of this disease in the state of Pará and the resulting morbidity of patients affected, with economic and social repercussions, it was made to the optimization of therapeutic schemes adopted, to the best knowledge of the relation dose x response. The itraconazole is one of the few drugs available for treatment, which has marked variability kinetic intra and inter individual, which compromises the establishment of the relation dose and response, as well as tissue and plasma concentrations achieved. In this sense, this work aimed at validation of analytical methodology by High Performance Liquid Chromatography and subsequent determination of itraconazole in samples of plasma and tissue in 20 patients with chromoblastomycosis, assisted in the laboratory of dermatoimmunology Dr. Marcello Candia, Marituba, Pará, who used the drug in doses of 200mg/day and 400mg/day. The technique employed was validated and proved adequate results in accordance with applicable law. Concentrations of plasma and tissue of itraconazole in the dose of 200mg/day were 121.3 87.9 ng/mL and 5.36 5.9 μg/g. The average plasma concentration of itraconazole in patients using 400mg/day was 290 234 ng/mL, and the plasma and tissue mean concentrations of itraconazole in patients who showed no clinical favourable, at doses of 200mg, making it necessary to increase to 400mg were 217 216 and 304 173 ng/mL; 14.87 12.94 e 21.80 6.62 μg/g. The average of relation between tissue and plasma concentrations in patients who had positive developments in clinical in the doses of 200mg/day was 44.29 67.12 and those that did not show positive developments in clinical in the doses of 200mg/day, making necessary to increase to 400mg/day were 68.52 59.90 and 71.71 38.26 respectively. / Cromoblastomicose é micose subcutânea causada pela implantação transcutânea de diversas espécies de fungos demáceos, isto é, fungos melanizados. Considerando a incidência desta doença no estado do Pará e a conseqüente morbidade dos pacientes afetados, com repercussões sociais e econômicas, fez-se necessário a otimização dos esquemas terapêuticos adotados, objetivando o melhor conhecimento da relação dose x resposta. O itraconazol é um dos poucos fármacos disponíveis para o tratamento, que apresenta marcada variabilidade cinética intra e inter individual, que compromete o estabelecimento da relação dose e resposta, bem como as concentrações plasmáticas e teciduais alcançadas. Neste sentido, este trabalho objetivou a validação da metodologia analítica por Cromatografia Líquida de Alta Eficiência e posterior determinação de itraconazol em amostras de plasma e tecido em 20 pacientes com cromoblastomicose, atendidos no laboratório de Dermato-Imunologia Dr. Marcello Candia, Marituba, Pará, que utilizaram o medicamento nas doses de 200mg/dia e 400mg/dia. A técnica validada demonstrou resultados adequados de acordo com a legislação vigente. As concentrações plasmáticas e teciduais de itraconazol na dose de 200mg/dia foram 121.3 87.9 ng/mL e 5.36 5.9 μg/g a concentração plasmática média de itraconazol em pacientes usando 400mg/dia foi de 290 234 ng/mL, e as concentrações plasmáticas e teciduais médias de itraconazol nos pacientes que não apresentaram evolução clínica favorável, nas doses de 200mg, tornando-se necessário o aumento para 400mg foram 217 216 e 304 173 ng/mL ; 14.87 12.94 e 21.80 6.62 μg/g. A média das relações entre as concentrações teciduais e plasmáticas nos pacientes que apresentaram evolução clínica favorável nas doses de 200mg/dia foi 44.29 67.12 e as que não apresentaram evolução clínica favorável nas doses de 200mg/dia, sendo necessário o aumento para 400mg/dia foram 68.52 59.90 ; 71.71 38.26 respectivamente.