A leptospirose é considerada a zoonose mais difundida do mundo, assim como uma doença reemergente. Esta enfermidade, causada por bactérias patogênicas do gênero Leptospira, possui altas taxas de infecção em países em desenvolvimento, ocasionando graves prejuízos econômicos e de saúde pública. Até o momento, não existem vacinas humanas licenciadas contra leptospirose. Após o seqüenciamento do genoma de três espécies de Leptospiras vários genes foram apontados como candidatos vacinais promissores. Uma categoria importante de genes candidatos são aqueles com possível atividade hemolítica. Neste trabalho, clonamos e expressamos diversas proteínas com possível atuação hemolítica. As proteínas recombinantes obtidas, no entanto, não exibiram atividade hemolítica. Uma destas proteínas, TlyC, foi investigada quanto à sua capacidade de interagir com os componentes da matriz extracelular (MEC). Os resultados obtidos indicam que TlyC liga-se com alta afinidade a diversos componentes da MEC, e que esta proteína é capaz de inibir competitivamente a adesão de Leptospiras à um material biológico que se assemelha à MEC. A transcrição e expressão destas proteínas foi detectada em cultura de Leptospira. Algumas das proteínas recombinantes foram utilizadas em um desafio animal contra leptospirose, mas nenhum delas foi protetora. Concluímos que estas proteínas não parecem ser bons candidatos vacinais e que TlyC é uma proteína que interage com componentes da MEC. / Leptospirosis is considered the most disseminated zoonosis of the world, and also a reemerging disease. This disease, caused by pathogenic bacteria of the genus Leptospira, has high rates of infection in developing countries, leading to severe economic and medical costs. There is not a licensed vaccine against leptospirosis for human use. After the genome sequencing of three species of leptospires, several genes were pointed to be promising vaccinal candidates. An important category of these candidates are those with putative hemolytic activity. In this work, we cloned and expressed some proteins with putative hemolytic activity. The recombinant proteins obtained, however, did not show hemolytic activity. One of these proteins, TlyC, was investigated with regard to its possible ability to interact to extracellular matrix (ECM) components. The results obtained indicate that TlyC binds with high affinity to several ECM components and that this protein can inhibit the Leptospira bind to a biological material that ressambles the ECM. The transcription and expression of these proteins were detected in leptospires cultures. Some of the recombinant proteins were used in an animal challenge against leptospirosis, but none of them were protective. We conclude that these proteins do not seem to be good vaccine candidates and that TlyC is a protein that interacts with the ECM and its components.

As novas drogas para tratamento do HIV/aids mudaram a história da doença, diminuindo a morbimortalidade e possibilitando um tratamento seguro e tolerável ao portador. Entretanto, para se alcançar os benefícios do tratamento é necessário o uso correto e diário dos medicamentos gerando um novo desafio: a adesão a TARV. A interação do paciente com a equipe multiprofissional tem sido associada ao aumento crescente da adesão. A inserção do farmacêutico nesta equipe é relativamente recente e tem potencial de impactar positivamente na adesão. Neste contexto, este trabalho teve como objetivo avaliar o impacto de intervenções farmacêuticas na adesão ao tratamento antirretroviral em pacientes com HIV/aids. Para alcançar os nossos objetivos foi realizado um estudo de intervenção (pesquisa-ação), prospectivo com análise quali e quantitativa. Foram convidados a participar do estudo os pacientes que já estavam em uso de TARV há pelo menos 12 meses antes do inicio do estudo e que apresentavam história de má adesão (grupo 1) e pacientes que iriam começar a TARV no momento de sua inclusão no estudo (grupo 2). A adesão foi avaliada por meio de questionários estruturados, pelos exames laboratoriais de contagem da carga viral e contagem do linfócito TCD4, e do histórico de retiradas dos medicamentos. O acompanhamento farmacêutico aconteceu por um período de 12 meses onde foram enviadas mensagens de texto SMS (torpedos) para os pacientes com objetivos de lembra-los da consulta com o farmacêutico e da retirada da TARV. Foram convidados a participar do estudo 120 pacientes, sendo que 95 concluíram o acompanhamento farmacêutico. Deste total, 63 pacientes pertenciam ao grupo 1 e 32 pertenciam ao grupo 2. Após 12 meses de seguimento farmacêutico, entre os 63 pacientes que já estavam em tratamento, houve aumento do percentual de boa adesão de 16% para 57%, com aumento do CD4+, e aumento do percentual de pessoas (de 21% para 52%) com carga viral indetectável. Para o grupo que iniciava a TARV pela primeira vez, 69% teve boa adesão e 91% teve queda significativa da carga viral após 12 meses de acompanhamento. Diante destes resultados, é possível concluir que ha uma tendência no aumento da adesão quando a equipe multiprofissional conta com um farmacêutico que atua de forma clínica junto ao paciente. / Antiretroviral therapy (ART) has changed the history of HIV/aids, reducing morbi-mortality and providing a safe and tolerable treatment. However, to achieve all the benefits from the treatment its expected a correct and daily use of medicines, which means the challenge of adherence to ART. Its known that an effective interaction between patient and the multidisciplinary team is linked to good treatment adherence. The insertion of a clinical pharmacist in this team is recent and it has the potential to positively impact in adherence and HIV control. This study aimed to assess pharmaceutical interventions on adherence to ART in HIV/aids patients. We designed an interventional and prospective study, including qualitative and quantitative analysis. Patients with poor history of adherence to ART, detected by the multiprofessional team (Group 1) were included. These patients should have been using ART at least 12 months before their entrance in the study. In the other group we invited people with recent HIV diagnosis and with ART prescription for the first time (Group 2). Adherence was assessed through structured questionnaires, laboratory exams of viral load count and CD4+ lymphocyte count, and by withdrawal of medicines. The pharmaceutical monitoring had been done during 12 months, in which text messages (SMS messages) were sent for patients to remind them about the pharmacist and medical appointments as well as the withdrawal of ART. An amount of 120 patients were invited to participate in the study, and 95 completed the pharmaceutical monitoring. Of this total, 63 patients belonged to Group 1 and 32 belonged to Group 2. After 12 months of pharmaceutical monitoring, among group 1 (63 patients) there was an increase in the percentage of adherence from 16% to 57%, an increase of CD4+ (median of 199 to 301cel/mm3) and an important raise in the percentage of people with undetectable viral load (from 21% to 52%). For Group 2 that started ART for the first time, 69% had a good adherence and 91% had a significant drop in viral load, after 12 months of follow-up. Based on these results, we can conclude that adherence and HIV control increases significantly when the multidisciplinary team has a pharmacist who works close to the patient and the healthcare team.

Submitted by Renata Lopes (renatasil82@gmail.com) on 2016-04-26T14:15:43Z No. of bitstreams: 1 jeansoaresmiranda.pdf: 6014272 bytes, checksum: a6aaf905414159a41b45b4d6a499eb38 (MD5) / Approved for entry into archive by Adriana Oliveira (adriana.oliveira@ufjf.edu.br) on 2016-05-02T00:50:50Z (GMT) No. of bitstreams: 1 jeansoaresmiranda.pdf: 6014272 bytes, checksum: a6aaf905414159a41b45b4d6a499eb38 (MD5) / Made available in DSpace on 2016-05-02T00:50:50Z (GMT). No. of bitstreams: 1 jeansoaresmiranda.pdf: 6014272 bytes, checksum: a6aaf905414159a41b45b4d6a499eb38 (MD5) Previous issue date: 2016-01-25 / CAPES - Coordenação de Aperfeiçoamento de Pessoal de Nível Superior / O objetivo dessa pesquisa foi avaliar a influência do tempo de condicionamento com ácido fluorídrico a 10%, sobre a resistência de união entre uma cerâmica Y-TZP vitrificada e um cimento resinoso. Blocos pré-sinterizados de cerâmica Y-TZP (IPS e.max® ZirCAD - Ivoclar-Vivadent) foram cortados para obtenção de 40 amostras. Previamente à sinterização, os blocos foram regularizados com lixas d’água de granulação #180, #600 e #1200. Eles foram, então, divididos aleatoriamente em quatro grupos (n=10), sendo um o grupo controle no qual foi realizada a silicatização com Rocatec Soft (RS) e três grupos teste vitrificados com glaze spray (VITA Akzent Plus, Vita Zanhfabrik, Bad Sachingen, Alemanha), com diferentes tempos de condicionamento com ácido fluorídrico a 10% (Condac Porcelana, FMG, Brasil) executado na superfície destinado a adesão: por 20s (GS20s), 60s (GS60s) ou 100s (GS100s). Para cimentação foi utilizado um adesivo universal (Single Bond Universal, 3M ESPE) contendo monômero MDP em sua composição e um cimento resinoso dual (RelyX Ultimate, 3M ESPE). Em cada bloco foram obtidas duas colunas de cimento, totalizando 20 amostras por grupo. Após termociclagem, o teste de cisalhamento foi realizado (EMIC,DL 2000), a resistência de união foi registrada e utilizada para cálculo da resistência adesiva. Além disso, a análise de falha também foi realizada em todas as amostras com um estereomicroscópio (Stemi 2000-C). Uma amostra extra de cada grupo teve metade de sua superfície tratada para obtenção de imagens por perfilometria e microscopia eletrônica de varredura (MEV), além de realização de espectrometria por energia dispersiva (EDS). O teste de Kruskal-Wallis apresentou p valor igual a 0,001 e o teste de Dunn demostrou diferença apenas do grupo RS (22,10Mpa) para os grupos GS (GS20s: 8,10Mpa; GS60s: 10,49; GS100s: 7,53), porém não houve nenhuma diferença dentre os diferentes grupos GS. As imagens de perfilometria e MEV revelaram um padrão irregular de disposição do glaze após o condicionamento com HF 10%. Por meio da perfilometria foi possível aferir a espessura da camada do glaze remanescente (GS20s: 5 ± 1μm; GS60s: 4 ± 1μm; GS100s: 3 ± 1μm). Todas as falhas foram adesivas. E foi possível concluir que a resistência de união entre uma cerâmica Y-TZP vitrificada e um cimento resinoso com MDP não é influenciada por diferentes tempos de condicionamento com ácido fluorídrico. / The purpose of this research is to evaluate the influence of conditioning time with hydrofluoric acid on the bond strength of a Y-TZP glazed ceramics and a resin cement. Ceramic pre-sintered Y-TZP blocks (IPS e.max® ZirCAD - Ivoclar Vivadent-) were cut to obtain 40 samples. Prior to sintering the blocks were smoothed with sandpaper water granulation #180, #600 and #1200. They were then randomly divided into four groups (n = 10), one control group was performed silicatization with Rocatec Soft (RS) and three vitrified test groups with different acid conditioning times surface: GS20s, GS60s and GS100s (application hydrofluoric acid for 20, 60 and 100 seconds respectively). For cementation was used a universal adhesive containing the MDP monomer in its composition (Single Bond Universal, 3M ESPE) and a dual resin cement (RelyX Ultimate, 3M ESPE). In each block was obtained two cement columns, totaling 20 samples per group. After thermocycling, the shear test was performed (EMIC, DL 2000), the maximum force to fracture was recorded and used to calculate the bond strength. Furthermore, the failure analysis was also performed with a esteriomicroscópio (Stemi 2000-C). An extra sample of each group had half of its surface treated to obtain images by profilometry and scanning electron microscopy (SEM), as well as conducting energy dispersive spectrometry (EDS). The Kruskal-Wallis test showed ap value of 0.001 and the Dunn test demonstrated differences only the RS group (22,10Mpa) for GS groups (GS20s: 8,10Mpa; GS60s: 10.49; GS100s: 7.53 ), but there was no difference among different GS groups. The profilometry and SEM images revealed an irregular pattern of glaze layout after conditioning with HF 10%. By profilometry it was possible to measure the thickness of the remaining glaze layer (GS20s: 5 ± 1μm; GS60s: 4 ± 1μm; GS100s: 3 ± 1μm). All failures were adhesive. And it concluded that the bond strength between Y-TZP glazed pottery and a resin cement with MDP is not influenced by different conditioning times with hydrofluoric acid.

Orientador: Roberta Cunha Matheus Rodrigues / Texto em português e inglês / Dissertação (mestrado) - Universidade Estadual de Campinas, Faculdade de Enfermagem / Made available in DSpace on 2018-08-25T10:11:00Z (GMT). No. of bitstreams: 1 SantosPedrosa_RafaelaBatistados_M.pdf: 1805803 bytes, checksum: 1c035d3233cb182bbb25a113e1cc2f2f (MD5) Previous issue date: 2014 / Resumo: Este estudo tem como objetivo disponibilizar uma versão da Self-efficacy for Appropriate Medication Adherence Scale ¿ SEAMS para a cultura brasileira e avaliar suas propriedades de medida quando aplicada em pacientes com doença arterial coronária (DAC) em seguimento ambulatorial.. O processo de adaptação cultural foi realizado de acordo com as etapas propostas na literatura - tradução, síntese, retrotradução, avaliação por comitê de especialistas e pré-teste, seguidos pela avaliação da praticabilidade, aceitabilidade, confiabilidade e validade. Fizeram parte deste estudo 147 pacientes com DAC em uso de medicamentos cardioprotetores e de alívio dos sintomas, em seguimento ambulatorial em hospital universitário do interior do estado de São Paulo. Os dados foram obtidos por meio de entrevista e aplicação de instrumento de caracterização sociodemográfica/clínica e das versões brasileiras da Morisky Self-Reported Measure of Medication Adherence Scale (MMAS-4), da General Perceived Self-Efficacy Scale (GSE) e da SEAMS. A praticabilidade foi avaliada pelo tempo despendido na entrevista e a aceitabilidade pela proporção de pacientes que responderam a todos os itens do instrumento. Foi estimada a confiabilidade no que se refere à consistência interna e estabilidade da medida. A validade de construto foi estimada pela evidência correlacional entre os escores da versão brasileira da SEAMS, da MMAS-4 e da GSE. A validade de grupos conhecidos foi testada entre aqueles classificados com "dose suficiente" e "dose insuficiente" ( medida da proporção de adesão) e entre aqueles "aderentes" e "não aderentes" (medida da avaliação global da adesão). Foi empregada a análise confirmatória de fatores por meio dos modelos de equações estruturais A validade convergente do modelo fatorial foi avaliada pelas medidas de Average Variance Extracted (AVE), magnitude das cargas fatorias, alfa de Cronbach e confiabilidade composta. A validade discriminante do modelo fatorial foi avaliada pelas análises das cargas fatoriais cruzadas, comparação entre as raízes quadradas das AVEs, pelos coeficientes de correlação entre os construtos e pela correlação desatenuada. Os dados foram submetidos às análises descritivas, com avaliação da praticabilidade, aceitabilidade e efeitos teto e chão; de confiabilidade por meio do coeficiente alfa de Cronbach (consistência interna) e do coeficiente de correlação intraclasse (estabilidade da medida). O coeficiente de correlação de Spearman foi utilizado para testar a correlação entre os escores das versões brasileiras da SEAMS, MMAS-4e GSE. O teste de Mann-Whitney foi utilizado para verificar a capacidade da versão brasileira da SEAMS em discriminar entre coronariopatas classificados em "dose suficiente" ou "insuficiente" e entre aqueles "aderentes" e "não aderentes" ao tratamento medicamentoso. A versão traduzida da SEAMS apresentou evidências de equivalências semântico-idiomática, conceitual e cultural, com elevada aceitabilidade e praticabilidade. Foi evidenciado efeito chão para o escore total e domínios da SEAMS. Os achados evidenciaram confiabilidade da medida - coeficiente de correlação intraclasse (0,99) e coeficiente alfa de Cronbach (entre 0,85-0,90). Foram constatadas correlações significativas negativas de moderada a forte magnitude com os escores da MMAS-4, porém não foram encontradas correlações com os ecores da medida geral de autoeficácia. A validade de grupos conhecidos foi apoiada, uma vez que a escala discriminou entre aderentes e não aderentes ao tratamento medicamentoso. A análise fatorial confirmatória confirmou a estrutura de fatores do instrumento original. Os resultados evidenciaram cargas fatoriais cruzadas ? 0,50 para todos os itens da escala nos domínios em que foram alocados no instrumento original, AVE=0,52 para o fator 1 e 0,69 para o fator 2 e confiabilidade composta de 088 e 0,99 para os fatores 1 e 2, respectivamente, apontando para a validade convergente do modelo. Foram constatadas valores superiores de cargas fatoriais cruzadas para todos os itens da escala nos domínios em que foram previamente designados no instrumento original, raízes quadradas de AVEs superiores às correlações entre os construtos e correlação desatenuada (r=0,83), sugerindo validade discriminante do modelo. A confiabilidade de ambos os fatores, estimada de acordo com a homogeneidade dos itens, apontou para confiabilidade e validade de construto convergente da versão brasileira da SEAMS. Os achados apontam para confiabilidade e validade de construto da versão brasileira da SEAMS entre coronariopatas em seguimento ambulatorial / Abstract: This study aims to provide a version of the Self-efficacy for Appropriate Medication Adherence Scale - SEAMS for Brazilian culture and evaluate its measurement properties when applied to patients with coronary artery disease (CAD). The process of cultural adaptation was performed according to the steps proposed in the literature - translation, synthesis, back translation, expert committee review and pretesting, followed by evaluation of the feasibility, acceptability, reliability and validity. This study included 147 patients with CAD in the use of cardioprotective medications and relief of symptoms in outpatients at a university hospital in the state of São Paulo. Data were obtained by interview and instrument sociodemographic / clinical characterization and Brazilian versions of Morisky Self-Reported Measure of Medication Adherence Scale (MMAS-4), the General Perceived Self-Efficacy Scale (GSE) and SEAMS. Practicality was assessed by time spent in the interview and the acceptability by the proportion of patients who responded to all items of the instrument. Reliability with respect to the internal consistency and stability of the measurement was estimated. Construct validity was estimated by correlational evidence between the scores of the Brazilian version of SEAMS, the MMAS-4 and GSE. Known groups validity was tested between those classified as "sufficient dose" and "insufficient dose" (measure of the proportion of membership) and among those "adherent" and "nonadherent" (measure of overall assessment of compliance). Was used confirmatory factor analysis through structural equation models Convergent validity of the factorial model was evaluated by measurements of Average Variance Extracted (AVE), magnitude of loads fatorias, Cronbach's alpha and composite reliability. The discriminant validity of the model was evaluated by factorial analysis of cross-factor loadings, comparing the square roots of AVEs, the correlation coefficients between the constructs and the correlation desatenuada. Data were subjected to descriptive analyzes, assessing the feasibility, acceptability and ceiling and floor effects; reliability through Cronbach alpha (internal consistency) and the intraclass correlation coefficient (measurement stability). The Spearman correlation coefficient was used to test the correlation between the scores of the Brazilian versions of SEAMS, MMAS-4e GSE. The Mann-Whitney test was used to verify the ability of the Brazilian version of the SEAMS in discriminating between coronary classified as "adequate dose" or "insufficient" and among those "adherent" and "nonadherent" to drug treatment. The translated version of SEAMS presented evidence of idiomatic semantic-conceptual and cultural equivalence, with high acceptability and feasibility. Floor effect was evidenced for the total score and domains of SEAMS. The findings indicate reliability of the measure - the intraclass correlation coefficient (0.99) and Cronbach's alpha coefficient (between 0.85-0.90). Significant negative correlations of moderate to strong magnitude with the scores of MMAS-4 were observed, but no correlations with ecores general measure of self-efficacy were found. Known groups validity was supported, since the scale discriminated between adherent and non-adherent to medication treatment. Confirmatory factor analysis confirmed the factor structure of the original instrument. Results showed cross-factor loadings ? 0.50 for all items of the scale in areas that were allocated in the original instrument, AVE = 0.52 for factor 1 and 0.69 for factor 2 and composite reliability of 0.88 and 0.99 for factors 1 and 2, respectively, indicating the convergent validity of the model. Higher values of cross-factor loadings for all scale items in domains that were previously designated in the original instrument, the square roots of higher than the correlations between constructs and desatenuada correlation (r = 0.83) strokes were observed, suggesting discriminant validity of model. The reliability of both factors, estimated according to the homogeneity of the items pointed to reliability and convergent validity of the Brazilian version of the SEAMS. The findings point to reliability and construct validity of the Brazilian version of SEAMS between coronary outpatients / Mestrado / Enfermagem e Trabalho / Mestra em Ciências da Saúde

Orientador: Anselmo Eduardo Diniz / Dissertação (mestrado) - Universidade Estadual de Campinas, Faculdade de Engenharia Mecânica / Made available in DSpace on 2018-08-23T04:12:20Z (GMT). No. of bitstreams: 1 Carvalho_MartaReginaDelleDonne_M.pdf: 17580883 bytes, checksum: f1ff52988b201685207f750165cbc037 (MD5) Previous issue date: 2013 / Resumo: O resumo poderá ser visualizado no texto completo da tese digital / Abstract: The abstract is available with the full electronic document / Mestrado / Materiais e Processos de Fabricação / Mestra em Engenharia Mecânica

Orientadores: José Dirceu Ribeiro, Edson Antunes / Tese (doutorado) - Universidade Estadual de Campinas, Faculdade de Ciências Médicas / Made available in DSpace on 2018-08-19T08:13:24Z (GMT). No. of bitstreams: 1 Grotta_MilenaBaptistella_D.pdf: 2330139 bytes, checksum: 5a69a2a222d3f7028574efcf65a49676 (MD5) Previous issue date: 2011 / Resumo: Introdução: A prevalência da obesidade e da asma tem aumentado muito durante as últimas décadas. Investigações atuais sugerem que a obesidade está associada à asma em numerosos estudos. Os mecanismos pelos quais a obesidade interfere nos sintomas da asma ainda são controversos. Objetivo: avaliar o efeito da obesidade na atividade eosinofílica através da quimiotaxia e adesão em crianças e adolescentes asmáticos e não asmáticos em associação a dosagem das adipocinas séricas. Método: Incluídos 32 asmáticos obesos (AO) e não obesos (ANO), 5 não asmáticos obesos (NAO) e 5 não asmáticos não obesos (NANO). Colhido sangue periférico para isolamento de eosinófilos através do gradiente de Percolll seguido de separação imunomagnética. Para quimiotaxia utilizada câmara de microquimiotaxia com 48 poços em triplicata com MEM (espontânea), eotaxina, PAF (fator de ativação plaquetária) e RANTES (regulated on activation, normal T cell expressed and secreted). Leitura através de filtro com contagem em microscópio óptico. A adesão foi realizada com placas de fibronectina em triplicata com MEM e eotaxina. Leitura através da absorbância das amostras desconhecidas com as da curva padrão de células. Feito dosagem de leptina e adiponectina por ELISA. Resultado: A quimiotaxia espontânea foi maior entre os AO e ANO (p=0,02) e entre os AO e NANO (p=0,03). Com eotaxina houve aumento para o grupo AO em relação aos ANO e aos NANO, e do grupo dos NAO em relação aos ANO e NANO (p<0,0001). Para o PAF, o grupo AO mostrou-se maior do que NANO (p=0,02). O RANTES apresentou significância entre os NAO em relação aos ANO e NANO (p=0,01). Na adesão espontânea dos eosinófilos a fibronectina, não foi encontrado relevância entre os grupos. Com eotaxina, houve maior adesão para os AO em relação aos NANO (p=0,04). Maior concentração de leptina no grupo dos AO e NAO (p=0,0001). Não foi encontrado diferença entre os grupos para adiponectina total. Conclusão: Este é o primeiro estudo a demonstrar uma maior atividade eosinofílica (quimiotaxia e adesão) em crianças e adolescentes obesos asmáticos atópicos em relação aos não obesos e aos voluntários saudáveis com associação ao aumento de leptina sérica / Abstract: Background: The prevalence of obesity and asthma has increased over the past several decades. Recent investigations suggest relationship between asthma and obesity in many studies, but the mechanisms are unclear. The aim of this study was evaluate the obesity effect in eosinophil activity by chemotaxis and adhesion in asthmatic and non-asthmatic children and adolescents in association with serum adipokines measurement Method: 32 asthmatic obese (AO) and asthmatic non obese (ANO), 5 non asthmatic obese (NAO) and 5 non asthmatic non obese (NANO) were included. Peripheral blood was collected and eosinophils were purified using a Percoll gradient followed by immunomagnetic cell separator. Chemotaxis was performed with microchemotaxis chamber in triplicate with MEM (spontaneous), eotaxin, PAF (platelet-activating factor) and RANTES (regulated on activation, normal T cell expressed and secreted). The measurement was done by optical microscope count. The adhesion was performed by fibronectin plates in triplicate with MEM and eotaxin. Eosinophilic adhesion was calculated by comparison between absorbance of unknown samples with the standard curve. Leptin and adiponectin were quantified by ELISA. Results: spontaneous chemotaxis was higher between AO and ANO (p=0.02) and between AO and NANO (p=0.03).With eotaxin, the increased was between AO and ANO and between AO and NANO, and between ANO and NANO (p<0.0001).With PAF, AO was higher than NANO (p=0.02). RANTES was increased among NAO and ANO and NANO (p=0.01). In spontaneous adhesion, there was no difference between groups. With eotaxin, the adhesion was higher between AO and NANO (p=0.04). Leptin was higher in AO and NAO than the others (p=0.0001). There was no difference among groups for total adiponectin. Conclusion: This is the first study that showed higher eosinophilic activity (chemotaxis and adhesion) in atopic obese asthmatic children and adolescents in relationship to asthmatic non obese and healthy volunteers / Doutorado / Saude da Criança e do Adolescente / Doutor em Saude da Criança e do Adolescente

Orientador: Nicola Amanda Conran Zorzetto / Dissertação (mestrado) - Universidade Estadual de Campinas, Faculdade de Ciências Médicas / Made available in DSpace on 2018-08-21T11:46:04Z (GMT). No. of bitstreams: 1 DiasJunior_PedroPaulo_M.pdf: 932681 bytes, checksum: a8ceae0940e26759a4abe344de43b8f4 (MD5) Previous issue date: 2012 / Resumo: A resposta vascular inflamatória envolve a interação complexa entre células. A adesão dos neutrófilos aos sítios inflamatórios é constituído de várias etapas que envolvem a interação das moléculas de adesão com os neutrófilos, intermediado pela L-selectina (CD62L) e pelas integrinas ?2, LFA-1 e Mac-1 (CD11a/CD18 e CD11b/CD18) com ligantes sobre o endotélio. Os eritrócitos podem aderir ao endotélio vascular usando as moléculas de adesão CD 36 e integrina VLA-4 entre outras moléculas de adesão. O mecanismo de adesão das plaquetas envolve o sequestro celular no local da lesão tecidual através da interação de quatro receptores sinérgicos: a glicoproteína GPIb/IX (CD42b/CD42a), a integrina ?2?1 (GPIa/IIa; CD49b/CD41a), a integrina ?IIb?3 (GPIIb/IIIa; CD41a/CD61), e a integrina ?5?1 (GPIc/IIIa; CD51/CD61). Em doenças associadas com a inflamação vascular, tais como a doença falciforme e aterosclerose, alterações na adesão de leucócitos à parede vascular desempenham um papel central na fisiopatologia da doença. O CD40L e o LIGHT são proteínas citocinas pertencente ao fator de necrose tumoral (TNF), tendo como receptores o CD40L, LTBR e o HVEM, respectivamente. Diante disso, este estudo objetivou avaliar os efeitos das proteínas inflamatórias CD40L e LIGHT nas propriedades adesivas dos neutrófilos, hemácias e plaquetas. Os neutrófilos, hemácias e plaquetas foram separados do sangue periférico e foram realizados ensaios de adesão estática e citometria de fluxo após estimulo destas células com as proteínas recombinantes, CD40L e LIGHT. Após incubação com CD40L ou LIGHT, os neutrófilos e hemácias da circulação periférica apresentaram alterações quanto às propriedades adesivas em relação aos neutrófilos e hemácias não estimulados. As plaquetas estimuladas com as citocinas não demonstraram alteração nas propriedades adesivas. Neutrófilos incubados com anticorpos bloqueadores das integrinas Mac-1 e LFA-1 apresentaram uma reversão no aumento das propriedades adesivas após estimulo com CD40L ou LIGHT. Os neutrófilos estimulados com as citocinas apresentaram uma diminuição na expressão proteíca de CD62L, característica de ativação celular. Nao foi observado nenhuma diferença quanto a expressão das integrinas Mac-1 e LFA-1 nos neutrófilos após estímulo com as citocinas. Esses resultados sugerem que essas proteínas inflamatórias podem aumentar as propriedades adesivas de neutrofilos (intermediado por um aumento na afinidade das integrinas) e hemácias. A presença de altas concentrações destas citocinas na circulação, como encontrados em algumas patologias caracterizadas por inflamação vascular, pode resultar em conseqüências importantes, como a indução da adesão dos leucócitos e hemácias à parede vascular / Abstract: The vascular inflammatory response involves a complex interaction between cells. The adhesion of neutrophils to inflammatory sites is composed of several stages involving the interaction of adhesion molecules on neutrophils and on the endothelium. These interactions are mediated by Lselectin (CD62L) and the ?2 integrins, LFA-1 and Mac-1 (CD11a/CD18 and CD11b / CD18, respectively) with ligands on the endothelium. The red cells may adhere to vascular endothelial adhesion molecules using CD 36 and the VLA-4 integrin and other adhesion molecules. The mechanism of adhesion of platelets involves the adhesion of these cells at the site of tissue injury through the interaction of four synergistic receptors: glycoprotein GPIb/IX (CD42b/CD42a), integrin ?2?1 (GPIa/IIa; CD49b/CD41a), integrin ?IIb?3 (GPIIb / IIIa, CD41a/CD61), and integrin ?5?1 (GPIC/ IIIa; CD51/CD61). In diseases associated with vascular inflammation, such as sickle cell disease and atherosclerosis, changes in leukocyte adhesion to the vascular wall plays a central role in the pathophysiology of the disease. The CD40L and LIGHT cytokines are proteins belonging to the tumor necrosis factor (TNF) family, and interact with the receptors, CD40L, LTBR and HVEM, respectively. Thus, this study aimed to evaluate the effects of the inflammatory proteins, CD40L and LIGHT, on the adhesive properties of neutrophils, erythrocytes and platelets. Neutrophils, erythrocytes and platelets were separated from peripheral blood and static adhesion assays and flow cytometry were performed after stimulation of these cells with the recombinant proteins, CD40L and LIGHT. After incubation with CD40L or LIGHT, neutrophils and red blood cells from the peripheral circulation showed alterations in adhesive properties compared to unstimulated neutrophils and erythrocytes. Platelets stimulated with cytokines showed no changes in adhesive properties. Neutrophils incubated with antibodies that block the functions of integrins Mac-1 and LFA-1 reversed the increase in adhesive properties after stimulation with CD40L or LIGHT. Neutrophils stimulated with cytokines showed a decrease in the protein expression of CD62L, a characteristic of cellular activation. No difference was observed in the expression of the integrins Mac-1 and LFA-1 on neutrophils after stimulation with cytokines. These results suggest that these inflammatory proteins can increase the adhesive properties of neutrophils (mediated by an increase in the affinity of the integrin) and erythrocytes. The presence of high concentrations of these cytokines in the circulation, as found in certain vascular diseases characterized by inflammation, can result in important consequences, such as the induction of the adhesion of leukocytes and red blood cells to the vascular wall / Mestrado / Ciencias Biomedicas / Mestre em Ciências Médicas

Orientador: Mônica Barbosa de Melo / Dissertação (mestrado) - Universidade Estadual de Campinas, Instituto de Biologia / Made available in DSpace on 2018-08-20T09:58:06Z (GMT). No. of bitstreams: 1 Cruz_PedroRodriguesSousada_M.pdf: 4934964 bytes, checksum: 906273ac9e66e4d8efa634ae942458bf (MD5) Previous issue date: 2012 / Resumo: As doenças falciformes são...Observação: O resumo, na íntegra, poderá ser visualizado no texto completo da tese digital / Abstract: Sickle cell diseases are...Note: The complete abstract is available with the full electronic document / Mestrado / Genetica Animal e Evolução / Mestre em Genética e Biologia Molecular

A nefropatia diabética é uma doença crônica caracterizada por falência renal, que torna necessária a hemodiálise. A diálise peritoneal é uma alternativa para a hemodiálise, porém causa peritonite e morte, principalmente devido à infecção com Staphylococcus aureus, especialmente em pacientes imunodeprimidos, como pacientes diabéticos. Nossa hipótese é que a insulina possa modular a peritonite causada por S. aureus. Para tanto, investigamos sua intervenção, após a indução de diabetes mellitus, na infecção peritoneal por cepas diferentes de S. aureus, analisando os mecanismos moleculares (produção/liberação de citocinas, expressão de moléculas de adesão) e a atividade microbicida dos macrófagos peritoneais envolvidos. Ratos Wistar, machos, diabéticos (aloxana, 42 mg/kg, i.v., 10 dias) e respectivos controles (salina, i.v.) foram submetidos à injeção intraperitoneal de uma suspensão de S. aureus (5x109 CFU/mL) ou volume equivalente de PBS estéril. Os animais foram submetidos a dois tratamentos com insulina NPH: 1) dose única (1UI e 4UI respectivamente, controle e diabético), administrada por via subcutânea; ou, 2) com 4 doses sendo a primeira administrada 2 horas antes da infecção, seguida de metade desta dose às 17 horas e no mesmo horário pelos próximos 2 dias (dose inicial 4UI e 1UI, grupo diabético e grupo controle, respectivamente), passadas 16 horas da última dose de insulina, a glicemia foi determinada e, em seguida, foi realizada eutanásia e coleta de amostras. Avaliamos: a) número de células no lavado peritoneal (LPe), leucograma e glicemia (monitor de glicose); b) níveis séricos de corticosterona e insulina (ELISA); c) concentrações de citocinas (IL-1&#946;, TNF-&#945;, IL-6, IFN-&#947;, IL-4, IL-10, IL-12) e quimiocinas (CINC-1, CINC-2, CINC-3) no sobrenadante do LPe (ELISA); d) expressão de moléculas de adesão (P-selectina, PECAM-1, ICAM-1) no endotélio vascular (imunoistoquímica); e) atividade microbicida. Após a infecção com a cepa ATCC 25923, comparados aos não infectados, ratos diabéticos apresentaram aumento no número de leucócitos (350%) e nas concentrações de CINC-1 (1900%), IL-1&#946; (1300%), IFN-&#947; (280%), IL-4 (800%). O tratamento destes animais com dose única de insulina diminuiu as concentrações de CINC-1 (17%) e IFN-&#947; (30%) e o leucócitos (55%); e aumentou a concentração de IL-4 (260%); enquanto o tratamento com 4 doses diminuiu o número de leucócitos (82%) e as concentrações de CINC-1 (96%) e CINC-2 (45%); e, aumentou as concentrações de TNF-&#945; (270%), IFN-&#947; (220%), IL-1&#946; (42%), IL-6 (760%) e a expressão de ICAM-1 (1360%); enquanto as concentrações de CINC-3, IL-10 e IL-12 não foram alteradas pelos tratamentos com insulina. Após a infecção com a cepa N315 HLA+, comparados aos não infectados, ratos diabéticos apresentaram aumento do número de leucócitos (200%), nas concentrações de CINC-1 (1000%), IL-4 (860%), IFN-&#947; (200%) e na expressão de PECAM-1 (800%) e diminuição de CINC-2 (92%). O tratamento destes animais com dose única de insulina diminuiu a concentração de CINC-1 (85%); e aumentou a concentração de CINC-2 (2030%), IL-1&#946; (370%) e IL-4 (250%); enquanto o tratamento com 4 doses diminuiu a concentração de CINC-1 (92%); e, aumentou número de leucócitos (66%), as concentrações de CINC-2 (100%), IL-1&#946; (490%), IL-6 (1870%) e IFN-&#947; (330%), e os outros parâmetros não foram modificados pelos diferentes tratamentos com insulina. Estes dados sugerem que a insulina possa modular a peritonite induzida por cepas diferentes de S. aureus, controlando pelo menos em parte, o infiltrado inflamatório, a produção das citocinas CINC-1, CINC-2, IL-4, IL-6, IFN-&#947;, TNF-&#945; e IL-1&#946;; e, consequentemente a expressão P-selectina e PECAM-1 no endotélio vascular do mesentério. / Diabetic nephropathy is a chronic disease characterized by kidney failure, so hemodialysis is necessary. Peritoneal dialysis is an alternative to hemodialysis, but causes peritonitis and death primarily due to infection by Staphylococcus aureus, especially in immunocompromised patients, such as diabetics. Our hypothesis is that insulin can modulate peritonitis caused by S. aureus, therefore, we investigated its action, after diabetes induction, in peritoneal infection with different S. aureus strains, analyzing the molecular mechanisms (cytokines production/release, adhesion molecules expression) and the microbicidal activity of peritoneal macrophages involved. Wistar male diabetic (alloxan, 42 mg/kg, iv, 10 days) and their respective controls (saline,iv) were subjected to intraperitoneal injection of S. aureus suspension (5x109CFU/mL) or an equivalent volume of PBS sterile. Animals were submitted to two treatments with NPH insulin administered subcutaneously : single dose (1IU and 4IU respectively , control and diabetic) 8 hours prior to euthanasia ; or 4 doses : first dose 2 hours before infection (4IU and 1IU , diabetic and control group, respectively), then half this dose of 17 pm and in the same time for the next 2 days, after 16 hours of the last dose, blood glucose was determined, and then it was carried out euthanasia and sampling. We evaluated: a) number of cells in peritoneal wash (PW), white blood cell count and blood sugar (glucose monitor) ; b) serum insulin and corticosterone (ELISA); c) concentrations of cytokines (IL-1&#946;, TNF-&#945;, IL-6, IFN-&#947;, IL-4, IL-10, IL-12) and chemokines (CINC -1, CINC-2, CINC-3 ) in supernatant of the SBA assay (ELISA); d) expression of adhesion molecules (P- selectin, ICAM-1, PECAM-1) in vascular endothelium ( immunohistochemistry); e) microbicidal activity. After infection with ATCC 25923 strain, compared to uninfected, diabetic rats showed an increase in leukocytes number (350%) and in concentrations of CINC-1 (1900%), IL-1&#946; (1300%), IFN-&#947; (280%), IL-4 (800%). Treatment of these animals with a single dose of insulin decreased concentrations of CINC-1 (17%) and IFN-&#947; (30%) and leukocytes number (55%); and increased IL-4 concentrations (260%); while treatment with 4 doses decreased leukocytes number (82%) and concentrations of CINC-1 (96%) and CINC-2 (45%); and increased concentrations of TNF-&#945; (270%), IFN-&#947; (220%), IL-1&#946; (42%), IL-6 (760%) and expression of ICAM-1 (1360%); while the concentrations of CINC-3, IL-10 and IL-12 were not affected by treatments with insulin. After infection with N315 HLA+ strain, compared to uninfected, diabetic rats showed an increase in leukocytes (200%), concentrations of CINC-1 (1000%), IL-4 (860%), IFN-&#947; (200%) and in the expression of PECAM-1 (800%); and CINC-2 decrease (92%). Treatment of these animals with a single dose of insulin decreased the concentration of CINC-1 (85%); and increased concentrations of CINC-2 (2030%), IL-1&#946; (370%) and IL-4 (250%); while treatment with 4 doses decreased the concentration of CINC-1 (92%); and increased leukocytes number (66%), concentrations of CINC-2 (100%), IL-1&#946; (490%), IL-6 (1870%) and IFN-&#947; (330%), and other parameters were not modified by treatments with insulin. These results suggest that both S. aureus strains activate differently the innate response during peritonitis, and insulin was not always able to modulate this response.

Orientador : Mario Fernando de Goes / Tese (doutorado) - Universidade Estadual de Campinas, Faculdade de Odontologia de Piracicaba / Made available in DSpace on 2018-08-02T02:39:27Z (GMT). No. of bitstreams: 1 Montes_MarcosAntonioJapiassuResende_D.pdf: 4527824 bytes, checksum: c03f81bab153f2ba9658374caf302faa (MD5) Previous issue date: 2002 / Resumo: A união ao esmalte é tida como um procedimento estabelecido, já a união à dentina permanece um desafio. Os maiores obstáculos para uma união à dentina são, além da contração de polimerização rígida dos compósitos restauradores, que desafia a interface, a própria dentina como substrato, devido ao seu alto conteúdo orgânico e umidade. Este estudo, buscou avaliar e discutir o conceito de "parede cavitária resiliente" bem como a morfologia das interfaces de união à dentina. Avaliar morfologicamente os efeitos de prétratamentos de superficie para união à dentina, relacionando-os a implicações clínicas. Avaliar a qualidade marginal de cavidades com alto fator-C, com uso de resinas de baixa viscosidade e remoção do colágeno. Avaliar a adaptação interna de cavidades com alto fator-C e margens em dentina, e avaliar e propor um novo método para observação da região desmineralizada na base da camada híbrida. Com base nos resultados, pôde-se concluir que o uso de uma camada intermediária de baixo módulo de elasticidade entre o adesivo e o compósito restaurador pode absorver tensões, melhorando o selamento marginal e preservando a união. Os pré-tratamentos de superficie promovem alterações diferenciadas na dentina, e devem influir nos procedimentos de união. A qualidade marginal foi melhorada com a remoção do colágeno, para o sistema adesivo com acetona, e o uso de uma camada intermediária de baixo módulo de elasticidade para o sistema autocondicionante. Os sistemas adesivos testados não foram capazes de prevenir a nanoinfiltração quando usados de acordo com as recomendações dos fabricantes. A remoção do colágeno melhorou a adaptação interna com o sistema adesivo com acetona, e preveniu a ocorrência da nanoinfiltração. A metenamma de prata mostrou-se um método apropriado para detecção e estudo da nanoinfiltração / Abstract: While bonding to enamel has been considered a reliable procedure, bonding to dentin remains a challenge. There are two major problems related to dentin bonding: the rigid polymerization shrinkage of the restorative composites that challenges the bonded interface; and dentin itself as a bonding substrate, due to its high organic content and its intrinsic wetness. This study, composed by four independent and sequenced articles, had the following objectives. To evaluate and to discuss the "elastic cavity wall" concept and the morphological aspects of the bonded interfaces. To evaluate the morphological effects of surface pre-treatments recommended to dentin bonding, and relate them to clinical implications; To evaluate the marginal quality of restorations in cavities with high C-factor by using low-viscosity resins and afier collagen depletion. To evaluate the internal adaptation in cavities with high C-factor and margins in dentin, and to evaluate and to propose a new method for observations of the demineralized zone at the base of the hybrid layer. The results demonstrated that the use of a low elastic modulus intermediate layer between the adhesive and the composite resin may absorb stress, thereby may enhance the marginal seal and preserve the bond. The surface pre-treatments promoted distinct alterations on dentin, and must influence considerably the bonding procedures. The marginal quality was improved with collagen depletion, afier acid-etching, for the acetonebased adhesive system, and the use of a low elastic modulus intermediate layer for the selfetching primer. The bonding systems tested were unable to prevent nanoleakage when used according to manufacturer's instructions. Collagen depletion enhanced internal adaptation of restorations for the acetone-based system and prevented nanoleakage occurrence. Silver methenamine staining is a useful method to detect nanoleakage / Doutorado / Doutor em Materiais Dentários