A deficiência de guanidino acetato metiltransferase (GAMT) é um erro inato do metabolismo da creatina caracterizado por hipotonia muscular, movimentos extrapiramidais involuntários e epilepsia. A doença é, bioquimicamente, evidenciada pelo acúmulo de guanidino acetato (GAA) e deficiência de creatina e fosfocreatina nos tecidos dos pacientes afetados. Os mecanismos da disfunção neurológica que ocorrem nessa doença ainda são desconhecidos. A Na+,K+-ATPase, a creatina quinase (CK) e a acetilcolinesterase (AChE) têm um papel fundamental no sistema nervoso central (SNC), e a alteração dessas enzimas, juntamente com a diminuição do metabolimo energético e a indução do estresse oxidativo têm sido associados com algumas doenças que afetam o SNC, como as doenças de Alzheimer, Parkinson e Huntington e isquemia cerebral. Propriedades neurotóxicas do GAA têm sido atribuídas, principalmente, à excitotoxicidade e ao estresse oxidativo. Dessa forma, esse trabalho tem como propósito ampliar o conhecimento sobre os mecanismos fisiopatológicos da deficiência de GAMT, investigando o efeito in vitro e in vivo (administração intra-estriatal de GAA), sobre as atividades da Na+,K+-ATPase, CK, AChE, metabolismo energético, bem como a recaptação de glutamato e a produção de espécies reativas de oxigênio (EROS) em estriado de ratos. Finalmente, investigamos o efeito da administração intra-estriatal de GAA sobre a memória/aprendizagem em estriado de ratos. Nossos resultados mostraram que a administração intraestriatal de GAA diminui as atividades da Na+,K+-ATPase, CK e complexo II e aumenta o TBARS e a atividade da AChE. Além destes, mostramos que o GAA inibe a recaptação de glutamato e induz estresse oxidativo em estriado de ratos. A administração de GAA, também é capaz de prejudicar a memória de ratos adultos. A inibição das atividades da Na+,K+-ATPase, da CK e do complexo II e o aumento do TBA e da atividade da AChE, causados pela administração intraestriatal de GAA, foram prevenidos pelo pré-tratamento (uma semana) com as vitaminas E e C ou taurina. Considerando os resultados apresentados, propõe-se que a inibição da atividade da Na+,K+-ATPase, da CK, do complexo II, bem como da inibição na recaptação de glutamato e de indução de estresse oxidativo causados pelo GAA possam estar envolvidos na disfunção neuronal observada em pacientes com deficiência de GAMT. / Guanidinoacetate methyltransferase deficiency (GAMT-deficiency) is an inborn error of creatine metabolism characterized by muscular hypotonia, involuntary extrapiramidal movements and epilepsy. The disease is biochemically characterized by accumulation of guanidinoacetate and deficiency of creatine and phosphocreatine in tissues of affected patients. However, the mechanisms underlying the neurological dysfunction of GAMTdeficiency patients are not well understood. Na+,K+-ATPase, creatine kinase (CK) and acetylcholinesterase (AChE) play a fundamental role in central nervous system (CNS). Alterations in these enzymes with reduction of energy metabolism and induction of oxidative stress have been associated to neurological diseases such as Alzheimer’s, Parkinson’s, Huntington’s disease and brain ischemia. Neurotoxic properties of GAA have been mainly related to excitotoxicity and oxidative stress. In this study we investigated possible pathophysiologic mechanisms of GAMT-deficiency. We studied the in vitro effect of GAA and the effect of GAA intrastriatal administration on Na+,K+- ATPase, CK and AChE activities, on brain metabolism, on glutamate uptake and on reactive oxidative species (ROS) production in striatum of adult rats. Finally, we investigated the effect of intraestriatal administration of GAA on inhibitory avoidance in adult rats. Our results showed that the intrastriatal administration inhibits Na+,K+-ATPase, CK and complex II activities and increases TBARS and AChE activity. We also showed that GAA in vitro inhibits glutamate uptake and induces oxidative stress. GAA administration also impairs memory in adult rats. The inhibition of Na+,K+-ATPase, CK and complex II activities and increase of TBARS production caused by intrastriatal administration of GAA was prevented by vitamins E and C or taurine pretreatment (for one week). Our findings indicate that inhibition of Na+,K+- ATPase, CK and complex II activities and alterations in glutamate uptake and oxidative stress caused by GAA may contribute to the neurological dysfunction characteristic of GAMT-deficiency patients.

Orientador: Orival Andries Junior / Dissertação (mestrado) - Universidade Estadual de Campinas, Faculdade de Educação Fisica / Made available in DSpace on 2018-08-06T19:11:01Z (GMT). No. of bitstreams: 1 Barbosa_AugustoCarvalho_M.pdf: 3471127 bytes, checksum: 926adc0a0aba1c9acdd1491ea87d9ae5 (MD5) Previous issue date: 2006 / Resumo: O objetivo deste trabalho foi verificar o efeito do treinamento de força específica no desempenho na natação. Para isso 14 nadadores competitivos em nível estadual foram divididos em dois grupos: controle (GC / n=6) e experimental (GE / n = 8). Ambos os grupos realizaram o mesmo treinamento durante seis semanas, cinco dias por semana. Adicionalmente o GE realizou um treinamento de força específica denominado treinamento complexo (MC) três vezes por semana em sessões extras durante o mesmo período. Todos os atletas foram avaliados em pré e pós-treinamento por testes específicos, a saber: nado amarrado (força), 3 x 25m (velocidade) e teste de desempenho da distância e estilo de competição. Este último foi avaliado também com os resultados da principal competição (Final). Durante todo o treinamento experimental foram coletadas amostras de sangue nas segundas e sextas-feiras para avaliar respostas da creatina quinase e uréia. De Pré para Pós foram encontradas alterações significantes apenas para a força (p<0,05). O GE também apresentou alteração significante de Pós para Final no desempenho. Os valores de CK e Uréia não apresentaram diferenças intergrupos. É possível concluir que a carga proposta para o MC é eficiente no implemento da força específica sem apresentar indícios preocupantes de lesão muscular e proteólise. Além disso, alterações no deserijpenho podem estar relacionadas com o efeito posterior duradouro do treinamento (EPDT), devido à melhora significante do desempenho do GE no momento Final / Abstract: The aim of this study was to verify the effect of Complex Training (CT) in swimming performance. Fourteen state competitive swimmers were assigned in two groups: control (CG I n=6) and experimental (EG I n=8). Both groups performed the same training in water during six weeks, five days I week. Additionally, EG performed a high specific strength training called CT three times I week in extra training sessions. The swimmer~ were evaluated in Pre and Post training with specific tests: tethered swimming (strength), 3 x 25m (velocity) and performance test with the same stroke and distance of competition. This last one was also evaluated in the main competition's results (Final). In ali the experimental training blood samples were collected on Mondays and Fridays to evaluated creatine quinase (CK) and urea training responses. Significant differences were found only for strength (p<0,05). EG also presented significant differences in performance from Post to Final. CK and urea did not presented intergroups differences. It can be concluded that the loads used in CT is efficient to strength improvement and it did not show serious differences in muscular soreness and proteolysis. Additionally, performance improvement may be relatéd to posterior effect of training (EPDT), because of the performance improvement in Final moment / Mestrado / Ciencia do Desporto / Mestre em Educação Física

Orientador: Antonio Herbert Lancha Jr / Dissertação (mestrado) - Universidade Estadual de Campinas, Instituto de Biologia / Made available in DSpace on 2018-08-07T02:13:46Z (GMT). No. of bitstreams: 1 Freire_ThiagoOnofre_M.pdf: 908913 bytes, checksum: fdee965a41f30e1b9f21e372ed367238 (MD5) Previous issue date: 2006 / Resumo: A creatina é um dos produtos mais consumidos entre os praticantes de atividade física. Seus benefícios se associam ao aumento de massa muscular, força e desempenho principalmente em atividades esportivas que têm como característica principal a alta intensidade e a curta duração. Recentemente alguns estudos têm demonstrado a capacidade da creatina em alterar a homeostasia da glicose, promovendo uma maior captação nos tecidos periféricos. O objetivo desse estudo foi investigar o efeito da suplementação de creatina na tolerância à glicose e estoques de glicogênio muscular e hepático, em ratos submetidos ou não à atividade física por 4 e 8 semanas. Oitenta ratos Wistar foram divididos em 2 grupos, que variavam de acordo com o tempo do experimento, 4 e 8 semanas. Cada grupo foi subdividido em 4 subgrupos: controle sedentário (CS); controle treinado (CT); suplementado sedentário (SS); e suplementado treinado (ST). Os animais tiveram livre acesso à água e a ração, sendo que o grupo suplementado recebeu a ração contendo 2% de creatina monohidratada. O treinamento foi realizado 4 vezes por semana durante 40 minutos de atividade aeróbia (Natação). Para controle da intensidade do exercício, os animais tiveram pesos (2 a 5% do peso corporal) ataxados ao tórax. Após 4 e 8 semanas foram feitos testes de tolerância oral à glicose (OGTT) e análise do conteúdo de glicogênio muscular (gastrocnêmio) e hepático. Não foram observadas diferenças significativas entre os grupos nos estoques de glicogênio (muscular e hepático), na glicemia e área sob a curva analisados após o OGTT. A suplementação de creatina não foi capaz de alterar a homeostasia da glicose em ratos submetidos ou não a atividade aeróbia por 4 e 8 semanas / Abstract: Creatine is one of the most used dietary supplement among athletes and physical active people. The benefits of creatine intake are related to increase muscle mass, power and performance, especially in high intensity, short term exercises. Recently studies have suggested that creatine supplementation can modulate glucose homeostasis by increasing glucose uptake in peripheral tissues. The aim of this study was to investigate the effects of creatine supplementation on muscle and hepatic glycogen and glucose tolerance in rats submitted or not to physical activity for 4 and 8 weeks. Eighty male, Wistar, rats were divided in two groups: 4 and 8 weeks. Then each group was subdivided in 4 subgroups, according to supplement intake and submission to exercise: Sedentary Control (CS); Trained Control (CT); Supplemented Sedentary (SS); and Supplemented Trained (ST). The animals had free access to water and chow, supplemented groups had 2% of their diet as creatine monohydrated. The exercise groups swam for 40 min / day for 4 days / week with 2 to 5% of their body weight attached to the chest. After 4 and 8 weeks, oral glucose tolerance tests were performed. On the subsequent day rats were killed and muscle and liver were collected and stored in liquid nitrogen for subsequent analysis. No changes in either glycogen content (muscle and hepatic tissue) or glucose tolerance were observed. This study shows that creatine supplementation do not alter glucose homeostasis in rats submitted or not to physical activity for 4 and 8 weeks / Mestrado / Bioquimica / Mestre em Biologia Funcional e Molecular

Orientador: Denise Vaz de Macedo / Dissertação (mestrado) - Universidade Estadual de Campinas, Instituto de Biologia / Made available in DSpace on 2018-08-12T14:27:15Z (GMT). No. of bitstreams: 1 Pimentel_CarlosAlberto_M.pdf: 2804322 bytes, checksum: f3240e0a8b8d538f11e513dc9dc2a3ad (MD5) Previous issue date: 2004 / Resumo: A prática do futebol requer que os atletas profissionais apresentem níveis ótimos de aptidão física. Para isso são aplicados, durante os treinamentos, estímulos específicos de esforço físico com diferenças na carga, intensidade e volume, garantindo assim, a obtenção das adaptações orgânicas necessárias. No entanto, para que ocorram as adaptações positivas, o treinamento não pode ultrapassar o limite individual de estresse que os atletas conseguem suportar. A técnica Limiar de Estresse propõe o monitoramento da intensidade do treino em atletas, através da análise de biomarcadores sanguíneos de estresse oxidativo e alteração muscular, com o objetivo de exercer uma função profilática, através da modulação da carga de treinamento quando necessário, otimizando, com isso a performance. Nosso objetivo nesse estudo foi aplicar e avaliar a Técnica de Limiar de Estresse em dois períodos preparatórios distintos de equipes de futebol. As sessões de treinos da competição-modelo Dallas Cup foram planejadas de acordo com os princípios metodológicos da concepção clássica, enquanto na competição Taça São Paulo utilizou-se a concepção contemporânea. Os biomarcadores sanguíneos analisados foram as concentrações plasmáticas de ácido úrico, grupamento sulfidrila e proteínas carboniladas e a atividade da enzima creatina quinase; as atividades no hemolisado das enzimas catalase e glutationa redutase, além da determinação do limiar do lactato sanguíneo como parâmetro de performance. Os resultados obtidos apontam aumento nas atividades das enzimas catalase e glutationa redutase em decorrência do treinamento baseado na concepção clássica. Os resultados dos mesmos biomarcadores em decorrência da concepção contemporânea de treinos mostraram aumento na atividade da enzima catalase e queda na atividade da enzima glutationa redutase. A atividade da enzima creatina quinase permitiu, independentemente da concepção adotada, seu uso como um índice de individualização dos treinamentos. O limiar do lactato apresentou valores mais elevados para o treinamento sob a concepção contemporânea. Os demais parâmetros não apresentaram alterações. Concluindo, a técnica Limiar de Estresse mostrou-se sensível e eficaz na modulação dos treinamentos. / Abstract: In order to perform professional football (Soccer), the athlete requires high levels of physical aptitude. To achieve this, it is necessary the application, at training time, of specific stimulus like strength with different degrees of intensity and volumes, to assure the organism reach the adaptations needed. To avoid harm for the athlete during the training process, the Stress Threshold technique proposes the use of biological markers to monitor the blood oxidation stress and anti-oxidation protection. The objective of this study is to monitor and regulate the levels of training, optimize the performance and develop a prophylactic foundation by utilising the Stress Threshold technique, during the teams (football, soccer) preparatory periods. The training sessions at the modelcompetition, Dallas Cup, were planed under the classic concepts, methodological principles, while in the Taça São Paulo were utilised the contemporary concepts. The blood stress markers analysed were: The activity levels of the enzymes creatine kinase; the activity levels of the enzymes catalase and glutathione reductase; the concentration levels of uric acid, sulfidrila groupings and carbolinads proteins; and the determination of the lactate threshold in the blood. The results obtained point towards the increase activity on the enzymes catalase and glutathione reductase as an occurrence of training, based on the classic concepts. The results on the analysis of the same blood markers while under the contemporary concepts training were showing an increase in the activity of the calatase enzyme and a decrease in the glutathione reductase's activity. The activity of the enzyme creatine kinase permitted, independently of known conceptions, to become an index of individualisation of the training disciplines. The threshold of the lactate in the blood was higher while training under the contemporary concepts. All the other parameters did not show any alterations. In conclusion, the Stress Threshold technique did show, itself, to be a sensible valid and accurate way of monitoring training in athletes. / Mestrado / Bioquimica / Mestre em Biologia Funcional e Molecular

Submitted by Cássia Santos (cassia.bcufg@gmail.com) on 2016-09-01T10:34:42Z No. of bitstreams: 2 license_rdf: 0 bytes, checksum: d41d8cd98f00b204e9800998ecf8427e (MD5) Dissertação - Karla Andrade Teixeira - 2016.pdf: 1020358 bytes, checksum: 6fcc37b871d6e8bb948ad3df803def3c (MD5) / Approved for entry into archive by Luciana Ferreira (lucgeral@gmail.com) on 2016-09-01T12:17:22Z (GMT) No. of bitstreams: 2 license_rdf: 0 bytes, checksum: d41d8cd98f00b204e9800998ecf8427e (MD5) Dissertação - Karla Andrade Teixeira - 2016.pdf: 1020358 bytes, checksum: 6fcc37b871d6e8bb948ad3df803def3c (MD5) / Made available in DSpace on 2016-09-01T12:17:22Z (GMT). No. of bitstreams: 2 license_rdf: 0 bytes, checksum: d41d8cd98f00b204e9800998ecf8427e (MD5) Dissertação - Karla Andrade Teixeira - 2016.pdf: 1020358 bytes, checksum: 6fcc37b871d6e8bb948ad3df803def3c (MD5) Previous issue date: 2016-03-15 / In the search for improved animal performance, has been testing new substances and new products to be used as additives in feed. Creatine and their precursors are examples of such compounds used for improvement of animal productivity. The guanidinoacetic acid is a natural precursor of creatine that has been studied in order to verify their effects on animal performance. With the objective of verify whether supplementation of guanidinoacetic acid in diets could help save the arginine used for the synthesis of creatine, which can be diverted to protein synthesis, growth and development of the animal. 90 piglets weaned at 21 days of age were used. The animals were distributed in a randomized block design based on the initial weight of the animals, with five treatments (0.00, 0.05, 0.10, 0.15 and 0.20% of inclusion of guanidinoacetic acid) six replicates and three animals per experimental unit. The experimental diets and water were fed ad libitum in the pre-initial I phase (21 -32 days old) and pre-initial II (33-42 days old), and the initial phase (43-63 days old). At 42 and 63 days old blood was collected from an animal for experimental unit to analyze creatinine and creatine kinase. They were analyzed daily weight gain, daily feed intake and feed conversion in phases pre-initial (21-42 days old), initial (43-63 days old) and the total duration of the experiment (21-63 days old). All variables were subjected to analysis of variance and regression analysis. It was adopted α = 0.05 and considered trend between α 0,05 and 0,10. In the pre-initial phase (21-42 days), there was a tendency to parameter gain weight daily (P= 0,069), however daily feed intake and feed conversion were not affected significantly by the addition of different levels of guanidinoacetic acid in the diet. As for the blood variables, creatinine levels both at 42 as at 63 days were not significantly affected. For creatine kinase levels at 42 days there was a tendency (P = 0.077), but after 63 days there were significant influences. In the initial phase (43-63 days) and total experimental period (21-63 days) were no significant effects of the inclusion of guanidinoacetic acid, both for performance variables as for creatinine and creatine kinase. / Na busca por um melhor desempenho dos animais, vem se testando novas substâncias e novos produtos a serem utilizados como aditivos nas rações. A creatina e seus precursores são exemplos destes compostos utilizados para melhora da produtividade dos animais. O ácido guanidinoacético é um precursor natural da creatina que tem sido estudado no intuito de verificar seus efeitos sobre o desempenho do animal. Foi realizado um experimento com o objetivo de verificar se a suplementação de ácido guanidinoacético nas rações pré-iniciais de leitões poderia ajudar a poupar a arginina utilizada para a síntese de creatina, podendo ser desviada para síntese proteica, crescimento e desenvolvimento do animal. Foram utilizados 90 leitões machos castrados, desmamados aos 21 dias de idade. Os animais foram distribuídos em delineamento em blocos casualizados com base no peso inicial dos animais, com cinco tratamentos (0; 0,05; 0,10, 0,15 e 0,20% de inclusão do ácido guanidinoacético), seis repetições e três animais por unidade experimental. As rações experimentais e água foram fornecidas à vontade nas fases pré-inicial I (21 a 32 dias de idade) e pré-inicial II (33 a 42 dias de idade), e na fase inicial (43 a 63 dias de idade). Aos 42 e aos 63 dias de idade foi coletado sangue de um animal por unidade experimental para análise de creatinina e creatina quinase. Foram analisadas ganho de peso diário, consumo de ração diário e conversão alimentar nas fases pré-inicial (21-42 dias), inicial (43-63 dias) e no período total do experimento (21-63 dias). Todas as variáveis foram submetidas à análise de variância e à análise de regressão. Foi adotado α = 0,05 e considerado tendência α entre 0,05 e 0,10. Na fase pré-inicial (21-42 dias), ocorreu tendência para o parâmetro de ganho de peso diário (P= 0,069), porem consumo de ração diário e conversão alimentar não foram influenciados significativamente pela adição de diferentes níveis de ácido guanidinoacético na dieta. Já para as variáveis sanguíneas, os níveis de creatinina tanto aos 42 quanto aos 63 dias não foram influenciados significativamente. Para os níveis de creatina quinase aos 42 dias houve tendência (P=0,077), mas aos 63 dias houve influencia significativa. Na fase inicial (43-63 dias) e período total do experimento (21-63 dias), não foram observados efeitos significativos da inclusão de ácido guanidinoacético, tanto para as variáveis de desempenho quanto para creatinina e creatina quinase.

Submitted by Erika Demachki (erikademachki@gmail.com) on 2017-04-24T20:59:21Z No. of bitstreams: 2 Dissertação - Kamilla Martins Borges - 2017.pdf: 1204322 bytes, checksum: 8a9b534df318a8ceb3b176888fbae080 (MD5) license_rdf: 0 bytes, checksum: d41d8cd98f00b204e9800998ecf8427e (MD5) / Approved for entry into archive by Luciana Ferreira (lucgeral@gmail.com) on 2017-04-25T15:47:11Z (GMT) No. of bitstreams: 2 Dissertação - Kamilla Martins Borges - 2017.pdf: 1204322 bytes, checksum: 8a9b534df318a8ceb3b176888fbae080 (MD5) license_rdf: 0 bytes, checksum: d41d8cd98f00b204e9800998ecf8427e (MD5) / Made available in DSpace on 2017-04-25T15:47:11Z (GMT). No. of bitstreams: 2 Dissertação - Kamilla Martins Borges - 2017.pdf: 1204322 bytes, checksum: 8a9b534df318a8ceb3b176888fbae080 (MD5) license_rdf: 0 bytes, checksum: d41d8cd98f00b204e9800998ecf8427e (MD5) Previous issue date: 2017-03-28 / Fundação de Amparo à Pesquisa do Estado de Goiás - FAPEG / Creatine is a substance that provides temporary energy. Guanidinoacetic acid (AGA) is a natural precursor of creatine, and can be added to feeds. The AGA provided acts as an energetic substrate with lower protein degradation with amino acid shift for gluconeogenesis, improving the initial performance of the birds. To evaluate the AGA in broiler chicken diet, an experiment was carried out using rations formulated for the pre-initial phase. Treatments consisted of a basal diet without AGA and rations with 0.10 and 0.20% AGA. A total of 252 male cutting chicks, distributed in a completely randomized design (DIC), with seven replicates and 12 birds per experimental unit were used. Feed consumption, weight gain and feed conversion were evaluated at seven, 14 and 21 days of age. Six days later, blood samples were collected for the determination of creatinine, creatine kinase (CK) and glucose and two metabolism tests were performed one at three and the other at 17 days of age. Data were submitted to analysis of variance ANOVA and the means were compared by the Tukey test. In the period of 1 to 7 days, an improvement in the feed conversion of animals receiving 0.20% AGA was observed. In the period from 7 to 14 days there was improvement in feed conversion and tending to improve the weight gain of the animals that received 0.20% AGA. There was no cumulative effect of AGA use on experimental rations fed to broiler chickens from 1 to 7 days of age on performance up to 21 days of age. Blood creatinine values at six days of life did not show significant differences. Animals that received 0.20% AGA presented higher CK blood concentration than the other treatments. The blood glucose concentration did not present statistical differences between treatments. The crude protein metabolism coefficient (CMPB) was increased within 3 to 7 days for animals receiving 0.20% AGA in the diet. There was no difference between treatments in the period from 17 to 21 days for the metabolization coefficient. The animals' intestinal weight and length did not show differences between treatments. Levels of 0.10 and 0.20% of AGA in the pre-starter diet improves weight gain and feed conversion over the period from 1 to 14 days of age in broilers. / A creatina é uma substância que fornece energia temporária. O ácido guanidinoacético (AGA) é precursor natural da creatina, e pode ser adicionado às rações. O AGA fornecido atua como um substrato energético havendo menor degradação proteica com desvio de aminoácidos para a gliconeogênese, melhorando o desempenho inicial das aves. Para avaliar o AGA em dieta de frango de corte foi realizado um experimento utilizando rações formuladas para fase pré-inicial. Os tratamentos consistiram de uma ração basal sem AGA e rações com 0,10 e 0,20% de AGA. Foram utilizados 252 pintos de corte machos, distribuídos em delineamento inteiramente casualizado (DIC), com sete repetições e 12 aves por unidade experimental. Foi avaliado o consumo de ração, ganho de peso e conversão alimentar aos sete, 14 e 21 dias de idade. Aos seis dias foi realizado coleta de sangue para determinação de creatinina, creatina quinase (CK) e glicose e realizados dois ensaios de metabolismo um aos três e outro aos 17 dias de idade. Os dados foram submetidos à análise de variância ANOVA e as médias foram comparadas pelo teste Tukey. No período de 1 a 7 dias foi observada tendência de melhora da conversão alimentar dos animais que receberam 0,20% de AGA. No período de 7 a 14 dias houve melhora na conversão alimentar e tendência de melhora do ganho de peso dos animais que receberam 0,20% de AGA. Não foi verificado efeito cumulativo da utilização do AGA nas rações experimentais fornecidas aos frangos de corte no período de 1 a 7 dias de idade sobre o desempenho até os 21 dias de idade. Os valores de creatinina sanguíneo aos seis dias de vida não apresentaram diferenças significantes. Animais que receberam 0,20 % de AGA apresentaram concentração sanguínea da enzima CK maior que dos demais tratamentos. A concentração de glicose sanguínea não apresentou diferenças estatísticas entre tratamentos. O coeficiente de metabolização da proteína bruta (CMPB) foi aumentado no período de 3 a 7 dias para os animais que receberam 0,20% de AGA na ração. Não houve diferença entre os tratamentos no período de 17 a 21 dias para o coeficiente de metabolização. O peso e o comprimento do intestino dos animais não apresentaram diferenças entre os tratamentos. Níveis de 0,10 e 0,20% de AGA na dieta pré-inicial melhora o ganho de peso e a conversão alimentar no período de 1 a 14 dias de idade em frangos.

Estudos recentes têm associado à prática de exercício físico de alta intensidade e de forma inabitual a alterações musculares que incluem lesões estruturais das miofibras. Nessa perspectiva, a suplementação de aminoácidos de cadeia ramificada (BCAA) destaca-se como uma estratégia eficaz no controle do dano celular e na promoção da recuperação muscular. Uma vez que, dentre os BCAA, a leucina é o que apresenta maior influência sobre a regulação de mecanismos anabólicos que incluem o estímulo ao aumento da taxa de tradução de RNAm mediado pela proteína quinase mTOR, se especula quais os possíveis efeitos da sua suplementação isolada em um modelo de exercício físico extenuante e inabitual. Buscamos então, com o presente estudo, avaliar o efeito da suplementação com leucina sobre as concentrações séricas de creatina quinase - marcadores de lesão muscular - e sobre a expressão e fosforilação das proteínas mTOR, 4E-BP1, S6K1, IKK, IkB-&#945;, NF-&#954;B - componentes de vias envolvidas na síntese de proteínas e da inflamação - no músculo esquelético de ratos adultos não treinados, submetidos a uma sessão de exercício até a exaustão. Para tanto, 48 ratos machos adultos da linhagem Sprague-Dawley foram distribuídos em 10 grupos, sendo que T3L, T48L E T72L receberam suplementação com leucina [leucina (135 mg/100 g) e T3A, T48A e T72A receberam uma mistura de aminoácidos não essenciais (135 mg/100 g)] ao final de uma sessão de exercício físico agudo até a exaustão; T3E, T48E e T72E - não receberam suplementação e foram submetidos ao protocolo de exercício; o grupo controle não recebeu suplementação e não foi submetido ao protocolo de exercício. Em seguida os animais foram eutanasiados 3, 48 e 72 horas após o termino do exercício para análise dos marcadores investigados. Entre os parâmetros avaliados houve diferença significativa na atividade da creatina quinase entre os grupos TL3 e TL4. No entanto os marcadores biomoleculares não apontaram diferenças entre os grupos. No entanto a fosforilação do NF- Kb da fração nuclear demonstrou uma tendência a ser menor nos grupos suplementados com leucina e o mesmo acontece com a MCP-1 (proteína quimioatraente de monócitos). Visto isso, podemos concluir que, em nossas condições experimentais, as vias de sinalização estudadas estavam envolvidas na diminuição da atividade da creatina quinase, porém, nossos resultados apontam que a suplementação com leucina pode estar envolvida em mecanismos que atenuem o dano celular após o exercício agudo em ratos não treinados. / Recent studies have associated infrequent exercise of high intensity to muscle changes that include structural lesions in myofibres. The supplementation of branched chain aminoacids (BCAA) stands out as an effective strategy in controlling the cell damage and promoting muscle recovery. As leucine is the BCAA exerting more influence on the regulation of anabolic mechanisms that include stimulating the increase of mRNA translation rate mediated by the protein kinase mTOR, it is speculated the potencial effects of leucine supplementation alone in a model of strenuous and infrequent exercise. In the present study, we evaluate the effect of leucine supplementation on serum levels of creatine kinase - marker of muscle damage - and on the expression and phosphorylation of proteins mTOR, 4E-BP1, S6K1, IKK, IkB-&#945;, NF-&#954;B - components of pathways involved in protein synthesis and inflammation - in the skeletal muscle of untrained adult rats, after a single acute bout of exercise to exhaustion. Forty eight adult male Sprague-Dawley rats were divided into 10 groups: T3L, T48L and T72L groups were given leucine supplementation [leucine (135 mg/100 g), and T3A, T48A and T72A groups were given a mix of non-essential aminoacids (135 mg/100 g)] at the end of the acute bout of exercise to exhaustion; T3E, T48E and T72E groups did not receive supplementation and underwent the exercise protocol; control group was not given supplementation nor exercise protocol. The animals were killed 3, 48 and 72 hours after the end of exercise to analyze the markers under study. Among the parameters assessed, there was a significant difference in the activity of creatine kinase between groups TL3 and TL4. However, no differences were seen in the biomolecular markers between groups. Nevertheless, the nuclear fraction of NF- Kb phosphorylation tended to be lower in the groups supplemented with leucine and the same was seen with MCP-1 (monocyte chemoattractant protein). Taken together, we conclude that the signalling pathways studied, in our experimental condition, do not seem to be involved in the reduced activity of creatine kinase; conversely, our results indicate that leucine supplementation may be involved in mechanisms attenuating cellular damage after a single acute bout of exercise in untrained rats.

As atividades enzimáticas e isoenzimáticas da CK e da LD foram determinadas nos tecidos gástricos neoplásico e da margem de ressecção e no soro de indivíduos com adenocarcinoma de estômago, submetidos à gastrectomia. O tecido gástrico neoplásico aapresentou índices CKBB/Cktotal e LD5/LD1, bem como atividade da LD5, superiores aos da margem de ressecção correspondente. No pré-operatório, os indivíduos estudados apresentaram elevação da atividade sérica da CK BB (100%) e da CK MB (69%). Este fato, possivelmente, resultou da liberação dessas isoenzimas pelo próprio neoplasma ou, também pelo tecido normal adjacente. As atividades séricas das isoenzimas da LD apresentaram-se dentro dos valores de referência, nesse período. Após a gastrectomia, houve aumento significativo das atividades isoenzimáticas séricas da CK e da LD relação àquelas do pré-operatório, notadamente, no 1º período pós-operatório. Tais alterações foram atribuídas à liberação dessas isoenzimas pelos tecidos lesados durante o ato cirúrgico. / Abstract not available

Coordenação de Aperfeiçoamento de Pessoal de Nível Superior / Epilepsy is among the most common neurological disorders around the world. Even with the advances in the pathophysiological studies and treatment of this condition, about 30% of the patients do not present satisfactory response to pharmacological treatment available today. In this sense, the searches for new therapies that can help the treatment of this condition are essential. The present thesis aimed to investigate the effect and the mechanisms involved in creatine supplementation and exercise training on a seizure model induced by PTZ. The results presented here showed that exercise training, acute and chronic creatine supplementation as well as the combination between exercise training and chronic creatine supplementation, protected against PTZ-induced seizures. Also, exercise training increased the SOD activity and the thiol groups content per se. Additionally, the chronic creatine supplementation also increased the thiol group content and the acute creatine administration increased the mitochondrial membrane potential () per se. Moreover, also the chronic supplementation and the physical activity program, as well as their combination controlled the increase in the lipoperoxidation and protein carbonylation, the decrease in thiol group content and in the activity of SOD, CAT and Na+,K+-ATPase, induced by the injection of PTZ. In the same way, the acute creatine treatment prevented against the decrease in the Na+,K+-ATPase and xanthine oxidase activity, the decrease in the ATP and ADP content, the increase in the AMP, adenosine, inosine, uric acid content, carbonylated protein and lipoperoxidation, after seizures induced by PTZ. The results indicate that the increase in antioxidant defenses and the maintenance in the energetic storages promoted by exercise training and acute and chronic creatine supplementation can be the putative mechanisms involved in protection against seizures and neurochemical changes induced by PTZ injection. Taking into account the high energetic requirement in disorders with epileptic phenotype, and the known oxidative component involved also in epileptogenesis and in spread of seizures, the exercise training and the creatine supplementation can be considered adjunct therapies in potential to treatment of conditions that present epileptic phenotype. / A epilepsia está entre as desordens neurológicas graves mais comuns no mundo. Apesar dos avanços no estudo patofisiológico e no tratamento dessa condição, cerca de 30% dos pacientes não respondem satisfatoriamente ao tratamento farmacológico disponível atualmente. Nesse sentido, a busca por novas terapias que possam auxiliar no tratamento desta condição é essencial. A presente tese buscou investigar o efeito e os mecanismos envolvidos na suplementação com creatina e no exercício físico, sobre um modelo de convulsões induzidas por pentilenotetrazol (PTZ). Os resultados aqui apresentados demonstraram que o exercício físico, a suplementação aguda e crônica com creatina assim como a combinação entre o exercício físico e a suplementação crônica com creatina protegeram das convulsões induzidas por PTZ. Verificou-se também que o exercício físico aumentou a atividade da enzima superóxido dismutase (SOD) e o conteúdo de grupamentos tióis per se. Além disso, a suplementação crônica com creatina também aumentou o conteúdo de grupamentos tióis e a administração aguda com creatina aumentou o potencial de membrana mitocondrial () per se. Somando-se a isso, tanto a suplementação crônica com creatina, quanto o programa de atividade física, ou sua combinação, controlaram o aumento na lipoperoxidação e na carbonilação de proteínas, a redução no conteúdo de grupamentos tióis não-protéicos e da atividade das enzimas SOD, Catalase (CAT) e Na+,K+-ATPase, induzidas pela injeção de PTZ. Semelhantemente, o tratamento agudo com creatina preveniu contra a redução da atividade da enzima Na+,K+-ATPase e xantina oxidase, redução no potencial de membrana mitocondrial e nos conteúdos de ATP e ADP, aumento nos conteúdos de AMP, Adenosina, Inosina, Ácido Úrico, proteína carbonilada e lipoperoxidação, após convulsões induzidas por PTZ. Esses resultados indicam que o aumento nas defesas antioxidantes e a manutenção nos estoques energéticos exercidos pela atividade física e pela suplementação aguda e crônica com creatina podem ser os possíveis mecanismos envolvidos na proteção contra as convulsões e as alterações neuroquímicas induzidas pela injeção de PTZ. Levando em conta a alta demanda energética presente em desordens com fenótipo epiléptico, além do conhecido componente oxidativo envolvido tanto na epileptogênese quanto na propagação de crises, a atividade física e a suplementação com creatina podem ser consideradas potenciais terapias auxiliares para o tratamento de condições que apresentem fenótipo epiléptico.

Fundação de Amparo a Pesquisa no Estado do Rio Grande do Sul / This study presents an analysis on the effects of creatine supplementation on parameters of susceptibility to seizures induced by subconvulsant dose of pentylenetetrazol (PTZ) in an experimental rat model of traumatic brain injury (TBI). TBI is an acute neurological event that can lead to chronic neurological disease, such as epilepsy. Given the magnitude of the problem, various forms of therapy is being tested, but many have failed and yet, few take into account the susceptibility to seizures as an outcome and concentrate on a very early period of injury, getting away from the reality of patients in underdeveloped countries. Creatine is an interesting compound to be evaluated for this purpose, since it has neuromodulatory properties and may regulate synaptic plasticity in developing neurons. Thus, it became interesting to investigate whether there is any effect of creatine in this scenario. To this, creatine supplementation was held by gavage in rats subjected to fluid percussion TBI model and this supplementation began one week after TBI, once a day for four weeks. PTZ test was performed two hours after the last dose of creatine. Furthermore a similar protocol was performed to verify the persistence of the effect and secondly, to verify the acute effect of creatine, just before the PTZ test. Latency for myoclonic and tonic clonic seizures, total time of generalized seizure as the clinical severity through the scale of Racine were measured and also epileptiform discharges and spindle activity before and after the administration of PTZ were quantified. As main results, it was found a decreased susceptibility to seizures in rats supplemented by a month, and the effect remained even if there was withdrawal of creatine for a week, however, this effect was not observed in the single dose of the compound. Still, a positive correlation between epileptiform discharges and spindle activity was found, both reduced in animals supplemented continuously. Thus, creatine is presented as a candidate to be tested in studies with TBI, with the purpose of reducing the susceptibility to seizures. / Este trabalho apresenta uma análise dos efeitos da suplementação de creatina sobre parâmetros de suscetibilidade à crise epiléptica induzida por pentilenotetrazol (PTZ) em dose subconvulsivante, por modelo experimental de traumatismo cranioencefálico (TCE) em ratos. O traumatismo cranioencefálico (TCE) é um evento neurológico agudo que pode levar à doença neurológica crônica, como a epilepsia. Devido a magnitude do problema, diversas formas terapêuticas vêm sendo testadas, porém muitas falharam e ainda, poucas levam em conta o desfecho da suscetibilidade à crises epilépticas, além de se concentrarem em um período muito precoce da patologia, ficando longe da realidade dos pacientes de países subdesenvolvidos. A creatina consiste num interessante composto a ser avaliado para esse fim, já que apresenta propriedades neuromodulatorias e de regulação da plasticidade sináptica em neurônios em desenvovlimento. Assim, tornou-se interessante investigar se existe algum efeito da creatina nesse cenário. Para isso, realizou-se suplementação de creatina por gavagem em ratos submetidos ao TCE por percussão de fluído, iniciada esta suplementação uma semana após o TCE, uma vez ao dia, por quatro semanas, sendo o teste com PTZ realizado duas horas após a última dose. Também foi realizado um protocolo semelhante para verificar se o efeito da creatina era duradouro e outro, para verificar o efeito agudo, logo antes do teste com PTZ. Foram mensurados o tempo de latência para crises mioclônica e tônico clônica generalizada, tempo total de crise generalizada, gravidade da crise através da escala de Racine, bem como quantificada as descargas epileptiformes e ondas de fuso antes e após a administração de PTZ. Como resultados principais, encontrou-se a diminuição da suscetibilidade à crises epilépticas nos ratos suplementados por um mês, e o efeito permaneceu mesmo quando houve retirada da creatina por uma semana adicional, porém, esse efeito não foi observado na administração única do composto. Também houve correlação positiva do aparecimento de descargas epileptiformes e atividades de fuso, ambas reduzidas nos animais suplementados continuamente. Assim, a creatina apresenta-se como substância candidata à testes em estudos com traumatismo cranioencefálico, com a finalidade de diminuir a suscetibilidade à crises epilépticas.