Orientador: André Fattori / Dissertação (mestrado) - Universidade Estadual de Campinas, Faculdade de Ciências Médicas / Made available in DSpace on 2018-08-23T14:36:17Z (GMT). No. of bitstreams: 1 Silva_JoaoCarlose_M.pdf: 3394200 bytes, checksum: 8d2a029f1ee7e0d42f602adc20337a62 (MD5) Previous issue date: 2013 / Resumo: Estudos demonstram a importância da anemia no contexto da senilidade, tanto por sua relação com perdas funcionais e redução da sobrevida, como também por ser identificada como um fator adicional para o desenvolvimento do fenótipo. De fato, a fragilidade e a anemia em indivíduos idosos parecem compartilhar alguns eventos fisiopatogênicos comuns relacionados ao processo inflamatório crônico. Doenças associadas ao envelhecimento, como aterosclerose, diabetes, doenças renais, alterações cardiovasculares e osteodegenerativas cursam com inflamação crônica e podem ter o seu impacto clínico agravado pelaconcomitância com a anemia. Os modelos mais utilizados no entendimento da fisiopatologia da fragilidade baseiam-se na interpretação da síndrome como resultado do acúmulo de déficits ao longo da vida33, resultando em maior vulnerabilidade biológica ou, ainda, como um estado de decréscimo do metabolismo global do individuo, associado a desregularão neuroendócrina e imunológica, que, também neste caso, cursa com redução da capacidade homeostática. Neste trabalho sugerimos que as alterações hematimétricas contribuem para o fenótipo como um agente estressor, mas também, representa um componente equivalente das perdas relacionadas à sarcopenia no modelo proposto por Friedet al. OBJETIVO GERAL:Este trabalho foi conduzido usando os dados do estudo multicêntrico populacional sobre fragilidade designada pela sigla FIBRA, acrônimo de Fragilidade em Idosos Brasileiros, em uma amostra de 255 idosos recrutados no domicilio, na urbana de Campinas. O fenótipo de fragilidade foi determinado utilizando os critérios do Cardiovascular Health Study e no Women Health andAgingStudy, já demonstrados e validados em publicações anteriores; os pontos de corte das variáveis de fragilidade, ajustados para a população brasileira, foram anteriormente publicados por nosso grupo.As amostras de sangue foram coletadas por de punção venosa utilizando material estéril, e acondicionadas protegidas da luz em tubo seco e tubo de EDTA. O material foi encaminhado ao laboratório de Hematologia do Hospital Universitário da Unicamp para a realização de hemograma e contagem de reticulócitos. Resultados: No modelo I da regressão multivariada, no qual foram incluídas apenas as variáveis hematimétricas, a classificação geral de fragilidade esteve relacionada à idade e o nível de HGB sérica; a contagem de RETAbs (contagem de reticulocitos absolutos) apareceu associada aos critérios individuais perda ponderal e atividade física (dados não mostrados em tabelas). No modelo II, no qual se introduziram as quantificações de citocinas inflamatórias, foram selecionadas como variáveis significativas a idade e a PCRus (proteína C reativa ultra sensível), sendo que cada um ano de avanço etário representou aumento de 1,20 vezes na chance de ser frágil, e cada aumento de 1 unidade no nível de PCRus sérica significou uma elevação de 5,56 vezes na chance de apresentar o fenótipo. Também no modelo II da análise multivariada verificou-se que para a diminuição de 10x106/mL na contagem de RETAbs, o grupo apresentou aumento de 40% na chance de ser frágil, enquanto que a cada elevação de 10x106/mL na contagem de RETAbs houve também aumento de 30% da chance de ser frágil. CONCLUSAO: estes achados sugerem que no conjunto de fragilidade, queda da concentração de hemoglobina, diminuição da contagem absoluta de reticulócitos e níveis séricos de PCRus talvez devam ser compreendidos como um componente constitutivo da fragilidade, estreitamente correlacionada ao processo de sarcopenia evidenciado pela perda ponderal. Neste sentido, os valores reduzidos dos índices hematimétricos, não somente indicam a participação da baixa oxigenação tecidual no processo fisiopatogênico da fragilidade, como também podem ser utilizados como mais um critério definidor do fenótipo. Este estudo FIBRA indica que futuras pesquisas de caráter longitudinal possam indicar os valores de hemoglobina e de reticulócitos absolutos que possam ser utilizados como critério definidor de fragilidade / Abstract: Studies have shown the importance of anemia in the context of senility both because of its relationship with functional loss and reduced survival and because it has been identified as an additional factor leading to the development of the phenotype. In fact, frailty and anemia in the elderly appear to share certain common pathophysiological events related to chronic inflammatory processes. Diseases associated with aging, such as atherosclerosis, diabetes, kidney disease, cardiovascular changes and osteodegenerative diseases, progress with chronic inflammation and their clinical impact may be aggravated if they occur concomitantly with anemia. The models most commonly used to understand the pathophysiology of frailty are based on an interpretation of the syndrome as the result of an accumulation of deficits during an individual's life, resulting in greater biological vulnerability or even a reduction in an individual's overall metabolism associated with neuroendocrine and immune dysregulation, which in this case is also accompanied by reduced homeostatic capacity19,34. We suggest that abnormal red cell indices contribute to the phenotype as a stressor but also play a similar role to that of sarcopenia in the model proposed by Fried et al., 2001. GENERAL OBJECTIVE: The study data were collected from a sample of residents in urban Campinas as part of the FIBRA (Frailty in Brazilian Seniors) multicenter population-based study. The frailty phenotype was determined using the criteria in the Cardiovascular Health Study and the Women's Health and Aging Study, which were described and validated in previous publications; the cut-off points for frailty variables adjusted for the Brazilian population were published previously by our group. Blood samples were collected by venipuncture using sterile material and stored away from light in dry collection tubes and EDTA tubes. The samples were sent to the Hematology Laboratory at Unicamp University Hospital for complete blood counts and reticulocyte counts. RESULTS: In multivariate regression model I, which included only red cell variables, the general frailty classification was related to age and serum hemoglobin (Hb) level. Absolute reticulocyte count (RetAbs) was associated with the individual criteria weight loss and reduced physical activity (data not shown in the tables). In model II, which also included inflammatory cytokine levels, age and hsCRP (high sensible C Reactive Protein) were selected as significant variables. Each additional year of age represented a 1.2-fold increase in the chance of being frail, and each 1-unit increase in serum hsCRP represented a 5.56-fold increase in the chance of having the frailty phenotype. Multivariate analysis using model II revealed that a reduction of 10x106/mL in RetAbs count resulted in a 40% increase in the chance of being frail, and that each 10x106/mL increase in this parameter also led to an increase (30%) in the chance of being frail. CONCLUSION: Our findings suggest that reduced Hb (hemoglobin) concentration, reduced RetAbs count and elevated serum hsCRP levels should perhaps be considered components of frailty, which is closely correlated with sarcopenia, as evidenced by weight loss. In this context, reduced red cell indices not only indicate that poor tissue oxygenation plays a role in the pathophysiology of frailty but can also be used as another criterion to define the phenotype. This FIBRA study has shown that future longitudinal studies may help determine Hb levels and RetAbs counts that can be used as criteria to define frailty / Mestrado / Gerontologia / Mestre em Gerontologia

Orientadores: Simone Appenzeller, Lilian Teresa Lavras Costallat / Dissertação (mestrado) - Universidade Estadual de Campinas, Faculdade de Ciências Médicas / Made available in DSpace on 2018-08-19T20:43:38Z (GMT). No. of bitstreams: 1 Postal_Mariana_M.pdf: 2371381 bytes, checksum: f17ddfd3643881ea1b2d3482a2de1cb8 (MD5) Previous issue date: 2012 / Resumo: Lúpus Eritematoso Sistêmico (LES) é uma doença autoimune, crônica e mutissistêmica, caracterizada por períodos de atividade e remissão. O interesse em identificar biomarcadores que se correlacionem com a atividade sistêmica do LES e que possam predizer um envolvimento orgânico futuro é crescente. O presente estudo, de característica transversal, teve como objetivo avaliar os níveis de interferon alfa (INF-?) e fator de necrose tumoral alfa (TNF-?) em pacientes com LES juvenil (LESj) (início da doença?16 anos), familiares de primeiro grau e indivíduos sadios não aparentados e elucidar sua associação com a atividade da doença, dados laboratoriais e de tratamento. Foram selecionados pacientes consecutivos com LESj acompanhados na Unidade de Reumatologia Pediátrica da UNICAMP entre 2009/2010. Manifestações clínicas, laboratoriais e medicação em uso foram avaliadas. A atividade da doença [SLE Disease Activity Index (SLEDAI)], dano cumulativo [Lupus International Collaborating Clinics/American College of Rheumatology Damage Index (SDI)] foi determinado para cada paciente no dia da coleta de sangue. Os transtornos de humor foram determinados através dos inventários de Depressão (BDI) e Ansiedade (BAI) de Beck. A dosagem das citocinas foi realizada por ELISA (Enzyme Linked Immuno Sorbent Assay). Níveis séricos de INF-? e TNF-? estavam aumentados no LESj quando comparado a familiares de primeiro grau e indivíduos sadios não aparentados. Níveis séricos de INF-? e de TNF-? foram significativamente maiores em pacientes com doença ativa (p=0,031; p=0,014, respectivamente). INF-? (r=0,33; p=0,012) e TNF-? (r=0,39; p=0,002) correlacionaram-se com SLEDAI. INF-? foi significativamente maior em pacientes com anti-dsDNA positivo (p=0,011), pacientes com vasculite cutânea (p=0,001), pacientes com rash malar (p=0,032) e em pacientes sem medicação (p=0,035). Níveis séricos de INF-? correlacionaram-se com níveis de C3 (r=0,34; p=0,032) e idade (r=-0,17; p=0,025). Níveis séricos de TNF-? foram significativamente maiores em pacientes com nefrite (p=0,009) e em pacientes com depressão (p=0,001). De acordo com nossos resultados, INF-? e TNF-? estiveram associados com a atividade da doença e poderiam ser considerados biomarcadores para avaliar atividade, porém estudos longitudidinais são necessários para determinar se o aumento dessas citocinas pode prever períodos de atividade em pacientes com LESj / Abstract: Systemic lupus erythematosus (SLE) is a chronic, multisystemic, relapsing and remitting autoimmune disease. The interest in identifying biomarkers that correlate with the SLE systemic activity and that can predict a future organ involvement is growing. The present cross-sectional study aimed to assess the levels of interferon alpha (IFN-?) and tumor necrosis factor alpha (TNF-?) in pediatric SLE patients (disease onset ?16 years), first-degree relatives and healthy unrelated controls and to elucidate its association with the activity disease, laboratory data and treatment. We selected consecutive pediatric SLE patients followed at the Pediatric Rheumatology Unit of UNICAMP between 2009/2010. Clinical, laboratory, disease activity [SLE Disease Activity Index (SLEDAI)], cumulative damage [Systemic Lupus International Collaborating Clinics / American College of Rheumatology Damage Index (SDI)] and current drug exposure were evaluated. Mood disorders were determined through the Depression (BDI) and Anxiety (BAI) Becks Inventory. The measurement of cytokines was performed by ELISA (Enzyme Linked Immuno Sorbent Assay). Serum levels of INF-? and TNF-? were increased in pediatric SLE patients (p?0.05) when compared to first-degree relatives and unrelated healthy controls. Serum levels of INF-? and TNF-? were significantly higher in patients with active disease (p=0.031; p=0,014, respectively). INF-? (r=0.33; p=0.012) and TNF-? (r=0.39; p=0.002) correlated with SLEDAI. INF-? was significantly higher in patients with positive anti-dsDNA (p=0.011), patients with cutaneous vasculitis (p=0.001), patients with malar rash (p=0.032) and patients without medication (p=0.035). Serum levels of IFN-? correlated with C3 levels (r=0.34; p=0.032) and age (r=-0.17; p=0.025). Serum levels of TNF-? were significantly higher in patients with nephritis (p=0.009) and in patients with depression (p=0.001). According to our results, IFN-? and TNF-? were associated with disease activity and could be considered biomarkers to assess disease activity in pediatric SLE patients, however longitudinal studies are needed to determine if increase of these cytokines may predict flares in pediatric SLE patients / Mestrado / Ciencias Basicas / Mestre em Clinica Medica

Orientador: Mary Luci de Souza Queiroz / Tese (doutorado) - Universidade Estadual de Campinas, Faculdade de Ciências Médicas / Made available in DSpace on 2018-08-20T01:29:54Z (GMT). No. of bitstreams: 1 Rocha_MichelleCorreada_D.pdf: 2565699 bytes, checksum: 3dabd7316dedec270c4ab7d36e55bdb7 (MD5) Previous issue date: 2012 / Resumo: A sílica cristalina, ou quartzo, é um mineral abundante na areia, rochas e solo, cuja exposição crônica predispõe a lesões pulmonares, proliferação de fibroblastos e produção excessiva de colágeno no pulmão causando silicose, uma forma de fibrose pulmonar. A exposição ocupacional à sílica cristalina também tem sido considerada um fator predisponente a doenças autoimunes como artrite reumatóide, esclerodermia e lúpus eritematoso sistêmico. Neste sentido, a sílica tem mostrado agir como adjuvante, aumentando os níveis de imunocomplexos e imunoglobulinas de forma inespecífica, podendo estar relacionado ao desenvolvimento de doença autoimune. Porém, a relação entre exposição à sílica e o desenvolvimento de autoimunidade não está clara devido à falta de conhecimento dos mecanismos envolvidos. Não se sabe se a silicose constitui apenas um marcador de exposição a altos níveis de sílica em pó ou se é uma patologia que pode predispor à doença autoimune. Assim, uma investigação mais acurada de indicadores de autoimunidade em indivíduos com silicose é necessária. Nossos resultados apresentam evidências de alterações compatíveis com autoimunidade nos indivíduos expostos à sílica comparado com a população controle ao demonstrar ativação da resposta imune humoral e celular, além de alterações funcionais nos linfócitos T (LT). Isto foi verificado pelos níveis elevados de fator anti-núcleo, fator reumatóide e anticorpos anti-células endoteliais; pelo aumento da resposta proliferativa de células mononucleares do sangue periférico, dos níveis séricos de Fas ligante solúvel, do número de células Natural Killer e alteração dos níveis das citocinas IFN-_, TNF-_, IL-1_, IL-2, IL-6, IL-10 e TGF-_ bem como alterações funcionais nos LT pela menor expressão das moléculas regulatórias CTLA-4 e PD-1. Além disso, nosso estudo sugeriu uma influência genética na expressão do receptor PD-1 pela menor expressão deste na superfície das células T CD4+ em indivíduos com o genótipo GG no estudo do polimorfismo PD1.3 e também demonstrou que a autoimunidade pode ocorrer anteriormente às manifestações clínicas de silicose / Abstract: Crystalline silica, or quartz, is a mineral abundant in sand, rock and soil which chronic exposure is known to predispose to pulmonary lesions, fibroblasts proliferation and excessive collagen production in the lungs that leads to silicosis, a form of pulmonary fibrosis. Occupational exposure to crystalline silica dust has been examined as a possible risk factor with respect to several autoimmune diseases, such as rheumatoid arthritis, scleroderma and systemic lupus erythematosus. In this regard, silica has been known to have an adjuvant effect on immunocomplexes and immunoglobulins production in a nonspecific manner, thus reinforcing its relation with the appearance of autoimmunity. However, the relationship between silica exposure and the development of autoimmunity remains to be elucidated because the mechanisms underlying this association are unknown. It is unclear whether silicosis is only a marker for high-level silica dust exposure or whether it represents a pathologic process that may predispose some individuals to the development of autoimmune disease. Therefore, an accurate investigation of the autoimmunity indicators in silicotic individuals is required. Our results present evidences of alterations compatible with autoimmunity in silica-exposed individuals as compared to the control population by demonstrating an activation of humoral and cellular immune responses as well as functional alterations in T lymphocytes (LT). It was shown by the increased levels of antinuclear antibodies, rheumatoid factor and anti-endothelial cell antibodies, by the increased proliferative response of peripheral blood mononuclear cells, augmented levels of serum soluble Fas ligand, number of Natural Killer cells and alterations of IFN-_, TNF-_, IL-1_, IL-2, IL-6, IL-10 and TGF-_ cytokine levels as well as by functional LT alterations by thelower expression of CTLA-4 and PD-1 regulatory molecules. In addition, our study suggested a genetic influence in the expression of PD-1 receptor by its lower expression in the surface of T CD4+ cells in individuals carrying GG genotype in the study of PD1.3 polymorphism and also demonstrated that autoimmunity can occur before the clinical manifestations of silicosis / Doutorado / Farmacologia / Doutor em Farmacologia

Orientadores: Denise Engelbrecht Zantut Wittmann, Marcos Antonio Tambascia / Dissertação (mestrado) - Universidade Estadual de Campinas, Faculdade de Ciências Médicas / Made available in DSpace on 2018-08-21T07:42:00Z (GMT). No. of bitstreams: 1 MouraNeto_Arnaldo_M.pdf: 2094698 bytes, checksum: 3daf90f26d6bd9090cf145bcbd4b709e (MD5) Previous issue date: 2012 / Resumo: Introdução: A síndrome do eutireoidiano doente (SED) é uma entidade caracterizada pela queda das concentrações sanguíneas de triiodotironina nas formas total e livre e aumento da forma reversa. Ocorre principalmente em pacientes portadores de doenças graves e agudas, particularmente dentre aqueles internados em unidade de terapia intensiva. Há descrição desta síndrome em portadores de Diabetes Mellitus, particularmente sob controle glicêmico inadequado. Objetivos: Avaliar as alterações dos hormônios tireoidianos em portadores de DM sob cuidado ambulatorial e a correlação entre concentrações de hormônios tireoidianos e controle glicêmico, presença de complicações crônicas (neuropatia, nefropatia, retinopatia) e marcadores de inflamação sistêmica subclínica, bem como sua relação com presença de eventos cardiovasculares. Metodologia: Estudo transversal avaliando 52 pacientes com diabetes tipo 2 e 52 indivíduos sem diabetes, entre 40 e 75 anos de idade, pareados por sexo, idade e índice de massa corporal. Avaliaram-se dados clínicos e antropométricos, concentrações séricas de hormônios tireoidianos e proteína C reativa, bem como exames laboratoriais que refletem o perfil lipídico e controle glicêmico. Resultados: Cerca de 73% dos pacientes com diabetes e 40% dos indivíduos sem DM apresentaram concentrações séricas diminuídas de T3 total; 25% dos pacientes e apenas 2% dos indivíduos sem DM apresentaram concentrações diminuídas de T3 livre. As concentrações séricas de T3 total (p<0,001), T3 livre (p<0,001) e T4 total (p=0,006) estavam diminuídas em comparação aos de indivíduos sem diabetes. As concentrações de T3 reverso não apresentaram diferença entre os dois grupos. Pacientes com diabetes apresentaram T4 livre mais elevado (p=0,033). As concentrações de T3 reverso foram significativamente diferentes apenas quando comparados os indivíduos com eventos cardiovasculares prévios com aqueles sem tal histórico (p=0,002 dentre os pacientes com diabetes e p=0,037 em relação aos indivíduos sem diabetes). A prevalência de eventos cardiovasculares foi de 25%. Houve correlação entre as concentrações de proteína C reativa e a relação cintura/quadril (p = 0,035) e as concentrações de T3 reverso (p = 0,001). Não houve correlação entre os hormônios tireoidianos e a concentração de hemoglobina glicada. No grupo de pacientes com diabetes, os fatores associados à presença de eventos cardiovasculares na análise multivariada foram sexo masculino (p=0,028) e T3 reverso elevado (p=0,01). A análise da curva ROC do T3 reverso em relação à detecção de eventos cardiovasculares mostrou uma sensibilidade de 84,6% e especificidade de 71,8% (p=0,002), similar à performance da proteína C reativa (sensibilidade = 76,9%; especificidade = 64,1%; p=0,022). Conclusões: O T3 total apresentou-se diminuído em 40% dos indivíduos sem DM e poderia superestimar o diagnóstico de SED se analisado como único parâmetro. Adicionalmente, as concentrações séricas de T3 total e livre e T4 total foram mais baixas no grupo de pacientes com diabetes em relação ao grupo controle. O aumento das concentrações de T3 reverso associou-se à presença de doença cardiovascular e à proteína C reativa elevada. O T3 reverso apresentou correlação com as concentrações de proteína C reativa e foi um preditor independente para eventos cardiovasculares / Abstract: Introduction: The non-thyroidal illness is an entity characterized by reduced serum levels of total and free triiodothyronine and a rise in its reverse form. It occurs mainly in critically ill patients. There are descriptions of this syndrome in patients with Diabetes Mellitus, especially those under inadequate glycemic control. Objectives: Evaluate the abnormalities in thyroid hormone levels in individuals with diabetes under standard outpatient care and the correlation of thyroid hormone levels with glycemic control, presence of chronic complications (neuropathy, nephropathy and retinopathy) and subclinical systemic inflammation, as well as its relation with the presence of previous cardiovascular events. Methodology: Cross sectional study involving 52 patients with type 2 diabetes and 52 individuals without the diabetes, between 40 and 75 years of age paired by age, gender and body mass index. We evaluated clinical and anthropometric data, serum levels of thyroid hormones and Creactive protein, as well as laboratory parameters that reflect the lipid profile and glycemic control. Results: Approximately 73% of the patients with diabetes and 40% of individuals without diabetes presented reduced serum levels of total T3. Nearly 25% of the patients and only 2% of the individuals without diabetes presented reduced levels of free T3. The levels of total T3 (p<0.001), free T3 (p<0.001) and total T4 (p=0.006) were lower in patients with diabetes compared with those without diabetes. The levels of reverse T3 did not present any difference between both groups. Patients with diabetes presented higher levels of free T4 (p=0.033). The levels of reverse T3 were significantly different only when comparing individuals with previous cardiovascular events with those without this characteristic (p=0.002 for patients with diabetes and p=0.037 for individuals without diabetes). The prevalence of cardiovascular disease was 25%. There was a correlation between serum levels of C-reactive protein and waist/hip ratio (p=0.035) and levels of reverse T3 (p=0.001). There was no correlation between thyroid hormone levels and glycated hemoglobin. In the group of patients with diabetes, the factors associated with the presence of cardiovascular events on multivariate analysis were male gender (p=0.028) and elevated reverse T3 levels (p=0.01). The ROC curve analysis of reverse T3 for detection of cardiovascular events yielded a sensitivity of 84.6% and a specificity of 71,8% (p=0.002), which was similar to the performance of C-reactive protein (sensitivity = 76.9%; specificity = 64.1%; p=0.022). Conclusions: Total T3 was reduced in 40% of the individuals without diabetes and could overestimate the diagnosis of de non-thyroidal illness syndrome if analyzed as the sole parameter. Additionally, the levels of total and free T3 and total T4 were lower in the group of patients with diabetes than in the control group. Higher reverse T3 levels were associated to the presence of cardiovascular disease and increased C-reactive protein levels. Reverse T3 was an independent predictor of cardiovascular events / Mestrado / Clinica Medica / Mestre em Clinica Medica

Orientador: Egle Cristina Couto de Carvalho / Dissertação (mestrado) - Universidade Estadual de Campinas, Faculdade de Ciências Médicas / Made available in DSpace on 2018-08-21T11:06:18Z (GMT). No. of bitstreams: 1 Guimaraes_JoaoAgripino_M.pdf: 1627287 bytes, checksum: b5aedfb0c0a3b2d807c0d3324ae57317 (MD5) Previous issue date: 2012 / Resumo: Contexto e objetivo: Alterações imunológicas podem estar associadas à infertilidade e endometriose. O objetivo deste estudo foi avaliar se, na infertilidade inexplicada e na infertilidade associada à endometriose, ocorre polarização da resposta imunológica Th1ou Th2. Tipo de estudo e local: Foi realizado um estudo de corte transversal no Centro de Atenção Integral a Saúde da Mulher (CAISM), Universidade de Campinas (Unicamp), Campinas, São Paulo, Brasil, de janeiro a junho de 2010. Métodos: 142 mulheres foram alocadas em três grupos (52 com infertilidade inexplicada, 38 inférteis com endometriose e 52 férteis) para dosagem de citocinas Th1 (interleucina 2, fator de necrose tumoral-ALFA' e do interferon-y ) e citocinas Th2 (interleucinas 4 e 10). Os dados foram descritos através de média, desvio-padrão e mediana, e através de frequências absolutas e relativas. Os grupos foram comparados em relação às variáveis através dos testes de qui-quadrado ou exato de Fisher. As citocinas foram comparadas entre os grupos através do teste de Kruskal-Wallis; em caso de diferença significativa, foram feitas comparações dois a dois através do teste de Mann-Whitney e aceitou-se nível de significância 5%. Resultados: As mulheres com infertilidade inexplicada apresentaram menores níveis de interferon-y (p = 0,0012) e maiores níveis de interleucina-4 (p < 0,0001) do que as mulheres férteis, e maiores níveis de interferon-y (p = 0,0001) e de interleucina-4 (p = 0,0005) do que as mulheres inférteis com endometriose. Aquelas com infertilidade primária apresentaram menores níveis de interferon-y e maiores de interleucina-4 que as mulheres férteis. Conclusão: Não foi detectado qualquer tipo de polarização da resposta imunológica Th1 ou Th2 nas mulheres com infertilidade inexplicada ou com endometriose, quando comparadas com mulheres férteis / Abstract: Context and objective: Immunological alterations may be associated with infertility and endometriosis. The aim of this study was to evaluate the polarization of Th1 and Th2 immune response in women with unexplained infertility and infertility associated with endometriosis. Design and setting: A cross-sectional study was performed at the Center for Integral Attention to Women's Health (CAISM) from University of Campinas (UNICAMP), SP, Brazil, from January to June 2010. Methods: 142 women were allocated into three groups (52 with unexplained infertility, 38 infertile women with endometriosis and 52 fertile women) for measurement of Th1 (interleukin 2, tumor necrosis factor-? and interferon-?) and Th2 cytokines (interleukins 4 and 10). Data were reported as mean, standard deviation, median, and by absolute and relative frequencies. The groups were compared with respect to variables using the chi-square or Fisher exact test. Cytokines were compared between groups using the Kruskall-Wallis test and, if significant differences were noted, comparisons were made in pairs by Mann-Whitney test, with 5% significance level. Results: Women with unexplained infertility showed lower levels of interferon-? (p = 0.0012) and increased levels of interleukin-4 (p <0.0001) than fertile women, and higher levels of interferon-? (p = 0.0001) and interleukin-4 (p = 0.0005) than infertile women with endometriosis. Those with primary infertility had lower levels of interferon-? and interleukin-4 over than fertile women. Conclusion: We could not detect any polarization of Th1 or Th2 immune response in women with unexplained infertility or infertility with endometriosis, when compared with fertile women / Mestrado / Saúde Materna e Perinatal / Mestre em Ciências da Saúde

Orientador: Lício Augusto Velloso / Tese (doutorado) - Universidade Estadual de Campinas, Faculdade de Ciências Médicas / Made available in DSpace on 2018-08-20T07:04:07Z (GMT). No. of bitstreams: 1 Geloneze_SylkaD'OliveiraRodovalho_D.pdf: 6829918 bytes, checksum: 54ecf818c1e1d1ee6ece76250f538ae2 (MD5) Previous issue date: 2012 / Resumo: A obesidade é hoje um dos mais importantes problemas de saúde pública no planeta. A profilaxia e o tratamento desta doença têm se revelado bastante difíceis e, em decorrência das inúmeras doenças associadas que aumentam consideravelmente a morbidade e mortalidade precoces dos pacientes obesos, têm se indicado, em casos selecionados, e com freqüência crescente o tratamento cirúrgico bariátrico. Apesar de, na maioria dos casos de pacientes submetidos à cirurgia bariátrica, os resultados serem bastante favoráveis, existe ainda uma heterogeneidade nos desfechos clínicos e metabólicos obtidos. Assim, a identificação de marcadores que possam ser avaliados antes da cirurgia e que tenham valor preditivo dos desfechos clínicos podem auxiliar na seleção de pacientes. O objetivo deste estudo foi avaliar se a presença do polimorfismo Gly428Ser do gene codificador da proteína PGC1alfa (Co-ativador alfa do receptor gama ativado por proliferador do peroxissomo) desempenha algum papel preditivo dos desfechos da cirurgia bariátrica em pacientes obesos. Foram avaliados 55 pacientes (26 Gly/Gly e 29 Gly/Ser + Ser/Ser), submetidos à gastroplastia com reconstrução em Y de Roux. Os pacientes foram acompanhados por um ano com avaliação de parâmetros clínicos, metabólicos e inflamatórios. A presença do polimorfismo foi associada a uma maior redução da relação cintura/quadril, dos níveis sanguíneos de glicose, proteína C reativa, interleucina-6 e do número de leucócitos. Por fim, a presença do polimorfismo também se relacionou a uma maior redução da espessura da intima-média em carótida. Assim, concluímos que a presença do polimorfismo Gly428Ser de PGC-1alfa èum marcador de melhor desfecho clínico e metabólico da cirurgia bariátrica em pacientes obesos / Abstract: Bariatric surgery is currently employed as an effective approach to treat class III obesity and class II obesity with co-morbidities. Unfortunately, the general anthropometric and metabolic outcomes of the surgery are not homogeneous and defining eligibility criteria that allow for a more precise prediction of the outcomes of this invasive procedure will refine the selection of patients. Here we tested the hypothesis that the Gly482Ser polymorphism of the ppargc1a gene would predict different outcomes following bariatric surgery. Fifty five patients (26 Gly/Gly and 29 Gly/Ser + Ser/Ser) selected for Roux-en-Y gastric bypass according to the NIH Consensus Statement criteria were followed up for one year monitoring anthropometric, metabolic and inflammatory parameters. Patients with the Gly482Ser polymorphism had significantly improved reductions in the waist/hip ratio, fasting blood glucose, C-reactive protein, blood leukocyte count, serum interleukin-6 and intima-media thickness of the carotid artery, as compared with Gly/Gly patients. Thus, the Gly482Ser polymorphism may predict a more favorable metabolic and inflammatory outcome for obese patients submitted to bariatric surgery leading to a reduced atherosclerotic risk / Doutorado / Clinica Medica / Doutor em Clínica Médica

Sabe-se que a desnutrição modifica a resposta imune específica e inespecífica do organismo frente a agentes infecciosos comprometendo a produção e a função de células linfo-hemopoéticas, estando associada a modificações da resposta imune, resultando em maior suscetibilidade à infecções, porém os mecanismos exatos que comprometem o sistema imune em estados de desnutrição ainda estão para serem esclarecidos. A literatura relata que aproximadamente 60% das infecções que evoluem para sepse são adquiridas no ambiente hospitalar, envolvendo geralmente bactérias Gram negativas e incidindo especialmente em indivíduos com nutrição inadequada. Considerando tais aspectos e em função da complexidade da interação do estado nutricional e resposta do organismo frente a agentes patogênicos, envolvendo controles celulares e moleculares múltiplos ainda pouco conhecidos, propusemo-nos a estudar alguns aspectos da resposta inflamatória em desnutrição. Camundongos Swiss machos adultos, submetidos a desnutrição protéica-energética, após perda de aproximadamente 25% do peso corpóreo, foram inoculados com lipopolissacarideo de Escherichia coli: Hemograma, mielograma, esplenograma e dosagens sistêmicas de citocinas, foram realizadas. Células coletadas da cavidade peritonial de animais que não foram estimulados com LPS foram utilizadas para as determinações de citocinas e NO in vitro, bem como para quantificação dos receptores CD14 e TLR-4/MD-2 e do fator de transcrição NF&#954;B. Células da cavidade peritonial foram usadas, também, para realização dos testes de espraiamento, fagocitose e atividade cida com Candida albicans. Animais desnutridos apresentaram anemia, leucopenia; severa redução na celularidade da medula óssea, do baço e da cavidade peritonial. A capacidade de espraiamento, fagocitose, atividade cida e síntese de citocinas e NO foram significativamente menores nos animais dos grupo desnutrido. O número de receptores de CD14 e TLR-4/MD-2 e do fator de transrição NF&#954;B, também foram significativamente menores nos animais desnutridos. Estes achados sugerem que. animais desnutridos apresentam resposta deficiente frente ao LPS. A menor expressão de receptores CD14 e TLR-4/MD-2 pode ser responsável, em parte pela imunodepressão observada. Os dados nos levam a inferir que o estado nutricional interfere no estado de ativação de macrófagos e na capacidade de resposta dos animais. / Malnutrition modifies the specific and non-specific immune response of the organism to infectious agents, hampering the production and function of Iympho-hemopoietic cells leading to a higher susceptibility of the orgonism to infections. However, the exact mechanisms by which the immune system is undermined has not yet been fully elucidated. Approximately 60% of infections that evolve to bacteremia are nosocomial, and usually involve Gram negative bacteria in individuais that have inadequate nutrition. Taking this into consideration, and in view of the complexity of the interaction between nutritional state and the organism\' s response to infection, which involves poorly known multiple cellular and molecular controls, we proposed to study a few aspects of the inflammatory response in protein malnutrition. Male, outbred Swiss mice were sumbitted to protein malnutrition and after the loss of about 25% of total body weight they were inoculad whith lipopolissacharide of Escherichia coli: Hemogram, mielogram, splenogram and the determination of systemic production of cytokines were used to evaluate. Cells from the peritoneal cavity of animais who were not inoculated were collected for determination of cytokines and NO production in vitro and to evaluate the expression of NF&#954;B and CD14 and TLR-4/MD-2 receptors. Cells from the peritoneal cavity were used too for the spreading, phagocytosis and killing tests with Candida albicans. Malnourished animais presented anemia, leucopenia a severe reduction on bone marrow, spleen and peritoneal cavity cellularity. The spreading, phagocytosis, killing and the production of cytokines and NO was significantly lower in malnourished animais. The number of CD14 and TLR-4/MD-2 receptors and NF&#954;B was found to be significantly lower in malnourished animais. These findings suggest that malnourished mice present a deficient response to LPS. The smaller expression of CD14 and TLR-4/MD-2 receptors may be partly responsible for the immunodeficiency observed. These data lead us to infer that the nutritional state interferes in the activation of macrophages and in the immune response capacity.

A nefropatia diabética é uma doença crônica caracterizada por falência renal, que torna necessária a hemodiálise. A diálise peritoneal é uma alternativa para a hemodiálise, porém causa peritonite e morte, principalmente devido à infecção com Staphylococcus aureus, especialmente em pacientes imunodeprimidos, como pacientes diabéticos. Nossa hipótese é que a insulina possa modular a peritonite causada por S. aureus. Para tanto, investigamos sua intervenção, após a indução de diabetes mellitus, na infecção peritoneal por cepas diferentes de S. aureus, analisando os mecanismos moleculares (produção/liberação de citocinas, expressão de moléculas de adesão) e a atividade microbicida dos macrófagos peritoneais envolvidos. Ratos Wistar, machos, diabéticos (aloxana, 42 mg/kg, i.v., 10 dias) e respectivos controles (salina, i.v.) foram submetidos à injeção intraperitoneal de uma suspensão de S. aureus (5x109 CFU/mL) ou volume equivalente de PBS estéril. Os animais foram submetidos a dois tratamentos com insulina NPH: 1) dose única (1UI e 4UI respectivamente, controle e diabético), administrada por via subcutânea; ou, 2) com 4 doses sendo a primeira administrada 2 horas antes da infecção, seguida de metade desta dose às 17 horas e no mesmo horário pelos próximos 2 dias (dose inicial 4UI e 1UI, grupo diabético e grupo controle, respectivamente), passadas 16 horas da última dose de insulina, a glicemia foi determinada e, em seguida, foi realizada eutanásia e coleta de amostras. Avaliamos: a) número de células no lavado peritoneal (LPe), leucograma e glicemia (monitor de glicose); b) níveis séricos de corticosterona e insulina (ELISA); c) concentrações de citocinas (IL-1&#946;, TNF-&#945;, IL-6, IFN-&#947;, IL-4, IL-10, IL-12) e quimiocinas (CINC-1, CINC-2, CINC-3) no sobrenadante do LPe (ELISA); d) expressão de moléculas de adesão (P-selectina, PECAM-1, ICAM-1) no endotélio vascular (imunoistoquímica); e) atividade microbicida. Após a infecção com a cepa ATCC 25923, comparados aos não infectados, ratos diabéticos apresentaram aumento no número de leucócitos (350%) e nas concentrações de CINC-1 (1900%), IL-1&#946; (1300%), IFN-&#947; (280%), IL-4 (800%). O tratamento destes animais com dose única de insulina diminuiu as concentrações de CINC-1 (17%) e IFN-&#947; (30%) e o leucócitos (55%); e aumentou a concentração de IL-4 (260%); enquanto o tratamento com 4 doses diminuiu o número de leucócitos (82%) e as concentrações de CINC-1 (96%) e CINC-2 (45%); e, aumentou as concentrações de TNF-&#945; (270%), IFN-&#947; (220%), IL-1&#946; (42%), IL-6 (760%) e a expressão de ICAM-1 (1360%); enquanto as concentrações de CINC-3, IL-10 e IL-12 não foram alteradas pelos tratamentos com insulina. Após a infecção com a cepa N315 HLA+, comparados aos não infectados, ratos diabéticos apresentaram aumento do número de leucócitos (200%), nas concentrações de CINC-1 (1000%), IL-4 (860%), IFN-&#947; (200%) e na expressão de PECAM-1 (800%) e diminuição de CINC-2 (92%). O tratamento destes animais com dose única de insulina diminuiu a concentração de CINC-1 (85%); e aumentou a concentração de CINC-2 (2030%), IL-1&#946; (370%) e IL-4 (250%); enquanto o tratamento com 4 doses diminuiu a concentração de CINC-1 (92%); e, aumentou número de leucócitos (66%), as concentrações de CINC-2 (100%), IL-1&#946; (490%), IL-6 (1870%) e IFN-&#947; (330%), e os outros parâmetros não foram modificados pelos diferentes tratamentos com insulina. Estes dados sugerem que a insulina possa modular a peritonite induzida por cepas diferentes de S. aureus, controlando pelo menos em parte, o infiltrado inflamatório, a produção das citocinas CINC-1, CINC-2, IL-4, IL-6, IFN-&#947;, TNF-&#945; e IL-1&#946;; e, consequentemente a expressão P-selectina e PECAM-1 no endotélio vascular do mesentério. / Diabetic nephropathy is a chronic disease characterized by kidney failure, so hemodialysis is necessary. Peritoneal dialysis is an alternative to hemodialysis, but causes peritonitis and death primarily due to infection by Staphylococcus aureus, especially in immunocompromised patients, such as diabetics. Our hypothesis is that insulin can modulate peritonitis caused by S. aureus, therefore, we investigated its action, after diabetes induction, in peritoneal infection with different S. aureus strains, analyzing the molecular mechanisms (cytokines production/release, adhesion molecules expression) and the microbicidal activity of peritoneal macrophages involved. Wistar male diabetic (alloxan, 42 mg/kg, iv, 10 days) and their respective controls (saline,iv) were subjected to intraperitoneal injection of S. aureus suspension (5x109CFU/mL) or an equivalent volume of PBS sterile. Animals were submitted to two treatments with NPH insulin administered subcutaneously : single dose (1IU and 4IU respectively , control and diabetic) 8 hours prior to euthanasia ; or 4 doses : first dose 2 hours before infection (4IU and 1IU , diabetic and control group, respectively), then half this dose of 17 pm and in the same time for the next 2 days, after 16 hours of the last dose, blood glucose was determined, and then it was carried out euthanasia and sampling. We evaluated: a) number of cells in peritoneal wash (PW), white blood cell count and blood sugar (glucose monitor) ; b) serum insulin and corticosterone (ELISA); c) concentrations of cytokines (IL-1&#946;, TNF-&#945;, IL-6, IFN-&#947;, IL-4, IL-10, IL-12) and chemokines (CINC -1, CINC-2, CINC-3 ) in supernatant of the SBA assay (ELISA); d) expression of adhesion molecules (P- selectin, ICAM-1, PECAM-1) in vascular endothelium ( immunohistochemistry); e) microbicidal activity. After infection with ATCC 25923 strain, compared to uninfected, diabetic rats showed an increase in leukocytes number (350%) and in concentrations of CINC-1 (1900%), IL-1&#946; (1300%), IFN-&#947; (280%), IL-4 (800%). Treatment of these animals with a single dose of insulin decreased concentrations of CINC-1 (17%) and IFN-&#947; (30%) and leukocytes number (55%); and increased IL-4 concentrations (260%); while treatment with 4 doses decreased leukocytes number (82%) and concentrations of CINC-1 (96%) and CINC-2 (45%); and increased concentrations of TNF-&#945; (270%), IFN-&#947; (220%), IL-1&#946; (42%), IL-6 (760%) and expression of ICAM-1 (1360%); while the concentrations of CINC-3, IL-10 and IL-12 were not affected by treatments with insulin. After infection with N315 HLA+ strain, compared to uninfected, diabetic rats showed an increase in leukocytes (200%), concentrations of CINC-1 (1000%), IL-4 (860%), IFN-&#947; (200%) and in the expression of PECAM-1 (800%); and CINC-2 decrease (92%). Treatment of these animals with a single dose of insulin decreased the concentration of CINC-1 (85%); and increased concentrations of CINC-2 (2030%), IL-1&#946; (370%) and IL-4 (250%); while treatment with 4 doses decreased the concentration of CINC-1 (92%); and increased leukocytes number (66%), concentrations of CINC-2 (100%), IL-1&#946; (490%), IL-6 (1870%) and IFN-&#947; (330%), and other parameters were not modified by treatments with insulin. These results suggest that both S. aureus strains activate differently the innate response during peritonitis, and insulin was not always able to modulate this response.

Made available in DSpace on 2014-06-12T18:28:59Z (GMT). No. of bitstreams: 2 arquivo1144_1.pdf: 2316718 bytes, checksum: d0402e5dbfe6888a88b8b9c579b0637e (MD5) license.txt: 1748 bytes, checksum: 8a4605be74aa9ea9d79846c1fba20a33 (MD5) Previous issue date: 2011 / Coordenação de Aperfeiçoamento de Pessoal de Nível Superior / Staphylococcus aureus resistentes a meticilina constituem um grave problema para a saúde mundial. Alguns fatores relacionados às condições do hospedeiro predispõem às infecções por esses micro-organismos, dentre eles destaca-se a desnutrição. Assim, torna-se importante avaliar repercussões da desnutrição neonatal na resposta imune frente à patógenos com perfis distintos de resistência, como o S. aureus. Para isso foram utilizados ratos machos Wistar amamentados por mães cuja dieta continha 17% de proteína (grupo nutrido) e 8% de proteína (grupo desnutrido). Após desmame, ambos os grupos foram alimentados com dieta normoprotéica até a idade adulta. Os Macrófagos alveolares foram obtidos após traqueostomia, através da coleta do lavado broncoalveolar. Para a obtenção dos linfócitos foi realizado o procedimento cirúrgico de punção cardíaca. Após o isolamento dos diferentes tipos celulares em placas tipo Falcon, procedeu-se com a realização dos estímulos. Sendo especificados quatro sistemas de análise: controle negativo, composto apenas por macrófagos/linfócitos em cultura; controle positivo, semelhante ao anterior, adicionado de lipopolissacarídeo (sorotipo de Escherichia coli; 055:B5, Sigma); e dois sistemas teste, composto por macrófagos/linfócitos estimulados com as cepas de Staphylococcus aureus sensível e resistente a meticilina. A dosagem das citocinas foi realizada pelo método de ELISA, a partir de amostras coletadas do sobrenadante das culturas após de 24 horas de incubação. Os resultados demonstram que modelo de desnutrição neonatal produziu sequela no peso corporal e reduziu a produção de citocinas pró-inflamatórias (IL-12 e IFN-&#947;), indicando que esse modelo de desnutrição pode comprometer a resolução de um processo infeccioso. A cepa de Staphylococcus aureus resistente a meticilina, estimulou uma maior produção de IFN-&#947; e IL-10 de macrófagos alveolares sugerindo estimulação imunológica mais intensa por parte dessa cepa

Orientador: Licio Augusto Velloso / Dissertação (mestrado) - Universidade Estadual de Campinas, Faculdade de Ciencias Medicas / Made available in DSpace on 2018-08-07T13:49:02Z (GMT). No. of bitstreams: 1 Romanatto_Talita_M.pdf: 698647 bytes, checksum: 63eca0e91717781c0ea52f0ebec9855e (MD5) Previous issue date: 2006 / Resumo: A insulina e a leptina induzem uma potente resposta anorexigênica e termogênica atuando sobre neurônios do hipotálamo. Evidências recentes sugerem que a resistência à ação desses hormônios deve participar dos mecanismos centrais que favorecem o desenvolvimento da obesidade e sua associação com o diabetes mellitus. O consumo de dieta rica em gordura induz a expressão de proteínas pró-inflamatórias em hipotálamo de ratos, inclusive da citocina TNF-a. O presente estudo avaliou o efeito de diferentes doses intracerebroventriculares (ICV) de TNF-a sobre a ativação da via de sinalização da insulina, a ingestão alimentar e o consumo de O2/produção de CO2. Ratos Wistar, machos de oito semanas, foram canulados por via ICV e tratados com diferentes doses de TNF-a, insulina ou salina. A dose mais alta de TNF-a promoveu uma redução de 20% na ingestão alimentar de 12 horas, sendo esta redução inferior àquela produzida pela insulina. Na mesma dose, a citocina promoveu um aumento da temperatura corporal e do quociente respiratório. O TNF-a induziu a ativação de elementos da via pró-inflamatória no hipotálamo, como JNK, p38 e NF?B, o que resultou na transcrição de genes de resposta rápida e indução de proteínas da família SOCS. Com relação à via molecular da insulina, o TNF-a não induziu a ativação de substratos proximais e intermediários, no entanto, mesmo a dose mais baixa foi capaz de ativar elementos distais da via, como ERK e FOXO-1. Cocluindo, o TNF-a exerce um potente efeito anorexigênico e pró-termogênico no hipotálamo de ratos através de mecanismos independentes da ativação de proteínas proximais da via de sinalização da insulina. ERK e FOXO-1, que participam como intermediários em várias outras vias de sinalização, incluindo a via da insulina, são ativados pelo TNF-a no hipotálamo e podem estar envolvidas no efeito anorexigênico e pró-termogênico do TNF-a nesse órgão / Abstrasct: Insulin and leptin induce potent anorexigenic and pro-thermogenic responses in specialized neurons of the hypothalamus. Recent evidence suggest that resistance to the action of these hormones play a role in the mechanisms that favor the development of obesity and its common association with type 2 diabetes mellitus. The consumption of a fat-rich diet induces molecular and functional resistance to leptin and insulin in the hypothalamus, which is accompanied by the expression of pro-inflammatory proteins including the cytokine TNF-a. The present study has evaluated the effect of different doses of intracerebroventricular (ICV) TNF-a upon the activation of insulin signal transduction, food ingestion, and the consumption of O2/ production of CO2. For that, eight weeks old male Wistar rats were ICV cannulated and treated with saline, insulin or TNF-a. High dose TNF-a ?promotes a reduction of 20 % of 12 h food intake, which is an inhibitory effect marginally inferior than the one produced by insulin. In addition, TNF-a increases body temperature and respiratory quotient, effects not reproduced by insulin. TNF-a is also capable of activating canonical pro-inflammatory signal in the hypothalamus, inducing JNK, p38, and NF?B, which results in the transcription of early responsive genes and induction of proteins of the SOCS family. Finally, TNF-a does not activate signal transduction through early and intermediary elements of the insulin signaling pathway such as IRS-2 and Akt, however, TNF-a, even at low doses, is capable of activating late elements of the insulin signaling pathway such as ERK and FOXO-1. In conclusion, TNF-a exerts potent anorexigenic and pro-thermogenic effects in the hypothalamus through mechanisms independent of the activation of proteins that participate in early and intermediary steps of the insulin signaling pathway. ERK and FOXO-1, which act as late signal transducers for several signaling pathways, including insulin, are activated by TNF-a in the hypothalamus and may participate in the anorexigenic/pro-thermogenic effects of TNF-a in this organ / Mestrado / Medicina Experimental / Mestre em Fisiopatologia Médica