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Orientador: Oslei Paes de Almeida / Dissertação (mestrado) - Universidade Estadual de Campinas, Faculdade de Odontologia de Piracicaba / Made available in DSpace on 2018-07-18T20:09:00Z (GMT). No. of bitstreams: 1 Graner_Edgard_M.pdf: 3332832 bytes, checksum: f992529fbb897a8b4402b0f62eaa6e30 (MD5) Previous issue date: 1993 / Resumo: O incisivo de rato é de crescimento contínuo, fazendo com que haja concomitantemente à erupção dentária a reorganização do epitélio juncional. O incisivo também apresenta a papila circundental, que é uma projeção epitelial em continuidade com o epitélio sulcular. A porção interna da papila circundental está em contato com a porção cervical do ligamento periodontal, em processo de reabsorção. Este trabalho descreve os aspectos ultraestruturais e a presença de laminina e colágeno tipo IV na junção dento-gengival e papila circundental na face distal do incisivo inferior de ratos... Observação: O resumo na íntegra, poderá ser visualizado no texto completo da tese digital / Abstract: The continuous growth of the rat incisor is associated with a constant reorganization of the junctional epithelium. The gengiva of the rat incisor presents the circundental papilla, corresponding to a projections of the sulcular epithelium in to the subjacent connective tissure. The internal surface os the circundental papilla contacts the cervical part of the periodontal ligament, that in the rat incisor suffers resorption. This work describes the ultrasctructural aspects and the presence of laminin and type IV collagen in the dento-gingival junction and in the circundental papilla of the distal surface of the lower rat incisor... Note: The complete abstract is available with the full electronic digital thesis or dissertations / Mestrado / Patologia / Mestre em Ciências

Orientador: Konradin Metze / Tese (doutorado) - Universidade Estadual de Campinas, Faculdade de Ciências Médicas / Made available in DSpace on 2018-08-26T20:44:11Z (GMT). No. of bitstreams: 1 Ferro_DanielaPeixoto_D.pdf: 2964245 bytes, checksum: 202d309cf65f632d47c7811d4958535d (MD5) Previous issue date: 2015 / Resumo: A aplicação integrada de técnicas modernas, como a Geração do Segundo Harmônico (SHG) e os tempos de vida da fluorescência (FLIM), com análise de imagens matemáticas nos permitem visualizar detalhes não vistos por microscopia de luz convencional. O objetivo deste estudo foi investigar se isto também pode ser aplicado para a investigação de tecido cicatricial. Foram estudados 28 casos de preparações histológicas de rotina, de quelóides, cicatrizes hipertróficas e normais. A Fluorescência de dois fótons e SHG foram obtidas por um microscópio multifóton (LSM 780 NLO-Zeiss), em objetiva de 40X e excitados por um laser Mai Tai de Ti: Safira (comprimento de onda de 940 nm). Foram adquiridas imagens em 3D e foram criadas imagens justapostas a fim de comparar diferentes cicatrizes ou várias regiões no interior da mesma cicatriz com análise de imagens informatizadas. Variáveis de Textura derivadas a partir da matriz de coocorrência das imagens de fluorescência mostraram diferenças significativas entre as cicatrizes normais, cicatrizes hipertróficas e quelóides. Para a análise do FLIM, foi utilizado um sistema composto por um microscópio confocal (LSM780-NLO- Zeiss), com objetiva de 40x e um sistema FLIM acoplado. As amostras foram excitadas por um laser de diodo a 405nm. Estudamos secções não coradas de 32 casos processados rotineiramente de tecido cicatricial incluídos em parafina. As áreas das regiões centrais e periféricas foram selecionadas aleatoriamente e comparadas. Os tempos de vida de fluorescência das hemácias serviram como padrão interno. Os tempos de vida do colágeno em áreas centrais em todos os tipos de cicatrizes foram significativamente mais longo do que em áreas periféricas. Houve correlação positiva entre os tempos de vida de fluorescência das hemácias e as fibras de colágeno entre os casos. Em resumo, o SHG e a técnica Flim revelam em cicatrizes rotineiramente processadas, características morfológicas dos tecidos, que não podem ser detectadas por microscopia de luz convencional / Abstract: The integrated application of modern techniques such as Second Harmonic Generation (SHG) and fluorescence lifetime imaging (FLIM) with mathematical image analysis enable us to visualize details not seen by conventional light microscopy. The aim of this study was to investigate whether this could also be true for the investigation of scar tissue. 28 routine histological preparations of keloids, hypertrophic and normal scars were studied. Two-photon fluorescence and SHG was obtained by a multiphoton microscope (LSM 780 NLO-Zeiss (at 40X objective magnification) and a Mai Tai Ti: Sapphire laser with excitation at 940 nm wavelength. 3D reconstructed patchwork images were created in order to compare different scars or various regions inside the same scar with computerized image analysis. Texture variables derived from the co- occurrence matrix of the fluorescence images showed significant differences between normal scars, hypertrophic scars and keloids. For FLIM analysis we used a system composed of a confocal microscope Zeiss LSM780 Upright-NLO with the 40x objective and a FLIM detection system. The samples were excited by a laser diode at 405nm. We studied unstained sections of 32 routinely processed and paraffin-embedded cases of scar tissue. Randomly selected areas of the central and peripheral regions were compared. The fluorescence lifetimes of red blood cells served as internal standard. Lifetimes of collagen in central areas of all scar types were significantly longer than in the periphery. There was a significant positive correlation between the fluorescence lifetimes of red blood cells and collagen fibers among the cases. In summary, SHG and FLIM techniques reveal in routinely processed scar tissue morphological characteristics, which cannot be detected by conventional light microscopy / Doutorado / Biologia Estrutural, Celular, Molecular e do Desenvolvimento / Doutora em Fisiopatologia Médica

A quitina é um biopolímero abundante na natureza e seu derivado, a quitosana é tido como excelente biomaterial na engenharia tecidual por sua versatilidade e propriedades, assim como colágeno que por sua presença natural no organismo e seu papel biológico fazem com que seja amplamente utilizado na medicina. As blendas destes biopolímeros possuem excelentes propriedades mecânicas devido às interações eletrostáticas e pontes de hidrogênio, e propriedades biológicas pelos materiais que as compõe, já demonstrando eficácia na regeneração tecidual. O extrato de Garcinia mangostna L., ou extrato de mangostão, é pouco estudado no ocidente, mas no oriente é amplamente utilizado para fins medicinais, com propriedades promissoras na área de engenharia tecidual. A interação deste com as blendas de quitosana/colágeno ainda não foram estudadas. Este trabalho teve como objetivo a obtenção e estudo de scaffolds de quitosana/colágeno em diferentes proporções (1:1, 2:1 e 3:1) com extrato de mangostão em variadas concentrações (10, 20 e 30%). A quitosana foi extraída por desacetilação da &#946-quitina de gládios de lula, o colágeno aniônico foi obtido de tendão bovino por hidrólise alcalina e o extrato de mangostão foi obtido da casca do fruto. A caracterização da quitosana e assim como colágeno, extrato e misturas foram analisados por absorção na região do infravermelho (FT-IR), efetuou-se um ensaio reológico dos géis e os scaffolds foram submetidos à calorimetria exploratória diferencial (DSC), microscopia eletrônica de varredura (MEV), ensaios de intumescimento e liberação do extrato. Ensaios reológicos indicam um comportamento pseudoplástico para todas as amostras e se feito um tratamento matemático, o melhor modelo às quais estas se adaptam seria o modelo de Carreau. Os DSC dos scaffolds mostram que a adição de extrato tende à elevar a temperatura de desnaturação (Td) do colágeno. Espectros FT-IR caracterizaram o extrato e não mostraram resultados conclusivos sobre a incorporação dele aos filmes. Fotomicrografias por MEV mostram alteração no tamanho médio de poros e canais com a adição de extrato. Ensaios de intumescimento dos scaffolds mostram uma diminuição de capacidade de absorção com adição de extrato, os ensaios de liberação feitos para os scaffolds das misturas mostram uma liberação entre 25-35% do extrato sendo as cinéticas de liberação modeladas pelo modelo de Kosmeyer-Peppas para a maioria das amostras. Obtendo-se assim géis e scaffolds que mostram resultados inicias promissores e com acréscimo de estudos complementares podem vir a ser utilizados no campo da engenharia tecidual. / Chitosan is an abundant biopolymer in nature, and it is an excellent biomaterial for tissue engineering due to its versatility and properties. Collagen, by the natural presence in the organism and to the biological role makes it widely used in medicine. These biopolymers blends have excellent mechanical properties due to electrostatic interactions and hydrogen bonds, and biological properties, demonstrating good efficiency in tissue engineering. The Garcinia mangostana L. extract, or mangosteen extract, is not very well studied in the western culture, but in the eastern, it is widely used in local medicine, with promising properties in tissue engineering field. The interaction between chitosan/collagen blends and mangosteen extract has not yet been studied. This study aims to obtain scaffolds from chitosan/collagen blends in different ratios, such as 1:1, 2:1 and 3:1 with different extract concentrations (10, 20 and 30%). Chitosan was obtained by deproteinization and deacetylation of &#946-chitin from squid\'s pens, anionic collagen was obtained from bovine tendon by alkaline hydrolysis, and the mangosteen extract was obtained from the hulls of fruits. Materials characterization was done by FT-IR, DSC, SEM, swelling and extract release in buffer solution. Rheological measurements were made with the gels formed from the mixture of the components. The rheological studies indicates a pseudo plastic behavior to all samples and by a mathematical treatment, the Carreau mathematical model was the best fitting. The DSC analysis for the collagen mixtures indicated a tendency to elevate the denaturation temperature with addition of extract. With the FT-IR results, we could obtain mangosteen extract spectrum but the mixtures spectrum did not show the extract incorporation. The photomicrographies obtained by SEM showed pore and channels alteration with extract addition. Swelling studies showed a decrease in swelling capacity after extract addition, release studies showed a 25-35% extract release by scaffolds and in most cases the kinetic was fitted by Kosmeyer-Peppas. Thus obtaining promising gels and scaffolds in the field of tissue engineering, but needing of further development.

Este trabalho teve como objetivo preparar e caracterizar um compósito de colágeno com silicato e hidroxiapatita a ser possivelmente utilizado para capeamento pulpar direto e em pulpotomia como material endodôntico em prevenção ao tratamento radical de canais radiculares que em virtude de suas anatomias dificultam a utilização de biomateriais no interior dos mesmos. Embora materiais para este fim estejam disponíveis no mercado, na maioria dos casos não são isentos de agressão na zona do reparo. O colágeno utilizado foi do tipo I na forma aniônica que foi misturado com silicato (cimento Portland branco) e hidroxiapatita em proporções variadas. Os materiais obtidos foram caracterizados por técnicas de calorimetria exploratória diferencial (DSC), termogravimetria (TG), microscopia eletrônica de varredura (MEV), espectrometria de dispersão de energia de Raios-X (EDX) e espectroscopia na região do infravermelho (FTIR). A presença de colágeno no compósito foi demonstrada por transições térmicas típicas daquelas encontradas para o colágeno do tipo I ('APROXIMADAMENTE' 48 graus Celsius), independentemente da proporção utilizada, e também por MEV, onde as fibras colagênicas também puderam ser observadas interligando as partículas de silicato. Em função das quantidades de colágeno utilizadas, a composição química dos compósitos foi praticamente aquela descrita para o silicato inicial utilizado. Estes resultados mostraram que a estrutura da matriz colagênica nos compósitos estudados não foi alterada, uma característica importante para a utilização dos materiais propostos na endodontia objetivando uma reparação dos tecidos envolvidos de uma forma “mais natural” / In this work was prepared and characterized collagen composites with silicate and hydroxyapatite for pulp capping; post pulpotomy usage, as endodontic material. Even though materials for this purpose are available, in most case they suffer degradation in the repair zone when. Was used type I collagen in the form anionic mixed with silicate (white Portland cement) and hydroxyapatite in various proportions. The materials were characterized by standard differential scanning calorimetry (DSC), thermogravimetry (TG), scanning electronic microscopy (SEM) and infrared spectroscopy (FTIR), energy dispersion X-Ray (EDX). The presence of the collagen in the composite was checked via the thermal transitions typical for collagen type I ('APPROXIMATE' 48 Celsius degrees), independently of the proportion used and also via MEV, in which the collagenic fibers could also be seen interconnecting the silicate particles. For the amounts of collagen used, we find the chemical composition of the composites is essentially the same as that of the silicate we started with. This results showed that the structure of the collagenic matrix in the composite studied is not altered – an important feature for the use of the proposed materials in endodontic applications aiming at repairing the relevant tissues in a “more natural way”

A relação entre as propriedades mecânicas de fêmures de celhos obtidas nos ensaios de flexão em três pontos e impacto, e a orientação das fibras de colágeno foi estudada, bem como a relação entre a energia absorvida nos dois ensaios. O limite máximo, limite proporcional, rigidez, resiliência e tenacidade foram obtidos a partir de ensaio de flexão em três pontos de 20 fêmures esquerdos de coelhos. A energia absorvida (tenacidade) no impacto foi obtida utilizando os 20 fêmures direitos. A orientação das fibras de colágeno foi estimada utilizando a técnica de polarização da luz incidente. A análise de regressão mostrou que no ensaio de flexão, a rigidez teve correlação positiva (R=0,43) e a resiliência, correlação negativa (R=-0,46) com a orientação das fibras de colágeno. A energia absorvida no impacto não apresentou índice de correlação significativo (p<0,05). A energia absorvida no ensaio de impacto pelos fêmures foi 4,73 vezes a energia absorvida ensaio de flexão, havendo diferença significativa entre os dois valores / The relationship between the mechanical properties of rabbit femurs in three-point bending and impact tests and collagen fiber orientation was studied, as well as the proportion between absorbed energy in both tests. Maximum limit, proportional limit, stiffness and resiliency were measured in 20 left rabbit femurs by three point bending tests and the absorbed energy was measured in 20 right rabbit femurs by impact tests. Collagen fiber orientation was estimated using polarized light. Regression analysis showed that in bending, stiffness has significant positive correlation (R=0,43) and resiliency has significant negative correlation (R=-0,46) with collagen fiber orientation. Absorbed energy in impact showed no significant correlation with collagen fiber orientation. The absorbed energy in impact tests was 4,73 times the absorbed energy in three point bending tests, with significant difference between the two values

O Callithrix jacchus é uma espécie nativa do Brasil que vem sendo amplamente utilizada nas pesquisas biomédicas como modelo experimental, além de estar sofrendo significativas baixas na natureza, especialmente, pela destruição de seu habitat. Assim, estudou-se corações de 11 espécimes de Callithrix jacchus oriundos do Centro de Primatas da Alemanha (DPZ), para a caracterização biométrica, morfométrica macroscópica e quantificação de colágeno dos ventrículos direito e esquerdo corados com finalidade de identificar o padrão primário deste tecido para a espécie e compará-lo com outras espécies domésticas e o homem. Com base nos resultados, concluiu-se que não há diferenças biométricas significativas entre machos e fêmeas, exceto pelo perímetro torácico que evidenciou dimorfismo sexual para a espécie. Os pesos relativos dos corações foram semelhantes aos encontrados na espécies humana, bovina e eqüina. A morfometria média do coração foi estabelecida sem diferenças significativas entre machos e fêmeas. A quantificação de colágeno apresentou diferenças significativas entre as duas colorações utilizadas, sendo o picrosírius modificado o método que apresentou maiores valores. O ventrículo direito continha maior percentagem de colágeno quando comparado ao ventrículo esquerdo o que sugere que o ventrículo direito está mais predisposto a alterações decorrentes de modificações do tecido conjuntivo / The Callithrix jacchus is Brazil native species wich is being widely used as experimental model in biomedical research, besides facing great losses, especially through the destruction of its habitat. Accordingly, 11 hearts of Callitrix jacchus from the Center of Primates in Germany (DPZ) have been studied, in order to establish a biometrical characterization, gross morphometry and collagen quantification of the left and the right ventricle to establish a prime pattern for this species and compare it with other domestic species and human. Based on the obtained results, no significant biometrical difference was found between male and female, just the thoracic perimeter showed sexual dimorphism. The relative heart weight was similar to the one measured in human, bovine and equine species. The average morphometry of the hearts did not show any significant difference between male and female. The collagen quantification established a difference between the used colorings, evidencing the modified picrosirius presented higher values. The right ventricle contained a higher percentage of collagen compared with the left one, indicating the right ventricle to be more predisposed to alterations of the modified connective tissue

Recentemente, pesquisadores têm descrito resultados promissores oriundos da Biomembrana de Látex Natural (BML). Estudos vêm sendo desenvolvidos para comprovar as características indutoras de neovascularização e regeneração tecidual que foram atribuídas a esse material. Entretanto, a biocompatibilidade tem sido considerada um dos mais importantes itens para validar um biomaterial para sua aplicação em humanos. A proposta deste estudo foi investigar qualitativa e quantitativamente os efeitos deste biopolímero, confeccionado à partir da extração de látex vegetal oriundos da árvore da borracha, Hevea brasiliensis, em pele de ratos escaldados. Foram usados 22 ratos, Wistar machos, com pesos entre 200 e 300g, divididos em três grupos: Controle negativo - normais (GI), Controle positivo - queimados (GII) e Tratados com a BML (GIII). A lesão térmica foi realizada por escaldamento (LTE), padronizada pelo peso corpóreo e usando água quente (85ºC for 10 segundos), e a ortoeutanásia dos animais ocorreu nos períodos de 4 e 14 dias pós-lesão. Os animais foram mantidos sob as mesmas condições de alojamento, alimentação, temperatura, umidade e luz. O grupo GIII apresentou melhor cicatrização comparado àqueles do grupo GII. Observou-se que as fibras colágenas e elásticas apresentaram-se em uma rede melhor organizada no grupo GIII e observou-se, ainda, que o número de vasos também foi maior neste grupo. Como vistos em estudos anteriores, a BML favoreceu a cicatrização em áreas queimadas e a neoangiogênese, sugerindo que este biomaterial é um promissor recurso terapêutico para a cicatrização da pele, particularmente nos casos em que a revascularização tecidual seja importante. / Recent investigations have described promising results obtained with the Natural Latex Biomembrane (BML). Several studies had been performed to prove the inductive characteristics of vascularization and tissue regeneration that has been attributed to this material. However biocompatibility has been considered one of the most important items to validate a biomaterial for its application in human beings. The aim of this study was to investigate qualitatively and quantitatively the effects of a biopolymer based on vegetal latex extracted from the Hevea brasiliensis rubber tree in scalded rat skin. Twenty two male Wistar rats weighing between 200 300 g, were divided in three groups: Negative control - normal (GI), Positive control - scalded (GII), and Treated with the BML (GIII). The thermal burn standardized with the body weight, was made using hot water (85ºC for 10 seconds). Euthanasia was performed at 4, and 14 days pos-burn. Animals were kept under the same conditions of accommodation, feeding, temperature, humidity, and light. The burn area with satisfactory healing was greater in GIII than in GII. Collagen and elastic fibers could be seen in a very organized fashion in GIII group, in a similar arrangement that GI. The number of vessels was higher in GIII that others groups. Similar to earlier studies, the BML seemed to benefit cicatrization and neoangiogenesis in the burn skin, suggesting that this biomaterial might be a new type of therapeutic resource for skin burn replacement, especially in cases of desirable tissue revascularization.

El presente estudio se desarrolló con el propósito de implementar una idea de negocio escalable, visionaria y atractiva / a raíz de esto, se realizó una investigación de mercado a fin de obedecer las tendencias y responder a las demandas insatisfechas. Los resultados del análisis señalaron que: las personas se mantienen en constante búsqueda de productos saludables y de fácil consumo, aprecian más los alimentos naturales que los procesados, prestan especial atención al valor nutricional de lo que ingieren y demuestran empatía de cara al medio ambiente. Ante esto, se consolidó la propuesta referida al lanzamiento de una bebida frutada 100% natural a base de colágeno, con la particularidad de poseer un proceso de elaboración artesanal y de contar con envases de vidrio con el objetivo de no solo generar un impacto positivo en la sociedad, sino también en el medio ambiente. En tal sentido, tomando en consideración el contexto actual, se optó por el método de venta online de manera que sea más accesible su comercialización. De forma consecuente, se procedió a redefinir nuestro radio de atención para el primer año en base a nuestra capacidad operativa y cercanía / dirigiéndonos así, a diez distritos pertenecientes a Lima Metropolitana Moderna. En el transcurso de la investigación, se efectuaron encuestas para precisar el precio y tamaño de presentación, se consultó fuentes respaldadas para el sustento de los presupuestos y proyecciones exhibidas, se ejecutaron acciones de marketing para impulsar las ventas, entre otras actividades que nos permitieron preparar un ensayo acertado.

El presente estudio se desarrolló con el propósito de implementar una idea de negocio escalable, visionaria y atractiva; a raíz de esto, se realizó una investigación de mercado a fin de obedecer las tendencias y responder a las demandas insatisfechas. Los resultados del análisis señalaron que: las personas se mantienen en constante búsqueda de productos saludables y de fácil consumo, aprecian más los alimentos naturales que los procesados, prestan especial atención al valor nutricional de lo que ingieren y demuestran empatía de cara al medio ambiente. Ante esto, se consolidó la propuesta referida al lanzamiento de una bebida frutada 100% natural a base de colágeno, con la particularidad de poseer un proceso de elaboración artesanal y de contar con envases de vidrio con el objetivo de no solo generar un impacto positivo en la sociedad, sino también en el medio ambiente. En tal sentido, tomando en consideración el contexto actual, se optó por el método de venta online de manera que sea más accesible su comercialización. De forma consecuente, se procedió a redefinir nuestro radio de atención para el primer año en base a nuestra capacidad operativa y cercanía; dirigiéndonos así, a diez distritos pertenecientes a Lima Metropolitana Moderna. En el transcurso de la investigación, se efectuaron encuestas para precisar el precio y tamaño de presentación, se consultó fuentes respaldadas para el sustento de los presupuestos y proyecciones exhibidas, se ejecutaron acciones de marketing para impulsar las ventas, entre otras actividades que nos permitieron preparar un ensayo acertado. / The present study was developed with the purpose of implementing a scalable, visionary and attractive business idea; Following this, a market research was conducted to obey trends and respond to the demands. The results of the analysis indicated that: people are constantly searching for healthy and easy-to-eat products, they appreciate natural foods more than processed ones, they pay special attention to the nutritional value of what they eat and they show empathy towards the environment. Because of this, the proposal regarding the launch of a 100% natural collagen-based fruit drink was consolidated, with the particularity of having an artisanal manufacturing process and having glass containers with the aim of not only generating a positive impact on society, but also in the environment. In this sense, taking into account the current context, the online sales method was chosen so that its commercialization is more accessible. Consequently, we proceeded to redefine our service radius for the first year based on our operational capacity and proximity; addressing us to ten districts belonging to Modern Metropolitan Lima. In the course of the investigation, surveys were conducted to specify the price and size of the presentation, we consulted backed sources for the livelihood of the budgets and projections exhibited, marketing actions were carried out to boost sales, among other activities that allowed us to prepare a successful essay. / Trabajo de investigación