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Aprendizagem de cálculo diferencial e integral por meio de tecnologias de informação e comunicação / Luiz Carlos Almeida de Domenico ; orientadora, Patrícia L. TorresDomênico, Luiz Carlos Almeida de January 2006 (has links)
Dissertação (mestrado) - Pontifícia Universidade Católica do Paraná, Curitiba, 2006 / Inclui bibliografia / Este trabalho de pesquisa sugere o uso das Tecnologias de Informação e Comunicação na aprendizagem de Cálculo Diferencial e Integral ,nos cursos de graduação do Centro de Ciências Exatas e Tecnologias da Pontifícia Universidade Católica do Paraná.A justif
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Método voltamétrico para quantificação de sulfentrazone em amostras de solo / Voltammetric method for quantification of sulfentrazone in soil samplesCatrinck, Mariana Neves 18 June 2014 (has links)
Submitted by Marco Antônio de Ramos Chagas (mchagas@ufv.br) on 2016-05-03T16:41:55Z
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Previous issue date: 2014-06-18 / Coordenação de Aperfeiçoamento de Pessoal de Nível Superior / O sulfentrazone é um herbicida que vem sendo aplicado em grandes áreas agrícolas do Brasil, principalmente nas culturas da cana-de-açúcar, soja e reflorestamento. Possui longa meia-vida e pode contaminar o solo para cultivos sucessivos e águas superficiais e subterrâneas. Todavia, faltam estudos sobre o comportamento desse herbicida em solos tropicais; pois, a metodologia para estes estudos é onerosa e, ainda está pouco disponível na maioria dos laboratórios por falta de equipamentos e recursos humanos qualificados. Na busca de soluções para este problema, neste trabalho, foi desenvolvida e validada uma metodologia eletroanalítica para quantificação de sulfentrazone em amostras de solo. Inicialmente, o sistema foi caracterizado qualitativamente por voltametria cíclica (CV). Os estudos sugerem que o transporte de massa do analito é regido por difusão e que a oxidação de sulfentrazone ocorre por meio de transferência irreversível de um elétron entre o analito e o eletrodo de trabalho, próximo ao potencial +0,936 V vs. Ag|AgCl, KCl sat 3 mol L -1 quando foi utilizando o eletrodo de carbono vítreo (GCE) em KOH 0,10 mol L -1 . Observou- se, também, resultados semelhantes próximo ao potencial +0,972 V vs. Ag|AgCl, KCl sat 3 mol L -1 quando se utilizou o eletrodo de ouro (AuE) em solução tampão fosfato pH 7,0,0. A quantificação do herbicida foi realizada pelo sistema composto por GCE em KOH 0,10 mol L -1 o qual se mostrou mais sensível e seletivo para quantificação; sendo, a voltametria de pulso diferencial (DPV) a técnica mais sensível e seletiva, com limites de detecção de 3,75 e 4,24 mg kg -1 e quantificação de 12,5 e 14,2 mg kg -1 , na ausência e presença de matriz de solo, respectivamente. O método apresentou repetibilidade entre 2,65 e 4,20 %, precisão intermediária entre 5,32 e 10,9 % e recuperação entre 88,5 e 103 %. Adicionalmente, a exatidão do método eletroanalítico proposto foi validada por comparação dos resultados com a metodologia padrão de análise (cromatografia líquida de alta eficiência, CLAE). Estes resultados indicam que a metodologia desenvolvida apresenta seletividade, simplicidade e baixo custo para quantificação de sulfentrazone em amostras de solo. / Sulfentrazone has been applied to broad areas in Brazil, especially in cultures of sugar cane, soy and reforestation. The herbicide has a long half-life in soil and may contaminate the soil for subsequent crops and surface waters and groundwaters. However, there are no reports on its systematic investigation in tropical soils, therefore the methodology for these studies is costly and is still not available in most laboratories due to lack of equipment and qualified human resources. In this work, an electroanalytical methodology to quantify Sulfentrazone in soil samples was developed and validated. Initially, the system was qualitatively characterized using cyclic voltammetry (CV). The studies suggest that oxidation of Sulfentrazone occurs by means of the irreversible transfer of one electron between the analyte and the working electrode, close to the potential +0.936 V vs. Ag|AgCl, KCl sat 3 mol L -1 , using a glassy carbon electrode (GCE) in KOH 0.10 mol L -1 , and close to the potential +0.972 V vs. Ag|AgCl, KCl sat 3 mol L -1 , using a gold electrode (AuE) in phosphate buffer at pH 7,0,0. The mass transport of analyte is governed by diffusion in both electrochemical systems. Because of the GCE system in KOH 0.10 mol L -1 proved to be more sensitive and selective in the quantification of the herbicide, the quantitative techniques were optimized in these conditions. Among the techniques investigated, it was confirmed that differential pulse voltammetry (DPV) was more sensitive and selective, with detection limits of 3.75 and 4.24 mg kg -1 , and quantification of 12.5 and 14.2 mg kg -1 , in the absence and presence of soil matrix, respectively. The reproducibility of the method ranged between 2.65 and 4.2 %, with intermediate precision between 5.32 and 10.9 %, and recovery between 88.5 and 103.2 %. Additionally, the accuracy of the electroanalytical method was validated by comparing the results with a standard analysis methodology (High-Performance Liquid Chromatography, HPLC). These results indicate that the methodology proposed for the quantification of Sulfentrazone in soil samples is selective, simple and non-expensive.
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Uma classe de equações tipo Yamabe e teoria de blow-up em H1 2 (M) / A class of equations of Yamabe type and blow-up theory in H1 2(M)Nogueira, Marcelo Aparecido Cabral 24 February 2015 (has links)
Submitted by Reginaldo Soares de Freitas (reginaldo.freitas@ufv.br) on 2016-06-17T09:29:53Z
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Previous issue date: 2015-02-24 / Coordenação de Aperfeiçoamento de Pessoal de Nível Superior / Nesta dissertação estudamos uma classe de equações elípticas tipo Yamabe em uma variedade Riemanniana compacta, sem bordo, de dimensão n ≥ 3. Tais equaçõoes tem sido alvo de investigações por décadas. Daremos ênfase a H1 -teoria de blow-up estudando sequências de Palais-Smale associadas com a equação crítica, definindo os pontos de blow-up e provando o teorema de decomposição em bolhas. / In this dissertation we study a class of elliptic Yamabe type equations on a compact Riemannian manifold, without boundary, of dimension n ≥ 3. Such equations have been the target of investigation for decades. The main focus will be on H1 -theory for the blow-up studying Palais-Smale sequences associated with the critical equation, defining the blow-up points and proving the theorem of decomposition in bubbles.
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Cálculo da espessura de blindagem pela combinação dos métodos LTSN e decomposiçãoChies, Roselice Parmegiani January 1996 (has links)
Neste trabalho apresenta-se uma nova maneira de calcular a espessura de blindagem de uma placa plana homogênea pela combinação dos métodos L TSN e Decomposição. No método da Decomposição o termo não-linear é aproximado pelos polinômios A 11 e A11 • É também empregada a formulação L TSN para resolver problemas de grandes espessuras. Simulações numéricas para a espessura de blindagem são apresentadas usando as formulações L TS2 e L TS4 considerando, respectivamente, cinco e dois termos da solução em série do método da Decomposição. / In this work is proposed a new approach to evaluate the shielding thickness of a homogeneous slab by combination the L TSN and Decomposition methods. In the Decomposition method, the non-linear term is approximated by the A11 and Ã11 polynomials. It is also used the L TSN formulation to solve large thickness problems. Numerical simulations for the shielding thickness are reported employing the L TS2 and L TS4 formulations and considering, respectively, five and two tenns of the series solution from the Decomposition method.
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A solução dinâmica em tratamento de dadosJung, Claudio Rosito January 1995 (has links)
O trabalho consiste no estudo de sistemas vibratórios lineares com n graus de liberdade, regidos pela equação diferencial vetorial linear. São analisados aspectos como a aplicação da solução dinâmica a vibrações aleatórias e métodos para a resolução do problema inverso (análise modal experimental). / The work consists on the stucly of vibrating systems with n degrees of freedom, described by the linear vectorial differential equation. We focus our analysis on applications of the dynamical solution to ranclom vibration anel methods for solving thc inverse problem (experimental modal analysis).
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Desenvolvimento de metodologia para dosagem sérica de dexametasona e seu emprego na interpretação do teste oral de supressão com 1 mg de dexametasona para identificação de pacientes com síndrome de Cushing / Development of a methodology to measure serum dexamethasone and its use to interpret the 1mg oral dexamethasone suppression test to identify patients with Cushing's syndromeHayashi, Lilian Fukusima [UNIFESP] 25 May 2011 (has links) (PDF)
Made available in DSpace on 2015-07-22T20:49:50Z (GMT). No. of bitstreams: 0
Previous issue date: 2011-05-25 / Introdução: A síndrome de Cushing (SC) é um distúrbio endócrino de grande desafio diagnóstico, pois, suas manifestações clínicas são comuns a outras condições, como obesidade, diabetes, dislipidemia e hirsutismo. Vários exames laboratoriais permitem o rastreamento e o estudo de indivíduos com suspeita desta síndrome, como o cortisol livre urinário de 24 horas (CLU), o cortisol sérico e/ou salivar às 23:00 horas e o teste de supressão com dexametasona (TSD). O TSD é amplamente utilizado no rastreamento da SC, pois se baseia na ação da dexametasona em suprimir o ACTH e o cortisol em indivíduos normais, enquanto pacientes com SC não apresentam supressão abaixo de um determinado valor. Materiais e métodos: O RIE para dexametasona no soro foi desenvolvido de acordo com as recomendações da resolução RE-899/2003, da ANVISA. Analisamos o soro de 96 voluntários, 67 (42M/25H) submetidos e 29 (25M/4H) não, ao TSDx (1mg ingerido às 23h, com coleta de sangue na manhã seguinte), e de 12 pacientes com diagnóstico confirmado de SC (10M/2H), estudados na UNIFESP e na Santa Casa de SP. Resultados: A concentração de Dx no soro variou de maneira semelhante nos voluntários e nos pacientes com SC (nos quais não houve supressão do cortisol sérico): 205 a 703 ng/dL e 174 a 661 ng/dL (IC95%), respectivamente; os valores foram indetectáveis naqueles que não se submeteram ao teste. Discussão e conclusão: O RIE mostrou boa reprodutibilidade em ambas as extremidades da escala de trabalho e foi eficiente na determinação dos níveis séricos de Dx durante o TSDx. O presente RIE para a dosagem de Dx no soro é acurado e confiável permitindo estabelecer uma faixa de referência de valores para subsidiar a interpretação do TSDx. / TEDE / BV UNIFESP: Teses e dissertações
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A relação com o saberSilva, Juliana Pires da January 2015 (has links)
Dissertação (mestrado) - Universidade Federal de Santa Catarina, Centro de Ciências da Educação, Programa de Pós-Graduação em Educação Científica e Tecnológica, 2015. / Made available in DSpace on 2015-09-15T04:06:43Z (GMT). No. of bitstreams: 1
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Previous issue date: 2015 / Nesta pesquisa investigamos a relação dos estudantes de engenharia com a primeira disciplina de Cálculo na Universidade Federal de Santa Catarina - Campus Araranguá. Uma de nossas hipóteses é que os problemas no ensino do Cálculo não são apenas relacionados aos conteúdos ou a metodologia do professor, mas também a postura que os estudantes estão assumindo diante do Cálculo. Para responder ao problema proposto, temos como objetivo identificar, analisar e compreender as relações estabelecidas pelos estudantes de engenharia com o processo de ensino e de aprendizagem da primeira disciplina de Cálculo na Universidade Federal de Santa Catarina no Campus Araranguá. Como ações para alcançar este objetivo, consideramos a questão do sentido e da mobilização, a relação com o aprender Cálculo, com os colegas, com os professores, com eles mesmos, com o curso e a universidade nesse processo educativo. Para captar estas relações, desenvolvemos um questionário com vinte e duas questões abertas aplicados com três turmas de Cálculo no primeiro semestre de 2014 no Campus Araranguá. As respostas foram categorizadas a partir da leitura e releitura dos questionários, onde procuramos agrupar e reagrupar respostas, comparando-as, interpretando-as, tendo como horizonte as relações emanadas no processo de aprendizagem do Cálculo dos estudantes. Para analisar as respostas, temos como aporte teórico os estudos da Relação com o Saber de Bernard Charlot (1996, 2000, 2001, 2005, 2009a, 2013) e Silva (2009). As análises efetuadas permitiram chegar a alguns resultados. De modo geral, três tipos de relações possíveis foram evidenciados: a minoria dos estudantes tem uma relação significativa com a disciplina; outra parte tem uma relação procedimental e a parte mais ampla tem uma relação meramente institucional, em que a disciplina não passa de uma obrigação nos cursos de engenharia. O estudo desenvolvido indica a necessidade de uma mudança de postura tanto dos estudantes quanto do professor no processo de ensino e aprendizagem do Cálculo.<br> / Abstract : In this study we investigated the relation of Engineering students to the first discipline of Calculus at the Federal University of Santa Catarina - Araranguá campus. One of our hypotheses addresses the problems in teaching Calculus, which are not only related to the content or the teacher's methodology, but also to the attitude that students take regarding Calculus. To answer the proposed problem, we aim to identify, analyze and understand the relations established by Engineering students to the teaching and learning process of the first discipline of Calculus in Araranguá campus of the Federal University of Santa Catarina. As for the actions taken to accomplish this objective, we considered the problem of sense and mobilization, the relation to knowledge of Calculus, to colleagues, to teachers, to themselves, to the course and university during this educational process. To capture these relations, we developed a questionnaire with twenty-two open-ended questions, which was applied with three groups of students of Calculus in the first semester of 2014 in Araranguá campus. After reading and rereading the questionnaire answers, we tried to group and regroup the answers into categories by comparing and interpreting them having in mind the relations, which emerge during students? learning process Calculus, as a target. To analyze the answers, we have studies about the relation to knowledge by Bernard Charlot (1996, 2000, 2001, 2005, 2009a, 2013) and Silva (2009) as theoretical contributions. Thus, the carried out analyses made it possible to come to some results. In general, three types of possible relations were found: the minority has a significant relation with the discipline; other part of group has a procedimental relation and the majority has a purely institutional relation where the discipline is just a mere obligation of the Engineering courses. This study demonstrates the need for an attitude change in both students and the teacher for the teaching and learning process of Calculus.
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Diagnósticos diferenciais histopatológicos das lesões cutâneas de leishmaniose tegumentar americanaQuintella, Leonardo Pereira January 2010 (has links)
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Previous issue date: 2014-10-07 / Fundação Oswaldo Cruz. Instituto de Pesquisa Clínica Evandro Chagas, Rio de Janeiro, RJ, Brasil / A leishmaniose cutânea (LC) se caracteriza por lesões granulomatosas, comumente ulceradas, e a esporotricose é importante diagnóstico diferencial. O presente trabalho objetivou determinar alterações histopatológicas úteis para essa diferenciação e relatar um caso de LC em que houve hiperplasia pseudoepiteliomatosa exuberante que foi confundida com carcinoma de células escamosas. Foi realizado um estudo das alterações histopatológicas de 119 lesões cutâneas ativas de esporotricose em lâminas coradas pela hematoxilina e eosina e, posteriormente, uma comparação entre as alterações em 171 lesões ativas de LC e 97 de esporotricose em que não se encontrou o microorganismo ao exame histopatológico. Todos os casos foram diagnosticados pelo isolamento do agente em cultura
A esporotricose se caracterizou histopatologicamente por uma dermatite difusa granulomatosa supurativa com necrose. A LC apresentou granulomas dos tipos \201Cclareira de Montenegro\201D e \201Ctuberculóide\201D e degeneração da matriz extracelular de forma significativamente mais freqüente do que a esporotricose. A esporotricose apresentou granulomas dos tipos \201Csupurativo\201D e \201Cestrelado\201D, células gigantes de diferentes tipos, granulomas associados a tecido de granulação e abscessos não associado aos granulomas de forma significativamente mais freqüente do que a LC. Uma análise múltipla dessas alterações por regressão logística demonstrou que elas podem distinguir as duas doenças corretamente em cerca de 90% dos casos. Assim, o exame histopatológico pode fornecer informações importantes na condução do diagnóstico diferencial entre a LC e a esporotricose. A hiperplasia pseudoepiteliomatosa na LC pode simular um carcinoma de células escamosas / Cutaneous leishmaniasis (CL) is characte
rized by granulomatous lesions, often
ulcerated, and sporotrichosis
is an important differential
diagnosis. This study aimed
to determine histopathological changes that coul
d assist in this differentiation and to
report a case of CL which presented ex
uberant pseudoepitheliomatous hyperplasia
thas was mistaken for squamous cell carc
inoma. A study of histopathological
changes of 119 active cutaneous lesions of sporotrichosis in hematoxylin-eosin
stained slides was conduct
ed, and then a comparison
between the changes in 171
CL and 97 sporotrichosis active lesions
in which the microorgani
sm was not found on
histopathological examination.
All cases were diagnosed by is
olation of the agent in
culture. Sporotrichosis was
histopathologically characteri
zed by a diffuse suppurative
granulomatous dermatitis with necrosis.
CL showed granuloma of "Montenegro
clearing" and "tuberculoid" types
and degeneration of
extracellular matrix significantly
more frequent than sporotrichosis. Sporotrichosis presented granulomas of
"suppurative" and "stellate" types, giant cells of different types, granulomas
associated with granulati
on tissue, and abscesses not associated with granulomas
significantly more frequent than CL. A multip
le analysis of these changes by logistic
regression demonstrated that they can correctly
distinguish the two diseases in about
90% of cases. Thus, the histopathologic
al examination can provide important
information in guiding the differential
diagnosis between CL and sporotrichosis.
Pseudoepitheliomatous hyperplasia in CL
can mimic squamous cell carcinoma
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Estudo molecular da Febre Maculosa Brasileira no diagnóstico diferencial com Dengue no Estado do Rio de Janeiro durante o período de 2010 a 2011Monteiro, Kerla Joeline Lima January 2014 (has links)
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Previous issue date: 2015-06-10 / Fundação Oswaldo Cruz. Instituto Oswaldo Cruz. Rio de Janeiro, RJ, Brasil / Doenças febris agudas são comuns e frequentemente associadas com agentes infecciosos em países tropicais como o Brasil. Com manifestações clínicas inespecíficas de difícil diferenciação com uma série de doenças endêmicas como dengue, leptospirose e outras doenças fatais, a febre maculosa brasileira (FMB) raramente tem sido considerada no diagnóstico, fato que, com o consequente retardo no tratamento antimicrobiano específico, tem determinado a elevada letalidade frequentemente observada em nosso país. A dengue é uma das doenças infecciosas mais importantes e frequentes no Brasil, onde epidemias são relatadas periodicamente no estado do Rio de Janeiro. Durante surtos de dengue, a possibilidade de erros no diagnóstico, devido à semelhança clínica, é uma realidade e a FMB deve ser considerada no diagnóstico diferencial de pacientes com febre, cefaleia e exantema. Neste contexto, considerando a hipótese de que a FMB, uma zoonose negligenciada transmitida por carrapatos, por falta de suspeita clínica, possa não ter sido identificada durante o surto de dengue ocorrido nos anos de 2010-2011, um estudo retrospectivo foi realizado com base em dados secundários e em amostras acondicionadas em laboratório de saúde pública
Amostras de sangue de pacientes com suspeita de dengue, mas que foram descartadas sorologicamente para dengue durante o período de janeiro de 2010 a junho de 2011, no estado do Rio de Janeiro, foram submetidas à amplificação por PCR usando primers rickettsianos específicos para genes gltA e rOmpA. A partir dos critérios de elegibilidade preconizados, somente 319 amostras, dos 4.343 casos identificados, foram submetidas à pesquisa de FMB. Rickettsia rickettsii foi identificada em dois casos fatais no município do Rio de Janeiro e ambos pacientes apresentavam quadro clínico inespecífico sem exantema, cujo óbito ocorreu antes do sétimo dia de doença. Estes resultados comprovam a importância de incluir a FMB no diagnóstico diferencial da dengue, especialmente em regiões onde têm sido relatados casos desta zoonose, cuja letalidade é elevada, na ausência de tratamento específico precoce / Acute febrile disease
s are common and often associated with infectious agents in tropical
countries such as Brazil. With nonspecific clinical manifestations and hard to differentiate
with a number of endemic disea
ses such as dengue, leptospirosis
,
and other fatal diseases,
Brazilian S
potted
F
ever (BSF) has rarely been considered in the diagnosis, fact that with
the consequent delay in the specific antimicrobial treatment,
has determined
high lethality
often observe
d in our country. Dengue is one of the most important and frequent infectious
diseases in Brazil, where epidemics are reported periodically in the State of Rio de Janeiro.
During dengue fever outbreaks, the possibility of errors in diagnosis d
ue to clinica
l
similarity, BSF
should be considered in the differential diagnosis of patients with fever,
headache
,
and rash. In this context, considering the hypothesis that
BSF
, a neglected
zoonosis transmitted by ticks, for lack of clinical suspicion, may not have b
een identified
during the
dengue
outbreak occurred in the years 2010
-
2011, a retrospective study
was
performed
based on secondary data and samples placed in public health laboratory.
Blood
samples from
patients with suspected dengue
that
were
serologically
discarded during the
period
of
January
2010
to June 2011 in the state of Rio de Janeiro, were subjected to PCR
amplification using specific
rickettsial
primers for gltA and rOmpA
genes
. From the
eligibility criteria preconi
z
ed, only
3
19
samples of 4,319 c
ases
identified
were submitted to
BSF
research
.
Rickettsia rickettsii
was identified in two fatal cases in the city of Rio de
Janeiro and both patients had nonspecific clinical picture without rash, whose death
occurred before the seventh day of illness.
T
hese results demonstrate the importance of
including
BSF
in the differential diagnosis of dengue, specially in regions where cases of
this zoonotic disease
have been reported
, whose
lethality
is high in the absence of early
specific treatment
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A heterogeneidade dos isolados silvestres de Trypanosoma Cruzi (zimodema III) expressa pelo perfil de suas glicoproteínas de superfícieKikuchi, Simone Akemi January 2014 (has links)
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Previous issue date: 2016-02-23 / Fundação Oswaldo Cruz. Instituto Oswaldo Cruz. Rio de Janeiro, RJ, Brasil / A doença de Chagas é uma doença tropical negligenciada que atinge principalmente a América Latina. Trypanosoma cruzi, agente etiológico desta enfermidade, é largamente distribuído no continente americano e apresenta uma grande variabilidade fenotípica e genotípica em suas cepas. Os fatores que determinam as diferentes formas clínicas da doença, assim como as razões pela qual uma cepa apresenta tropismo diferenciado não estão claros. De forma semelhante, a correlação entre a variabilidade genética do parasito, sua relação com o desenvolvimento clínico da doença, assim como sua distribuição geográfica também não está bem estabelecida. Estas observações associadas com a variabilidade na resposta ao tratamento conduzem ao fato de que este cenário complexo, possivelmente, será mais bem entendido quando houver uma completa caracterização do parasito e o entendimento da relação parasito-hospedeiro na doença de Chagas. Desta forma, com o objetivo de estudar esta diversidade, caracterizações de populações deste parasito têm sido realizadas através de técnicas biológicas, bioquímicas e moleculares tentando associar determinado grupo de parasito a um determinado perfil epidemiológico. Neste estudo, foram utilizados parâmetros moleculares e bioquímicos para caracterização de amostras de T.cruzi isolados silvestres de Triatoma vitticeps do município de Santa Maria Madalena (Rio de Janeiro) e cepas da Amazônia (Manaus e Barcelos). Estudos baseados no perfil eletroforético de isoenzimas, propuseram que o T.cruzi fosse classificado em 3 zimodemas (ZI, ZII e ZIII). Posteriormente, através de diversas técnicas de biologia molecular,classificou-se as cepas em duas grandes linhagens filogenéticas: T.cruzi I (que se correlaciona ao ZI) e T.cruzi II (que se correlaciona ao ZII)
Dados ecológicos e moleculares sugerem que as cepas pertencentes ao ZIII estejam mais relacionadas a T. cruzi I do que T. cruzi II, mas na realidade a posição de ZIII permanece controversa. A diversidade encontrada entre os isolados, bem como entre estes e cepas já estabelecidas nos leva a indagações sobre as moléculas de superfície destas populações e de que forma estas poderiam influenciar na interação parasito-hospedeiro. Este trabalho tem como objetivo principal definir o mapa de proteínas solúveis das cepas e isolados pertencentes ao ZIII ressaltando as diferenças existentes. Desta forma, buscamos analisar as os mapas proteícos, perfil de proteases e estudar a expressão de glicoproteínas de superfície (Gp 82, Gp 35/50, Gp 90) destes isolados de T. cruzi (ZIII) (epimastigota e tripomastigota) obtidos de triatomíneos silvestres. Para isto foram utilizadas as técnicas de eletroforese bidimensional e espectrometria de massa. Foi feita a padronização de protocolos para a obtenção de extratos protéicos das formas epimastigotas e da separação das proteínas por eletroforese bidimensional. Os ensaios realizados na faixa de pH 3-10, revelaram uma grande diversidade de spots. Entretanto, quando a faixa de pH foi diminuida (4-7) houve um aumento no número de spots revelados. Uma diversidade considerável na expressão de proteína bem como na intensidade de vários spots também foi observada entre as cepas e isolados estudadas. Experimentos de western blot e citometria de fluxo mostraram uma expressão diferencial das gps nos diferentes isolados. Esses resultados contribuem para o conhecimento e registro do perfil de alguns isolados silvestres de T. cruzi em regiões ainda não acometidas pela doença. Nossos resultados apontaram uma heterogeneidade destes isolados de T. cruzi relacionados à biologia e expressão diferencial de enzimas de superfície / Chagas disease is a neglected tropical disease
which
affects mainly Latin America.
Trypanosoma cruzi
, the etiologic agent
of Chagas disease, is widely distributed in the
American continent.
The factors that determine the different clinical forms of the
disease, as well as the reasons why one strain shows differential tropism are not clear.
Similarly, the correlation between
the genetic variability of the parasite, its relationship
with the clinical development of the disease, as well as their geographical distribution is
also not well established.
Genetical studies are important to clarify the intra
-
specific
heterogeneity of
the parasite, the study of the biological behavior and the host
-
parasite
relationships could clarify the importance of different strains, in the determination of
clinico
-
pathological manifestations of Chagas' disease. These observations associated
with the
variability in response to treatment leads to the fact that this complex scenario
possibly be better understood when there is a complete characterization of the parasite
and the understanding of host
-
parasite relationship in Chagas disease. Thus,
aiming t
o
study
aim of studying this diversity characterizations of populations of this parasite
have been done by biological, biochemical and molecular techniques trying to associate
certain group of a given parasite epidemiology. In this study, molecular and
bio
chemical parameters for the characterization of
T. cruzi
isolated from
Triatoma
vitticeps
municipality of Santa Maria Madalena (Rio de Janeiro) and strains of the
Amazon (Manaus and Barcelos) were used.
Studies based on enzyme electrophoresis
profile clust
ered
T.cruzi
isolates into 3 zymodemes (ZI, ZII and ZIII). Molecular
techniques showed a dimorphism among the isolates, grouping them into
T.cruzi
I
(related to ZI) and
T.cruzi
II (related to ZII). Ecological and molecular data suggest that
ZIII strains ar
e more related to
T. cruzi I
than
T. cruzi II
, but their exact phylogeny is an
unresolved issue. This work aims to define the map of soluble proteins of strains and
isolates belonging to ZIII highlighting the differences.
The diversity found among
isolates
, as well as between them and established strains leads to questions about the
surface molecules of these populations and how these could influence the host
-
parasite
interaction.
Thus, we seek to analyze the protein maps, profile of proteases and study
the
expression of surface glycoproteins (Gp 82, Gp 35/50, Gp 90) of these isolates of
T.
cruzi
(ZIII) (epimastigote and trypomastigote) obtained
from silvatic
triatomine
s
. To
this end the techniques of two
-
dimensional electrophoresis and mass spectrometry wer
e
used. The present work describes the standardization of a protocol in order to obtain
reproducible extraction and separation of soluble proteins using two dimensional gel
electrophoresis from different ZIII strains. The experiments carried out in pH 3
-
10
,
revealed a great diversity of spots . Further separation using a narrow pH range (4
-
7)
showed an increase in number of spots.
A considerable diversity in protein expression
as well as the intensity of various spots was also observed between the strains a
nd
isolates studied.
Experiments western blot and flow cytometry showed a differential
expression of the different GPS isolated. These results contribute to the knowledge and
record of some wild isolates of
T. cruzi
in areas not yet affected by the disease
profile.
Our results showed a heterogeneity of isolates of
T. cruzi
biology and related
differential expression of enzymes surface.
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