A habilidade de se preparar para futuros eventos é essencial para o comportamento. No presente trabalho, investigamos como diferentes formas de expectativa temporal podem modular o processamento de estímulos sensoriais. Por meio de 4 experimentos psicofísicos, sendo 2 com registro eletroencefalográfico (EEG) concomitante, nós estudamos o efeito da ação motora voluntária e da expectativa temporal em diferentes estágios do processamento sensorial. Nossos resultados sugerem que mecanismos ligados à preparação motora influenciam a percepção temporal das consequências desta ação. Além disso, nossos resultados mostraram que a atenção temporal pode modular estágios motores e sensoriais do processamento. Em conjunto, nossos resultados sugerem que expectativas temporais podem influenciar diferentes estágios do processamento principalmente por meio do controle de excitabilidade cortical de regiões do sistema nervoso central ligadas àquela tarefa. / The ability to anticipate future events is essential for behavior. On the present work, we investigated how different forms of temporal expectations can modulate stimuli processing. In four psychophysical experiments (two of them with EEG) we studied how voluntary action and temporal attention can influence processing at different stages. Our results suggest that mechanisms related to motor preparation can bias the temporal perception of the consequences of this action. Moreover, we found that temporal attention can modulate perceptual and motor stages of stimulus processing. Altogether, our results suggest that temporal expectations can influence different levels of target processing, mainly by controlling cortical excitability of task-relevant regions of the central nervous system.

Tese (doutorado) - Universidade Federal de Santa Catarina, Centro de Ciências da Saúde, Programa de Pós-Graduação em Farmácia, Florianópolis, 2009. / Made available in DSpace on 2012-10-24T16:38:49Z (GMT). No. of bitstreams: 1 265413.pdf: 3730048 bytes, checksum: f61fcefd12bae9a7111b586b424409ab (MD5) / Hormônios esteróides, vitamina D, retinóides e hormônios da tireóide estimulam respostas celulares através de mecanismos genômicos e não-genômicos. No presente trabalho, hormônios com ação genômica: Tiroxina (T4) e 1?,25-diidróxivitamina D3 (1?,25(OH)2D3 ou 1,25D), foram estudados sob o ponto de vista não-genômico através de dois diferentes sistemas de membrana plasmática: transporte de aminoácidos em testículos de ratos e fluxo de cloreto em células de Sertoli TM4. As células de Sertoli de testículos de mamíferos são células secretoras que além de proteínas, nutrientes e fatores de crescimento, secretam um fluido rico em cloreto (Cl-) e potássio (K+) no lúmen dos túbulos seminíferos que são críticos para espermatogênese. Primeiramente, os resultados desse trabalho demonstraram que os canais de Ca2+ e os canais de K+ dependentes de ATP (K+ATP) são requeridos para o efeito estimulatório do hormônio T4 no transporte de aminoácidos em testículos de ratos imaturos. Além disso, os canais de Cl- e os canais de K+ dependentes da baixa condutância de Ca2+ (SKCa) estão parcialmente envolvidos nesse mecanismo. Esse efeito não-genômico do T4 é dependente da proteína cinase C (PKC) e aponta o T4 como um importante regulador metabólico da função testicular. Posteriormente foi demonstrado o efeito estimulatório da 1,25D no transporte de aminoácidos em testículo de ratos de uma forma dependente da concentração, dependente da idade e específico para esse hormônio. O requerimento dos canais de Ca2+, dos canais SKCa, da proteína cinase A (PKA) e da síntese de proteínas indicam efeitos rápidos e prolongados da 1,25D nesse mecanismo. Através de estudos eletrofisiológicos foi demonstrado que a 1,25D aumenta a permeabilidade ao íon cloreto na membrana plasmática de células de Sertoli TM4 em potenciais despolarizantes através do receptor VDR (receptor de vitamina D) e de uma forma dependente das proteínas PKA e PKC. Com a utilização de análogos esteróis da vitamina D (VDS) específicos para o estudo de respostas não-genômicas, células TM4 individuais foram tratadas com diferentes VDS, 1,25D e 25-diidróxivitamina D3 (25D) (metabólitos naturais); 1?,25(OH)2-lumisterol D3 (JN; agonista não-genômico), e/ou 1?,25(OH)2-vitamin D3 (HL; antagonista não-genômico). Os resultados demonstraram que: 1) 1,25D, 25D e JN são agonistas no estímulo da permeabilidade ao Cl-; 2) HL bloqueia o efeito desses agonistas confirmando a presença de um VDR alternativo de membrana (VDRmem ou VDR-AP). Experimentos de capacitância celular e videomicroscopia demonstraram que a 1,25D estimula processos secretórios em células TM4 importantes para a função reprodutiva. Ensaios de ligação hormônio-receptor e análises computacionais demonstraram que dois curcuminóides, a curcumina (CM) e a bisdemetóxicurcumina (BDC), polifenóis ativos da planta turmérica, se ligam com alta afinidade ao VDR e mais favoravelmente ao VDR-AP. Dessa forma, para verificar a especificidade de ação da 1,25D no VDR-AP, o efeito da CM e da BDC foi testado nas correntes de Cl- em células TM4. Em baixas concentrações, CM e BDC demonstraram um mecanismo de ação similar a 1,25D no aumento da permeabilidade ao íon Cl-. Em altas concentrações, CM e BDC parecem ativar correntes de Cl- através dos canais de cloreto reguladores da condutância transmembrana da fibrose cística (CFTR). Os dados obtidos com esse trabalho contribuem para o entendimento de novas vias de ação nas células de Sertoli desencadeadas por hormônios e substâncias relacionadas importantes para a homeostasia endócrina e exócrina do testículo.

Tese (doutorado) - Universidade Federal de Santa Catarina, Centro de Ciências Biológicas, Programa de Pós-Graduação em Farmacologia, Florianópolis, 2015. / Made available in DSpace on 2015-10-27T03:10:06Z (GMT). No. of bitstreams: 1 335688.pdf: 3214575 bytes, checksum: 5b217a51db5b79e383c2c7b3b7e13e8d (MD5) Previous issue date: 2015 / estriado dorsolateral (EDL) é uma estrutura encefálica envolvida com o processamento de funções motoras, cognitivas e emocionais, que na doença de Parkinson (DP) ela sofre degeneração de neurônios dopaminérgicos. Esta degeneração dopaminérgica nigroestriatal também afeta outras áreas do cérebro, incluindo o córtex pré-frontal (CPF), que tem sido associado com o aparecimento dos sintomas cognitivos em fases pré-motoras da DP. No presente trabalho, utilizou-se abordagens comportamentais, neuroquímicas e eletrofisiológicas para investigar a dissociação temporal (7 ou 21 dias) entre o papel do EDL e do CPF no aparecimento de comportamentos relacionados à anedonia e à depressão em ratos submetidos à lesões bilaterais do EDL com 6-hidroxidopamina (6-OHDA). A administração de 6-OHDA gerou uma degeneração parcial de neurônios dopaminérgicos na via nigroestriatal induzindo prejuízos motores na maior dose testada (20 µg/sítio de injeção). No entanto, as doses mais baixas de 6-OHDA (5 e 10 µg/sítio de injeção) não induziram prejuízos das funções motoras. Comportamentos relacionados à anedonia foram observados no teste do esguicho e no teste do consumo de sacarose 7 dias após a lesão com 6-OHDA. Em contrapartida, alterações nos comportamentos relacionados à depressão avaliados nos testes da natação forçada e da interação social só foram evidentes 21 dias após a lesão com 6-OHDA, quando os comportamentos relacionados à anedonia não estavam mais presentes. Essa dissociação temporal nos prejuízos comportamentais apresentados foi relacionada a alterações dependentes do tempo e da estrutura encefálica (EDL ou CPF) em marcadores dopaminérgicos, como os receptores D1 (D1R) e D2 (D2R) para a dopamina e o transportador de dopamina (DAT). Os resultados eletrofisiológicos mostraram alterações dependentes do tempo na sensibilidade de neurônios do EDL e no CPF à dopamina que podem estar associadas às alterações comportamentais e neuroquímicas induzidas pela 6-OHDA. O tratamento durante 7 ou 21 dias com fluoxetina (10 mg/kg), bupropiona (10 mg/kg) ou quinpirole (0,1 m/kg) preveniu o aparecimento dos comportamentos relacionados à anedonia e à depressão induzidos pela 6-OHDA. Esses resultados fornecem a primeira demonstração de um envolvimento dissociado do EDL e do CPF em comportamentos relacionados à anedonia e à depressão, respectivamente em ratos submetidos a um modelo animal da DP. As flutuações temporais na densidade de receptores dopaminérgicos12e na sua funcionalidade podem conduzir a alterações na sensibilidade do sistema dopaminérgico nestas duas estruturas cerebrais. Os resultados do presente trabalho são inovadores, pois desvendam alguns mecanismos relacionados ao sistema dopaminérgico que podem estar envolvidos com a dualidade entre os sintomas depressivos e anedônicos na DP.<br> / Abstract : dorsolateral striatum (DLS) processes motor and non-motor functions and undergoes extensive dopaminergic degeneration in Parkinson`s disease (PD). This nigrostriatal dopaminergic degeneration also affects other brain areas including the prefrontal cortex (PFC), which has been associated with the appearance of non-motor symptoms of PD. Using behavioral, neurochemical and electrophysiological approaches, we investigated the temporal dissociation (7 or 21 days) between the role of the DLS and PFC in the appearance of anhedonia and helplessness behavior in rats submitted to bilateral DLS lesions with 6-hydroxydopamine (6-OHDA). The 6-OHDA induced a partial dopaminergic nigrostriatal damage with motor impairments being observed only at the highest tested dose (20 µg/site). However, the lower 6-OHDA doses (5 and 10 µg/site) did not induce such impairments. Anhedonic-like behaviors were observed in the splash and sucrose consumption tests at 7 days after 6-OHDA lesion. In contrast, helplessness behaviors, as evaluated in the forced swimming and social interaction tests only emerged 21 days after 6-OHDA lesion when anhedonia was no longer present. These temporally dissociated behavioral alterations were coupled to temporal- and structure-dependent alterations in dopaminergic markers such as dopamine D1 and D2 receptors and dopamine transporter (DAT), leading to altered dopamine sensitivity in DLS and PFC circuits, evaluated electrophysiologically. Treatments during 7 or 21 days with fluoxetine (10 mg/kg), bupropion (10 mg/kg) or quinpirole (0.1 mg/kg) prevented the onset of impairments in anhedonic-like and helpless behaviors. These results provide the first demonstration of a dissociated involvement of the DLS and PFC in anhedonic- and helplessness behaviors in an animal model of PD, which was linked with temporal fluctuations in density and functionality of dopaminergic receptors. Leading to altered dopaminergic system sensitivity in these two brain structures. This study sheds new light to the duality between depressive and anhedonic symptoms in PD.

As células do cumulus oophorus são firmemente conectadas umas às outras e ao oócito e participam ativamente do amadurecimento oocitário. Essas células apresentam abundância de receptores para o FSH. Os carboidratos da molécula do FSH podem terminar em resíduos de ácido siálico, permitindo que ele exista em numerosas isoformas. As isoformas mais ácidas do FSH contêm mais resíduos de ácido siálico. Os níveis dessas isoformas variam na fase folicular do ciclo menstrual e possuem diferentes capacidades de estímulo ovariano, sendo as menos ácidas mais potentes e de curta meia-vida plasmática. Objetivo: padronizar a técnica de registro eletrofisiológico intracelular para as células do cumulus oophorus humanas e verificar a ação de uma isoforma menos ácida do FSH, a Folitropina Beta (Puregon®) sobre o potencial de membrana dessas células, comparando com a ação de um FSH com menor grau de pureza e mais ácido (FSH ovino). Metodologia: o potencial de membrana foi registrado utilizando células de cumulus oophorus de pacientes encaminhadas ao procedimento de injeção intracitoplasmática de espermatozóides (ICSI). As células do cumulus foram cultivadas em placas de cultura com meio HTF (Life Global® - Guilford, CT USA) acrescido de 10% de Soro Sintético (SSS- Life Global® - Guilford, CT USA) por 24 a 48 horas. Durante o experimento eletrofisiológico, a placa foi perfundida com o fluxo de 1 mL/min de meio de Hank´s acrescido de Hepes com 10% de Soro Sintético (SSS- Life Global® - Guilford, CT USA) mantido a 37º C. O registro intracelular foi realizado com microeletrodos preenchidos com KCl 3 M com uma resistência de 15 a 25 MΩ e acoplados a um eletrômetro. A resistência da membrana ao fluxo de cargas foi avaliada com a aplicação de pulsos quadrados de corrente (0,5 nA, 0,5 Hz e 200 ms) através do eletrodo de registro. Os hormônios testados (FSH ovino e Folitropina Beta) foram aplicados topicamente na placa. Para a análise estatística foi utilizado o teste de Anova de duas vias (seguido do pós-teste de Bonferroni) ou o teste exato de Fischer. Resultados: Foi realizada a padronização da técnica de registro eletrofisiológico para as células do cumulus e o potencial de membrana médio em repouso obtido foi de -34,02 mV, com desvio-padrão de ± 6,46 e erro-padrão da média de ± 2,04. A resistência média das membranas ao fluxo de íons foi de 16,5 MΩ, com desvio-padrão de ± 4,03 e erro-padrão da média de ± 1,8. A aplicação do FSH Ovino (1 μM) causou uma lenta despolarização, estatisticamente significativa 180 segundos após a aplicação do hormônio (P<0,01). A aplicação da Folitropina Beta (Puregon® 1 μM) causou uma lenta despolarização, estatisticamente significativa 120 e 180 segundos após a aplicação do hormônio (P<0,001). O padrão de despolarização foi semelhante entre as duas isoformas, sendo o efeito da Folitropina Beta mais imediato que o do FSH Ovino aos 120 segundos. Conclusões: A partir da padronização da técnica de registro eletrofisiológico intracelular para as células do cumulus oophorus humanas, registrou-se o potencial médio de membrana em repouso (-34,02 mV) e a resistência média da membrana ao fluxo de íons (16,5 MΩ). O FSH Ovino (1 μM) e a Folitropina Beta (Puregon®) (1 μM) possuem uma ação despolarizante sobre o potencial de membrana das células do cumulus. Para o FSH Ovino, essa despolarização foi significativa 180 segundos após a aplicação do hormônio e para a Folitropina Beta, a despolarização foi significativa já aos 120 segundos após a aplicação. Há uma semelhança no padrão de despolarização produzida pelo FSH Ovino e pela Folitropina Beta. Um melhor entendimento das diferenças no funcionamento das isoformas do FSH pode proporcionar o desenvolvimento de melhores protocolos de tratamento para as pacientes, com menos efeitos colaterais. Esse conhecimento também pode ser utilizado para o aprimoramento das técnicas de maturação in vitro dos oócitos, que podem poupar as pacientes dos efeitos colaterais e dos altos custos da estimulação exógena com gonadotrofinas. / The cumulus oophorus cells are firmly connected to each other and to the oocyte and they take an important part on the oocyte maturation. These cells present numerous FSH receptors. The carbohydrates present in the FSH molecule may end in sialic acid residues, allowing FSH to exist in various isoforms. The more acidic isoforms present more sialic acid residues in their carbohydrate moieties. These isoforms exhibit fluctuations in the follicular phase of the menstrual cycle and possess different capabilities of ovarian stimulation, with the least acidic isoform having higher potency and lower plasmatic half-life. Objective: The aim of this study was to standardize the intracellular electrophysiology register technique to the human cumulus oophorus cells and to investigate the membrane potential action of a less acidic FSH isoform (Puregon™), comparing with the membrane action using a less purified, more acidic FSH isoform (sheep FSH). Methods: The membrane potential was registered in cumulus oophorus cells from patients assigned to the intracytoplasmatic sperm injection (ICSI) technique. The cumulus cells were cultured in plates with HTF medium for 24 to 48 hours. During the electrophysiological experiment, the plate was superfused with 1 mL/min of Hank`s medium supplemented with Hepes, maintained at 37º C. The intracellular register was performed with microcapillaries filled with 3 M KCl with resistance ranging between 15 and 25 MΩ, and coupled to an electrometer. The membrane resistance to the ion flow was assessed by the application of square current pulses (0,5 nA, 0,5 Hz and 200 ms) through the register electrode. The tested hormones (sheep FSH and Beta Follitropin Puregon™) were applied topically onto the plate. Statistical analysis was performed using the ANOVA test for repeated measures (with Bonferroni post-test) or Fischer´s exact test. Results: the standardization of the electrophysiological register technique for the cumulus cells was successfully achieved and the mean resting membrane potential obtained was -34,02 ± 2,04 mV (SEM). The mean resistance of the membrane to the ion flow was 16,5 ± 1,8 MΩ (SEM). The sheep FSH application (1 μM) led to a slow depolarization, statistically significant 180 seconds after the hormone application (P<0,01). Beta Follitropin administration (1 μM) led to a slow depolarization, statistically significant 120 and 180 seconds after the hormone application (P<0,001). The depolarization pattern was similar between both isoforms, being that Beta Follitropin`s effect was more immediate than sheep FSH`s. Conclusion: With the electrophysiological intracellular register technique standardization to the human cumulus cells, the mean resting membrane potential was registered (-34,02 mV) and the mean membrane resistance to the ion flow was obtained (16,5 MΩ). Sheep FSH (1 μM) and Beta Follitropin (Puregon™) (1 μM) prompted a depolarizing action in the membrane potential of cumulus cells. Sheep FSH depolarization was significant at 180 seconds after the hormone application and Beta Follitropin depolarization was significant at 120 seconds after its application. Both isohormones have similar depolarization patterns. A better understanding of the differences in the action of both FSH isoforms shall make it possible to develop better hormone induction protocols in fertility treatments, with less side effects for the patients. This knowledge will potencially also make it possible to improve the in vitro oocyte maturation techniques, sparing patients of the hormone treatment side effects and of the high financial costs of the exogenous gonadotrophins administration.

Objetivo: Caracterizar as respostas do Mismatch Negativity (MMN) em crianças com limiares auditivos dentro dos padrões de normalidades e sem queixas auditivas. Métodos: Estudo do tipo transversal. Participaram desta pesquisa crianças de cinco a onze anos, sem queixas auditivas. Todos os participantes realizaram avaliação audiológica periférica com medidas de imitância acústica, audiometria tonal e audiometria vocal previamente à realização do MMN. Para a execução do procedimento eletrofisiológico, MMN, foi utilizado o equipamento Masbe ATC Plus da marca Contronic. Os eletrodos foram fixados nas posições Fpz (eletrodo ativo), M1 e M2 (eletrodos referência) e na fronte (eletrodo terra). A intensidade utilizada para evocar o potencial foi de 80 dBNA, o estímulo frequente utilizado foi de 1.000 Hz e o estímulo raro de 2.000 Hz. Os estímulos foram apresentados em ambas as orelhas de modo monoaural. As crianças realizaram a avaliação sentadas e foram condicionadas a assistirem a um vídeo sem som, no tablet, enquanto o procedimento era realizado. Resultados: Para o grupo feminino, a média das latências e amplitudes foi de 177,3 ms e 5,01 μV na orelha direita e de 182,4 ms e 5,39 μV na orelha esquerda. Quanto ao grupo masculino, a média das latências foi de 194,4 ms na orelha direita e 183,6 ms na orelha esquerda, com amplitude de 5,11 μV na orelha direita e 5,83 μV na orelha esquerda. Não houve diferença estatisticamente significante nos valores de latência e amplitude entre orelhas (p=0,867 e p=0,178), idade (p>0,20) e sexo dos participantes (p>0,05). Conclusão: Os valores encontrados nas latências e amplitudes do potencial MMN são semelhantes aos observados na literatura científica compulsada, em crianças com desenvolvimento típico e sem queixas auditivas. / Aim: To characterize the answers of Mismatch Negativity (MMN) in children with hearing thresholds within the normality patterns and without auditory complaints. Methods: Transversal type study. Children between 5 and 11 years old without auditory complaints have participated in this research. All the participants have done peripheral audiological evaluation with acoustic immittance measures, tonal audiometry and vocal audiometry previously to MMN execution. To perform the electrophysiological procedure, MMN, it was used Masbe ATC Plus equipment from Contronic brand. The electrodes were fixed in Fpz (active electrode), M1 and M2 (reference electrodes) and front (earth electrode) positions. The intensity used to evoke the potential was 80 dBNA, the frequent stimulus used was 1.000 Hz and the rare stimulus was 2.000 Hz. The stimuli were presented in both ears monoaurally. Children performed the assessment sat and they were conditioned to watch a video without sound, on a tablet computer, while the procedure was performed. Results: For the female group, the average of the latencies and amplitudes was 177,3 ms and 5,01 μV for the right ear and 182,4 ms and 5,39 μV for the left ear. Regarding the male group, the average of latencies was 194,4 ms for the right ear and 183,6 ms for the left ear, with an amplitude of 5,11 μV for the right ear and 5,83 μV for the left ear. There was no significant statistically difference for the values of latency and amplitude among ears (p=0,867 and p=0,178), age (p>0,20) and gender of the participants (p>0,05). Conclusion: The values found in the latencies and amplitudes of MMN potential are similar to those observed in the scientific literature examined, in children with typical development and without auditory complaints.

Submitted by ROBERTO PAULO CORREIA DE ARAÚJO (ppgorgsistem@ufba.br) on 2015-07-17T19:22:01Z No. of bitstreams: 1 OLIVEIRA, Conceição Silva.pdf: 1607931 bytes, checksum: 047430f4a4dd8a0a588c2a6998e7d9c4 (MD5) / Made available in DSpace on 2015-07-17T19:22:01Z (GMT). No. of bitstreams: 1 OLIVEIRA, Conceição Silva.pdf: 1607931 bytes, checksum: 047430f4a4dd8a0a588c2a6998e7d9c4 (MD5) / Coordenação de Aperfeiçoamento de Pessoal de Nível Superior (CAPES) / A síndrome de Turner (ST) é uma doença genética rara, com variabilidade genotípica e fenotípica que afeta de 1:2000 a 1:5000 meninas nascidas vivas. Mulheres com ST apresentam alta incidência de problemas auditivos. Fatores genéticos, deficiência de estrógeno ou uma combinação de ambos, fazem com que as mulheres com ST necessitem de próteses auditivas no início da vida. Essas mulheres também podem apresentar latências do potencial evocado auditivo de tronco encefálico (PEATE) mais longas e ausência de emissões otoacústicas evocadas. Por isso, o acompanhamento audiológico e eletrofisiológico é fundamental. Tema: Avaliação dos potenciais evocados auditivos do tronco encefálico e das emissões otoacústicas evocadas transientes em pacientes com ST. Objetivo: Descrever os achados do PEATE e os resultados das Emissões Otoacústicas Evocadas Transientes (EOAET) em pacientes com ST. Avaliar as latências absolutas das ondas I, III e V, os intervalos interpicos I-III, III-V e I-V e latência interaural; verificar as associações da reposição de estrógeno e do cariótipo com as latências das ondas; e analisar as associações da reposição de estrógeno e do cariótipo com as respostas das EOAET. Método: Estudo de corte transversal, de natureza quantitativa, envolvendo amostra de conveniência constituída por 30 pacientes com ST. As pacientes foram submetidas a um questionário e a uma avaliação eletrofisiológica (PEATE e EOAET). A análise estatística foi realizada com tabelas de contingência bidimensionais, teste de qui-quadrado de G2 e por estatística V de Cramer. As ANOVA foram realizadas através do teste de Shapiro-Wilk e dos coeficientes de assimetria e curtose. Em todas as análises foi adotado o nível de significância de 5% (α=0,05). Resultados: A média de idade das pacientes foi 18,4 (7-29) anos. Das 30 pacientes, 23 (76,7%) foram submetidas à reposição de estrógeno e 18 (60%) tinham o cariótipo 45,X. Perda auditiva estava presente em 33,3% na orelha direita e em 26,7% na orelha esquerda. Não houve associação do cariótipo com as latências absolutas e interpicos das ondas do PEATE. Houve associação entre o aumento das médias da latência interpico III-V (p<0,01) e da latência interpico I-V (p<0,05) da orelha esquerda com o tratamento com estrógeno. Nas EOAET observou-se ausência de resposta em 18,5% na orelha direita e 22,2% na orelha esquerda. No cariótipo 45,X notou-se que 80,0% dos casos na orelha direita e 73,3% na orelha esquerda tiveram EOAET presentes enquanto no mosaicismo esse percentual foi de 83,3%. Houve associação positiva entre o estrógeno e a presença das emissões (p<0,05) na orelha direita. Conclusão: Existiu associação da reposição de estrógeno com o aumento das latências interpicos III-V e I-V da orelha esquerda. As latências interpicos I-III e III-V das ondas do PEATE foram maiores nas pacientes com ST do que as latências do padrão de referência utilizado. Não houve associação entre o cariótipo e as latências absolutas e interpicos das ondas do PEATE. Houve associação entre as EOAET da orelha direita e o tratamento com estrógeno. Não houve correlação do cariótipo com as respostas das EOAET, porém verificouse uma maior proporção de “falha” nas pacientes com o cariótipo clássico 45,X. / Turner syndrome (TS) is a rare genetic disease with genotypic and phenotypic variability that affects 1:2000 to 1:5000 live born girls. Women with TS have a high incidence of hearing problems. Genetic factors, estrogen deficiency or a combination of both make women with TS require hearing aids earlier in life. These women also may show longer latencies of auditory evoked potential brainstem response (ABR) and absence of evoked otoacoustic emissions. Therefore, the audiological and electrophysiological monitoring is essential. Topic: Evaluation of brainstem auditory evoked potential and transient evoked otoacoustic emissions in patients with TS. Objective: To describe the findings of ABR and the results of Transient Otoacoustic Emissions (TEOAE) in patients with TS; to evaluate the absolute latencies of waves I, III and V, interpeak intervals I-III, III-V and I-V and interaural latency; to assess associations of estrogen replacement and karyotype with wave latencies; and to analyze the associations of estrogen replacement therapy and karyotype with the TEOAE responses. Method: Cross-sectional quantitative study, involving a convenience sample of 30 patients with TS. The patients were submitted to a questionnaire and an electrophysiological assessment (BERA and TEOAE). Statistical analysis was performed with two-dimensional contingency tables, chi-square statistic test of G2 and with Cramer's V statistics. The ANOVA was performed using the Shapiro-Wilk test and the coefficients of skewness and kurtosis. In all analyzes, it was used a significance level of 5% (α = 0.05). Results: The mean age of the patients was 18.4 (7-29) years. Of the 30 patients, 23 (76.7%) underwent estrogen replacement therapy and 18 (60%) had a 45,X karyotype. Hearing loss was present in 33.3% in the right ear and 26.7% in the left ear. There was no association of karyotype with absolute latencies and interpeak of BAEPs waves. There was association between increased mean interpeak latency III-V (p <0.01) and I-V interpeak latency (p <0.05) in the left ear with estrogen treatment. The EOAET did not show response in 18.5% in the right ear and 22.2% in the left ear. In relation to 45,X karyotype, 80.0% of the cases in the right ear and 73.3% in the left ear had TEOAE present, while in mosaicism the percentage was 83.3%. There was a positive association between estrogen and the presence of emissions (p <0.05) in the right ear. Conclusion: There was an association of estrogen replacement with increased interpeak latencies III-V and I-V of the left ear. Interpeak latencies I-III and III-V of BAEP waves were higher in patients with ST than the latencies of the reference standard used. There was no association between karyotype and absolute latencies and interpeak of BAEPs waves. There was an association between the TEOAE of the right ear and estrogen treatment. There was no correlation of karyotype with TEOAE responses, but there was a higher proportion of "failure" in patients with classic 45,X karyotype.

Dissertação (mestrado) - Universidade Federal de Santa Catarina, Centro Tecnológico. Programa de Pós-Graduação em Engenharia Elétrica. / Made available in DSpace on 2012-10-20T23:51:48Z (GMT). No. of bitstreams: 1 197797.pdf: 2255402 bytes, checksum: 494813b7bc8c969551f46fe15046968f (MD5) / A aplicação de pulsos elétricos com fins terapêuticos, ou Eletroterapia, é uma técnica consolidada no tratamento de pacientes em reabilitação. Questões relacionadas à falta de critérios no ajuste dos parâmetros de estimulação interferem na qualidade da terapia, que na prática clínica fica a cargo da experiência do fisioterapeuta. O presente trabalho descreve o desenvolvimento de um Sistema de Eletroestimulação Informatizado (SEIN), para o tratamento de quadros patológicos associados à dor e à reabilitação neuromuscular, capaz de realizar a terapia e armazenar informações relacionadas ao tratamento de cada paciente em formulários eletrônicos personalizados, possibilitando ao profissional da saúde, um controle consciente quanto à metodologia de tratamento empregada. O SEIN, utiliza um software, chamado Sistema Gerenciador do Tratamento (SGT), que possui um banco de dados e uma interface para a realização efetiva da terapia, através do ajuste dos parâmetros de estimulação. Circuitos eletrônicos recebem os dados relacionados a estes parâmetros, e geram os sinais na forma de corrente elétrica, através de um microcontrolador PIC e um amplificador de potência. O SEIN, desenvolvido sob as normas IEC vigentes, gera nove tipos de correntes elétricas, com a amplitude máxima de 45 mA (em único canal). Dentro dos padrões normativos, os testes e ensaios realizados indicam que o SEIN possui segurança e funcionalidade para o uso clínico, sendo muitas de suas características técnicas significativamente vantajosas, frente aos eletroestimuladores existentes nos mercados nacional e internacional.

Tese (doutorado)—Universidade de Brasília, Instituto de Ciências Biológicas, Programa de Pós-Graduação em Biologia Animal, 2017. / Submitted by Raquel Almeida (raquel.df13@gmail.com) on 2017-10-25T11:17:38Z No. of bitstreams: 1 2017_HarryMoralesDuque.pdf: 4563170 bytes, checksum: c4e65c2f9e037eeb6f5786fa0c41a04a (MD5) / Approved for entry into archive by Raquel Viana (raquelviana@bce.unb.br) on 2017-10-30T19:39:37Z (GMT) No. of bitstreams: 1 2017_HarryMoralesDuque.pdf: 4563170 bytes, checksum: c4e65c2f9e037eeb6f5786fa0c41a04a (MD5) / Made available in DSpace on 2017-10-30T19:39:37Z (GMT). No. of bitstreams: 1 2017_HarryMoralesDuque.pdf: 4563170 bytes, checksum: c4e65c2f9e037eeb6f5786fa0c41a04a (MD5) Previous issue date: 2017-10-30 / Toxinas de escorpiões têm sido alvo de pesquisa dada suas propriedades farmacológicas. Estas toxinas agem sobre quatro tipos de canais iônicos (Na+ , K+ , Ca++ e Cl- ). As que agem sobre os canais iônicos para sódio (NaScTx) são divididas em dois grupos α- ou β-toxinas segundo seu alvo molecular dentro desses canais iônicos. As primeiras interferem na cinética de inativação e as do segundo grupo afetam a cinética de ativação do canal iônico alvo. Muitas destas toxinas já foram identificadas e testadas sobre diferentes alvos farmacológicos. A maioria é proveniente de escorpiões da família Buthidae, conhecidos como os escorpiões de relevância médica devido à capacidade toxica de sua peçonha. No entanto, ainda falta elucidar sobre toxinas das peçonhas de espécies potencialmente perigosas à saúde humana. A pesquisa de toxinas está sendo promissora para diversos estudos e desenvolvimento biotecnológico. Dado que a maioria age sobre canais iônicos, elas se tornam ferramentas para estudar interações ou mecanismos moleculares de ação desses alvos. Portanto, as toxinas podem favorecer direta ou indiretamente no desenvolvimento de estratégias para tratar, por exemplo, doenças como as canalopatias. Tityusobscurus é um escorpião que ocorre no norte do Brasil, onde acontecem acidentes por sua picada. Os componentes de sua peçonha estão sendo pesquisados e os alvos farmacológicos das NaScTxs descritas ainda não foram identificados. Neste trabalho, pela primeira vez, duas NaScTxs (To4 e To5) foram purificadas da peçonha de T. obscurus por cromatografia RP-HPLC, sequênciadas por in-sourcedecay ISD e por meio da biblioteca de cDNA previamente descrita. A validação do alvo molecular especifico destas toxinas foi realizada testando sete subtipos de canais iônicos humanos hNav1.1 – hNav1.7 usando a técnica eletrofisiológica de patch clamp. Adicionalmente, tentou-se expressar a toxina To5 heterólogamente em Escherichia coli, visando comparar a atividade eletrofisiológica desta com a nativa. Nossos resultados mostraram que tanto a To4, quanto a To5 são β-toxinas que afetam a ativação e correntes de todos os canais iônicos testados. Estas toxinas não mostraram algum efeito tipo α, assim, descarta-se a possibilidade de estas agirem sobre outro sitio destes canais testados. Futuros testes eletrofisiológicos poderão ser feitos sobre canais iônicos próprios de inseto, já que estas duas toxinas potencialmente agem nos dois grupos taxonômicos. Dada sua capacidade promiscua sobre os hNavs testados, as toxinas To4 e To5 mostram ser componentes virtualmente tóxicos da peçonha deste escorpião. Estes e outros componentes dessa peçonha tornam do T. obscurus, um escorpião potencialmente perigoso à saúde humana. / Scorpion toxins have been research targets due its pharmacological properties. They can target four ion-channels types (Na+ , K+ , Ca++ e Cl- ). Such toxins active on sodium channels (NaScTx) have two interaction points on them, thus being classified as α- or β-toxins. The first group interferes with the kinetic inactivation, and the second group affects the kinetic activation from sodium channels (Navs). Several toxins were identified and tested on pharmacological targets. Most of these are from Buthidae scorpion family, a taxonomic group considered as of medical relevance. It is necessary to elucidate toxins from potentially dangerous scorpion venom species yet not described. The toxins study is being promissory to diverse research and biotechnological development. Due that the most of them target on ion channels, they would become tools to ion channels interaction studies or action molecular mechanisms analysis of them. Thus, toxins could promote direct or indirectly the strategies development to treat, for example, diseases as channelopathies. Tityus obscurus scorpion from north of Brazil is cause of accidents for sting. Its venom components are being investigated, among them, the described NaScTxs do not have the target Navdefined. By first time, in this work, two T. obscurusNaScTxs (To4 e To5) were purified from venom by RP-HPLC chromatography, sequenced by in-source decay ISD and by cDNA library previously described. The specific molecular target validation was testing the human Navs (hNav1.1 – hNav1.7) by electrophysiological technique patch clamp. Additionally, To5 toxin was expressed in Escherichia coli to perform futures electrophysiological tests. Our results showed than To4 and To5 are β-toxins affecting the both activation and ionic currents from all hNavs isoforms tested. These toxins did not show α- activity discarding other possible target site on these hNavs. Electrophysiological tests on insect Navs are recommended because these toxins are potentially active on them. The promiscuous capacity of the To4 and To5 toxins on hNavs make of them compounds potentially toxic to humans. The T. obscurus venom would be potentially dangerous to human health.

Made available in DSpace on 2014-07-23T02:01:34Z (GMT). No. of bitstreams: 1 000459620-Texto+Completo-0.pdf: 5079443 bytes, checksum: 08c93370bfca9d36a99775d85a58b7d2 (MD5) Previous issue date: 2014 / The main goal of this work was to implement a microfabricated electrode system for in vitro neural stimulation and recording. The MEA biosensor structural characterization was obtained by optical and scanning electrical microscopy images. Qualitative analysis of the chemical composition was made through energy-dispersive X-ray spectroscopy. Analysis of the noise level was conducted by evaluating the RMS value of the potentials recorded with sensors filled with standard saline solution. An electronic interface between a MEA and a conventional data acquisition system with eight channels was constructed and performance tests of the built interface were conducted. Installation of a MEA commercial system was carried out and preliminary tests were performed by experimenting with rodent neuronal cell culture and brain slices. An attempt was made to adapt a conventional perfusion system by peristaltic pump to the MEA system; however, the results were unsatisfactory due to the high noise level of the recordings. Experimental procedures related to the proper handling of MEAs were defined, and the influence of different parameters involved in experimentation with MEAs was investigated. Finally, the data analysis of cell culture recordings indicated detection of local field potentials (LFPs) of greater amplitude, higher counts of spikes and higher spike frequency in the records obtained with standard culture medium compared to those obtained with extracellular electrophysiological solution. The data analysis of cortical slices recordings indicated the detection of a greater number of spikes per minute, higher spike frequency and greater peak-to-peak spikes amplitudes by the microelectrodes that have captured LFPs of greater magnitude. / O objetivo principal deste trabalho foi implementar um sistema de eletrodos microfabricados para registro e estimulação neural extracelular in vitro. A estrutura dos arranjos de microeletrodos (MEAs) foi caracterizada através de imagens por microscopia óptica e por microscopia eletrônica de varredura. A análise qualitativa da composição química foi feita por espectroscopia de raios X por energia dispersiva e a análise do nível de ruído foi realizada através da avaliação do valor RMS dos potenciais registrados com os sensores preenchidos com solução salina padrão. Uma interface eletrônica entre um MEA e um sistema de aquisição de dados convencional com oito canais foi construída e testes de desempenho foram realizados. Um sistema MEA comercial foi instalado e validado através de experimentação com cultura neuronal e fatias de cérebro de roedor. A tentativa de adaptação de um sistema convencional de perfusão por bomba peristáltica ao sistema MEA mostrou-se insatisfatória devido ao alto nível de ruído dos registros. Procedimentos experimentais relacionados ao correto manuseio dos MEAs foram definidos, e investigou-se a influência de diferentes parâmetros sobre a atividade detectada com os sensores. Finalmente, a análise dos dados com cultura celular indicou detecção de potenciais de campo locais (PCLs) de maior amplitude, maior contagem de spikes e maior freqüência de atividade nos registros obtidos com meio de cultura padrão. Os dados com fatias de tecido indicaram a detecção de maior número de spikes por minuto, de maior freqüência de atividade e de maior amplitude pico-a-pico dos spikes nos microeletrodos que captaram PCLs de maior amplitude.

Objetivo: Caracterizar as respostas do Mismatch Negativity (MMN) em crianças com limiares auditivos dentro dos padrões de normalidades e sem queixas auditivas. Métodos: Estudo do tipo transversal. Participaram desta pesquisa crianças de cinco a onze anos, sem queixas auditivas. Todos os participantes realizaram avaliação audiológica periférica com medidas de imitância acústica, audiometria tonal e audiometria vocal previamente à realização do MMN. Para a execução do procedimento eletrofisiológico, MMN, foi utilizado o equipamento Masbe ATC Plus da marca Contronic. Os eletrodos foram fixados nas posições Fpz (eletrodo ativo), M1 e M2 (eletrodos referência) e na fronte (eletrodo terra). A intensidade utilizada para evocar o potencial foi de 80 dBNA, o estímulo frequente utilizado foi de 1.000 Hz e o estímulo raro de 2.000 Hz. Os estímulos foram apresentados em ambas as orelhas de modo monoaural. As crianças realizaram a avaliação sentadas e foram condicionadas a assistirem a um vídeo sem som, no tablet, enquanto o procedimento era realizado. Resultados: Para o grupo feminino, a média das latências e amplitudes foi de 177,3 ms e 5,01 μV na orelha direita e de 182,4 ms e 5,39 μV na orelha esquerda. Quanto ao grupo masculino, a média das latências foi de 194,4 ms na orelha direita e 183,6 ms na orelha esquerda, com amplitude de 5,11 μV na orelha direita e 5,83 μV na orelha esquerda. Não houve diferença estatisticamente significante nos valores de latência e amplitude entre orelhas (p=0,867 e p=0,178), idade (p>0,20) e sexo dos participantes (p>0,05). Conclusão: Os valores encontrados nas latências e amplitudes do potencial MMN são semelhantes aos observados na literatura científica compulsada, em crianças com desenvolvimento típico e sem queixas auditivas. / Aim: To characterize the answers of Mismatch Negativity (MMN) in children with hearing thresholds within the normality patterns and without auditory complaints. Methods: Transversal type study. Children between 5 and 11 years old without auditory complaints have participated in this research. All the participants have done peripheral audiological evaluation with acoustic immittance measures, tonal audiometry and vocal audiometry previously to MMN execution. To perform the electrophysiological procedure, MMN, it was used Masbe ATC Plus equipment from Contronic brand. The electrodes were fixed in Fpz (active electrode), M1 and M2 (reference electrodes) and front (earth electrode) positions. The intensity used to evoke the potential was 80 dBNA, the frequent stimulus used was 1.000 Hz and the rare stimulus was 2.000 Hz. The stimuli were presented in both ears monoaurally. Children performed the assessment sat and they were conditioned to watch a video without sound, on a tablet computer, while the procedure was performed. Results: For the female group, the average of the latencies and amplitudes was 177,3 ms and 5,01 μV for the right ear and 182,4 ms and 5,39 μV for the left ear. Regarding the male group, the average of latencies was 194,4 ms for the right ear and 183,6 ms for the left ear, with an amplitude of 5,11 μV for the right ear and 5,83 μV for the left ear. There was no significant statistically difference for the values of latency and amplitude among ears (p=0,867 and p=0,178), age (p>0,20) and gender of the participants (p>0,05). Conclusion: The values found in the latencies and amplitudes of MMN potential are similar to those observed in the scientific literature examined, in children with typical development and without auditory complaints.