CAPES / O objetivo deste trabalho foi avaliar o efeito de óleo essencial de Eugenia uniflora e Bacillus thuringiensis e a associação destes sobre larvas e adultos de Alphitobius diaperinus, em condições de laboratório. Para tal, foram avaliadas diferentes concentrações do óleo essencial de E. uniflora (0%, 0,25%; 0,50%; 0,75%; 1,0%; 1,25% e 1,5%) sobre larvas e adultos de A. diaperinus, visando selecionar a concentração que causasse cerca de 50% de mortalidade nos insetos, para utilização no experimento de associação. Para ocorrer emulsificação do óleo foi misturado 10 µL do tenso ativo Tween® 80 (0,01%) em água. Também foi realizada a avaliação do efeito inseticida de diferentes linhagens (BR 137, BR 140 e BR 146) de B. thuringiensis, na concentração 3 × 108 UFC/mL, sobre larvas e adultos de A. diaperinus para selecionar a linhagem que causasse maior percentual de mortalidade para ser utilizada no experimento de associação. Em ambos os experimentos, 10 mL de cada concentração (óleo ou bactéria) foi adicionada e misturada a 38 g de ração comercial para frangos, previamente esterilizada, para adultos e em 20 g de ração, para larvas. Após a preparação da mistura, esta foi dividida em oito partes iguais e distribuída em placas de Petri (150 mm x 20 mm), para adultos e em placas de acrílico, com 12 poços individualizados, para larvas. Cada placa foi considerada uma repetição e recebeu 12 larvas ou 12 adultos, totalizando 96 insetos por tratamento. Como testemunha foi misturada à ração água destilada esterilizada. As placas foram acondicionadas em câmara climatizada à temperatura de 27 ± 2ºC, UR de 70 ± 10% e fotofase de 14 horas. A avaliação foi realizada diariamente, durante nove dias, quantificando-se o número de indivíduos mortos. Para o experimento de associação foram utilizadas as três linhagens de B. thuringiensis (BR 137, BR 140 e BR 146), na concentração 3 × 108 UFC/ml e o óleo essencial de E. uniflora na concentração de 1% por ter causado 50% de mortalidade sobre as larvas. O delineamento experimental e os procedimentos para ontagem, armazenamento e avaliação foram os mesmos descritos para os experimentos anteriores. O óleo essencial de E. uniflora, na concentração de 0,75% causou maior mortalidade em larvas de A. diaperinus (70,83%), porém, não diferiu da concentração de 1% (50%). Para adultos, o óleo essencial não causou efeito inseticida nas concentrações avaliadas. As linhagens de B. thuringiensis, BR 137, BR 140 e BR 146 apresentaram efeito inseticida com mortalidades de 38,54%, 48,95% e 51,04% respectivamente, para larvas de A. diaperinus. Para adultos, as linhagens não apresentaram efeito inseticida. Na associação das linhagens BR 137, BR 140 e BR 146 com o óleo essencial de E. uniflora a 1%, as mortalidades foram de 80,55%, 62,50% e 81,94%, respectivamente. O óleo essencial de E. uniflora causou efeito inseticida somente sobre larvas de A. diaperinus. As três linhagens de B. thuringiensis foram patogênicas somente para larvas de A. diaperinus. Na associação das linhagens de B. thuringiensis e o óleo essencial de E. niflora, os agentes não interferiram negativamente um sobre o outro, evidenciando a possibilidade de utilização de tal associação. Os resultados aqui obtidos foram observados de forma significativa na fase larval, o que faz com que mais estudos sejam desenvolvidos a fim de selecionar linhagens mais virulentas e concentrações com maior efeito inseticida para insetos adultos. / The objective of this study was to evaluate the effect of essential oil of Eugenia uniflora and Bacillus thuringiensis alone and the association these on larvae and adult Alphitobius diaperinus in laboratory conditions. To this, they were evaluated essential oil different concentrations of E. uniflora (0%, 0,25%, 0,50%, 0,75%, 1,0%, 1,25% and 1,5%) on larvae and adult A. diaperinus, in order to select the concentration that caused around 50% mortality in insects, for use in association experiment. To occur emulsification of oil was mixed 10 uL of tense active Tween® 80 (0,01%) in water. It was performed to evaluate the effect of insecticide different strains (BR 137, BR 140 and BR 146) of B. thuringiensis, concentration 3×108 CFU/mL, on larvae and adults of A. diaperinus to select the strain that causes most mortality percentage to be used in association experiment. In both experiments, 10 mL of each concentration (oil or bacteria)was added and mixed to 38 g of commercial feed for broilers, previously sterilized, for adults and 20 g of feed, for larvae. After preparation of the mixture, this was divided into eight equal parts and distributed in Petri dishes (150 mm x 20 mm) for adults and acrylic plates with 12 individual wells to larvae.Each plate was considered a repetition and received 12 larvae and 12 adults, totaling 96 insects per treatment. As control was mixed with feed sterilized distilled water. The plates were placed in a climatic chamber at 27 ± 2 ° C, RH 70 ± 10% and photoperiod of 14 hours. The evaluation was conducted every day for nine days by quantifying the number of dead individuals. For the association experiment were used the three strains of B. thuringiensis (BR 137, BR 140 and BR 146), at the concentration 3×108 CFU/mL and the essential oil of E. uniflora at a concentration of 1% for causing 50 % mortality of the larvae. Experimental design and procedures for assembly, storage and evaluation were the same as described for the previous experiments. The essential oil of E. uniflora at a concentration of 0,75% caused higher mortality in larvae of A. diaperinus (70,83%), however, did not differ from concentration of 1% (50%). For adults, the essential oil showed no insecticidal effect on measured concentrations. The strains of B. thuringiensis, BR 137, BR 140 and BR 146 presented insecticidal effect with mortalities of 38,54%, 48,95% and 51,04% respectively for larvae of A. diaperinus. For adults, the strains showed no insecticidal effect. The association of lines BR 137, BR 140 and BR 146 with the essential oil of E. uniflora 1% mortalities were 80,55%, 62,50% and 81,94%, respectively. The essential oil of E. uniflora caused only insecticidal effect on larvae of A. diaperinus. The three strains of B. thuringiensis were pathogenic only for larvae of A. diaperinus. The association of strains of B. thuringiensis and E. uniflora essential oil, agents do not interfere negatively on one another, suggesting the possible use of such an association. The results obtained were observed significantly in the larval stage, which means that more studies are developed in order to select more virulent strains and concentrations higher insecticidal effect to adult insects.

CAPES / Neste trabalho foi investigado a composição química de metabólitos voláteis extraídos de quatro plantas Pimenta pseudocaryophyllus (Myrtaceae), Psidium cattleyanum (Myrtaceae), Hedychium coronarium (Zingiberaceae) e Costus spiralis (Zingiberaceae) através da cromatografia gasosa acoplada à espectrometria de massas (CG/MS). São apresentados resultados relativos à composição química sazonal do óleo essencial obtido das folhas de Pimenta pseudocaryophyllus, em amostras coletadas bimestralmente de janeiro a novembro de 2009. Em novembro foram observadas as maiores concentrações relativas aos constituintes majoritários do óleo essencial das folhas dessa espécie, sendo o chavibetol (70,90%) e metileugenol (20,70%). Além disso, foram avaliadas as atividades antimicrobianas do óleo essencial das folhas de P. pseudocaryophyllus através de técnicas de difusão com discos e microdiluição em caldo. O chavibetol, composto majoritário mostrou-se o responsável pela maior atividade antifúngica. São apresentados também a sazonalidade do óleo essencial obtido do rizoma de Hedychium coronarium, em amostras coletadas bimestralmente de março a janeiro de 2012 a 2013. Em março foram observadas as maiores concentrações relativas aos constituintes majoritários do óleo essencial do rizoma dessa espécie, sendo β- pineno (31,82%) e 1,8 cineol (28,30%). O estudo populacional dos metabólitos voláteis das folhas do Psidium cattleyanum coletados em Curitiba-PR identificou vinte e oito componentes sendo majoritário o lavander lactona (12,26%). Por outro lado, trinta e um compostos foram identificados no óleo essencial dessa mesma espécie em ecossistema de restinga, sendo majoritário o α-tujeno (25,20%). A extração de metabólitos voláteis das flores H. coronarium e brácteas da C. spiralis foi efetuada através do processo de aeração, fornecendo o linalol (43,58%) e o β- pineno (23,25%), respectivamente como os compostos majoritários. / In this work we investigated the chemical composition of volatile metabolites extracted from four plants Pepper pseudocaryophyllus (Myrtaceae), Psidium cattleyanum (Myrtaceae), Hedychium coronarium (Zingiberaceae) and Costus spiralis (Zingiberaceae) by gas chromatography-mass spectrometry (GC / MS). Results are presented relative to seasonal chemical composition of the essential oil obtained from the leaves of Pepper pseudocaryophyllus in samples collected bimonthly from January to November 2009. In November showed the highest concentrations on the major constituents of the essential oil from the leaves of this species, being chavibetol (70.90%) and methyleugenol (20.70%). Furthermore, we evaluated the antimicrobial activity of essential oil from the leaves of P. pseudocaryophyllus through techniques of diffusion disk and broth microdilution. The chavibetol, major compound was shown to be responsible for the greatest antifungal activity. We present also the seasonality of the essential oil obtained from the rhizome of Hedychium coronarium in samples collected bimonthly from March to January 2012-2013. In March the highest concentrations were observed on the major constituents of the essential oil of the rhizome of this species, and β-pinene (31.82%) and 1,8 cineole (28,30%). The population study of volatile metabolites from the leaves of Psidium cattleyanum collected in Curitiba identified twenty-eight components, the majority being lavander lactone (12.26%). Conversely, thirty-one compounds were identified in the essential oil of the species ecosystem in restinga provided the major constituent being the α-tujeno (25.20%). The extraction of volatile metabolites of flowers H. coronarium and bracts of C. spiralis was effected through the aeration process, providing linalool (43.58%) and β-pinene (23.25%), respectively as the major compounds.

CAPES / O objetivo deste trabalho foi avaliar o efeito de óleo essencial de Eugenia uniflora e Bacillus thuringiensis e a associação destes sobre larvas e adultos de Alphitobius diaperinus, em condições de laboratório. Para tal, foram avaliadas diferentes concentrações do óleo essencial de E. uniflora (0%, 0,25%; 0,50%; 0,75%; 1,0%; 1,25% e 1,5%) sobre larvas e adultos de A. diaperinus, visando selecionar a concentração que causasse cerca de 50% de mortalidade nos insetos, para utilização no experimento de associação. Para ocorrer emulsificação do óleo foi misturado 10 µL do tenso ativo Tween® 80 (0,01%) em água. Também foi realizada a avaliação do efeito inseticida de diferentes linhagens (BR 137, BR 140 e BR 146) de B. thuringiensis, na concentração 3 × 108 UFC/mL, sobre larvas e adultos de A. diaperinus para selecionar a linhagem que causasse maior percentual de mortalidade para ser utilizada no experimento de associação. Em ambos os experimentos, 10 mL de cada concentração (óleo ou bactéria) foi adicionada e misturada a 38 g de ração comercial para frangos, previamente esterilizada, para adultos e em 20 g de ração, para larvas. Após a preparação da mistura, esta foi dividida em oito partes iguais e distribuída em placas de Petri (150 mm x 20 mm), para adultos e em placas de acrílico, com 12 poços individualizados, para larvas. Cada placa foi considerada uma repetição e recebeu 12 larvas ou 12 adultos, totalizando 96 insetos por tratamento. Como testemunha foi misturada à ração água destilada esterilizada. As placas foram acondicionadas em câmara climatizada à temperatura de 27 ± 2ºC, UR de 70 ± 10% e fotofase de 14 horas. A avaliação foi realizada diariamente, durante nove dias, quantificando-se o número de indivíduos mortos. Para o experimento de associação foram utilizadas as três linhagens de B. thuringiensis (BR 137, BR 140 e BR 146), na concentração 3 × 108 UFC/ml e o óleo essencial de E. uniflora na concentração de 1% por ter causado 50% de mortalidade sobre as larvas. O delineamento experimental e os procedimentos para ontagem, armazenamento e avaliação foram os mesmos descritos para os experimentos anteriores. O óleo essencial de E. uniflora, na concentração de 0,75% causou maior mortalidade em larvas de A. diaperinus (70,83%), porém, não diferiu da concentração de 1% (50%). Para adultos, o óleo essencial não causou efeito inseticida nas concentrações avaliadas. As linhagens de B. thuringiensis, BR 137, BR 140 e BR 146 apresentaram efeito inseticida com mortalidades de 38,54%, 48,95% e 51,04% respectivamente, para larvas de A. diaperinus. Para adultos, as linhagens não apresentaram efeito inseticida. Na associação das linhagens BR 137, BR 140 e BR 146 com o óleo essencial de E. uniflora a 1%, as mortalidades foram de 80,55%, 62,50% e 81,94%, respectivamente. O óleo essencial de E. uniflora causou efeito inseticida somente sobre larvas de A. diaperinus. As três linhagens de B. thuringiensis foram patogênicas somente para larvas de A. diaperinus. Na associação das linhagens de B. thuringiensis e o óleo essencial de E. niflora, os agentes não interferiram negativamente um sobre o outro, evidenciando a possibilidade de utilização de tal associação. Os resultados aqui obtidos foram observados de forma significativa na fase larval, o que faz com que mais estudos sejam desenvolvidos a fim de selecionar linhagens mais virulentas e concentrações com maior efeito inseticida para insetos adultos. / The objective of this study was to evaluate the effect of essential oil of Eugenia uniflora and Bacillus thuringiensis alone and the association these on larvae and adult Alphitobius diaperinus in laboratory conditions. To this, they were evaluated essential oil different concentrations of E. uniflora (0%, 0,25%, 0,50%, 0,75%, 1,0%, 1,25% and 1,5%) on larvae and adult A. diaperinus, in order to select the concentration that caused around 50% mortality in insects, for use in association experiment. To occur emulsification of oil was mixed 10 uL of tense active Tween® 80 (0,01%) in water. It was performed to evaluate the effect of insecticide different strains (BR 137, BR 140 and BR 146) of B. thuringiensis, concentration 3×108 CFU/mL, on larvae and adults of A. diaperinus to select the strain that causes most mortality percentage to be used in association experiment. In both experiments, 10 mL of each concentration (oil or bacteria)was added and mixed to 38 g of commercial feed for broilers, previously sterilized, for adults and 20 g of feed, for larvae. After preparation of the mixture, this was divided into eight equal parts and distributed in Petri dishes (150 mm x 20 mm) for adults and acrylic plates with 12 individual wells to larvae.Each plate was considered a repetition and received 12 larvae and 12 adults, totaling 96 insects per treatment. As control was mixed with feed sterilized distilled water. The plates were placed in a climatic chamber at 27 ± 2 ° C, RH 70 ± 10% and photoperiod of 14 hours. The evaluation was conducted every day for nine days by quantifying the number of dead individuals. For the association experiment were used the three strains of B. thuringiensis (BR 137, BR 140 and BR 146), at the concentration 3×108 CFU/mL and the essential oil of E. uniflora at a concentration of 1% for causing 50 % mortality of the larvae. Experimental design and procedures for assembly, storage and evaluation were the same as described for the previous experiments. The essential oil of E. uniflora at a concentration of 0,75% caused higher mortality in larvae of A. diaperinus (70,83%), however, did not differ from concentration of 1% (50%). For adults, the essential oil showed no insecticidal effect on measured concentrations. The strains of B. thuringiensis, BR 137, BR 140 and BR 146 presented insecticidal effect with mortalities of 38,54%, 48,95% and 51,04% respectively for larvae of A. diaperinus. For adults, the strains showed no insecticidal effect. The association of lines BR 137, BR 140 and BR 146 with the essential oil of E. uniflora 1% mortalities were 80,55%, 62,50% and 81,94%, respectively. The essential oil of E. uniflora caused only insecticidal effect on larvae of A. diaperinus. The three strains of B. thuringiensis were pathogenic only for larvae of A. diaperinus. The association of strains of B. thuringiensis and E. uniflora essential oil, agents do not interfere negatively on one another, suggesting the possible use of such an association. The results obtained were observed significantly in the larval stage, which means that more studies are developed in order to select more virulent strains and concentrations higher insecticidal effect to adult insects.

The genus Cymbopogon (Poaceae) is composed of more than 100 species found in tropical countries, and about 56 species have essential oils with aromatic characteristics and some ones have mediinal, pharmaceutical and industrial importance. The essential oils of the genus are rich in mono-and sesquiterpenes. Among the species of the genus Cymbopogon winterianus Jowitt, popularly known as |citronella|, |Java citronella| or |jacapé| is used in folk medicine as a repellent, antimicrobial, analgesic, anxiolytic and for the treatment of epilepsy. The aim of this study was to evaluate pharmacological and toxicological properties of the essential oil extracted from the leaves of Cymbopogon winterianus (EOC) in experimental protocols. Analysis by GC-MS showed the major components are citronellal, citronellol and geraniol. In pharmacological screening the main changes observed were: ptosis, sedation and decreased ability to raise. In the test of acute toxicity LD 50 was calculated in 1953.8 mg / kg (1580.9 to 2326.7) (p.o.) and in 567.3 mg / kg (395.8 to 758.2) (ip). The OEC decreased the number of crossings in the test of spontaneous movement and increased the sleep time induced by thiopental. In the the rota-rod task EOC did not interfere the motor coordination of the animals. Antinociceptive, anti-inflammatory and antioxidant effects were performed using the tests of writhing induced by acetic acid, nociception induced by formalin into the paw hot plate, the carrageenan-induced inflammation and sequestering activity of free radicals (DPPH). The results showed that the OEC reduced the response to pain, the migration of neutrophils to the abdominal cavity and is very efficient in sequestering the free radicals. In the evaluation of acute and subchronic toxicity, the animals were treated respectively with EOC in a single dose (900 mg / kg - po) and daily doses of 50mg/kg (po). In the acute test, the main behavioral changes were ptosis, sedation, decreased response to touch, decreased ability to raise and analgesia. No changes suggestive of toxicity in acute and subchronic tests were found in the assessment of body weight, water intake and feed and organ weights. In the evaluation of biochemical parameters, there were significant changes in the dosage of aspartate aminotransferase, alanine aminotransferase and alkaline phosphatase (p <0.05) in both acute and subchronic tests. The results together suggest that EOC possess depressant, antinociceptive, antiinflammatory and antioxidant properties without loss of motor coordination. In addition, EOC showed toxicity, since histological changes were found in kidney and liver in the acute assay and in liver in the subchronic assay. / O gênero Cymbopogon (Poaceae) é composto por mais de 100 espécies encontradas em países tropicais, e por volta de 56 espécies são aromáticas e algumas têm importância medicinal, farmacológica e industrial, sendo ricas em óleos essenciais. Os óleos essenciais extraídos do gênero são ricos em mono e sesquiterpenos. Dentre as espécies do gênero o Cymbopogon winterianus Jowitt, conhecido popularmente como citronela , citronela de Java ou jacapé , é utilizado na medicina popular como repelente, antimicrobiano, analgésico, ansiolítico e para o tratamento da epilepsia. O objetivo desse trabalho foi estudar aspectos farmacológicos e toxicológicos do óleo essencial extraído das folhas de Cymbopogon winterianus (OEC) em protocolos experimentais. Análise realizada através de GC-MS demonstrou como componentes majoritários o citronelal, citronelol e geraniol. Na triagem farmacológica as principais alterações registradas foram: ptose, sedação e levantar diminuído. No teste da toxicidade aguda a DL50 calculada foi de 1.953,8 mg/kg (1.580,9 2.326,7) (v.o.) e 567,3 mg/kg (395,8-758,2) (i.p.). O OEC promoveu redução no número de cruzamentos no teste da movimentação espontânea e aumento no tempo de sono induzido pelo tiopental. No teste do rota rod observou-se que o OEC não interfere a coordenação motora dos animais. Os testes para se determinar propriedades antinociceptiva, antiinflamatória e antioxidante foram realizados utilizando-se os testes de contorção abdominal induzido por ácido acético, de nocicepção na pata induzido por formalina, da placa quente, de inflamação induzido por carragenina e atividade de sequestro dos radicais livres (DPPH). Os resultados demonstraram que o OEC reduziu a resposta a dor, a migração de neutrófilos para a cavidade abdominal e foi muito eficiente no seqüestro dos radicais livres. Na avaliação da toxicidade aguda e subcrônica, os animais foram tratados respectivamente com o OEC em dose única (900 mg/kg - v.o.) e doses diárias de 50mg/kg (v.o.). No teste agudo, as principais alterações comportamentais apresentadas foram ptose palpebral, sedação, resposta ao toque diminuída, levantar diminuído e analgesia. Em relação à avaliação do peso corpóreo, ingesta de água e ração e peso dos órgãos não ocorreram alterações sugestivas de toxicidade nos ensaios agudo e subcrônico. Na avaliação dos parâmetros bioquímicos, observaram-se alterações significativas na dosagem de aspartato aminotransferase, alanina aminotransferase e fosfatase alcalina (p<0.05) em ambos os ensaios agudo e subcrônico. Os resultados em conjunto sugerem propriedades depressora, antinociceptiva, antiinflamatória e antioxidantes sem que esses efeitos promovam perda de coordenação motora. Além disso, o OEC possui toxicidade na dose e via testada, visto que alterações histológicas foram encontradas nos rins e no fígado no ensaio agudo e no fígado no ensaio subcrônico.

Coordenação de Aperfeiçoamento de Pessoal de Nível Superior, CAPES.

Coordenação de Aperfeiçoamento de Pessoal de Nível Superior, CAPES.

Terpenos são compostos que fazem parte da constituição de óleos essenciais. Estes compostos são formados pela condensação de unidades de isopreno e quando contêm oxigênio são denominados terpenoides. O presente trabalho teve como objetivo avaliar a atividade antimicrobiana e antioxidante dos terpenoides citral, citronelal, citronelol, 1,8-cineol, geraniol, α-terpineol e do sesquiterpeno β-cariofileno. Para tanto, as concentrações inibitórias mínimas (CIM) e as doses inibitórias 50% (DI50) foram determinadas através do método de diluição seriada (0 a 10 μL/mL v/v) em microplacas. A viabilidade celular, na concentração inibitória mínima, foi avaliada por plaqueamento e contagem. Foi avaliado também o efeito dos terpenoides sobre a respiração de bactérias e leveduras. Além disso, testes específicos envolvendo citral, citronelal, citronelol e geraniol foram realizados com as leveduras Saccharomyces cerevisiae e Candida albicans, sendo eles: avaliação da sobrevivência, lise celular e perda de componentes celulares. A atividade antioxidante in vitro dos terpenoides foi determinada pelo método DPPH(1,1-difenil 2-picrilhidrazil)A atividade antioxidante in vivo de citral e citronelal foi realizada utilizando S. cerevisiae como organismo modelo. Os resultados mostraram que os seis terpenoides e sesquiterpeno têm atividade antimicrobiana, com variação entre as concentrações destes isolados e o tipo de microrganismo avaliado. De um modo geral, o citral foi o terpenoide que exibiu ação antimicrobiana mais expressiva, enquanto o β-cariofileno afetou um número restrito de microganismos. A presença de citral e citronelal, nas concentrações inibitórias mínimas correspondentes, reduziu a respiração de Salmonella typhinmurium e Staphylococcus aureus. C. albicans e S. cerevisiae, quando tratadas com CIM de citral, citronelal, citronelol e geraniol, tiveram a respiração inibida. Geraniol foi o terpenoide com maior atividade microcida sobre C. albicans. Citral, citronelol, citronelal e geraniol induziram a perda de componentes celulares tanto em C. albicans quanto em S. cerevisiae. Todos os compostos mostraram atividade antioxidante in vitro, particularmente o citral. Por outro lado, citronelal foi o único terpenoide que apresentou atividade antioxidante in vivo, sobre células eucarióticas. De uma maneira geral, o presente trabalho mostrou que o citral apresenta importante atividade antioxidante e antimicrobiana, induzindo a perda de componentes celulares e inibindo a respiração. Estas informações são importantes para aplicações farmacológicas deste composto ou óleos essenciais com elevada concentração de citral. / Terpenes are the main constituents of plant essential oils. These compounds are formed by the condensation of isoprene units, and when contain oxygen are named terpenoids. The present work aimed to evaluate the antimicrobial and antioxidant activity of terpenoids citral, citronellal, citronellol, 1,8-cineole, geraniol, α- terpineole and sesquiterpene β-caryophyllene. Thus for, the minimal inhibitory concentrations (MIC), and the inhibitory dosage 50% (ID50) were determined using the microplate serial dilution method (0 to 10 μL/mL v/v). Cell viability at the MIC concentration was evaluated by plating and counting. The effect of terpenoids on bacterial and yeast respiration was evaluated. Moreover, the following specific tests were developed on Saccharomyces cerevisiae and Candida albicans using citral, citronellal, citronellol and geraniol: cell viability, cellular lysis, and loss of cellular components. The in vitro antioxidant activity of the terpenoids was determined by the DPPH (1,1-difenil 2-picrilhidrazil)essay. In vivo antioxidant activity of citral and citronellal was evaluated using S. cerevisiae as model organism. The results showed that all the six terpenoids and one sesquiterpene have antimicrobial activity, with variation among terpenoids and microrganisms. In general, citral exhibited the highest antimicrobial activity, where β-cariophyllene affects a restricted number of organisms. The presence of citral and citronellal at their MICs reduced respiration of Salmonella typhimurium and Staphylococcus aureus. Respiration inhibitory activity of citral, citronellol, citronellal and geraniol was also evidenced on C. albicans and S. cerevisiae. Geraniol was the terpenoid with the highest microcide activity on C. albicans and S. cerevisiae, as determined by the methylene blue staining method. Citronellal and citronellol exhibited low lytic activity on S. cerevisiae, but not on C. albicans. Citral, citronellol, citronellal and geraniol induced the loss of cellular components in both C. albicans and S. cerevisiae. All the compounds showed in vitro antioxidant activity, particularly citral. Conversely, citronellal was the only terpenoid with in vivo antioxidant activity on eukaryotic cells. In general, the present work showed that citral has an important antioxidant and antimicrobial activity, inducing the loss of cellular components and inhibiting cell respiration. These informations are important for the pharmacological application of this compound or essential oils with high concentration of citral.

The jamun fruit (Syzygium cumini (L.) Skeels) and the rose pepper (Schinus terebinthifolius Raddi) are species of multiple aptitudes with a high oil potential. Its essential oil produced by leaves, fruits and stems show a large variety of pharmacological properties. Evaluation of chlorophyll a fluorescence emission and monitoring of gas exchanges mechanisms may provide valuable data for plant functionality evaluation. Thus, the ecophysiological evaluation of these species, was conducted aiming to relate it with essential oil production. First, the content of chlorophyll a, b and total, chlorophyll a fluorescence, and oil essential productivity of the species was analyzed, extracted in the dry season. Subsequently, the liquid photosynthesis assimilate rate, stomatal conductance, transpiration, vapor pressure deficit, air and leaf temperature, internal carbon and fresh leaves oil productivity, in dry and rainy season were evaluated. For the ecophysiological parameters first studied, jamun fruit had higher values, in companson with rose pepper. As for the essential oil produced by the two species, rose pepper showed the best yield for fresh and dry leaves. It was not verified any direct relation between the photosynthetic apparatus efficiency and essential oil production to the two species studied. The results found in the following study pointed to significant differences in all variables and time influence in the studied species, in both seasons. In the rainy season, a different tendency in the species evaluated according to the dry season was found. In the highest humidity season were verified the highest net photosynthesis rates (A), stomatal conductance (Gs) and transpiration (E), for rose pepper and jamun fruit trees. In this same season, the highest contents of internal carbon (Ci) were verified. The essential oil production in the two species, generally, did not vary seasonally. This variation was only seen for dry rose pepper leaves. with a higher productivity in the rainy season. As the previous study, it was not possible to correlate the ecophysiological parameters studied with the secondary metabolites production / O jamelão (Syzygium cumini (L.) Skeels) e a aroeira (Schinus terebinthifolius Raddi) são espécies de múltiplas aptidões com grande potencial olerífero. Seus óleos essenciais produzidos em folhas, frutos e hastes apresentam propriedades farmacológicas diversas. Técnicas como medição da emissão de fluorescência da clorofila a e o monitoramento dos mecanismos de trocas gasosas podem fornecer dados imprescindíveispara avaliação da funcionalidade das plantas. Portanto, nesse trabalho objetivou-se a avaliação ecofisiológica destas espécies, a fim de relacioná-la com a produção de óleos essenciais. Num primeiro momento, foram avaliados os teores de clorofila a, b e total, fluorescência da clorofila a,e o rendimento de óleo essencial das espécies estudadas, extraído no período de seca. No seguinte, foram avaliados: taxa assimilatória de fotossíntese líquida, condutância estomática, déficit de pressão de vapor, temperaturas do ar e da folha, carbono interno e rendimento de óleo de folhas frescas e secas, nos períodos seco e chuvoso. Para os parâmetros ecofisiológicos primeiramente estudados, as plantas de jamelão apresentaram os maiores valores, enquanto os da aroeira foram estatisticamente menores. Quanto ao óleo essencial produzido pelas duas espécies, a aroeira apresentou o melhor rendimento para folhas secas e frescas. Não foi verificada relação direta entre a eficiência do aparato fotossintético e a produção de óleo essencial para as duas espécies estudadas. Os resultados encontrados no estudo seguinte, apontaram diferenças significativas em todas as variáveis e influência do horário das medições nas respostas das espécies estudadas, nas duas épocas. Pode-se verificar, no período de chuvas, uma tendência diferenciada das espécies em relação ao período seco. No período de maior umidade verificaram-se as maiores taxas de fotossíntese líquida (A), condutância estomática (Gs) e transpiração (E) para aroeira e jamelão. Nesse mesmo período, foram verificados os maiores teores de carbono interno (Ci). A produção de óleo essencial nas duas espécies, de modo geral, não apresentou variações devido a sazonalidade. Essa variação somente foi observada em folhas secas de aroeira, com rendimento muito superior ao observado no período chuvoso. Assim como no estudo anterior, não se pode correlacionar os parâmetros ecofisiológicos estudados com a produção de metabólitos secundários.

M.Tech. / Essential oils are volatile oils, generally odorous, which occur in certain plants or specified parts of plants, and are recovered by accepted procedures, such that the nature and composition of the product is, as nearly as practicable, unchanged by such procedures (ISO, 1968). The principal uses are as: flavouring agent, medicinal and aromatherapy application. Today, the essential oils are sought-after for innumerable applications starting from markers for plant identifications to bases for semi-synthesis of highly complex molecules. The extraction of highly delicate essential oils from plants remains a crucial step in all these applications. By using steam to mediate the extraction, it is possible to maintain mild conditions and effect superior extraction. In the current work, an integrated procedure for steam extraction followed by volatiles sampling and analysis from the leaves of the Eucalyptus tree was explored. There are two problems to overcome in the extraction from solid plant materials: that of releasing the essential oils from solid matrix and letting it diffuse out successfully in a manner that can be scaled-up to industrial volumes. Towards this end, the effect of different parameters, such as temperature, pressure and extraction time on the extraction yield was investigated and the experimental results show that all of these temperatures (90 °C, 97°C, and 99°C), were significant parameters affecting yield. Increase in yield was observed as pressure was increased and the use of high pressure (150 kPa) in steam extraction units permits much more rapid and complete distillation of essential oils over atmospheric pressure. The yield was calculated from the relation between the essential oil mass extracted and the raw material mass used in the extraction. The volatiles, Eucalyptus oil in vapour form released from the leaves were condensed and analyzed using Gas chromatography, and eight major components were found to be contained in this species. A mathematical model based on diffusion of essential oil from the leaves was developed. Using a numerical method, the best diffusion coefficient was established for different operating conditions by comparing the model concentration of oil remaining in the leaves with the experimental amount of oil recovered; hence minimizing the sum of squared errors. It was found that one cannot simply assume that the oil leached and recovered was the same as that originally present in the leaves. The initial mass of oil was determined by fitting the diffusion model to the data. An Arrhenius model was used to account for the effect of temperature. The resulting expression for the diffusion coefficient as a function of temperature can now be used to model the large scale extraction of the essential oils from Eucalyptus leaves.

This work describes the results obtained from the phytochemical study, chemometric analysis and activity cytotoxic in vitro and in vivo of the leaves Guatteria pogonopus Mart., a species of Annonaceae that occurs in Sergipe. The leaves were subjected to two processes. In the first, the leaves were conducted extraction and the study of the chemical composition of the essential oil, considering the seasonality effect; in the second, the isolation of fixed compounds was performed on order to identify alkaloids. Both studies were evaluated towards the antitumor activity in vitro and in vivo. Yields of essential oils ranged from 0.34 % for the month of October/2012 to 0.10 % for the month of September/2012. This variation can be explained by the climate, which the rainfall was higher in September compared to October. This means that the greater the amount of precipitation, reduced yield. The sesquiterpene hydrocarbons were the main constituents of the oils in the samples, with the highest concentration in the month of July/2012 (71.93 %). They were identified as á- and â-pinene, bicyclogermacrene, germacrene B, ã-patchoulene, spathulenol, á-santalene, (E)-caryophyllene, ã-elemene and globulol. In Principal Component Analysis (PCA), both CP1 and CP2 components can explain 90 % of the total variance. It is remarkable that several compounds have focused on the right of the axis of CP1. This phenomenon explains the regularity of the percentage that appears in each month. The ã-patchouleno, spathulenol and bicyclogermacrene compounds protrude to the left of the axis of CP1. Which are the major compounds of the composition of essential oils predominant in all sampling months. In addition to these one can see (E)-caryophyllene and á-santalene, to a lesser prominence this axis. In Hierarchical Cluster Analysis (HCA) formed groups because of similarities. The results of the in vitro antitumor activity of essential oil showed pronounced cytotoxic activity against NCI-H358M, PC-3M and OVCAR-8 lines. In vivo study oil was able to inhibit tumor growth, thus indicating that the essential oil has a significant antitumor potential. Phytochemical study the alkaloidal sheets from the fraction of methanol extract was possible to date the isolation of six alkaloids encoded as GP-1 (nornuciferine), GP-2 (isocorydine), GP-3 (mixture of the nornuciferine and anonaine), GP-4 (lisycamine) and GP-5 (liriodinene). The identification of the alkaloids was performed by 1D/2D 1H and 13C NMR, MS and GC/MS, and comparison with authentic standards and literature data. The cytotoxicity assay performed with single concentration in the extracts and fractions (50 mg/ml) and basic substances (25 mg/mL) revealed promising results with minimal inhibition of 50 % of at least one tumor cell lines. Among the extracts, fractions and evaluated substance, the alkaloidal fraction and compounds GP-1 were the most active against strains B16-F10 and HepG2. Because the activities presented and in order to obtain the IC50 for these two samples front lines K562, HL-60 cells and PBMC were also evaluated. Both the alkaloidal fraction and the compound GP-1 showed good results. The results indicated that G. pogonopus is a biologically active cytotoxic properties with promising source of compounds. / Este trabalho descreve os resultados do estudo fitoquimico, analise quimiometrica e investigacao citotoxica in vitro e in vivo das folhas de Guatteria pogonopus Mart. uma especie de Annonaceae de ocorrencia em Sergipe. As folhas foram submetidas a dois processos: no primeiro, foi realizada a extracao e o estudo da composicao quimica do oleo essencial, levando em consideracao o efeito da sazonalidade. Enquanto que no segundo, foi realizado o isolamento de compostos fixos visando a identificacao de alcaloides. Ambos estudos foram avaliados frente a atividade antitumoral in vitro e in vivo. Os rendimentos dos oleos essenciais variaram de 0,34% para o mes de outubro/2012 a 0,10% para o mes de setembro/2012. Essa variacao pode ser explicada pelo clima, o qual o indice pluviometrico foi maior para setembro em relacao a outubro. Isso significa, que quanto maior a quantidade de precipitacao, menor o rendimento. Os sesquiterpenos hidrocarbonetos foram os constituintes majoritarios nas amostras dos oleos, com maior concentracao no mes de julho/2012 (71,93%). Os constituintes majoritarios identificados foram Ñ- e £]-pineno, biciclogermacreno, germacreno B, £^-patchouleno, espatulenol, £-santaleno, (E)-cariofileno, £^-elemeno e globulol. Na Analise de Componentes Principais (ACP), as duas componentes CP1 e CP2 conseguem explicar mais de 90% da variancia total dos dados. E possivel notar que varios compostos se concentraram na direita do eixo da CP1. Esse fenomeno explica a regularidade da porcentagem que aparece em cada mes. Os compostos £^-patchouleno, espatulenol e biciclogermacreno se sobressaem para esquerda do eixo da CP1. Os quais sao os compostos majoritarios da composicao dos oleos essenciais predominante em todos os meses de coleta. Na Analise de Agrupamento Hierarquico (AAH) formaram-se grupos devido a semelhancas. Os resultados da atividade antitumoral in vitro do oleo essencial indicaram pronunciada atividade citotoxica contra as linhagens de NCI-H358M, PC-3M e OVCAR-8. No estudo in vivo o oleo foi capaz de inibir o crescimento tumoral, indicando assim, que o oleo essencial apresenta um potencial antitumoral significativo. Do estudo fitoquimico da fracao alcaloidica do extrato metanolico foi possivel ate o momento o isolamento de seis alcaloides codificados como GP-1 (nornuciferina), GP-2 (isocoridina), GP-3 (nornuciferina e anonaina em mistura), GP-4 (lisicamina), GP-5 (liriodenina). A identificacao dos alcaloides foi realizada por RMN de 1H e 13C 1D/2D, EM e CG/EM, bem como comparacao com padroes autenticos e dados da literatura. O ensaio de atividade citotoxica em concentracao unica realizado com os extratos e fracoes (50 £gg/mL) e substancias puras (25 £gg/mL), revelaram resultados promissores com inibicao minima de 50% de pelo menos uma das linhagens tumorais. Entre os extratos, fracoes e substancia avaliadas, a fracao alcaloidica e o composto GP-1 foram os mais ativos contra as linhagens B16-F10 e HepG2. Devido as atividades apresentadas e com o objetivo de se obter a CI50 essas duas amostras tambem foram avaliadas frente as linhagens de celulas K562, HL-60 e PBMC. Tanto a fracao alcaloidica como o composto GP-1 apresentaram bons resultados. Os quais indicaram que G. pogonopus e uma fonte promissora de compostos biologicamente ativos com propriedades citotoxicas.