Orientador: Heitor Moreno Junior / Dissertação (mestrado) - Universidade Estadual de Campinas, Faculdade de Ciências Médicas / Made available in DSpace on 2018-08-04T01:19:55Z (GMT). No. of bitstreams: 1 Toretta_LilianIgnezMontanari_M.pdf: 8030512 bytes, checksum: 84fab573dae03f1ec3b460c7d0ee21d7 (MD5) Previous issue date: 2004 / Resumo: Avaliou-se o comportamento da pressão arterial (PA) e da freqüência cardíaca (FC) durante a interrupção do ato de fumar, por meio dos sistemas Finapres (batlbat) e MAPA (Monitorização Ambulatorial da Pressão Arterial), em fumantes de grau moderado, após sete dias de tratamento com bupropiona, isolada ou associada à nicotina de liberação transdérmica....Observação: O resumo, na íntegra, poderá ser visualizado no texto completo da tese digital / Abstract: The purpose of this study was to evaluate the changes in arterial blood pressure (BP) and heart rate (HR) during smoking abstinence, as measured by Finapres (beatlbeat) and ABPM (Ambulatory Blood Pressure Monitoring) devices, in moderate smokers after 7 days of treatment with bupropion alone, or bupropion combined with transdermal nicotine....Note: The complete abstract is available with the full electronic digital thesis or dissertations / Mestrado / Farmacologia / Mestre em Farmacologia

Orientador: Gun Birgitta Bergsten Mendes / Dissertação (mestrado) - Universidade Estadual de Campinas, Faculdade de Ciências Médicas / Made available in DSpace on 2018-07-24T04:58:45Z (GMT). No. of bitstreams: 1 Leite_DeboraPeterson_M.pdf: 1189010 bytes, checksum: e0d8516f4302641a5b6b4d7db139a1ce (MD5) Previous issue date: 1998 / Resumo: Este estudo prospectivo foi realizado com a finalidade de descrever o perfil da prescrição de medicamentos para pacientes pediátricos hospitalizados em uma Enfermaria de Pediatria de um Hospital-Escola que realiza atendimento terciário. De Julho a Outubro de 1996, 318 pacientes foram acompanhados desde a admissão à alta hospitalar. Pneumonia de origem bacteriana foi o diagnóstico mais comum. Os pacientes permaneceram em média 7 dias no hospital, e receberam a prescrição de uma média de 5.7 medicamentos diferentes. 93.4% dos pacientes receberam prescrições para a classe N-SÍstema Nervoso, e 82.4% para a classe J-Antiinfecciosos gerais de uso sistêmico. Essas duas classes terapêuticas somaram 8273 (67,8%) de um total de 12198 itens de prescrição. Foi determinada a densidade de prescrição para todas as classes terapêuticas prescritas e para os doze medicamentos mais prescritos. Interações medicamento-medicamento foram identificadas nas prescrições de 69 pacientes (22.3%). Esse estudo proporciona uma visão geral da prescrição de medicamentos para crianças hospitalizadas, um passo necessário para um programa de farmacovigilância. / Abstract: This prospective study was carried out in order to describe the drug therapy profile of pediatric patients in a Pediatric Unit of a tertiary care university hospital in Brazil. From July to October 1996, 318 patients were followed from admission to discharge. Bacterial pneumonia was the single most common diagnosis. The patients stayed an average of 7 days in the hospital and received prescriptions for an average of 5.7 different drugs. 93.4% of the patients received prescriptions for class N Nervous System and 82.4% for class J General Antiinfectives for Systemic Use These two therapeutic classes accounted for 8273 (67.8%) of a total of 12198 prescription items. Prescription density was determined for the all prescribed therapeutic classes and for the twelve most prescribed drugs. Drug interactions were identified in the prescriptions of 69 patients (22.3%). This study provides an overview of drug prescription for hospitalized children, a necessary step to a pharmacovigilance program. / Mestrado / Farmacologia / Mestre em Ciências Médicas

Orientador: Nancy Airoldi Teixeira / Dissertação (mestrado) - Universidade Estadual de Campinas, Faculdade de Ciências Médicas / Made available in DSpace on 2018-07-20T10:26:04Z (GMT). No. of bitstreams: 1 Pereira_DarcioGomes_M.pdf: 3063979 bytes, checksum: 810abf8b1934bb4e14a164e84ebb94b5 (MD5) Previous issue date: 1995 / Resumo: Este trabalho descreve os efeitos do tratamento agudo e crônico com lítio sobre o déficit de fuga na caixa de altemação e nos níveis séricos de metais no modelo do desamparo aprendido, em ratos; estuda, também, os efeitos do tratamento crônico de lítio sobre a hipoalgesia induzida por choques. Através de manipulações fannacológicas, investiga a participação do sistema opióide hormonal no déficit de fuga. A administração aguda de lítio, em doses que forneceram níveis séricos deste metal de 0,42 ± 0,08 mEq/l, dentro da faixa profilática usada na clínica, não preveniu o desamparo aprendido. Por outro lado, o tratamento crônico forneceu concentrações séricas similares de lítio, e foi capaz de preveni-lo; este tratamento elevou ainda os níveis de potássio no soro, alterando sua homeostase. As concentrações séricas de sódio mantiveram-se estáveis sob qualquer tratamento. Choques inescapáveis ou escapáveis aumentaram os níveis de lírio no soro. Não constatamos envolvimento opióide-hormonal na indução do efeito de desamparo aprendido. A administração do antagonista opióide naltrexona ou a administração de dexametasona antes do treino não preveniram o déficit de fuga, que normalmente se segue aos choques inescapáveis. Por outro lado, a administração de naltrexona antes da sessão de teste bloqueou completamente a expressão desse efeito comportamental. o tratamento crônico com lítio produziu uma marcante e prolongada reação analgésica, a qual persistiu até 72 horas no grupo inescapável. Esta reação foi independente da reexposição aos 5 choques breves de 0,6 mA nas patas. Concluímos, finalmente, que o lítio exerce um efeito modulatório sobre o déficit de fuga na caixa de altemação e sobre a resposta hipoalgésica produzida por choques inescapáveis / Abstract: This thesis describes the effects of acute and chronic lithium treatment on the shuttlebox escape deficit and on the serum metal levels in a leamed helplessness model, as well as the effects of chronic lithium treatment upon the hypoalgesia induced by shocks. In addition, the involvement of the opioid hormonal system in the shuttlebox escape deficit was investigated. Acute lithium administration which resulted in serum lithium levels of 0.42 ± 0.08 mEq/l (within the prophylactic range) did not prevent the induction of leamed helplessness. On the other hand, chronic lithium administration provided similar serum lithium concentrations and was able to prevent this phenomenon; this treatment also increased the serum potassium levels with a consequent change in potassium homeostasis. Serum sodium concentrations were stable under alI treatment schedules. Inescapable or escapable shocks increased the serum lithium levels. Our results suggest that the opioid-hormonaI system is not invoIved in the induction of learned helplessness. The administration of naItrexone (an opioid antagonist) or dexamethasone before the training session did not prevent the learned helplessness. However, naltrexone given before the escape test completely blocked the expression of this behavioral response. Chronic lithium treatment produced a marked and prolonged hypoalgesic , reaction which persisted for up to 72 hr in the inescapable group. This reaction was independent of reexposure to the shocks. We conclude that lithium exerts a modulatory effect on the shuttlebox escape deficit and on the hypoalgesic response produced by exposure to inescapable shocks / Mestrado / Mestre em Farmacologia

Orientador: Eduardo Dias de Andrade / Tese (doutorado) - Universidade Estadual de Campinas, Faculdade de Odontologia de Piracicaba / Made available in DSpace on 2018-07-16T01:45:25Z (GMT). No. of bitstreams: 1 Junqueira_SolangeMariaDieterichRabelo_D.pdf: 1791510 bytes, checksum: b127d431200713a1ccca1ec01cfb01c3 (MD5) Previous issue date: 1992 / Resumo: Este trabalho teve por objetivo avaliar os efeitos da betametasona, empregada na forma de duas preparações farmacêuticas distintas, sobre alguns valores de auto-hemostasia. Para tanto,foram utilizados 30 ratos Wistar,machos,divididos em 3 grupos experimentais,tratados (via 1M) com solução de NaCI a 0,9% (Grupo Controle), fosfato dissódico de betametasona ou com a associação deste mesmo sal ao acetato de betametasona, que possibilita uma ação farmacológica de maior duração do glucocorticóide. Nos tempos de .1, 24, 48 e 168 horas após o tratamento, foram obtidas amostras de sangue e avaliado o tempo de coagulação sangüínea e o número de plaquetas circulantes. Os resultados obtidos demonstraram que o fosfato dissódico de betametasona, na dose única de 0,1mg/kg, não alterou os parâmetros de auto-hemostasia estudados. Quando a mesma dose da preparação farmacêutica de depósito de Betametasona foi empregada, observou-se apenas um Discreto aumento do Tempo de coagulação e uma pequena diminuição da contagem respectivamente nos tempos de 168 e 24 horas. de plaquetas , Apesar destas alterações serem estatisticamente significantes (p < 0,05), os valores encontrados situaram-se dentro das faixas de normalidade biológica do tempo de coagulação sangüínea e contagem de plaquetas, em ratos / Abstract: The aim of this paper was to study the effeets of two distinet pharmaceutieal preparations of betamethasone, values of auto-hemostasis. To do so, 30 male Wistar rats were used, divided in 3 upon the experimental groups, dissodium phosphate betametasone acetate. Treated with normal saline, betametasone or with this salt associated with After 1, 24, 48 and 168 hours of these distinct treatments, blood samples were obtained and avaliated the clotting time and platelet count.The results showed no interference of the betamethasone Dissodium phosphate (0,1 mg / kg) , In the values of the auto-hemostasis parameters studied. In the animals treated with the depot preparati ns of betamethasone, there was a discret increase of the c clotting time and a little decrease of the platelet count, in the times of 168 and 24 hours, respectively. In spite of this alterations are statisticaly significant (p < 0,05), these values are situated in biological normal ranges for the clotting time and platelet count, in rats / Doutorado / Farmacologia / Doutor em Ciências

Orientador : Renato G.G. Terzi / Dissertação (mestrado) - Universidade Estadual de Campinas, Faculdade de Ciências Médicas / Made available in DSpace on 2018-07-17T10:31:11Z (GMT). No. of bitstreams: 1 Araujo_IzildaEsmeniaMuglia_M.pdf: 1211797 bytes, checksum: 7d4284e99293b1b46cfa9b7086815797 (MD5) Previous issue date: 1992 / Resumo: O aumento do tônus vascular periférico com drogas alfa-adrenérgicas é vital para a restauração da circulação espontânea (RCE*) durante a ressuscitação cardiopulmonar (RCP). Nós estudamos os efeitos da Angiotensina 11 (A-II), um potente vasoconstrictor não-adrenérgico sobre a pressão coronariana (PPcor) e a restauração da circulação espontânea em um modelo canino de parada fibrilatória eletricamente induzida. Dezoito cães mestiços de ambos os sexos, pesando 11,9 +/- 3,7kg, anestesiados com tiopental s6dio, foram intubados e ventilados com ar (V.e.: 20 ml/kg e FR: 15mov/min.). As pressões de aorta e de átrio direito assim como o ECG (DII) foram registrados continuamente. As manobras de RCP a tórax fechado (1 ventilação/5 compressões toráxicas manuais), foram iniciadas dez minutos após o início da fibrilação ventricular. Os animais foram divididos aleatoriamente em 2 grupos. Dois minutos após o início da RCP, o grupo A recebeu por via venosa central 10ml de cloreto de sódio 0,9% e o grupo B, Angiotensina II (0,1mg/kg diluído em 10ml de cloreto de sódio 0,9%). O choque desfibrilatório foi iniciado dois minutos após a administração da droga até a obtenção de um ritmo viável ou até atingir o máximo de 6 choques. Os resultados obtidos na PPcor e RCE em ambos os grupos nos tempos: controle (pré-parada), 2 minutos de RCP (pré-droga) e 4 minutos de RCP (2 minutos pós-droga), foram os seguintes (em mmHg): grupo A: 119,3 +/- 11,2; 8,0 +/- 10,3 e 12,0 +/- 14,8, respectivamente, sendo que em apenas um dos nove cães deste grupo foi obtida a RCE (11 %); grupo B: 111,1 +/-14,1; 6,2 +/- 3,1 e 37,5 +/- 9,5, respectivamente, com oito dos nove cães apresentando a RCE (89%). Angiotensina-II aumentou significativamente a PPcor e a RCE, quando comparada com o grupo-controle, neste modelo de parada por fibrilação ventricular. Estas observações indicam a necessidade de maiores investigações da sua possível utilidade na ressuscitação humana / Abstract: Augmentation of peripheral vascular tone with alpha-adrenergic drugs is vital for restoration of spontaneous circulation (ROSC) during cardiopulmonary resuscitation. We studied the effects of Angiotensin-II (A-II), a potent nonadrenergic vasoconstrictor drug on coronary perfusion pressure (CorPP) and ROSC in a dog model of Fibrillatory Arrest (FA). Eighteen mongrel dogs, both sexes, weighing 11.9 +/- 3.7 kg, anaesthetized with thiopental, were intubated and ventilated with air (TV: 20 ml/kg, RR: 15/min). Ao pressure, RA pressure and EKG were continuously monitored. FA was induced electrically and manual closed-chest CPR (1 air ventilation/5 chest compressions) was started 10 min after the onset of ventricular fibrillation. The animals were then divided into 2 equal groups and after 2 min of CPR they received via a central IV line: Saline, 10ml (group A) or A-II, 0.1 mg/kg (group B). Defibrillation was attempted 2 min after drug injection until either a maximum of 6 DC shocks or a viable rhythm was achieved. Ventricular fibrillation induced a rapid fali in Ao pressure and an increase in RA pressure and, at the end of the 10th min of VF, the mean Ao pressure was very low and CorPP was virtualIy inexistent. During the basic closed chest cardiopulmonary resuscitation (CC - CPR) period (2 min CPR), CorPP remained very low. Two min after drug injection (4 min CPR), CorPP increased significanthy in group B (from 6.2 +/- 3.1 to 37.5 +/- 9.5mmHg p < 0.001), but not in group A (from 8.0 +/-10.3 to 12.0 +/-14.8mmHg, p = NS). A viable, non-fibrillatory rhythm was achieved in alI animaIs after defibrillation attempts, and 1 out of 9 dogs in group A (SAL) and 8 out of 9 in grup B (A-II) had their spontaneous circulation restored (p < 0.01). A-II, a potent non-adrenergic vasoconstrictor drug, was greatly effective for augmentation of CorPP and ROSC in this FA model and deserves further investigation in resuscitation / Mestrado / Mestre em Farmacologia

Orientador: Maria de Lourdes Garboggini da Gama / Tese (doutorado) - Universidade Estadual de Campinas, Faculdade de Odontologia de Piracicaba / Made available in DSpace on 2018-07-19T23:46:11Z (GMT). No. of bitstreams: 1 LimaJunior_GersonMendesde_D.pdf: 2064230 bytes, checksum: dcd99a6419c6e3d90d3a3bf64dba2237 (MD5) Previous issue date: 1994 / Resumo: Foi estudado o efeito da amputação dos incisivos inferiores s'obre as glândulas submandibulares de ratos machos castrados. Demonstramos que nestes animais, injetados com metotrexato Q,75 mg/kg, i.p., e submetidos ã amputação dos in cisivos inferiores',ocorre aumento do peso relativo das glându1as' submandibu1ares - não ocorrendo o mesmo em ratos cas- , trados que só .sofr'eram amputação dos incisivos inferiores. Assim, utilizando-se ratos que foram castrados aos 30 dias de idade, prQcedemQ~ a amputação dos incisivos inferiores e administramosDurateston 250R. Os resultados indicam um peso gla~ dular relativo menor para as glândulas dos ratos que receberam a adminis.tração da referida droga, por via i .m.. Animais machos castr'ados tambem foram submetidos à administração de metotrexato ou ci.clofosfamida e ã amputação única dos incisivos inferiores e administração de reserpina ou pindolol, com a finalidade de verificar se tais drogas bloqueadoras do simpático impediriam os aumentos relativos das glândulas submandibulares, que eram retiradas e pesadas no 79 dia após a amputação dos incisivos inferiores. Nos animais que se injetou matotrexato mais reserpina e se fez amputação dos incisivos inferiores, não houve significante aumento ou diminuições dos pesos glandulares relativos quando comparado com os contro- 1es, apesar de o peso glandular medio ter sido menor. Já os ratos i..njetadoscom reserpina 25 mg/kg e ciclofosfamida, apre sentaram pesos relativos maiores que os ratos do grupo injetados com r'e.serpinae metotrexato e com incisivos inferiores am- putados. Comparando-se ratos castrados, nos quais se injetava pindolol mais ciclofosfamida, não foi verificado diferença sig-. nificante entre os pesos glandulares médios destes ratos e do grupo controle, isto ê, ratos castrados, com incisivos inferiores amputados mais administração de pindolol. Os resultados dos experimentos foram submetidos ã análise de variância e ao teste de Tuk.ey / Abstract: Not informed. / Doutorado / Farmacologia / Doutor em Odontologia

Submitted by Cleide Dantas (cleidedantas@ufpa.br) on 2014-10-30T11:57:54Z No. of bitstreams: 2 license_rdf: 22974 bytes, checksum: 99c771d9f0b9c46790009b9874d49253 (MD5) Tese_ToxicidadeInvitroInvivo.pdf: 776314 bytes, checksum: 33f19517a288e14275d6fcf1fc1bc1be (MD5) / Approved for entry into archive by Ana Rosa Silva (arosa@ufpa.br) on 2014-10-30T13:38:57Z (GMT) No. of bitstreams: 2 license_rdf: 22974 bytes, checksum: 99c771d9f0b9c46790009b9874d49253 (MD5) Tese_ToxicidadeInvitroInvivo.pdf: 776314 bytes, checksum: 33f19517a288e14275d6fcf1fc1bc1be (MD5) / Made available in DSpace on 2014-10-30T13:38:57Z (GMT). No. of bitstreams: 2 license_rdf: 22974 bytes, checksum: 99c771d9f0b9c46790009b9874d49253 (MD5) Tese_ToxicidadeInvitroInvivo.pdf: 776314 bytes, checksum: 33f19517a288e14275d6fcf1fc1bc1be (MD5) Previous issue date: 2014 / CAPES - Coordenação de Aperfeiçoamento de Pessoal de Nível Superior / O paracetamol (PAR) é um dos medicamentos de venda livre mais utilizado em todo o mundo. Entretanto, doses elevadas do PAR produzem toxicidade hepática e/ou renal. No intuito de minimizar a toxicidade do PAR e obter melhor atividade analgésica e anti-inflamatória, um estudo prévio realizou modificações na estrutura química do PAR por modelagem molecular, dando origem ao ortobenzamol (OBZ) – análogo do PAR. Assim, o OBZ foi sintetizado e avaliado em modelos de nocicepção e inflamação em animais. O estudo demonstrou atividade analgésica central do OBZ, com potência superior ao PAR. Além disso, nos testes de inflamação, essa droga apresentou inibição significativa no processo inflamatório. Entretanto, para que o OBZ possa ser considerado uma alternativa terapêutica nova e importante para o tratamento da dor e/ou da inflamação é necessário determinar sua toxicidade. Assim, este estudo objetivou avaliar a toxicidade in vitro e in vivo do OBZ e, compará-la com a do PAR. Para isso, a neurotoxicidade foi avaliada in vitro em culturas primárias de neurônios corticais, através de ensaios de viabilidade celular, determinação dos níveis de glutationa total e reduzida, assim como a possível capacidade neuroprotetora frente ao estresse oxidativo. Foram realizados estudos in vivo em camundongos, iniciados pela determinação da dose efetiva mediana (DE50) do PAR, a fim de compará-la com a do OBZ nos modelos de toxicidade estudados. Determinou-se o estresse oxidativo hepático e cerebral pela análise dos níveis de peroxidação lipídica e nitritos. A possível disfunção hepática e renal foi determinada, por meio da análise dos níveis plasmáticos das enzimas aspartato aminotransferase (AST), de alanina aminotransferase (ALT), gama glutamiltransferase (GGT) e, da creatinina no sangue. Avaliaram-se alterações nos parâmetros clínicos através do hemograma, leucograma e plaquetograma e, realizou-se a determinação da toxicidade aguda. Os resultados obtidos neste estudo demonstraram que o ortobenzamol é mais seguro que o paracetamol. Registrou-se ao ortobenzamol ausência de neurotoxicidade, menor potencial hepatotóxico e hematotóxico, ausência de nefrotoxicidade e, ainda, foi classificado como um xenobiótico de baixa toxicidade após a avaliação da toxicidade aguda. Portanto, o ortobenzamol pode ser considerado como uma futura alternativa terapêutica segura ao paracetamol, no tratamento da dor e inflamação. / Paracetamol (PAR) is the non-prescription medicine most used worldwide. However, high doses of PAR produce hepatic and/or renal toxicity. In order to minimize the toxicity of PAR and get better analgesic and anti-inflammatory activity, a previous study conducted by modifying the chemical structure of PAR through molecular modeling, gave rise to ortobenzamol (OBZ) – analog of PAR. Thus, the OBZ was synthesized and evaluated in models of nociception and inflammation in animals. The study showed central analgesic activity of OBZ, with superior potency when compared to PAR. In addition, tests showed a significant inhibition in the inflammatory process. However, to the OBZ be able to be considered as an important new therapeutic option for the treatment of pain and/or inflammation is necessary to determine its toxicity. Given that, this study aimed to evaluate the toxicity in vitro and in vivo OBZ and compare it with the PAR. For this purpose, in vitro neurotoxicity was evaluated in primary cultures of cortical neurons through cell viability assays, determination of the levels of total and reduced glutathione, as well as the possible neuroprotective capacity against oxidative stress. In vivo studies were performed in mice, initiated by determining the median effective dose (ED50) of PAR in order to compare it with the OBZ at toxicity models studied. It was determined the liver and brain oxidative stress by analyzing the levels of lipid peroxidation and nitrites. The possible hepatic and renal dysfunction was determined by analyzing plasma enzymes aspartate aminotransferase (AST), alanine aminotransferase (ALT), gamma glutamyl transferase (GGT) levels and creatinine in the blood. We evaluated changes in clinical parameters through the CBC, WBC and platelet parameters and was held to determine the acute toxicity. The results of this study showed that in the tested doses, ortobenzamol is safer than paracetamol. The ortobenzamol displayed absence of neurotoxicity, less hepatotoxic and hematotoxic potential, absence of nephrotoxicity and also was rated as a xenobiotic with low toxicity after evaluation of acute toxicity. Therefore, the ortobenzamol can be considered as a safer alternative to the treatment of pain and inflammation when compared to paracetamol.

Submitted by Edisangela Bastos (edisangela@ufpa.br) on 2015-06-08T17:13:02Z No. of bitstreams: 2 license_rdf: 0 bytes, checksum: d41d8cd98f00b204e9800998ecf8427e (MD5) Tese_ExposicaoConcentracaoSubletal.pdf: 1719211 bytes, checksum: 64e13c368ada463d2fc33aa27b42debb (MD5) / Approved for entry into archive by Ana Rosa Silva (arosa@ufpa.br) on 2015-06-17T16:05:56Z (GMT) No. of bitstreams: 2 license_rdf: 0 bytes, checksum: d41d8cd98f00b204e9800998ecf8427e (MD5) Tese_ExposicaoConcentracaoSubletal.pdf: 1719211 bytes, checksum: 64e13c368ada463d2fc33aa27b42debb (MD5) / Made available in DSpace on 2015-06-17T16:05:56Z (GMT). No. of bitstreams: 2 license_rdf: 0 bytes, checksum: d41d8cd98f00b204e9800998ecf8427e (MD5) Tese_ExposicaoConcentracaoSubletal.pdf: 1719211 bytes, checksum: 64e13c368ada463d2fc33aa27b42debb (MD5) Previous issue date: 2015 / FAPESPA - Fundação Amazônia de Amparo a Estudos e Pesquisas / CAPES - Coordenação de Aperfeiçoamento de Pessoal de Nível Superior / O mercúrio é um metal que se destaca dos demais por se apresentar líquido em temperatura e pressão normais. Este xenobiótico se apresenta como a maior fonte de poluição em várias partes do mundo e tem como característica ser altamente tóxico ao Sistema Nervoso Central (SNC). O despejo é na forma líquida diretamente no solo e leito dos rios. Este metal pesado é complexado com vários elementos presentes no solo ou sedimentos sendo convertido à metilmercúrio (MeHg) pela microbiota aquática. O MeHg apresenta a capacidade de se acumular ao longo da cadeia trófica, um evento conhecido como biomagnificação, o qual afeta diretamente a vida humana. Nesse sentido, a Região Amazônica se destaca por possuir todos os componentes necessários para a manutenção do ciclo biogeoquímico do mercúrio, além de populações cronicamente expostas a este metal pesado, sendo este fato considerado um problema de saúde pública. Tem-se conhecimento que este xenobiótico após a exposição aguda a altas doses promove desordens relacionadas ao surgimento de processos degenerativos no SNC, entretanto, os efeitos a baixas concentrações ainda não são totalmente conhecidos. Nesse sentido, se destacam as células gliais que atuam como mediadores no processo de neurotoxicidade desse metal, principalmente em baixas concentrações. Apesar de este tipo celular exibir um importante papel no processo de intoxicação mercurial, a ação deste metal sobre as células glias é pouco conhecida, principalmente sobre o genoma e a proliferação celular. Desta forma, este trabalho se propõe a avaliar o efeito da exposição a este xenobiótico em baixa concentração sobre o material genético e a proliferação celular em células da linhagem glial C6. As avaliações bioquímica (atividade mitocondrial – medida pelo ensaio de MTT –) e morfofuncional (integridade da membrana – avaliada pelo ensaio com os corantes BE e AA –) confirmaram a ausência de morte celular após a exposição ao metal pesado na concentração de 3 μM por um intervalo de 24 horas. Mesmo sem promover processos de morte celular, o tratamento com esta concentração subletal de MeHg foi capaz de aumentar significativamente os níveis dos marcadores de genotoxicidade (fragmentação do DNA, formação de micronúcleos, pontes nucleoplásmica e brotos nucleares). Ao mesmo tempo, foi possível observar uma alteração no ciclo celular através do aumento do índice mitótico e uma mudança no perfil do ciclo celular com aumento da população celular nas fases S e G2/M, sugerindo um aprisionamento nessa etapa. Esta mudança no ciclo celular, provocada por 24h de exposição ao MeHg, foi seguida de uma redução no número de células viáveis e confluência celular 24h após a retirada do MeHg e substituição do meio de cultura, além do aumento no tempo de duplicação da cultura do mesmo. Este estudo demonstrou pela primeira vez que a exposição ao metilmercúrio em concentração baixa e subletal é capaz de promover eventos genotóxicos e distúrbios na proliferação celular em células de origem glial. / Mercury is a metal that stands out from the rest for present liquid under normal temperature and pressure. This xenobiotic is the largest source of pollution in many parts of the world and has been characterized toxic to the central nervous system (CNS). After dumping in liquid form directly into soil and riverbed, this heavy metal complex with various organic elements or it is converted to methylmercury (MeHg) by aquatic microbiota. The MeHg can move up the food chain, an event known as biomagnification, which directly affects human life. Thereby, the Amazon stands out for having all the components necessary for the maintenance of biogeochemical cycle of mercury as well as populations chronically exposed with this heavy metal. And this metal is considered a public health problem. It is well known that this xenobiotic after acute exposure to high doses promotes disorders related to the emergence of degenerative processes in the CNS, however, the effects at low concentrations are not yet fully described. Despite this cell type play an important role in the mercury intoxication process, the role of this metal on glial cells is not well known, especially on the genome and cell proliferation. Thus, this study aimed to evaluate the effect of exposure to this xenobiotic at low concentration on DNA and cell proliferation in C6 glial lineage cells. The biochemical (mitochondrial activity - measured by MTT assay -) and morphofunctional evaluations (membrane integrity - measured by the assay with dyes and AA BE -) confirmed the absence of cell death after exposure to heavy metals in a concentration of 3 μM for 24 hours. Even without causing cell death processes, the treatment with sublethal concentration of MeHg that was able to significantly increase the levels of markers of genotoxicity (DNA fragmentation, micronuclei, nuclear nucleoplasmic bridges and nuclear bud). At the same time, it was possible to observe a change in the cell cycle by increasing the mitotic index and a change in the cell cycle profile with increased cell population in S and G2 / M phases, suggesting an arrest cell cycle arrest. This change in cell cycle caused by MeHg exposure was followed by number of viable cells and cell confluence decrease, 24 hours after the withdrawal of MeHg of culture medium. The C6 cell line culture in addition showed an increase on doubling time parameter. This study demonstrates for the first time exposure to methylmercury low and sublethal concentration can promote genotoxic events and disturbances in cell proliferation in glial cell origin.

Submitted by Cássio da Cruz Nogueira (cassionogueirakk@gmail.com) on 2017-06-26T15:13:43Z No. of bitstreams: 2 license_rdf: 0 bytes, checksum: d41d8cd98f00b204e9800998ecf8427e (MD5) Dissertacao_EstudosFarmacognóticosFitoquímicos.pdf: 2916197 bytes, checksum: 4618aef8c86657faa5e5e0790bb8dbab (MD5) / Approved for entry into archive by Irvana Coutinho (irvana@ufpa.br) on 2017-06-28T15:10:09Z (GMT) No. of bitstreams: 2 license_rdf: 0 bytes, checksum: d41d8cd98f00b204e9800998ecf8427e (MD5) Dissertacao_EstudosFarmacognóticosFitoquímicos.pdf: 2916197 bytes, checksum: 4618aef8c86657faa5e5e0790bb8dbab (MD5) / Made available in DSpace on 2017-06-28T15:10:09Z (GMT). No. of bitstreams: 2 license_rdf: 0 bytes, checksum: d41d8cd98f00b204e9800998ecf8427e (MD5) Dissertacao_EstudosFarmacognóticosFitoquímicos.pdf: 2916197 bytes, checksum: 4618aef8c86657faa5e5e0790bb8dbab (MD5) Previous issue date: 2016-05-12 / No presente trabalho, a Annona glabra foi submetida a estudos farmacognósticos, fitoquímicos e biológicos (atividade leishmanicida e antimicrobiana). Nos estudos farmacognósticos, utilizou-se os métodos descritos na Farmacopéia Brasileira V ed. (2010). O extrato etanólico (EE) foi obtido através de maceração descontínua do pó das cascas com etanol. Este foi submetido a fracionamento por partição líquido-líquido com hexano e metanol aquoso 10%, gerando-se as frações hexanica (FH) e metanólica (FM). A FM foi refracionada em coluna de Sephadex originando-se 46 frações, analisadas em CCD e reveladas com ácido Sulfúrico, Dragendorff e ultravioleta (360 nm) sendo reunidas em 5 grupos conforme o perfil cromatográfico. O Grupo 3 foi purificado em coluna cromatográfica em escala preparativa originando a amostra G3-1. O EE, FM, FH, Grupo 2 e G3-1 foram analisadas em CLAE-DAD. A amostra G3-1 foi submetida a análise em espectroscopia de massas e ressonância magnética nuclear (RMN). Na avaliação da atividade antimicrobiana utilizou-se os métodos da difusão em ágar (Escherichia coli, Staphylococcus aureus e Pseudomonas aeruginosa) e de microdiluição (CIM). O EE e suas frações foram submetidos ao ensaio da atividade leishmanicida (Leishmania amazonensis). O pó foi classificado como pó grosso e de baixa densidade com teor de cinzas e umidade estando dentro dos parâmetros estabelecidos pela Farmacopéia Brasileira. Em CLAE-DAD, os principais picos do EE e suas frações apresentaram no espectro de UV absorbâncias com ʎ entre 240 nm a 280 nm e ʎ entre 300 nm a 400 nm sugestivos respectivamente da banda II (anel A) e banda I (anel B) de flavonóides. A estrutura química de G3-1 foi identificada como sendo o flavonóide Rutina. No teste de difusão em ágar observou-se a formação de halos do EE e FM somente nas placas de Staphylococcus aureus. No ensaio de microdiluição verificou-se que o EE e a FM apresentaram CIM>1000 μg/mL, sendo assim, consideradas inativas. No ensaio antileishmania, o EE apresentou CI50>200 μg/mL. A FM e FH também apresentaram CI50>200 μg/mL, no entanto, inibiram o crescimento das promastigotas respectivamente em 20% e 33,7%. As subtrações Grupo 2 e G3-1 apresentaram CI50>200 μg/mL, porém, na concentração de 200 μg/mL inibiram o crescimento parasitário em aproximadamente 45%. O EE, suas frações e subfrações foram inativas frente as amastigotas de L. amazonensis, no entanto, a FH nas concentrações de 250 e 125 μg/mL inibiu a infecção em 39,1% e 18,7%. Em síntese, o EE e suas frações mostraram-se inativas nos ensaios antimicrobiano e leishmanicida, porém o fracionamento contribuiu para o aumento da atividade sugerindo que substâncias ativas devam estar em baixos teores no extrato e suas frações. / In this study, the Annona glabra underwent pharmacognostic, phytochemicals and biological studies (leishmanicide and antimicrobial activity). In pharmacognostic studies, we used the methods described in Brazilian Pharmacopoeia V ed. (2010). The ethanolic extract (EE) was obtained by maceration of the powder batch of shells with ethanol. The extract was fractionated by liquid-liquid partition with hexane and 10% aqueous methanol resulting in hexane (HF), and methanol (MF) fractions. The MF was submitted to Sephadex column. This procedure resulted in 46 fractions that were analyzed in thin layer chromatography and revealed with sulfuric acid, Dragendorff, and ultraviolet (360 nm) being assembled into 5 groups according to their chromatographic profiles. Group 3 was purified by column chromatography on a preparative scale yielding the G3-1 sample. EE, MF, HF, Group 2 and G3-1 were analyzed by HPLC-DAD. The G3-1 sample was analysed by mass spectrometry and nuclear magnetic resonance (NMR). To evaluate the antimicrobial activity, methods of agar diffusion (Escherichia coli, Staphylococcus aureus and Pseudomonas aeruginosa) and microdilution (MIC) were used. The EE and its fractions were subjected to leishmanicide activity test (Leishmania amazonensis). The powder was classified as coarse and low-density, with ash and moisture contents within the parameters established by the Brazilian Pharmacopoeia. In HPLC-DAD, the main peaks of EE and its fractions were presented in UV absorption spectrum of 240 nm to 280 nm, and 300 nm to 400 nm suggestive respectively Band II (Ring A), and band I (ring B ) of flavonoid. The G3-1 chemical structure was identified as flavonoid rutin. In the agar diffusion test, we observed the formation of halos in EE and MF only in Staphylococcus aureus plates. In the microdilution assay, the EE and FM showed MIC> 1000 mg / mL, considered inactive. In antileishman test, the EE showed IC50> 200 / ml. The MF and HF also showed IC50> 200 / ml; however, they inhibited the growth of promastigotes respectively in 20% and 33.7%. The subtractions and G3-1 Group 2 showed IC50> 200 / ml, but the concentration of 200 / ml inhibited the parasite growth by approximately 45%. The EE, fractions, and subfractions were inactive against L. amazonensis amastigotes. However, the HF concentrations of 250 and 125 g / ml inhibited infection in 39.1% and 18.7%. In short, EE and its fractions were shown to be inactive in the antimicrobial and leishmanicide trials, but fractionation contributed to increase activity suggesting that active substances must be at low levels in extract and its fractions.

Tesi realitzada al Grup de Nanomalària (IBEC-ISGlobal) / Bearing in mind the absence of an effective preventive vaccine against malaria (WHO, 2015) and its severe clinical manifestations that are principally associated with red blood cell (RBC) destruction and parasitized-RBC (pRBC) cytoadherence to host cells causing in turn nearly half a million deaths every year, this disease represents nowadays a major threat to life and consequently its control and ultimate global eradication must be undertaken without preconceptions. Additionally, the basic rationale followed by most of the currently marketed antimalarial approaches is based on the administration of single/multiple drugs on their own, strategy that promotes the emergence of drug-resistant parasites owing to the limitation in delivering drug payloads into the pRBC high enough to kill the intracellular parasite while at the same time minimizing the risk of causing toxic side effects to the patient. Such dichotomy has been successfully addressed through the preparation of RBC- and pRBC-targeted drug delivery systems in the form of antibody-vectorized liposomes (iLPs), among other types of nanovectors, improving in this way the activity of antimalarials (Chandra, 1991; Owais, 1995; Urbán, 2011). Nevertheless, the aforesaid iLP models have been poorly characterized with a minimal knowledge regarding: their mechanism of interaction with the target cell, release kinetics of encapsulated material or antibody coupling yield; and their recognized antigens have not been reported or are still unknown. Besides, the improvement in drug activity they have provided has been rather modest when evaluated against the human-infecting Plasmodium falciparum species. The main scope of this PhD thesis has been in this regard the characterization and development of more effective immunoliposomal nanovectors against P. falciparum with special attention given to the obtainment of chemotherapeutic approaches displaying multiple mechanisms of action. Antibody coupling yields of >40% were obtained by means of their derivatization with the SATA crosslinker and the incorporation of maleimide-containing, PEGylated phospholipids into LPs, which results in the highly stable thioether linkage. SATA/antibody molar ratios of up to 10× provided adequate antigen recognition and minimal iLP aggregation. Furthermore, the pH- driven active encapsulation of chloroquine (CQ) and primaquine antimalarials into DSPC-based LPs together with their conjugation with a monoclonal antibody specific for the glycophorin A antigen of RBCs (GPA-iLPs) enabled these iLPs (i) to completely recognize and become retained into both RBCs/pRBCs, as well as (ii) a total and stable drug encapsulation along with its effective intracellular release under parasite culture conditions. The improved antimalarial efficacy of CQ-loaded, GPA-iLPs was demonstrated in vivo in P. falciparum-infected, humanized mice through the reduction of their parasite densities to undetectable levels (<0.01% parasitemia) and following a 4 × 0.5 mg CQ/kg dosage schedule. Free CQ at a dosage 3.5 times higher was at least 40-fold less effective. Moreover, lumefantrine-laden iLPs targeted against rosette-forming variants of PfEMP1 exhibited a great potential for severe malaria therapeutics by means of mechanically disrupting already generated rosettes while at the same time eliminating those parasites forming them. An increased activity of lumefantrine in reducing the number of rosette-forming pRBCs was obtained when delivered by homologous PfEMP1-targeted-iLPs with a ~5.5-fold decreased IC50 compared to either free drug or non-targeted LPs. The rosette-disrupting activity of anti- PfEMP1 antibodies was importantly preserved after their conjugation to LPs. Finally, based on a recent study in Toxoplasma gondii (Nagamune, 2008), the biosynthesis of ABA by P. falciparum was explored as a new target route for the design of antimalarials. However, ABA could not be found in late form-pRBC extracts even though the sensitivity for its detection had been extraordinarily improved (LOD of 0.03 ng/ml).