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Análise proteômica de paracoccidioides sp. em condições de estresse osmótico / Proteomic analysis of paracoccidioides sp. under osmotic stress

Rodrigues, Leandro Nascimento da Silva 28 November 2014 (has links)
Submitted by Marlene Santos (marlene.bc.ufg@gmail.com) on 2016-08-10T17:18:30Z No. of bitstreams: 2 Tese - Leandro Nascimento da Silva Rodrigues - 2014.pdf: 2636013 bytes, checksum: 332020037e85516d843bbcbfc5e4da75 (MD5) license_rdf: 0 bytes, checksum: d41d8cd98f00b204e9800998ecf8427e (MD5) / Approved for entry into archive by Luciana Ferreira (lucgeral@gmail.com) on 2016-08-15T13:41:26Z (GMT) No. of bitstreams: 2 Tese - Leandro Nascimento da Silva Rodrigues - 2014.pdf: 2636013 bytes, checksum: 332020037e85516d843bbcbfc5e4da75 (MD5) license_rdf: 0 bytes, checksum: d41d8cd98f00b204e9800998ecf8427e (MD5) / Made available in DSpace on 2016-08-15T13:41:26Z (GMT). No. of bitstreams: 2 Tese - Leandro Nascimento da Silva Rodrigues - 2014.pdf: 2636013 bytes, checksum: 332020037e85516d843bbcbfc5e4da75 (MD5) license_rdf: 0 bytes, checksum: d41d8cd98f00b204e9800998ecf8427e (MD5) Previous issue date: 2014-11-28 / Coordenação de Aperfeiçoamento de Pessoal de Nível Superior - CAPES / The dimorphic fungus Paracoccidioides is the etiological agent of paracoccidioidomycosis, a systemic mycosis with high relevance for the public health in Brazil and other Latin American countries such as Colombia and Venezuela. Generally, microorganisms require responses to stress conditions to survive in response to environmental changes and pathogenic organisms, particularly, require an effective response even higher to react against host defences. Osmotic stress has been used as a model to study signal transduction and seems to cause many cellular adaptations, which include signal transduction pathways modification, protein expression alteration and cellular volume and size regulation. In this work we have evaluated the proteomic profile of yeast cells of Paracoccidioides sp. (Pb01) obtained in osmotic stress condition. Data describe an osmoadaptative response of this fungus when subjected to this treatment. Proteins involved in the synthesis of the cell wall components were modulated, evidencing a remodelling of the cell wall. In addition, it was also observed alterations on the energy metabolism, given that proteins of the pentose phosphate pathway were abundant while proteins of the glycolysis were less abundant under osmotic stress condition. In addition changes in amino acid metabolism were also observed; more clearly the degradation of amino acids such as leucine, isoleucine and valine was induced during osmotic stress. Hereupon, our study suggests that Paracoccidioides sp. (Pb01) present a vast osmoadaptative repertoire; comprising different proteins which act complementarily and that this response could be able to minimize the effects caused by osmotic stress. / O fungo dimórfico Paracoccidioides é o agente etiológico da paracoccidioidomicose, uma micose sistêmica com grande relevância na saúde pública no Brasil e em outros países da América Latina, como Colômbia e Venezuela. Microrganismos, em geral, requerem respostas às condições de estresse para sobreviver às mudanças ambientais e patógenos, em particular, necessitam de uma resposta efetiva ainda maior para reagir às defesas do hospedeiro. O estresse osmótico é usado como um modelo para estudos de transdução de sinais e parece causar muitas adaptações celulares, as quais incluem alterações nas vias de transdução de sinais, expressão de proteínas e regulação do volume e tamanho celulares. Neste trabalho foi avaliado o perfil proteômico das células leveduriformes de Paracoccidioides sp. (Pb01) obtidas sob condições de estresse osmótico. Os dados evidenciam uma resposta osmoadaptativa deste fungo, quando submetido a este tipo de estresse. Proteínas envolvidas na biossíntese de componentes de parede celular foram moduladas, evidenciando um remodelamento de parede. Também foram observadas prováveis alterações no metabolismo de energia, tendo em vista que proteínas da via das pentoses fosfato mostraram-se abundantes, enquanto proteínas da via glicolítica mostraram-se em menor abundância frente às condições de estresse osmótico. Adicionalmente alterações no metabolismo de aminoácidos também foram observadas; de forma mais evidente a degradação de aminoácidos como leucina, valina e isoleucina foi induzida durante o estresse osmótico. Neste sentido, nosso estudo sugere que Paracoccidioides sp. (Pb01) possui um amplo repertório osmoadaptativo, composto por diferentes proteínas que atuam de maneira complementar e que devem atuar promovendo a minimização dos efeitos causados pelo estresse osmótico.
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Desenvolvimento de células a combustível de álcoois direta: produção de protótipos de alta potência / Direct alcohol fuel cell development: high power prototype production

Lívia Martins da Palma 20 May 2015 (has links)
Neste trabalho investigou-se a oxidação de álcoois (etanol e glicerol) em meio alcalino empregando diferentes catalisadores de metais nobres suportados em carbono Vulcan preparados através da síntese de irradiação de micro-ondas, para aplicação em dispositivos de células a combustível. Neste âmbito, catalisadores suportados em carbono na razão metal:carbono de 40:60 % foram preparados com dois metais nobres: catalisadores a base de Pt(PtM/C, M=Sn, Ru e Ni); e catalisadores a base de Pd(PdM/C, M=Sn, Ru, Ni, Rh, Fe e Mn). Os resultados de EDX revelaram que todos os catalisadores apresentam composições experimentais próximas às nominais. Todos os catalisadores apresentaram características dos respectivos metais nobres; geometria cúbica de face-centrada. Catalisadores de Pd54Fe46/C, Pd71Ru29/C também apresentaram fases isoladas dos óxidos de rutênio e ferro,a fase de Pd2Sn também está presente nos catalisadores contendo Sn. Cristalitos e partículas na ordem de 2 a 7 nm foram observados. Dentre os diversos catalisadores estudados para a oxidação de etanol ([Etanol]=1,0 mol L-1 + [NaOH]=1,0 mol L-1), o catalisador Pt45Sn55/C apresentou maior atividade, formando ácido acético e acetaldeído em quantidade superiores aos demais catalisadores. Já para catalisadores a base de Pd, Pd54Fe46/C e Pd63Sn37/C apresentaram resultados eletroquímicos muito semelhantes, porém, em relação aos produtos formados durante a eletrólise, o catalisador Pd54Fe46/C formou 3 vezes mais ácido acético(4 elétrons). Para a eletro-oxidação de glicerol em meio alcalino ([Glicerol]=0,5 mol L-1 + [NaOH]=1,0 mol L-1), o catalisador Pt86Ru14/C foi o que apresentou os maiores valores de atividades catalíticas. Os principais produtos formados durante as eletrólises de glicerol foram ácido glicérico, ácido tartrônico, 1,3-dihidroxiacetona (DHA), a quantidade de produtos formados pelo catalisador Pt86Ru14/C foi, aproximadamente, três vezes superiorao catalisador Pt/C. A formação de um produto de maior valor agregado, 1,3-DHA, é interessante do ponto de vista eletrossíntético. A seguinte ordem de reatividade é observada para os catalisadores de Pd: PdRu/C >PdFe/C >PdMn/C >PdRh/C >PdSn/C. Dentre os produtos formados na oxidação de glicerol somente para os catalisadores PdRh/C e PdFe/Cidentificou-se ácido tartrônico (6 elétrons) e 1,3-DHA (2 elétrons) / In this thesis it was investigated ethanol and glycerol oxidation in alkaline medium using different noble metal catalysts supported on Vulcan carbon prepared by microwave irradiation synthesis, for application in fuel cell devices. In this context, catalysts in the ratio metal:carbon 40:60% were prepared using two noble metals: Pt-based catalysts (PtM/C, M = Sn, Ru and Ni); and Pd-based catalysts (PdM/C, M = Sn, Ru, Ni, Rh, Fe and Mn). The experimental compositions obtained by EDX were close to nominal values. All the catalysts exhibited cubic face-centered geometry characteristics of its respective noble metal. Catalysts Pd54Fe46/C and Pd71Ru29/C also presented of iron and ruthenium oxides phases, Pd2Sn phase is also observed for Pd61Sn39/C catalyst. Particles and crystallites around 2 to 7 nm were observed. Among all catalysts studied for ethanol electro-oxidation ([Ethanol]=1.0 mol L-1 + [NaOH]=1.0 mol L-1), Pt45Sn55/C catalyst was the most active, the yield of acetic acid and acetaldehyde are higher for this composition. Pd-based catalysts, Pd54Fe46/C and Pd61Sn39/C showed very similar electrochemical behavior; however, for Pd54Fe46/C catalyst the amount of acetic acid (4 electrons) formed are three times higher. Pt86Ru14/C catalyst presented the highest catalytic activities for glycerol electro-oxidation ([glycerol]=0.5 mol L-1 + [NaOH]=1.0 mol L-1). The main products formed during glycerol electrolysis were glyceric acid, tartronic acid, 1,3-dihydroxyacetone (DHA), the amount of products formed employing Pt86Ru14/C catalyst was almost three times higher than Pt/C catalyst. The formation of a product with higher added-value, 1,3-DHA, is interesting in electro-synthetic point of view. The reactivity order were observed for Pd catalysts are: PdRu/C > PdFe/C > PdMn/C > PdRh/C > PdSn/C. Tartronic acid (6 electrons) and 1,3-DHA (2 electrons) were only identified at PdRh/C and PdFe/C catalysts
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Co-digestão de glicerina bruta associada a esterco bovino na produção de biogás / Co-digestion of crude glycerine associated with cattle manure in the production of biogas

Siqueira, Jessé 07 December 2012 (has links)
Made available in DSpace on 2017-07-10T17:59:32Z (GMT). No. of bitstreams: 1 Jesse Siqueira.pdf: 809003 bytes, checksum: 6021d4aac82f4c76ae84284b8bb770cd (MD5) Previous issue date: 2012-12-07 / Coordenação de Aperfeiçoamento de Pessoal de Nível Superior / In seeking to reduce dependence on fossil fuels, alternative energy sources and less environmental impact has been widely studied, biofuels. Among them, we highlight the biodiesel and biogas. The increased production of biodiesel to meet with Brazilian legislation, invariably leads to an increase in the supply of a co-product called crude glycerin. With a generation of about 10% of the total volume of biodiesel produced large amounts of glycerin are generated annually, however, the costs for purification of the co-product are high. It is necessary to note its correct disposal, since it has high organic load and its improper disposal could mean major environmental impacts. One way is the biodigestion with other organic waste such as cattle manure. Its high carbon biodegradable can be used in co-digestion with cattle manure as a supplement in the production of biogas. The addition of different concentrations of crude glycerin (2%, 4% and 6% m / m) was used as a supplement in anaerobic digestion co-dairy cattle manure in laboratory batch digesters (3.5 L working volume) . The digesters were operated at mesophilic conditions (30 ° C), with hydraulic retention time (HRT) of 30 days. It was analyzed the total solids (TS), volatile solids (VS) and chemical oxygen demand (COD) to determine the process efficiency in the removal of organic matter and its effect on biogas production. The addition of 4% glycerin resulted in higher production of biogas, about 9307 ml. The COD removal efficiency decreased with addition of glycerin, with the greatest reduction in control treatment, 68%. In other treatments increased by 90% and 118% for treatments Gli4% and Gli6% respectively. The VS reductions for the treatments Gli0%, Gli2% Gli4% and Gli6% were 18.17%, 61.60%, 24.36% and 44.83% for the respective treatments. / Em busca de se diminuir a dependência do uso de combustíveis fósseis, fontes alternativas e de menor impacto ambiental tem sido amplamente estudadas, os biocombustíveis. Dentre eles, destacam-se o biodiesel e o biogás. O aumento da produção de biodiesel a fim de atender à legislação brasileira, invariavelmente acarreta um aumento na oferta de um co-produto chamado glicerina bruta. Com uma geração de cerca de 10% do volume total de biodiesel produzido, grandes quantidades de glicerina são geradas anualmente, sendo que os custos para a purificação são elevados. São necessárias formas de se destinar corretamente esse co-produto, já que apresentam elevada carga orgânica e sua disposição inadequada poderia significar grandes impactos ambientais. Uma forma é a biodigestão juntamente com outro resíduo orgânico, como os dejetos bovinos. Seu teor elevado de carbono biodegradável pode ser aproveitado na co-digestão com dejetos bovinos como um suplemento na produção de biogás. A adição de diferentes concentrações de glicerina bruta (0%, 2%, 4% e 6% m/m) foi utilizada como suplemento na co-digestão anaeróbia de dejetos bovinos de leite, em biodigestores laboratoriais de batelada ( 3,5 L de volume útil). Os biodigestores foram operados em condições mesofílicas (30º C), com tempo de retenção hidráulica (TRH) de 30 dias. Foram analisados os sólidos totais (ST), sólidos voláteis (SV) e demanda química de oxigênio ( DQO) a fim de determinar a eficiência do processo na remoção da matéria orgânica e seu efeito na produção de biogás. A adição de 4% de glicerina resultou na maior produção de biogás, cerca de 9307 mL. A eficiência na remoção de DQO diminuiu nos tratamentos com adição de glicerina, sendo a maior redução no tratamento controle, de 68%. Nos demais tratamentos houve um aumento de 90% e 118% para os tratamentos Gli4% e Gli6% respectivamente. As reduções de SV para os tratamentos Gli0%, Gli2%, Gli4% e Gli6%, foram de 18,17%, 61,60%, 24,36% e de 44,83%, para os respectivos tratamentos.
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EFEITO CATALÍTICO DE ELETRODOS DE Pt/C , PtIr/C, PtW/C E PtRe/C SOBRE REAÇÃO DE OXIDAÇÃO DE ETANOL E GLICEROL. / CATALYTIC EFFECT OF ELECTRODES Pt / C, PtIr / C, PTW / PTRE CE / C ON OXIDATION REACTION OF ETHANOL AND GLYCEROL

Nunes, Fernanda de Almeida 06 July 2012 (has links)
Made available in DSpace on 2016-08-19T12:56:39Z (GMT). No. of bitstreams: 1 dissertacao Fernanda.pdf: 1549685 bytes, checksum: d2b56a7ad60c89efdf1404d7658ae95a (MD5) Previous issue date: 2012-07-06 / Coordenação de Aperfeiçoamento de Pessoal de Nível Superior / In this work, nanocatalysts of Pt/C, PtRe/C PtIr C and PtW/C supported on carbon were prepared by the alcohol reduction process and characterized by transmission electron microscopy (TEM), X-ray Diffraction (XRD), Energy Dispersive X-ray (EDX) and X-ray photoelectron spectroscopy (XPS). The electrochemical behavior of nano catalysts in the presence of ethanol and glycerol were evaluated by cyclic voltammetry (CV) and chronoamperometry. The results indicated that the nanoparticles PtRe/C showed better catalytic performance in the range of interest potential for direct alcohol fuel cells, up to 0.6 V. It can be suggested that this behavior is due to the presence of Re that intensified the catalyst performance aiding the formation of more reactive sites to improve the oxidation process. / Neste trabalho, nanocatalisadores de Pt/C, PtRe/C, PtIr/C e PtW/C suportados em carbono foram preparados pelo método de redução por álcool e caracterizados usando as técnicas de Microscopia eletrônica de transmissão (MET), Difração de raios-X (DRX), Energia Dispersiva de raios-X (EDX) e Espectroscopia fotoeletrônica de raios X (XPS). O comportamento eletroquímico dos nanocatalisadores frente às reações de oxidação de etanol e glicerol foi avaliado por voltametria cíclica (VC) e cronoamperometria. Os resultados mostraram que as nanopartículas de PtRe/C apresentaram melhor desempenho catalítico na faixa de potenciais de interesse para células à combustível. Pode-se sugerir que este comportamento se deve a presença do Re que intensificou o desempenho do catalisador auxiliando a formação de sítios mais reativos para melhorar o processo de oxidação.
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Enxertos combinados de derme alógena residual, preservada em glicerol, sobreposta por pele autógena, como cobertura definitiva de queimaduras pofundas - relato de casos / Combined grafts of glycerol preserved residual allogeneous dermis put upon by autogenous skin as definitive covering of deep burns: cases report

Gino Cesar Cunha Arrunategui 16 February 2007 (has links)
Ainda que resulte na sobrevida do paciente, o tratamento atual de queimaduras profundas e extensas é imperfeito. A contratura cicatricial e o aspecto rendilhado persistentes na área enxertada produzem resultados estéticos e funcionais pobres. A principal dificuldade no adequado restabelecimento do tegumento destes pacientes é o déficit de derme, decorrente da reposição das perdas com enxertos relativamente finos. Neste trabalho são relatados quatro casos, decorrentes da familiaridade obtida em nossa prática clínica com o emprego de pele preservada em glicerol, nos quais foi utilizada a enxertia combinada, isto é, derme alógena residual sobreposta por enxertos de espessura parcial autógenos, como forma de reposição de matriz dérmica. Os tegumentos resultantes da enxertia combinada mostraram-se estáveis e duráveis, dentro do período de seguimento dos casos apresentados. / Although it results in the patient\'s survival, the current treatment of deep and extensive burns is imperfect. Scar contracture and the persistent lacy aspect in the grafted area produce aesthetic and functional poor results. The main difficulty in the appropriate re-establishment of the tegument of these patients is the deficit of dermis, due to the replacement of the skin losses with relatively thin grafts. In this work, decurrent of the familiarity obtained in our clinical practice with glycerol preserved cadaver skin, four cases are reported, which the combined grafting was used, that is, residual allogeneous dermis put upon by split thickness autogenous grafts, as form of replacement of dermal matrix. The resulting teguments of the combined grafting were shown stable and durable, inside the follow-up period of the presented cases.
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Preparação e utilização de amino catalisadores - derivados do glicerol, D-manitol e L-aminoácidos - em reações de adição aldólica

Martins, Rafaela de Souza 03 August 2017 (has links)
Submitted by Renata Lopes (renatasil82@gmail.com) on 2017-10-10T11:51:05Z No. of bitstreams: 1 rafaeladesouzamartins.pdf: 11994443 bytes, checksum: c42e2d285fd87e325b038e9bfe95bdf5 (MD5) / Approved for entry into archive by Adriana Oliveira (adriana.oliveira@ufjf.edu.br) on 2017-10-10T12:22:21Z (GMT) No. of bitstreams: 1 rafaeladesouzamartins.pdf: 11994443 bytes, checksum: c42e2d285fd87e325b038e9bfe95bdf5 (MD5) / Made available in DSpace on 2017-10-10T12:22:21Z (GMT). No. of bitstreams: 1 rafaeladesouzamartins.pdf: 11994443 bytes, checksum: c42e2d285fd87e325b038e9bfe95bdf5 (MD5) Previous issue date: 2017-08-03 / CAPES - Coordenação de Aperfeiçoamento de Pessoal de Nível Superior / Neste trabalho descrevemos a preparação de oito amino catalisadores, obtidos na forma de sal do trifluoroacetato. Quatro destes catalisadores foram preparados na forma da mistura de dois estereoisômeros, a partir do glicerol e os aminoácidos L-leucina, L-valina, L-fenilalanina e a L-prolina. Os outros quatro amino catalisadores foram preparados, em sua forma estereoisomericamente pura, a partir do D-manitol e os aminoácidos L-leucina, L-valina, Lfenilalanina e a L-prolina. Os oito amino catalisadores foram capazes de catalisar a reação de adição aldólica entre a cicloexanona e o 4-nitrobenzaldeído. Os produtos de adição foram obtidos em rendimentos que variaram de 58-95 %, sendo a maior r.d. de 1 : 9,12 (sin:anti), determinada por RMN de 1H, e maior e.e. de 94 %, determinado por cromatografia líquida de alta eficiência. O melhor resultado, considerando o rendimento, a diastereo e a enantiosseletividade dos produtos formados, foi obtido quando o catalisador enantiomericamente puro derivado da L-prolina foi utilizado. / In this work we describe a preparation of eight amino-catalysts, obtained as a trifluoroacetate salt. Four of these catalysts were prepared, in the form of the mixture of two stereoisomers, from glycerol and the amino acids L-leucine, L-valine, L-phenylalanine and L-proline. The other four amino-catalysts were prepared in stereoisomerically pure form from D-mannitol and the amino acids L-leucine, L-valine, L-phenylalanine and L-proline. The eight aminocatalysts were able to catalyze the aldol addition reaction between cyclohexanone and 4nitrobenzaldehyde. The addition products were obtained in yields ranging from 58-95 %, the highest d.r. from 1:9.1 (sin: anti), determined by 1H NMR, and higher e.e. of 94 %, determined by high performance liquid chromatography. The best result, considering the yield, diastereomer and enantioselectivity of the formed products, was obtained when the enantiomerically pure L-proline derived catalyst was used.
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Análise das alternativas de destinação do glicerol realizadas por produtores de biodiesel: proposta de contribuição no âmbito das medidas compensatórias e mitigadoras / Analysis of the alternatives of destination of glycerol carried out by biodiesel producers: proposal of contribution in the scope of compensatory and mitigating measures

Juliana Chiaretti Novi 25 May 2017 (has links)
Legalmente, foi implementado pelo Governo Federal, o Programa Nacional de Produção do Biodiesel (PNPB). Entretanto, sua produção gera o glicerol. Para os pesquisadores, caso disposto indevidamente, esse coproduto poderá acarretar problemas ambientais. Assim, se o intuito é alcançar a sustentabilidade com a implantação do biodiesel na matriz energética, tornase relevante sua adequada gestão, uma vez que não há controle sobre sua produção e destinação. Falhas de mercado geralmente coexistem com as chamadas falhas de regulação. Nesse contexto, o objetivo foi analisar alternativas de destinação do glicerol realizadas por produtores de biodiesel que podem contribuir no âmbito das medidas compensatórias e mitigadoras. Os métodos utilizados foram pesquisa bibliográfica, documental e de campo para se estudar a teoria e a prática que envolvem o tema. A análise de conteúdo foi realizada com o uso do software MAXQDA®. Além das unidades estudadas, compostas por grandes e pequenos produtores de biodiesel, foram entrevistados engenheiros químicos e pesquisadores na área. Como resultados tem-se que as alternativas de destinação do glicerol realizadas pelos pequenos produtores estudados parecem evidenciar alocação eficiente de recursos. Assim, dentre os aspectos sustentáveis, o econômico se destaca na forma de oportunidade de negócios e geração de renda para o pequeno produtor. Ao contrário, nos grandes produtores, uma vez que poderá demandar maiores custos de transação a destinação é ineficiente e transferida para terceiros. Assim, buscando perpetuar o sistema econômico e proteger o meio ambiente, espera-se que os resultados possam fornecer subsídios para a implantação de políticas que visem remediar ineficiências relacionadas à preservação ambiental e sustentabilidade nos negócios. / Legally, the Federal Government implemented the National Biodiesel Production Program (PNPB). However, its production generates glycerol. For researchers, if improperly disposed of, this co-product could lead to environmental problems. Thus, if the intention is to achieve sustainability with the implementation of biodiesel in the energy matrix, it becomes relevant its adequate management, since there is no control over its production and destination. Market failures generally coexist with so-called regulatory failures. In this context, the objective was to analyze which alternatives of destination of glycerol carried out by biodiesel producers can contribute in the scope of the compensatory and mitigating measures. The methods used were bibliographic, documentary and field research to study the theory and practice that involve the theme. Content analysis was performed using MAXQDA® software. In addition to the units studied, composed of large and small biodiesel producers, were interviewed chemical engineers and researchers in the area. As a result, the alternatives of destination of the glycerol carried out by the small producers studied seem to show efficient allocation of resources. Thus, among the sustainable aspects, the economic stands out in the form of business opportunity and income generation for the small producer. On the contrary, in large producers, the destination is transferred to third parties, since it may demand higher transaction costs. Thus, a system is proposed to encourage, discipline and facilitate alternatives that may contribute to the perpetuation of the economic system in conjunction with environmental protection, attributing functionality to compensatory and mitigating measures. It is hoped that the results could contribute to the implementation of policies aimed at increasing subsidies, especially for small producers.
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Congelamento de sêmen suíno: estudo de crioprotetores intra e extracelulares, metodologias de congelamento e marcador molecular de congelabilidade / Freezing of boar semen: study of penetrating and nonpenetrating cryoprotectants, freezing methods and freezability molecular marker

Bianchi, Ivan 27 February 2007 (has links)
Made available in DSpace on 2014-08-20T13:32:49Z (GMT). No. of bitstreams: 1 tese_ivan_bianchi.pdf: 495717 bytes, checksum: 66978c47d9c193a45f85b5cad5be6c3f (MD5) Previous issue date: 2007-02-27 / Although boar semen is available in the frozen format since 1975, its use has been restricted to very specific situations for many reasons: it requires spermatozoa concentration per dose twice to three times higher than that for cooled semen; semen processing is labor intensive; and farrowing rate and litter size are reduced. Thus, most of the artificial inseminations in swine are performed at the day of semen collection or at most at the following day, using liquid semen conditioned between 15 and 18 ºC. The aims of this thesis were: to evaluate distinct extenders for cooling semen, methods for freezing, centrifugation temperatures, the use of amides as penetrating cryoprotectants and of low density lipoprotein as nonpenetrating cryoprotectants, and the presence of specific protein factors in seminal plasma in the results that could be associated with boar semen freezability. Five experiments have been executed: four with evaluations in vitro (motility and cell membrane integrity); and one with fertilization in vivo. The control treatment was the freezing with glycerol at 3% concentration. The semen processing method that provide more efficient results consisted of semen cooling during 120 min up to a centrifugation temperature of 15 °C. We also identified a 26 kDa factor in the seminal plasma that is associated with maintenance of the integrity of the sperm cell membrane post-thawing. Additionally, parameters of semen quality in vitro with the use of dimetilacetamide at 5% were better than those observed with the most used penetrating cryoprotectant (glycerol 3%) as control, although no difference between those cryoprotectants was observed in vivo. This study demonstrated the association of components in the seminal plasma with the sperm quality, and presenting an alternative protocol of semen freezing-thawed boar semen based in the use of dimetilacetamide at 5%. / Apesar do sêmen suíno congelado estar disponível comercialmente deste 1975, o seu uso tem ocorrido somente em ocasiões específicas, pois, em relação ao uso de sêmen refrigerado, requer duas a três vezes maior número de espermatozóides por dose, o processamento do sêmen é trabalhoso, o tamanho da leitegada é diminuído em um a três leitões por parto e a taxa de parição é menor. Dessa forma, a grande maioria das inseminações artificiais nessa espécie utiliza sêmen diluído e acondicionado no estado líquido entre 15 e 18 ºC. Os objetivos desta tese foram: avaliar diferentes diluidores de resfriamento, metodologias de congelamento, temperaturas de centrifugação, uso de crioprotetores intracelulares a base de amidas e extracelulares baseados em lipoproteína de baixa densidade, além do estudo de fatores protéicos presentes no plasma seminal nos resultados de avaliações in vitro e in vivo de sêmen suíno congelado-descongelado. Foram executados cinco experimentos com avaliações da qualidade do sêmen congeladodescongelado, quatro experimentos com avaliações in vitro (motilidade e integridade de membrana) e um experimento com fertilização in vivo. O tratamento utilizado como controle foi o congelamento com glicerol na concentração de 3%. A melhor curva de resfriamento após a coleta até 15 °C, foi atingida com o tempo de 120 min. Foi identificado um fator de 26 kDa no plasma seminal, cuja ausência proporcionou melhores resultados de integridade de membrana plasmática após o descongelamento. O uso do crioprotetor intracelular dimetilacetamida na concentração de 5%, proporcionou nas avaliações in vitro, resultados superiores ao tratamento controle (glicerol 3%), não diferindo na avaliação in vivo. O presente estudo demonstrou a relação de componentes do plasma seminal com a qualidade espermática, além de apresentar um novo protocolo de congelamentodescongelamento de sêmen suíno baseado no uso de dimetilacetamida 5%.
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Metabolismo de ácidos graxos e glicerol no tecido adiposo branco de camundongos com resistência à insulina induzida pela dieta hiperlipídica / Fatty acid and glycerol metabolism in white adipose tissue of mice with insulin resistance induced by high fat diet

Samyra Lopes Buzelle 26 February 2016 (has links)
Camundongos Swiss, quando submetidos à dieta hiperlipídica (HL), apresentam considerável ganho ponderal e de depósitos adiposos, tornando-se obesos e resistentes à insulina. O objetivo deste trabalho foi avaliar o efeito da dieta HL por 8 semanas no perfil inflamatório, síntese de triacilglicerol (TAG) com ênfase na vias de geração de glicerol-3-fosfato (G3P) e lipólise nos tecidos adiposos brancos (TAB) retroperitoneal (RETRO) e epididimal (EPI) de camundongos. Camundongos Swiss foram alimentados com as dietas: controle (CT) - dieta purificada (AIN-93G); ou HL - dieta AIN-93G modificada contendo 35% de lipídeos (4% de óleo de soja e 31% de gordura suína). Os camundongos alimentados com a dieta HL apresentaram uma maior massa corporal, acompanhada pelo aumento nos tecidos RETRO e EPI, além de desenvolverem resistência à insulina constatada no teste de tolerância à glicose (TTG), hiperglicemia e hiperinsulinemia. O conteúdo protéico da pAKT, avaliado por western blot (WB), e a adiponectina, dosada em homogenados dos tecidos adiposos, estão reduzidos apenas no EPI. Houve aumento na expressão gênica de MCP-1 e PAI-1, e foi observada menor área dos adipócitos no EPI, sem alteração no RETRO dos animais HL. A síntese de novo de ácidos graxos (AG), avaliada pela incorporação de 3H de 3H2O em AG foi maior em ambos os TAB, porém a captação de AG das lipoproteínas circulantes avaliada pela atividade e expressão da lipase lipoproteica (LPL) aumentou no EPI e reduziu no RETRO. A dieta HL induziu aumento na fosforilação do glicerol, avaliada pela atividade e conteúdo da GK que aumentaram nos dois TAB, e maior incorporação de 1-14C-glicerol em TAG no EPI. A captação de glicose in vitro e conteúdo do GLUT- 4, que indicam atividade da via glicolítica foram reduzidos no EPI e RETRO, assim como a gliceroneogênese avaliada pela incorporação de 1-14C-piruvato em TAG, sem alterações na atividade e conteúdo da fosfoenolpiruvato carboxiquinase (PEPCK). A atividade lipolítica basal foi avaliada in vitro pela liberação de glicerol por adipócitos isolados, e não foi alterada pela ingestão de dieta HL, porém quando estimulada por noradrenalina a liberação de glicerol foi menor nos animais HL, assim como as fosforilações da ATGL e HSL e conteúdo do receptor adrenérgico ?3. A dieta HL levou a uma redução no conteúdo de PPAR? e aumento de ATF3 em ambos os tecidos. No EPI houve aumento de pCREB, pSTAT3 e RGS2 em relação aos controles enquanto no RETRO a única diferença encontrada foi a menor pSTAT3. Nossos resultados demonstram que o aumento nos TAB é resultado de maior síntese e captação de AG, e que o G3P necessário para a esterificação a TAG é proveniente principalmente da fosforilação direta do glicerol pela GK; além disso, a reduzida lipólise também parece contribuir para esse quadro. Nos animais HL, o EPI parece ser mais propenso aos efeitos da dieta do que o RETRO / Swiss mice when subjected to high fat diet (HFD), shown considerable weight gain and adipose depots, becoming obese and insulin resistant. The aim of this study was to evaluate the effect of HFD diet for 8 weeks in the inflammatory profile, triacylglycerol (TAG) synthesis with emphasis in glycerol-3-phosphate (G3P) generation pathways and lipolysis in retroperitoneal (RETRO) and epididymal (EPI) white adipose tissue (WAT) of mice. Swiss mice were fed with diets: control (CT) - purified diet (AIN-93G); or HFD - purified diet (AIN-93G) plus 35% of fat (4% soybean oil and 31% of lard). Mice fed a HFD diet had a higher body mass, accompanied by an increase in RETRO and EPI tissues, in addition to developing insulin resistance, evidenced by glucose tolerance test (GTT), hyperglycemia and hyperinsulinemia. The protein content of pAKT, accessed by western blot, and adiponectin, measured in WAT homogenates, are reduced only in EPI. There was an increase in gene expression of MCP-1 and PAI-1, and was observed smaller area of adipocytes in EPI, with no change in RETRO of HFD fed animals. De novo synthesis of fatty acids (FA), evaluated by incorporation of 3H from 3H2O in FA was higher in both TAB, but the uptake of FA, from blood lipoproteins, evaluated by the activity and expression of lipoprotein lipase (LPL) was increased in EPI and reduced in RETRO. HFD induced increase in phosphorylation of glycerol, evaluated by the activity and content of glycerolkinase (GyK) which increased in both TAB and greater incorporation of 1-14C-glycerol in the TAG only in EPI. The in vitro glucose uptake and GLUT-4 content, which indicates the activity of the glycolytic pathway were reduced in EPI and RETRO, as well as glyceroneogenesis assessed by the incorporation of 1-14C- pyruvate into TAG without changes in the activity and contents of phosphoenolpyruvate carboxykinase (PEPCK). The basal lipolytic activity was evaluated in vitro by glycerol releasing from isolated adipocytes, and was not altered by HFD intake, but when stimulated by noradrenaline glycerol release was lower in HFD animals as well as the phosphorylation of ATGL and HSL and ?3 adrenergic receptor content. HFD led to a reduction in the content of PPAR gamma and an increase in ATF3 in both tissues. In EPI there was an increase in pCREB, pSTAT3 and RGS2 while in RETRO the only difference was reduced pSTAT3. Our results shown that TAB increase is result of increased FA synthesis and uptake, and G3P required for esterification TAG comes mainly from direct phosphorylation of glycerol by GyK; Furthermore, reduced lipolysis also seems to contribute to this scenario. HFD effects seem to be more prominent in EPI than in RETRO
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Desenvolvimento de metodologia para a produção de nanopartículas de Y3Al5O12 (YAG) de tamanhos médios diferenciados / Development of methodology for production of nanoparticles Y3Al5O12 (YAG) with different average sizes

Tatiana Veroneze 22 September 2011 (has links)
O desenvolvimento de materiais nanoestruturados tem se destacado devido a necessidade de miniaturização de dispositivos e a procura por novos efeitos físicos e químicos capazes de gerar novas tecnologias. Um importante composto com aplicações principalmente em óptica é o YAG (Y3Al5O12) presente no sistema cerâmico alumina-ítria (\'AL IND.2\'O IND.3\'-\'Y IND.2\'O IND.3\'). O YAG apresenta estrutura cristalina cúbica, expansão térmica isotrópica e não apresenta efeitos de birrefringência, o que possibilita a produção de cerâmica transparente para uso como material hospedeiro de íons terras-raras para o desenvolvimento de lasers de estado sólido. O ponto de partida em processamento cerâmico começa com o conhecimento das características físico-químicas do pó do composto. Em nosso trabalho, o objetivo foi o desenvolvimento de uma metodologia para a obtenção de nanopós de YAG de tamanhos médios diferenciados. Para isso foram realizados distintos processos químicos de síntese, e também, foram utilizados diferentes processos de separação, como a centrifugação e a sedimentação. Na produção das nanopartículas foram utilizados três métodos de síntese: Método de Pechini, Rota Glicerol e Método de Coprecipitação. No método de Pechini avaliou-se o efeito de diferentes valores de pH (1, 4, 7, 9 e 11) e procurou-se correlacionar com os tamanhos médios das nanopartículas. Após a obtenção do pó precursor foram realizadas medidas de decomposição térmica (DSC e TG), observando as principais transformações físico-químicas do material decorrentes dos diferentes métodos de síntese. A formação da fase cristalina do YAG foi determinada por difração de raios X e uma análise estrutural foi efetuada por espectroscopia de infravermelho. Medidas de área superficial específica (BET) foram usadas para avaliar o tamanho médio das partículas. Nanopós de YAG com diferentes intervalos de tamanhos foram produzidos, e o rendimento para cada intervalo de tamanho definido. / Nanostructured materials has emerged because the intense interest for miniaturization of devices and crescent demand for new physical and chemical effects that can generate new technologies. An important compound with applications mainly in optics is the YAG (Y3Al5O12). It\'s present in the alumina-yttria ceramic system (\'AL IND.2\'O IND.3\'-\'Y IND.2\'O IND.3\'). The YAG has a cubic crystaline structure, isotropic thermal expansion and it has no birefringence effects, which allows the production of transparent ceramics to use as host of solid-state lasers. The starting point in ceramic processing begins with the knowledge of the characteristics and physical and chemical properties of the powder. In our work, the goal was the development of a methodology for obtaining YAG nanopowders of different average sizes. To do this we performed distinct chemical synthesis, and we also used different separation processes such as centrifugation and sedimentation. For production of nanoparticles we used three synthesis methods: Pechini, glycerol route and coprecipitation. In the Pechini method we evaluated the effect of different pH values (1, 4, 7, 9 and 11) and tried to correlate with the average sizes of nanoparticles. After obtain the precursor powders we studied the decomposition thermal (DSC and TG) process, arising from the different synthesis methods. The crystalline phase of YAG was determined by x-ray diffraction and the structural analysis was carried out by infrared spectroscopy. Specific surface area measurements (BET) were used to evaluate the average particle size.YAG nanopowders with different average sizes were produced.

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