Orientador: Marco Antonio de Andrade Belo / Banca: Claudinei da Cruz / Banca: Eduardo Makoto Onaka / Resumo: Este estudo objetivou avaliar a participação hepática e efeito glicocorticoide sobre a resposta inflamatória em tilápias do Nilo desafiadas com Aeromonas hydrophila, submetidas ou não a hepatotoxicidade induzida pelo CCl4. Para a realização desta investigação, 130 tilápias do Nilo (Oreochromis niloticus), com peso médio de 150g, oriundos da mesma desova, foram distribuídas aleatoriamente em 13 tanques com capacidade de 2500L de água cada, constituindo quatro tratamentos: NN = sem CCl4 e sem glicocorticoide; CN = com CCl4 e sem glicocorticoide; NG = sem CCl4 e com glicocorticoide; CG = com CCl4 e com glicocorticoide. Um 13° tanque foi composto de peixes não submetidos a nenhum tipo de manipulação para constituir os valores de referência para o estudo (PF). Para todos os grupos foram amostrados 10 animais. A administração do CCl4 foi realizada na cavidade celomática em dose única de 0,5 mL.Kg-1 de p.v. nos grupos CN e CG, enquanto a dexametasona foi administrada via IM na região dorso-lateral esquerda na concentração de 0,2% na dose de 2mg Kg-1 de p.v. nos tratamentos NG e CG. Ambas as administrações foram realizadas no momento de inoculação da cepa de A. hidrophila. Em 6, 24 e 48 HPI (horas pós inoculação), foram colhidos: o exsudato inflamatório para quantificação e avaliação das células inflamatórias; amostras de sangue para avaliação hematológica e bioquimica; feito avaliação somática e histologica do fígado e baço. Como resultado destacamos transtorno hepático gerado pelo CCl4. Este acarretou diversas alterações no mecanismo da resposta inflamatória em tilápias do Nilo como diminuição da síntese de proteínas e formação de degeneração gordurosa hepática, bem com alteração do metabolismo energético apresentando muitas vezes efeito sinérgico quando associado ao efeito imunossupressor da dexametasona, sugerindo a ocorrência de ... / Abstract: This study evaluated the hepatic participation and the glucocorticoid effect on the inflammatory response in Nile tilapia challenged with Aeromonas hydrophila , submitted or not to by CCl4. Conducting this research, 130 Nile tilapia (Oreochromis niloticus ) hepatotoxicity with average weight 150g, from the same spawning , were randomly distributed into 13 tanks with a capacity of 2500L of water each , in four treatments: NN = no CCl4 and without glucocorticoids, CN = with CCl4 and without glucocorticoids , NG = no CCl4 and glucocorticoid, CG = with CCl4 and glucocorticoids. A 13 ° tank was composed of fish not subjected to any manipulation to provide reference values for the study (PF). For all groups 10 animals were sampled. The administration of CCl4 was performed on coelomic cavity in a single dose of 0.5 mL. kg -1 and the CG CN groups, while dexamethasone was administered intramuscularly in the left dorso lateral region in the concentration of 0.2% at a dose of 2mg Kg-1 bw in NG and CG treatments. Both administrations were performed at the time of inoculation strain of A. hidrophila. In 6, 24 and 48 HPI (hours post inoculation) were harvested: the inflammatory exudate for quantification and evaluation of inflammatory cells, blood samples for hematological and biochemical evaluation; made somatic and histological assessment of the liver and spleen was made. As a result include liver disorder generated by CCl4. This led to several harmful changes in the mechanism of the inflammatory response in Nile tilapia as decreased protein synthesis and the formation of fatty liver degeneration, and with altered energy metabolism often presenting synergistic effect when combined with the immunosuppressive effect of dexamethasone, suggesting the occurrence of decreased production of coagulation factors, chemical mediators of inflammation and inhibition of cell membrane receptors / Mestre

Made available in DSpace on 2016-05-11T13:01:08Z (GMT). No. of bitstreams: 2 rafael_torres_ioc_dout_2015.pdf: 4727913 bytes, checksum: 39b1968a4427b96bd96b03ae25ef6316 (MD5) license.txt: 1748 bytes, checksum: 8a4605be74aa9ea9d79846c1fba20a33 (MD5) Previous issue date: 2015 / Fundação Oswaldo Cruz. Instituto Oswaldo Cruz. Rio de Janeiro, RJ, Brasil / O Diabetes mellitus é uma das principais doenças crônicas que afetam a população mundial. Além de hiperglicemia, os pacientes diabéticos exibem uma marcante hiperatividade do eixo hipotálamo-hipófise-adrenal (HPA) evidenciada pelo aumento dos níveis de glicocorticoides (GCs) circulantes. Este hipercortisolismo é importante em várias complicações diabéticas. No entanto, há poucas evidências da participação dos GCs em outras morbidades do diabetes, como na atrofia muscular, compartilhadas por pacientes com o diabetes e pessoas com Cushing, uma doença caracterizada pela hiperatividade deste eixo HPA. A redução na expressão do receptor nuclear PPAR-\03B3 tem sido demonstrada em órgãos de animais diabéticos acometidos por complicações da doença, e a ativação de PPAR-\03B3 é capaz de restaurar a funcionalidade desses órgãos. Além disso, o tratamento de pacientes com a doença de Cushing com ligantes de PPAR-\03B3 reduz os níveis de GCs circulantes. Desse modo, o nosso objetivo foi investigar o papel do PPAR-\03B3 na atividade do eixo HPA em animais diabéticos. O diabetes foi induzido por injeção intravenosa de aloxana em ratos em jejum. O agonista de PPAR-\03B3 rosiglitazona (rosi), o antagonista do receptor de GCs RU486 ou inibidor de PI3K wortmannin foram administrados diariamente durante 18 dias consecutivos, começando três dias após a injeção de aloxana. Observamos que a condição diabética induzida por administração de aloxana em ratos é caracterizada por hiperatividade do eixo HPA com redução na expressão de receptores de GCs na hipófise, hipertrofia adrenal e aumento dos níveis de GCs circulantes O papel destes hormônios esteroides sobre a atrofia muscular em animais diabéticos foi evidenciado pela melhoria no parâmetro microvascular funcional do músculo grácil, e aumento da massa do músculo gastrocnêmio observada em animais diabéticos tratados com RU486. Em paralelo com a hiperatividade do eixo HPA, observamos uma redução da expressão de PPAR-\03B3 nas adrenais e hipófise, bem como uma diminuição no ligante de PPAR-\03B3 15-d-PGJ2 no plasma dos animais diabéticos. O tratamento destes animais com rosi foi capaz de reduzir os níveis de GCs, em associação com a diminuição da hipertrofia adrenal e expressão de MC2-R. Em paralelo, a rosi restaurou os níveis de ACTH no plasma, em associação com a redução no número de células corticotróficas e expressão de POMC na hipófise dos ratos diabéticos, mesmo não restabelecendo o mecanismo de controle por retroalimentação da produção de GCs na hipófise através dos receptores de mineralocorticoides e GCs, respectivamente, MR e GR. Além disso, o tratamento com rosi aumentou a expressão de PPAR-\03B3 nas glândulas adrenais e hipófise dos ratos diabéticos, e o bloqueio de PPAR-\03B3 com GW9662 inibiu a capacidade da droga de reduzir os níveis plasmáticos de GCs. Os ratos diabéticos também apresentaram redução na expressão de PI3K na hipófise, e a rosi aumentou a expressão desta cinase nas glândulas adrenais e na hipófise. Além disso, o pré-tratamento de ratos diabéticos com wortmannin foi capaz de reduzir parcialmente a capacidade da rosi em reduzir os níveis de GCs no plasma. Assim, sugerimos que a hiperatividade do eixo HPA em animais diabéticos está diretamente relacionada com a atrofia muscular Além disso, a ativação de PPAR-\03B3 restaura a reatividade eixo HPA em ratos diabéticos através de um mecanismo dependente da ativação de PI3K, surgindo como um possível alvo no controle das complicações da doença / Diabetes mellitu s is one of the major chronic diseases that affect the world population . Beyond of hyperglycemia, diabetic patients exhi bit a marked hyperactivity of the hypothalam us - pituitary - adrenal (HPA) axis evidenced by increased levels of circulating glucocorticoids (GCs) . This hypercortisolism is important in several diabetic complications. However, there are few evidence s of the pa rticipation of GCs in other diabetic morbidities , including muscle atr o phy, that are shared by patients with diabet es and individuals with Cushing , a disease characterized by hyperactivity of HPA axis. The reduction in the expression of the nuclear recepto r PPAR - γ has been demonstrated in diabetic animal organs affected by complications of disease, and the PPAR - γ activation is able to restore the functionality of these organs. Furthermore, treatment of patients w ith Cushing’s disease with PPAR - γ ligands reduc es the levels of circulating GC s. Thereby, our aim was to investigate the role of PPAR - γ on HPA axis activity in diabetic animals. Diabetes was induced by the intravenous injection of alloxan into fasted rats. The PPAR -  agonist rosiglitazone (rosi) , GCs r eceptor antagonist RU486 or PI3K inhibitor wortmannin were administered daily for 18 consecutive days, starting three days after alloxan injection . We observed that the diabetic condition induced by alloxan administration in rats is characterized by a hype ractivity of the HPA axis with reduction in GCs receptor expression in the pituitary, adrenal hypertrophy and increase in circulating levels of GC s. The role of these steroid hormones on muscular atrophy in the diabetic animals was evidenced by improvement in the microvascular functional parameter of gracilis muscle, and increase of the mass of the gastrocnemius muscle observed in diabetic animals treated with RU486. In parallel with the hyperactivity of the HPA axis, we observed a reduction of PPAR - γ expre ssion in the adrenal and pituitary as well as a decreased on plasma PPAR - γ ligand 15 - d - PGJ 2 in the diabetic animals . Trea tment of these animals with rosi was able to reduce the GCs levels , in association with decrease of adrenal hypertrophy and MC2R expres sion. In parallel, rosi restore d plasma ACT H levels , in association with reduction of corticotrophic cells and POMC expressio n in pituitary of diabetic rats, despite of not restoring the feedback control of GCs production in the pituitary through mineraloc orticoid and GCs receptors, respectively MR and GR . Furthermore, treatment with rosi increase s the expression of PPAR - γ in both adrenal and pituitary glands in diabetic rats , and the blocka g e of PPAR - γ with GW9662 inhibited the capacity of the drug to reduce plasma GCs levels . Diabetic rats also presented reduction of PI3K expression in pituitary, and r osi increased the expression of this kinase in both adrenal and pituitary glands. In addition, pre - treatment of diabetic rats with wortmannin was able to partially reduce the ability of rosi to reduce plasma GCs levels . Thus, we suggest that the HPA axis h yperactivity in diabetic animals is directly related with muscle atrophy. Moreover, the activation of PPAR - γ restored HPA axis reactivity in diabetic rats via a mechanism dependent on PI3K activation , emerging as a possible target in the control of the disease complications / 2016-11-28

Memoria para optar al título de Bioquímico / Durante la inflamación de las mucosas, las células epiteliales y los macrófagos expresan el receptor de tipo Toll 4 (TLR4) y secretan citoquinas, las que potencian el cuadro. Sin embargo, hasta ahora existe escasa información acerca de la regulación de la expresión de TLR4 por la combinación de moléculas pro-inflamatorias y antiinflamatorias. Utilizando la línea celular de epitelio pulmonar, las células A549, se evaluó la expresión del TLR4 a nivel de transcrito, proteína y actividad transcripcional de mutantes con deleciones en la región promotora del receptor, posterior a la exposición al factor de necrosis tumoral á (TNFα) en presencia o ausencia del glucocorticoide sintético Dexametasona (Dex), mediante PCR en tiempo real, inmunoblot o citometría de flujo, y ensayos del gen reportero luciferasa, respectivamente. El aumento de la expresión de TLR4 inducido por TNFα, tanto a nivel del mRNA como de la proteína, es revertido por la adición de Dex. La regulación de la actividad transcripcional del promotor de TLR4 por estas moléculas fue similar a la observada a nivel de proteína, y el efecto inhibitorio de Dex estaría comandado por al menos un elemento de respuesta del receptor de glucocorticoides, GR (GRE). En conjunto, estos resultados demuestran un efecto antagónico de Dexametasona sobre la expresión de TLR4 inducida por TNFα, aparentemente por un mecanismo que involucra al menos la regulación de GR a nivel del promotor de TLR4. Se evidenció claramente en estas células los fuertes efectos antagónicos que ejercen sobre la expresión de TLR4, moléculas pro-inflamatorias como es TNFα y antiinflamatorias como los glucocorticoides

Orientador: Valdir Gouveia Garcia / Banca: Maria José Hitomi Nagata / Banca: Álvaro Francisco Bosco / Banca: Ariel Lenharo / Banca: Jamil Awad Shibli / Resumo: As modalidades terapêuticas que envolvem implantes dentais têm se expandido gradativamente, sendo implantados em uma variedade de estruturas ósseas. Dessa forma, o propósito do presente trabalho foi estudar a influência de corticóides no processo inicial de osseointegração de implantes de titânio instalados em maxilas de ratos. Foram utilizados implantes de titânio c.p., grau II, cônico de 1,4mm de diâmetro e 2,7mm de comprimento, com superfície tratada. Trinta e oito ratos wistar tiveram seus primeiros molares superiores esquerdo e direito extraídos. Após 30 dias de reparo alveolar, dois animais foram sacrificados para confirmar o fim desse processo. Os demais animais tiveram os implantes instalados bilateralmente e foram divididos randomicamente em três grupos: Controle (Ctr/n=12) que não receberam nenhum tipo de tratamento; Placebo (Pl/n=12) e Tratado (Tra/n=12), que receberam injeções diárias de 1 ml de solução salina e corticosterona na dosagem de 5mg/kg, respectivamente. Trinta dias após a implantação, todos os animais foram eutanasiados e tiveram a concentração plasmática do corticóide mensurada: Ctr (101,31 ± 26,7 ng/ml), Pla (95,22 ± 25,36 ng/ml) e Tra (281,37 ± 64,72 ng/ml); e o contato osso-implante determinado: Ctr (96,67%), Pla (82,22%) e Tra (15,73%), nos quais o grupo Tra apresentou-se estatisticamente diferente dos demais grupos (p<0,05). Assim, diante da metodologia empregada, foram evidenciadas menor formação óssea e conseqüente redução da área de tecido ósseo neo-formado na interface osso-implante. / Abstract: The therapeutic modalities which involves dental implants has been gradually expanded, being implanted in a variety of bone structures. In this way, the aim of the present work was to study the corticoid influence at the initial process of bone integration of titanium implants installed in rat jaws. It were used titanium implants c.p.; grade II, conic with 1,4mm diameter and 2,7mm length, with treated surface. Thirty eight wistar rats had their first upper left and right molars extracted. After 30 days of alveolar repair, two animals were sacrificed to confirm the end of this process. The others had their implants installed bilaterally and they were splited randomly in three groups: Control (Ctr/n=12) which did not receive any kind of treatment; Placebo (Pla/n=12) and Treated (Tre/n=12) which received 1ml daily shots of salt solution and corticosterone at a dosage of 5mg/Kg, respectively. Thirty days after the implantation, all the animals were euthanasiated and the plasmatic concentration of corticoid was measured: Ctr (101,31 ± 26,7 ng/ml), Pla (95,22 ± 25,36 ng/ml) and Tre (281,37 ± 64,72 ng/ml); and the bone implant contact was determined: Ctr (96,67%), Pla (82,22%) and Tre (15,73%), in which the Tre group presented statistically different from the other groups (p<0,05). Thus, front the employed methodology it was shown lesser bone formation and consequent reduction of the bone tissue area neo-formed at bone-implant interface. / Doutor

Orientador: João Carlos Pinheiro Ferreira / Banca: Eunice Oba / Banca: Ian Martin / Resumo: As aves da família Psittacidae são muito visadas pelo tráfico de animais selvagens. O papagaio-verdadeiro (Amazona aestiva) é uma das espécies mais traficadas. Os animais provenientes do tráfico são transportados em espaço restrito, sem alimento ou água e as aves adoecem ou morrem devido ao estresse ou brigas, antes mesmo de chegarem ao consumidor final. O estresse leva a secreção de glicocorticoides que possui diversas funções nos vertebrados além de sofrerem flutuações dos seus níveis basais para preparar o organismo para o início das atividades diárias. Fatores ambientais e necessidades fisiológicas interagem para a manutenção do relógio biológico, que é responsável por determinar essas alterações endócrinas. As análises hormonais através de técnicas não-invasivas têm sido usadas em estudos da biologia da conservação, comportamentais e fisiológicos em aves cativas ou de vida livre devido a sua facilidade de coleta e por não causarem prejuízos ao indivíduo. Os níveis de metabólitos de glicocorticoides presentes nas excretas refletem as concentrações plasmáticas desses hormônios. Com objetivo de determinar o perfil de excreção urofecal de metabólitos de glicocorticoides nos excrementos de A. aestiva, ao longo do dia e relacionar esses achados com as atividades diária desses animais, foram utilizados 22 animais (12 machos e 10 fêmeas) alojados em gaiolas individuais, e suas excretas foram colhidas a cada três horas, por 24 horas consecutivas. Foi observado um pico nas concentrações de metabólitos de glicocorticóides nas primeiras horas do dia, quando também se inicia as atividades diárias das aves; e as concentrações diminuíram gradualmente até atingirem seus níveis basais no final da tarde e se mantiveram baixos até a manhã seguinte / Abstract: The birds of the Psittacidae family are highly targeted for wildlife trafficking. The Blue-fronted parrot (Amazona aestiva) is one of the most trafficked species. The animals are transported in restricted spaces, without food or water and the birds get sick or die due to stress or fights, before arriving to the final consumer. Stress leads to secretion of glucocorticoids that has several functions in vertebrates and suffer fluctuations of baseline levels to prepare the organism for the start of daily activities. Physiological and environmental factors interact to maintain the biological clock, which is responsible for determining these endocrine changes. The hormonal assays employing non-invasive techniques have been used in studies of conservation biology, behavioral and physiological studies of captive or free-living birds because of the ease of collection and lack of harm to the individual. Levels of glucocorticoid metabolites in feces reflect plasma concentrations of these hormones. In order to define the profile of excretion of glucocorticoids metabolites in A. aestiva droppings throughout the day and correlate these findings with the daily activities of these animals, we used 22 animals (12 males and 10 females) housed individually in cages, and their droppings were collected every three hours for 24 consecutive hours. A peak in the concentration of glucocorticoids metabolites was observed in the first hours of the day at the start of the birds' daily activities, and the concentrations decreased gradually to basal levels in the late afternoon and remained low until the next morning / Mestre

Glucocorticoids are frequently included in the chemotherapy regimens administered to patients with CLL because they are potent immunosuppressant agents and because they are able to induce apoptosis in CLL cells. Although used from a long time, the molecular mechanisms by which glucocorticoids induce cell death in CLL cells are largely unknown. Interestingly, CLL cells from prognostic groups defined by the mutational load of the IGHV genes and the expression of ZAP70 seem to have different responses to glucocorticoids. The hypothesis in this thesis is that there are genes or proteins that determine the different response to glucocorticoids among the specific prognostic groups of patients with CLL. Sensitivity to dexamethasone was analyzed ex vivo in 50 CLL and compared according to IGHV mutational status and/or ZAP70 expression. The response was further compared by gene expression profiling (GEP) of selected cases. Expression of genes of interest was validated by quantitative reverse transcriptase PCR. Response to dexamethasone is higher in cases with unmutated IGHV/high ZAP70 expression and the levels of induction of the pro-apoptotic BIM gen correlate with the degree of cell death. The different levels of apoptosis induced by dexamethasone observed in the CLL groups defined by ZAP70 expression translate into different profiles of gene expression. These differences are mainly quantitative; cases with high ZAP70 expression show higher levels of gene induction/repression than cases with low ZAP70 expression. Specific analysis of genes of interest performed in a large series disclosed that baseline mRNA and protein expression levels of FKBP5, the co-chaperone of the glucocorticoid receptor, correlate with the extent of CLL cells apoptosis induced by the treatment with dexamethasone. Baseline FKBP5 levels are higher in samples from patients with high ZAP70 expression. GILZ is differentially induced by dexamethasone in ZAP70 expression groups of CLL, being higher in cases with high ZAP70 expression. Induction of GILZ correlates with induction of BIM and levels of apoptosis. Unmutated IGHV/high ZAP70 CLL cells exhibit better response to dexamethasone treatment, which is accompanied by a differential expression of genes involved in the glucocorticoid-receptor pathway and by an increased induction of genes related to apoptosis. / Los glucocorticoides son frecuentemente incluidos en la quimioterapia administrada a pacientes con leucemia linfática crónica (LLC), pues son potentes inmunosupresores e inducen la apoptosis de las células de LLC. Los mecanismos moleculares por los cuales los glucocorticoides inducen la apoptosis de las células de LLC son en gran parte desconocidos. Las células LLC de grupos pronósticos definidos por el estado mutacional de los genes IGHV y por la expresión de ZAP70 parecen tener diferentes respuestas a los glucocorticoides. La hipótesis de esta tesis es que hay genes o proteínas expresados de forma diferente en los grupos pronósticos de pacientes con LLC que determinan los diferentes niveles de apoptosis inducidos por los glucocorticoides. La sensibilidad al glucocorticoide dexametasona, se determino ex vivo en 50 muestras de pacientes con LLC y se comparo en función del estado mutacional de los genes IGHV y/o de la expresión de ZAP70. También se compararan los perfiles de expresión génica (GEP) de casos seleccionados. Los niveles de expresión de los genes de interés se validaran por QRT-PCR. La respuesta a la dexametasona es superior en los casos de LLC con genes IGHV no mutados/alta expresión de ZAP70. Los niveles de inducción del gen proapoptótico BIM se correlacionan con el grado de muerte celular. Los diferentes niveles de apoptosis inducida por dexametasona en los grupos de LLC definidos por la expresión de ZAP70 se traducen diferentes GEP. Las diferencias entre los GEP de cada grupo fueran principalmente cuantitativas, los casos con alta expresión de ZAP70 muestran niveles más altos de inducción/represión génica que los casos con baja expresión. Se observo que los niveles basales de ARNm y proteína de FKBP5, una cochaperona del receptor de los glucocorticoides, se correlacionan con el grado de apoptosis inducida por la dexametasona y que los niveles de FKBP5 son más elevados en los casos con alta expresión de ZAP70. GILZ induce diferencialmente por la dexametasona, observándose mayores inducciones en los casos con alta expresión de ZAP70. La inducción de GILZ se correlaciona con la inducción de BIM y con la magnitud de la apoptosis.

El propósito de la investigación fue determinar si la administración intramuscular en el glúteo de 4 mg Dexametasona antes y la administración intramuscular en el masetero de 4 mg de Dexametasona después de la extracción de terceras molares inferiores provocaba una mayor disminución de la inflamación frente a la administración intramuscular de 4 mg de Dexametasona antes de la cirugía, la administración intramuscular en el glúteo de 4 mg de Dexametasona en el masetero después de la cirugía y frente al grupo control. Para esto se administró la Dexametasona en 28 pacientes (16 mujeres y 12 varones) del departamento de Estomatología del Centro Médico Naval de la Marina de Guerra del Perú, con diagnóstico de terceras molares inferiores impactadas los cuales fueron divididos en 4 grupos: el grupo de administración intramuscular en el glúteo de 4 mg Dexametasona antes y administración intramuscular en el masetero de 4 mg de Dexametasona después de la extracción de terceras molares inferiores, el grupo de administración intramuscular en el glúteo de 4 mg de Dexametasona antes de la cirugía de terceras molares inferiores y el grupo de administración intramuscular de 4 mg de Dexametasona intramuscular en el masetero terminada la cirugía y el grupo CONTROL (pacientes a los cuales no se les administró Dexametasona). Para evaluar la inflamación ésta se dividió en tres subvariables: edema, trismus y dolor que fue evaluado en los grupos de Estudio y el grupo Control. El edema fue determinado por la variación de la medición horizontal de la intersección de los puntos anatómicos (tragus-pogonion de tejidos blandos, gonion-ángulo externo del ojo). Las mediciones se realizaron los tres días posteriores a la extracción y el séptimo día. El Trismus fue determinado evaluando la máxima apertura interincisal con mediciones diarias los siete días posteriores a la extracción de las terceras molares inferiores. El dolor fue determinado usando la Escala Visual Análoga y cuantificando el número de analgésicos tomados por los pacientes. La medición del dolor se realizó los tres días posteriores a la extracción de las terceras molares inferiores. Los resultados mostraron que no existe diferencias estadísticas significativas en la disminución del edema, trismus y dolor entre el grupo de administración intramuscular en el glúteo de 4 mg Dexametasona antes y administración intramuscular local en el masetero de 4 mg de Dexametasona terminada la extracción de terceras molares inferiores frente los grupos a quienes recibieron la administración intramuscular en el glúteo de 4 mg de Dexametasona antes de la cirugía y el grupo de administración intramuscular de 4 mg de Dexametasona en el masetero terminada la cirugía. La administración intramuscular en el glúteo de 4 mg Dexametasona antes y de 4 mg de Dexametasona intramuscular en el masetero terminada la extracción de terceras molares inferiores, y la administración de 4 mg de Dexametasona intramuscular en el glúteo antes de la extracción de terceras molares inferiores provocaron una mayor disminución de la inflamación frente al grupo control siendo esta diferencia altamente significativa. Finalmente de acuerdo a los resultados encontrados el empleo la Dexametasona en cirugías de terceras molares inferiores producen menor inflamación postcirugía con respecto a los pacientes que no reciben Dexametasona. El uso de la Dexametasona es una herramienta útil para la prevención de complicaciones inflamatorias postcirugía de terceras molares inferiores y otros tipos de cirugía orales. / “Appraisal of the Anti-inflammatory effects of glucocorticoids in patients that need inferior third molars surgery” The purpose of the research was to determinate if the intramuscular (IM) administration in gluteus muscle of 4mg Dexamethasone before and the IM administration in masseter muscle of 4mg Dexamethasone after inferior third molar’s extraction provoked greater decrease than the IM administration in gluteus muscle of 4mg of Dexamethasone only before of surgeon, the IM administration of 4 mg Dexamethasone in masseter only after of surgeon and front of Control group. The Dexamethasone was administered in 28 patients (16 woman and 12 man) of Stomatology Department at Naval Medical Center, with Impact inferior third molar diagnosis whose were divided in four groups: three groups in the Study Group; group of patients with IM administration in gluteus muscle of 4mg Dexamethasone before and the IM administration of 4mg Dexamethasone in Masseter muscle after of inferior third molar’s extraction, the group of IM administration in gluteus muscle of 4 mg Dexamethasone only before the surgeon, the group of IM administration of 4 mg. Dexametasona in masseter muscle finished the surgeon and Control Group (patients who hadn’t been administered Dexamethasone). The evaluation of inflammation was divided in three sub variable: edema, trismus and pain these were evaluated in Study Group and Control Group. Edema was determinated by horizontal measurement’s variation of the anatomic point’s intersection (Tragus- Pogonion of soft tissue, Gonion-external angle of eyes). The measure was doing until the three day and the seven day after the extraction. Trismus was determinated evaluating the interincisal opening maxim with measurements daily for seven days after of inferior third molar’s extraction. The pain was determinated wearing the Analogous Visual Scale and counting the number of analgesic taken by patients, the pain’s measurement was done three days later of inferior third molar’s extraction. The results showed that it doesn’t exist significant statistics difference in decreases of edema, trismus, and pain among the group of IM administration in gluteus muscle of 4mg Dexamethasone before and the IM administration in masseter muscle of 4mg Dexamethasone after of inferior third molar’s extraction, the Group which has received IM administration in gluteus muscle of 4 mg Dexamethasone only before the surgeon and the group of IM administration in masseter muscle of 4 mg Dexamethasone finished the surgeon only. The group of IM administration in gluteus muscle of 4mg. Dexamethasone before and the IM administration in masseter muscle of 4mg Dexamethasone after of inferior third molar’s extraction; and the IM administration in gluteus muscle of 4 mg Dexamethasone only before the surgeon provoked a greater decrease of inflammation front of Control group with significant high difference. Finally the results found the use of Dexamethasone in inferior third molar’s surgeon produced less inflammation post surgeon than patients who hadn’t been receive Dexamethasone. The use of Dexamethasone is an useful tool to prevention of inflammatory complications post surgeon of inferior third molars and other kinds of oral surgeons.

Submitted by Alessandra Portugal (alessandradf@ioc.fiocruz.br) on 2013-10-03T12:11:54Z No. of bitstreams: 1 RAFAEL CARVALHO TORRES.pdf: 4075176 bytes, checksum: 19fc00e0161a371b5fb7c118bba5a10a (MD5) / Made available in DSpace on 2013-10-03T12:11:54Z (GMT). No. of bitstreams: 1 RAFAEL CARVALHO TORRES.pdf: 4075176 bytes, checksum: 19fc00e0161a371b5fb7c118bba5a10a (MD5) Previous issue date: 2012 / Fundação Oswaldo Cruz. Instituto Oswaldo Cruz. Rio de Janeiro, RJ, Brasil / O estado diabético está associado à redução no número e ao comprometimento da funcionalidade de mastócitos. A partir disso, este trabalho foi realizado com intuito de investigar o papel do receptor ativado por proliferadores de peroxissomos (PPAR)- na redução do número e reatividade de mastócitos em ratos diabéticos. O efeito da ativação do PPAR-γ sobre a apoptose dos mastócitos também foi avaliada. A diabetes foi induzida através de uma injeção única de aloxana (40 mg/Kg) em animais que se encontravam em jejum. Após três dias da indução da diabetes, o ligante agonista de PPAR-γ rosiglitazona (0,5 mg/Kg) e/ou o antagonista específico do mesmo receptor GW9662 (0,5 mg/Kg) foram administrados uma vez ao dia durante 18 dias consecutivos. A taxa de apoptose dos mastócitos e os níveis hormonais foram determinados pela análise da fragmentação de DNA e por radioimunoensaio, respectivamente. O tratamento com rosiglitazona restaurou o número de mastócitos na cavidade torácica e no tecido mesentérico dos ratos diabéticos. Além disso, o tratamento dos animais diabéticos com rosiglitazona restabeleceu a liberação normal de histamina dos mastócitos após estimulação antigênica in vitro, avaliada por fluorimetria. O aumento da apoptose dos mastócitos em animais diabéticos foi inibida com a rosiglitazona. Observamos ainda que o aumento nos níveis circulantes de corticosterona associado com a disfunção mastocitária em ratos diabéticos é sensível ao tratamento com o agonista de PPAR-γ. Em adição, o bloqueio do receptor PPAR-γ com GW9662 suprimiu a capacidade da rosiglitazona em normalizar os níveis de glicocorticóides bem como restaurar o número de mastócitos. Utilizando imunohistoquímicas, constatamos que a ativação do PPAR-γ no eixo hipotálamo-pituitária-adrenal (HPA) de animais diabéticos reduziu a expressão do receptor do hormônio adrenocorticotrófico (ACTH) MC2-R, bem como do receptor de glicocorticóides (GR), nas adrenais e hipófise, respectivamente, desses animais. Finalmente, nós mostramos que o aumento nos níveis de ACTH no plasma dos animais diabéticos foi reduzido pelo tratamento com rosiglitazona. Como conclusão, nossos achamos mostram que a rosiglitazona restaura o número e reatividade dos mastócitos de animais diabéticos, acompanhado pela redução da apoptose dessas células, em paralelo com a atenuação da elevada secreção de glicocorticóides, indicando que o PPAR-γ tem um papel importante nesse fenômeno. Palavras chave: Receptores ativados por proliferadores de peroxissomos-γ, diabetes, mastócitos, apoptose, glicocorticóides, eixo HPA. / Mast cell function and survival have been shown to be down-regulated under diabetic conditions. This study was undertaken in order to investigate the role of the peroxisome proliferator-activated receptor (PPAR)- in the reduction of mast cell number and reactivity in diabetic rats. The effect of PPAR-γ activation on mast cell apoptosis was also evaluated. Diabetes was induced by a single intravenous injection of alloxan (40 mg/Kg) into fasted rats and PPAR- agonist rosiglitazone (0.5 mg/Kg) and/or specific antagonist GW9662 (0.5 mg/Kg) were administered after 3 days of diabetes induction, once daily for 18 consecutive days. Mast cell apoptosis and hormone levels were evaluated by analyses of DNA fragmentation and radioimmunoassay, respectively. Treatment with rosiglitazone restored mast cell numbers in the thoracic cavity and in mesenteric tissue of diabetic rats. Rosiglitazone treatment also significantly reversed the diabetes-induced reduction in histamine release by mast cells following activation with antigen in vitro, as measured by fluorescence. Increased apoptosis in mast cells from diabetic rats were inhibited by rosiglitazone. Moreover, we noted that the increase in plasma corticosterona levels associated with mast cell dysfunction in diabetic rats was inhibited by rosiglitazone administration. In addition, PPAR- γ blockade with GW-9662 abolished the ability of rosiglitazone to restore baseline levels of mast cells and plasma corticosterone in diabetic rats. Activation of PPAR-γ on the hypothalamic-pituitary-adrenal (HPA) axis was able to reduce the expression of both adrenocorticotropic hormone (ACTH) receptor MC2-R and glucocorticoid receptor GR on the adrenals and pituitary, respectively, of the diabetic rats, attested by immunohistochemistry. Finally, we showed that the increase in plasma ACTH levels in diabetic rats was reduced by rosiglitazone treatment. In conclusion, our findings showed that rosiglitazone restored the number and reactivity of mast cells in diabetic rats, accompanied by suppression of apoptosis, in parallel with attenuation of alloxan-induced hypercorticolism, indicating that PPAR- has an important role in these phenomena.

Submitted by Fabio Sobreira Campos da Costa (fabio.sobreira@ufpe.br) on 2017-04-07T13:15:48Z No. of bitstreams: 2 license_rdf: 1232 bytes, checksum: 66e71c371cc565284e70f40736c94386 (MD5) Dissertação Mestrado Verônica Melo CCS.pdf: 1393412 bytes, checksum: ba56180c890511d0089ae952978dcc15 (MD5) / Made available in DSpace on 2017-04-07T13:15:48Z (GMT). No. of bitstreams: 2 license_rdf: 1232 bytes, checksum: 66e71c371cc565284e70f40736c94386 (MD5) Dissertação Mestrado Verônica Melo CCS.pdf: 1393412 bytes, checksum: ba56180c890511d0089ae952978dcc15 (MD5) Previous issue date: 2016-07-01 / Introdução: o uso crônico de glicocorticoides é considerado a principal causa de osteoporose secundária e iatrogênica. Existem poucos estudos associando fraturas ao uso de glicocorticoides na faixa etária pediátrica. Eles poderiam ajudar na criação de abordagens preventivas e terapêuticas. Objetivos: avaliar se o uso de glicocorticoides, nos 12 meses precedentes, associou-se à ocorrência de fraturas em crianças e adolescentes; identificar a frequência de asma e outras doenças; comparar o perfil demográfico, o tipo de trauma, o índice de massa corpórea, a prática de exercício físico, a ingesta de leite e o tabagismo passivo domiciliar nos grupos com e sem fratura; verificar a frequência de deficiência de vitamina D. Métodos: no período de abril a outubro de 2015, um estudo tipo caso controle foi conduzido em crianças e adolescentes vitimadas por trauma, com e sem fratura, a partir da análise dos dados coletados. Resultados: foram estudados 104 pacientes, 50 com fratura e 54 com trauma, mas sem fratura. Ao todo, 80,4% eram meninos e 40,4% estavam na faixa etária de 10 a 14 anos. O uso prévio de glicocorticoides ocorreu em 15,4% do total, sem diferença estatisticamente significante entre os dois grupos. Entre 39 pacientes com fratura e que dosaram a vitamina D, 47,2% tinham níveis séricos < 30ng/ml. A prática de exercício físico associou-se a um aumento em 2,2 vezes no risco para fratura. Conclusões: este estudo não mostrou associação entre o uso prévio de glicocorticoides e a ocorrência de fraturas em crianças e adolescentes. A faixa etária de 10 a 14 anos, o trauma grave e o exercício físico associaram-se com um maior risco para fraturas. Cerca de metade de uma amostra dos pacientes com fratura apresentou níveis insuficientes/deficientes de vitamina D, mesmo em região tropical. / Introduction: Osteoporosis is not exclusive to older adults and manifests by fractures. Chronic glucocorticoid use is considered the main cause of secondary and iatrogenic osteoporosis. Few studies have related fractures to the use of glucocorticoids in children and adolescents. Such studies could be useful for the development of preventive and therapeutic strategies. Objectives: To assess whether glucocorticoid use in the past 12 months is associated with the occurrence of fractures in children and adolescents; to identify the frequency of asthma and other diseases; and to compare the demographic profile, type of trauma, body mass index, physical activity, milk intake, and household exposure to cigarette smoke of groups with and without fractures; to verify the frequency of vitamin D insufficiency/deficiency. Methods: A case-control study, conducted from April to October 2015, analyzed the data of trauma children and adolescents with and without fractures. Results: A total of 104 trauma patients were studied, 50 with and 54 without fractures. In all, 80.4% were males, and 40.4% were aged 10 to 14 years. Previous glucocorticoid use occurred in 15.4% of the sample, without significant difference between the groups. Of the 39 fracture patients with measured serum vitamin D levels, 47.2% had levels < 30ng/ml. Physical activity was associated with a 2.2-fold risk of fractures, but without significance in multivariate analysis. Conclusions: This study did not find an association between previous glucocorticoid use and the occurrence of fractures in children and adolescents. In 10- to 14-year-olds, severe trauma and physical activity were associated with higher risk of fractures. About half the fracture sample had insufficient/deficient vitamin D levels, despite residing in a tropical region.

Memoria para optar al título Bioquímico / Como parte del sistema inmune innato existe un grupo de receptores de reconocimiento de patrones (PRRs) capaces de detectar aquellos patrones moleculares asociados a patógenos (PAMPs). Entre estos PRRs, destacan los receptores de tipo Toll o TLRs. Dentro de esta familia de receptores, TLR2 reconoce PAMPs derivados de bacterias gram positivas, los que promueven la activación de la vía de señalización intracelular dependiente del adaptador molecular MyD88, que conduce a la activación de IKK y de las MAPKs, las que tienen un impacto fundamental sobre la expresión de citoquinas proinflamatorias. El estudio de los mecanismos fisiológicos de control de esta vía de señalización constituye un área de investigación relevante en inmunología. En este sentido, los glucocorticoides, anti-inflamatorios naturales, ejercen su efecto vía un receptor citoplasmático (GR) mediante procesos de trans-represión y de expresión de proteínas reguladoras. A pesar de esto, se desconoce su efecto sobre las vías de inducción de citoquinas pro-inflamatorias mediadas por TLR2, tal como la vía de p38. Basados en estos antecedentes, el objetivo general de esta memoria de título consistió en determinar la participación de p38 en la producción de TNF-α en células A549, inducida por un agonista de TLR2, Pam3Cys-Ser-Lys4, en presencia o ausencia de dexametasona. Los objetivos específicos se centraron en: 1) determinar la expresión de TNF-α, a nivel de transcrito y proteína, en células activadas con el agonista sintético Pam3Cys-Ser-Lys4, en presencia o ausencia de dexametasona 2) evaluar la fosforilación de la proteína quinasa p38 en células estimuladas con Pam3Cys-Ser-Lys4, en presencia o ausencia de dexametasona y 3) evaluar la contribución de la proteína quinasa p38 sobre la expresión de TNF-α en células estimuladas con Pam3Cys-Ser-Lys4, en presencia o ausencia de dexametasona. Los resultados obtenidos indican que la activación de TLR2 por Pam3Cys-Ser-Lys4 induce un aumento en la expresión de TNF-α, el que no es reprimido por dexametasona. Se observó una activación de la vía p38 inducida por Pam3Cys-Ser-Lys4, que está involucrada en la expresión de TNF-α. Por otro lado, constatamos que dexametasona ejerce su efecto anti-inflamatorio clásico mediante la expresión de moléculas reguladoras de la vía de p38, como la fosfatasa MKP-1. Sin embargo, no podemos descartar un efecto independiente de la expresión de genes regulados por el glucocorticoide. Además, observamos que dexametasona no actuaría en los eventos tempranos de señalización de la vía de TLR2, como lo constatamos con la fosforilación de p38. Estos datos demostrarían un mecanismo a través del cual los glucocorticoides regulan procesos inflamatorios inducidos por TLR2, con un impacto relevante en el desarrollo de la inmunidad innata y la inflamación / As part of innate immune system, it exists a group of pattern-recognition receptors (PRRs) capable of detecting those molecular pattern associated to pathogens (pathogenassociated molecular patterns; PAMPs). Among these PRRs, Toll-like receptors (TLRs) stand out. Inside this receptor family, TLR2 recognizes PAMPs derived from gram positive bacteria, thus promoting activation of MyD88-dependent intracellular pathway. It leads to IKK and MAPKs activation, which have a fundamental impact on the expression of proinflammatory cytokines. The study of the physiological control mechanisms of this pathway constitutes an area of relevant research in immunology. In this sense, glucocorticoids, natural anti-inflammatory molecules, exert its effect by a cytoplasmatic receptor (GR) by trans-repression mechanism and regulatory proteins expression. In spite of this, the effect of glucocorticoid on the TLR2-mediated pro-inflammatory cytokine pathway induction, specially on p38, is unknown. Based on these precedents, the general aim of this study was determining the role of p38 in TNF-α production in A549 cells induced with Pam3Cys-Ser-Lys4, a TLR2 agonist, in presence or absence of dexametasona. The specific objectives were centered to: 1) determine TNF-α expression, at messenger and protein level; 2) evaluate the p38 protein kinase phosphorylation and 3) evaluate the contribution of p38 protein kinase on TNF-α expression under the stimulation with Pam3Cys-Ser-Lys4, in presence or absence of dexamethasone. The results indicate that the activation of TLR2 by Pam3Cys-Ser-Lys4 induces an increase in TNF-α expression, which is not suppressed for dexamethasone. It also was observed an activation of p38 pathway induced by Pam3Cys-Ser-Lys4, that was involved in TNF-α expression. On the other hand, that dexametasona exert its classic anti-inflammatory effect by means of expression of regulatory molecules of the p38 pathway, as phosphatase MKP-1. Nevertheless, we can’t reject an independent effect from the expression of glucocorticoid regulated genes. Besides, dexamethasona wouldn’t work on early events of TLR2 signalling pathway, as we observed for p38 phosphorylation. This data would show a mechanism by which glucocorticoids regulates the TLR2- induced inflammatory processes, with a relevant impact in the processes involved in the development of the innate immunity and inflammation