A esporotricose é uma micose subcutânea causada por espécies do complexo Sporothrix schenckii que acomete seres humanos e animais, principalmente os gatos. Desde 1998 o Instituto Nacional de Infectologia Evandro Chagas/Fiocruz no Rio de Janeiro vem acompanhando uma epidemia dessa doença envolvendo seres humanos, cães e gatos, onde as principais formas de transmissão são arranhadura, mordedura e/ou contato com o exsudato das lesões cutâneas de gatos doentes. O diagnóstico definitivo da esporotricose felina é obtido a partir do isolamento do Sporothrix sp. em meios de cultura, entretanto, o resultado desse exame pode demorar até quatro semanas, o que em algumas situações pode retardar o início do tratamento antifúngico. Os exames citopatológico, histológico e imuno-histoquímico são opções viáveis e mais rápidas para o diagnóstico dessa micose em gatos, principalmente em situações quando não é possível realizar o isolamento fúngico. O diagnóstico precoce da esporotricose felina é importante na implementação rápida do tratamento antifúngico, melhorando o prognóstico na maioria dos casos. O objetivo deste estudo foi avaliar e comparar as diferentes técnicas utilizadas no diagnóstico da esporotricose felina antes e durante o tratamento antifúngico. Na primeira etapa do estudo foram comparados os exames citopatológico (coloração pelo método panótico rápido), histológico (impregnação pela prata de Grocott) e imuno-histoquímico de 184 gatos no diagnóstico da esporotricose sem tratamento antifúngico prévio utilizando o cultivo fúngico como teste padrão de referência. Estruturas leveduriformes foram observadas em 160 (87,0%) casos no exame citopatológico, 168 (91,3%) na histopatologia e 163 (88,3%) na imunohistoquímica. A associação das três técnicas elevou a sensibilidade do diagnóstico para 98,3%, o que enfatiza a necessidade de sua implementação como ferramentas de rotina, sobretudo quando a cultura fúngica não está disponível. Na etapa seguinte, a carga parasitária e o isolamento de Sporothrix sp. das lesões cutâneas de 74 gatos foram avaliados mensalmente antes e durante o tratamento com itraconazol por um período de 12 semanas. A mediana da carga fúngica observada antes do início do tratamento antifúngico foi maior (pMW = 0,013) nos gatos nos quais foi observada a persistência da lesão (Med=98,6) em relação aqueles em que houve cicatrização (Med=15,0). A redução da carga fúngica ocorreu em todas as lesões estudadas, assim como a redução da positividade da cultura fúngica e do exame citopatológico. Estes resultados sugerem uma redução no potencial zoonótico dos gatos, enfatizando a importância do tratamento precoce como medida de controle. Adicionalmente, o isolamento do fungo e a presença de estruturas leveduriformes nas lesões de gatos com esporotricose podem ser fatores preditores da falência terapêutica, indicando a necessidade da implementação de alternativas terapêuticas. / Sporotrichosis is subcutaneous mycose caused by species of fungus from the Sporothrix schenckii complex and affects humans and animals, especially cats. Since 1998, the Instituto Nacional de Infectologia Evandro Chagas/Fiocruz in Rio de Janeiro has been describing in Rio de Janeiro an epidemic of sporotrichosis, involving humans, cats and dogs, with most of cases related to transmission through scratches, bites or contact with lesions from infected cats. The definitive diagnosis is based on the isolation of the fungus in culture; however, the results may take up to four weeks and postpone treatment outset. The cytopathology, histopathology and immunohistochemistry should be considered as rapid and accessible alternatives for the diagnosis in cats, especially when the fungal culture is not available. The early diagnosis of feline sporotrichosis is desirable for the prompt beginning of the antifungal treatment, improving the prognosis in most of the cases. The aim of this study was to evaluate and compare different techniques for the diagnosis of feline sporotrichosis before and during the treatment with itraconazol. In the first part of the study, cytopathological (Quick Panoptic), histopathological (Grocott silver stain) and immunohistochemical examinations were compared regarding the diagnosis of sporotrichosis in 184 cats without previous treatment, by using fungal culture as a reference standard. The yeast-like cells were observed in 160 (87.0%) cases by cytopathological examination, in 168 (91.3%) by histopathology and in 163 (88.3%) by immunohistochemistry. The combination of the three methods led to the diagnosis of 98.3% of cases, pointing to the need of their implementation as regular tools, notably when fungal culture is not available. In the second part of the study, the fungal burden and the isolation of Sporothrix sp. in cutaneous lesions of 74 cats were monthly evaluated before and during the treatment with itraconazole for twelve weeks. The median of the fungal load detected before the outse of the antifungal treatment was higher (pMW=0.013) in cats in which there was a persistence of the cutaneous lesion (Med=98.6) in comparison to those in which healing of the lesion was observed (Med=15.0). The decrease of the fungal burden occurred in all the lesions in this study as well as the reduction of the positivity of the fungal culture and the cytopathological examination. These results suggest a reduction in the zoonotic potential of cats and emphasize the importance of the early treatment as a control measure. In addition, the isolation of the fungus and the presence of yeast-like cells in lesions of cats with sporotrichosis during the treatment can be a predictor of treatment failure and should alert for the need of alternative therapeutic regimens.

Submitted by (edna.saturno@ufrpe.br) on 2017-02-22T16:50:48Z No. of bitstreams: 1 Virgina Fonseca Pedrosa.pdf: 303865 bytes, checksum: 420df1fdf37bd4dee6c57213ba1e8f55 (MD5) / Made available in DSpace on 2017-02-22T16:50:48Z (GMT). No. of bitstreams: 1 Virgina Fonseca Pedrosa.pdf: 303865 bytes, checksum: 420df1fdf37bd4dee6c57213ba1e8f55 (MD5) Previous issue date: 2009-08-27 / Conselho Nacional de Pesquisa e Desenvolvimento Científico e Tecnológico - CNPq / The use of methods for identification of agents etiológicos represents an important tool to diagnose illnesses and consequently, to try to minimize the losses caused by the agent's permanence in the fish farmings. In this sense, it was aimed at to associate the lesions anatomopathological with the diversity of bacterias found in collected tilápias of different cultivation systems in Pernambuco. 58 tilápias samples were collected in the summertime period and rainy, that were submitted to analyses anatomopathological and bacteriological, having been observed the occurrence of Aeromonas spp. (29,3%), Vibrio spp. (41,4%) and enterobactérias of the goods Klebsiella spp. (17,2%), Leminorella spp. (1,7%), Obesumbacterium spp. (5,2%), Proteus spp. (1,7%), Providencia spp. (19%), Salmonella spp. (1,7%), Shigella spp. (1,7%) and Taturnella spp. (14%). A significant dependence was detected (p <0,05) of the lesions anatomopathological, with the identified bacterias, as anemic gills, necrosis in the liver and infiltrated eosinofílico in the liver in the animals with Aeromonas spp, lesions in the corporal surface and he/she atrophies in the spleen in the cases with víbrios, lesions in the fins, myocarditis, necrosis in the liver and in the pancreas and infiltrated inflammatory in the liver they were observed in the cases in that enterobactérias of different genders were involved, could be attributed to the unbalance in the atmosphere, contributing in the susceptibilidade of the animals front to these agents opportunists, also existing the possibility of they be associated to the concomitant presence of Aeromonas spp, once there was a significant correlation (p <0,05) in the enterobactérias occurrence and Aeromonas spp. It was verified, through mathematical modelling, that the coming animals of cultivation farms in tank-net, as well as the ones that possess larger corporal total lengths, they presented a better weight earnings. / A utilização de métodos, para identificação de agentes etiológicos, representa uma importante ferramenta para diagnosticar enfermidades e, consequentemente, tentar minimizar as perdas nas pisciculturas. Neste sentido, objetivou-se associar as lesões anatomopatológicas com a diversidade de bactérias encontradas em tilápias coletadas de diferentes sistemas de cultivo em Pernambuco. Foram coletadas 58 amostras de tilápias no período de estio e chuvoso, que foram submetidas à análises anatomopatológicas e bacteriológicas, tendo sido observada a ocorrência de Aeromonas spp. (29,3%), Vibrio spp. (41,4%) e enterobactérias dos gêneros Klebsiella spp. (17,2%), Leminorella spp. (1,7%), Obesumbacterium spp. (5,2%), Proteus spp. (1,7%), Providencia spp. (19%), Salmonella spp. (1,7%), Shigella spp. (1,7%) e Taturnella spp. (14%). Detectou-se uma dependência significativa (p < 0,05) das lesões anatomopatológicas, com as bactérias identificadas, como brânquias anêmicas, necrose no fígado e infiltrado eosinofílico no fígado nos animais com Aeromonas spp, lesões na superficie corporal e atrofia no baço nos casos com víbrios. Nos casos em que estiveram envolvidas enterobactérias de diferentes gêneros, observaram-se lesões nas nadadeiras, miocardite, necrose no fígado e no pâncreas e infiltrados inflamatórios nos fígado, podendo estar atribuídas ao desequilíbrio no ambiente. Esse desequilíbrio pode ter contribuído para a susceptibilidade dos animais frente aos agentes oportunistas, existindo também a possibilidade de estarem associadas à presença concomitante de Aeromonas spp, uma vez que houve uma correlação significativa (p < 0,05) na ocorrência de enterobactérias e Aeromonas spp. Verificou-se por meio de modelagem matemática, que os animais provenientes de fazendas de cultivo em tanques-rede, assim como os que possuem maiores comprimentos corporais, apresentaram melhor ganho de peso.

Submitted by MÔNICA SOUSA CAMPOS (monicabioufg@yahoo.com.br) on 2018-05-30T18:29:47Z No. of bitstreams: 1 Campos, Mônica Sousa.pdf: 6442713 bytes, checksum: b70652123809d9c255cdb371d59e5fd2 (MD5) / Approved for entry into archive by Paula Torres Monteiro da Torres (paulatms@sjrp.unesp.br) on 2018-05-30T20:03:48Z (GMT) No. of bitstreams: 1 campo_ms_do_sjrp_int.pdf: 6442713 bytes, checksum: b70652123809d9c255cdb371d59e5fd2 (MD5) / Made available in DSpace on 2018-05-30T20:03:48Z (GMT). No. of bitstreams: 1 campo_ms_do_sjrp_int.pdf: 6442713 bytes, checksum: b70652123809d9c255cdb371d59e5fd2 (MD5) Previous issue date: 2018-02-23 / Coordenação de Aperfeiçoamento de Pessoal de Nível Superior (CAPES) / A crisina é um composto natural biologicamente ativo encontrado predominantemente em flores de maracujá azul, em mel, camomila, própolis e casca de frutas. Possui propriedades potentes como efeito anti-inflamatório, antioxidante e tem sido empregada para o tratamento de desordens reprodutivas. Essa flavona tem o potencial de aumentar os níveis de testosterona endógena, tanto por inibir a enzima aromatase, quanto por estimular a esteroidogênese testicular. Alterações no metabolismo hormonal mediadas por interferências exógenas podem interferir na fisiologia prostática resultando em modificações na atividade secretora da glândula e na regulação dos receptores hormonais. Assim, o objetivo deste estudo foi avaliar os efeitos da exposição à crisina sobre a próstata e gônadas de gerbilos adultos. Para avaliar o potencial androgênico da crisina, nós analisamos, comparativamente, os efeitos da testosterona sobre estes mesmos órgãos. Machos e fêmeas de gerbilos com 90 dias de idade foram tratados com crisina (50 mg/kg/dia) ou com cipionato de testosterona (1 mg/kg/semana) e divididos tem 3 subgrupos que foram eutanasiados após 3, 7 e 21 dias de tratamento. As próstatas foram coletadas para análises morfológicas, morfométrico-estereológicas, imuno-histoquímicas e ultraestruturais. Testículos e ovários foram submetidos a análises morfológicas e morfométrico-estereológicas. Os níveis séricos de testosterona e 17β-estradiol foram mensurados por ELISA. Machos e fêmeas tratados com crisina não apresentaram aumento dos níveis séricos de testosterona. No entanto, apenas as fêmeas tratadas com crisina durante 21 dias demonstraram aumento nos níveis séricos de estradiol. Foram observados tanto na próstata ventral masculina, quanto na próstata feminina em todos os tempos de tratamento com crisina, aumento da frequência de receptores androgênicos (AR), maior taxa de proliferação e hiperplasia glandular. Além disso, foi observada nas fêmeas em todos os tempos de exposição com crisina maior frequência imunomarcação para receptor estrogênico alfa (ERα). Ultraestruturalmente, machos e fêmeas tratados com crisina apresentaram intenso desenvolvimento das organelas da rota biossintética-secretora, acompanhada de intensa remodelação estromal, enquanto toxicidade celular foi observada apenas nas fêmeas. Nas gônadas masculinas o tratamento com crisina preservou a morfologia testicular. Em fêmeas, observou-se um maior número de folículos ovarianos em maturação. Comparativamente o tratamento com cipionato de testosterona foi capaz de causar lesões na próstata e gônadas, visto que focos de neoplasia intraepitelial prostática e degeneração gonadal foram observados em ambos os sexos. Esses resultados demonstram que a exposição à crisina, preservou a morfologia testicular normal, aumentou o número de folículos ovarianos em crescimento, aumentou a atividade secretória e alterou a regulação de receptores hormonais na próstata, potencializando a resposta desta glândula aos efeitos biológicos dos esteróides endógenos. Assim nas condições experimentais desse estudo embora a crisina e a testosterona evocassem alterações morfológicas semelhantes na próstata gerbilos masculina e feminina, a suplementação com crisina foi mais favorável à saúde da próstata. Contudo, a administração de crisina como agente fitoterápico deve ser considerada com precaução, visto que esse flavonóide parece exercer efeitos diferenciais em machos e fêmeas. / Chrysin is a naturally occurring biologically active compound found predominantly in blue passion flower, honey, chamomile, propolis and fruit peel. It has potent anti-inflammatory and antioxidant properties and has been used for the treatment of reproductive disorders. This flavone has the potential to increase endogenous testosterone levels both by inhibiting the aromatase enzyme and stimulating testicular steroidogenesis. Changes in hormone metabolism mediated by exogenous interferences may interfere with the prostatic physiology resulting in changes in the secretory activity of the gland and in the regulation of hormonal receptors. Thus, the objective of this study was to evaluate the effects of the exposure to chrysin on the prostate and gonads of adult gerbils. To evaluate the androgenic potential of chrysin, we comparatively analysed the effects of testosterone on these organs. Male and female gerbils aged 90 days were treated with either chrysin (50 mg/kg/day) or testosterone cypionate (1 mg/kg/week), subdivided into 3 subgroups and euthanized after 3, 7 and 21 days of treatment. The prostates and gonads were collected for morphological, morphometric-stereological, ultrastructural and immunehistochemical analyses. The testes and ovaries were subjected to morphological and morphometric-stereological analyses. Serum levels of testosterone and 17β-estradiol were determined using ELISA methods. Males and females treated with chrysin did not show increase in serum testosterone levels. However, only the females treated with chrysin for 21 days showed increase in the serum levels of estradiol. It was observed in both ventral prostate of males and in prostate of females in all the times of treatment with chrysin an increase in the frequency of androgen receptors (AR), a higher rate of proliferation and glandular hyperplasia. In addition, it was observed in all exposure times of females treated with chrysin a higher immunoreactivity frequency for alpha estrogen receptor (ERα). As to ultrastructure, males and females treated with chrysin showed intense development of the organelles of the biosynthetic-secretory route, accompanied by intense stromal remodeling. Cell toxicity was observed only in females. In the gonads of males the treatment with chrysin preserved testicular morphology. In females, we observed a larger number of ovarian follicles in maturation. Comparatively, the treatment with testosterone cypionate was able to cause lesions in the prostate and gonads, since the foci of prostatic intraepithelial neoplasia and gonadal degeneration were observed in both sexes. These results demonstrate that exposure to chrysin preserved normal testicular morphology, increased the number of ovarian follicles in growth, higher activity of secretory and changed the regulation of hormone receptors in the prostate potentiating the response of this gland to the biological effects of endogenous steroids. Therefore, under the experimental conditions of this study, although the chrysin and testosterone evoked similar morphological changes to those in the prostate of both sexes, supplementation with chrysin appeared to be more favorable to the prostate health. However, the chrysin intake as a phytotherapic agent should be considered with caution given that this flavonoid seems to exert distinct effects in males and females.

As principais enfermidades virais detectadas na carcinicultura mundial sÃo a SÃndrome da Mancha Branca (WSSV), InfecÃÃo Hipodermal e Necrose HematopoiÃtica (IHHNV), SÃndrome de Taura (TSV) e a SÃndrome da CabeÃa Amarela (YHV), esta Ãltima sem registro nos cultivos brasileiros. As doenÃas virais acima relacionadas nÃo estÃo restritas ao ambiente de cultivo. O WSSV foi detectado em vÃrias espÃcies de peneÃdeos e em outros grupos de crustÃceos silvestres. O IHHNV parece ser restrito aos peneÃdeos, tendo tambÃm sido detectado em populaÃÃes silvestres. O presente estudo teve como Ãrea de investigaÃÃo uma gamboa do EstuÃrio do Rio Juaguaribe, localizada na comunidade de Canavieiras, Aracati-CE, que recebe efluentes de fazendas de carcinicultura. A pesquisa objetivou verificar possÃveis escapes da espÃcie Litopenaeus vannamei para o ambiente de entorno e a ocorrÃncia do WSSV e IHHNV em populaÃÃes de camarÃes silvestres. Foram capturados 450 camarÃes por meio de arrastos e tarrafeamentos em trÃs estaÃÃes durante trÃs coletas realizadas nos meses de marÃo, abril e maio de 2006. Para a pesquisa viral foram utilizadas a ferramenta diagnÃstica de biologia molecular, reaÃÃo em cadeia da polimerase (PCR) e histologia clÃssica. A identificaÃÃo dos animais demonstrou o escape da espÃcie exÃtica. NÃo foi detectada a presenÃa do WSSV nas amostras analisadas. Contudo, foi detectado o IHHNV em 17 indivÃduos, sendo seis L. vannamei, oito Farfantepenaeus subtilis, um Farfantepenaeus brasiliensis e dois Litopenaeus schmitti, ficando demonstrada a suscetibilidade dessas espÃcies nativas ao IHHNV.

Noventa e três mastocitomas cutâneos caninos, presentes em 74 animais, tiveram seus históricos clínicos investigados. Destes, 25 casos foram submetidos à análise morfométrica nuclear em lâminas de citopatologia nas colorações Panótico rápido e H&E; e 28 casos à graduação histopatológica e à imunoistoquímica para detecção das expressões de KIT, BAX, Ki-67 e PCNA, de modo a identificar os melhores indicadores prognósticos para a neoplasia. Os parâmetros citomorfométricos nucleares investigados foram: área, diâmetro-médio e perímetro. Os tumores foram classificados em graus histopatológicos I (bem diferenciados), II (de diferenciação intermediária) ou III (pobremente diferenciados), segundo a proposta de Patnaik, Ehler e MacEwen (1984). Os resultados obtidos através dos indicadores investigados foram comparados às graduações oferecidas pelo exame histopatológico, bem como aos tempos de sobrevida pós-cirúrgica e à mortalidade em função da doença. A citomorfometria obteve correlação com a mortalidade e o tempo de sobrevida dos animais em ambas as colorações testadas. Entre os marcadores imunoistoquímicos, as expressões de Ki-67 e BAX mostraram-se eficientes na previsão da sobrevida e mortalidade para o tumor, enquanto que as de KIT e PCNA não foram indicadores prognósticos para a neoplasia. Quanto maiores os parâmetros citomorfométricos e as porcentagens de núcleos positivos para Ki-67 e BAX, maiores as taxas de mortalidade e menores os períodos de sobrevida pós-cirúrgica. Finalmente, a graduação histopatológica foi o método que obteve os resultados mais expressivos na histopatologia, demonstrando ainda ser o método mais confiável deste painel. Nossos resultados apresentam um novo método de classificação para os mastocitomas cutâneos caninos, a partir da análise morfométrica aliada ao exame citopatológico, e confirmam que as avaliações imunoistoquímicas de Ki-67 e BAX, podem auxiliar na graduação dos mastocitomas, contribuindo com o estabelecimento de prognósticos e tratamentos mais precisos. / Ninety-three canine cutaneous mast cell tumors, of 74 dogs, had their clinical history investigated. Among these, 25 cases were submitted to nuclear morphometric analysis on cytopathology slides stained by panoptic method and hematoxylin & eosin; and 28 cases were submitted to histopathologic grading and immunohistochemistry to evaluate KIT, BAX, Ki-67 e PCNA expressions, in order to identify the best prognostic indicators for this neoplasm. The nuclear cytomorphometric parameters used in the present study were: area, average-diameter and perimeter. The tumors were histologically classified as grades I (well differentiated), II (of intermediate differentiation) or III (poorly differentiated), as proposed by Patnaik, Ehler and MacEwen (1984). The results obtained by the indicators investigated were compared to the histopathologic grading, as well as to post-surgical survival times and mortality due to mast cell disease. Cytomorphometry was correlated with mortality and survival times in both staining methods. Among the immunohistochemical markers, Ki-67 and BAX expressions were efficient in predicting survival times and mortality due to mast cell tumors. KIT and PCNA expressions were not prognostic indicators for this tumor. The increases observed in the cytomorphometric parameters, and Ki-67 and BAX positive nuclei percentages were correlated with higher mortality rates and reduced post-surgical survival times. Finally, using the histopathologic grading system, we obtained the best results on histopathology, being this the most trustworhty method of this diagnostic panel. Our results presents a new grading system for canine cutaneous mast cell tumors, based on morphometric analysis on cytopathology slides, and confirm that immunohistochemical evaluation of Ki-67 and BAX expression may contribute to mast cell grading, leading to more accurate prognosis and treatment.

Malformações congênitas, teratogenias ou anomalias do desenvolvimento são processos patológicos definidos como defeitos estruturais que se originam durante a vida embrionária. A ocorrência de teratogenias tem sido relatada em todas as classes de vertebrados e geralmente são incompatíveis com um período de vida prolongado. Uma ampla variedade destas malformações é descrita em répteis, principalmente nas espécies que compreendem a ordem Squamata. Acredita-se que as malformações nestes animais ocorram devido a causas genéticas e/ou ambientais incluindo-se, dentre outras possibilidades, a baixa variabilidade gênica de algumas populações, as alterações de temperatura e umidade ambientais, e a poluição do meio-ambiente. A caracterização e o entendimento dos processos patológicos envolvidos nestas anomalias são de fundamental importância para a compreensão dos fatores que interferem com a conservação dos vertebrados em geral e, no que remete ao presente estudo, das serpentes em específico. Neste contexto, o objetivo desta pesquisa foi caracterizar as alterações macroscópicas e histopatológicas presentes em 102 serpentes acometidas por teratogenias, compreendendo as espécies Bothrops jararaca e Crotalus durissus, correlacionando as alterações histopatológicas identificadas com as malformações. As características macroscópicas das teratogenias foram avaliadas por meio de exames morfométricos, radiográficos, microtomográficos e necroscópicos. Alterações histopatológicas foram identificadas por meio de análise óptica de luz a partir de métodos citoquímicos rotineiros e especiais. O estudo revelou que serpentes da espécie B. jararaca apresentaram lesões axiais mais severas que indivíduos da espécie C. durissus. Nas análises intraespecíficas, fêmeas de C. durissus apresentaram lesões axiais mais severas e em maior número que os machos. No que diz respeito à distribuição destas lesões, indivíduos da espécie C. durissus apresentaram o terço final da coluna, como a região mais acometida pelas malformações axiais. A caracterização microtomográfica de teratogenias específicas (anoftalmia, bicefalia, buftalmia, cauda enrodilhada, ciclopia, cifoescoliose, hidrocefalia, lordose, malformação cefálica e prognatismo), permitiu a análise detalhada destas anomalias e a documentação de alterações morfológicas originais para serpentes como, por exemplo, a agenesia dos ossos frontal, parietal e supraoccipital em B. jararaca portadora de malformação cefálica. A relação entre as alterações histopatológicas e as malformações externas mostrou a existência de correlação estatisticamente significante entre a incidência de doenças renais císticas em serpentes acometidas por braquignatia, quadros inflamatórios oculares em serpentes portadoras de buftalmia, e a desorganização das fibras musculares periaxiais e fusão de corpos vertebrais em serpentes portadoras de lordose. Os dados obtidos constituem uma base de informações úteis para estudos futuros no campo da patologia, teratologia, embriologia e ecotoxicologia em serpentes. / Congenital malformations, developmental abnormalities or teratogeny are pathological processes defined as structural defects that originate during embryonic life. The occurrence of teratogeny has been reported in all classes of vertebrates and is generally incompatible with a prolonged life. A wide variety of these malformations is described in reptiles, especially in species that comprise the Squamata order. It is believed that the defects in these animals occur due to genetic and/or environmental causes including, among other possibilities, the low genetic variability of some populations, changes in environmental temperature and humidity, and environmental pollution. Characterization and understanding of the pathological processes involved in these anomalies are of fundamental importance for the comprehension of factors that interfere with vertebrates conservation in general and, referring to this study, snakes in particular. In this context, the objective of this research was to characterize the macroscopic and histopathological changes present in 102 snakes affected by congenital malformations, comprising the species Bothrops jararaca and Crotalus durissus, correlating histopathological changes with malformations. The macroscopic characteristics of deformities were evaluated by morphometric, radiographic, microtomographic and necropsy analysis. Histopathological changes were identified by light microscopy from routine and special cytochemical methods. The study revealed that B. jararaca snakes had more severe axial lesions than individuals of C. durissus species. In intraspecific analyses, females of C. durissus presented more severe and more numerous axial lesions than males. Regarding lesions distribution, the spinal cord and body final third in individuals of C. durissus species was the region most affected by axial defects. The microtomographic characterization of specific teratogenies (anophthalmia, bicefaly, buphthalmia, curled tail, cyclopia, kyphoscoliosis, hydrocephaly, lordosis, cephalic malformation and prognathism) allowed detailed analysis of these anomalies and the first documentation of certain morphological changes in snakes, for example, agenesis of the frontal, parietal and supraoccipital bones in a B. jararaca presenting cephalic malformation. The relationship between histopathological changes and external malformations showed a statistically significant correlation between the incidence of cystic kidney disease in snakes affected by brachygnatia, ocular inflammatory conditions in snakes affected by buphthalmia, and disorganization of periaxial muscle fibers and fusion of vertebral bodies in snakes presenting lordosis. This research has provided useful and informative data for future studies in the fields of pathology, teratology, embryology and ecotoxicology in snakes.

As cianobactérias (algas azuis) são organismos procariontes, fotossintéticos, encontrados em praticamente todo tipo de habitat líquido e que podem formar grandes massas superficiais de cor verde intensa denominadas florações. O aparecimento de florações na superfície da água ocorre com uma incidência cada vez mais elevada e é considerado um risco potencial à saúde, devido à natureza tóxica de algumas algas. As cianobactérias podem produzir hepatotoxinas, neurotoxinas e dermatotoxinas, que já causaram reações adversas e morte de animais e seres humanos. A maioria das hepatotoxinas são microcistinas (MCs), uma família de toxinas produzidas por espécies de cianobactérias de água doce. A MC-LR foi a primeira a ser identificada é a mais estudada, pois tem sido associada à maioria dos casos de intoxicação envolvendo cianotoxinas. O presente trabalho visou avaliar a toxicidade causada em camundongos pela exposição prolongada ao extrato aquoso de uma floração de cianobactérias contendo microcistinas. Para tanto, camundongos machos Swiss receberam o extrato (300 ou 900 mg/kg) por quatro semanas, sendo avaliados: ganho de peso, consumo de ração e água, comportamento no campo aberto (CA) e no labirinto em cruz elevado (LCE), hemograma, bioquímica sanguínea, achados anatomopatológicos e presença de MC no plasma e fígado. Além disso, quantificou-se as MCs presentes no extrato e avaliou-se in vitro a morte celular de leucócitos expostos a esse extrato e à MC-LR. A análise química do extrato mostrou que este possui, além das MCs, anabaenopeptinas; dentre as MCs foram encontradas a MC-LR, MC-RR, MC-YR e [D-Asp3] MC-LR. A exposição prolongada ao extrato por 28 dias não alterou o ganho de peso e o peso relativo de órgãos. Na necropsia também não foram observadas alterações macroscópicas, contudo alterações histopatológicas foram encontradas no fígado e no rim. No fígado foram observados focos discretos de necrose lítica hepatocelular associada a infiltrado de neutrófilos e células mononucleares. No rim, o tratamento com o extrato aumentou significativamente a intensidade de nefrose tubular, sendo esta mais acentuada nos animais tratados com a maior dose. O tratamento prolongado com o extrato em ambas doses causou efeitos comportamentais dosedependentes no CA: aumento significativo da distância percorrida, do número de entradas, do tempo em movimento e do número de levantamentos no centro do CA, além de um aumento do tempo de permanência no centro, com conseqüente diminuição deste parâmetro na periferia. No entanto, nenhum dos parâmetros avaliados no LCE foi alterado. A exposição prolongada ao extrato causou alterações sutis em parâmetros hematológicos e bioquímicos, caracterizadas por tendência de diminuição de leucócitos e de aumento dos níveis de creatinina sérica nos animais tratados com a maior dose do extrato. O tratamento prolongado com o extrato permitiu a detecção de MC apenas no fígado. Tanto a MC-LR como o extrato promoveram aumento das taxas de apoptose em leucócitos de camundongo in vitro. Finalizando, observou-se que a exposição prolongada a uma floração contendo MCs causou baixa toxicidade e efeitos comportamentais dose-dependentes, mostrando que o comportamento animal é bastante útil para avaliar efeitos mais sutis de agentes tóxicos sobre o sistema nervoso central. / Cyanobacteria (blue-green algae) are prokaryotic and photosynthetic organisms found in practically every type of liquid habitat and that can form great superficial masses of intense green color called blooms. The development of algal blooms on water surface occurs with a higher incidence and is recognised as being a potential health hazard due to the toxic nature of some algae. Cyanobacteria can produce hepatotoxins, neurotoxins and dermatotoxins, which already caused adverse effects and death of animals and human beings. Most of the hepatotoxins are microcystins (MCs), a family of toxins produced by species of freshwater cyanobacteria. MC-LR was the first to be identified and is the more studied, therefore, it has been associated to most of the cases of intoxication involving cyanotoxins. The present study was performed to evaluate the toxicity in mice after prolonged exposure to a cyanobacteria bloom extract containing microcystins. For this, male Swiss mice were treated with the extract (300 or 900 mg/kg) for four weeks and was evaluated: weight gain, food and water consumption, behavior in the open field (OF) and in the elevated plus-maze (EPM), blood count, clinical biochemistry, anatomopathological findings and presence of MC in the plasma and liver. Besides, the MCs present in the extract were quantified and the cellular death of leukocytes exposed in vitro to MC and to the extract was evaluated. The chemical analysis of the extract showed that it presented, besides MCs, anabaenopeptins; the MCs found were MC-LR, MC-RR, MC-YR and [D-Asp3] MC-LR. The prolonged exposure to the extract for 28 days did not alter the weight gain and the relative weight of organs. At necropsy, macroscopic alterations were not observed, however, histopathological alterations were found in the liver and in the kidney. In the liver, discreet necrosis focuses associated with neutrophils and mononuclear cells were found. In the kidney, the treatment with the extract increased significantly the intensity of tubular nephrosis, and this was more accentuated in the animals treated with the largest dose. The prolonged treatment with both doses caused dose-dependent behavioral effects in the OF: significant increase of moved distance, number of entries, time moving and rearing in the center of the OF, besides an increase of time spent in the center, with consequent decrease of this parameter in the periphery. None of the parameters evaluated in EPM were altered. The prolonged exposure to the extract caused subtle alterations in hematological and biochemical parameters, characterized by tendency for leukocyte decrease and increase of the levels of serum creatinine in the animals treated with the largest dose of the extract. The prolonged treatment with the extract allowed the detection of MC just in the liver. As much MC-LR as the extract promoted increase of the apoptosis levels in mouse leukocytes in vitro. Concluding, it was observed that the prolonged exposure to the cyanobacteria bloom containing MCs caused low toxicity and dose-dependent behavioral effects, showing that animal behavior is useful to evaluate subtler effects of toxic agents on the central nervous system.

O experimento associando probióticos no aleitamento e creche utilizou 144 leitões do nascimento até aos 62 dias de idade no Laboratório de Pesquisa em Suínos (FMVZ USP). No aleitamento, o delineamento experimental foi inteiramente casualizado com dois tratamentos e na creche em blocos casualizados formando o esquema fatorial 2x3 com seis tratamentos. A unidade experimental no aleitamento foi a baia maternidade constituída de grade de parição e na creche gaiola suspensa com 3 animais cada, constituindo, 8 repetições por tratamento. Aos 35 dias de idade os animais da creche foram inoculados com cepa de Salmonella Typhimurium via oral. Na maternidade os tratamentos foram: Placebo (PLA), 1mL de água destilada e Probiótico A (ProbA), 5g em 15mL de água destilada. O ProbA foi aplicado em duas ocasiões, ao nascimento e 12 horas antes do desafio e os animais que não receberam ProbA, receberam PLA. Os tratamentos na creche foram: Probiótico A Probiótico B (ProbA ProbB) 30g/tonelada de ProbB na ração; Controle Probiótico B (CTL ProbB): 30g/tonelada de ProbB na ração; Probiótico A Probiótico A(ProbA ProbA); Controle Controle (CTL CTL); Probiótico A Desafio (ProbA DES); Controle Desafio (CTL DES). As variáveis; peso, consumo, ganho de peso e conversão alimentar, foram analisadas em medidas repetidas no tempo com contrastes e o escore de fezes submetido à análise de variância pelo teste de Tukey. Foi utilizado o programa computacional Statistical Analysis System SAS. Na maternidade o peso médio do ProbA foi superior ao PLA, não observando-se diferenças no ganho de peso. Na creche o ProbA mostrou-se significativamente melhor em comparação aos demais tratamentos na conversão alimentar. No escore fezes, os animais desafiados apresentaram mais diarréia, e mais eliminação de S. Typhimurium, evidenciando o efeito positivo do desafio programado. A avaliação histológica aos 63 dias revelou aspecto similar nos diferentes grupos com e sem desafio. A eficiência econômica destacou o CTL ProbB.. O estudo indicou ação positiva dos probióticos quando aplicado logo ao nascimento, por influenciar diretamente na formação da microbiota intestinal, em fases mais adiantadas como na creche os efeitos são menos diretos. / The experiment involving probiotics in lactation and nursery were used one hundred and forty four piglets were used from birth to 62 days of age at Swine Research Laboratory (USP FMVZ). In the lactation, the experimental design was randomized with two treatments and in the nursery were randomized blocks forming a 2x3 factorial, consisting of six treatments. The experimental unit considered was the pen with 3 animals, with 8 repetitions per treatment. At 35 days of age the nursery animals were inoculated with a Salmonella Typhimurium strain orally. The treatments in the maternity were: Placebo (PLA): 1mL of distilled water and Probiotic A (ProbA): 5g in 15ml of distilled water. The ProbA was applied twice, at birth and 12 hours before the challenge and the animals that received no ProbA, received PLA. At the nursery twelve hours before the challenge, the same group of piglets that received ProbA and PLA in the maternity, received reinforcement for ProbA and PLA. In the nursery: Probiotic A Probiotic B (ProbA ProbB): 30g/ton of diet; Control Probiotic B (ProbB CTL): 30g/ton of diet; Probiotic A probiotic A (ProbA probA) Control Control (CTL CTL) Probiotic Challenge (DES ProbA) Control Challenge (CTL DES).The variables analyzed were weight, consumption, weight gain and feed conversion. The variables were analyzed with repeated measures contrasts and fecal score variable was subjected to analysis of variance by Tukey test. We used the computer program Statistical Analysis System SAS. In maternity, ProbA was superior to PLA treatment and did not observe differences in weight gain. At nursery the ProbA ProbA was significantly better compared to the other treatments in feed conversion. In the feces score, challenged animals showed high scores and greater elimination of S. Typhimurium, showing the effects of the programmed challenge. Histological evaluation at 63 days showed similar appearance within different groups (challenged or not). Economic evaluation shows CTL ProbB. The study indicated positive action of probiotics applied shortly after birth, by directly influencing the formation of the intestinal tract and in nursery as the effects are less direct.

Immunohistochemical (IHC) assessment in cancer research is important for understanding the distribution and localisation of biomarkers at the cellular level. However currently IHC analyses are predominantly performed manually, increasing workloads and introducing inter- and intra-observer variability. Automation shows great potential in clinical research to reduce pathologists' workloads and speed up cancer research in large clinical studies. Whilst recent advancements in digital pathology have enabled IHC measurements to be performed automatically, the acquisition of manual annotations of tumours in scanned digital slides is still a limiting factor. In this thesis, an automated solution to tumour localisation is explored with the aim of replacing manual annotations. As an exemplar, human breast tissue microarrays stained with estrogen receptor are considered. Methods for automated tumour localisation are described with a focus on capturing structural information in tissue by adopting superpixel properties in a rotation invariant manner, suitable for histopathology images. To incorporate essential contextual information, methods which utilise posterior tumour probabilities in an iterative manner are proposed. Results showed pixel-level agreements between automated and manual tumour segmentation masks (κ=0.811) approach inter-rater agreement between expert pathologists (κ=0.908). A large proportion of disagreements between automated and manual segmentations were shown to correlate to minor discrepancies, inconsequential for IHC assessment. IHC scores extracted from automated and manual tumour segmentation masks showed strong agreements (Allred: κˆ=0.911; Quickscore: κˆ=0.922), demonstrating the potential of automation in clinical practice across large clinical trials.

Submitted by Jorge Silva (jorgelmsilva@ufrrj.br) on 2018-09-12T17:35:07Z No. of bitstreams: 1 2017 - Bianca Pachiel Medeiros.pdf: 3428941 bytes, checksum: 22642dcf6ea2928765599063c978c85f (MD5) / Made available in DSpace on 2018-09-12T17:35:07Z (GMT). No. of bitstreams: 1 2017 - Bianca Pachiel Medeiros.pdf: 3428941 bytes, checksum: 22642dcf6ea2928765599063c978c85f (MD5) Previous issue date: 2017-04-27 / The aim of this study was to characterize by ultrasonography and histopathology the injuries of cows discarded. For this, 50 mammary glands were collected from cows slaughtered for food in a frigorific on Rio de Janeiro state. Each mammary quartery was externally and internally inspected and we evaluated the presence of injuries and alterations. Twenty-six glands were evaluated by ultrasonography using a 7.5 MHz transrectal transducer. For the histopatological examination we collected fragments with macroscopic alterations that were placed in flasks containing formalin 10% buffered solution of routinely processed, stained with hematoxylin and eosin and evaluated in microscopy. The most of macroscopic changes occurred in the mammary parenchyma and few changes were observed in the skin and teats. The most frequent changes in the parenchyma were fibrosis, followed by hyperemia, hypertrophy, presence of abscesses and edema. In addition, different types of secretion were observed: milky with normal appearance, milky with whitish or yellowish lumps, thick yellowish-greenish, gelatinous with homogeneous translucent appearance, ranging from colorless, yellowish and brownish yellow. In ultrasonography, changes in ecotexture, echogenicity, presence of gas, nodules and high cellularity content were observed in the parenchyma, gland cistern and teats. The most of teats showed normal wall, followed by hyperechoic and few of mixed echogenicity.The content observation was not possible in most of the teats cisterns, and when we observed, the majority had content without cellularity (normal). In the parenchyma, the most of the contents observed showed mixed or increased echogenicity, most of heterogeneity ecotexture. In the histopathological examination of the mammary tissues, the most frequent finding was the presence of inflammatory infiltrates more commonly consisting of lymphocytes and macrophages. Inflammatory cells were most frequently within the tubules and surrounding the acini and galactophore ducts. In the skin was observed orthokeratosisand and in teats the papilloma in addition moderate or mildmultifocal chronic granulomatous dermatitis. In lymph nodes only one alteration characterized as moderate multifocal acute purulent lymphadenitis was observed. In addition to inflammatory infiltrates, the presence of corpora amylacea in seven samples was observed in the mammary parenchyma. It is concluded that the macroscopic, ultrasonographic and histopathological evaluation methods added to the physical examination can promote a more complete and efficient diagnosis for the diseases of the mammary glands of this species. / Prop?s-se com este estudo caracterizar por ultrassonografia e histopatologia as les?es de gl?ndulas mam?rias de vacas de descarte. Para isso, foram coletadas 50 ?beres (200 quartos mam?rios) de vacas abatidas para consumo em um frigor?fico no Estado do Rio de janeiro. Cada quarto mam?rio foi inspecionado externa e internamente, sendo avaliadas as les?es e as altera??es presentes. Vinte e seis gl?ndulas foram avaliadas por ultrassonografia utilizando-se transdutor retal de 7,5 MHz. Para o exame histopatol?gico foram coletados fragmentos com altera??es macrosc?picas, acondicionados em frascos contendo formol a 10% tamponado, processados rotineiramente, corados com hematoxilina e eosina e avaliados em microscopia ?ptica. A maior parte das altera??es macrosc?picas ocorreu no par?nquima mam?rio e poucas altera??es foram observadas na pele e nos tetos. As altera??es mais encontradas no par?nquima foram fibrose, seguida de hiperemia, hipertrofia, abscessos e edema. Al?m destas foram observados diferentes tipos de secre??o: leitosa com aspecto normal, leitosa com grumos esbranqui?ados ou amarelados, espessa de colora??o amarelo-esverdeada, gelatinosa com aspecto homog?neo transl?cido variando entre incolor, amarelada e amarelo-amarronzada. Na ultrassonografia foram observados no par?nquima, cisterna da gl?ndula e dos tetos altera??es de ecotextura, ecogenicidade, presen?a de g?s, n?dulos e conte?do com alta celularidade. A maioria dos tetos apresentou parede normoecoica, seguida por hiperecoica e poucos de ecogenicidade mista. A observa??o de conte?do n?o foi poss?vel na maioria das cisternas do teto, e quando observado a maioria apresentava baixa celularidade (normal). No par?nquima, a maioria dos conte?dos observados apresentaram ecogenicidade mista ou aumentada, a maioria de ecotextura heterog?nea. No exame histopatol?gico dos tecidos mam?rios, o achado mais frequente foi a presen?a de infiltrado inflamat?rio, mais comumente consistindo de linf?citos e macr?fagos. As c?lulas inflamat?rias estavam com maior frequ?ncia no interior dos t?bulos e circundando os ?cinos e ductos galact?foros. Na pele foi observada ortoqueratose, nos tetos papiloma e dermatite granulomatosa cr?nica multifocal leve ou moderada. Em linfonodos apenas observou-se uma altera??o caracterizada como linfadenite purulenta aguda multifocal moderada. Al?m dos infiltrados inflamat?rios, no par?nquima mam?rio foi observada a presen?a de corpora amylacea em sete amostras. Conclui-se que os m?todos de avalia??o macrosc?pica, ultrassonogr?fica e histopatol?gica, somados ao exame f?sico podem promover um diagn?stico mais completo e eficiente para as enfermidades de gl?ndulas mam?rias desta esp?cie.