Orientadores: Sandra Maria Carmello-Guerreiro, Marilia de Moraes Castro, Lia Ascensão / Tese (doutorado) - Universidade Estadual de Campinas, Instituto de Biologia / Made available in DSpace on 2018-08-08T00:05:44Z (GMT). No. of bitstreams: 1 Lacchia_AnaPaulaStechhahn_D.pdf: 8477823 bytes, checksum: a1685fc288b20acce389a79bd6302d17 (MD5) Previous issue date: 2006 / Resumo: Anacardiaceae é composta por 70 gêneros com aproximadamente 600 espécies de distribuição principalmente pantropical, com poucas de regiões temperadas. A classificação infrafamiliar mais amplamente utilizada, proposta por Engler (1892), divide a família em cinco tribos: Anacardieae, Rhoeae, Semecarpeae, Spondiadeae e Dobineeae. No presente trabalho, foram estudadas uma espécie da tribo Anacardieae (Anacardium humile St.Hil), uma espécie da tribo Rhoeae (Lithraea molleoides (Vell.) Engl. e duas espécies da tribo Spondiadeae (Spondias dulcis G.Forst e Tapirira guidnensis Aubl.). As estruturas secretoras dos órgãos vegetativos e reprodutivos destas espécies foram caracterizadas anatômica e histoquimicamente e apenas os canais secretores foram caracterizados ultra-estruturalmente. Os canais têm epitélio unisseriado; os associados ao floema são resiníferos (lato sensu) e os medulares de A. humile e S. dulcis, são mucilaginosos. A presença de canais produzindo secreções quimicamente distintas em um mesmo órgão, de uma mesma espécie, está sendo descrita pela primeira vez neste tranalho. Em A. humile, L. molleoides e T.guianensis os canais estão associados ao floema da pétala, sépala, receptáculo, pedicelo florais de todas as flores e ao floema do mesofilo ovariano das flores pistiladas e do pistilódio das flores estaminadas de L. molleoides e, T. guianensis. Canais também são encontrados no fruto e pedúnculo de A. humile e no fruto de T. guianensis. Os canais têm epitélio unisseriado; os florais de A. humile, L. molleoides e T. guianensis são resiníferos (lato sensu), os do fruto e pedúnculo de A. humile são resiníferos (stricto sensu) e os do fruto de T. guianensis são resiníferos (lato sensu). Em uma mesma espécie os canais secretores presentes em diferentes órgãos podem produzir substâncias distintas¿Observação: O resumo, na íntegra poderá ser visualizado no texto completo da tese digital / Abstract: Anacardiaceae is comprised of 70 genera with approximately 600 species of pantropical distribution, mainly, with few species from temperate regions. The most used infrafamilial classification, proposed by Engler (1892), divides this family in five tribes: Anacardieae, Rhoeae, Semecarpeae, Spondiadeae, and Dobineeae. In the present work, there were studied a species from Anacardieae tribe (Anacardium humile St.Hil), a species from Rhoeae tribe (Lithraea molleoides (Vell.) Engl., and two species from Spondiadeae tribe (Spondias dulcis G.Forst and Tapirira guianensis Aubl.). The secretory structures of the vegetative and reproductive organs of these species were characterized anatomically and histochemically, and the secretory canals present in them were ultrastructurally characterized. The canals present uniseriate epithelium; the ones associated to the phloem are resiniferous (lato sensu) and the medullar ones of A. humile and S. dulcis are mucilaginous. The presence of canals that produce chemically distinct secretions in the same organ of a species is being described for the first time. In A. humile, L. molleoides, and T. guianensis, the canals are associated to the phloem of petal, sepal, receptacles, and ovarian mesophyll; only in the pistil-like structure of the male flowers of L. molleoides and T. guianensis, there are found some canaIs. The canals are also found in the fruit and peduncle of A. humile and in the fruit of T. guianensis. The canaIs have uniseriate epithelium; the floral canaIs of A. humile, L. molleoides, and T. guianensis are resiniferous (lato sensu), the ones from fruit and peduncle of A. humile are resiniferous (stricto sensu), and the ones from the fruit of T. guianensis are resiniferous (lato sensu). In the same species, the secretory canaIs present in different organs may produce distinct substances...Note: The complete abstract is available with the full electronic digital thesis or dissertations / Doutorado / Doutor em Biologia Vegetal

Orientadores: Liliana Aparecida Lucci De Angelo Andrade, Sophie Francoise Mauricette Derchain / Tese (doutorado) - Universidade Estadual de Campinas, Faculdade de Ciências Médicas / Made available in DSpace on 2018-08-24T12:06:20Z (GMT). No. of bitstreams: 1 Pinto_PaolaBertolottiCardoso_D.pdf: 22982855 bytes, checksum: ca4a4e679f0037c1494bf2866a333968 (MD5) Previous issue date: 2013 / Resumo: Os carcinomas mucinosos do ovário são raros e representam apenas 3% dos carcinomas. Frente a este diagnóstico, é preciso descartar a possibilidade de metástase para o ovário, principalmente de neoplasia primária do trato gastrointestinal. Apesar da avaliação morfológica, macro e microscópica, e das reações imunoistoquímicas contribuírem para o diagnóstico diferencial, existem casos de difícil diferenciação. Um algoritmo para separar os carcinomas mucinosos primários dos metastáticos no ovário foi proposto na literatura e determina que são metastáticos os tumores bilaterais ou unilaterais menores que 13cm, classificando as neoplasias com uma acurácia de quase 90%. Objetivos: comparar os aspectos macro e microscópicos aliados à avaliação imunoistoquímica para a diferenciação entre tumores mucinosos primários e metastáticos no ovário, avaliando a acurácia do algoritmo nos casos, os dados clínicos e sua evolução. Métodos: Todos os tumores mucinosos envolvendo o ovário, dos arquivos do Laboratório de Anatomia Patológica da UNICAMP no período de 1994 a 2009 foram levantados. Feita revisão dos prontuários com descrição dos dados clínicos, evolução das pacientes, revisão de lâminas para avaliação de dados histopatológicos e seleção dos blocos de parafina para a construção de micro-arranjo de tecidos, onde foram realizadas as reações imunoistoquímicas para: CK7, CK20, ?-catenina, WT-1, CDX-2, Dpc-4, CA125, RE e RP. Resultados: Dos 76 casos selecionados, 35 eram carcinomas mucinosos primários do ovário, 33 eram metastáticos e em 8 casos o primário não foi definido, sendo excluídos da análise estatística. A sobrevida média foi maior nos primários (65X35 meses; p<0.0001). A acurácia do algoritmo foi de 82,1%. A maioria dos metastáticos originou-se do cólon ou reto (54%). Dos primários, 85% eram unilaterais >13 cm e dos metastáticos, 61% eram bilaterais e 18% unilaterais <13cm. Entre as características histológicas, êmbolos carcinomatosos e a ausência de gradiente morfológico foram mais observados nos metastáticos. Na análise bivariada dos marcadores apenas CK7, CK20 e CDX2 mostraram diferenças significantes entre os grupos, entretanto houve muita sobreposição de resultados. Após análise multivariada foram selecionados: gradiente histológico e CK7 para formação de um novo algoritmo que definiu, com acurácia de 91%, que um tumor é metastático quando apresenta qualquer um dos aspectos: bilateral; unilateral e <13 cm; ausência de gradiente histológico; ou gradiente histológico presente com falta de expressão do CK7. Conclusão: tanto o algoritmo, como as reações imunoistoquímicas e os aspectos morfológicos são úteis no diagnóstico diferencial entre primário e metastático, porém não há nenhum dado discriminatório e, em alguns casos, somente a análise com equipe multidisciplinar pode definir o primário, reconhecendo as peculiaridades deste diagnóstico desafiador / Abstract: Primary ovarian mucinous carcinomas are uncommon and the most important differential is metastatic adenocarcinoma, mainly from gastrointestinal origin. Besides immunohistochemical profile, an algorithm determines, with a high accuracy, that unilateral and >13cm tumors are primary carcinomas and all the others, metastasis. Objective: to describe clinical and histopathological aspects of mucinous carcinomas, assessing the algorithm accuracy and immunohistochemical markers contributory to diagnosis. Methods: 76 mucinous carcinomas from our files (1994-2009) were revised; immunohistochemical reactions for CK7, CK20, Ca125, hormonal receptors (ER, PR), WT1, SMAD4, ?-catenin, CDX2 were performed by TMA. Results: 35 were ovarian primary tumors (group 1), 33 were metastasis (group 2). In eight cases the primary was not identified and these were excluded from statistic analysis. Most of the metastasis were from colorectal cancer (54%). Mean survival differed between the groups (65X35 months; p<0.0001). Agreement with the algorithm was 82.1%. In group 1, 85% were unilateral >13cm; in group 2, 61% were bilateral and 18% unilateral tumors <13cm. Different from group 1, common features in group 2 were vascular invasion and tumors without histological gradient. Bivariate analysis pointed out CK7, CK20 and CDX2 as main markers to distinguish both groups, but overlapping of the results was observed. After multivariate analysis, 2 aspects were selected: histological gradient and CK7; a new algorithm was designed and established with an accuracy of 91%, that a mucinous carcinoma is metastatic to the ovary when it shows one of the aspects: bilateral, or unilateral and <13cm, or without histological gradient, or presence of histological gradient but CK7 is negative. Conclusion: Algorithm and immunohistochemistry are useful, but there is no gold-standard marker. In some cases, only multidisciplinary evaluation can achieve reliable anatomo-clinical diagnosis, in this challenging situation / Doutorado / Anatomia Patologica / Doutora em Ciências Médicas

Orientador: Alan Roger dos Santos Silva / Tese (doutorado) - Universidade Estadual de Campinas, Faculdade de Odontologia de Piracicaba / Made available in DSpace on 2018-08-27T16:02:08Z (GMT). No. of bitstreams: 1 Neves-Silva_Rodrigo_D.pdf: 4907287 bytes, checksum: 38719ff902e5d495d2cea840229a01b1 (MD5) Previous issue date: 2015 / Resumo: Tumores odontogênicos (TOs) são neoplasias originadas do órgão de desenvolvimento dentário ou de seus remanescentes. Neste contexto, o ameloblastoma é um dos TOs mais relevantes devido a sua elevada frequência e alto potencial de agressividade clínica. O presente estudo se propôs a realizar uma análise clinicopatológica retrospectiva de ameloblastomas e, posteriormente, validar o uso da técnica do tissue microarray (TMA) para a análise imunoistoquímica de ameloblastomas. Material e métodos: O estudo clinicopatológico se baseou numa amostra de 869 TOs, oriundos de dois centros de Patologia Oral brasileiros, sendo 177 (20,36%) casos de ameloblastomas, dos quais foram selecionados 40 (22,59%) casos representativos de ameloblastomas multicísticos que foram distribuídos em dois blocos do TMA montados em triplicata contendo cilindros de 1.0mm e 2.0mm (Sakura Co., Tokyo, Japan). A validação da análise imunoistoquímica foi realizada para proteínas expressas em citoplasma (citoqueratina 14, citoqueratina 19 e Bcl-2) e em núcleo (Ki-67); analisada por meio semiquantitativo e também por microscopia óptica digital (Aperio Scanscope CS® Slide Scanner; Aperio Technologies Inc.; Vista, CA; USA) e quantificada por meio dos algoritmos PixelCount® e NuclearV9® (Aperio Technologies Inc.; Vista, CA; USA). Resultados: Os 40 casos de ameloblastoma multicístico afetaram predominantemente pacientes do gênero masculino (62,5%), a média de idade no momento do diagnóstico foi de 39,92 anos (variando de 15 a 71 anos), a maioria (92,5%) dos casos ocorreu na região posterior da mandíbula. A concordância obtida para a expressão imunoistoquímica entre os diferentes diâmetros do TMA e os cortes convencionais mostrou melhores resultados para os cilindros de 2.0mm montados em triplicata nas análises digital e semiquantitativa. Em conclusão, o presente estudo demonstrou originalmente que a técnica do TMA pode ser usada com rigor científico para estudos baseados na análise imunoistoquímica de marcadores de citoplasma e núcleo celular em ameloblastomas multicísticos / Abstract: Odontogenic tumors (OTs) are neoplasms originating from the tooth developing apparatus or its remnants. In this context, ameloblastoma is one of the most relevant OTs due to its high frequency and clinical potential of aggressiveness. The present study performed a retrospective, clinicopathological analysis of ameloblastomas and subsequently validated the use of the tissue microarray (TMA) for immunohistochemical analysis of ameloblastomas. Materials and methods: The clinicopathologic study was based on a sample of 869 OTs from two Brazilian Oral Pathology Centers. Of these, 177 (20.36%) cases were ameloblastomas, of which 40 (22.59%) cases of multicystic ameloblastomas were selected and divided into two TMA blocks mounted in triplicate containing cores of 1.0mm and 2.0mm (Sakura Co., Tokyo, Japan). The validation of the immunohistochemical analysis was performed for proteins expressed in the cytoplasm (cytokeratin 14, cytokeratin 19, and Bcl-2) and nuclei (Ki-67), analyzed in a semiquantitative way as well as by digital optical microscopy (Aperio Scanscope CS® Slide Scanner; Aperio Technologies Inc., Vista, CA, USA), and quantified by PixelCount® and NuclearV9® algorithms (Aperio Technologies Inc., Vista, CA, USA). Results: Forty cases of ameloblastoma affected predominantly male patients (n=25; 62.5%). The mean age at diagnosis was 39.92 years (ranging from 15 to 71 years), and the majority (92.5%) of the cases occurred in the posterior mandible. The concordance obtained for the immunohistochemical expression in different TMA core diameters and whole sections showed best results for 2.0mm TMA assembled in triplicates both for semiquantitative and digital analyses. In conclusion, this study originally demonstrated that the TMA technique could be used with scientific rigor in studies based on immunohistochemical analysis of cytoplasmic and nuclear markers in multicystic ameloblastomas / Doutorado / Estomatologia / Doutor em Estomatopatologia

A popularização dos répteis no mercado pet e no meio científico amplia a necessidade por conhecimentos clínicos e fisiológicos mais adequados a classe o que, consequentemente, irá melhorar a qualidade dos atendimentos e do manejo desses animais. Destaca-se que, como cada espécie de réptil apresenta um comportamento metabólico e fisiológico distinto é necessário a realização de estudos com cada espécie em particular. Assim, buscou-se caracterizar os receptores opioides no sistema nervoso central (SNC) e os efeito sedativo e analgésico da morfina e do butorfanol em Iguana iguana. Na 1ª etapa três iguanas jovens (101 &plusmn; 6g) e saudáveis foram submetidas à eutanásia para colheita do SNC. Os tecidos de dois animais foram submetidos à técnica do RNAseq para formação de um transcriptoma de novo, para então obter-se as sequências de nucleotídeos dos receptores opioides. Já o tecido de um animal foi submetido à técnica de imuno-histoquímica (IH). Na 2ª etapa, 10 iguanas jovens (160 &plusmn; 46g) receberam cinco tratamentos, por via intramuscular e com intervalo de duas semanas entre eles: solução salina (0,3mL, CON), morfina 5 mg/kg (MOR5) e 10 mg/kg (MOR10), butorfanol 5 mg/kg (BUT5) e 10 mg/kg (BUT10). A sedação foi avaliada por meio da escala comportamental específica para iguanas e pelo teste de natação forçada, sendo este por 120 segundos. A latência do reflexo de retirada do membro (LRRM) frente ao estímulo térmico foi utilizada para avaliação antinociceptiva promovida pelos opioides. Todos os testes foram avaliados antes do tratamento (0) e com 30 minutos, 1, 2, 3, 4, 6, 12 e 24 horas pós-tratamento. Utilizou-se ANOVA e Dunnett para a comparação com o momento basal (0 minuto) e ANOVA de dois fatores e Tukey entre os grupos. As sequências gênicas compatíveis com os receptores &mu; (mu), &kappa; (kappa) e &delta; (delta) foram identificadas, porém o teste de IH não revelou resultados confiáveis para as marcações dos receptores no SNC. Na escala comportamental apesar dos escores de sedação terem sido baixos, foi observado aumento significativo na pontuação entre 30 minutos e 2 horas em MOR5 e entre 30 minutos e 3 horas em MOR10, BUT5 e BUT10. O tempo de natação foi reduzido em MOR10 e BUT5 entre 30 minutos e 2 horas e em BUT10 a redução ocorreu entre 30 minutos e 12 horas. Todos os tratamentos proporcionaram sedação pelos dois testes com 12 horas de avaliação. Por outro lado no teste de termoalgimetria só foi observado aumento no tempo de LRRM em MOR10, entre 2 horas e 4 horas de avaliação. Conclui-se que os receptores opioides estão presentes no SNC, porém apenas &kappa; e &delta; foram evidenciados na IH. Ademais, as duas doses de butorfanol e a maior dose de morfina promovem sedação, sendo que apenas 10 mg/kg de morfina promoveu antinocicepção em iguanas no presente estudo. / The increasing popularity of reptiles in the pet market and in the scientific studies requires appropriate clinical and physiological knowledge, which will consequently improve the quality of care and management of this classe. It is necessary to have studies with each species in particular because of every specie of reptile has different metabolic and physiological behavior. Therefore, it was aimed localization of opioid receptor in the central nervous system (CNS) and evaluated the sedative and analgesic effect of morphine and butorphanol in Iguana iguana. At the first stage three young (101 &plusmn; 6g) and healthy green iguanas were submitted to euthanasia for harvesting the CNS, then the tissues of two animals were submitted to the RNAseq technique for the formation of de Novo transcriptome, so we could get the nucleotide sequences of the opioid receptors obtained. The immunohistochemistry (IH) technique was use to locate the distribution of these receptors in the CNS. In the second stage, 10 young green iguanas (160 &plusmn; 46 g) received five treatments, intramuscularly and with an interval of two weeks between them: saline solution (0.3 mL, CON), morphine 5 mg/kg (MOR5) and 10 mg/kg (MOR10), butorphanol 5 mg/kg (BUT5) and 10 mg/kg (BUT10). The sedation was estimate by behavioral scale for iguanas and forced swing test, during 120 seconds. The latency of hind limb withdrawal reflex (LWR) in front of the thermal stimulus was use for antinociceptive evaluation promoted by opioids. All the tests were evaluate before treatment (0) and at 30 minutes, 1, 2, 3, 4, 6, 12 and 24 hours post-treatment. ANOVA and Dunnett were used for comparison with the baseline (0 minute) and two-way ANOVA and Tukey between the groups. We identified sequences compatible with &mu; (mu), &kappa; (kappa) and &delta; (delta), but only &kappa; and &delta; were marked in the IH of the CNS. In the behavior scale despite of low scores of sedation, it was observe a significant increase in the score between 30 minutes and 2 hour MOR5 and between 30 minutes and 3 hours in MOR10, BUT5 and BUT10. The time of swimming test was reduced in MOR10 and BUT5 between 30 minutes and 2 hours and in BUT10 the reduction occurred between 30 minutes and 12 hours. All treatment provided sedation for both tests in 12 hours of evaluation. Otherwise, the thermoalgymetry test showed increased time in LWR in MOR10 between 2 hours and 4 hours of evaluation. It concluded that the opioid receptors are present in the CNS. In addition, the two doses of butorphanol and the highest dose of morphine further sedation and only 10 mg/kg of morphine promoted antinociception in iguanas in this study.

Euphorbiaceae é uma família com grande diversidade floral, despertando o interesse desde meados do século XVIII e que, atualmente, é composta por 218 gêneros e 6.745 espécies, distribuídas em quatro subfamílias (Cheilosoideae, Acalyphoideae, Crotonoideae e Euphorbioideae). Essas variações morfológicas, tais como a presença de pseudantos e os diferentes níveis de reduções florais, são razões para as divergências em sua classificação e motivação para diversos estudos evolutivos. Considerando a variedade de tipos de pseudantos e flores presentes nas diferentes subfamílias, quatro espécies foram selecionadas para este trabalho: Dalechampia meridionalis Müll. Arg. (Acalyphoideae), Joannesia princeps Vell. (Crotonoideae), Euphorbia sipolisii N.E. Br. (Euphorbioideae) e Pera glabrata Poepp. ex Baill. (de posição incerta). O objetivo desse estudo foi analisar os diferentes graus de redução floral, com ênfase na atividade dos meristemas (padrões de divisão, expansão e diferenciação celular) juntamente com os fatores ontogenéticos (diferenças quanto à formação de primórdios) que levaram a supressão de verticilos e culminaram no surgimento dos pseudantos. Aliado a esta diversidade e à redução dos verticilos, tem-se a importância das estruturas secretoras na manutenção da recompensa ao polinizador e, portanto, o objetivo deste trabalho é complementado com o estudo morfoanatômico destas estruturas e análise histoquímica de seus exsudatos. Botões florais e flores em diversos estágios de desenvolvimento foram analisados em microscopia de luz e em microscopia eletrônica de varredura para auxiliar na investigação da ontogênese floral. Nas fases iniciais de desenvolvimento dos pseudantos, as primeiras estruturas a se formar são os diferentes níveis de brácteas. Os primórdios florais iniciam formação concomitantemente aos invólucros, sendo a iniciação das flores estaminadas pistiladas diferenciada, ocorrendo a formação de perianto unicamente em Dalechampia e Pera, formação de constrições nas flores de Dalechampia e Euphorbia e os pseudantos consideradas protogínicos. As flores de J. princeps apresentam iniciação similar à dos pseudantos, diferindo especialmente quanto ao desenvolvimento do perianto, não havendo a formação de constrição. As flores diferem anatomicamente quanto à características do gineceu e também nos padrões de ramificação. Coléteres são encontrados nas fases iniciais de desenvolvimento do ciátio e Dalechampia e laticíferos e idioblastos fenólicos ocorrem em diversas fases de Joannesia e Pera, secretando exsudatos compostos por mucilagem, proteínas, ácidos graxos e fenólicos. A glândula de resina de Dalechampia e os nectários de Euphorbia e Joannesia atuam como glândulas nupciais e iniciam sua formação logo nos primórdios florais, apresentando secreção de exsudatos ricos em lipídios e açúcares, respectivamente. Considerando a ocorrência dos pseudantos em Acalyphoideae e Euphorbioideae e a variação floral presente em Crotonoideae, propõe-se que as características estruturais e as reduções florais observadas nos pseudantos tiveram mais de uma origem ao longo da evolução de Euphorbiaceae e assim sugerimos que os pseudantos evoluíram não apenas de um processo de redução, mas também de uma reorganização das flores ao longo do eixo da inflorescência. As estruturas secretoras estão possivelmente relacionadas a variação morfológica e à história evolutiva do grupo, importantes para o desenvolvimento completo das inflorescências e flores / Euphorbiaceae is a family with great floral diversity, arousing interest from the mid-eighteenth century, currently composed of 218 genera and 6,745 species, distributed into four subfamilies (Cheilosoideae, Acalyphoideae, Crotonoideae and Euphorbioideae). The morphological variations such as the presence of pseudanthia and different levels of floral reductions are reasons for the differences in classification and also motivation for several evolutionary studies. Considering the variety of pseudanthia and flowers present in the different subfamilies, four species were selected for this study: Dalechampia meridionalis Müll. Arg. (Acalyphoideae), Joannesia princeps Vell. (Crotonoideae), Euphorbia sipolisii N.E. Br. (Euphorbioideae) and Pera glabrata Poepp. ex Baill. (uncertain position). The aim of this study was to analyze the different degrees of floral reduction, with emphasis on the activity of meristems (patterns of division, expansion and differentiation) along with the ontogenetic factors (differences on the primordia formation) which led to the suppression of whorls and culminated into the emergence of pseudanthia. Allied to this diversity and reduction of whorls, there is the importance of secretory structures in maintaining the pollinators reward and therefore the aim of this study is complemented with the morphoanatomical study of these structures and the histochemical analysis of their exudates. Flower buds and flowers in different stages of development were analyzed in light and scanning electronic microscopy to assist the investigation of floral ontogeny. In the early stages of development of pseudanthia, the first structures to be formed are the different levels of bracts. The floral primordia begin concomitantly as the involucre, with distinct initiation of staminate and pistillate flowers, formation of perianth only in Dalechampia and Pera, constrictions in the flowers of Euphorbia and Dalechampia and pseudanthia considered protogynic. The flowers of J. princeps show similar initiation as pseudanthia, differing especially in the development of the perianth, without the formation of constriction. The flowers differ anatomically in the gynoecium characteristics and also in branching patterns. Colleters are found in early stages of development of the cyathium and in Dalechampia, and laticifers and phenolic idioblasts occur in various stages of Joannesia and Pera, secreting exudates composed of mucilage, proteins, fatty acids and phenolic compounds. The resin gland of Dalechampia and the nectaries of Euphorbia and Joannesia act as nuptial glands and begin their formation in the floral primordia, presenting secretion of exudates rich in lipids and sugars, respectively. Considering the occurrence of pseudanthia in Acalyphoideae and Euphorbioideae and the floral variations present in Crotonoideae, it is proposed that the structural characteristics and floral reductions observed in pseudanthia had more than one single origin throughout the evolution of Euphorbiaceae and so we suggest that pseudanthia evolved not only by a process of reduction, but also by a reorganization of flowers along the inflorescence axis. Secretory structures are possibly related to morphological variations and the evolutionary history of the group, being important for the complete development of inflorescences and flowers

Orientador: Regina Helena Garcia Martins / Banca: Alexandre Todorovic Fabro / Banca: Maria Inês Beltrati Cornacchioni Rehder / Banca: Christiano de Germano Carneiro / Banca: Norimar Hernandes Dias / Resumo: Objetivo: estudar o remodelamento dos colágenos dos tipos I, III, IV e V, da elastina, da fibronectina, da laminina e do ácido hialurônico, no processo de senilidade da laringe humana por meio de estudo imuno-histquímico. Casuística e Métodos: foram utilizadas 30 pregas vocais humanas masculinas removidas durante a rotina de necrópsia do Departamento de Patologia da Faculdade de Medicina de Botucatu/UNESP, sendo 20 laringes de idosos (n-10; 60-75 anos e n-10; acima de 75 anos) e 10 de adultos controles (de 30 a 50 anos). Os fragmentos das pregas vocais receberam as reações imuno-histoquímicas para os colágenos I, III, IV e V, elastina, fibronectina, laminina e ácido hialurônico. As leituras das lâminas foram realizadas quantificando-se o grau de acúmulo de coloração acastanhada das estruturas da lâmina própria e da membrana basal, sendo a área padronizada em μm2 e o resultado dado em porcentagem de área pelo software ImageJ. Resultados: houve aumento da imunoexpressão dos colágenos I e III nas laringes dos idosos (p<0.05). Os valores registrados do colágeno I na camada superficial nas três faixas etárias foram respectivamente, 34,2%, 39,6% e 40,4%; na camada profunda, 31,8%, 44,4% e 46,9%. Os valores do colágeno III na camada superficial nas três faixas etárias foram respectivamente, 25,6%, 31,2% e 32,4%; na camada profunda, 23,6%, 24,6% e 29,9%. Para os colágenos IV e V, observou-se maior intensidade de marcação desses anticorpos no endotélio dos vasos da camada superficial da lâmina própria e na membrana basal com discreta variação entre os grupos sem diferença estatística. Os valores registrados do colágeno IV na camada superficial nas três faixas etárias foram respectivamente, 20,9%, 20,7% e 21,3%; na camada profunda, 17,6%, 19,3% e 20,4%. Os valores do colágeno V na camada superficial nas três faixas etárias foram respectivamente, 38,5%, 36,2% e 31,8%; na camada profunda ... / Abstract: Objective: to study the remodeling of collagen types I, III, IV and V, elastin, fibronectin, laminin and hyaluronic acid using immunohistochemical techniques during the aging process of human larynx. Casuistic and Methods: thirty male human vocal folds were removed during routine autopsy in the Department of Pathology at Botucatu Medical School/UNESP, of these, twenty elderly men (n-10; 60-75 years and n-10, over 75 years) and 10 adult male (30-50 years). The fragments of vocal folds received the immunohistochemical techniques for collagens types I, III, IV and V, elastin, fibronectin, laminin and hyaluronic acid. The readings of the lamina propria were carried out taking into account the accumulation of brownish color of its structures as well as basal membrane, given the standard area in μm2 and the result in percentage of area by the ImageJ software. Results: there was an increase of immunoexpression of collagen types I and III in the larynxes of the elderly (p≤0.05). The values registered in the collagen type I on the superficial layer of the three age groups were respectively, 34.2%, 39.6% and 40.4%, whereas 31.8%, 44.4% and 46.9% in the deep layer. The values of the collagen type III in the superficial layer of the three age groups were respectively, 25.6%, 31.2% and 32.4%; while in the deep layer the values were 23.6%, 24.6% and 29.9%. For the collagen types IV and V, a higher intensity in the immunoexpression of these antibodies in the vascular endothelium of the superficial layer as well as the basal membrane was observed. The registered values for collagen type IV in the superficial layer in the three age groups were respectively 20.9%, 20.7% and 21.3% as well as 17.6%, 19.3% and 20.4% in the deep layer. The values of collagen type V in the superficial layer in the three age groups were respectively 38.5%, 36.2% and 31.8%; and in the deep layer, 36.6%, 35% and 31.3%. There was an increase of immunoexpression of fibronectin ... / Doutor

Meningite é um grupo de doenças infecciosas que constituem um problema global sério à saúde, tendo uma grande relevância social pelas altas taxas de mortalidade que esta doença pode causar. A descrição da progressão da doença, do agente causador e dos sintomas está bem estabelecida, no entanto, as fases iniciais da doença e todo o processo de infecção ainda não é compreendido. O desenvolvimento de diagnósticos laboratoriais mais rápidos e efetivos têm sido promissores. Este trabalho aborda a utilização de anticorpos monoclonais para o diagnóstico por meio da técnica de imunohistoquímica. Os anticorpos monoclonais foram obtidos durante fusões utilizando-se células esplênicas, linfócitos B contra antígenos de N.meningitidis. Os anticorpos foram utilizados em estudo imuno-histoquímico (IHQ) utilizando amostras de tecidos fixados em formol de pacientes com suspeita de meningite ou meningococcemia, no período de 2009 a 2015. Nosso intuito com este projeto é incrementar o diagnóstico histopatológico da meningite meningocócica, sobretudo em situações em que não houve confirmação por técnicas biomoleculares, como o PCR, da presença do agente causador desta doença. Estabelecemos um protocolo para a pesquisa de antígenos de N.meningitidis, conforme padronizado para a reação de IHQ. Nosso trabalho obteve bons resultados, os dois anticorpos monoclonais quando aplicados na reação de IHQ, não apresentaram reatividade cruzada com meningite bacteriana e viral, causadas por outros agentes etiológicos quando utilizamos DAB ou Fast Red como cromógenos. Portanto o uso dos anticorpos em conjunto com a técnica de IHQ se mostrou uma ferramenta de saúde pública auxiliando a vigilância epidemiológica. / Meningitis is a group of infectious diseases that compose a serious global health problem, having a great social relevance by high mortality rates that this disease can cause. The description of the disease progression, the causative agent and the symptoms is well established, however, the early stages of the disease and the infection is not yet understood. The development of faster and effective laboratory diagnoses have been promising. This paper discusses the use of monoclonal antibodies for diagnosis by means of the technique of Immunohistochemistry. Monoclonal antibodies were obtained during mergers using splenic cells, B lymphocytes against antigens of N. meningitidis. The antibodies were used in studies immunohistochemical (IHC) using formalin-fixed tissue samples from patients with suspected meningitis or meningococcemia, during the period from 2009 to 2015. Our aim with this project was to increase the histopathological diagnosis of meningococcal meningitis, especially in situations where there has been no confirmation by biomolecular techniques, such as PCR, of the presence of the causative agent of this disease. We have established a protocol for detecting antigens of N. meningitidis, as standardized to the IHC. The result obtained was very promising, the two monoclonal antibodies obtained good results. There was no cross-reactivity with bacterial and viral meningitis, caused by other etiological agents when using DAB or Fast Red as chromogens. Therefore the use of antibodies in conjunction with IHQ technique proved to be a public health tool aiding the epidemiological surveillance.

Orientador: Debora Aparecida Pires de Campos Zuccari / Banca: Ângelo Gustavo Zucca Matthes / Banca: Ana Elizabete Silva / Resumo: INTRODUÇÃO: A alta mortalidade do câncer de mama (CM) está relacionada com a ocorrência de metástase, processo que depende da angiogênese. A detecção de microRNAs circulantes por biópsia líquida, com destaque para o miR-210 e miR-152 no CM, é de grande importância para a determinação do diagnóstico precoce e prognóstico e, assim, podem contribuir para diminuir a mortalidade por CM. OBJETIVO: Identificar e validar microRNAs como biomarcadores circulantes não invasivos no diagnóstico e prognóstico de pacientes com CM e confirmar a atuação deles na angiogênese. MATERIAL E MÉTODOS: Amostras de fragmentos tumorais e de plasma foram coletados de 30 mulheres com CM, cinco com alterações benignas da mama e cinco de mulheres controles. A análise da expressão dos microRNAs foi realizada por RT-qPCR e a análise da expressão das proteínas-alvo por imunohistoquímica. Valores de p<0,05 foram considerados significantes. RESULTADOS: Como esperado, houve aumento da expressão do oncomiR-210 e diminuição do supressor miR152 nos fragmentos tumorais de CM. Já nas amostras de plasma de CM, foi verificado aumento de ambos os miRNAs. Por fim, constatou-se que as proteínas HIF-1α, IGF-1R e VEGF apresentaram aumento da expressão em CM, enquanto a proteína VHL apresentou diminuição. CONCLUSÃO: Em conclusão, foi observado aumento de expressão do miR-210 e diminuição do supressor tumoral miR-152 em fragmentos de CM validadas pela expressão de suas proteínas-alvo envolvidas na angiogênese. Ainda, o... / Abstract: BACKGROUND: The high mortality of breast cancer (BC) is related to the occurrence of metastasis, a process that depends on angiogenesis. The detection of circulating microRNAs by liquid biopsy, as a highlight for miR210 and miR-152 in BC, is of great importance for the determination of early diagnosis and prognosis and, thus, may contribute to decrease BC mortality. OBJECTIVE: To identify and validate microRNAs as noninvasive circulating biomarkers in the diagnosis and prognosis of BC patients and to confirm their performance in angiogenesis. MATERIALS AND METHODS: Tumor fragments and plasma samples were collected from 30 women with BC, five with benign breast conditions and five of women controls. Expression of the microRNAs was performed by RT-qPCR and the analysis of target protein expression by immunohistochemistry. Values of p <0.05 were considered significant. RESULTS: As expected, there was an increase in oncomiR-210 expression and a decrease in miR-152 suppressor in BC tumor fragments. In the BC plasma samples, both miRNAs were increased. Finally, it was found that the HIF-1α, IGF-1R and VEGF proteins showed increased BC expression, whereas the VHL protein showed decrease. CONCLUSION: In conclusion, increase expression of miR-210 and decrease of miR-152 tumor suppressor in BC fragments was observed, validated by the expression of their target proteins involved in angiogenesis. Furthermore, the increased expression of both miRNAs by liquid biopsy of women with BC is ... / Mestre

Orientador: Eliana Aguiar Petri Nahas / Resumo: Objetivo: Avaliar a associação entre a síndrome metabólica (SM) e o perfil imuno-histoquímico (IHQ) do câncer de mama em mulheres na pós-menopausa. Métodos: Realizou-se estudo clínico de corte transversal com 189 mulheres, idade entre 45-75 anos, atendidas em Hospital Universitário. Foram incluídas mulheres em amenorreia >12 meses e idade ≥ 45 anos, com diagnóstico recente de câncer de mama, sem tratamento oncológico prévio. Por meio de entrevista foram coletados dados clínicos, antropométricos (peso, altura e circunferência da cintura) e bioquímicos (colesterol total, HDL-c, LDL-c, triglicerídeos (TG) e glicose). A partir do anatomopatológico e da imuno-histoquímica foram coletados dados sobre o câncer de mama (histopatológico, grau, estádio do tumor, linfonodos) e o status hormonal (receptor de estrogênio, RE; receptor de progesterona, RP; receptor do fator de crescimento epidérmico humano-2, HER-2) e a atividade proliferativa epitelial (Ki67). Por convenção da IHQ, os tumores foram agrupados em cinco subtipos: Luminal A (RE +, RP +, HER-2 - e Ki-67 <14%); Luminal B HER-2 - (RE+, RP+ ou -, HER-2 - e Ki-67 ≥14%); Luminal B HER-2 + (RE+, RP+ ou -, HER-2 + e qualquer Ki-67); Não-luminal HER-2 (RE -, RP -, HER2 + e qualquer Ki-67) e Triplo-negativo (RE-, RP-, HER2- e qualquer Ki-67). Foram consideradas com SM as mulheres que apresentaram três ou mais critérios diagnósticos: circunferência da cintura (CC) > 88 cm; TG  150 mg/dL; HDL colesterol < 50 mg/dL; pressão arterial 130/... (Resumo completo, clicar acesso eletrônico abaixo) / Abstract: Objective: To evaluate the association between metabolic syndrome (MetS) and the breast cancer immunohistochemical profile in postmenopausal women. Methods: An analytical cross sectional study was conducted with 189 women, aged 45-75 years, attended at University Hospital. Women with newly diagnosed breast cancer, no previous cancer treatment, in amenorrhea> 12 months and age ≥ 45 years, were included. Clinical, anthropometric and biochemical (total cholesterol, HDL, LDL, triglycerides (TG) and glucose) data were collected. Data on breast cancer (histopathology, grade, tumor stage, lymph nodes), hormone status (estrogen receptor, ER, progesterone receptor, PR, human epidermal growth factor receptor-2, HER2) and epithelial proliferative activity (Ki67) were collected. Tumors were grouped into five subtypes: Luminal A (ER +, PR +, HER-2 -, Ki-67 <14%); Luminal B HER-2 negative (ER+, PP+ or -, HER-2 -, Ki-67 ≥14%); Luminal B HER-2 positive (ER+, PR+ or -, HER-2 +, any Ki-67); Non-luminal HER-2 (ER -, PR -, HER-2 +, any Ki-67) and Triple-negative (ER-, PR-, HER-2-, any Ki-67). Women with three or more of the following criteria were diagnosed with metabolic syndrome (MetS): waist circumference ≥ 88 cm; triglycerides ≥ 150 mg/dL; HDL cholesterol < 50 mg/dL; blood pressure≥ 130/85 mmHg; glucose≥ 100 mg/dL. For statistical analysis, the t-student test, the Gamma Distribution (asymmetric variables), the chi-square test and the logistic regression (OR-odds ratio) were used. Results: Am... (Complete abstract click electronic access below) / Mestre

Orientador: Maria Cecília Rui Luvizotto / Coorientador: Heitor Flávio Ferrari / Banca: Daniela Bernadete Rozza / Banca: Livia Castanhas Breganó / Resumo: O tumor mamário canino (TMC) é a neoplasia que mais comumente acomete cadelas idosas não castradas. Na análise histopatológica, 41 a 53% dos TMCs são classificados como malignos. Os receptores de estrógeno α (REα) são receptores nucleares importantes na transcrição de fatores e transdução de sinais hormonais, considerados um dos fatores prognósticos para o tumor mamário humano, participam de forma ativa na carcinogênese mamária. Durante o desenvolvimento do TMC, macrófagos teciduais compõe o microambiente tumoral, com a função de estimular a angiogênese, aumentando a possibilidade de metástases, sendo fundamental para o prognóstico de neoplasia mamária na cadelae na mulher. O objetivo deste trabalho foi pesquisara expressão e a provável correlação de REα com a distribuição de macrófagos tumorais (TAMs) em TMCs por meio de imunohistoquímica. Foram analisados 40 tumores mamários malignos, classificados histologicamente em quatro grupos distintos e um grupo controle composto por 08 glândulas mamárias caninas sem alteração anatomopatológica e seus respectivos linfonodos regionais. Os resultados mostraram que a imunomarcação positiva ao REα variou de um a três casos dentre os grupos histológicos estudados, havendo nestes, menor número de metástase para linfonodo. A positividade para os TAMs mostrou associação com o tipo histológico, variando de moderada a acentuada nos carcinomas mamários de alto grau histológico que apresentaram necrose, invasão linfática e formação tubular. Não ... (Resumo completo, clicar acesso eletrônico abaixo) / Abstract: The canine mammary tumor (CMT) is the neoplasia that most commonly affects uncastrated elderly female dogs. On histopathological analysis, 41 to 53% of CMTs are classified as malignant. Estrogen receptors α (REα) are important nuclear receptors for transcription factors and signal transduction of hormones, considered prognosis factor for breast cancer in human, and recognized as actively involved in breast carcinogenesis. During the development of mammary cancer in canine species, macrophages composes the tumor microenvironment, stimulating angiogenesis, facilitating the local dissemination of neoplastic cells and increasing the possibility of metastasis, being fundamental for mammary neoplasia prognosis in dogs and women. This study aimed to evaluate the expression and the probable correlation of REα with the distribution of tumor associated macrophages (TAMs) in CMTs by immunohistochemistry. Forty CMTs were analyzed histologically in four distinct groups and a control group composed of eight canine mammary glands without alteration anatomopathological and their respective regional lymph nodes. The results showed that the REα positive immunostaining varied from one to three cases among the histological groups studied, and there was less lymph node metastasis. The positivity for TAMs showed a positive correlation with the histological type, ranging from moderate to severe in mammary carcinomas of high histological grade that presented necrosis, lymphatic invasion and tubular ... (Complete abstract click electronic access below) / Mestre