Introdução: A osteoartrite (OA) é uma doença que comumente afeta os seres humanos, sendo caracterizada como um processo degenerativo que abrange as articulações. A OA afeta a cartilagem articular, osso subcondral, ligamentos, cápsula articular, membrana sinovial e músculos periarticulares. O tratamento para esta desordem se baseia em terapia farmacológica, não farmacológica e cirúrgica, isoladamente ou em combinação, a fim de maximizar os efeitos benéficos e minimizar os efeitos indesejáveis. O presente estudo tem como objetivo avaliar e comparar os efeitos isolados e combinados da terapia farmacológica com anti-inflamatório não-esteroidal (AINE) de uso tópico, aos efeitos da atividade física, e por fim, aos efeitos da laserterapia de baixa potência (LBP), em um modelo experimental de OA. Materiais e Métodos: A OA foi induzida por injeção de papaína intra-articular no joelho direito de ratos Wistar machos. Após 21 dias os animais começaram a ser tratados com AINE de aplicação tópica e/ou com atividade física (natação) e/ou LBP. Os tratamentos foram realizados 03 vezes por semana, durante 08 semanas, perfazendo um total de 24 sessões de terapia. Foram realizadas análises bioquímicas e morfológicas da articulação do joelho, compreendendo análise histológica, contagem total de células, atividade de mieloperoxidase (MPO), RT-PCR (COX-1, COX-2, IL-1β, IL-6, IL-10, TNF-α, MMP-3 e MMP-13), análise de citocinas pelo método de ELISA (TNF-α, IL-1β, IL-6 e IL-10), PGE2 e por fim, a análise de Western-Blot (COX-1 e COX-2). Resultados, discussão e conclusão: Os resultados do presente estudo indicam que o tratamento com laserterapia de baixa potência é o mais eficiente em diminuir os danos à articulação e modular o processo inflamatório induzido pela injeção de papaína na articulação do joelho de ratos. / Introduction: Osteoarthritis (OA) is a disease that commonly affects humans and it is characterized as a degenerative process that reachs joints. OA affects the articular cartilage, subchondral bone, ligaments, joint capsule, synovial membrane and periarticular muscles. The treatment for this disorder is based on pharmacological therapy, non-pharmacological therapy and surgery, alone or in combination, in order to maximize the beneficial effects and minimize side effects. This research project aims to evaluate and compare the isolated and combined effects of pharmacological therapy with non-steroidal anti-inflammatory drug (NSAID) of topical use, to effects of physical activity and finally to effects of low-level laser therapy (LLLT) in an experimental model of osteoarthritis. Materials and Methods: OA was induced by intra-articular injection of papain in the right knee of male Wistar rats. After 21 days animals started to be treated with topical NSAID and/or physical activity (swimming) and/or LBP. Treatments was performed 3 times per week for 8 weeks, a total of 24 therapy sessions. It was performed morphological and biochemical analysis of the knee joint, including histology, counting of total cells, activity of myeloperoxidase (MPO), RT-PCR (COX-1, COX-2, IL-1β, IL-6, IL-10, TNF-α, MMP-3 and MMP-13) cytokines analysis by ELISA (TNF-α, IL-1β, IL-6 and IL-10), PGE2, and finally Western- Blot analysis (COX-1 and COX-2). Results, discussion and conclusion: The results of this project indicate that treatment with low-level laser therapy is more efficient in order to decrease damage in joint and to modulate inflammatory process induced by papain injection in rats knee join.

O reparo ósseo é regulado por fases: inflamatória, proliferativa e remodelação, sendo importante para a qualidade do osso. Terapias têm sido estudadas para ajudar neste processo, como Plasma Rico em Fibrina (PRF) e terapia a laser (LBP). No entanto os estudos são controversos. O objetivo deste estudo foi analisar o impacto da LBP com ou sem PRF no reparo após o defeito ósseo crítico em tíbia de ratos. Os animais foram divididos em grupos: hígido, defeito sem tratamento, defeito tratado com 3 doses de LBP, PRF sozinho e associado com LBP. A fim de analisar o processo de reparo, a tíbia foi removida após 1,3,7,14,21,30 e 60 dias após o procedimento, sem qualquer tipo de tratamento para análise histológica e bioquímica do curso de temporal. Após determinação do tempo ideal, analisamos os diferentes tratamentos. Os resultados mostram que o tempo de curso do procedimento de defeito ósseo induz um aumento de IL - 1b e de fosfatase alcalina, sem alterações no TNF-a e IL-10 e diminuição de IL-6. Tratamento LBP induziu a expressão de IL10 e inibir IL-1 b, TNF-a, IL-6 e fosfatase alcalina. O tratamento associado reduziu a fosfatase alcalina, TNF-a, IL-6 e aumento de IL-10. Conclui-se que o tratamento combinado não apresentara melhora significativa no reparo ósseo. / The bone repair is regulated by phases: inflammatory, proliferative and remodeling and is important for bone quality. Therapies have been studied to help in this process, as Platelet Rich Fibrin (PRF) and laser therapy (LLLT). However the studies are controversial. The aim of this study was to analyze the impact of LLLT with or without PRF repair after the critical bone defects in tibias. The animals were divided into groups: healthy male without blemish treatment, defect treated with 3 doses of LBP, PRF alone and associated with LLLT. In order to analyze the repair process , the tibia was removed after 1,3,7,14,21,30 and 60 days after the procedure, without any kind of treatment for histological and biochemical analysis of the course of time. After determining the optimal time, we analyze the different treatments. The results show that the time course of the procedure of defect induces an increase of IL - 1b and alkaline phosphatase, without changes in TNF- a and IL-10 and reduced IL-6. LBP treatment induced the expression of IL -10 and inhibiting IL-1 b, TNF- a, IL-6 and alkaline phosphatase. The combined treatment decreased the alkaline phosphatase, TNF- a , IL-6 and increased IL-10. We conclude that combined treatment had not produced significant improvement in bone repair.

A cirurgia ortognática é o procedimento cirúrgico que visa a correção das deformidades dentofaciais esqueléticas e pode levar a diminuição dos movimentos mandibulares, dor e edema. Uma possibilidade de tratamento para essas consequências é a fototerapia com laser de baixa potência. O objetivo deste estudo foi realizar uma avaliação longitudinal dos movimentos mandibulares, dor e edema em pacientes submetidos à cirurgia ortognática bimaxilar, após fototerapia com laser de baixa potência (LLLT). Foram avaliados 30 pacientes, divididos em grupo laser (n=15) e grupo controle (n=15) de modo aleatório. O grupo laser recebeu laserterapia pós-operatória por 19 sessões. O grupo controle recebeu placebo de laserterapia. Os grupos foram comparados quanto aos movimentos mandibulares - abertura máxima, lateralidade e protrusão máxima, dor - escala visual analógica, edema - medidas entre pontos cefalométricos, em um período de 60 dias após a cirurgia. Foram aplicados testes estatísticos para comparação entre os grupos (p<0,05). Houve diferença significante para abertura máxima, lateralidade e protrusão máxima nos períodos de 14 a 60 dias para a maioria das comparações. Foi verificada diferença significante para dor pós-operatória na maioria das comparações, nos períodos 24 h a 5 semanas, sendo que grupo laser atingiu o valor 0, 2 semanas antes. Ocorreu redução do edema, sem diferença estatisticamente significante para maioria das mensurações. Com base neste estudo, foi possível concluir que após a fototerapia com laser de baixa potência (LLLT) houve um ganho nos valores de todos os movimentos mandibulares, não houve diferença significante para ocorrência de edema e houve uma diminuição da ocorrência de dor. / The orthognathic surgery is the surgical procedure that aims to correct skeletal dentofacial deformities and can lead to decrease in jaw movements, pain and edema. A possible treatment for these consequences is the low-power laser phototherapy. The aim of this study was a longitudinal evaluation of jaw movements, pain and edema in patients undergoing orthognathic surgery bimaxillary after lowlevel laser light therapy (LLLT). We evaluated 30 patients divided into laser group (n=15) and control group (n=15) randomly. The laser group received postoperative laser therapy for 19 sessions. The control group received laser therapy placebo. The groups were compared regarding jaw movements - maximum aperture, laterality and maximum protrusion, pain - visual analog scale, edema - measured between cephalometric points in a period of 60 days after surgery. Statistical tests were applied to compare the groups (p <0.05). There was a significant difference for maximum aperture, laterality and maximum protrusion in periods of 14 to 60 days for most comparisons. There was a significant difference in postoperative pain in most comparisons, in the periods 24 h to 5 weeks, and laser group reached the value 0 a 2 weeks before. There was a reduction of edema, with no statistically significant difference for most measurements. Based on this study, it was concluded that after phototherapy with low power laser (LLLT) there was a gain in the amount of all mandibular movements, there was no significant difference in the occurrence of edema and there was a decrease in the occurrence of pain.

BACKGROUND: Low-level phototherapy is advocated to increase energetic metabolism, muscle performance, protect skeletal muscle from injuries due to energetic imbalance and accelerate muscle recovery following exercise. Nevertheless, results from individual researches do not agree on its efficacy. OBJECTIVES: To determine the efficacy of low-level phototherapy (i.e. Light-Emitting Diode therapy [LEDtherapy] or Light Amplification by Stimulated Emission of Radiation therapy [LASERtherapy]) on exercise capacity and skeletal muscle protection and recovery in people undergoing an exercise protocol. METHODS: We performed two systematic reviews with meta-analyses based on Cochrane Collaboration and PRISMA statement. Trials were collected from Cochrane Central Register of Controlled Trials, MEDLINE, EMBASE, SciELO, PEDro and LILACS up to May 2014 or February 2015. The references lists from selected manuscripts were screened for further references of interest. We included randomized controlled trials and crossover studies in which study participants were allocated to receive either low-level phototherapy or placebo treatment. Outcomes of interest were pain, creatine kinase activity, lactate concentration, lactate dehydrogenase activity, edema, range of movement, strength, number of repetitions, time to exhaustion, peak torque and muscle power. RESULTS: In the first review we identified 15 studies involving 317 participants and in the second review we identified 16 studies involving 297 participants. Compared to the placebo group, pre-exercise LASERtherapy improved the number of repetitions (mean difference [MD] = 3.52 repetitions; 95% confidence interval [CI] = 1.24 repetitions, 5.80 repetitions; P = 0.002), delayed the time to exhaustion (MD = 3.23 s; 95% CI = 0.24 s, 6.22 s; P = 0.03), reduced the lactate levels (MD = -0.41 mmol/L; 95% CI = -1.34 mmol/L, -0.17 mmol/L; P = 0.0007) and reduced the creatine kinase levels (standardized mean difference = -0.66; 95% CI = -1.30, -0.02; P = 0.04). Post-exercise LEDtherapy reduced pain measured by visual analogue scale (MD = -2.04 mm; 95% CI = -4.03 mm, -0.06 mm; P = 0.04). CONCLUSION: There is moderate evidence that low-level phototherapy improves exercise capacity. It is not clear if low-level phototherapy has beneficial effects on skeletal muscle injury and pain. / CONTEXTO: A fototerapia de baixa intensidade é indicada para melhorar o metabolismo energético e o desempenho muscular, proteger a musculatura de lesões provenientes da depleção energética e favorecer a recuperação muscular após o exercício. No entanto, resultados de investigações clínicas não se mostram concordantes em relação à sua eficácia. OBJETIVOS: Determinar os efeitos da fototerapia de baixa intensidade com Diodos Emissores de Luz (LEDterapia) ou Amplificação da Luz por Emissão Estimulada de Radiação (Light Amplification by Stimulated Emission of Radiation, LASERterapia) na capacidade de exercício, proteção e recuperação musculares em pessoas submetidas ao exercício. MÉTODO: Foram realizadas duas revisões sistemáticas com metanálise baseadas nas recomendações da Colaboração Cochrane e PRISMA statement. Os estudos foram provenientes da Cochrane Central Register of Controlled Trials, MEDLINE, EMBASE, SciELO, PEDro e LILACS até maio de 2014 ou fevereiro de 2015, além da busca manual nas referências dos artigos selecionados. Foram incluídos ensaios clínicos controlados aleatórios e estudos cruzados nos quais os participantes foram alocados para receber fototerapia de baixa intensidade ou tratamento placebo. Os desfechos avaliados foram dor, atividade de creatina quinase, concentração de lactato, atividade de lactato desidrogenase, edema, amplitude de movimento, força, número de repetições, tempo até a exaustão, pico de torque e potência muscular. RESULTADOS: A primeira revisão sistemática foi composta por 15 estudos, totalizando 317 participantes, e a segunda revisão sistemática foi composta por 16 estudos com um total de 297 participantes. Comparado ao placebo, a LASERterapia antes do exercício promoveu um aumento do número de repetições (diferença média [mean difference, MD]= 3,52 repetições; intervalo de confiança (IC) 95% = 1,24 repetições, 5,80 repetições; P = 0,002), aumento do tempo até a exaustão (MD = 3,23 s; IC 95% = 0,24 s, 6,22 s; P = 0,03), redução dos níveis séricos de lactato (MD = -0,41 mmol/L; IC 95% = -1,34 mmol/L, -0,17 mmol/L; P = 0,0007) e redução dos níveis séricos de creatina quinase (diferença média padronizada = -0,66; IC 95% = -1,30, -0,02; P = 0,04). A LEDterapia aplicada após o exercício resultou menos dor avaliada pela escala visual analógica (MD = -2,04 mm; 95% CI = -4,03 mm, -0,06 mm; P = 0,04). CONCLUSÃO: Há moderada evidência de que a fototerapia de baixa intensidade aumenta a capacidade de exercício. Não é possível afirmar que a fototerapia apresenta efeitos positivos na lesão muscular e na dor secundários ao exercício.

Esse estudo avaliou o laser de baixa intensidade (LBI-15J/cm2, 780nm) e a proteína do látex (P1; 0,1%) no esmagamento (15Kgf, axonotmese) do nervo isquiático de ratos Wistar. Grupos: GI-controle; GII-exposto; GIII-lesado; GIV-LBI; GV-P1; GVI-LBI e P1. Após 4 e 8 semanas realizou-se as análises morfológica, morfométrica, imunohistoquímica (VEGF e NGF) e ultraestrutural. Houve melhora com os tratamentos propostos. Após 4 semanas não foi possível eleger o melhor tratamento; após 8 semanas os animais que receberam a P1 associada ou não ao LBI apresentaram mais capilares e fibras nervosas mais organizadas. Após 4 semanas as expressões do NGF e VEGF estavam elevadas nos GIII, GIV e GVI e após 8 semanas elas estavam diminuídas. As características dos grupos lesados eram mais próximos dos controles após 8 semanas, revelando tempo-dependência; ainda nesse período a P1 apresentou melhor recuperação, pois o LBI não alcançou os mesmos resultados, e a associação dos tratamentos não potencializado a recuperação, sugerindo que a melhora observada nesse caso se refere à P1. / This study evaluated the low intensity laser (LBI-15J/cm2, 780nm) and latex protein (P1, 0.1%) in the crush (15 kgf, axonotmesis) of the sciatic nerve in rats. Groups: GIcontrol; GIIexposed; GIII-injured; GIV-LBI; GV-P1; GVI-LBI and P1. After 4 and 8 weeks were performed morphological, morphometric, immunohistochemical (VEGF and NGF) and ultrastructural analysis. There was improvement with the proposed treatments. After 4 weeks has not been possible to choose the best treatment, after 8 weeks, the animals that received the P1 associated or not to LBI had more capillaries and more organized nerve fibers. After 4 weeks the expressions of NGF and VEGF were higher in GIII, GIV and GVI and after 8 weeks they were decreased. The characteristics of the injured groups were closer to control after 8 weeks, revealing time-dependence, even in this period P1 showed better recovery because the LBI did not achieve the same results, and the association of treatments did not enhanced this recovery, suggesting that the improvement observed in this case refers to P1.

Submitted by Luciana Ferreira (lucgeral@gmail.com) on 2015-10-28T11:00:36Z No. of bitstreams: 2 Dissertação - Aline do Carmo Gonçalves - 2015.pdf: 1858086 bytes, checksum: 7231813c18a0ebd7f161cec329ca3e86 (MD5) license_rdf: 23148 bytes, checksum: 9da0b6dfac957114c6a7714714b86306 (MD5) / Approved for entry into archive by Luciana Ferreira (lucgeral@gmail.com) on 2015-10-28T11:03:17Z (GMT) No. of bitstreams: 2 Dissertação - Aline do Carmo Gonçalves - 2015.pdf: 1858086 bytes, checksum: 7231813c18a0ebd7f161cec329ca3e86 (MD5) license_rdf: 23148 bytes, checksum: 9da0b6dfac957114c6a7714714b86306 (MD5) / Made available in DSpace on 2015-10-28T11:03:17Z (GMT). No. of bitstreams: 2 Dissertação - Aline do Carmo Gonçalves - 2015.pdf: 1858086 bytes, checksum: 7231813c18a0ebd7f161cec329ca3e86 (MD5) license_rdf: 23148 bytes, checksum: 9da0b6dfac957114c6a7714714b86306 (MD5) Previous issue date: 2015-05-22 / Coordenação de Aperfeiçoamento de Pessoal de Nível Superior - CAPES / Leishmaniasis is a neglected disease, caused by protozoa of the genus Leishmania, which affects organs (visceral leishmaniasis), skin and mucous (American tegumentary leishmaniasis, ATL). The treatment of ATL is effective, however causes several collateral effects, and the absence treatment or incomplete treatment is associated with relapse. Alternative treatments should, therefore, be explored, and low potency lasers indicate the possibility of a noninvasive therapy without collateral effects and that can act together with conventional therapy. LLLT (Low-Level Laser Therapy) was applied on experimental mice BALB/c lesions, caused by Leishmania (Leishmania) amazonensis (MAB-6) in order to evaluate the healing time. The cytokines profile expression was evaluated by real-time PCR and ELISA, and Immunohistochemistry was performed to quantify M2 macrophages using MP-23 antibody. In the lesions treated with laser, it was observed a lower healing time when compared with the group of animals with untreated injuries. Moreover, it was observed an increased expression of regulatory and anti-inflammatory cytokines in the inflammatory infiltrate. We evaluated the effect of laser on macrophages RAW264.7, differentiated or not for the M1 or M2 profile, and infected in vitro. Also, we evaluated the phagocytic activity by quantification of the infected macrophages and the number of amastigotes per infected macrophage at 4 and 24 hours after infection; and nitric oxide (NO) production. The laser treatment increased the NO production and phagocytic activity of macrophages in different profiles, including those macrophages that were not differentiated before the infection. The 660nm laser stimulates macrophages and accelerates the healing of experimental injuries caused by L. amazonensis. Depending on the stage of the infection that the treatment is initiated, the laser may affect the inflammatory phase for the elimination of the parasite or stimulate the proliferative phase regulators and anti-inflammatory cytokines. / A leishmaniose é uma doença negligenciada, causada por protozoários do gênero Leishmania, que acomete órgãos (leishmaniose viceral), pele e mucosas (leishmaniose tegumentar americana, LTA). O tratamento da LTA é eficaz, contudo causa inúmeros efeitos colaterais, e o não tratamento ou o tratamento incompleto está associado com casos de recidivas. Tratamentos alternativos, portanto, devem ser explorados, e os laseres de baixa potência apontam para a possibilidade de uma terapia não invasiva, sem efeitos colaterais e que podem atuar em conjunto com a terapia convencional. A LLLT (Low-Level Laser Therapy) foi aplicada sobre lesões experimentais de camundongos BALB/c, causadas por Leishmania (leishmania) amazonensis (MAB-6) e avaliado o tempo de cicatrização, por PCR em tempo real e ELISA o perfil de expressão de citocinas, e por Imunoistoquímica foi feita a quantificação de macrófagos M2 pelo anticorpo MP-23. Nas lesões tratadas com laser o tempo de cicatrização foi menor que no grupo de animais com lesões não tratadas. Além disso, foi constatada uma maior expressão de citocinas regulatórias e antiinflamatórias no infiltrado inflamatório. Avaliamos o efeito do laser sobre macrófagos RAW264.7 diferenciados ou não para o perfil M1 ou M2, e infectados in vitro. Foram avaliados os quesitos de atividade fagocítica através da quantificação de macrófagos infectados e número de amastigotas por macrófagos infectados às 4 e 24 horas após a infecção; e produção de óxido nítrico (NO). O tratamento com o laser aumentou a produção de NO e a atividade fagocítica nos diferentes perfis de macrófagos, inclusive naqueles macrófagos que não foram diferenciados antes da infecção. O laser de 660nm estimula os macrófagos e acelera a cicatrização. Dependendo da fase da infecção em que se inicia o tratamento o laser pode influenciar a fase inflamatória, para a eliminação do parasito, ou na fase proliferativa estimulando citocinas reguladoras e antiinflamatórias.. Palavras-chave: Leishmaniose tegumentar americana; Terapia com laser de baixa potência; Macrófagos; Cicatrização; Citocinas.

A terapia laser de baixa intensidade (TLBI) vem sendo utilizada no tratamento de feridas devido aos seus efeitos cicatrizantes. No entanto, espécies bacterianas podem ser detectadas em úlceras cutâneas crônicas, não estando claro quais os melhores parâmetros a serem utilizados para se obter maior eficácia da inibição das bactérias que podem vir a colonizar essas feridas, já que são escassos os estudos que associam diferentes linhagens de bactérias, com diferentes comprimentos de onda e fluências da TLBI. O objetivo do estudo foi analisar a influência da TLBI no crescimento bacteriano in vitro. Para realização do estudo foram utilizadas linhagens da S. aureus (ATCC 25923), P. aeruginosa (ATCC 27853) e E. coli (ATCC 25922), as quais foram repicadas e incubadas por um período de 24 horas, à temperatura de 37º C. Após o crescimento bacteriano, as células foram suspensas em solução fisiológica com turvação de 0,5 na escala de McFarland (1,5 X 108 UFC/mL-1). Em seguida foram realizadas cinco diluições seriadas até alcançar a concentração de 1,5 X 103 UFC/mL-1. Uma alíquota de 300 L desta suspenção foi transferida para poços da placa de microtitulação e então expostas a irradiação. A seguir uma fração de 100 L foi espalhada sobre a superfície do meio de cultura sólido Mueller-Hinton em placas de Petri (90 x 15 mm), incubada a 37° C e após 24, 48 e 72 horas foram realizadas às contagens de UFC (unidades formadoras de colônias). A irradiação laser (laserpulse - Ibramed® Amparo, SP Brasil) foi realizada nos comprimentos de onda de 450, 660, 830 e 904 nm, nas fluências de 0 (controle), 3, 6, 12, 18 e 24 J/cm2, aplicado de forma direta e perpendicular a placa, a uma distância de 2 mm, sobre uma área de 1 cm2. Todos os dados foram submetidos ao teste de normalidade Shapiro-Wilk, sendo os dados referentes a contagem das UFC submetidos ao teste de Kruskal Wallis e post hoc de Dunn com nível de significância de 5%. A irradiação laser inibiu o crescimento da S. aureus em todos os comprimentos de ondas testados, nas fluências superiores a 12 J/cm², com maiores taxas de inibição em 24 J/cm2 (79,6%). Ao analisar o comportamento da taxa de inibição bacteriana, pode-se observar uma tendência similar entre todos os comprimentos de onda. No entanto, para a P. aeruginosa a TLBI foi capaz de inibir o crescimento em todos os comprimentos de onda, somente na fluência de 24 J/cm², não sendo possível identificar um padrão de inibição. A E. coli apresentou um padrão de inibição nos comprimentos de onda de 450 e 830 nm. Para os comprimentos de onda de 660 e 904 nm pode-se identificar inibição somente em 12 e 18 J/cm2, respectivamente. Assim, pode-se afirmar que a TLBI foi capaz de inibir o crescimento bacteriano em todos os comprimentos de onda, não apresentando o mesmo padrão de inibição entre as espécies bacterianas, comprimento de onda e fluências testadas, se mantendo por até 72 horas após a irradiação. / Low level laser therapy (LLLT) has been used in treatment of wounds due your healing effects. Some bacteria\'s species can be detected in almost all chronic ulcers, being not clear which are the best parameters to more effective inhibition of bacteria that may colonize these wounds. There are just a few studies that relate different bacteria types with different wavelength and different fluence of LLLT. Thus, the study objective is analyze the LLLT effect of bacterial growth in vitro. In this study were used S. aureus (ATCC 25923), P. aeruginosa (ATCC 27853) and E. coli (ATCC 25922), which were transplanted and incubated for 24 hours at a temperature of 37° C. After bacterial growth, the cells were suspended in saline with a turbidity of 0.5 McFarland scale (1.5 X 108 CFU/mL-1). Next, five serial dilutions were performed to achieve a concentration of 1.5 X 103 CFU/mL-1. An aliquot 300 L of this suspension was transferred to wells of a microtiter plate and then exposed to irradiation. Then 100 L of a fraction was spread on the surface of solid culture medium Mueller-Hinton in Petri dishes (90 x 15 mm) plates, incubated at 37° C and after 24, 48 and 72 hours to CFU counts were made (colony forming units). The laser irradiation (Laserpulse - Ibramed® - Amparo, SP - Brazil) was performed at wavelengths of 450, 660, 830 and 904 nm, the fluence of 0 (control), 3, 6, 12, 18 and 24 J/cm2 and applied directly perpendicular to the plate at a distance of 2 mm over an area of 1 cm2. All data were subjected to test normality the Shapiro-Wilk test, and the data for CFU counts submitted to test the Kruskal Wallis test and post hoc Dunn\'s test with a significance level of 5%. The laser irradiation inhibited the growth of S. aureus in all wavelengths tested in the higher fluences to 12 J/cm2, with higher rates of 24 J/cm2 inhibition (79.6%). In analyzing the behavior of the rate of bacterial inhibition, one can observe a similar trend among all wavelengths. However, for the LLLT P. aeruginosa was able to inhibit the growth of all wavelengths, the only fluence 24 J/cm2, it is not possible to identify a standard of inhibition. E. coli showed a standard of inhibition at a wavelength of 450 and 830 nm. For the wavelengths of 660 and 904 nm can be identified only inhibition at 12 and 18 J/cm2, respectively. Thus, it can be stated that LLLT was able to inhibit bacterial growth in all wavelengths, not presenting the same standard inhibition among bacterial species, the wavelength and fluence tested by keeping for up to 72 hours after irradiation.

Recursos fisioterapêuticos tem sido utilizados no tratamento de úlceras de perna como a terapia a laser de baixa intensidade. A contaminação bacteriana dessas úlceras é freqüente constituindo-se numa importante complicação da cicatrização. Assim, busca-se investigar os efeitos dessa terapêutica frente às culturas de diferentes espécies bacterianas in vitro e in vivo. Utilizou-se aparelho laser modelo Theralase III-DMC (685 e 830 nm) e diferentes doses (1,2 e 4J). Foram utilizados bactérias, S. aureus ATCC 6538 (Gram+) e P. aeruginosa ATCC 15442 (Gram-), reativadas em B.H.I.Agar inclinado a 37 graus C/24h. Após as bactérias foram re-suspensas em B.H.I. caldo/37 graus Celsius/20h, centrifugadas 3x/15min/4.500rpm, seguida de lavagens e homogeneização. A suspensão foi diluída em placas de cultura celular de 96 poços, submetidas a diluições seriadas sucessivas, encontrando as diluições ideais de \'10 POT.-12\' bactérias/ml para S. aureus e \'10 POT.-15\' bactérias/ml para P. aeruginosa. As soluções bacterianas foram irradiadas com laser de diferentes comprimentos de onda (685 e 830 nm) e diferentes doses (1, 2 e 4J). Dez micro litros da solução bacteriana do último poço foram semeados em placa de petri nos meios Mc Conkey Agar e B.H.I.-Agar bactérias Gram positiva e negativa respectivamente para posterior contagem das unidades formadoras de colônia (U.F.C.´s.). Foram semeadas 10 placas para cada dose de diferente comprimento de onda e espécie bacteriana diferente e 10 placas para o grupo controle, ou seja, sem irradiação laser. Nos estudos in vivo, foram utilizados coelhos, machos, neozelandeses pesando aproximadamente 1,5 Kg. A anestesia foi feita com 1,5 ml/animal de ketamina 100 mg e xylzina 1,0 ml/animal. Foram feitas 6 feridas de 6 mm de diâmentro (punch) em cada orelha, constituindo-se cada animal, um grupo (n=12). As feridas foram previamente contaminadas com S. aureus (G+) e P. aeruginosa (G-). Os animais foram divididos em Grupo 1 (laser 685 nm + G+), Grupo 2 (laser 830 nm + G+), Grupo 3 (laser 685 nm + G-), Grupo 4 (laser 830 nm + G-), Grupo 5 (apenas laser 685 nm), Grupo 6 (apenas laser 830 nm), Grupo 7 (lasers 685 e 830 nm + G-), Grupo 8 (lasers 685 e 830 nm + G+). As úlceras foram fotografadas nos tempos de 24h, 3 dias, 7 dias, 10 dias, 13 dias e 16 dias e posteriormente analisadas com programa Image J, realizadas pelo mesmo indivíduo. Os resultados foram analisados pelo teste estatístico ANOVA e pós-teste de Bonferroni para múltiplas amostras não paramétricas. No experimento in vitro foi observado que todas as doses laser utilizadas tiveram efeito inibitório no crescimento bacteriano em ambas as espécies, sendo esse efeito maior na dose de 4 J/\'CM POT.2\', nos diferentes comprimentos de onda utilizados (685 nm e 830 nm), mesmo quando esses foram usados de forma consecutiva. In vivo, observou-se que no 3º dia pós cirúrgico houve uma diferença estatisticamente significante entre os grupos 1 e 6. No 7º dia a diferença estatística aconteceu entre os grupos 1 e 4. No 10º dia, não houve diferenças estatisticamente significante entre as áreas dos grupos. No 13º dia observou-se diferença estatística entre todos os grupos quando comparados com os grupos 7 e 8 (lasers 685 e 830 nm + G+). No 16º de segmento todas as feridas encontavam-se cicatrizadas. A terapia a laser de baixa intensidade apresentou efeito inibitório do crescimento bacteriano in vitro e nos estudos in vivo, mostrando-se capaz de acelerar o processo de cicatrização de feridas, mesmo contaminadas com diferentes espécies bacterianas. / Physical therapeutic resources have been used to treat leg ulcers, such as laser therapy of low intensity. Bacterial contamination of these ulcers often constitutes itself into a major complication of healing. Thus, search up to investigate the effects of this therapy off the cultures of different bacterial species in vitro and in vivo. It was used laser device model Theralase III-DMC (685 e 830 nm) in different doses (1, 2 e 4J). It was used bacteria S. aureus ATCC 6538 (Gram+) and P. aeruginosa ATCC 15442 (Gram-), reativated in tilted BHI-Agar to 37 Celsius degrees/24h. After the bacteria were re-suspended in broth B.H.I. to 37 Celsius degrees for 20h, centrifuged 3x/15min/4.500rpm, followed by washing and homogenization. The suspension was diluted in 96 wells cell culture plates, and submitted to successive serial dilutions, finding the ideas dilutions of \'10 POT.-12\' bacteria/ml for S. aureus and \'10 POT.-15\' bacteria/ml for P. aeruginosa. The bacterial solutions were irradiated with different wavelength of laser (685 e 830 nm) and different doses (1, 2 e 4J). Ten microliters of bacterial solution from the last well were sowed in Petri´s plate with Mc Conkey agar and BHI-agar to bacterias Gram positive and negative respectively for further counting of colony forming units (CFU´s). Ten plates for each dose of different wavelength and different bacterial species were sowed and 10 boards for the control group, without laser irradiation. In the in vivo studies were used New Zealand male rabbits, weighing approximately 1.5 Kg. Anesthesia was made with 1.5 ml of ketamine 100 mg and xylzina 1.0 mL/animal. Six punched wounds were made in each ear, and each animal constituted a group (n=12). The wounds were previously contaminated with S. aureus (G+) and P. aeruginosa (G-). The animals were divided in Group 1 (laser 685 nm + G+), Group 2 (laser 830 nm + G+), Group 3 (laser 685 nm + G-), Group 4 (laser 830 nm + G-), Group 5 (only laser 685 nm), Group 6 (only laser 830 nm), Group 7 (lasers 685 e 830 nm + G-), Group 8 (lasers 685 e 830nm + G+). The ulcers were photographed in times of 24h, 3, 7, 10, 13 and 16 days and then analyzed with ImageJ software, conducted by the same individual. The results were analyzed by non parametric ANOVA statistical test and post-test for multiple samples by Bonferroni´s test. In the in vitro experiments was observed that all the laser doses used presented an inhibitory effect on bacterial growth in both species, and this effect was greater using the dose of 4J in different wavelengths (685 nm, 830 nm), even when these were applied consecutively. In vivo, it was observed that in the 3rd day after surgery there was a statistically significant difference between groups 1 and 6. In the 7th day happened to statistical difference between groups 1 and 4. In the 10th day there was no statistically significant difference among the areas of groups. In the 13th day there was statistical difference between all groups when compared with groups 7 and 8 (685 and 830 nm lasers + G+). In the 16th to follow all the wounds had been healed. The laser therapy of low intensity showed inhibitory effect of bacterial growth in vitro and in vivo studies and it were able to accelerate the wound healing, even contaminated with different bacterial species.

A irradiação laser em baixa intensidade (LLLT) pode promover acelerada epitelização, maior grau de vascularização e aumento da síntese de colágeno nas feridas cirúrgicas. Porém, poucas são as evidências demonstrando que a LLLT influencie diretamente na expressão do fator de crescimento endotelial vascular (VEGF). Este estudo investigou e correlacionou a cinética de expressão de RNAm para VEGF-A165 durante o processo de reparo tecidual de feridas em língua de ratos, irradiadas (grupo GIII) ou não irradiadas (grupo GII) com o laser diodo GaAlAs. Foram realizadas pesagens sistemáticas (dias 0, 1, 2, 4 e 6) para estudar os padrões de crescimento e desenvolvimento dos animais. Animais não operados (grupo controle, GI) foram utilizados para posteriores comparações estatísticas dos valores de variação de peso (análise de variância a um critério, teste de Tukey, p<0,05). Após a cirurgia (dia 0), duas sessões de irradiação laser foram realizadas, uma logo após o procedimento operatório (laser infravermelho, 35 J/cm2) e a segunda, 48h após o início do experimento (laser vermelho visível, 5 J/cm2). Os animais foram sacrificados 1, 3, 5 e 7 dias após a cirurgia, para obtenção de amostras de tecido lingual através de biópsia. O RNA total foi extraído pela utilização do método guanidino-isotiocianato-fenol-clorofórmio. Após a transcrição reversa ? reação em cadeia da polimerase (RT-PCR), os resultados da eletroforese horizontal permitiram avaliar a razão da expressão de RNAm para GAPDH e VEGF-A165 nos grupos GI, GII e GIII (análise de variância a dois critérios, teste de Tukey, p<0,05). A média de variação de peso dos animais do grupo GII foi ao mesmo tempo maior que a do grupo GIII e menor que a do grupo GI em todos os dias de análise, observando-se diferença estatisticamente significativa (p<0,05). Apenas durante o sexto dia, não foram observadas diferenças significativas entre as médias de variação de peso dos grupos GII e GIII (p=0,220) e GI e GII (p=0,409). Os valores da expressão de RNAm para VEGF-A165 no grupo GII foram estatisticamente maiores que os do grupo GI (p=0,0285) e GIII (p=0,0101) no primeiro dia de análise. Não foram observadas diferenças estatisticamente significativas entre os grupos GI, GII e GIII quando comparados nos demais períodos de tempo. Portanto, o laser diodo GaAlAs foi capaz de biomodular a expressão do RNAm para VEGF-A165 durante o primeiro dia do processo de reparo tecidual de feridas em língua de ratos. / Low level laser therapy (LLLT) can promote accelerated epithelization, greater of vascularization and increase of collagen synthesis in surgical wounds. However, few evidences proved that LLLT directly influence in the expression of vascular endothelial growth factor (VEGF). This study investigated and correlated the kinetic of expression of mRNA VEGF-A165 during the tissue repair of wounds in tongues of irradiated (group GIII) or not irradiated rats (group GII) with GaAlAs diode laser. Systematic weighings were performed on days 0, 1, 2, 4 and 6 to study the growth and development standards of the rats, using not operated animals (control group, GI) for future statistical comparisons (one-way ANOVA and Tukey\'s test, p<0.05). Two sessions of laser irradiation were accomplished, the first one right after the surgical procedure (infrared laser, 35 J/cm2) and the second one, 48h after of the beginning of the experiment (visible red laser, 5 J/cm2). The animals were sacrificed on days 1, 3, 5 and 7 and samples of tongue tissue were obtained. The total RNA was extracted by using of guanidine-isotiocianate-phenol-chloroform method. After the reverse transcription - polymerase chain reaction (RT-PCR), the results of horizontal electrophoresis permitted to assess the ratio of mRNA GAPDH and VEGF-A165 expression for groups GI, GII and GIII (two-way ANOVA, Tukey\'s test, p<0.05). The weight variation of animals of group GII was both greater than that of animals of group GIII and lower of than that of animals of group GI in daily analysis, observing statistically significant differences (p<0.05). Only during the sixth day, significant differences between the averages of weight variation of the groups GII and GIII (p=0.220) and GI and GII (p=0.409) were not observed. The expression of mRNA VEGF-A165 in group GII was statistically greater than that of group GI (p=0.0285) and GIII (p=0.0101) in the first day. Significant differences among the groups GI, GII and GIII were not observed in other time periods. Therefore, GaAlAs diode laser was able to modulate the expression of mRNA VEGF-A165 during the first day of tissue repair process of wounds in rat tongues.

Submitted by Renata Lopes (renatasil82@gmail.com) on 2017-03-29T13:30:24Z No. of bitstreams: 1 carolinadelourdesjuliaovieirarocha.pdf: 438849 bytes, checksum: 0e5f838b152a2294e48909758b185709 (MD5) / Approved for entry into archive by Adriana Oliveira (adriana.oliveira@ufjf.edu.br) on 2017-03-30T11:20:43Z (GMT) No. of bitstreams: 1 carolinadelourdesjuliaovieirarocha.pdf: 438849 bytes, checksum: 0e5f838b152a2294e48909758b185709 (MD5) / Made available in DSpace on 2017-03-30T11:20:43Z (GMT). No. of bitstreams: 1 carolinadelourdesjuliaovieirarocha.pdf: 438849 bytes, checksum: 0e5f838b152a2294e48909758b185709 (MD5) Previous issue date: 2010-01-01 / O Diabetes Mellitus é um problema mundial de saúde pública, de incidência elevada, em termos de pessoas afetadas e mortalidade prematura. As ulcerações em membros inferiores são a maior causa de morbidade entre os diabéticos, tendo como conseqüência a amputação. Na presença desta doença, o processo cicatricial é mais dificultado. Diversos estudos estão sendo realizados com a utilização da Terapia Laser de Baixa Intensidade no processo de cicatrização e reparo tecidual. A terapia laser de baixa intensidade tem sido relatada como importante moduladora da cicatrização de feridas cutâneas. No presente estudo, nós avaliamos os efeitos da terapia laser de baixa intensidade sobre a intensidade do infiltrado inflamatório e quantidade de vasos sangüíneos em feridas cutâneas de camundongos diabéticos não obesos (NOD), adicionalmente, analisamos a expressão da enzima ciclooxigenase 2 no sítio do reparo tecidual utilizando o modelo experimental camundongos NOD para estudar a cicatrização de feridas cutâneas. Foram utilizados 30 camundongos NOD. Destes, 14 ficaram diabéticos e foram divididos em dois grupos: grupo I (n = 7), controle, composto por camundongos NOD não submetidos à terapia laser de baixa intensidade e grupo II (n = 7), tratado, composto por camundongos NOD submetidos à terapia laser de baixa intensidade nos seguintes parâmetros: 15 mW de potência, dose de 3,8 J/cm2, e tempo de aplicação de 20 segundos. Após sete dias do ato cirúrgico e após aplicação do laser, os animais foram eutanasiados com sobredose de anestesia e foram colhidas amostras das feridas para posterior análise histopatológica, histomorfométrica e imunohistoquímica. Os resultados em conjunto sugeriram que a terapia laser de baixa intensidade é capaz de modular negativamente a expressão da enzima ciclooxigenase 2 contribuindo para o controle da resposta inflamatória em feridas cutâneas de camundongos NOD. / Diabetes Mellitus is a worldwide problem of public health, the high incidence, in terms of people affected and premature mortality. Ulcers of the lower limbs are the leading cause of morbidity among diabetic patients, which resulted in amputation. In this disease, the healing process is hampered. Several studies are being conducted with the use of low-level laser therapy in the process of healing and tissue repair. The low-level laser therapy has been reported as an important modulator of healing of skin wounds. In this study we evaluated the effects of low-level laser therapy intensity of the inflammatory infiltrate and number of blood vessels in wounds of non-obese diabetic mice (NOD), in addition, we analyzed the expression of cyclooxygenase 2 enzyme at the site of repair tissue using the NOD mice experimental model to study the healing of skin wounds. Were used thirty NOD mice, these fourteen were diabetic and were divided into two groups: group I (n = 7) underwent a surgical procedure of skin wounds and group II (n = 7) underwent a surgical procedure of skin wounds and treated with LLLT. Group II was submitted to LLLT in the following parameters: 15 mW of power, dose of 3.8 J/cm2 and exposure time of 20 seconds. Seven days after surgery and after laser application, animals were euthanized with an overdose of anesthesia and were submitted colleted tissue samples for subsequent histological analysis, histomorphometry and immunohistochemistry. A low-level laser therapy has promoted the inhibition of cyclooxygenase 2 expression in skin wounds in mice diabetic. The results together suggested that low-level laser therapy is able to negatively modulate the expression of cyclooxygenase 2 enzyme contributing to the inflammatory response in cutaneous wounds in NOD mice.