Made available in DSpace on 2016-06-02T20:36:15Z (GMT). No. of bitstreams: 1 1910.pdf: 5624011 bytes, checksum: 1f711c93bef1eb05247d258e994dfe38 (MD5) Previous issue date: 2008-02-29 / Universidade Federal de Minas Gerais / The phytochemical study of Hortia in this work aims to contribute with the chemosystematics of the Rutaceae and with the best classification of the genus inside the family. The study of the species H. oreadica, H. brasiliana and H. superba led us to isolate 15 compounds, such as the dihydrocinnamic acids derivatives 3-phenyl-[2 ,6 -dimethoxy-(3 ,4 :5 ,6 )-2 ,2 - dimethylpirano]propionic acid (01), methyl 3-phenyl-[2 -methoxy-(3 ,4 :5 ,6 )-2 ,2 - dimethylpirano]propionate (02), methyl 3-phenyl-[2 ,6 -dimethoxy-(3 ,4 :5 ,6 )- 2 ,2 -dimethylpirano]propionate (03), methyl 3-phenyl-[2 ,5 -dimethoxy- (3 ,4 :5 ,6 )-2 ,2 -dimethylpirano]propionate (04), 3-phenyl-[2 -methoxy- (3 ,4 :5 ,6 )-2 ,2 -dimethylpirano]propionic acid (05), 3-phenyl-[2 ,5 -dimethoxy-(3 , 4 -O:5 ,6 ) 2 ,2 -dimethylpyrano]propionic acid (06), being structure 06 new for specie H. oreadica; coumarin 5-methoxyseselin (07); cinnamic acid derivative E- 3,4-dimethoxy-á(3-hydroxy-4-carbomethoxyphenyl)cinnamic acid (08), new in literature, the alkaloids rutaecarpine (09), 7,8-dehydrorutaecarpine (10) new in the genus Hortia, dictamine (11), N-methylflindersine (12) and the limonoids guyanin (13), hortiolide E (14) and hortiolide G (15), being structure 14 described for the first time in the specie H. oreadica and 15 in literature. The phytochemical study of the species from Hortia genus still not allow classify correctly it inside the family. Hortia presents limonoids with C and D rings modified, characteristic of Meliaceae. However the presence of metabolites such as alkaloids, coumarins, dihydrocinnamic and cinnamic acids derivatives confirm that Hortia belongs the Rutaceae family, even so are not clear its accurate positioning. The presence of limonoids highly modified could indicated that genus can not belong nor to the Todallieae and nor the Cusparieae, being located separately inside of the Rutaceae family. Several biological assays had been performed with crude extracts and compounds isolated from Hortia, with a collection of the synthetic compounds and the lasiodiplodin, compound isolated from the pathogenic fungus. The Minimum Inhibitory Concentration of many substances was related against the bacteria Xylella fastidiosa that causes Citrus Variegated Chlorosis. The promising substances were synthetic quinolinones 2-methyl-6-fluor-4-quinolone (S2) and 2-methyl-5-methoxy-7-hydroxy-4-quinolone (S4) and the alkaloid rutaecarpine (09) with MIC from 0.5 to 1.0 mg/mL. We have studied the in vitro antimicrobial activity against oral pathogens that permitted to determine hexane extract such as successful against all microorganisms assayed and limonoid guyanin (13) and alkaloid dictamine (11) with the best MIC, being 200 and 100 µg/mL, respectively. The assays against alimentary pathogens revealed that lasiodiplodin, 2-methyl-6-fluor-4-quinolone (S2) and 2-methyl-5,7-dimethoxy-4- quinolone (S4) synthetics as the more effective among all substances. Therefore, this work showed that several substances with properties antibacterial constitute an important source for the discovery of new antimicrobial products. / O estudo fitoquímico de Hortia descrito neste trabalho visa contribuir com a quimiossistemática da família Rutaceae e também com a melhor classificação do gênero dentro da mesma. O estudo das espécies H. oreadica, H. brasiliana e H. superba levou ao isolamento de 15 substâncias, sendo, derivados do ácido diidrocinâmico ácido 3-fenil-[2 ,6 -dimetoxi-(3 ,4 -O:5 ,6 )-2 ,2 - dimetilpirano]propiônico (01), 3-fenil-[2 -metoxi-(3 ,4 -O:5 ,6 )-2 ,2 - dimetilpirano]propionato de metila (02), 3-fenil-[2 ,6 -dimetoxi-(3 ,4 -O:5 ,6 )-2 ,2 - dimetilpirano]propionato de metila (03), 3-fenil-[2 ,5 -dimetoxi-(3 ,4 -O:5 ,6 )-2 ,2 - dimetilpirano]propionato de metila (04), ácido 3-fenil-[2 -metoxi-(3 ,4 -O:5 ,6 )-2 ,2 - dimetilpirano]propiônico (05), ácido 3-fenil-[2 ,5 -dimetoxi-(3 ,4 -O:5 ,6 )-2 ,2 - dimetilpirano]propiônico (06), sendo que a estrutura 06 parece ser nova para a espécie H. oreadica; a cumarina 5-metoxiseselina (07); o derivado do ácido cinâmico E-ácido 3,4-dimetoxi-á(3-hidroxi-4-carbometoxifenil)cinâmico (08), novo na literatura; os alcalóides rutaecarpina (09), 7,8-desidrorutaecarpina (10) inédita no gênero Hortia, dictamina (11) e N-metilflindersina (12) e os limonóides guianina (13), hortiolida E (14) e hortiolida G (15), dos quais a estrutura 14 está sendo descrita pela primeira vez na espécie H. oreadica e 15 na literatura. O estudo fitoquímico das espécies do gênero Hortia ainda não permite classificá-la corretamente dentro da família. Hortia apresenta limonóides com anéis C e D modificados, característicos de Meliaceae. No entanto a presença de metabólitos como alcalóides, cumarina, derivados do ácido diidrocinâmico e cinâmico vêm confirmar que Hortia pertence à família Rutaceae, embora não esteja claro seu exato posicionamento dentro da mesma. A presença de limonóides bastante modificados para Hortia poderia indicar que o gênero não pertença à Todallieae ou Cusparieae, podendo estar posicionado separadamente dentro da família Rutaceae. Vários ensaios biológicos foram realizados com os extratos e compostos isolados, com uma coleção de compostos sintéticos e a lasiodiplodina, composto isolado de um fungo patogênico. São relatadas as Concentrações Inibitórias Mínimas de diversas substâncias frente a bactéria causal da Clorose Variegada dos Citros, Xylella fastidiosa. As substâncias promissoras foram as quinolinônicas sintéticas 2-metil-6-flúor-4-quinolona (S2) e 2-metil-5-metoxi-7- hidróxi-4-quinolona (S4) e o alcalóide rutaecarpina (09), com CIM entre 0,5 e 1,0 mg/mL. Foi realizado a investigação do potencial antimicrobiano in vitro frente a alguns patógenos bucais que permitiu determinar o extrato hexânico como o mais promissor frente a todas as cepas ensaiadas e o limonóide guianina (13) e o alcalóide dictamina (11) com os melhores valores de CIM, sendo 200 e 100 µg/mL, respectivamente. Os ensaios frente à patógenos de origem alimentar revelaram que as substâncias lasiodiplodina e as sintéticas 2-metil-6-flúor-4- quinolona (S2) e 2-metil-5,7-dimetoxi-4-quinolona (S4) foram as mais eficazes dentre todas as ensaiadas. Portanto, a partir deste trabalho verificou-se que algumas substâncias com propriedades antibacterianas revelaram importantes fontes na descoberta de novos produtos com potencial antimicrobiano.

Made available in DSpace on 2016-06-02T20:36:16Z (GMT). No. of bitstreams: 1 2003.pdf: 2958413 bytes, checksum: 4160426061ec67f4e48d4d92b60d4806 (MD5) Previous issue date: 2006-12-15 / Universidade Federal de Sao Carlos / This work reports the study of a surprising plant microorganism relationship, involving the plant Sapindus saponaria, which is rich in antigungal saponins, and an endophyte fungus isolated from the pericarpe of the fruits collected in the host plant, and identified as Xylaria sp. The main objective of this work was to understand the survival mechanism of this fungus in such inhospitable ambient. It was found that this fungus biotransforms the structure of the saponins present in S. saponaria, making it less toxic, allowing the fungus to survive in the plant tissue. The reaction involved in this survival mechanism was a hidroxilation at ring C of the aglicone skeleton of saponins present in S. saponaria. This study also had as objective the stablishment of a fast method for the isolation and identification of saponins and ASOG (Acyclic Sesquiterpene Oligoglycosides) present in the plant s fruits. For the isolation of these compounds, the Sephadex® LH-20 column showed to be very efficient and the mass spectrometry technique (ESI-MS) was used as a rapid method of identification of this substances. The Xylaria sp. fungus was cultivated in synthetic mediums for the isolation of secondary metabolites. The microorganism showed a great potential for the production of several compounds, especially the isocoumarins. The analytical tools used to monitor all the experiments reported here comprises chromatographic and spectrometric techniques as HPLC, GC, open column chromatography, MS and MS/MS, 1D NMR and 2D NMR. Mechanisms of fragmentation were tentativelly suggested for all compounds studied by mass spectrometry. / Esse trabalho relata o estudo de uma surpreendente relação planta-microrganismo envolvendo a planta Sapindus saponaria, uma espécie extremamente rica em saponinas, em concentrações elevadas, as quais são compostos que possuem ação antifúngica bastante acentuada e, e um fungo do gênero Xylaria. O trabalho em questão teve por objetivo compreender o mecanismo de sobrevivência deste fungo em um ambiente tão inóspito. A resposta encontrada para esta questão foi que o fungo realiza uma biotransformação na estrutura das saponinas presentes em S. saponaria, possibilitando assim a sobrevivência deste nos tecidos da planta. Trata-se de uma reação de hidroxilação localizada no esqueleto triterpênico das saponinas presentes em S. saponaria. Outro objetivo do estudo foi encontrar um método rápido para o isolamento e identificação de saponinas e OGSA (Oligoglicosídeos Sesquiterpênicos Acíclicos) presentes nos frutos da planta. Para o isolamento destes compostos a fase estacionária Sephadex® LH-20 apresentou grande eficiência e a técnica de espectrometria de massas (MS) foi utilizada como um método rápido para identificação destas substâncias. O fungo Xylaria sp. foi cultivado em meios sintéticos para isolamento de metabólitos secundários. O microrganismo apresentou grande potencial para produção de diversos compostos, dando destaque para a classe das isocumarinas. Para realização deste trabalho foram utilizadas técnicas cromatográficas e espectrométricas como HPLC, GC, cromatografia em coluna, MS e MS/MS, 1D NMR e 2D NMR. Foram realizadas propostas de fragmentação para todos os compostos estudados por espectrometria de massas.

Made available in DSpace on 2016-06-02T20:36:19Z (GMT). No. of bitstreams: 1 2066.pdf: 3869548 bytes, checksum: 919d361643b7d2da104c8bf183496f29 (MD5) Previous issue date: 2008-07-18 / Financiadora de Estudos e Projetos / This work presents the phytochemical study and biological assays carried out with organic extracts of fruits and seeds from Trichilia claussenii, T. elegans and inflorescence from T. catigua against S. frugiperda. Among the extracts assayed, the methanol extracts of seeds from T. claussenii and inflorescence from T. catigua presented the highest insecticidal activity, with 64,0 and 64,4 % of mortality, respectively. The bioassay-guided study of the methanol extract of seeds from T. claussenii led to identification of ��-phenylalkyl and alkenyl fatty acids, active substances in this extract. The flavonoid ent-catequin was isolated from the methanol extract of inflorescence from T. catigua and it was associated with the insecticidal activity found in this extract. Fatty acids with the methylene chains ranging from C-5 to C-16 were assayed against S. frugiperda. Tests showed that the hexanoic, nonanoic and decanoic acids, displayed the highest rate of mortality at concentration of 10,0 mg/mL. The study of the three species allowed isolating and identifying the following compounds: a mixture of ��-phenylalkyl and alkenyl fatty acids, ��-lactonas, 4-hydroxy-N-methylproline, N-methylproline, uridine, uracile, entcatequin, 5-O-cafeoylquinic acid and the steroids 3-��-O-��-Dglucopyranosilsitosterol, ��-sitosterol, campesterol, estigmasterol e sitostenone. The limonoids 11��-acetoxyobacunone and 1,2-dihiyro-1��-acetoxy-11��-acetoxy-14,15-epoxycneorin R were isolated for the first time from a Trichilia species. / Este trabalho apresenta o estudo fitoquímico e os ensaios biológicos realizados com os extratos orgânicos dos frutos e sementes das espécies Trichilia claussenii, T. elegans e inflorescências T. catigua sobre Spodoptera frugiperda. Dentre os extratos ensaiados, os extratos metanólicos das sementes de T. claussenii e inflorescências de T. catigua foram os que apresentaram a mais alta atividade inseticida, com 64,0 e 64,4 % de mortalidade, respectivamente. O estudo biomonitorado do extrato metanólico das sementes de T. claussenii levou a identificação dos ácidos ��-fenil alcanóicos e alquenóicos, substâncias ativas neste extrato. Do extrato metanólico das inflorescências de T. catigua foi isolado o flavonóide ent-catequina, associado à atividade inseticida encontrada neste extrato. Ácidos graxos com cadeias metilênicas variando entre C-5 a C-16 foram testados sobre S. frugiperda. Ensaios mostraram que os ácidos hexanóico, nonanóico e decanóico apresentaram altas taxas de mortalidade na concentração de 10,0 mg/mL. Através do estudo dessas três espécies foi possível isolar e ou identificar as substâncias: ácidos ��-fenil alcanóicos e alquenóicos, ��-lactonas, 4-hidróxi-N-metilprolina, N-metilprolina, uridina, uracila, ent-catequina, ácido 5-O-cafeoilquínico, os esteróides 3-��-O-��-D-glucopiranosil sitosterol, ��-sitosterol, campesterol, estigmasterol e sitostenona. Sendo os limonóides 11��-acetoxiobacunona e 1,2 diidro-1��-acetoxi-11��-acetoxi-14,15-epoxicneorina R isolados pela primeira vez no gênero Trichilia.

Made available in DSpace on 2016-06-02T20:36:31Z (GMT). No. of bitstreams: 1 3601.pdf: 23843273 bytes, checksum: 9749b85bea7922b896f2c98d31db0fc3 (MD5) Previous issue date: 2011-02-24 / Universidade Federal de Minas Gerais / Alternanthera brasiliana is widely used by Brazilian people as a folk medicine for the treatment of numerous diseases. However, little is known about its chemical composition and the microorganisms that live in association with it. This work proposed the use of dereplication strategies to establish a correlation between chemical compounds present in the plant and the antibiotic activity associated with it. These strategies were also used for study endophytic micro-organisms associated with this plant, since the metabolites present in plant tissues are often result of interaction between plants and different factors present in their habitat, such as micro-organisms. 50 strains of endophytic micro-organisms associated to Alternanthera brasiliana were isolated. High-Throughput Screening strategies, which envolved analytical techniques as LC-PDA-MS, LC-PDA-MS/MS, LC-SPE-NMR and antibiosis assays allowed identification of antibiotic compounds present in the A. brasiliana stems. These compounds are member of oxylipins group, among which we highlight the 13-Z,E-KODE, 13-E,E-KODE, 9-E,Z-KODE and 9-E,EKODE. Furthermore, were identified some depsipeptides compounds produced by a strain of Fusarium fungus, isolated as endophyte of A. brasiliana. Beauvericin, which is one of these compounds , is known for its antibiotic and insecticide activities. This compound was also found in the plant extracts, suggesting that endophyte microorganism could play a role in producing antibiotic compounds inside plant tissues. / A planta Alternanthera brasiliana é popularmente conhecida por suas diversas atividades biológicas. Assim, o presente trabalho pretende contribuir com o uso de estratégias de desreplicação a fim de estabelecer uma correlação entre os compostos químicos presentes nesta planta e a atividade antibiótica associada a ela. Além disso, essas estratégias de desreplicação foram utilizadas para o estudo dos micro-organismos endofiticos associados a esta planta, uma vez que os metabólitos secundários presentes nos tecidos das plantas muitas vezes são resultado da interação desta planta com diversos fatores presentes em seu habitat, e dentre eles a interação com microorganismos merece destaque. Foram isoladas 50 cepas de micro-organismos endofiticos associados à planta Alternanthera brasiliana. O uso de abordagens de High Throughput Screening aliadas a técnicas analíticas como LC-PDA-MS, LC-PDA-MS/MS, LC-SPE-NMR e ensaios de antibiose permitiram a identificação dos compostos antibióticos presentes no caule de A. brasiliana. Esses compostos pertencem a classe das oxilipinas, dentre os quais se destacam o 13-Z,E-KODE, 13-E,E-KODE, 9-E,Z-KODE e 9-E,E-KODE. Tambem foram identificados compostos da classe dos depsipeptídeos nos extratos de uma cepa do gênero Fusarium, isolada como endofítico de A. brasiliana. Dentre os depsipeptídeos encontrados, a beauvericina estava presente em grande quantidade no extrato deste micro-organismo. Este composto, conhecido por suas atividades antibiótica e inseticida, foi encontrado também no extrato da planta, sugerindo que o micro-organismo endofítico poderia estar produzindo compostos desta classe no interior dos tecidos da planta, onde ele está alojado.

Made available in DSpace on 2016-06-02T20:36:32Z (GMT). No. of bitstreams: 1 3752.pdf: 3408960 bytes, checksum: 6c7acb0ed95bf974942c00994cacd869 (MD5) Previous issue date: 2011-01-31 / Universidade Federal de Minas Gerais / The present work describes the search of bioactive secondary metabolites in plant species of genus Zanthoxylum and synthetic derivatives seeking specific inhibitors of cathepsins L and V. The natural products are involved in approximately 50% of all drugs marketed. Cathepsins represent a class of enzymes that has the primary function of randomly degrade proteins at lysosomes, but are also involved in different pathologies, such as, atherosclerosis, rheumatoid arthritis, osteoporosis and various cancers. This work was carried out monitoring Zanthoxylum extracts by fluorimetric assays and by Highperformance liquid chromatography (HPLC). Among the species studied, the most promising extracts were methanol and dichloromethane extracts of Zanthoxylum acuminatum, the latter being selected for isolation. The chromatographic methodology afforded the isolation of a triterpene: lupeol (1), the coumarins umbelliferone (2), heradenol (3), nordentatin (4), anisocoumarin (5), derivated of 6´,7´-epoxy-7-geranyloxycoumarin (6); canthinonic alkaloids 5-methoxycantin-6-one (7), 4,5-dimehoxycantin-6-ona (8); β-carboline alkaloid; 7-hydroxi-1-ethyl-β-carboline (9); and acridone alkaloid arborinine (10). All were tested at concentration of 25 mM and coumarin 5 inhibited over 50%, showing more activity and selective against cathepsin L. The value potency (IC50) of this compound was 30 μM for cathepsin L and 102 μM for cathepsin V. Furthermore, were determined the potency values, selectivity and mechanism of action acridones alkaloids isolated from Swinglea glutinosa, N-aryl anthranilic acids, synthetic acridone alkaloids and a series of alkaloids 4-quinoline-2-substituted. The most promising compound was the alkaloid acridone AC_05 with a IC50 of 0.5 μM and Ki of 0.18 μM. Moreover, the compound AC_05 presented as a competitive inhibitor against both cathepsins, which is consistent with the interaction model proposed by molecular modeling. / Este trabalho descreve a busca de metabólitos secundários bioativos em espécies de plantas do gênero Zanthoxylum e a partir de derivados sintéticos visando inibidores específicos das catepsinas L e V. Os produtos naturais estão envolvidos em cerca de 50% de todos os fármacos comercializados. As catepsinas representam uma classe de enzimas que têm função primária de degradar aleatoriamente proteínas nos lisossomos e também estão envolvidas em diferentes patologias, tais como aterosclerose, artrite reumatóide, osteoporose e diferentes tipos de cânceres. Neste trabalho foi realizado o monitoramento dos extratos do gênero Zanthoxylum por ensaios fluorimétricos e cromatografia líquida de alta eficiência (CLAE). Dentre as espécies avaliadas, os extratos mais promissores foram os extratos metanólico e diclorometânico e de Zanthoxylum acuminatum, sendo este último selecionado para isolamento. A metodologia cromatográfica levou ao isolamento de um triterpeno; o lupeol (1), as cumarinas; a umbeliferona (2), heradenol (3), nordentatina (4), anisocumarina (5),derivado do 6´, 7´-epoxi-7-geraniloxicumarina (6); alcalóides do tipo cantinônicos; 5-metoxicantin-6-ona (7), 4,5-dimetoxicantin-6-ona (8); um alcalóide β-carbonílico; 7- hidroxi-1-etil-β-carbolina (9); e um do tipo acridônico; arborinina (10). Todos foram ensaiados na concentração de 25 μM e a cumarina 5 apresentou inibição superior a 50%, mostrando maior ativade e seletivade frente a catepsina L. O valor de potência (IC50) deste composto foi 30 μM para a catepsina L e de 102 μM para a catepsina V. Além disso, foram determinados os valores de potência, seletividade e mecanismo de ação para alcalóides acridônicos isolados de Swinglea glutinosa, ácidos N-aril antranílicos, alcalóides acridônicos sintéticos e uma série de alcalóides 4- quinolínicos-2-substituídos. O composto considerado mais promissor foi o alcalóide acridônico AC_05, com valor IC50 de 0,5 μM e Ki 0,18 μM. Além disto, este composto AC_05 apresentou-se como um inibidor competitivo frente as duas catepsinas, estando de acordo com o modelo de interação proposto por modelagem molecular.

Made available in DSpace on 2016-06-02T20:36:33Z (GMT). No. of bitstreams: 1 3775.pdf: 9877415 bytes, checksum: d8756cd20cabf326225b8d0cf3163991 (MD5) Previous issue date: 2011-06-17 / Universidade Federal de Minas Gerais / Brazil has a rich fauna and flora, for these reasons it is called as mega-diverse country. This diversity enables the isolation and identification of substances that become promising in several areas and an example is the insecticidal activity of various substances in agriculture. This study presents the identification of volatiles from leaves, the phytochemical study and insecticidal and fungicidal test of fractions of organic extracts of Astronium graveolens (Anacardiaceae) that belong to the Order Sapindales. Among the fractions tested against leaf-cutting ants (Atta sexdens rubropilosa) and their symbiotic fungus, Leucoagaricus gongylophorus, ethyl acetate fractions of ethanolic extracts of roots, stems and branches showed good activities. In parallel was evaluated the action of those fractions against Spodoptera frugiperda, however, those fractions did not showed promising activities. Phytochemical study of ethyl acetate fractions resulted in the isolation of 11 secondary metabolites, two flavonoids: 5,3',4'-trihydroxy-7-methoxyflavone and myricetin-3-O-_-L-rhaminosídeo, three phenolic compounds: epigallocatechin methyl ester, 5-O-caffeoylquinic acid, 3- O-galoil-5-cafeoilchinic acid (inedited); six dimeric chalcones, (7S,8"R)-(2',4,4',5, tetrahydroxychalcone-(2_7",8_8 ')-2' ,4",4"'-trihydroxy-7",8"-dihydrochalcone; (7R,8S,7"S,8"R)-2',4,4',5,7-pentahydroxy-7,8-dihydrochalcone-(2_7",8_8")- 2 ',4",4"'-trihydroxy-7",8"dihydrochalcone; (7S,8R,7 S,8 S)-2',4,4',5,7-pentahydroxy- 7,8-dihydrochalcone-(2_7",8_8")-2 ',4",4"'-trihydroxy-7",8"-dihydrochalcone; rel- (7S,8S,7"S,8S)-tetrahydro-7,7''-bis-(4-hydroxyphenyl)-7,7''(furandil)-8,8,2.4''- dihydroxiphenyl;4,5,4 dihydroxy-7,2 -oxo-chalcone-(2_7 ,8_8 )-2 ,4 ,4 ,2 ,4 - trihydroxychalcone; 4,4 dihydroxy-7,2 -oxo-chalcone-(2_7 ,8_8 )-2 ,4 ,2 ,4 - tetrahydroxychalcone . The dimeric chalcones are new to the genera and, except first one, in the literature. / O Brasil apresenta uma rica fauna e flora, por esse motivo é conhecido como um país megadiverso. Esta diversidade possibilita o isolamento e a identificação de substâncias que se tornam promissoras em diversas áreas e um exemplo é a atividade inseticida de diversas substâncias na agricultura. Este trabalho teve como resultados a identificação de voláteis das folhas, o estudo fitoquímico e os ensaios inseticidas e fungicidas dos extratos orgânicos da espécie Astronium graveolens (Anacardiaceae) pertencente à Ordem Sapindales. Dentre os testes frente à formiga cortadeira (Atta sexdens rubropilosa) e o seu fungo simbionte, Leucoagaricus gongylophorus, as frações acetato de etila dos extratos etanólicos das raízes, caule e galhos se destacaram. Paralelamente foi avaliada a ação destas frações frente à Spodoptera frugiperda, entretanto, as frações não apresentaram atividades promissoras. O estudo fitoquímico da fração acetato de etila resultou no isolamento de 11 metabólitos secundários, divididos em: dois flavonóides, 5,3 ,4 -trihidroxi-7- metoxiflavona e miricetina-3-O-_-L-raminosídeo; três compostos fenólicos, galato de metila, ácido 5-O-cafeoilquínico, 3-O-galoil-5-O-cafeoilquínico (inédito na literatura); seis chalconas diméricas, (7 S,8 R)-(2 ,4,4 ,5,tetrahidroxichalcona-(2_7 ,8_8 )- 2 ,4 ,4 -trihidroxi-7 ,8 -dihidrochalcona; (7R,8S,7 S,8 R)-2 , 4,4 , 5,7-pentahidroxi- 7,8-dihidrochalcona-(2_7 ,8_8 )-2 ,4 ,4 -trihidroxi-7 ,8 -dihidrochalcona; (7S,8R,7 S,8 S)-2 ,4,4 ,5,7-pentahidroxi-7,8-dihidrochalcona-(2_7 ,8_8 )-2 ,4 ,4 - trihidroxi-7 ,8 -dihidrochalcona; rel-(7R,8S,7 R,8 S)-tetrahidro-7,7 -bis(4-hidroxifenil)- 8,8 -(furandiil)-bis-(2,4-dihidroxifenil); 4,5,4 dihidroxi-7,2 -oxo-chalcona- (2_7 ,8_8 )-2 ,4 ,4 ,2 ,4 -trihidroxichalcona; 4,4 dihidroxi-7,2 -oxo-chalcona- (2_7 ,8_8 )-2 ,4 ,2 ,4 -tetrahidroxichalcona. As chalconas diméricas são inéditas no gênero e, exceto a primeira, na literatura.

Made available in DSpace on 2016-06-02T20:36:33Z (GMT). No. of bitstreams: 1 3783.pdf: 10203848 bytes, checksum: 794932a0918147c34080a4065425c240 (MD5) Previous issue date: 2011-02-25 / Financiadora de Estudos e Projetos / Leaf-cutting ants are considered one of the main pests that affect Brazilian agriculture. To control this pest are employed, most often, halogenated, sulfurous and phosphorus compounds. However, the continued use of these compounds leads to problems such as the emergence of resistance by insects, soil and underwater contamination e most of them affect many non-target species, may cause environmental imbalance and thus raising the needed of search for new compounds that are more selective and less damaging to the environment. From this perspective, the present work presents a phytochemical study of the specie Virola sebifera and evaluation of the insecticide and/or fungicide potential of the crude extracts, fractions and isolated compounds against the leaf-cutting ants, Atta sexdens rubropilosa, and its symbiotic fungus, Leucoagaricus gongylophorus. One of the techniques employed to the phytochemical study was the high-speed counter-current chromatography and it was confirmed the efficiency of this technique and the importance of choosing a suitable biphasic solvent system for the desired separation. In this work were isolated and/or identified three acylresorcinols, four lignans and five flavonoids, being all the flavonoids the first time reported for this specie. From the biological tests with leaf-cutting ants, it was found that the methanol extract of leaves of Virola sebifera and theirs fractions showed insecticidal activity as a result of the synergistic effect of their chemical composition. The bioassay with the symbiotic fungus, Leucoagaricus gongylophorus, revealed great fungicide potential of the isolated lignans, mainly the lignan (-)-kusunokinin, which exhibited 100% of inhibition of mycelial growth. / As formigas cortadeiras são consideradas uma das principais pragas que afetam a agricultura brasileira. Para o controle desses insetos são empregados, na maioria das vezes, compostos halogenados, sulfurados e fosforados. No entanto, a utilização contínua desses compostos gera problemas como o aparecimento de resistência por parte dos insetos, contaminação de solo e lençóis freáticos e muitos deles atingem espécies não-alvo podendo provocar um desequilíbrio ecológico e despertando assim, a necessidade de buscar-se novos compostos mais seletivos e menos prejudiciais ao meio ambiente. Nessa perspectiva, o presente trabalho apresenta o estudo fitoquímico da espécia Virola sebifera e avaliação do potencial inseticida e/ou fungicida dos extratos, frações e susbtâncias obtidos frente às formigas cortadeiras da espécie Atta sexdens rubropilosa e seu fungo simbionte Leucoagaricus gongylophorus. Uma das técnicas empregadas para realização do estudo fitoquímico foi cromatografia em contracorrente de alta velocidade onde se comprovou a eficiência desta técnica e a importância da escolha de um sistema de solventes bifásico adequado para a separação desejada. Foram isolados e/ou identificados neste trabalho três acilresorcinóis, quatro lignanas e cinco flavonóides sendo todos os flavonóides pela primeira vez relatados para a espécie em questão. A partir dos ensaios biológicos realizados com as operárias de formigas cortadeiras, verificou-se que o extrato metanólico das folhas de Virola sebifera e suas frações apresentaram atividade inseticida como resultado do efeito sinergístico da sua composição química. Os ensaios com o fungo simbionte, Leucoagaricus gongylophorus, revelaram grande potencial fungicida das lignanas isoladas, principalmente a lignana (-)-kusunokinina, a qual apresentou 100% de inibição do crescimento micelial do fungo

Made available in DSpace on 2016-06-02T20:36:40Z (GMT). No. of bitstreams: 1 4447.pdf: 11266317 bytes, checksum: 6b1120210ec06b96c9b2a338298384a7 (MD5) Previous issue date: 2011-08-26 / Universidade Federal de Sao Carlos / Microorganisms, known as being relatively simple, have shown a great adaptation power to different nutritional situations by changing their metabolism with lack or supply of nutrients in the culture medium. This feature allows a wide range of the use of microorganisms to produce metabolites with several interests. This study has been named OSMAC (One Strain Many Compounds) approach, which was applied in this study by using two fungi from Penicillium genus. Through culture medium modification with FeCl3 during growth of P. brasilianum, it was able to produce isoquinolinic alkaloid. On the other hand, the addition of CaCl2, another alkaloid belonging to tremogenic class was isolated and analysed by spectroscopic methods. When P. griseoroseum was cultivated with NH4Br, it was observed the production of a halogenated secondary metabolite, which was not reported before (brominated roquefortine C). Analyses by GC/MS led to detect three phenolic compounds with bromine atoms in its structure. The secondary metabolites of P. griseoroseum with no modification in the culuture medium were studied and three metabolites were isolated. Two of them belong to the tetronic acid class and the other one was isolated as a dimer from clavatol. Analyses by LC/ MS-MS were able to identify other tetronic acids in the ethyl acetate extract from P. griseoroseum. / Os microorganismos, por serem de organização relativamente simples, têm um poder de grande adaptação a variadas situações nutricionais, modificando seu metabolismo com a carência ou com o fornecimento de nutrientes ao meio de cultivo. Isso permite uma ampla flexibilidade em sua utilização, podendo-se induzir microorganismos a produzir determinadas substâncias de interesse. Esta abordagem pode levar a uma variedade de novos metabólitos secundários interessantes a partir de uma única cepa de um microorganismo. Este estudo vem sendo denominado de abordagem OSMAC (One Strain Many Compounds), a qual foi utilizada no presente trabalho com dois fungos do gênero Penicillium. Foi verificado que ao modificar o meio de cultura com FeCl3 durante o crescimento de P. brasilianum houve a produção de um alcalóide isoquinolínico, enquanto com a adição de CaCl2 houve a produção de outro alcalóide pertencente à classe dos alcalóides tremogênicos. Com relação ao fungo P. griseoroseum, foi isolado um metabólito halogenado (roquefortina C contendo um átomo de bromo) quando ao meio de cultura foi adicionado NH4Br. As substâncias isoladas foram analisadas por técnicas espectroscópicas. Também foram detectados por GC/MS mais três compostos fenólicos contendo átomos de bromo em sua estrutura. O metabolismo secundário de P. griseoroseum foi analisado e foram isolados policetídeos pertencentes à classe dos ácidos tetrônicos e um dímero do clavatol, inédito na literatura. Análises por LC/MS-MS detectaram outros ácidos tetrônicos presentes no extrato de acetato de etila.

Made available in DSpace on 2016-06-02T20:36:45Z (GMT). No. of bitstreams: 1 5235.pdf: 10166776 bytes, checksum: b87e8fe3bd8a3dcdf010e3da1c7b75c2 (MD5) Previous issue date: 2013-03-25 / Universidade Federal de Sao Carlos / In this work, we studied the structural transformation of methylpheophorbide a (2), a derivative of chlorophyll a (1) that was extracted from seaweed Spirulina maxima. The main propose of the study was to obtain compounds with low aggregation and appropriate photophysical characteristics for applications in Photodynamic Therapy (PDT). In this way, we prompted to transform chlorin type derivatives into the corresponding bacteriochlorins using cycloaddition reaction approaches. The use of chlorophyll a (1) was mainly motivated by its availability and low cost. In addition, this compound has been a focus of study in our research group. Therefore, it was initially developed a method of extracting/processing chlorophyll a which directly provided compound 2 (Scheme 1). In this process we used an extraction/transesterification one-pot method using an acid solution of methanol and chlorin 2 was obtained in 0.8% yield from dried seaweed. Compound 3 was obtained from 2 (77%) and then hydrogenated to give 4 (80%). The chlorophyll derivative 4 was used as starting material in order to prepare the desired bacteriochlorin via cycloaddition methodology (Scheme 2). Scheme 1. Functionalization reactions of chlorophyll a. i, ii, iii, iv, v, vi) extracting/processing one-pot reaction of compound 2 from the seaweed Spirulina maxima dehydrated in the presence of MeOH/H2SO4 5% (v/v) for 24h 0.8% . vii) MeONa / MeOH, r.t., 8h, 77%; viii) H2, 1 atm, Pd/C, 80%. Several azomethine and nitrile oxide dipoles were tested in the 1,3- dipolar cycloaddition reactions. Nevertheless, none of the studied conditions provided the desired cycloaddition adduct (bacteriochlorin). In some cases, decarboxylation by-products or total/partial substrate 4 degradation was observed. Scheme 2. Synthesis of new bacteriochlorins. An alternative method for the synthesis of bacteriochlorins using a cycloaddition approach was designed starting from the vinyl-chlorin 13 and Nphenylmaleimide (15) (Scheme 3). The synthesis of compound 13 was accomplished starting from compound 4 by dihydroxylation reaction with OsO4 (67%) followed by double dehydration in 1,2-dichlorobenzene (30%). The most promising results from cycloaddition reaction were obtained with 13 and 15 with yields around 47% (75:25 ratio of diastereoisomers determined by 1H-NMR spectroscopy). Scheme 3. Synthesis of new bacteriochlorins. The synthesized compounds were characterized by 1D and 2D NMR and UV-vis spectroscopy, infra-red and mass spectrometry. Some preliminary photophysical studies, such as photobleaching, were also conducted in order to qualify bacteriochlorin compound 14 as a potential photosensitizer. Moreover, aggregation studies by UV-vis were performed, which confirmed the low aggregation of the obtained bacteriochlorins. / Neste trabalho foram realizados estudos de modificações estruturais no metil-feoforbídeo a (2), um derivado da clorofila a (1) extraída da alga Spirulina maxima. O objetivo principal foi obter compostos de baixa agregação e com características fotofísicas adequadas para aplicações em Terapia Fotodinâmica (PDT), buscando, por exemplo, transformar os derivados do tipo clorina em bacterioclorinas a partir de reações de cicloadição. O uso da clorofila a (1) foi motivado pela disponibilidade, baixo custo e por fazer parte de vários estudos de nosso grupo de pesquisa. Assim, inicialmente foi desenvolvido um método de extração/transformação da clorofila a fornecendo diretamente o composto 2 (Esquema 1). Neste processo foi empregada uma extração/transesterificação one-pot de 1, em uma solução ácida de metanol. Os rendimentos deste processo estiveram em torno de 0,8% a partir da alga desidratada. Em seguida, o composto 2 foi transformado em 3 (77%) e posteriormente hidrogenado para fornecer 4 (80%). Após a preparação de 4 foram iniciados alguns estudos de cicloadição visando preparar um derivado do tipo bacterioclorina (Esquema 2). Esquema 1. Reações de funcionalização do pigmento natural clorofila a. i, ii, iii, iv, v, vi) extração/transformação one-pot do composto 2 da reação da alga Spirulina maxima desidratada na presença de MeOH/H2SO4 5% (v/v) por 24h, 0,8% . vii) MeONa/MeOH, t.a., 8h, 77%; viii) H2, 1 atm, Pd/C, 80%.Para as reações de cicloadição 1,3-dipolar propostas, foram testados alguns dipolos do tipo azometino e óxido de nitrilo. Vários dos estudos realizados não forneceram os produtos de cicloadição desejados (bacterioclorina). Em algumas situações foram obtidos subprodutos de descarboxilação ou foi verificada degradação total/parcial do substrato 4. Esquema 2. Síntese de novas bacterioclorinas. Uma segunda abordagem visando à síntese de bacterioclorinas a partir de cicloadições foi delineada partindo-se da vinil-clorina 13 realizando-se uma reação de Diels-Alder com a N-fenilmaleimida (15) (Esquema 3). A síntese do composto 13 foi realizada a partir do composto 4 pela reação de bis-hidroxilação com OsO4 (67%) seguido da dupla desidratação em 1,2 diclorobenzeno (30%). Os melhores resultados da reação de cicloadição entre 13 e 15, apresentaram rendimentos na ordem de 47% (proporção aproximada de 75:25 dos diastereoisômeros determinada por RMN de 1H). Esquema 3. Síntese de novas bacterioclorinas. Os compostos sintetizados neste trabalho foram caracterizados utilizando-se técnicas de espectroscopia de RMN 1D e 2D, espectroscopia na região do UV-vis, espectroscopia na região do infravermelho e espectrometria de massas. Ao longo das abordagens sintéticas foram realizados alguns estudos fotofísicos preliminares, como photobleaching, de modo a qualificar a bacterioclorina 14 enquanto potencial fotossensibilizador. Também foi realizado estudo de agregação por UV-vis no qual se confirmou a baixa agregação das bacterioclorinas obtidas.

Made available in DSpace on 2016-06-02T20:36:49Z (GMT). No. of bitstreams: 1 5703.pdf: 9636340 bytes, checksum: f0c2d44d2cef3dc3b41ae4d5b56d8d1c (MD5) Previous issue date: 2011-08-05 / Universidade Federal de Sao Carlos / In the present work, the lanostane triterpenes Lanosta-8,24-diene-3β,23-diol and Lanosta-8,23-diene-3β,25-diol were isolated from the basidiomycete Scleroderma sp., an extremely rich source of triterpenes and not yet reported as having it. The molecular structures were completely determined by 1D and 2D NMR and mass spectrometry (MS) analyses with fragmentation mechanisms being also suggested. These and other substrates were considered for terpenoids metabolism study in Xylaria sp., a micro-organism known from previous projects, at the research group LaBioMMi, by living in mutuality with Sapindus saponaria, a saponins producer plant, known for its antifungal metabolites. Different substrates were considered for fungal experiments, including oleanolic acid, isolated from clove and identified by 1H NMR, stevioside, obtained from commercial source, avenacosides A and B from oats, used in its natural way (known for being rich in these glycosides) and the previously isolated lanosterols from Scleroderma sp. As in their habitat, Xylaria fungus has proved to have great glycosides affinity, promoting deglycosylations reactions or even combining them with different sugar patterns. Oleanolic acid was completely consumed by the micro-organism, while lanosterol were fully incorporated into the fungus mycelium. Using high-resolution LC/MS analysis with Q-TOF hybrid analyzer, the metabolites were accurately identified so as some biotransformation products. / No presente trabalho foram isolados os triterpenos lanostanos Lanosta-8,24-diene-3ß,23-diol e Lanosta-8,23-diene-3ß,25-diol do basidiomiceto Scleroderma sp., uma fonte rica em triterpenos e ainda não reportada como produtora destes metabólitos. As estruturas moleculares foram completamente determinadas por RMN 1D e 2D e análises de espectrometria de massas, tendo ainda as fragmentações propostas. Esses e outros substratos foram considerados para o estudo do metabolismo de terpenóides em Xylaria sp., um micro-organismo conhecido de pesquisas anteriores do grupo LaBioMMi por viver em mutualismo com Sapindus saponaria, uma planta rica em saponinas, que são metabólitos conhecidos pelo potencial antifúngico. Diferentes substratos foram utilizados nos experimentos com o fungo, dentre eles o ácido oleanólico isolado do cravo da Índia (com sua estrutura determinada por RMN 1H), steviosídeo, proveniente de fonte comercial, avenacosídeos A e B, utilizados sem isolamento prévio a partir da aveia (a qual é uma fonte rica nesses glicosídeos) e os lanosteróis isolados de Scleroderma sp. Assim como em seu habitat, a Xylaria mostrou grande afinidade pelos glicosídeos, promovendo reações de desglicosilações ou mesmo acumulando-os com diferentes padrões de glicosilação. O ácido oleanólico foi completamente consumido pelo micro-organismo, enquanto que os lanosteróis foram totalmente incorporados ao micélio do fungo. Através de análise em LC/MS de alta resolução com analisador híbrido Q-TOF foi possível determinar com precisão a identidade dos metabólitos utilizados, assim como alguns produtos de biotransformação.