Made available in DSpace on 2016-06-02T20:34:04Z (GMT). No. of bitstreams: 1 TeseSYS.pdf: 12958851 bytes, checksum: b27e3b157a5ab30383540f9953fc104a (MD5) Previous issue date: 2006-06-02 / Universidade Federal de Minas Gerais / This work involved the bioassay-guided study of Helietta puberula (Rutaceae) e Simarouba versicolor (Simaroubaceae). The biossays were carried out with leaf-cutting ants Atta sexdens rubropilosa, antifungal activity against the symbiotic fungus Leucoagaricus gongylophorus and inhibition of the enzymatic activity of pectinases. The results obtained with extracts and fractions showed that the selected plants were promising source of compounds in the control against leafcutting ants. The phytochemical investigation of active extracts and fractions allowed the isolation of 31 compounds of differences types such as: steroids ( β- sitosterol, stigmasterol, sitostenone, stigmastenone, campestenone and 3 β-O-3 β- D-glucopyranosil sitosterol); triterpenes of the tirucalane type (22S,3 α- dihydroxytirucal-7,24-dien-23-one), esqualene (eurilene) and lupanic (lupeol and lupenone); quinoline alkaloids (N-metil-4-methoxy-2-quinolone), furoquinolinic alkaloids (dictamine, γ-fagarine, kokusaginine, maculine, flindersiamine), acridonic alkaloids (arborinine); canthinonic alkaloids (4,5- dimethoxycanthin-6-one and 5-methoxycanthin-6-one) and of the β-carboline types of alkaloids (7-hidroxy-ethyl β-carboline and 7-hidroxy-1,1 -propyonate of methyl β-carboline); flavonoids (flavone, isosakuranetine and 5,7,3 ,4 ,5 - pentamethoxyflavone); one stilbene (22); coumarins (7-hidroxycoumarin, 6,7- dimethoxycoumarin, 6-hydroxy-7,8-dimethoxycoumarin, 3 -(1 ,1 - dimethylalyl)-isoescopoletin, methylether-graveliferone); quassinoids (glaucarubolone and glaucarubinone) and two cinnamic acids derivatives (methyl 3,4,5-trimethoxycinnamate and geranyl 3,4-dimethoxycinnamate). Among these substances, furoquinoline and canthinonic alkaloids, flavone and the quassinoids were active against the L. gongylophorus fungus; inhibiting 100% of its grownth and also showed inhibition against leaf-cutting ants survivel biossay. The study of chitosan as matriz on the microencapsulation process; to the encapsulation of the bioactive compound, reduction of the mammalian toxicity, protection Humans and also the environment; showed very promising results, but more study is necessary mainly to reduce the size of the particle / Este trabalho apresenta o estudo fitoquímico de duas plantas: Helietta puberula (Rutaceae) e Simarouba versicolor (Simaroubaceae), biomonitorado através de ensaios em três modelos biológicos: formigas cortadeiras (Atta sexdens rubropilosa), seu fungo simbionte (Leucoagaricus gongylophorus) e enzimas pectinases. Os ensaios biológicos de extratos e frações mostraram que as plantas selecionadas são promissoras no controle de formigas cortadeiras. O estudo fitoquímico dos extratos e frações ativas levou a identificação de 34 substâncias de diferentes classes: esteróides (sitosterol, estigmasterol, sitostenona, estigmastenona, campestenona e 3 β-O-3 β-D-glucopiranosil sitosterol); triterpenos do tipo tirucalano (22S,3 α-diidroxitirucala-7,24-dien-23-ona); esqualeno (eurileno) e lupânico (lupeol e lupenona); alcalóides do tipo quinolônico (N-metil-4-metóxi- 2-quinolona, furoquinolínicos (dictamina, γ-fagarina, kokusaginina, maculina, flindersiamina), acridônico (arborinina); cantinônicos (4,5-dimetóxicantin-6-ona e 5-metóxicantin-6-ona) e do tipo β-carbonílicos (7-hidroxi-1-etil β-carbolina e 7-hidroxi-1,1 -propionato de metila β-carbolina); flavonóides (flavona, isosakuranetina e da 5,7,3 ,4 ,5 -pentametóxiflavona) e do estilbeno; de cumarinas (7-hidróxicumarina, 6,7-dimetóxicumarina, 6-hidróxi-7,8- dimetóxicumarina, 3 -(1 ,1 -dimetilalil)-isoescopoletina, metiletergraveliferona); quassinóides (glaucarubolona e glaucarubinona) e de dois derivados do ácido cinâmico (3,4,5-trimetoxicinamato de metila e 3,4- dimetoxicinamato de geranila). Dentre essas substâncias, os alcalóides do tipo furoquinolínicos e cantinônicos, a flavona e os quassinóides, apresentaram inibição de até 100% no crescimento do fungo L. gongylophorus e sobrevivência média de 7 dias num experimento de 23 dias nos ensaios com A. sexdens rubropilosa. O estudo da quitosana como matriz no processo de microencapsulação, visando a estabilidade do princípio ativo, a redução na toxicidade em mamíferos e proteção ao homem e ao meio ambiente, mostrou-se muito promissora, necessitando-se ainda um estudo mais aprofundado para redução no tamanho das cápsulas para futuramente vir a ser utilizada para microencapsulamento de substâncias ativas.

Made available in DSpace on 2016-06-02T20:34:04Z (GMT). No. of bitstreams: 1 TeseTRA.pdf: 6023275 bytes, checksum: 87890c0b29cd99b76805b302af8bc9ac (MD5) Previous issue date: 2006-05-17 / This work involved the study of plant extracts of the Rutaceae species. Among 16 extracts tested in assays carried out with T. cruzi gGAPDH and L. tarentolae APRT enzymes and trypomastigote forms of T. cruzi, four showed significant activities at least in one of them. The petroleum ether extract of stems of Conchocarpus macrophyllus (CMCF) and the methanolic extract of leaves of Rauia sp (RFM) showed 94% and 75% of parasitic lyses on trypomastigote forms of T. cruzi. The methanolic extract of leaves of Rauia sp1 (RF1M) showed 74% of inhibition of gGAPDH enzyme and the dichloromethane extract of stems of Conchocarpus macrophyllus (CMCD) showed 74% of inhibition of APRT enzyme. The methanolic extract of leaves of Rauia sp1 (RF1M) showed 67,9% of inhibition on the APRT enzyme assay. The phytochemical study of Rauia sp allowed the isolation of 30 substances among them 4 are described for the first time, the coumarins 3-ethylrauianin and 5-methoxyrauianin and the alkaloids 7-hydroxy-8-methoxy-N-methylflindersine and 8- hydroxy-Nmethylflindersine that is described as a natural product at first time. Among them 26 have already been described in the literature the coumarins murranganone, 7- methoxy-8-(2-acetyloxy-3-methyl-1-oxobut-2-enyl)-coumarin, isomurranganone, murralongin, murrangatin, munomicrolin, murrangatin diacetate, rauianin, umbeliferone e isoescopoletin, the alkaloids N-methyl-4-methoxy-2-quinolone, mirtopsine, dictamine, γ-fagarine, skimmianine, Z-dimethylrhoifolinate, zantobungeanine, zantodioline and veprissine, the amides paprazine and N-transferuloyltyramine, the flavone 3,7,4 -trimethoxy-5-hydroxyflavone, the lignan siringaresinol, the fenolic coumpound vanilic acid and the steroids β-sitosterol and stigmasterol. The phytochemical study of Conchocarpus macrophyllus allowed the isolation of 4 substances the alkaloids arborinine and methylarborinine and the steroids β-sitosterol and stigmasterol. Among the substances tested in one or more assays none of them showed satisfactory results, leading to conclude that either the active compounds have not been isolated or their activity is related to the combination effects. / Este trabalho envolveu estudo fitoquímico de plantas pertencentes à família Rutaceae. Foram testados 16 extratos de plantas pertencentes à família Rutaceae em ensaios sobre as enzimas GAPDH de T. cruzi e APRT de L. tarentolae e sobre formas tripomastigotas de T. cruzi quatro apresentaram atividades satisfatórias em pelo menos um dos ensaios a que foram submetidos. O extrato em éter de petróleo do caule de Conchocarpus macrophyllus (CMCE) e o extrato metanólico das folhas de Rauia sp (RFM) apresentaram 94% e 75% de lise parasitária frente às formas tripomastigotas de T. cruzi. O extrato metanólico das folhas de Rauia sp1 (RF1M) apresentou 74% de inibição frente à enzima GAPDH e o extrato diclorometânico do caule de Conchocarpus macrophyllus (CMCD) apresentou 77% de inibição sobre a enzima APRT. O extrato metanólico das folhas de Rauia sp1 (RF1M) apresentou resultado próximo ao considerado satisfatório (67,9% de inibição) no ensaio sobre a enzima APRT. O estudo fitoquímico de Rauia sp resultou no isolamento de 30 substâncias. Destas, 4 são inéditas na literatura; as cumarinas 3-etilrauianina e 5-metoxirauianina e os alcalóides 7-hidroxi-8-metoxi-N-metilflindersina e 8-hidroxi-N-metilflindersina, este último não foi ainda relatado como produto natural e 26 já foram descritas na literatura; as cumarinas murranganona, 7-metoxi-8-(2-acetoxi-3-metil-1-oxobut-2- enil)-cumarina, isomurranganona, murralongina, murrangatina, munomicrolina, acetato de murrangatina, rauianina, umbeliferona e isoescopoletina, os alcalóides Nmetil- 4-metoxi-2-quinolona, mirtopsina, dictamina, γ-fagarina, esquimianina, Zrhoifolinato de dimetila, zantobungeanina, zantodiolina e veprissina, as amidas paprazina e N-trans-feruloiltiramina, a flavona 3,7,4 -trimetoxi-5-hidroxi flavona, a lignana siringaresinol, o composto fenólico ácido vanílico e a mistura dos esteróides sitosterol e estigmasterol. O estudo de Conchocarpus macrophyllus resultou no isolamento de 4 substâncias, os alcalóides acridônicos arborinina e metilarborinina e a mistura dos esteróides sitosterol e estigmasterol. Dentre as substâncias que tiveram o potencial biológico avaliado frente a um ou mais ensaios nenhuma apresentou resultado satisfatório.

Made available in DSpace on 2016-06-02T20:34:05Z (GMT). No. of bitstreams: 1 TeseAPM.pdf: 3545061 bytes, checksum: 5ef30df4bdf3fc845cd85984795b7e0c (MD5) Previous issue date: 2006-05-15 / This work describes the results of the search for insecticidal compounds from the Meliaceae family. The samples assayed against fall armyworm Spodoptera frugiperda were the hexane, methanol and hydromethanol extracts of twigs, leaves, seeds, aril and exocarp of T. catigua; twigs, leaves, fruits, seeds, aril and exocarp of T. claussenii and twigs, leaves and fruits of T. elegans. The hexane and methanol extracts of leaves, hexane of twigs and methanol of fruits from T. claussenii showed to possess the higher insecticidal activity against S. frugiperda. Nevertheless, the hexane and methanol extracts of fruits from T. elegans showed the highest rate of larval mortality (100 %). The hydromethanol extract of T. elegans showed moderate insecticidal activity and also showed growth inhibition and antifeedant activities. The active extracts were fractionated and the chemical study led to isolation of 20 compounds, including limonoids, triterpenes, coumarins, steroids and one sesquiterpene. From the hexane extract of leaves from T. claussenii were isolated the steroids β-sitosterol, stigmasterol, campesterol and sitostenone; the triterpenoids α-amyrin, β-amyrin, lupeol, lupenone, in addition to the cycloartane triterpene 24-methylen-26- hydroxycicloartan-3-on and sesquiterpene criptomeridiol. From the methanol extract of leaves of T. claussenii were isolated the steroids 24-methylen-3 β,4 β,22 α- trihydroxy-colesterol and 3- β-O- β-D-glucopyranosilsitosterol. From the methanol extract of fruits from T. elegans were isolated the coumarins 6,7- dimethoxycoumarin, 6-methoxy-7-hydroxycoumarin e 7-hydroxycoumarin. The same coumarins and the steroids were also isolated from the hexane extract of fruits from T. elegans. The limonoids cedrelone and 11 β-methoxycedrelone were isolated from the hexane extract of aril from T. catigua. Limonoids methylangolensate together with the photogedunin epimeric mixture were isolated from the methanol extract of aril from T. catigua. This is first report of the isolation of limonoids from T. catigua. Triterpens isolated from Cedrela fissilis and limonoids isolated from Cipadessa fruticosa (Meliaceae) were tested against S. frugiperda. Among them odoratol showed the best results (insecticidal activity, growth inhibition and antifeedant). Febrifugin A showed the highest rate of mortality of total cycle (at 50 mg kg-1) of 73.3%. / Este trabalho apresenta os resultados obtidos dos ensaios biológicos dos extratos hexânico, metanólico e hidrometanólico de ramos, folhas, sementes, arilo e exocarpo de T. catigua; ramos, folhas, frutos, sementes, arilo e exocarpo de T. claussenii e ramos, folhas e sementes de T. elegans sobre à lagarta-do-cartucho do milho Spodoptera frugiperda. Os extratos hexânico e metanólico de folhas, hexânico de ramos e metanólico de frutos de T. claussenii apresentaram alta atividade inseticida frente a S. frugiperda. No entanto, os extratos hexânico e metanólico de frutos de T. elegans causaram a mais alta taxa de mortalidade larval (100 %), já o extrato hidrometanólico apresentou atividade inseticida moderada e mostrou-se inibidor de crescimento e da alimentação. Os extratos ativos foram fracionados e o estudo químico levou ao isolamento de 20 metabólitos, incluindo limonóides, triterpenos, cumarinas, esteróides e um sesquiterpeno. Do extrato hexânico de folhas de T. claussenii foram isolados os esteróides β-sitosterol, estigmasterol, campesterol, sitostenona e os triterpenóides α-amirina, β-amirina, lupeol, lupenona, além do triterpeno do tipo cicloartano 24-metileno-26-hidroxicicloartan-3-ona e do sesquiterpeno criptomeridiol. Do extrato metanólico de folhas de T. claussenii foram isolados somente os esteróides 24-metileno-3 β,4 β,22 α-triidroxi-colesterol e - β-O- β-Dglucopiranosil sitosterol. Ao se fracionar o extrato metanólico de frutos de T. elegans foram isoladas as cumarinas 6,7-dimetoxicumarina, 6-metoxi-7- hidroxicumarina e 7-hidroxicumarina. As mesmas cumarinas e os esteróides foram novamente isolados do extrato hexânico de frutos de T. elegans. Os limonóides cedrelona e 11β-metoxicedrelona foram isolados do extrato hexânico do arilo de T. catigua. Além destes limonóides, o angolensato de metila e a mistura epimérica de fotogedunina foram isolados do extrato metanólico do arilo de T. catigua. Este é o primeiro relato do isolamento de limonóides de T. catigua. Triterpenóides isolados de Cedrela fissilis e limonóides isolados de Cipadessa fruticosa (Meliaceae) foram ensaiados frente a S. frugiperda. Dentre os triterpenóides testados, o odoratol apresentou os melhores resultados (atividade inseticida, inibidor de crescimento e inibidor de alimentação). A febrifugina A causou a mais alta taxa de mortalidade do ciclo total (a 50 mg kg-1) de 73,3%.

Made available in DSpace on 2016-06-02T20:34:06Z (GMT). No. of bitstreams: 1 TeseCD.pdf: 6879107 bytes, checksum: c167cda73860ef0c5e5b15af0e2e7280 (MD5) Previous issue date: 2006-08-01 / The use of herbal medicines in the Brazilian market has increased in the last few decades. Therefore, the quality control for herbal products, as well as traditional medicines, is extremely important and for both: the manufactured products and the raw material. However, to guarantee the product s quality implies in an increase of the process costs in an industry. Currently, the quality of herbal extracts is predicted by analysis of selected marker compounds, which are often characteristic chemicals of a specific herb, but that many times do not present any relation with bioactivity. As a consequence, the marker-based approach is an incomplete and unsatisfactory method for quality control of herbal medicines In order to cope with this problem, current developments in improving sensitivity and analytical capacity of known techniques, had made possible the plant s complex extract evaluation. The present work describes an analytical methodology for the phytomedicines catuaba, espinheira-santa and guaco, based on the metabolic profile approach, where the Nuclear Magnetic Resonance techniques, as well as the High Performance Liquid Chromatography, are employed to obtain a fingerprinting of these herbal medicines. Nevertheless, due to the complex spectral data profile (1H spectra and chromatograms) evaluation it was necessary to employ chemometrics. These multivariate methods made possible to extract some relevant information and to prove the authenticity of the analyzed commercial samples. The commercial catuaba samples analysis by HR-MAS NMR/ chemometrics showed be more efficient, when compared with liquid NMR, indicating that the species sold as the phytomedicine catuaba is Trichillia catigua. Whereas, the results obtained for espinheira-santa showed an opposite situation pointing out that the efficiency of the HR-MAS is correlated with the physiological constitution of the plant material analyzed. Beside NMR results, HPLC analysis showed that the majority of the espinheira-santa commercial samples do not employ Maytenus ilicifolia species. The guaco results obtained by both, NMR and HPLC techniques were inconclusive needing the use of a complementary technique. Therefore, the present work also describes the use of the High Performance Liquid Chromatography coupling with Abstract Tandem Mass Spectrometry, by means of SRM experiments, to evaluate some commercial guaco samples. This technique provides the detection of the coumarin 1,2-benzopyrone in all the analyzed samples, due to the SRM high sensitivity, thus certifying its authenticity. The results obtained by Nuclear Magnetic Resonance, High Performance Liquid Chromatography and chemometrics, proved to be valuable tools for the evaluation of complex phytomedicines matrix. In specific cases, where high sensitivity in the analytical method is required, Mass Spectrometry can be used as an additional technique. / A utilização dos fitoterápicos no mercado nacional tem se tornado crescente nas últimas décadas. Desse modo, o controle de qualidade para os produtos de origem vegetal, assim como para os medicamentos tradicionais, é de extrema importância; e não só para o produto tecnologicamente acabado, como também para sua matéria-prima. Contudo, garantir a qualidade de um produto implica em um aumento de custos para as indústrias. Atualmente, uma das maiores práticas para a padronização das ervas baseia-se na identificação de marcadores químicos, característicos para as espécies, mas que muitas vezes não apresentam qualquer relação com sua atividade biológica. Assim sendo, essa abordagem se mostra incompleta, ou muitas vezes, insatisfatória para o controle de qualidade desse tipo de medicamento. Para contornar esse problema recentes desenvolvimentos, principalmente no aumento da sensibilidade e na capacidade analítica das técnicas existentes, tornaram possível a avaliação de extratos de plantas complexos em sua totalidade. O presente trabalho descreve uma metodologia de análise para os fitofármacos catuaba, espinheira-santa e guaco, fundamentada na abordagem analítica conhecida como metabolic profile, onde a Ressonância Magnética Nuclear, assim como a Cromatografia Líquida de Alta Eficiência, são empregadas para a obtenção do fingerprinting desses fitomedicamentos. Entretanto, os dados gerados (espectros de 1H e cromatogramas) apresentaram um perfil muito complexo sendo então necessária a utilização da quimiometria para sua avaliação. O emprego de métodos multivariados possibilitou à extração de informações relevantes, assim como, a constatação da autenticidade das amostras comerciais analisadas. O emprego da RMN de HR-MAS, juntamente com a quimiometria, na análise de amostras comerciais de catuaba, se mostrou mais eficiente quando comparado a RMN de líquidos, indicando que a espécie mais comercializada como o fitofármaco é a Trichillia catigua. Entretanto, os resultados obtidos para a espinheira-santa foram contrários, evidenciando a limitação da HR-MAS no que diz respeito à constituição fisiológica do material analisado. Adicionalmente a RMN, a utilização da CLAE Resumo possibilitou verificar que a maioria das amostras comerciais de espinheira-santa não utiliza a espécie Maytenus ilicifolia em sua formulação. Já para o fitofármaco guaco os resultados obtidos, tanto com a RMN como com a CLAE, se mostraram contraditórios, sendo necessária a utilização de uma outra técnica analítica complementar. Assim sendo, o trabalho também descreve a utilização do acoplamento da CLAE com a Espectrometria de Massas Tandem, através dos experimentos de SRM, na avaliação de extratos de amostras comerciais de guaco. O emprego dessa técnica permitiu a detecção da cumarina 1,2-benzopirona em todas as amostras analisadas, devido à sua elevada sensibilidade, atestando assim suas autenticidades. Portanto, através dos resultados obtidos no desenvolvimento deste trabalho, pôde-se concluir que a Ressonância Magnética Nuclear, assim como a CLAE, aliada a Quimiometria, apresentam um grande potencial em estudos que visam a avaliação de matrizes complexas, como os medicamentos fitoterápicos. Em casos específicos, onde uma maior sensibilidade no método analítico se faz necessária, a Espectrometria de Massas pode ser empregada de forma complementar.

Made available in DSpace on 2016-06-02T20:34:07Z (GMT). No. of bitstreams: 1 1955.pdf: 5674571 bytes, checksum: 8343a92ca8c330573a90a68bfe13d958 (MD5) Previous issue date: 2008-04-18 / Financiadora de Estudos e Projetos / The species R. praetermissa is native from Amazonia. Plant recently classified, it does not give biological and/or chemical in the literature. This fact has led to this study, which can lead to the correct chemosystematic positioning of the genus within the family Rutaceae. From the phytochemical study of the roots of R. praetermissa concluded in 2005, mainly were found alkaloids derived from tryptophan and limonoids. The second step was the phytochemical study of some fractions of the dichloromethane extract of the roots and the extracts of the stem and leaves of the species. Alkaloids have been isolated and identified (indole, furoquinolines and quinolones), triterpenes (cycloartanes and friedelanes), steroids and a derivative of cinnamic acid. Among the substances found can highlight four substances not reported in the literature: two alkaloids, a diterpene and the derivative of cinnamic acid. A collection of 120 natural products isolated by the group of Natural Products/UFSCar was subjected to a series of enzymatic reactions that explained the mechanism of action of the substances considered active against photosynthesis in vitro in chloroplasts isolated from the leaves of spinach. It was possible to clarify the mechanism of action of 30 substances, which allowed so far, the publication of articles in indexed international journals and conferences (nationals and internationals). The prospects are quite interesting, especially as regards the implementation of this new line of research, not only in the Department of Chemistry (UFSCar), but also in Brazil, so that later are found models for new herbicides inhibitors of photosynthesis. / A espécie R. praetermissa é nativa da Amazônia. Planta recentemente classificada, não apresenta dados biológicos e/ou químicos na literatura. Este fato levou a realização deste estudo, o que pode levar ao correto posicionamento quimiossistemático do gênero dentro da família Rutaceae. A partir do estudo fitoquímico das raízes de R. praetermissa concluído em 2005, foram encontrados principalmente alcalóides derivados do triptofano e limonóides. Nesta segunda etapa foi realizado o estudo fitoquímico de algumas frações do extrato em diclorometano das raízes e ainda os extratos do caule e folhas da espécie. Foram isolados e identificados alcalóides (indólicos, furoquinolínicos e quinolônicos), triterpenos (cicloartanos e friedelano), esteróides e um derivado do ácido cinâmico. Dentre as substâncias encontradas podemos destacar quatro substâncias não relatadas na literatura: dois alcalóides, um diterpeno e um derivado do ácido cinâmico. Uma coleção de 120 produtos naturais isolados pelo grupo de PN/UFSCar foi submetida a uma série de reações enzimáticas que esclareceram o mecanismo de ação das substâncias consideradas ativas frente à inibição da fotossíntese in vitro em cloroplastos isolados das folhas de espinafre. Foi possível esclarecer o mecanismo de ação de 30 substâncias, o que possibilitou até o momento, a publicação de artigos em revistas indexadas internacionais e congressos (nacionais e internacionais). As perspectivas são bastante interessantes, principalmente no que diz respeito à implantação desta nova linha de pesquisa não só no Departamento de Química (UFSCar), mas também no Brasil, para que posteriormente sejam encontrados modelos para novos herbicidas inibidores da fotossíntese.

Made available in DSpace on 2016-06-02T20:34:12Z (GMT). No. of bitstreams: 1 2528.pdf: 3813512 bytes, checksum: fa4478664a26cf6d9e862070fa69b204 (MD5) Previous issue date: 2009-07-17 / Financiadora de Estudos e Projetos / This work reports the identification of quinolizidíne alkaloids (QA) and other non-alkaloidal secondary metabolites found in plants, and a discussion on the likely biosynthetic pathway of quinolizidine alkaloids. Phytochemical study of A. dasycarpum resulted in the isolation of 26 substances, 9 of them quinolizidine alkaloids: homo-6-epipodopetaline, acosmine, acosminine, dasycarpumine, bowdechine, panascomine, a mixture of lupanine and lupanocosmine and 24-methyl-homo-6-epipodopetaline, the later reported for the first time in the literature; two styryl α-pyrones: 12-O-desmethylyangonine and 12-O-βDglucopyranosyldesmethylyangonine; two triterpenes: lupenone and lupeol, the later in large amounts; a mixture of steroids: sistosterol, campesterol and stigmasterol, and a chlorogenic acid: 5-O-cafeoilquinic acid. It was also isolated 2,3-dihidrobenzofuran derivatives: bowdenol and a mixture containing eight fatty acid esters of bowdenol, bowdenyl myristate, pentadecanoate, palmitoleate, palmitate, margarate, linoleate, oleate and stearate esters . The investigation of the methanol extract from the of roots of Acosmium dasycarpum using GC-MS, led to detect 30 quinolizidine alkaloids: α-isosparteine, β-sparteine, 5,6 dehydrosparteine, sparteine, ammodendrine, 4-hydroxysparteine, N- methyl angustifoline, lupanine, aphylline, multiflorine, homo-6-epipodopetaline, 18-epipiptanthine, piptanthine, podopetaline, ormosanine, homosweetinine, homoormosanine, homo-18-epiamazonine, homopiptanthine, homo-18-epipiptanthine, homopodopetaline, lupanocosmine, dasycarpumine, dasycosmine, acosmine, panascosmine and acosminine, santanine, isodasinine, dasinine and dasycosmine, the last four are compounds are reported here for the first time. It has been suggested a possible biogenesis for the quinolizidine alkaloids with lupine, acosmine and diazo-adamantane skeleta. / O presente trabalho relata a identificação de alcalóides quinolizidínicos (AQ) além de outros metabólitos secundários não alcaloídicos encontrados nessa planta, e tece comentários sobre o provável caminho biossintético de alcalóides quinilozidínicos. O estudo fitoquímico resultou no isolamento de 26 substâncias sendo 9 alcalóides quinolizidínicos: homo-6- epipodopetalina, acosmina, acosminina, dasicarpumina, bowdequina, panascomina; mistura de lupanina e lupanocosmina e 24-metil-homo-6-epipodopetalina, esta ultima é nova na literatura, duas estiril pironas: 12-O-desmetiliangonina, 12-O-βDglicopiranosil demetiliangonina; dois triterpenos: lupenona e lupeol, este em grande quantidade e a mistura dos esteróides: sistosterol, campesterol e estigmasterol, além do ácido clorogênico: ácido 5-O-cafeoilquínico. Foram isolados também o derivado 2,3-diidrobenzofurano: bowdenol e uma mistura contendo oito ésteres de ácidos graxos de bowdenol: miristato de bowdenila, pentadecanoato de bowdenila, palmitoleato de bowdenila, palmitato de bowdenila, margarato de bowdenila, linoleato de bowdenila, oleato de bowdenila e estearato de bowdenila. O estudo do extrato metanólico da raiz da Acosmium dasycarpum utilizando CG-EM, permitiu identificar 30 alcalóides quinolizidínicos: α-isoesparteina, β-isoesparteina, esparteina, 5,6 diidroesparteina, amodendrina, 4-hidroxiesparteina, Nmetiangustifolina, lupanina, afilina, multiflorina, homo-6-epipodopetalina, 18- epipiptantina, piptantina, podopetalina, homo-6-epipodopetalina, homoormosanina, ormosanina, homo-18-epiamazonina, homo-18-epipiptantina, homopodoetalina, homopiptantina, lupanocosmina, dasicarpumina, acosmina, panascosmina, acosminina, santanina, isodasinina, dasinina e dasicosmina, as quatro últimas são substância inéditas. Foi sugerida uma provável biogênese para os alcalóides quinolizidínicos com esqueleto lupínico, diaza-adamantano e acosmínico.

Made available in DSpace on 2016-06-02T20:34:16Z (GMT). No. of bitstreams: 1 2112.pdf: 5693137 bytes, checksum: ed718439c222617a1ea873a2cb8344f3 (MD5) Previous issue date: 2008-10-24 / Universidade Federal de Minas Gerais / The present work describes the search of bioactive secondary metabolites isolated from plants, against enzymes: gGAPDH (glyceraldehydes-3- phosphate dehydrogenase from Trypanosoma cruzi and lysosomal cathepsins K, V, L and S. This work is divided in two parts: Part I: Study of the oil from the nut shells of Anacardium occidentale (Anacardiaceae) - Chagas disease, a parasitic infection caused by the flagellate protozoan Trypanosoma cruzi, is a major public health problem affecting millions of individuals in Latin America. On the basis of the essential role in the life cycle of T. cruzi, the enzyme gGAPDH has been considered an attractive target for the development of novel antitrypanosomatid agents. From the dicloromethane extract of A. occidentale were isolated phenolic compounds which were investigated on their inhibition activity against gGAPDH and trypomastigote forms of T. cruzi. The most promising compound was the 6-n-pentadecylsalicylic acid (AC1) with IC50 values of 28 μM against gGAPDH and 66.7 μg/mL against trypomastigote forms. In addition, a detailed mechanistic characterization of the effects of AC1 on the T. cruzi gGAPDHcatalyzed reaction showed clear noncompetitive inhibition with respect to both substrate G-3-P and cofactor NAD+. Part II: Study of natural products and synthetic derivatives searching for inhibitors of lysosomal cysteine peptidases - After completing the human genome, eleven lysosomal cysteine peptidases were identified. Those enzymes are involved in general protein degradation. The lysosomal cysteine peptidases are found in various tissues and those are found in many organs. Cathepsin K is associated to bone resorption, cathepsin L to skin cancer, at last cathepsins V and S are associated to the immune system. In this work, four enzymes (cathepsins K, V, L and S) were selected as a molecular target for the identification of new inhibitors. Some potent inhibitors of cathepsin V were found, and a study including kinetic characterization of the most potent inhibitors, including potency (IC50), mechanism of action and constant Ki was carried out. The most promising compound is the acridone alkaloid citbrasine (107), with values of IC50 of 1.2 μM and Ki of 0.24 μM. Moreover, it was determined that citbrasine is a competitive inhibitor against cathepsin V in relation to the substrate ZFRMCA. Additionally, it was carried out the study of molecular modeling for acridone alkaloids that showed significant inhibition of cathepsin V. / Este trabalho descreve a busca de metabólitos secundários bioativos de plantas, com o intuito de serem avaliados contra as enzimas: gGAPDH (gliceraldeído-3-fosfato desidrogenase glicossomal) do Trypanosoma cruzi e as catepsinas lisossomais K, V, L e S. A descrição deste trabalho está dividida em duas partes. Parte I: Estudo do óleo das cascas da castanha de Anacardium occidentale (Anacardiaceae) - A doença de Chagas, uma infecção parasitária causada pelo protozoário flagelado Trypanosoma cruzi, é um importante problema de saúde pública que afeta milhões de pessoas na América Latina. Com base no papel essencial no ciclo de vida de T. cruzi, a enzima gGAPDH tem sido considerada um alvo atraente para o desenvolvimento de novos agentes tripanocidas. Do extrato diclorometânico das cascas da castanha de A. occidentale obtiveram-se compostos fenólicos que foram avaliados frente à enzima gGAPDH e as formas tripomastigotas de T. cruzi. A substância mais promissora foi o ácido 2-pentadecenil-6- hidroxibenzóico (AC 1), com valores de IC50 de 28 μM na enzima gGAPDH e 66,7 μg/mL nas formas tripomastigostas. Além disso, foi determinado que AC1 é um inibidor do tipo não-competitivo para a enzima gGAPDH em relação tanto ao substrato G-3-P (Ki = 2 μM ) quanto ao cofator NAD+ (Ki = 4 μM). Parte II: Estudo de produtos naturais e derivados sintéticos buscando inibidores de cisteíno peptidases lisossomais - Depois de completado o genoma humano, onze cisteíno peptidases lisossomais foram identificadas. Essas enzimas têm a função primária de degradar proteínas, de forma não seletiva, dentro do lisossomo e são encontradas em vários órgãos e tecidos. A catepsina K está associada ao processo de reabsorção óssea, catepsina L ao câncer de pele e as catepsinas V e S ao sistema imune. Neste trabalho, foram selecionadas quatro enzimas (catepsinas K, V, L e S) como alvos moleculares para a identificação de novos inibidores. Foi realizada a caracterização cinética dos inibidores mais potentes frente à catepsina V, através da potência biológica (IC50), mecanismo de ação e constante Ki. A substância mais promissora foi o alcalóide acridônico citibrasina (107), com valor de IC50 de 1,2 μM e Ki de 0,24 μM. Além disso, foi determinado que citibrasina é um inibidor do tipo competitivo para a catepsina V em relação ao substrato ZFRMCA. Adicionalmente foi realizado o estudo de modelagem molecular para os alcalóides acridônicos que apresentaram inibição significativa frente à catepsina V.

Made available in DSpace on 2016-06-02T20:34:16Z (GMT). No. of bitstreams: 1 2103.pdf: 9010606 bytes, checksum: 6ec32b7b3b1e18e59d2b173d7cd4775b (MD5) Previous issue date: 2007-11-23 / Universidade Federal de Minas Gerais / This work shows the isolation, identification of microorganisms from the species Khaya ivorensis and the identification of the pathogen that is attacking this plant on Bahia state (Brazil). In total seven strains of microorganisms from K. Ivorensis were isolated, but only six were identified. Two of them, Penicillium spp., Rhizopus spp., were identified according to their characteristics macro and micro morphological structures vegetative and reproductive. Four fungi were identified by the regions ITS 1 and/or ITS 2 of DNAr, by its morphological and microscopic characteristics. In addition, the Blast of the sequences of these regions confirmed the presence of the Pestalotiopsis crassiuscula 96%, Phomopsis sojae 95%, Lasiodiplodia theobromae, and its telemorfo Botryosphaeria rhodina 98%. Literature shows that Botryosphaeria rhodina is common in disease Canker in plant, similar occur in K. ivorensis, suggesting that this fungi is the pathogen in specie studded. After the identification of Khaya pathogen it was studded, yielding to isolation and identification of sixteen compounds from different classes: Des-methyl lasiodiplodin, lasiodiplodin, isocoumarin, two derivatives γ-butirolactones (4-propil-3-carbonyl-2- methyl-4-butanolideo and 4-propil-2-carbonyl-3-methyl-4-butenolideo), 11- hidroxijasmônic acid, 5-hidroximethylfurfural, tirosol, ergosterol, peroxido de ergosterol, steroids (stigmastenon, sitostenon and campestenon), nucleosídeos (5 - inosil, uridine e uracila), manitol and one triglycerides. Both derivatives γ- butirolactonas appear to be new in literature. The isolated compounds were identified by Nuclear Magnetic Ressonance 1D and 2D and Mass Spectrometry. The limonoids methyl angolenasate isolated in large amount from K. ivorensis symptomatic and 7- deacetoxy-7-oxogedunin isolated from Carapa guianensis, were bioassayed against the microorganisms Penicillium ssp., Phomopsis sojae and Botryosphaeria rhodina, in order to analyze if these fungi modify the structure of compounds. However, in some experiments were not observe any difference and in others, only hypothesis can be done by MS analyze. In a complementary study, compounds lasiodiplodin, ergosterol, 5 -inosil and mannitol were assayed as inhibitor of ATP synthesis, and only lasiodiplodin presented good results. / Este trabalho apresenta o isolamento, a identificação de microorganismos da espécie Khaya ivorensis e a identificação do patógeno que vem atacando esta espécie na Bahia. Foram isolados, no total, sete grupos de microorganismos da espécie K. ivorensis, mas apenas seis foram identificadas. Dois deles, Penicillium spp., Rhizopus spp., foram identificados de acordo com suas características macro e micro morfológico das estruturas vegetativas e reprodutivas. Quatro fungos foram identificados pelas regiões ITS 1 e/ou ITS 2 do DNAr, pelas suas características morfológicas e microscópicas e o Blast das seqüências das referidas regiões indicaram ser Pestalotiopsis crassiuscula 96%, Phomopsis sojae 95%, Lasiodiplodia theobromae, além de seu telemorfo Botryosphaeria rhodina 98%. Considerando o potencial de fitopatogênia descrito na literatura para os gêneros encontrados, a freqüência e localização dos fungos isolados, pode-se afirmar que Botryosphaeria rhodina é o agente causal da doença do plantio de K. ivorensis na Bahia. Após a identificação do patógeno de Khaya fez-se o estudo fitoquímico deste fungo, levando ao isolamento e identificação de 19 substâncias de diferentes classes: des-metil lasiodiplodina, lasiodiplodina, isocumarina, dois derivados γ- butirolactonas (4-propil-3-carbonil-2-metil-4-butanolideo e 4-propil-2-carbonil-3-metil- 4-butenolideo), ácido 11-hidroxijasmônico, 5-hidroximetilfurfural, tirosol, ergosterol, peróxido de ergosterol, esteróides (estigmastenona, sitostenona e campestenona), nucleosídeos (5 -inosil, uridina e uracila), manitol e um triglicerideo, dentre estas substâncias os dois derivados γ-butirolactonas possivelmente são novos na literatura. Os compostos isolados foram identificados pelas técnicas de Ressonância Magnética Nuclear 1D e 2D e por Espectrometria de massas. Foi realizado o experimento de biotransformação com os limonóides angolesato de metila isolado em grande quantidade de K. ivorensis sintomática e 7-desacetoxi-7-oxogedunina isolado de Carapa guianensis, frente aos microorganismos Penicillium ssp., Phomopsis sojae e Botryosphaeria rhodina, para verificar se ocorria ou não a modificação destes compostos junto aos fungos. No entanto, em alguns experimentos não observou-se nenhuma diferença e em outros, apenas supõem-se que tenha ocorrido a modificação. Em um estudo complementar, realizou-se ensaios frente a síntese de ATP com os compostos lasiodiplodina, ergosterol, 5 -inosil e do manitol, sendo que somente a lasiodiplodina apresentou uma boa inibição.

Made available in DSpace on 2016-06-02T20:34:26Z (GMT). No. of bitstreams: 1 3753.pdf: 9161600 bytes, checksum: 26887a20430e04deb54cb6b8e7360500 (MD5) Previous issue date: 2011-06-22 / Universidade Federal de Sao Carlos / The present work describes the study of variation in the chemical profile of citrus after inoculation of Xylella fastidiosa, in charge of the Citrus Variegated Chlorosis is one of the most serious diseases that cause damage in Brazilian citrus. The bacterium X. fastidiosa was inoculated in Citrus sinensis grafted on C. limonia and was evaluated using chemometric tools and development of analytical methods such as HPLC-DAD, LC-MS/MS, LC-UV-SPE-NMR and HRMAS quantitative variation of some secondary metabolites such as coumarins and flavonoids identified both in grafts and in the matrix C. sinensis and C. limonia. The chemometric methods PCA and HCA applied to the data obtained in studies by HPLC-DAD and HR-MAS allowed to discriminate plants contaminated with the bacteria of the species healthy, as well as the respective individuals. By analyzing the change in the chemical profile of citrus studied by HPLC-UV-SPE-NMR it was possible to detect the presence of a new class of secondary metabolites derived from p-hidroxy-cinnamic acid containing oxidized dihydropyran and dihydrofuran rings. Similarly, when analyzing the compounds of medium polarity by LC-MS/MS technique was identified, until now, in the roots and leaves several coumarins not cited in the literature for any of the species that constitute the graft, as dihydrosuberenol, 2 ', 3'-dihydrosuberosin, citrubutin the limonoid diosfenol limonin and flavonoid 3-hydroxy-3', 4 ',5,7,8- pentamethoxyflavone. Finally, was observed that coumarin bergapten is present in reasonable quantities only in the leaves of Rangpur lime, which is tolerant to X. fastidiosa, and when the graft presents with symptoms of citrus variegated chlorosis is a small production of this in their leaves, indicating that this is a phytoanticipin. / O presente trabalho descreve o estudo da variação do perfil químico de citros após a inoculação da bactéria Xylella fastidiosa, responsável pela Clorose Variegada do Citros (CVC) que é uma das mais sérias doenças causadoras de prejuízos na citricultura brasileira. Para isso, inoculou-se a X. fastidiosa em enxertos de C. sinensis sobre C. limonia e avaliou-se através de ferramentas quimiométricas e de desenvolvimento de métodos analíticos como HPLC-DAD, LC-MS/MS, LC-UV-SPE-NMR e HRMAS a variação quantitativa de alguns metabólitos secundários, como cumarinas e flavonóides identificados tanto nos enxertos quanto nas matrizes C. sinensis e C. limonia. As ferramentas quimiométricas PCA e HCA aplicadas aos dados obtidos nos estudos de HPLC-DAD e HR-MAS permitiram discriminar as plantas contaminadas com a bactéria das espécies sadias, assim como os respectivos indivíduos. Ao analisar a variação do perfil químico dos citros estudados através da HPLC-SPE-UVNMR foi possível detectar a presença de uma nova classe de metabólitos secundários derivados do ácido p-metoxicinâmico contendo anéis diidropirano e diidrofurano oxidados. Do mesmo modo, ao analisar os compostos de média polaridade, através da técnica de LC-MS/MS foi possível identificar, até o presente momento, nas raízes e folhas algumas cumarinas não citadas na literatura para nenhuma das duas espécies que constituem o enxerto, como diidrosuberenol, 2 ,3 -diidrosuberosina, citrubutina, o limonóide limonina diosfenol e o flavonóide 3-hidroxi- 3 ,4 ,5,7,8-pentametoxiflavona. Finalmente, observou-se que a cumarina bergapteno está presente em quantidade razoável apenas nas folhas do limão cravo, o qual é tolerante à X. fastidiosa, e quando o enxerto apresenta os sintomas da CVC há uma pequena produção desta em suas folhas, indicando ser esta uma fitoantecipina

Made available in DSpace on 2016-06-02T20:34:30Z (GMT). No. of bitstreams: 1 3971.pdf: 22168750 bytes, checksum: 73fca2de293462d87dee9fdb8283238b (MD5) Previous issue date: 2011-10-26 / Universidade Federal de Minas Gerais / The chemical investigation of plants belonging to the genus Hortia described here aimed at contributing to the chemosystematics of the family Rutaceae as well as to the correct placement of this genus within this family. Study involving the species H. oreadica Groppo, Kallunki and Pirani; H. brasiliana Vand. ex DC.; and H. superba Ducke led to the isolation of 21 compounds, more specifically ten limonoids, three dihydrocinnamic acid derivatives, five alkaloids (two furan quinolinic, one 2-quinolone, and two indoloquinazolinone) and three coumarins (one linear furanocoumarin and two angular pyranocoumarins). Taking together all the data obtained on secondary metabolites from the genus Hortia in the present study as well as in previous works, it was possible to propose the positioning of this genus in the intersection of Rutoideae and Toddalioideae, but close to Flindersioideae. Various biological assays were conducted by using plant extracts and isolated compounds from three Hortia species, and the most significant activities were detected for rutaecarpine (against Xylella fastidiosa and Mycobacterium tuberculosis) and N-methyl-4-methoxy-2-quinolone (against Guignardia citircarpa); for the limonoids hortiolide C (against X. fastidiosa and Streptococccus sanguinis), hortiolide D (against Streptococccus salivarius), and hortiolide E (against S. sanguinis and S. salivarius); for the dihydrocinnamic acid derivative 3-[2,6-dimethoxy-6´,6´-dimethylpyran- (2´,3´:4,5)-phenyl]-propionic acid (against M. tuberculosis and G. citricarpa); and for the coumarin 5-methoxy-seseline (against G. citricarpa). Investigation of the phytopathogenic fungus G. citricarpa aimed at acquiring knowledge about the chemistry of this microorganism. After optimization of the liquid culture medium (potato-dextrose, Czapeck and Czapeck enriched with 2% malt extract) and growth period (05 to 45 days) appropriate for G. citricarpa, this fungus was developed at a larger scale using potato-dextrose for 25 to 35 days. The crude extracts were submitted to fractionation by chromatography, which furnished 13 different compounds of different classes of secondary metabolites, namely four diketopiperazines [cyclo-(proline-leucine), cyclo-(phenylalaninetyrosine), cyclo-(proline-tyrosine), and cyclo- (proline-phenylalanine)], one nitrogen base (uracil), three nucleosides (uridine, 5-methyl-uridine, and inosine), one amino acid (tryptophan), one aromatic alcohol (tyrosol), one furfuraldehyde (5-hydroxy-methyl-furfuraldehyde), one benzoic acid derivative (4-hydroxybenzoic acid), and one triglyceride. The isolation of tyrosol motivated new investigations on its possible role in pathogenicity events in Citrus, since there are some literature reports on its signaling and autoregulation activities in some endophytic fungi. Crude extracts from G. citricarpa were assayed against X. fastidiosa. The results revealed promising MIC values, prompting continuation of this study. In conclusion, the work described in this thesis has demonstrated that some natural compounds displaying antimicrobial activity have potential application as lead compounds for the discovery of novel bioactive compounds. / O estudo químico de plantas do gênero Hortia descrito neste trabalho visou contribuir com a quimiossistemática da família Rutaceae e também com o posicionamento correto do gênero dentro da mesma. O estudo das espécies H. oreadica Groppo, Kallunki e Pirani, H. brasiliana Vand. ex DC. e H. superba Ducke levou ao isolamento de 21 substâncias: dez limonoides, três derivados do ácido diidrocinâmico, cinco alcaloides (dois furoquinolínicos, um 2-quinolona e dois indoloquinazolínicos) e três cumarinas (uma furano cumarina linear e duas piranocumarinas angulares). A união dos dados de metabólitos secundários do gênero Hortia obtidos neste e em estudos prévios permitiu propor um posicionamento para este gênero na intersecção de Rutoideae e Toddalioideae, mas próximo à Flindersioideae. Vários ensaios biológicos foram realizados com extratos vegetais e compostos isolados das três espécies de Hortia e as atividades biológicas mais expressivas foram dos alcaloides rutaecarpina (frente à Xylella fastidiosa e Mycobacterium tuberculosis) e N-metil-4-metóxi-2-quinolona (frente à Guignardia citircarpa), dos limonoides hortiolida C (frente à X. fastidiosa e Streptococccus sanguinis), hortilida D (frente à Streptococccus salivarius), hortiolida E (frente à S. sanguinis e S. salivarius), do derivado do ácido diidrocinâmico ácido 3-[2,6- dimetóxi-6´,6´-dimetilpirano-(2´,3´:4,5)-fenil]-propiônico (frente à M. tuberculosis e G. citricarpa) e da cumarina 5-metóxi-seselina (frente à G. citricarpa). O estudo do fungo fitopatogênico G. citricarpa visou contribuir com o conhecimento da química deste micro-organismo. Após estudos de otimização do meio de cultura líquido (batata-dextrose, Czapeck e Czapeck enriquecido com 2% de extrato de malte) e período de crescimento (05 a 45 dias) apropriados para G. citricarpa, este fungo foi desenvolvido em escala ampliada em batata-dextrose por um período de 25 e 35 dias. Os extratos brutos foram submetidos a fracionamentos cromatográficos, obtendo-se treze substâncias de diferentes classes de metabólitos secundários, sendo quatro dicetopiperazinas [ciclo-(prolina-leucina), ciclo-(fenilalanina-tirosina), ciclo-(prolina-tirosina) e ciclo- (prolina-fenilalanina)], uma base nitrogenada (uracila), três nucleosídeos (uridina, 5-metil-uridina e inosina), um aminoácido (triptofano), um álcool aromático (tirosol), um furfuraldeído (5-hidróxi-metil-furfuraldeído), um derivado do ácido benzóico (ácido 4-hidróxi-benzóico) e um triglicerídeo. O isolamento do tirosol neste trabalho instiga novas investigações sobre a possível função do mesmo no evento da patogenicidade em Citros, uma vez que há alguns relatos na literatura sobre estudos da atividade sinalizadora e autoreguladora desta molécula em alguns fungos endofíticos. Extratos brutos de G. citricarpa foram avaliados frente à X. fastidiosa e os resultados obtidos revelaram valores de CIM bastante interessantes e promissores, estimulando a continuidade deste estudo. Portanto, a partir do trabalho descrito nesta tese verificou-se que algumas substâncias naturais com propriedades antimicrobianas revelaram-se como importantes fontes na descoberta de novos produtos com potencial bioativo.