Sabe-se que a hipertensão arterial está intimamente ligada a prejuízos no controle autonômico cardiovascular, caracterizado pelo maior predomínio do componente autonômico simpático e redução no componente autonômico vagal. Dessa forma, o objetivo do presente estudo foi avaliar o comportamento da variabilidade da frequência cardíaca durante o período de recuperação em homens e mulheres, bem como os efeitos promovidos pela prática do exercício físico nesses indivíduos hipertensos. Para tanto, foram utilizados dados de 21 voluntários hipertensos e sedentários com média de idade de 49?9,8 anos, divididos em 2 grupos distintos, homens (n=10) e mulheres (n=11). Todos os indivíduos foram submetidos a um protocolo de treinamento físico aeróbio em esteira, 3 vezes por semana, durante 12 semanas, com duração de 45 minutos, e intensidade fixada na frequência cardíaca obtida a 5% abaixo do limiar anaeróbio respiratório obtido no teste ergoespirométrico (Protocolo de Bruce Modificado). Ao final do treinamento de 12 semanas a capacidade aeróbia (VO2pico) foi novamente avaliada. O registro para análise espectral da VFC foi realizado entre 09h00min e 10h00min da manhã, obedecendo ao seguinte protocolo; após 20 minutos em repouso na posição supina em uma maca inclinável, os voluntários foram colocados passivamente na posição inclinada a 75 graus durante mais 20 minutos. O registro da FC na posição supina e durante o tilt test foi realizado por meio do eletrocardiograma, do qual foram obtidas as séries temporais oriundas da medida do tempo entre os intervalos das ondas R-R. Para a análise estatística foi utilizada a comparação entre dois grupos, ou no mesmo grupo, antes e após, foi utilizado o teste \"t\" de Student; Quando a distribuição não era normal foram utilizados testes não-paramétricos. Na comparação entre dois grupos foi utilizado o teste de Mann-Whitney. Foram consideradas estatisticamente significantes P era menor que 5%. Os resultados mostraram que o treinamento físico aeróbio no grupo Total-pós apresentou reduções significativas da pressão arterial sistólica (PAS) e da pressão arterial média (PAM). A associação entre os sexos mostrou aumento da FC basal. Já quando comparado os sexos separadamente, também foi observado diminuição da PAS no grupo Homem-pós em relação ao grupo Homem-pré, enquanto que nas mulheres essa redução ocorreu apenas na pressão arterial diastólica (PAD). Em relação aos valores antropométricos, houve diferença estatistica apenas no parâmetro altura entre os grupos Mulheres-pré e Homens-pré. Os resultados do 6º minuto da recuperação não apresentaram diferenças estatisticamente significantes quando comparado os grupos, Total, Homens e Mulheres. Entretanto, quando se faz a associação entre os grupos Mulheres-pós e Homens-pós, foi observado uma redução da banda de LF(ms2). Apesar do HF(ms2), também ter tendido a diminuir, não houve relação estatística. Em relação a avaliação por meio da análise simbólica, os resultados mostraram redução nos valores de 2LV no grupo Mulheres-pós. A análise dos resultados do 6º ao 12º min no grupo Total não mostraram diferenças significantes em nenhum parâmetro analisado. Da mesma forma, quando comparamos os sexos separadamente, também não observamos diferenças estatisticamente significantes entre eles. Já quando analisamos os valores da análise simbólica, também não observamos diferenças no grupo Total tanto pré quanto pós treinamento. Ao verificar os resultados obtidos no grupo Homens-pós houve aumento do 0V em relação ao grupo Homens-pré. Os resultados inter grupos também mostraram aumento dos parâmetros 0V e 0V/2V no grupo mulheres-pré quando comparado ao grupos Homens-pré. Diferentemente, os valores de 1V, 2LV e 2V apresentaram reduções significativas também no grupo Mulheres-pré em relação ao grupo Homens-pré. Os resultados no 12º min do grupo Total pré e pós não apresentaram diferença na analise espectral entre eles. Entretanto, quando comparamos inter grupos, o grupo Mulheres-pós apresentou uma redeução da banda de LF (ms2) quando comparado ao grupo Homem-pós, já os demais parâmetros não foram diferentes.Para os valores da análise simbólica observamos apenas diminuição do parâmetro 2LV no grupos Mulheres-pós quando comparado ao grupo Homens-pós. Os demais resultados não apresentaram reduções significantes. Assim, concluimos que o treinamento físico aeróbio promoveu a redução dos parâmetros hemodinâmicos nos grupos analisados. Além disso, embora observamos que a FC de recuperação foi semelhante entre os grupos, a VFC na recuperação no 6 e no 12º minutos apresentou maior recuperação no grupo das mulheres / It is known that hypertension is closely linked to losses in cardiovascular autonomic control, characterized by the predominance of the sympathetic autonomic component and reduced vagal autonomic component. Thus, the aim of this study was to evaluate the behavior of heart rate variability during the recovery period in men and women, as well as the effects caused by physical exercise in these hypertensive individuals. For this, we used data of 21 hypertensive and sedentary volunteers with a mean age of 49?9,8 years, divided into two distinct groups, men (n = 10) and women (n = 11). All subjects underwent a physical training protocol on a treadmill three times a week for 12 weeks, with 45 minutes duration, and intensity fixed heart rate obtained 5% lower respiratory anaerobic threshold obtained in the cardiopulmonary exercise test (Bruce Amended Protocol). At the end of 12 weeks of training aerobic capacity (VO2 peak) was again evaluated. The record for spectral analysis of HRV was performed between 09:00 and 10:00 am, according to the following protocol; after 20 minutes of rest in supine position on a tilt stretcher, the volunteers were passively placed in position tilted at 75 degrees for 20 minutes. The HR record in the supine position and during the tilt test was performed by the electrocardiogram, which were obtained from the time series derived from the measurement of time intervals between the waves R-R. For statistical analysis was used to compare two groups, or in the same group before and after, we used the \"t\" test of Student; When the distribution was not normal non-parametric tests were used. Comparing two groups we used the Mann-Whitney test. statistically significant were considered P was less than 5%. The results showed that aerobic exercise training on Total-post group showed significant reductions in systolic blood pressure (SBP) and mean arterial pressure (MAP). The association between the sexes showed increased basal FC. But when comparing the sexes separately, it was also observed reduction in SBP in group-Man post in relation to the group pre-Man, while in women this reduction occurred only in diastolic blood pressure (DBP). Regarding the anthropometric values, there was statistical difference only in the height parameter between Women and Men-pre-pre groups. The results of the 6th minute of recovery showed no statistically significant differences when comparing the groups Total, Men and Women. However, when making the association between Women and Men-postpost groups, it was observed a reduction in band LF (ms2). Despite the HF (ms2), also have tended to decline, there was no statistical relationship. In relation to evaluation through the symbolic analysis, the results showed reduction in 2LV values in Womenpost group. The results of the 6th to the 12th min Total group showed no significant differences in any parameter analyzed. Similarly, when comparing the sexes separately, we did not observe statistically significant differences between them. But when we analyze the values of symbolic analysis showed no difference in the Total group both pre and post training. When checking the results of the Men-post group there was an increase of 0V compared to pre-Men group. The results also showed increased inter groups of parameters 0V and 0V / 2V women in the group pre-Men when compared to pre-groups. In contrast, the values of 1V, 2V and 2LV also showed significant reductions in pre-Women group in relation to pre-Men group. The results after 12 min Total pre and post group showed no difference in spectral analysis between them. However, when compared inter groups, the Women-post group showed a reduction band LF (ms2) compared to man-post group, since the other parameters were not different. For the values of symbolic analysis we observe only decrease parameter 2LV Women in post-groups when compared to men-after group. The other results showed no significant reductions. Thus, we conclude that aerobic physical training promoted reduction of hemodynamic parameters in the analyzed groups. Moreover, although we note that the FC recovery was similar between groups, HRV recovery at 6 and after 12 minutes showed higher recovery in the women\'s group

A presença de receptores de estrogênio no coração, músculo liso vascular e em centros cerebrais sugere a influência desse hormônio na regulação cardiovascular tanto durante o repouso quanto durante o estresse físico. O ojetivo desse estudo foi comparar as respostas hemodinâmicas e neurais ao exercício físico em 10 mulheres jovens (J) e em 10 mulheres pós-menopausa (PM). Métodos: A pressão arterial sistólica (PAS), média (PAM) e diastólica (PAD) foram analisadas pelo método oscilométrico (Dixtal), a freqüência cardíaca (FC) pelo ECG, a atividade nervosa simpática periférica (ANSP) pela microneurografia, pré, durante e pós-exercícios estáticos (E) e dinâmicos (D) a 10% e a 30% da contração voluntária máxima. Pós-exercícios a 30%, a circulação no antebraço foi ocluída (Ov) por 2 min. O fluxo sangüíneo no antebraço (FSA) foi mensurado pela pletismografia de oclusão venosa a ar e a resistência vascular periférica a partir da relação FSA / PAM. Os dados coletados durante o período de repouso, bem como os dados da Monitorização Ambulatorial da Pressão Arterial (MAPA) foram analisados através do teste t Studen. Os dados da sessão experimental (? e ?%; expressos em média mais ou menos erro padrão) foram comparados pela análise de variância ANOVA de dois caminhos para amostras dependentes sendo aceito como significante P<= 0,05. Resultados: Durante o período de repouso, as mulheres J apresentaram ANSP, PAS, PAM e PAD (registrados na perna) significantemente menores do que o grupo PM. O FSA apresentou maiores valores nas J quando comparadas às PM. Além disso, a RVP parece estar aumentada em PM, no entanto, os valores verificados não foram estatisticamente significantes. Durante o exercício J apresentaram variações relativas de ANSP significativamente maiores em resposta ao exercício E 10% e a 30% da CVM a qual é mantida durante a Ov e em resposta ao exercício D10% da CVM. As mulheres PM apresentaram variações relativas de FC significativamente maiores em resposta aos exercícios E 30% e D 30% que não se mantêm durante a Ov. Não houve diferença significante na MAPA durante o período de vigília, no entanto, durante o período de sono, os valores de PAD foram menores em J. A queda noturna foi significantemente maior em J do que em PM. Conclusões: O presente estudo demonstrou uma possível relação entre a atenuação da sensibilidade quimiorreflexa e o aumento do controle do comando central na população PM em resposta o exercício físico que pode estar relacionado ao estrogênio por si só ou à associação entre deficiência estrogênica e envelhecimento / The presence of estrogen receptors in the heart, vascular smooth muscle, autonomic brain centers suggest it\'s possible involvement in the regulation of cardiovascular system during and during physical stress.Objective: The aim of this study was to compare haemodynamic and neural responses to physical exercise in 10 young women (Y) and 10 women post menopause (PM).Methods: Systolic Blood Pressure (SBP), Mean Blood Pressure (MBP) and Diastolic Blood Pressure (DBP) were registered by the oscilometric method (Dixtal), heart rate (HR) by ECG, muscle sympathetic nerve activity (MSNA) was accessed by microneurography, before, during and after static (S) and dynamic (D) exercise at 10% and 30% of maximal voluntary contraction (MVC). Post exercise flow ischemia (PEI) was performed for 2 minutes after the exercise at 30% MVC. Muscle blood flow (MBF) was registered by venous occlusion pletismography. Vascular resistance (VR) was calculated by MBP/MBF. The data form 24h Ambulatory Blood Pressure (ABP) and rest period were compared by the t Student test. During exercise MSNA, SBP, DBP, MBP, HR (? and ?%; mean ± standard error) data were analyzed by using two-way within-subject factors repeated-measures ANOVA, values of p<=0.05 were considered to be statistically significant. Results: During the rest period, Y had MSNA, SBP,MBP and DBP (registered in the leg) significantly lower than PM. MBF was superior in Y when compared to PM. Besides that, VR seems to be greater in PM than in Y, even though these values were not statistically significant. During exercise, Y had relative variations of MSNA significantly grater than PM during S 10% and S 30% MVC exercise which is maintained during PEI, and at D 10% MVC exercise. PM women had relative variations of HR significantly grater than Y during exercise at 30% (static and dynamic) which was not maintained at PEI. There were no significant differences at 24h ABP during day time registers, but during night time, DBP is significantly lower in the Y. Night time fall was bigger in the Y when compared to PM. Conclusion: The present study showed a possible relation between the attenuation of chemioreflex sensibility and the increase in the central command control in the PM during exercise. This response might be associated to lack of estrogen its self or to the association of estrogen deficiency and aging

O presente trabalho compreende o estudo da resposta imune e inflamatória no sistema nervoso central (SNC) de camundongos ou ratos-veadeiros (Peromyscus maniculatus) frente a infecção por dois diferentes tipos de vírus neurotrópicos, o vírus da estomatite vesicular (VEV) e o herpesvírus bovino tipo 5 (BoHV-5). Na primeira etapa, foi avaliada a função das células residentes do SNC no tocante à expressão de quimiocinas durante a infecção pelo VEV em ratos-veadeiros. No presente estudo, durante a encefalite causada pelo vírus da estomatite vesicular sorotipo New Jersey (VEVNJ) em ratos-veadeiros, as quimiocinas RANTES e MCP-1 foram expressas somente no bulbo olfatório (BO), local onde o vírus estava restrito. A expressão de quimiocinas foi seguida de um influxo de células inflamatórias no BO tardiamente no curso da doença aguda. A quimiocina RANTES foi expressa por neurônios, astrócitos e micróglia, ao passo que MCP-1 foi expressa por neurônios e astrócitos. Embora os astrócitos e a micróglia tenham respondido à infecção pelo VEVNJ ao expressarem quimiocinas, os neurônios foram o principal tipo celular infectado pelo vírus. Portanto, os neurônios infectados podem exercer um papel crucial na geração da resposta imune no BO. A sinalização entre neurônios e outras células residentes do SNC muito provavelmente é o mecanismo pelo qual os astrócitos e micróglia são ativados durante a encefalite causada pelo VEVNJ. Os resultados aqui apresentados, também indicam que a expressão de RANTES e MCP-1 no BO de ratos-veadeiros infectados pelo VEVNJ pode ajudar a prevenir a disseminação do vírus para outras áreas do SNC. Na segunda etapa, foi avaliada a susceptibilidade de camundongos isogênicos BALB/c frente à infecção pelo BoHV-5 em camundongos isogênicos BALB/c em diferentes dias pós-inoculação (DPI). O BoHV-5 quando inoculado pela via intracraniana foi capaz de infectar e se replicar no SNC de camundongos BALB/c. Entretanto, até o momento avaliado (15 DPI), os animais sobreviveram a infecção sem apresentar sinais neurológicos evidentes. A infecção foi acompanhada de uma resposta imune do tipo Th1 importante, com expressão significativa das citocinas IFN-Y e TNF-&#945;, e quimiocina CCL-2. A expressão das citocinas e quimiocinas se deu principalmente no início da infecção (3 e 4 DPI), a qual foi seguida por uma meningo-encefalite com manguitos perivasculares e periventriculite, compostas predominantemente por macrófagos e linfócitos. Após a expressão significativa das citocinas e quimiocina, os animais foram capazes de debelar a infecção aguda, uma vez que partículas virais viáveis não foram detectadas após o 6 DPI. Entretanto, o BoHV-5 foi capaz de infectar o gânglio trigeminal, uma vez que grande quantidade de DNA de BoHV-5 foi detectada no 3 DPI, o que foi confirmado pela presença de antígenos virais no citoplasma de neurônios do gânglio trigeminal de camundongos BALB/c infectados / The present work comprises the study of immune and inflammatory responses in the central nervous system (CNS) of mice or deer mice (Peromyscus maniculatus) during infection by two different neurotropic viruses, the vesicular stomatitis virus (VSV) and bovine herpesvirus type 5 (BoHV-5). In the first part, the role of CNS resident cells regarding chemokine expression in deer mice infected with VSV was evaluated. Here, we demonstrated that during vesicular stomatitis New Jersey virus (VSNJV) encephalitis in deer mice, chemokines RANTES and MCP-1 are expressed only in the olfactory bulb (OB), where the virus was restricted. This chemokine expression was followed by the influx of inflammatory cells to the OB later in the course of acute disease. Neurons, astrocytes and microglia expressed RANTES, whereas MCP-1 was expressed by neurons and astrocytes. Although astrocytes and microglia responded to VSNJV infection by expressing chemokines, neurons were the predominantly infected cell type. Therefore, infected neurons may have a critical role in initiating an immune response in the OB. The signaling between neurons and other CNS resident cells is most likely the mechanism by which astrocytes and microglia are activated during the course of VSV encephalitis. Our results also indicate that the expression of RANTES and MCP-1 in the OB of deer mice infected with VSNJV might help prevent the spread of VSNJV to other areas of CNS. In the second part of the study, the susceptibility of isogenic BALB/c mice to BoHV-5 infection was evaluated in different days post-inoculation (DPI). BoHV-5, when inoculated through intracranial route, was able to infect and replicate within the CNS of BALB/c mice. However, until the evaluated time (15 DPI), the mice was able to survive without showing prominent neurological signs. The infection was accompanied by an important Th1 immune response, with a significant expression of the cytokines IFN-Y and TNF-&#945;, and chemokine CCL-2. The expression of these cytokines and chemokines was detected mainly on the early course of infection (3 and 4 DPI), and was followed by a meningoencephalitis with perivascular cuffing and periventriculitis, composed mainly by macrophages and lymphocytes. After the expression of cytokines and chemokine, the mice were able to curb BoHV-5 acute infection, since viable viral particles were not detected after 6 DPI. However, BoHV-5 was able to infect the trigeminal ganglia, since a large number of BoHV-5 DNA copies was detected on 3 DPI, which was confirmed by the presence of viral antigens within the cytoplasm of neurons in the trigeminal ganglia of infected BALB/c mice

Orientador: Francisco Langeani Neto / Banca: Roberto Esser dos Reis / Banca: Marcelo Ribeiro de Britto / Resumo: Desde as primeiras hipóteses filogenéticas para Hypoptopomatinae e Neoplecostominae, muitas mudanças ocorreram em decorrência do aumento da diversidade conhecida, o que teve grande impacto nas filogenias propostas posteriormente. Surgiram também problemáticas envolvendo a composição de ambas as subfamílias em virtude de divergências entre análises morfológicas e moleculares. Sendo assim, novas fontes de dados são fundamentais para um maior entendimento da diversidade dos grupos, além de colaborar para a elucidação de sua história evolutiva. Desta forma, o presente trabalho teve como objetivo avaliar a contribuição de caracteres neuroanatômicos em uma análise filogenética para Hypoptopomatinae e Neoplecostominae, de modo a avaliar sua composição, as relações filogenéticas entre as subfamílias e delas com as outras subfamílias de Loricariidae. Para tanto, foram analisados 55 táxons terminais pertencentes às subfamílias Delturinae, Hypoptopomatinae, Hypostominae, Loricariinae e Neoplecostominae, além de representantes de Callichthyidae, pertencentes também à superfamília Loricarioidea, e Pimelodidae. Os espécimes foram dissecados e tiveram seu encéfalo retirado para a análise morfológica. A análise filogenética foi realizada por meio de busca heurística, usando-se o software TNT, versão 1.1. Foram utilizados 60 caracteres tratados como não-aditivos e com pesos iguais. Os resultados corroboram o monofiletismo de Loricariidae, e de três de suas subfamílias (Hypoptopomatinae, Loricariinae e Neoplecostominae). A análise demonstrou boa resolução principalmente no nível de subfamília, embora o relacionamento entre elas tenha apresentado flutuações, o que parece estar relacionado principalmente aos táxons de Loricariinae, que tem resultado como o grupo mais diverso no que se refere ao sistema nervoso central. Loricariinae foi recuperada como subfamília mais basal... / Abstract: Since the first phylogenetic hypotheses for Hypoptopomatinae and Neoplecostominae, many changes have occurred due to the increase of its known diversity, which had great impact on the latest phylogenetic proposals. Came to light also problems involving the composition of both subfamilies due to differences between morphological and molecular analysis. Thus, new sources of data are fundamental to a better understanding of the diversity of groups, and contribute to the elucidation of their evolutionary history. Therefore, this study aimed to evaluate the contribution of neuroanatomical characters in a phylogenetic analysis to Hypoptopomatinae and Neoplecostominae, in order to assess its composition, the phylogenetic relationships within the subfamilies, and of these groups with other subfamilies of Loricariidae. Were analyzed 55 terminal taxa including the Loricariidae subfamilies Delturinae, Hypoptopomatinae, Hypostominae, Loricariinae, Neoplecostominae, representatives of Callichthyidae, which also belongs to the superfamily Loricarioidea, and Pimelodidae. The specimens were dissected and had their brain removed for morphological analysis. Phylogenetic analysis was performed using heuristic search, using the TNT software, version 1.1. 60 characters treated as non-additive and with equal weights were used. The results support the monophyly of Loricariidae, and three of its subfamilies (Hypoptopomatinae, Loricariinae and Neoplecostominae). The analysis showed particularly good resolution at the level of subfamily, although the relationship between them presented fluctuations, which appears to be primarily related to Loricariinae taxa, which as a result is the most diverse group regarding to the central nervous system. Loricariinae was recovered as the most basal subfamily. The subfamily Neoplecostominae was found composed by Pareiorhaphis hystrix, Isbrueckerichthys and Neoplecostomus, this one recovere ... / Mestre

Submitted by Angela Maria de Oliveira (amolivei@uepg.br) on 2019-02-06T18:43:55Z No. of bitstreams: 2 license_rdf: 811 bytes, checksum: e39d27027a6cc9cb039ad269a5db8e34 (MD5) Rubens Gomes Junior.pdf: 1292894 bytes, checksum: a7cb84fdd6de57c93b761eeb2199e77d (MD5) / Made available in DSpace on 2019-02-06T18:43:55Z (GMT). No. of bitstreams: 2 license_rdf: 811 bytes, checksum: e39d27027a6cc9cb039ad269a5db8e34 (MD5) Rubens Gomes Junior.pdf: 1292894 bytes, checksum: a7cb84fdd6de57c93b761eeb2199e77d (MD5) Previous issue date: 2018-10-18 / Conselho Nacional de Desenvolvimento Científico e Tecnológico / A Disintegrin and Metalloprotease (ADAM) é uma família de proteínas transmembranas capaz de mediar adesão celular, assim como clivagem de moléculas da superfície celular. ADAM23 é um membro desta família predominantemente expressa no sistema nervoso durante o desenvolvimento até a fase adulta. Camundongos nocautes para o gene adam23 desenvolvem problemas neurológicos como tremor e ataxia e morrem logo após o nascimento, sugerindo que esta proteína possui papel fundamental no desenvolvimento e manutenção do sistema nervoso. Sendo assim, a análise do padrão de expressão da proteína ADAM23 no processo de diferenciação pode contribuir no entendimento do seu papel biológico no contexto do desenvolvimento do sistema nervoso. Primeiramente foi avaliado se as linhagens celulares de neuroblastoma (SHSY-5Y e Neuro2a), feocromocitoma (PC-12) e glioblastoma (T98G) expressavam ADAM23. Em todas as linhagens foi possível observar a proteína ADAM23. Para avaliar se a expressão de ADAM23 era alterada em eventos de diferenciação, as linhagens celulares de neuroblastoma e feocromocitoma foram usadas como modelos de diferenciação neuronal. Em PC-12 não houve alteração na expressão de ADAM23 quando as células foram tratadas com fator neurotrófico derivado de encéfalo. A linhagem celular de neuroblastoma humano, SHSY-5Y, também não apresentou alteração na expressão da proteína de interesse quando tratada com all-trans ácido retinóico. Os ensaios utilizando o neuroblastoma murino, Neuro2a, não mostraram alteração na expressão de ADAM23 nos grupos tratados com all-trans ácido retinóico ou all-trans retinal. Entretanto, nesta linhagem houve aumento da forma não processada de ADAM23 (100 kDa) nos grupos em que o soro fetal bovino foi reduzido a 1%, independente do tratamento ácido retinóico e do retinal. Ainda foi investigado um possível papel protetor de ADAM23 frente ao estresse oxidativo causado por peroxido de hidrogênio em diferentes concentrações e tempos em Neuro2a, mas nenhuma alteração na expressão foi observada. Estes dados sugerem que ADAM23 pode estar envolvida no processo de diferenciação neuronal em Neuro2a desencadeado pela redução do soro fetal bovino, entretanto mais estudos são necessários para elucidar este mecanismo. / A Disintegrin and Metalloprotease (ADAM) is a family of transmembrane proteins able to mediate cell adhesion, as well as cleavage of cell surface molecules. ADAM23 is a member of this family predominantly expressed in nervous system during development until adulthood. Mice knockouts for adam23 gene develop neurological problems, such as tremor and ataxia and die soon after birth, suggesting that protein plays a key role in development and maintenance of nervous system. Therefore, evaluation of expression profile of ADAM23 protein in the differentiation process may contribute to understanding of its biological role in context of the development of nervous system. First, it was evaluated whether cell lines of neuroblastoma (SHSY-5Y and Neuro2a), pheochromocytoma (PC-12) and glioblastoma (T98G) expressed ADAM23. In all lineages it was possible to observe the ADAM23 protein. To assess whether ADAM23 expression was altered in differentiation events, neuroblastoma and pheochromocytoma cell lines were used as models of neuronal differentiation. PC-12 cells showed no change in ADAM23 expression when they were treated with brain-derived neurotrophic factor. The human neuroblastoma cell line, SHSY-5Y, also showed no change in the expression of the protein of interest when they were treated with all-trans retinoic acid. Assays using murine neuroblastoma, Neuro2a, showed no change in ADAM23 expression on groups treated with all-trans retinoic acid or all-trans retinal. However, in this lineage presented an increase of the unprocessed form of ADAM23 (100 kDa) on group, which the fetal bovine serum was reduced to 1%, independent of retinoic acid or retinal treatment. A possible protective role of ADAM23 against oxidative stress caused by hydrogen peroxide at different concentrations and times in Neuro2a was still investigated, but no change in expression was observed. These data suggest that ADAM23 may be involved in the neuronal differentiation process in Neuro2a triggered by the reduction of fetal bovine serum, however more studies are needed to elucidate this mechanism.

Submitted by Setor de Tratamento da Informa??o - BC/PUCRS (tede2@pucrs.br) on 2015-06-25T11:34:05Z No. of bitstreams: 1 471145 - Texto Completo.pdf: 583122 bytes, checksum: b9760b9161356a851110fa2f73635187 (MD5) / Made available in DSpace on 2015-06-25T11:34:05Z (GMT). No. of bitstreams: 1 471145 - Texto Completo.pdf: 583122 bytes, checksum: b9760b9161356a851110fa2f73635187 (MD5) Previous issue date: 2015-03-09 / Glioblastoma multiform (GBM) is a highly aggressive tumor of the central nervous system and has a few available therapies. In GBM, proinflammatory signaling pathways, such as STAT3 and NF- ?B are aberrantly activated and associated with cell proliferation, survival, invasion and resistance to chemotherapy. Therefore, inhibition of these pro-inflammatory pathways has been suggested as a strategy to combat malignant cells. Resolvins of D-series promote resolution of inflammation by decreasing the activation of NF-?B. The Resolvin D2 (RvD2) is derived from a double sequence of docosahexaenoic acid lipoxygenation, which is derived from the essential fatty acid Omega-3. Our hypothesis is that the resolvins, by direct or indirect inhibition of pro-inflammatory pathways, could compromise the survival and growth of glioma. Our goal is to assess the role of RvD2 and its precursor 17 (R) HDHA (HR17) on tumor cell proliferation and survival in murine glioma model. For this, murine glioma cell line (GL261) was treated in vitro with RvD2 and HR17, and cell death and proliferation were evaluated. Furthermore, the effect of RvD2 and HR17 was evaluated in vivo after GL261 brain implantation; histopathological characteristics and immunohistochemistry for activated caspase-3 were evaluated to. It was found that RvD2 GL261 induces apoptosis in vitro. Furthermore, in vivo treatment of RvD2 and HR17 increased the number of tumor cells positive for activated caspase-3, although not alter tumor area. Interestingly, the HR17 treatment reduces tumor mitotic index in vivo. These results suggest that RvD2 and HR17 have a potential role in the induction of apoptosis in murine glioma cells. / Glioblastoma multiforme (GBM) ? um tumor altamente agressivo do Sistema Nervoso Central e possui poucas terapias dispon?veis. Em GBM, vias de sinaliza??o pr?-inflamat?rias, como da STAT3 e NF-?B, s?o aberrantemente ativadas e associadas com a prolifera??o celular, sobreviv?ncia, invas?o e resist?ncia ? quimioterapia. Por conseguinte, a inibi??o dessas vias pr?inflamat?rias tem sido sugerida como uma estrat?gia para combater as c?lulas malignas. As resolvinas da s?rie D promovem resolu??o da inflama??o diminuindo a ativa??o de NF-?B. A Resolvina D2 (RvD2) deriva de uma sequencia de dupla lipoxigena??o do ?cido docosahexaen?ico, o qual ? derivado do ?cido graxo essencial Omega-3. Nossa hip?tese ? que as resolvinas, por inibi??o direta ou indireta de vias pr?-inflamat?rias, poderiam comprometer a sobreviv?ncia e o crescimento do glioma. Nosso objetivo consiste em avaliar o papel da RvD2 e de seu precursor 17(R)HDHA (HR17) sobre a prolifera??o de c?lulas tumorais e sobreviv?ncia em um modelo de glioma murino. Para isso, a linhagem de c?lulas de glioma murino (GL261) foi tratada in vitro com RvD2 e HR17, e amorte celular e prolifera??o foram avaliadas. Al?m disso, o efeito de RvD2 e HR17 foi avaliado in vivo ap?s o implante de GL261 no c?rebro, avaliando-se caracter?sticas histopatol?gicas e a imunohistoqu?mica para caspase-3 ativada. Verificou-se que RvD2 induz apoptose de GL261 in vitro. Al?m disso, o tratamento de RvD2 e HR17 in vivo aumentou o n?mero de c?lulas tumorais positivas para caspase-3 ativada, embora n?o alterassem a ?rea do tumor. Curiosamente, o tratamento HR17 reduz o ?ndice mit?tico tumoral in vivo. Estes resultados sugerem que RvD2 e HR17 t?m um potencial papel na indu??o de apoptose em c?lulas de glioma murino.

Submitted by Setor de Tratamento da Informa??o - BC/PUCRS (tede2@pucrs.br) on 2015-12-28T12:22:52Z No. of bitstreams: 1 458573 - Texto Completo.pdf: 3676265 bytes, checksum: 796a38fadce4a0d871cc457059630e2b (MD5) / Made available in DSpace on 2015-12-28T12:22:53Z (GMT). No. of bitstreams: 1 458573 - Texto Completo.pdf: 3676265 bytes, checksum: 796a38fadce4a0d871cc457059630e2b (MD5) Previous issue date: 2014-02-27 / Coordena??o de Aperfei?oamento de Pessoal de N?vel Superior - CAPES / Introduction: Peripheral nerve injury results in functional loss in the innervated organ, and recovery without surgical intervention is rare. Many surgical techniques can be used for nerve repair. Among these, the tubulization technique can be highlighted: this allows regenerative factors to be introduced into the chamber. Biomaterials and neurotrophic factors are indicated as a therapeutic alternative for reconstruction of peripheral nerves. Objective: To develop a nanotextured absorbable tube of poly(lactic-co-glycolic acid), and to evaluate its effect with and without tacrolimus on peripheral nerve regeneration in rats. Materials and Methods: Nanotextured absorbable PLGA tubes and films with and without incorporation of tacrolimus are developed, which were characterized in vitro and in vivo biocompatibility, biodegradability and effectiveness as technical tubing were fabricated. The in vivo experiment in which 88 rats were used, occurred in two stages: the copolymers with and without tacrolimus were implanted in 63 animals to evaluate the biocompatibility; a defect of 10mm sciatic nerve was created in the remaining 25 animals were divided into three groups according to treatment: autograft (5), tubulization with PLGA (10), tubulization with PLGA and tacrolimus (10). Walking Track and histomorphometric analyses were performed. Results: Nanotextured PLGA films, containing tacrolimus or not, differ from the negative control cell viability in vitro assays (p=0.000). The film containing tacrolimus was significantly improved, regardless of the time, when compared to the film without the drug (p=0.026). In vivo biocompatibility evaluation demonstrated a surrounding tissue to PLGA implants with acute inflammation, which was decreasing the long 90 days evaluation. It was evident less collagen deposition in both biomaterials, p ? 0.020 seven days after the implants were inserted. The PLGA tube without tacrolimus had smaller average response to the thickness of the myelin sheath compared to autograft and the tube containing tacrolimus in proximal, medial and distal segments (p<0.05). In functional assessment of the recovery of the sciatic nerve in rats, the group of PLGA without tacrolimus significantly differed from the 90 days autograft group (p= 0.0020). Conclusion: The present study suggests that the combination of tacrolimus and PLGA promoted the regeneration of rat sciatic nerves, and this can be a powerful alternative to clinical use in peripheral nerve injuries. / Introdu??o: Les?es em nervos perif?ricos resultam na perda de fun??o do ?rg?o inervado e raramente apresentam recupera??o sem a interven??o cir?rgica. Uma das formas de reparo ? a t?cnica de tubuliza??o, atrav?s da qual ? poss?vel acrescentar fatores com capacidade regenerativa. Nesse contexto, biomateriais e fatores neurotr?ficos s?o indicados como uma alternativa terap?utica para reconstru??o de nervos perif?ricos. Objetivo: Desenvolver tubo nanotexturizado absorv?vel composto por poli (?cido l?ctico-co-?cido glic?lico), e avaliar seu efeito sem e com incorpora??o de tacrolimus sobre a regenera??o de nervo perif?rico em ratos. Materiais e M?todos: Foram confeccionados tubos nanotexturizados absorv?veis de PLGA com e sem incorpora??o de tacrolimus, que foram caracterizados in vitro e in vivo quanto ? biocompatibilidade, biodegrada??o e efic?cia como t?cnica de tubuliza??o. O experimento in vivo, no qual foram utilizados 88 ratos, ocorreu em 2 etapas: os copol?meros sem e com incorpora??o de tacrolimus foram implantados em 63 animais para avaliar a biocompatibilidade; um defeito de 10mm no nervo ci?tico foi criado nos 25 animais restantes, os quais foram divididos em tr?s grupos conforme o tratamento: enxerto aut?logo (5), tubuliza??o com tubo PLGA (10) e tubuliza??o com tubo PLGA e tacrolimus (10). Foram realizados Teste de Marcha e an?lise histomorfom?trica. Resultados: As membranas de PLGA, contendo ou n?o tacrolimus, diferiram do controle negativo nos ensaios de viabilidade celular in vitro (p=0,000); a membrana contendo tacrolimus foi significativamente melhor, independentemente do tempo, quando comparada ? membrana sem o f?rmaco (p=0,026). Na avalia??o da biocompatibilidade in vivo, o tecido circunjacente aos implantes de PLGA apresentaram inflama??o aguda, que foi decrescendo ao longo dos 90 dias de avalia??o. Em 7 dias ap?s os implantes serem inseridos, evidenciou-se menor deposi??o de col?geno nos dois biomateriais quando comparado aos demais per?odos (p ? 0,020). O tubo de PLGA sem tacrolimus teve m?dia menor em rela??o ? espessura da bainha de mielina comparado ao enxerto aut?logo e ao tubo contendo tacrolimus nos segmentos proximal, medial e distal (p < 0,05). Na avalia??o funcional da recupera??o do nervo ci?tico de ratos, o grupo de PLGA sem tacrolimus diferiu significativamente do grupo enxerto aut?logo (em 90 dias | p= 0,0021), com menores ?ndices de fun??o ci?tica. Conclus?o: o presente estudo sugere que a combina??o de PLGA e tacrolimus favoreceu a regenera??o de nervo ci?tico de rato, e esta poder? ser uma potente alternativa para aplica??o cl?nica em les?es de nervos perif?ricos.

O Diabetes mellitus (DM) é uma desordem metabólica caracterizada principalmente por hiperglicemia crônica. Durante o DM, a atenção está voltada principalmente para doenças que afetam sistemas periféricos, contudo, as complicações do DM podem resultar em danos ao sistema nervoso central (SNC), podendo levar a prejuízos cognitivos. Em vista disso, o objetivo desta tese foi investigar alterações no SNC, particularmente relacionadas às funções astrocitárias e do funcionamento das barreiras encefálicas em modelo animal de DM baseando-se nas alterações periféricas. Além disso, foi analisado o efeito da exendina-4 (EX-4), um agonista dos receptores do peptídeo semelhante ao glucagon (GLP-1), em reverter os parâmetros avaliados. Os resultados observados mostraram prejuízos periféricos e no SNC decorrentes do DM. O DM foi responsável pela excessiva produção de AGEs e alterações em parâmetros periféricos como peso corporal, glicemia, hemoglobina glicada (HbA1c) e peptídeo C. Ao analisar o SNC, observamos prejuízo nas funções cognitivas, em parâmetros astrocitários, disfunções nas barreiras encefálicas e diminuição do conteúdo da subunidade GluN1 do receptor N-metil D-Aspartato (NMDA). O tratamento com EX-4 reverteu o prejuízo cognitivo, o dano nas barreiras encefálicas, a captação de glutamato e o conteúdo de GluN1. No entanto, a EX-4 não teve efeito sobre a glicemia e formação de AGEs. O dano em funções astrocitárias e nas barreiras encefálicas observado no DM pode ser decorrente da ativação de vias de sinalização desencadeadas pelos elevados níveis de AGEs. Da mesma maneira, o prejuízo no comportamento cognitivo provavelmente possa ser atribuído aos danos astrocitários e nas barreiras encefálicas observados no DM. O efeito da EX-4 na melhora cognitiva possivelmente seja devido aos seus efeitos na captação de glutamato, no conteúdo de GluN1 e na recuperação das barreiras do encéfalo. Ainda, os papéis já estabelecidos da EX-4 na ativação de vias de sinalização relacionadas com a aprendizagem e memória e na diminuição da expressão de mediadores inflamatórios, podem ter atenuado os danos causados pela hiperglicemia e pelo acúmulo de AGEs. No entanto, mais estudos são necessários para estabelecer o mecanismo de ação da EX-4 na recuperação dos danos causados pelo DM no SNC. / Diabetes mellitus (DM) is a metabolic disorder characterized primarily by chronic hyperglycemia. During the DM, attention is mainly focused on diseases affecting peripheral systems. However, DM complications may result in damage to the central nervous system (CNS), leading to cognitive impairments. In view of this, the aim of this thesis was to investigate changes in the CNS, particularly related to astrocytic functions and the functioning of the brain barriers in animal model of DM relying on the peripheral changes and to analyze the effect of exendin-4 (EX-4), an agonist of glucagon like peptide-1 (GLP-1) receptors, in reversing the parameters evaluated. The observed results showed peripheral and CNS damage resulting from DM. The DM was responsible for the excessive production of AGEs and changes in peripheral parameters such as body weight, blood glucose, glycated hemoglobin (HbA1c) and C-peptide When assessing the CNS, we observed impairment in cognitive functions, astrocytic parameters, dysfunctions in the brain barriers and decrease in N-methyl-D-aspartate (NMDA) GluN1 subunit content. Treatment with EX-4 reversed the cognitive impairment, damage in brain barriers, glutamate uptake and GluN1 content. However, the EX-4 had no effect in the glycemia and ADEs formation. The loss of astrocytic and brain barriers functions observed in DM may be due to the activation of signalling pathways triggered by high levels of AGEs. In addition, impairment in cognitive behavior can probably be attributed to astrocyte and brain barriers damage observed in DM. The effect of EX-4 on the cognitive improvement possibly be due to its effects on glutamate uptake, in the GluN1 content and in the recovery of the brain barriers. In addition, the EX-4 established roles in the activation of signalling pathways associated with learning and memory and in the decrease expression of inflammatory mediators, can attenuate the damage caused by hyperglycemia and by accumulation of AGE. However, further studies are needed to establish the mechanism of EX-4 action in the recovery of damage caused by DM in CNS.

Dados recentes mostram que os Ácidos Graxos Trans (AGT) são uma classe de lipídios os quais estão relacionados a malefícios a saúde humana. AGT são ácidos graxos insaturados que contém ao menos uma ligação dupla não conjugada na cofiguração trans, gerando uma gordura de característica mais linear. A presença de uma ligação dupla trans na cadeia dos ácidos graxos resulta em um menor ângulo de ligação, em comparação as ligações duplas cis, resultando em uma conformação mais similar aos ácidos graxos saturados do que aos insaturados. Diversos estudos têm identificado uma associação entre a ingestão de AGT e maior risco a doenças neurodegenerativas, cardiovasculares e efeitos pró inflamatórios. Neste estudo, avaliamos os efeitos dos ácidos graxos trans sob marcadores inflamatórios, bioquímicos, comportamentais e do sistema nervoso central em ratos adultos Wistar. Nossos resultados demonstraram que AGT induzem um aumento na produção de citocinas pró inflamatórias (IL1, IL6, IL10 e TNFα) em ambas concentrações normo e hiperlipídicas tanto no líquido cerebroespinhal quanto no plasma. Com relação aos marcadores oxidativos, AGT elevaram as concentrações destes marcadores mais do que as respectivas dietas com banha de porco suportando um possível componente inflamatório nos AGT independente da concentração da dieta. Nos marcadores cerebrais, a suplementação com AGT causou uma redução na massa e potencial de membrana mitocondrial no córtex, elevou marcadores inflamatórios e oxidativos em córtex e hipocampo e gerou prejuízos a performance dos ratos Wistar no Campo Aberto. Este estudo representa uma nova ferramenta para entender os mecanismos bioquímicos dos AGT em marcadores séricos, do líquido cerebroespinhal e do sistema nervoso central. De uma forma geral, esses achados sugerem que a composição lipídica é mais importante do que a quantidade consumida em termos de AGT e ácidos graxos cis. / Recent data regarding Trans Fatty Acids (TFAs) have implicated this lipid as being particularly deleterious to human health. TFAs are unsaturated fatty acids that contain at least one non conjugated double bond in the trans configuration, resulting in a more linear shape. The presence of a trans double bond in a fatty acid chain results in a smaller bond angle, or kink, than in a cis double bond, resulting in a fatty acid chain conformation that is more similar to a saturated fatty acid than to an unsaturated fatty acid. Several studies have identified an association between trans fat intake and a risk of neurodiseases, cardiometabolic disease and pro-inflammatory effects. In this study, were evaluated the trans fatty acids on inflammatory, biochemical and behavioral parameters and central nervous system of adult Wistar rats. Our results has demonstrated that TFAs induce the production of proinflammatory cytokines (IL1, IL6, IL10 and TNFα) in animal models fed normo- and hyperlipidic diets in both cerebrospinal liquid and blood. In relation to oxidative parameters, the TFA diet elevated the CSF concentration of these parameters more than the Cis Fatty Acid diet, supporting a possible inflammatory component to the PHSO diet that is independent of concentration. In the brain parameters, dietary supplementation with AGT caused a reduction in mitochondrial mass and membrane potential in the cortex, impaired inflammatory and oxidative parameters in the cortex and hippocampus and resulted in alterations in the open field task performance of Wistar rats. This study represents a new approach to understand the biochemical mechanisms of TFA in serum parameters, cerebrospinal fluid and center nervous system. Overall, these findings suggest that fat composition is more important than the quantity of fat consumed in terms of dietary cis and trans fatty acids.

Uma memória previamente consolidada pode novamente tornar-se lábil através da reativação (desestabilização), necessitando da reconsolidação para se restabilizar e persistir. Quando a memória se encontra no estado lábil ela é suscetível a interferências ou modificações. Portanto, a reconsolidação abre a possibilidade de alterar memórias de medo indesejáveis. Neste trabalho, foi utilizado um novo desenho experimental, onde os animais condicionados a um contexto aversivo eram distraídos, com um sopro suave de ar, quando apresentavam respostas de medo durante a reexposição ao contexto condicionado. Foi observado que um estímulo distrator apresentado durante o estado lábil da memória é capaz de diminuir a aversividade da mesma. A atenuação da memória aversiva foi duradoura já que os animais não demonstraram retorno do medo em teste realizados até 20 dias após o treino. Além disso, foi demonstrado que o estímulo distrator só é efetivo se a memória for previamente desestabilizada. Quando a desestabilização não ocorre, seja devido da exposição a um contexto novo ou ao bloqueio farmacológico da desestabilização, o estímulo distrator não é efetivo em reduzir a memória aversiva. Adicionalmente, foi demonstrado que quando o estímulo distrator é apresentado no período de consolidação, a memória também é prejudicada. Juntos, esses resultados demonstram que a reexposição sob distração pode ser uma estratégia não-farmacológica eficaz no tratamento de memórias aversivas. / Memories when reactivated enter a transient, labile state, which is follow by a re-stabilization process termed reconsolidation. During labile state memories are sensitive to interferences. Thus, reconsolidation provides an opportunity to change an unwanted fear memory. In this study, we describe a novel behavioral design in which contextual fear conditioned animals was distract, with a soft air puff, when expressed freezing response during memory reactivation. Our results showed that distractor stimulus was able to disrupted fear memory when presented during labile state and this disruption was lasting to 20 days after training. Furthermore, was demonstrated that distractor stimulus effectiveness is dependent of memory destabilization. If animals are expose in a novel context or destabilization are pharmacological blocked the distractor stimulus not is effective. Additionally, memory consolidation was disrupted by distraction. Taken together, these results showed that distraction disrupted memory reconsolidation been an effective non pharmacologic strategy to impair fear memories.