A obesidade é uma doença que atualmente atinge proporções pandêmicas. A atividade inflamatória subsequente ao aumento do tecido adiposo está associada a vários prejuízos causados pela obesidade. Pacientes obesos tendem a apresentar inflamação de baixo grau sustentada, conhecida como metainflamação, principalmente pela produção excessiva de mediadores proinflamatórios pelo tecido adiposo. Dentre os distúrbios causados pela obesidade, destaca-se a potencialização das mudanças fisiológicas que ocorrem no envelhecimento, levando à diminuição da capacidade de adaptação do indivíduo ao ambiente e aumentando a sua vulnerabilidade a processos patológicos. Dessa forma, as doenças associadas à obesidade parecem ser ainda mais prejudiciais em idosos. Diante do conhecimento dos prejuízos à saúde causados pela obesidade, esse trabalho tem como objetivo avaliar a participação da obesidade, induzida por uma dieta de cafeteria, no perfil metabólico e na ativação de vias proinflamatórias no sistema nervoso central e verificar a diferença de suscetibilidade a essas alterações devido às diferentes idades dos indivíduos. Ratas Wistar de 3 e 18 meses, no início do experimento, foram tratadas por 12 semanas, com dieta de cafeteria (5,6 kcal/g) ou ração padrão (2,9 kcal/g) à vontade. Ao final das 12 semanas, no período do diestro do ciclo estral, os animais foram decapitados. Os animais que foram tratados com dieta de cafeteria, tanto de 3 quanto de 18 meses, apresentaram aumento do consumo energético diário. Além disso, apresentaram resistência à insulina e número aumentado de astrócitos observados no córtex cerebral. Houve efeito da idade e da dieta de cafeteria sobre o aumento do ganho de peso corporal ao longo do tratamento, o acúmulo de gordura abdominal e o aumento do índice adiposo. Houve efeito da interação entre os fatores idade e dieta na alteração dos níveis séricos de triacilgliceróis e na elevação da concentração da citocina proinflamatória interleucina 1β no córtex cerebral e no hipocampo. O fator idade atuou, de forma estatisticamente significativa no decréscimo da concentração sérica de HDL e de leptina, além de promover aumento da concentração da citocina proinflamatória IL-1β no hipocampo e do número de astrócitos observados no hipocampo dos animais analisados. Esse estudo mostra que, embora a dieta de cafeteria não seja capaz de induzir um quadro completo de dislipidemia em 12 semanas, em animais submetidos a essa dieta a partir dos 3 e dos 18 meses de idade, seria suficiente para induzir resistência à insulina em um período de tempo relativamente curto. Além disso, a dieta de cafeteria contribuiu para a deposição de tecido adiposo abdominal, que está associado a vários prejuízos à saúde, bem como para a manifestação de características de inflamação, como aumento da expressão de IL1-β e astrogliose em estruturas relacionadas à cognição, como o hipocampo e o córtex. / Obesity is a pandemic disease. Obese patients are likely to show low-grade inflammation, named “metainflammation”, mainly due to an excessive production of inflammatory mediators by adipose tissue. Obesity intensifies age-related physiological changes, increasing the vulnerability of elderly patients to pathological processes. Thus, obesity-related diseases are accentuated in the elderly. Despite of obesity-related disorders, the aims of this study are to evaluate the role of cafeteria diet-induced obesity on the metabolic profile and on the proinflammatory pathways activation in the central nervous system, and to evaluate the vulnerability to the disorders accordingly the stage in life of the rats. Three and 18 months-old female Wistar rats were treated for 12 weeks with cafeteria diet (5,6 kcal/g) or standard chow (2,9 kcal/g) ad libitum. At the end of 12 weeks, at the diestrous phase of estrous cycle the rats were killed. All the cafeteria diet-fed rats showed increased diary energetic intake. Also, the cafeteria diet-fed rats showed insulin resistance, higher blood leptin level and increased number of astrocytes in the cerebral cortex. There were diet-induced effects on increasingly body weight, abdominal fat deposition and adipose index. There was interaction between diet and age on the blood triglyceride levels and on the increase of Interleukin 1-β levels in hippocampus. The age-related effects were the decrese in HDL and leptin blood levels, the increased levels of IL1-β in the hippocampus and the astrogliosis in the hippocampus. This study shows that, although cafeteria diet for 12 weeks did not induce a complete dislipidemic profile, it was capable to induce insulin resistance in a short period of time. Also, cafeteria diet contributed to increased abdominal fat. Abdominal fat is related to several adverse health effects. Cafeteria diet also induced the manifestation of inflammation features, like increased expression of IL-1β and astrogliosis in the hippocampus and in the cerebral cortex.

Orientador: Angelina Zanesco / Banca: Luiz Osorio Silveira Leiria / Banca: Leandro Pereira de Moura / Banca: Fabiola Taufic Monica Iglesias / Banca: Gilberto de Nucci / Resumo: O sistema nervoso simpático desempenha importante papel no sistema cardiovascular e no metabolismo, sendo que os receptores adrenérgicos do subtipo β3 (β3 -AR) estão amplamente distribuídos em diferentes células, encontrando-se especialmente no tecido cardíaco, musculatura lisa e tecido adiposo. Esses receptores estão relacionados a diversas ações fisiológicas, como relaxamento da musculatura lisa vascular e não vascular, lipólise do tecido adiposo branco e termogênese do tecido adiposo marrom. Por outro lado, a importância dos β3 -AR no tecido adiposo perivascular (PVAT) e regulação do tono vascular não é conhecida. O mirabegron (YM-178) é um agonista β₃-AR seletivo, atualmente desenvolvido por Astellas Pharma Inc., e aprovado desde 2012 pelos EUA, para tratamento de bexiga hiperativa, considerando a ação dos receptores β₃-AR no relaxamento do músculo liso. Contudo não existe nenhum estudo envolvendo o mirabegron nos parâmetros cardiometabólicos plasmáticos e no metabolismo do tecido adiposo e em modelos de obesidade. Objetivos: Analisar os efeitos do tratamento de Mirabegron (Mira), um agonista β₃-AR seletivo, por duas semanas em parâmetros cardiometabólicos e reatividade vascular na presença ou ausência de PVAT de camundongos obesos. Métodos: Camundongos C57BL/6J foram divididos em grupos controle veículo (CTR), controle tratado com Mira (CTR+MIRA), obeso alimentado com dieta hiperlipídica (HFD 12 semanas) tratado com veículo (OB) e obeso tratado com Mira (OB+MIRA). Mira f... (Resumo completo, clicar acesso eletrônico abaixo) / Abstract: Sympathetic nervous system plays an important role in the cardiovascular system and metabolism. In particular, the β3 subtype adrenergic receptors (β3-AR) are widely distributed in different cells, especially in cardiac tissue, smooth muscle and adipose tissue. These receptors are related to several physiological actions, such as vascular and non-vascular smooth muscle relaxation, lipolysis and thermogenesis. In addition, β3-AR participates in the increasing of the number of mitochondria at specific sites of white adipose tissue, called browning of white adipose tissue. Finally, it is not known whether these receptor subtypes may play a role in regulation of the perivascular adipose tissue (PVAT) vasomotricity. Despite these important actions involving these receptor population, studies involving selective β3-AR agonists on obesity state are scarce. Mirabegron (YM-178) is a selective β₃-AR agonist, currently developed by Astellas Pharma Inc. and approved since 2012 by the USA for overactive bladder treatment, considering the action of β₃-AR receptors on smooth muscle relaxation. Intrestingly, there is no study involving the effects of mirabegron on cardiometabolic parameters, adipose tissue metabolism in obesity models. Objectives: To examine the effects of Mirabegron (Mira) treatment, for two weeks on cardiometabolic parameters and vascular reactivity in the presence or in the absence of PVAT in obese mice. Methods: C57BL / 6J mice were divided into vehicle control (CTR), Mi... (Complete abstract click electronic access below) / Doutor

A síndrome dos ovários policísticos (polycystic ovary syndrome – PCOS) constitui o distúrbio endócrino mais comum em mulheres em idade reprodutiva, afetando cerca de 5 a 10% das mulheres em todo o mundo. Caracteriza-se por hiperandrogenismo e disfunção ovariana, incluindo oligo-anovulação e/ou ovários policísticos na ausência de outras doenças que causem hiperandrogenismo. Também importante é o reconhecimento da PCOS como uma disfunção metabólica, manifestada por obesidade abdominal, resistência à insulina, dislipidemia e hipertensão. Estes fatores aumentam o risco para diabetes tipo 2 e, provavelmente, doença cardiovascular. O tecido adiposo secreta adipocinas e pode mediar inúmeros processos fisiológicos. Entre as adipocinas, a leptina e a adiponectina têm sido associadas com índice de massa corporal (IMC), ação da insulina e metabolismo da glicose. Além disso, o tecido adiposo armazena, mobiliza e forma esteróides a partir de interconversões de vários metabólitos hormonais. A aromatase é a enzima-chave para a síntese de estrogênios a partir de androgênios e está presente no tecido adiposo. Evidências indicam associações entre hormônios sexuais e hipertensão arterial sistêmica. Nas mulheres com PCOS, a hipertensão tem sido relacionada ao excesso de androgênios e à resistência à insulina. No presente estudo, avaliamos os níveis séricos de leptina e adiponectina, calculamos a relação leptina/adiponectina (L/A), bem como determinamos a expressão gênica de leptina, adiponectina e aromatase no tecido adiposo subcutâneo de mulheres com PCOS e de mulheres controles não hirsutas, com ciclos ovulatórios e pareadas para IMC. Encontramos níveis mais elevados de leptina sérica nas pacientes PCOS com sobrepeso/obesidade em relação com mulheres de peso normal, enquanto que as concentrações de adiponectina foram semelhantes em todos os subgrupos. A relação L/A foi maior nos subgrupos sobrepeso/obesidade quando comparados com o grupo controle de peso normal. A expressão gênica de leptina no tecido adiposo subcutâneo foi maior nas mulheres PCOS com sobrepeso/obesidade em relação às controles de peso normal, enquanto que a expressão gênica de adiponectina foi semelhantes entre os grupos. Na análise de regressão múltipla, o percentual de gordura corporal contribuiu significativamente para a relação L/A em PCOS, independentemente do IMC e do índice de androgênios livres. O RNAm da aromatase no tecido adiposo foi significativamente mais elevado no grupo de PCOS hipertensas (NCEP/ATP III 2001) quando comparado com as PCOS normotensas e com o grupo controle. Uma correlação positiva entre a expressão gênica de aromatase e a pressão arterial sistólica e diastólica foi observada nas pacientes com PCOS. Em conclusão, os dados do presente estudo sugerem que as alterações observadas na secreção de adipocinas parecem estar mais relacionadas à adiposidade do que ao excesso de androgênios na PCOS. Além disso, o excesso de androgênios e a hiperinsulinemia podem ter algum papel nos mecanismos moleculares que ativam a transcrição do RNAm da aromatase no tecido adiposo de mulheres com PCOS. / Polycystic ovary syndrome (PCOS), the most prevalent endocrine disorder in women of reproductive age, affects 5 to 10% of women worldwide. It is characterized by hyperandrogenism and ovarian dysfunction, including oligo-anovulation and/or polycystic ovaries in the absence of other diseases affecting pituitary and/or adrenal glands. Also important is the recognition of PCOS as a metabolic disorder, manifested by abdominal obesity, insulin resistance, dyslipidemia and hypertension. These factors increase the risk for type 2 diabetes and probably for cardiovascular disease. Adipose tissue has been recognized as an active endocrine organ and a secretory mediator of numerous physiological processes. The adipokines leptin and adiponectin have been associated with body mass index (BMI), insulin action, and glucose metabolism. In addition, adipose tissue is a reservoir of steroids, a center of sexual hormone conversion and a source of estrogen. Aromatase is the key enzyme for estrogen synthesis from androgens and is present in adipose tissue. Evidences indicate there are associations between sex hormones and arterial hypertension. In women with PCOS, hypertension has been linked to androgen excess and insulin resistance. In the present study, we assessed leptin and adiponectin serum levels and the leptin to adiponectin (L/A) ratio and evaluated the gene expression of leptin, adiponectin and aromatase in subcutaneous adipose tissue from PCOS and BMI-matched non-hirsute, ovulatory control women. We found higher leptin serum levels in overweight/obese PCOS patients than in normoweight women, while adiponectin concentrations were similar in all subgroups. L/A ratio was higher in overweight/obese subgroups than in normoweight controls. Subcutaneous leptin gene expression was higher in overweight/obese PCOS women than in normoweight controls, while the adiponectin gene expression was similar in all groups. On multiple regression analysis, percentage of body fat contributed significantly to L/A ratio in PCOS, independently of BMI and free androgen index. Subcutaneous aromatase mRNA was significantly higher in the hypertensive (NCEP/ATP III 2001) PCOS than in normotensive PCOS and control groups. A positive correlation between aromatase gene expression in subcutaneous fat with systolic and diastolic blood pressure was observed in PCOS patients. In conclusion, results from our study suggest that altered adipocyte secretion seems to relate to adiposity rather than to androgen excess in PCOS. In addition, our data suggest that androgen excess and hyperinsulinemia may play a role on the molecular mechanisms that activate aromatase mRNA transcription in abdominal fat tissue in women with PCOS.

Submitted by Hiolanda Rêgo (hiolandarego@gmail.com) on 2017-05-26T15:49:55Z No. of bitstreams: 1 Dissertação_ICS_ Adenilma Duranes Sousa.pdf: 2663510 bytes, checksum: fba19cb0e919e73195f00b46394234aa (MD5) / Made available in DSpace on 2017-05-26T15:49:55Z (GMT). No. of bitstreams: 1 Dissertação_ICS_ Adenilma Duranes Sousa.pdf: 2663510 bytes, checksum: fba19cb0e919e73195f00b46394234aa (MD5) / As leishmanioses são infecções causadas pelo tripanosomatídeo Leishmania sp. Estima-se que 350 milhões de pessoas estão sob o risco de contrair leishmaniose, em todo mundo. A Leishmaniose visceral (LV) é a forma clínica mais grave da doença. Os principais sintomas apresentados são febre prolongada, hepatomegalia, esplenomegalia, hipergamaglobulinemia, pancitopenia, perda de peso, e em casos não tratados, óbito. Algumas alterações bioquímicas e metabólicas são observadas na VL, principalmente aumento das concentrações plasmáticas de triglicerídeos, colesterol e LDL. O tecido adiposo e as adipocinas, podem participar da regulação da resposta imune em processos inflamatórios e em diversas infecções. O objetivo geral desse trabalho foi investigar a relação do tecido adiposo e das adipocinas com parâmetros bioquímicos e imunológicos observados na leishmaniose visceral experimental. Foram utilizados 41 hamsters dourados (Mesocricetus auratus) machos adultos, com peso médio de 132 gramas. Os animais foram infectados com 1X105 promastigota de L. infantum na derme da orelha. A eutanásia ocorreu 4 e 8 meses após a infecção. O Tecido adiposo, o baço e o fígado foram coletados, pesados e acondicionados em solução de conservação. A carga parasitária do baço e fígado, foi avaliada por meio da técnica de diluição limitante. A expressão das citocinas no baço foi avaliada por meio da realização do qRT-PRC. Os parâmetros bioquímicos e as adipocinas foram dosadas no soro. Foi realizada a análise histopatológica e a morfometria do tecido adiposo corado por HE. As análises estatísticas foram realizadas usando o Software GraphPad Prism 5.0. Os animais infectados apresentaram perda de peso e esplenomegalia no oitavo mês de infecção. Os animais apresentaram carga parasitária moderada, tanto no baço, quanto no fígado. Não houve diferença na expressão das citocinas, nem na concentração sérica dos parâmetros bioquímicos e das adipocinas. A carga parasitária do baço e do fígado apresenta correlação negativa com os níveis de albumina. A carga parasitária do baço apresentou correlação negativa com os níveis de colesterol total. A Análise de correlação das adipocinas, mostrou que a adiponectina está correlacionada negativamente com as concentrações de glicose e albumina dos animais controles. E a leptina apresentou correlação negativa com o peso relativo do baço no grupo dos animais controle e correlação positiva com as concentrações séricas de triglicérides e VLDL, em ambos os grupos. Adicionalmente, a leptina apresentou correlação positiva com a carga parasitária do baço e com o peso relativo do tecido adiposo epididimal e retroperitoneal. Já as concentrações de HDL estão correlacionadas negativamente com os níveis de leptina, em hamster infectados com L. infantum. As análises de correlação mostraram que leptina tem relação com o estabelecimento da LV em hamsters.

Dissertação (mestrado) - Universidade Federal de Santa Catarina, Centro de Ciências Biológicas, Programa de Pós-Graduação Multicêntrico em Ciências Fisiológicas, Florianópolis, 2014. / Made available in DSpace on 2014-08-06T17:56:01Z (GMT). No. of bitstreams: 1 326328.pdf: 2019637 bytes, checksum: d942bf130a8793b2f4c7885aa06efef3 (MD5) Previous issue date: 2014 / É sabido que os glicocorticoides (GCs) podem diminuir a sensibilidade periférica à insulina, termo que é aplicado como resistência à insulina (RI), fato que parece ser decorrente de alterações em eventos pós-receptores de insulina. A RI está presente nos indivíduos obesos e uma possível explicação para a RI nesses indivíduos se deve a ativação subclínica de vias de sinalização inflamatórias que incluem as cinases c-jun-N-terminal (JNK) e a cinase do IkB (IKKß). Quando ativadas, estas cinases fosforilam o IRS-1 no resíduo serina e atenuam a sinalização insulínica. A fim de verificar se há alguma similaridade entre esse processo e a RI induzida pela administração de GCs, verificamos o conteúdo e o grau de fosforilação de proteínas chaves das vias insulínica e inflamatórias no tecido adiposo branco (TAB) de ratos tratados com dexametasona (DEX). Para tal, ratos Wistar receberam injeção diária de DEX (1 mg/kg de peso corpóreo) durante 5 dias consecutivos, enquanto animais controle receberam solução salina (CTL). Foram analisados o peso corpóreo e consumo de ração, glicose sanguínea, componentes plasmáticos (triaciglicerol, insulina, lactato, TNF-a, IL-6, IL-1ß e IL-10), conteúdo de glicogênio hepático, liberação de glicerol, tolerância à glicose, à insulina e ao piruvato. Também foram avaliados o conteúdo de proteínas envolvidas na sinalização insulínica (IRS-1 e Akt) e na sinalização inflamatória (JNK, IKKß, TLR-4 e NFkB) além do receptor de glicocorticoide (GR) e da enzima 11ß-HSD1 no TAB. Os ratos DEX apresentaram redução do peso corpóreo (17%) e do consumo de ração (58%), aumento das concentrações de glicose (25%), insulina (500%), lactato (80%) e de triacilglicerol (190%) (p<0,05). O conteúdo de glicogênio hepático bem como da liberação basal de glicerol ex vivo foram 250% e 50% maiores nos ratos DEX, em relação aos ratos CTL (p<0,05). Os testes in vivo revelaram a presença de intolerância à glicose (GTT), redução da sensibilidade à insulina (ITT) bem como aumento da gliconeogênese (PTT), provavelmente de origem hepática, nos animais DEX (p<0,05). Os ratos DEX tiveram redução no conteúdo total (46%) e fosforilado (44%) da Akt, aumento da fosforilação em serina do IRS-1 (63%), redução no conteúdo do GR (47%) e aumento do conteúdo da enzima 11ß-HSD1 (69%) em TAB em relação ao grupo CTL (p<0,05). A fosforilação das proteínas-cinases JNK e IKKß foi46% e 52% menor no TAB de ratos DEX, respectivamente (p<0,05), enquanto das proteínas TLR-4 e NFkBp65 mantiveram-se similares aos do grupo CTL. As concentrações plasmáticas de TNF-a e IL-1ß também estiveram diminuídas nos ratos DEX (p<0,05). Com base em nossos resultados concluímos que o tratamento com DEX por 5 dias consecutivos reproduz a atenuação da sinalização insulínica (redução da fosforilação de Akt e aumento da fosforilação do IRS-1 em serina) em TAB de ratos. Essa atenuação da sinalização insulínica parece não ser resultante de uma ativação exacerbada dos componentes da via inflamatória já que o tratamento com o GC esta associado à redução ou inalteração do conteúdo e/ou da atividade das proteínas JNK, IKKß, TNF-a, TLR-4 e NFkBp65.<br> / Abstract : It is known that glucocorticoids (GCs) may decrease peripheral insulin sensitivity, which means insulin resistance (IR), and appears to be a consequence of changes in the insulin post-receptor events. IR is present in obese individuals and a possible explanation for the IR in these individuals is due to the subclinical activation of inflammatory pathways including the c-jun N-terminal (JNK) and IkB kinase (IKKß) kinases. When activated, these kinases phosphorylate IRS-1 at serine residues attenuating the insulin signaling. To elucidate if there is a similarity between this process and the GCs induced-IR, we evaluated the content and the activity of key proteins of the insulin and inflammatory pathways in white adipose tissue (WAT) of rats treated with dexamethasone (DEX). For this purpose, Wistar rats received daily injection of DEX (1 mg / kg body weight) for 5 consecutive days, while control animals received saline (CTL). Body weight and food intake, blood glucose, plasma components (triacyglycerol, insulin, lactate, TNF-a, IL-6, IL-1ß and IL-10), hepatic glycogen content, glycerol release and glucose, insulin and pyruvate tolerance were analyzed. We also evaluated the content of proteins involved in the insulin pathway (Akt, and IRS-1) and in the inflammatory pathway (JNK, IKKß, NFkB and TLR-4), as well as the glucocorticoid receptor (GR) and the enzyme 11ß-HSD1 in the WAT. DEX rats showed reduced body weight (17%) and food intake (58%), increased blood glucose values (25%) and augmented circulating insulin (500%), lactate (80%) and triacylglycerol (190%) (p<0.05). The hepatic glycogen content as well as the ex vivo glycerol release were 250% and 50% higher in DEX, compared to CTL rat, respectively (p<0.05). In vivo tests revealed impaired glucose tolerance (GTT), decreased insulin sensitivity (ITT) and increased hepatic gluconeogenesis (PTT), probably of hepatic origin, in DEX rats (p<0.05). DEX rats showed reduced Akt content (46%) and phosphorylation (44%), increased IRS-1 serine phosphorylation (63%), reduced GR content (47%) and augmented 11ß-HSD1 content (69%) in WAT, compared to CTL group (p<0.05). The JNK and IKKß phosphorylation was 46% and 52% lower in WAT from DEX rats, respectively (p<0.05), whereas the TLR-4 and NFkBp65 protein contents remained similar between the groups. Plasma concentrations of TNF-a and IL-1ß were also reduced in DEX rats (p<0.05). Based on our results we conclude that dexamethasone treatment for 5 consecutive days reproduces the attenuation of the insulin signaling (reduction of Akt phosphorylation and increase of IRS-1 serine phosphorylation) in WAT of rats. This attenuation of insulin pathway does not seem to be a result of an exacerbation of the inflammatory pathway activation, considering the GC treatment is associated to a reduction or no change in the content and/or activity of the JNK , IKKß , TNF-a , TLR-4 and NFkBp65 proteins.

Tese (doutorado) - Universidade Federal de Santa Catarina, Centro de Ciências da Saúde, Programa de Pós-Graduação em Ciências Médicas, Florianópolis, 2014. / Made available in DSpace on 2015-02-05T20:35:33Z (GMT). No. of bitstreams: 1 330195.pdf: 1831812 bytes, checksum: f6a68fbb57eacf59ff3ac3dff0a9e6d9 (MD5) Previous issue date: 2014 / Abstract : Introdução: Nas últimas décadas, descobriu-se que o adipócito era capaz de secretar adipocinas e citocinas com funções autócrinas, parácrinas e sistêmicas, que influenciavam de maneira importante, todo o metabolismo dos organismos vivos. Dentre os fatores associados aos distúrbios da biologia do adipócito, podemos destacar o estresse oxidativo, intimamente relacionado à formação dos produtos finais de glicação avançada (AGEs). Esparsos trabalhos na literatura têm procurado elucidar o papel da via do óxido nítrico (NO.) na fisiologia do tecido adiposo. Essa via, por meio do aumento das concentrações de guanosina 3'5' monofosfato cíclico (GMPc), promove efeitos positivos na biologia do adipócito, e consequentemente maior equilíbrio no balanço energético e metabolismo sistêmicos. Outra maneira de incrementar as concentrações de GMPc é por meio da administração de inibidores da fosfodiesterase 5, medicamentos que no futuro talvez sejam úteis nos distúrbios do tecido adiposo, como a obesidade, e suas consequências. Objetivos: Identificar o impacto de uma dieta hipercalórica e hiperlipídica (dieta de cafeteria) sobre a variação do peso corporal, a ingestão alimentar, a resistência à ação da insulina, as concentrações séricas de adiponectina, bem como nas concentrações de fator de necrose tumoral a (TNFa), interleucina 6 (IL-6), NO. e AGEs no tecido adiposo visceral. Analisar o efeito do tadalafil na intensidade da resistência à insulina, nas concentrações séricas de adiponectina, assim como nas concentrações de TNFa, IL-6 e AGEs no tecido adiposo visceral. Métodos: Estudo analítico experimental controlado e com intervenção, envolvendo um total de 72 ratos machos Wistar, distribuídos em 06 subgrupos de 12 animais: subgrupo ração salina ? SGRS, recebeu ração e solução salina; subgrupo ração tadalafil - SGRT, recebeu ração e tadalafil; subgrupo ração magro - SGRM, recebeu ração e solução salina; subgrupo cafeteria salina - SGCS, recebeu dieta de cafeteria e solução salina; subgrupo cafeteria tadalafil - SGCT, recebeu dieta de cafeteria e tadalafil e subgrupo cafeteria magro - SGCM, recebeu dieta de cafeteria e solução salina. O estudo teve a duração de 10 semanas, e o peso dos animais e a ingestão alimentar foram registrados semanalmente. Foram mensuradas as concentrações séricas de insulina e adiponectina, bem como as concentrações de TNFa, IL-6, nitrito (metabólito do NO.) e compostos de Maillard (equivalente aos AGEs) no tecido adiposo, sendo que todo o material foi coletado no momento do sacrifício dos animais. Na análise estatística foram empregados os testes ANOVA one way com correção de Tukey,ANOVA two way e teste t pareado. Resultados: Foi observado um aumento significativo do peso corporal ao longo do estudo em todos os subgrupos. A média de peso final aos 60 dias foi superior nos animais alimentados com dieta de cafeteria. A ingestão alimentar em gramas foi maior nos animais alimentados com ração. Os animais alimentados com dieta de cafeteria apresentavam uma maior expansão do tecido adiposo. As médias do modelo de avaliação da homeostase para resistência à insulina (HOMA-IR) entre os subgrupos no final do acompanhamento não foram diferentes. A proporção da adiponectina sérica em relação ao tecido adiposo total foi maior nos animais que receberam dieta balanceada, e as concentrações de IL-6 foram maiores nos animais que receberam dieta de cafeteria. A concentração de nitrito foi maior nos animais submetidos à dieta balanceada. As concentrações médias de compostos de Maillard foram maiores nos animais submetidos à dieta de cafeteria e nos animais de maior peso. Nos animais submetidos à dieta de cafeteria e tadalafil a concentração de compostos de Maillard foi menor. Conclusão: A dieta de cafeteria por 60 dias, apesar de mais sacietógena, levou a uma média de peso ponderal e tecido adiposo visceral superiores nos animais a ela submetidos sem, no entanto, induzir a um aumento expressivo da resistência à ação da insulina. Apesar da expansão do tecido adiposo total, a dieta de cafeteria não foi capaz de aumentar proporcionalmente as concentrações de adiponectina, sugerindo a interferência de outros fatores na fisiologia desta adipocina. O aumento das concentrações de IL-6, no tecido adiposo visceral dos animais alimentados com dieta de cafeteria, indica um provável incremento no processo inflamatório local. A diminuição dos níveis de nitrito no tecido adiposo dos animais submetidos à dieta de cafeteria sugere um prejuízo à via do óxido nítrico, enquanto o aumento das concentrações de compostos de Maillard, e, por consequência de AGEs, uma intensificação do processo oxidativo. Outro fator relacionado aos compostos de Maillard foi o peso, já que os animais de menor peso apresentavam também uma concentração menor destes compostos. O uso do tadalafil não foi eficaz na redução da resistência à insulina, no aumento das concentrações séricas de adiponectina e na diminuição das concentrações de citocinas inflamatórias no tecido adiposo. No entanto, o tadalafil mostrou-se capaz de reduzir a concentração de AGEs no tecido adiposo de animais submetidos à dieta de cafeteria, sugerindo um possível efeito favorável sobre o estresse oxidativo.<br> / Abstract : Introduction: In recent decades, new discoveries demonstrated that the adipocytes were capable of secreting adipokines and cytokines with autocrine, paracrine and systemic functions, which influenced in important ways throughout the metabolism of living organisms. Among the factors associated with adipocyte biology disorders we can highlight oxidative stress, closely related to the advanced glycation end products (AGEs) formation. Few studies have sought to elucidate the role of nitric oxide (NO.) in the adipose tissue physiology. This pathway increases the titles of guanosine 3'5' cyclic monophosphate (cGMP), ultimately bringing positive effects on adipocyte biology, and consequently greater balance in energy control and systemic metabolism. Another way to increase cGMP levels is through the administration of phosphodiesterase-5 (PDE5) inhibitors, drugs that may be useful in the future in adipose tissue disorders, such as obesity and its consequences. Objectives: To identify the impact of a hypercaloric and hyperlipidic diet (cafeteria diet) on body weight variation, food intake, insulin resistance, serum adiponectin levels and visceral adipose tissue levels of tumor necrosis factor a (TNFa), interleukin 6 (IL-6), NO., and AGEs. To analyze the consequences of the administration of tadalafil in the intensity of insulin resistance, serum adiponectin levels, as well as visceral adipose tissue levels of TNFa, IL-6, and AGEs. Methods: Analytical controlled experimental intervention study involving a total of 72 male Wistar rats, divided into 06 subgroups of 12 animals: chow-saline subgroup (CSG) received chow and saline; chow-tadalafil subgroup (CTG) received chow and tadalafil; chow lean subgroup (CLG) received chow and saline; cafeteria diet-saline subgroup (CafSG) received cafeteria diet and saline; cafeteria diet-tadalafil subgroup (CafTG) received cafeteria diet and tadalafil; and cafeteria diet-saline lean subgroup (CafLG) received cafeteria diet and saline. The study lasted 10 weeks and weight gain and food intake were recorded weekly. Insulin and adiponectin levels were detected in serum. The concentrations of TNFa, IL-6, nitrite (NO. metabolite) and Maillard compounds (AGEs equivalent) were detected in adipose tissue. All the samples for testing were collected at the time of animals' sacrifice. In statistical analysis, one-way ANOVA test with Tukey correction, two-way ANOVA, and paired t test were applied. Results: A significant increase of body weight throughout the study was observed in all subgroups. The mean final weight at 60 days was higher in animals fedcafeteria diet. Food intake in grams was higher in animals fed with chow at many times of the study. Animals fed the cafeteria diet had greater expansion of epididymal and retroperitoneal adipose tissue. The mean homeostasis model assessment for insulin resistance (HOMA -IR) between subgroups at the end of follow-up was not different. The serum adiponectin levels in relation to total adipose tissue were higher in animals fed a balanced diet, and the IL-6 levels were higher in animals fed cafeteria diet. The nitrite concentration was higher in animals subjected to balanced diet. Mean levels of Maillard compounds were higher in animals subjected to the cafeteria diet, and in the animals with the highest weight. In animals submitted to the cafeteria diet and tadalafil, concentration of Maillard compounds was lower. Conclusion: Cafeteria diet for 60 days, although more satiating, led to a higher mean total weight and visceral adipose tissue in animals that were submitted to it, without, however, resulting in a significant increase in insulin resistance. Despite the total adipose tissue expansion, cafeteria diet was not able to proportionally increase adiponectin levels, suggesting the influence of other factors in this adipokine production. Increased levels of visceral adipose tissue IL-6 of animals fed cafeteria diet indicate a probable increase in the local inflammatory process. The decreased adipose tissue nitrite levels of animals subjected to the cafeteria diet suggest injury to the nitric oxide pathway, while increased Maillard compounds levels, and consequently of AGEs, an intensification of the oxidative process. Another factor related to Maillard compounds was the weight of the animals, as leaner animals showed lower concentration of these compounds. The use of tadalafil was not effective in reducing insulin resistance, increasing adiponectin levels, and decreasing inflammatory cytokines in adipose tissue. However tadalafil was capable of reducing AGEs levels in the adipose tissue of animals fed cafeteria diet, suggesting a possible favorable effect on oxidative stress.

Tese (doutorado) - Universidade Federal de Santa Catarina, Centro de Ciências Biológicas, Programa de Pós-Graduação em Bioquímica, Florianópolis, 2015. / Made available in DSpace on 2015-09-29T04:08:50Z (GMT). No. of bitstreams: 1 334525.pdf: 7690982 bytes, checksum: a566cb5bfdf076e3559a98ca79c5fc74 (MD5) Previous issue date: 2015 / A hiperglicemia crônica proveniente da diminuição da produção insulínica e do aumento da resistência tecidual à insulina é a principal causa de danos teciduais associados à diabetes e insulinoresistência, e pode ser desencadeada por fatores como menor disponibilidade de GLUT4. Compostos insulinoestimulantes e que regulam de forma rápida a homeostase da glicose e a translocação de GLUT4 para a membrana plasmática são de grande importância na terapêutica da diabetes, e nesse âmbito se encontram os triterpenos pentacíclicos (TPs) e a 1,25 (OH)2 vitamina D3 (1,25-D3). Os TPs são metabólitos vegetais amplamente disponíveis na dieta humana e sua potencial ação nutracêutica desperta atenção devido ao efeito antidiabético frequentemente relatado, porém, cientificamente pouco comprovado. Ainda, estudos sugerem que a deficiência em 1,25-D3 prejudica a secreção de insulina em ratos, podendo levar a diabetes melito tipo 2, enquanto o tratamento com esse hormônio aumentou a sensibilidade à insulina por estimular a expressão do receptor de insulina e o transporte de glicose. Contudo, os mecanismos de ação da 1,25-D3 neste aspecto ainda são pouco elucidados. Neste trabalho foi estudado o efeito antihiperglicêmico e o mecanismo de ação da 1,25-D3 e de triterpenos naturais na secreção insulínica e absorção tecidual de glicose. Para análise de curva tempo e dose resposta dos triterpenos, ratos Wistar machos após jejum (16 h) foram pré-tratados com os TPs (ácido betulínico (AB), ácido ursólico (AU), trihidroxioleanano (THO), 3ß-hidroxihopeno (BHH) ou fernenodiol) e após 30 min foi induzida a hiperglicemia para análise da tolerância à glicose. Do soro foram determinadas a glicemia, insulina, lactato desidrogenase, GLP-1 e a concentração de cálcio. Ainda nestes animais, o músculo sóleo e o fígado foram utilizados para dosagem de conteúdo total de glicogênio. Para estudos in vitro de mecanismo de ação, foram investigados os processos de captação de 14C-deoxiglicose, incorporação de 14C-timidina ao DNA, de 14C-leucina em proteínas em presença ou não de inibidores farmacológicos e expressão, síntese e translocação de transportadores GLUT4 no músculo e tecido adiposo. Em ilhotas pancreáticas isoladas de ratos foram estudados os efeitos desses compostos na secreção de vesículas contendo insulina, no influxo de 45Ca2+ e captação de 14C-deoxiglicose. Os triterpenos estudados reduziram fortemente a glicemia dos animais hiperglicêmicos, bem como aumentaram a insulina, o GLP-1 séricos e o conteúdo de glicogênio muscular e hepático, sem aumentar a atividade da lactato desidrogenase (LDH) e a concentração sérica de cálcio. Os ácidos betulínico, ursólico e trihidroxioleanano agiram estimulando a captação de glicose por uma via dependente de PI3K, contudo, diferentemente do ácido ursólico, o AB e THO não estimularam prioritariamente as vias de ação nuclear, mas estimularam a translocação de GLUT4 no período estudado. Estudos com a 1,25-D3 mostraram que esse hormônio age por mecanismo independente de PI3K, estimulou o aumento na incorporação de timidina ao DNA e o conteúdo total de GLUT4. Estudos com ilhotas pancreáticas isoladas incubadas em presença de ácido ursólico e 3ß-hidroxihopeno mostraram que estes tratamentosestimulam a secreção de insulina pelas células ß-pancreáticas. Os triterpenos 3ß-hidroxihopeno, fernenodiol e AB estimularam o influxo de 45Ca2+ em ilhotas pancreáticas por mecanismo dependente de canais de cálcio do tipo L e de potássio sensíveis a ATP e em especial, o AB agiu também através de mecanismo mediado por canais de cloreto. Estes resultados juntos mostram que todos os triterpenos testados apresentaram forte ação nas vias de sinalização voltadas para a homeostasia da glicose, estimulando à secreção de insulina em ilhotas pancreáticas, bem como o aumentaram no influxo de cálcio e/ou ativaram a captação de glicose no músculo esquelético e tecido adiposo assim como a 1,25-D3 estimulou a captação de glicose em músculo esquelético por meio de aumento de síntese e/ou translocação do GLUT4.<br> / Abstract : Chronic hyperglycemia resulting from decreased insulin production and increased tissue insulin resistance is the major cause of tissue damage associated with diabetes and insulin resistance, and can be triggered by factors such as low availability of GLUT4. Insulinogenic compounds that quickly regulates glucose homeostasis and translocation of GLUT4 to the plasma membrane are of great importance in diabetes therapy, like the pentacyclic triterpenes (TPs) and 1,25 (OH)2 vitamin D3 (1,25-D3). The TPs are plant metabolites widely available in the human diet and its potential nutraceutical action arouses attention due to the often reported antidiabetic effect, however, scientifically need proves. Also, studies suggest that 1,25-D3 deficiency impairs insulin secretion in rats, leading to type 2 diabetes, while the treatment with this hormone increased insulin sensitivity by stimulating insulin receptor expression and glucose transport. However, the mechanisms of action of 1,25-D3 in this regard are still poorly understood. In this work, was studed the antihyperglycemic effect and the mechanism of action of 1,25-D3 and natural triterpenes in insulin secretion and tissue uptake of glucose. For analysis of time and dose-response curve of the triterpenes, male Wistar rats after fasting (16 hours) were pretreated with the TPs (betulinic acid (BA), ursolic acid (UA), trihydroxyoleanane (THO), 3ß-hydroxyhopene (BHH) or fernenediol) and after 30 min was induced hyperglycemia for analysis of glucose tolerance. Were determined from serum glucose, insulin, lactate dehydrogenase, GLP-1 and calcium concentration. Also of these animals, the liver and soleus muscle were used for determination of the total glycogen content. In vitro mechanism of action studies of 14C-deoxyglucose uptake, 14C-thymidine incorporation into the DNA and 14C-leucine into protein in the presence or absence of pharmacological inhibitors and expression were investigated. Also, synthesis and translocation of GLUT4 transporters in muscle and adipose tissue were analysed. In isolated pancreatic islets of rats were studied the effects of these compounds in secretory vesicles containing insulin, in 45Ca2+ influx and uptake of 14C-deoxyglucose. The triterpenes studied reduced the blood glucose of hyperglycemic animals and stimulates the insulin increase, serum GLP-1 and the contents of muscle and liver glycogen, without increasing the activity of lactate dehydrogenase (LDH) and serum calcium concentration. The betulinic acid, ursolic and trihydroxyoleanane acted stimulating glucose uptake by a PI3K-dependent pathway, however, unlike the ursolic acid, AB and THO not primarily stimulated nuclear courses of action, but stimulated GLUT4 translocation of the study period. The 1,25-D3 showed a PI3K-independent mechanism, but stimulated the increase in thymidine incorporation to DNA and the total content of GLUT4. Studies using isolated pancreatic islets incubated in the presence of ursolic acid and 3ß-hydroxyhopene showed that these treatments stimulate insulin secretion from pancreatic ß-cells. The 3ß-hydroxyhopene, fernenediol and AB-stimulated 45Ca2+ influx in pancreatic islets was by a mechanism dependent of L-type calcium and ATP-sensitive potassium channels, andespecially, the AB act also through mechanisms mediated by chloride channels. These results together show that all triterpenes tested showed strong action in signaling pathways focused on glucose homeostasis by stimulating the secretion of insulin in pancreatic islets, as well as the increased calcium influx and/ or glucose uptake in skeletal muscle and adipose tissue as well as the 1,25-D3 stimulated glucose uptake in skeletal muscle by increasing the synthesis and GLUT4 translocation.

A obesidade é considerada uma epidemia na atualidade, principalmente nos países em desenvolvimento. Indivíduos com obesidade possuem maior risco para desenvolvimento de doenças cardiovasculares, diabetes mellitus tipo 2 (DM2) e alguns tipos de câncer, o que diminui a qualidade e expectativa de vida destes indivíduos. O tecido adiposo (TA) é o sítio anatômico da manifestação dos principais efeitos fisiopatológicos da obesidade. Alterações neste tecido estão implicadas, não somente no desenvolvimento da obesidade, mas também destas outras doenças associadas. Uma das alterações presentes nos indivíduos com obesidade é uma inflamação crônica de baixo grau, associada à produção aumentada de citocinas proinflamatórias. Evidências sugerem que o inflamassoma NLRP3 (Nod-like receptores family pyrin domain containing 3) é um dos principais responsáveis pela produção de citocinas proinflamatórias no TA, como a interleucina- 1β (IL-1β). Embora vários estudos tenham relatado uma associação do NLRP3 com obesidade e / ou resistência à insulina (RI); resultados contraditórios também foram relatados por outros estudos. Portanto, realizamos uma revisão sistemática para resumir os resultados de estudos que avaliaram a associação do NLRP3 com obesidade e RI. Dezenove estudos foram incluídos na revisão. Os estudos foram selecionados por apresentarem análises de expressão do NLRP3 no TA de indivíduos com e sem obesidade ou avaliarem associações entre polimorfismos neste gene e obesidade. Em geral, estudos em humanos indicam que a obesidade e RI estão associadas com a expressão aumentada de NLRP3 no TA. Estudos em ratos obesos corroboraram essa associação. Além disso, dieta com alto teor de gordura (DATG) aumenta a expressão de Nlrp3 no TA de camundongos, enquanto que a dieta que restringe calorias diminui sua expressão. Da mesma 12 forma, o bloqueio do Nlrp3 em camundongos protege contra a obesidade e RI induzidas por DATG. São escassos os estudos que avaliaram polimorfismos no NLRP3 e obesidade. Visto que a obesidade é uma doença multifatorial, com componentes ambientais e genéticos envolvidos no seu desenvolvimento, fatores diversos devem ser analisados, em especial, no TA. O comparative gene identification-58 (CGI-58) foi primeiramente identificado como um co-ativador da adipose triglyceride lipase (ATGL), aumentado a lipólise. Estudos mais recentes também identificaram funções do CGI-58 independentes da ativação da ATGL. O CGI-58 parece atuar como uma lysophosphatidic acid acyltransferase (LPAAT), ou seja, possui a capacidade de catalisar a modificação do ácido lisofosfatídico em ácido fosfatídico. Isto representa um passo importante na biossíntese de lipídios neutros e glicerofosfolipídios, gerando moléculas de sinalização que regulam processos inflamatórios e a ação da insulina. Até o momento, apenas alguns poucos estudos avaliaram a associação entre CGI-58 e obesidade, com resultados inconclusivos. Assim, comparamos a expressão de CGI-58 no TA subcutâneo (TAS) de indivíduos com diferentes categorias de índice de massa corporal (IMC). Também avaliamos se o CGI-58 se correlaciona com parâmetros de composição corporal, taxa metabólica de repouso (TMR), RI e perfis lipídicos e glicêmicos. Para tal, utilizamos biópsias de TAS de 67 indivíduos submetidos à cirurgia bariátrica ou cirurgia abdominal eletiva. Os pacientes foram divididos em: Grupo 1 (n = 14; IMC ˂ 27,0 kg/m2), Grupo 2 (n = 24; IMC 30,0 - 39,9 kg/m2) e Grupo 3 (n = 29; IMC ≥ 40,0 kg/m2). A expressão gênica do CGI-58 foi quantificada usando RT-qPCR. A expressão de CGI-58 foi diminuída em pacientes do Grupo 3 [mediana de 0,60 (0,45 - 0,85, percentil 25º - 75º)] e Grupo 2 [0,85 (0,50 - 1,23)] em comparação com pacientes do Grupo 1 [1,70 (0,99 - 2,70)] (p ˂ 0,001). Valores de CGI-58 acima da mediana foram associados com menor risco de obesidade, ajustando-se para as covariáveis (RC = 0,036, IC 95% 0,003 - 0,410). Além disso, a expressão de CGI-58 foi negativamente correlacionada com parâmetros de composição corporal (IMC, circunferência da cintura, porcentagens de massa gorda e massa magra), TMR, perfil lipídico (colesterol total e triglicerídeos), RI e hemoglobina glicada, enquanto correlacionou-se positivamente com o colesterol HDL. Sendo assim, a expressão de CGI-58 está diminuída em indivíduos com obesidade, estando associada com um pior perfil metabólico. De acordo com exposto é possível que NLRP3 e CGI-58 tenham um papel importante no desenvolvimento da obesidade. Parece que estes dois genes atuam de forma inversa, pois o NLRP3 está aumentado em indivíduos com obesidade enquanto o CGI-58 está diminuído. De forma interessante, um estudo anterior demonstrou que ratos com bloqueio de CGI-58 especificamente nos macrófagos e tratados com DATG tiveram inflamação exacerbada e RI devido à ativação do inflamassoma NLRP3 e consequente secreção de IL-1β. No entanto, mais estudo são necessários para esclarecer o papel do CGI-58 na patogênese da obesidade. / Nowadays, obesity is considered epidemic, especially in developing countries. Individuals with obesity are at greater risk for developing cardiovascular diseases, type 2 diabetes mellitus (T2DM) and some types of cancer, which reduces the quality and life expectancy of these individuals. Adipose tissue (AT) is the anatomical site of the manifestation of the main pathophysiological effects of obesity. Alterations in this tissue are implicated, not only in the development of obesity, but also of these other associated diseases. One of the alterations present in individuals with obesity is a chronic low-grade inflammation, associated with increased production of pro-inflammatory cytokines. Evidence has suggested that the NLRP3 inflammasome (Nod-like receptors family pyrin domain containing 3) is one of the main factors involved in the production of pro-inflammatory cytokines in AT, such as interleukin-1β (IL-1β). Although several studies have reported an association of the NLRP3 inflammasome with obesity and / or insulin resistance (IR); contradictory results have also been reported by other studies. Therefore, we conducted a systematic review to summarize the results of the studies that evaluated the association of NLRP3 with obesity and IR. Nineteen studies were included in the review. Selected studies focused on NLRP3 expression in the TA of individuals with and without obesity or evaluated associations between polymorphisms in this gene and obesity. Overall, human studies indicate that obesity and IR are associated with increased NLRP3 expression in AT. Studies in obese mice corroborate this association. Moreover, high fat diet (HFD) increases Nlrp3 expression in murine AT while calorie-restricted diet decreases its expression. Hence, Nlrp3 blockade in mice protects against HFD-induced obesity and IR. Few studies analyzed the association of NLRP3 polymorphisms with obesity. Considering that obesity is a multifactorial 15 disease, with environmental and genetic components involved in its development, several factors must be analyzed, especially in AT. Initially, comparative gene identification-58 (CGI-58) was identified as a co-activator of adipose triglyceride lipase (ATGL), increasing lipolysis. Recent studies have also identified CGI-58 functions independent of ATGL activation. CGI-58 seems to act as a lysophosphatidic acid acyltransferase (LPAAT), that is, it has the ability to catalyze the modification of lysophosphatidic acid in phosphatidic acid. This represents an important step in the biosynthesis of neutral lipids and glycerol-phospholipids, generating signaling molecules that regulate inflammatory processes and insulin action. To date, only few studies have evaluated the association between CGI-58 and obesity, with inconclusive results. Thus, we compared CGI-58 expression among subcutaneous adipose tissue (SAT) of subjects with different body mass index (BMI) categories. We also evaluated if CGI-58 correlates with body composition parameters, resting energy expenditure (REE), insulin resistance (IR), and lipid and glycemic profiles. To this, SAT biopsies were obtained from 67 individuals who underwent bariatric surgery or elective abdominal surgery. Patients were divided in: Group 1 (n = 14; BMI ˂ 27.0 kg/m2), Group 2 (n = 24; BMI 30.0 - 39.9 kg/m2) and Group 3 (n = 29; BMI ≥40.0 kg/m2). CGI-58 expression was quantified using RT-qPCR. CGI-58 expression was decreased in patients from Group 3 [median 0.60 (0.45 – 0.85, 25th – 75th percentiles)] and Group 2 [0.85 (0.50 – 1.23)] compared to Group 1 patients [1.70 (0.99 – 2.70)] (P ˂ 0.001). CGI-58 values above median were associated with protection for obesity, adjusting for covariables (OR = 0.036, 95% CI 0.003 – 0.410). Moreover, CGI-58 expression was negatively correlated with body composition parameters (BMI, waist circumference, fat mass, and fat-free mass), REE, lipid profile (total cholesterol and triglycerides), IR, and glycated hemoglobin, while it was positively 16 correlated with HDL cholesterol. Therefore, CGI-58 expression is decreased in patients with obesity, and it was associated with worse metabolic profile. According to the aforementioned data, it is possible that NLRP3 and CGI-58 might play an important role in the development of obesity. It seems that these two genes act in opposite ways, since NLRP3 is increased in individuals with obesity while CGI-58 is decreased. Interestingly, a previous study demonstrated that macrophage-specific Cgi-58 blockade in AT from mice increased inflammation and IR after HFD, due to the activation of the NLRP3 inflammasome and, consequent secretion of IL-1β. However, additional studies are needed to clarify the role of CGI- 58 in the pathogenesis in the obesity.

A obesidade é uma doença que atualmente atinge proporções pandêmicas. A atividade inflamatória subsequente ao aumento do tecido adiposo está associada a vários prejuízos causados pela obesidade. Pacientes obesos tendem a apresentar inflamação de baixo grau sustentada, conhecida como metainflamação, principalmente pela produção excessiva de mediadores proinflamatórios pelo tecido adiposo. Dentre os distúrbios causados pela obesidade, destaca-se a potencialização das mudanças fisiológicas que ocorrem no envelhecimento, levando à diminuição da capacidade de adaptação do indivíduo ao ambiente e aumentando a sua vulnerabilidade a processos patológicos. Dessa forma, as doenças associadas à obesidade parecem ser ainda mais prejudiciais em idosos. Diante do conhecimento dos prejuízos à saúde causados pela obesidade, esse trabalho tem como objetivo avaliar a participação da obesidade, induzida por uma dieta de cafeteria, no perfil metabólico e na ativação de vias proinflamatórias no sistema nervoso central e verificar a diferença de suscetibilidade a essas alterações devido às diferentes idades dos indivíduos. Ratas Wistar de 3 e 18 meses, no início do experimento, foram tratadas por 12 semanas, com dieta de cafeteria (5,6 kcal/g) ou ração padrão (2,9 kcal/g) à vontade. Ao final das 12 semanas, no período do diestro do ciclo estral, os animais foram decapitados. Os animais que foram tratados com dieta de cafeteria, tanto de 3 quanto de 18 meses, apresentaram aumento do consumo energético diário. Além disso, apresentaram resistência à insulina e número aumentado de astrócitos observados no córtex cerebral. Houve efeito da idade e da dieta de cafeteria sobre o aumento do ganho de peso corporal ao longo do tratamento, o acúmulo de gordura abdominal e o aumento do índice adiposo. Houve efeito da interação entre os fatores idade e dieta na alteração dos níveis séricos de triacilgliceróis e na elevação da concentração da citocina proinflamatória interleucina 1β no córtex cerebral e no hipocampo. O fator idade atuou, de forma estatisticamente significativa no decréscimo da concentração sérica de HDL e de leptina, além de promover aumento da concentração da citocina proinflamatória IL-1β no hipocampo e do número de astrócitos observados no hipocampo dos animais analisados. Esse estudo mostra que, embora a dieta de cafeteria não seja capaz de induzir um quadro completo de dislipidemia em 12 semanas, em animais submetidos a essa dieta a partir dos 3 e dos 18 meses de idade, seria suficiente para induzir resistência à insulina em um período de tempo relativamente curto. Além disso, a dieta de cafeteria contribuiu para a deposição de tecido adiposo abdominal, que está associado a vários prejuízos à saúde, bem como para a manifestação de características de inflamação, como aumento da expressão de IL1-β e astrogliose em estruturas relacionadas à cognição, como o hipocampo e o córtex. / Obesity is a pandemic disease. Obese patients are likely to show low-grade inflammation, named “metainflammation”, mainly due to an excessive production of inflammatory mediators by adipose tissue. Obesity intensifies age-related physiological changes, increasing the vulnerability of elderly patients to pathological processes. Thus, obesity-related diseases are accentuated in the elderly. Despite of obesity-related disorders, the aims of this study are to evaluate the role of cafeteria diet-induced obesity on the metabolic profile and on the proinflammatory pathways activation in the central nervous system, and to evaluate the vulnerability to the disorders accordingly the stage in life of the rats. Three and 18 months-old female Wistar rats were treated for 12 weeks with cafeteria diet (5,6 kcal/g) or standard chow (2,9 kcal/g) ad libitum. At the end of 12 weeks, at the diestrous phase of estrous cycle the rats were killed. All the cafeteria diet-fed rats showed increased diary energetic intake. Also, the cafeteria diet-fed rats showed insulin resistance, higher blood leptin level and increased number of astrocytes in the cerebral cortex. There were diet-induced effects on increasingly body weight, abdominal fat deposition and adipose index. There was interaction between diet and age on the blood triglyceride levels and on the increase of Interleukin 1-β levels in hippocampus. The age-related effects were the decrese in HDL and leptin blood levels, the increased levels of IL1-β in the hippocampus and the astrogliosis in the hippocampus. This study shows that, although cafeteria diet for 12 weeks did not induce a complete dislipidemic profile, it was capable to induce insulin resistance in a short period of time. Also, cafeteria diet contributed to increased abdominal fat. Abdominal fat is related to several adverse health effects. Cafeteria diet also induced the manifestation of inflammation features, like increased expression of IL-1β and astrogliosis in the hippocampus and in the cerebral cortex.

Conselho Nacional de Desenvolvimento Científico e Tecnológico / O tabagismo e a obesidade são as principais causas de morbidade e mortalidade no mundo. Estudos populacionais relatam que fumantes, principalmente do sexo feminino, apresentam baixo índice de massa corporal. Porém, são escassos os estudos que avaliem a composição corporal de humanos e animais expostos a fumaça de cigarro, em especial nos adolescentes. Aos 35 d de idade, camundongos fêmeas foram expostos à fumaça de cigarros 3R4F (médio teor de nicotina), 8 h/dia, por 15 dias (F, n=12), paralelamente foi avaliado animais não expostos (C, n=12). Imediatamente após a exposição, metade dos animais de cada grupo foi sacrificada e a outra metade permaneceu em observação por 30dias. Durante todo o período experimental, a massa e comprimento corporal e ingestão alimentar foram avaliados. Ao final de cada período, os animais foram avaliados por DXA (Dual Energy X-ray Absorptiometry) e sacrificados por exsanguinação. Para avaliação e comprovação da exposição ao fumo foi utilizado a cotinina e morfologia do pulmão. No plasma foram avaliados colesterol, triglicerídeos, glicose, cotinina e insulina. Amostras de tecido adiposo intra-abdominal (IA) e subcutâneo (SC) foram coletadas e processadas por técnica histológica de rotina para análise morfológica. As expressões de PPAR&#61543;, UCP2 e CPT1 foram avaliadas no tecido IA por western blotting. Durante a exposição, a massa, o comprimento corporal, a ingestão alimentar, a massa magra e a massa de tecido IA, bem como a glicose e o colesterol e a expressão de PPAR&#61543; permaneceram inalterados. A expressão de UCP2 e CPT1, assim como a insulina circulante diminuiram. A gordura corporal total e do tronco, triglicerídeos e cotinina aumentaram. A análise morfológica não evidenciou alteração no tecido IA, mas, houve aumento do número e diminuição da área dos adipócitos no tecido SC. Após trinta de dias de abstinência a massa corporal, a massa e o número de adipócitos do tecido IA e a glicose aumentaram no grupo F, enquanto houve diminuição do colesterol, da área do adipócito IA e SC e do número do SC. Porém, sem alteração da ingestão, do comprimento corporal, da massa magra, da massa de gordura total e do tronco, da insulina e dos triglicerídeos e também da expressão de PPAR&#61543;, UCP2 e CPT1 no IA. A exposição à fumaça de cigarro, em camundongos fêmeas jovens, desencadeou mudanças na adiposidade, que repercutiram de forma prejudicial e precoce sobre o metabolismo. Mesmo com a cessação do hábito de fumar os distúrbios metabólicos permanecem expressivos / Smoking and obesity are major causes of morbidity and mortality worldwide. Population studies have reported that smokers, especially women, have low body mass index. However, there are few studies that assess the body composition of humans and animals exposed to cigarette smoke, especially in teenagers. At 35 d of age (d) female mice were exposed to 3R4F cigarette smoke, with the average concentration of nicotine, 8 h / day for 15 days (group S= 12). Unexposed animals were evaluated in parallel (C= 12). Immediately after the expose half the animals of each group were sacrificed and the other half remained under observation for 30 d. During the experimental period, weight, body length and food intake were evaluated. At the end of the exposure period, animals were assessed by DEXA (Dual Energy X-ray Absorptiometry) and then sacrificed by exsanguination. For evaluation and confirmation of smoke exposure cotinine concentrations and lung morphology were evaluated. The serum cholesterol, triglycerides, glucose cotinine and insulin were measured. The samples of intra-abdominal and subcutaneous adipose tissue IA were collected and processed for morphological analysis. The expression of PPAR&#61543;, CPT1and UCP2 were measured in IA by western blotting. During exposure body mass, corporal length, intake, lean mass and mass IA, such of glucose, cholesterol and the expression of PPAR&#61543; did not differ .The expression UCP2 e CPT1, as circulating insulin decreased. The total body fat and trunk fat, triglycerides and cotinine increased. Morphological analysis revealed no change in IA tissue, but there was an increase and decrease in size of adipocytes in the SC tissue. During exposure the area and number of adipocytes IA were similar between groups, but decreased in SC in the area and increased number of adipocytes. After thirty days of abstinence, body mass, weight and number of adipocytes of IA tissue and glucose increased in group S, while decreased cholesterol, IA adipocyte area and number of SC. However, there were no chamber in the intake, the body length, lean mass, total fat mass and trunk, insulin and triglyceride levels and also the expression of PPAR &#61543;, UCP2 and CPT1 IA. Smoke exposure in young female mice triggered changes in adiposity, which have affected in a detrimental way metabolism. Even with the cessation of smoking, metabolic disorders remain significant