Submitted by Mario BC (mario@bc.ufrpe.br) on 2016-06-10T15:35:28Z No. of bitstreams: 1 Debora Costa Viegas de Lima.pdf: 1473314 bytes, checksum: a21d99f149ebbe332a3c6463de600fcb (MD5) / Made available in DSpace on 2016-06-10T15:35:28Z (GMT). No. of bitstreams: 1 Debora Costa Viegas de Lima.pdf: 1473314 bytes, checksum: a21d99f149ebbe332a3c6463de600fcb (MD5) Previous issue date: 2015-06-10 / Coordenação de Aperfeiçoamento de Pessoal de Nível Superior - CAPES / Conselho Nacional de Pesquisa e Desenvolvimento Científico e Tecnológico - CNPq / This research aimed to detect the occurrence of IgG antibodies against T. gondii in rabbits, identify risk factors associated with T. gondii infection and detect T. gondii DNA in rabbit organs. Blood samples from 150 rabbits and tissue fragments (brain, heart and diaphragm) from 54 rabbits were collected in the state of Pernambuco. Data obtained in questionnaires were submitted to analysis of risk factors. The serum samples were submited to serological test (MAT) and the tissue samples to molecular (PCR) and histopathology tests. Results indicated the presence of antibodies against T. gondii in 6.7% (10/150) of the rabbits and T. gondii DNA in 9.25% (5/54). On histopathology were detected lesions associated with T. gondii mainly characterized by granuloma, mononuclear cell infiltrates, areas of degeneration and necrosis in brain and heart. This is the first study of Toxoplasma gondii detection in naturally infected rabbits in northeastern. The identified risk factors were: feeding based on raw vegetables (Odds ratio: 39.00) and contact between cats and rabbits (Odds ratio: 52.00); being this detection relevant to the implementation of effective preventive measures against toxoplasmosis and its prevalence in these and in other species. The detection of T. gondii in rabbits demonstrates the importance of the infection risk and maintenance of this agent in these animals and in the environment, beeing a public health risk. / Objetivou-se com essa pesquisa detectar a ocorrência de anticorpos IgG contra T. gondii em coelhos, identificar os fatores de risco associados à infecção por T. gondii e detectar o DNA de T. gondii em órgãos de coelhos. Foram coletadas amostras de sangue de 150 coelhos e fragmentos de cérebro, coração e diafragma de 54 coelhos no estado de Pernambuco. Os dados obtidos em questionários foram submetidos à análise dos fatores de risco. As amostras de soro foram submetidas a teste sorológico (MAT) e as amostras de tecido aos exames molecular (PCR) e histopatológico. Foi evidenciada a presença de anticorpos contra T. gondii em 6,7% (10/150) dos coelhos e DNA de T. gondii em 9,25% (5/54). Na histopatologia foram detectadas lesões teciduais associadas a T. gondii caracterizadas principalmente por granuloma, infiltrado inflamatório mononuclear, áreas de degeneração e necrose em cérebro e coração. Este é o primeiro estudo sobre a detecção de Toxoplasma gondii em coelhos naturalmente infectados na região Nordeste do Brasil. Os fatores de risco identificados foram: alimentação a base de vegetais crus (Odds ratio: 39,00) e contato entre gatos e coelhos (Odds ratio: 52,00); sendo esta detecção relevante na implementação de medidas preventivas eficazes contra a Toxoplasmose e sua prevalência nessas e em outras espécies. A detecção de T. gondii em coelhos demonstra a importância do risco da infecção e manutenção deste agente nesses animais e no ambiente, sendo um risco para a Saúde Pública.

Submitted by Mario BC (mario@bc.ufrpe.br) on 2016-06-17T12:04:51Z No. of bitstreams: 1 Fernando Jorge Rodrigues Magalhaes.pdf: 3340571 bytes, checksum: 190faaa50a18c056123ab2a8a9e3e659 (MD5) / Made available in DSpace on 2016-06-17T12:04:51Z (GMT). No. of bitstreams: 1 Fernando Jorge Rodrigues Magalhaes.pdf: 3340571 bytes, checksum: 190faaa50a18c056123ab2a8a9e3e659 (MD5) Previous issue date: 2016-02-26 / Coordenação de Aperfeiçoamento de Pessoal de Nível Superior - CAPES / This study analyzed a total of 1,863 serum samples from cats (domestic and feral), dogs, sheep, cattle, pigs, chickens and horses from Fernando de Noronha, Pernambuco-Brazil, to study the prevalence and spatial distribution of Toxoplasma gondii, and identify risk factors for some species. Indirect immunofluorescence test was performed by using cutoff 1:64 for pigs, sheep, cattle, horses and 1:16 to chickens, dogs and cats. To identify risk factors associated with infection by T. gondii was used univariate analysis and logistic regression for sheep, cattle and chickens. The spatial distribution of infection by this parasite was obtained by intensity Kernel estimator. Of all the animals sampled, 63.5% (1,183/1,863) were positive with titles ranging 16 to 1024 with high prevalence rates for chickens (88.4%), sheep (85.0%), cats domestic (71.26%), feral cats (54.74%) and dogs (48.75%). T. gondii infection is widespread in animals from Archipelago with high prevalence of infection observed in the definitive host (cats), also identified as a risk factor for some species studied. The results indicate to the urgent need for health intervention to strengthen the strategic and integrated measures to prevent and control this disease to prevent infection in animals and humans on this island. / Nesse estudo foram analisadas um total de 1.863 amostras de soro de felinos (domésticos e ferais), caninos, ovinos, bovinos, suínos, galinhas e equinos criados no arquipélago de Fernando de Noronha, Pernambuco para estudar a prevalência e distribuição espacial da infecção por Toxoplasma gondii, além de identificar os fatores de risco para algumas espécies de produção. A pesquisa de anticorpos IgG anti-T. gondii foi realizada pela reação de Imunofluorescência indireta (RIFI), utilizando-se ponto de corte 1:64 para os suínos, ovinos, bovinos, equinos e 1:16 para galinhas, cães e gatos. Para identificar os fatores de risco associados à infecção por T. gondii foi empregada a análise univariada e regressão logística para ovinos, bovino e galinhas. A distribuição espacial da infecção por este protozoário foi obtida por meio do estimador de intensidade de Kernel. Do total dos animais amostrados, 63,5% (1.183/1.863) foram positivos com títulos que variaram de 16 a 1024 com destaque para as elevadas prevalências obtidas para galinhas (88,4%), ovinos (85,0%), bovinos (10,7%), gatos domésticos (71,26%), gatos ferais (60,74%), cães (48,75%), suínos (51,85%) e equinos (22,7%). A infecção por T. gondii está disseminada nos animais do Arquipélago com focos distribuídos por toda a ilha, resultado da alta prevalência da infecção observada no hospedeiro definitivo (felinos), também identificado como fator de risco para algumas espécies estudadas. Os resultados sinalizam para a necessidade urgente de intervenção sanitária para reforçar as medidas estratégicas e integradas na prevenção e controle dessa enfermidade para prevenir a infecção em animais e humanos desta ilha.

Submitted by (edna.saturno@ufrpe.br) on 2016-07-25T15:58:13Z No. of bitstreams: 1 Ruy Brayner de Oliveira Filho.pdf: 6533867 bytes, checksum: 0b425b61cc6c98d7b84992e82605ee42 (MD5) / Made available in DSpace on 2016-07-25T15:58:13Z (GMT). No. of bitstreams: 1 Ruy Brayner de Oliveira Filho.pdf: 6533867 bytes, checksum: 0b425b61cc6c98d7b84992e82605ee42 (MD5) Previous issue date: 2012-11-27 / The objective of this study was to characterize the epidemiological situation of infection by Brucella spp., Leptospira spp. and Toxoplasma gondii in equids in Brejo Paraibano microregion, Northeastern Brazil. Antibodies against these agents were investigated in 257 samples from equids (204 horses, 46 mules and seven donkeys) in 26 properties. For serological diagnosis of infection by Brucella spp., Rose Bengal Test (RBT) was used. For serological diagnosis of Leptospira spp. Infection, it was used the Microscopic Agglutination Test (MAT), using 24 pathogenic serovars of Leptospira spp. as antigens, and a cut-off of 1:100. For serological diagnosis of infection by T. gondii, it was used the Indirect Fluorescent Antibody Test (IFAT) and a cut-off of 1:64. Regarding Brucella spp., no sample was positive in RBT. The number of foci of infection by Leptospira spp. found was 76.9%. The prevalence of infection for Leptospira spp. was 15.9% (C.I. 11.7-21.0). The number of foci of infection by T. gondii was found to be 46.1%. In the samples analyzed, the overall prevalence of infection by T. gondii was 7.8% (C.I. 4.8-8.8). Regarding species, it was observed a prevalence of Leptospira spp. infection of 16.2% (horses), 13.0% (mules) and 28.6% (donkeys). The prevalence of infection by T. gondii was 8.3% (C.I. 4.9-13.0) for horses, 2.2% (C.I. 0.1-11.5) for mules and 28.6% (C.I. 3.7-71.0) among donkeys. Regarding infection for Leptospira spp., age was identified as a protective factor, where animals aged between 2.5 and 11 years had a risk of infection 0.4 times lower than those with less than 2.5 years (OR 0.4; C.I. 0.18-0.90). In relation to T. gondii, in logistic regression of variables, it was observed that the water source was a risk factor, because in those properties that supplied running water to the animals the risk of infection was 4.4 times higher than in those properties that provided standing water (OR 4.4; C.I. 1.0-19.0). This is the first epidemiological study in Brejo Paraibano microregion that analyzed infections by Brucella spp., Leptospira spp. and T. gondii in equids. To reduce the risk of infection, good quality water should be given to the animals, as well as access of cats, rodents and other animals to water sources and facilities where animals are kept must be avoided. Based on the results, it is concluded that the animals are exposed to sources of infection of Leptospira spp. and T. gondii, and a high number of outbreaks has been found widely distributed in the microregion. Health care should be reinforced especially in properties with more animals. / Objetivou-se com este estudo caracterizar a situação epidemiológica das infecções por Brucella spp., Leptospira spp. e Toxoplasma gondii em equídeos na microrregião do Brejo Paraibano, região Nordeste do Brasil. Anticorpos contra esses agentes foram pesquisados em 257 amostras de equídeos (204 equinos, 46 muares e sete asininos) em 26 propriedades. Para o diagnóstico sorológico da infecção por Brucella spp., utilizou-se o teste do Antígeno Acidificado Tamponado (AAT). Para o diagnóstico sorológico da infecção por Leptospira spp., utilizou-se a Soroaglutinação Microscópica (SAM), empregando 24 sorovares patogênicos de Leptospira spp. como antígenos, e um ponto de corte de 1:100. Para o diagnóstico sorológico da infecção por T. gondii utilizou-se a Reação de Imunofluorescência Indireta (RIFI) e um ponto de corte de 1:64. Em relação à Brucella spp., nenhuma amostra foi reagente ao AAT. O número de focos da infecção por Leptospira spp. encontrado foi de 76,9%. A prevalência da infecção para Leptospira spp. foi de 15,9% (I.C. 11,7 - 1,0). O número de focos da infecção por T. gondii encontrado foi de 46,1%. Nas amostras analisadas, a prevalência geral da infecção por T. gondii foi de 7,8% (I.C. 4,8 - 8,8). Em relação às espécies observou-se uma prevalência da infecção por Leptospira spp. de 16,2% (equinos), 13,0% (muares) e 28,6% (asininos). A prevalência da infecção por T. gondii foi de 8,3% (I.C. 4,9 - 13,0) para os equinos, 2,2% (I.C. 0,1 - 11,5) para os muares e 28,6% (I.C. 3,7 - 71,0) entre os asininos. Em relação à infecção para Leptospira spp., na análise dos fatores de risco pela regressão logística identificou-se como fator de proteção a variável idade, onde os animais com idade entre 2,5 e 11 anos tiveram risco de infecção 0,4 vezes menor do que aqueles com menos de 2,5 anos (OR 0,4; I.C. 0,18 - 0,90). Em relação à infecção por T. gondii, na regressão logística das variáveis observou-se que a fonte de água foi um fator de risco, pois naquelas propriedades que forneciam água corrente para os animais o risco de infecção foi 4,4 vezes maior do que naquelas propriedades que forneciam água parada (OR 4,4; I.C. 1,0 - 19,0). Este é o primeiro estudo epidemiológico na microrregião do Brejo Paraibano a analisar as infecções por Brucella spp., Leptospira spp. e T. gondii em equídeos. Para diminuir os riscos de infecção, deve-se fornecer aos animais uma água de boa qualidade, bem como evitar acesso de gatos, roedores e outros animais a fontes de água e instalações onde os animais são mantidos. Com base nos resultados obtidos, conclui-se que os animais estão expostos a fontes de infecção de Leptospira spp. e T. gondii, sendo encontrado um elevado número de focos o que indica uma ampla distribuição na microrregião. Os cuidados sanitários devem ser reforçados, principalmente em propriedades com maior quantidade de animais.

Submitted by (edna.saturno@ufrpe.br) on 2016-11-07T11:40:52Z No. of bitstreams: 1 Silvio Gomes de Sa.pdf: 2886055 bytes, checksum: 0aa7c0772b26e8fa8700c92d6f0cece5 (MD5) / Made available in DSpace on 2016-11-07T11:40:52Z (GMT). No. of bitstreams: 1 Silvio Gomes de Sa.pdf: 2886055 bytes, checksum: 0aa7c0772b26e8fa8700c92d6f0cece5 (MD5) Previous issue date: 2011-02-23 / Conselho Nacional de Pesquisa e Desenvolvimento Científico e Tecnológico - CNPq / The objective of this study was to verify the venereal transmission of Toxoplasma gondii in mice experimentally infected with oocysts of the ME49 strain. The first experiment studied the presence and distribution of T. gondii in the reproduction organs of experimentally infected male mice, in the acute infection phase. Five experimental groups were formed (MG1, MG2, MG3, MG4 and CG-control), inoculated with 50, 100, 500 and 1000 oocysts, respectively. The proof of infection was carried out by an antibodies study and the presence of parasitic DNA in the blood, urine and reproductive tissues. Reproductive tissues were histologically evaluated for the study of suggestive lesions from the infection. Suggestive forms of T. gondii were observed in the urine at the 7th and 15th post-infection days. In the serology only one animal from the MG2 and all from MG3 and MG4 presented antibodies IgM and IgG. In the PCR-Nested, 80% of animals from MG1 and MG2 were positive in the DNA blood study and no animals from MG3 and MG4 were positive. None of the animals from the control group were positive in serology and molecular techniques. Of the males from the infected groups, 30% presented parasitic DNA in the prostate, 40% in the testicle and epididymis and 60% in the seminal vesicle. In the histopathology, testicular degeneration, focal mononuclear infiltration and more accentuated olygospermia were observed in the animals from MG3 and MG4, but not in the CG. The second experiment was carried out with the objective of studying the venereal transmission of T. gondii and the reproductive disturbances in female mice divided in four groups and mated with experimentally infected males between the 2nd and 14th post-infection days. The infection was proven by using the serology and molecular techniques. Histopathology was carried out in reproductive tissues of males (prostate, seminal vesicle, testicles and epididymis) and females (uterus and ovaries). One hundred percent of males presented parasitic DNA in tissues of the reproductive organ or in the blood. However, only one male inoculated with 100 oocysts and 10 inoculated with 500 and 1000 oocysts soroconverted, respectively. Reproductive problems were also observed in mated females, however, they did not present antibodies anti-T. gondii and 75% of them (23/40) were positive in the PCR-Nested. The results obtained in this study conclude that the venereal transmission of the parasite occurs in mice experimentally infected with the ME49 strain in the doses used. / Objetivou-se com este trabalho estudar a transmissão venérea de Toxoplasma gondii em camundongos experimentalmente infectados com oocistos da cepa ME49. No primeiro experimento estudou-se a presença e distribuição de T. gondii no aparelho reprodutor de camundongos machos experimentalmente infectados na fase aguda da infecção. Foram formados cinco grupos experimentais (GM1, GM2, GM3, GM4 e GC - controle), inoculados com 50, 100, 500 e 1000 oocistos, respectivamente. A comprovação da infecção foi feita por meio da pesquisa de anticorpos e presença de DNA parasitário em sangue, urina e tecidos reprodutivos. Tecidos reprodutivos foram histologicamente avaliados para a pesquisa de lesões sugestivas da infecção. Formas sugestivas de T. gondii foram observadas na urina aos 7° e 15° dias pós-infecção. Na sorologia apenas um animal do GM2 e todos do GM3 e GM4 apresentaram anticorpos IgM e IgG. Na PCR-Nested, 80% dos animais do GM1 e GM2 foram positivos para pesquisa de DNA no sangue e nenhum animal do GM3 e GM4 foi positivo. Nenhum animal do grupo controle foi positivo na sorologia e técnicas moleculares. Dos machos dos grupos infectados, 30% apresentaram DNA parasitário na próstata, 40% no testículo e epidídimo e 60% na vesícula seminal. Na histopatologia observou-se degeneração testicular, infiltrado mononuclear focal e oligospermia mais acentuada nos animais do GM3 e GM4 e não observadas no GC. O segundo experimento foi realizado com o objetivo principal de estudar a transmissão venérea de T. gondii e os distúrbios reprodutivos em camundongas divididas em quatro grupos e acasaladas com machos experimentalmente infectados entre o 2° e 14° dias pósinfecção. A infecção foi comprovada por meio da sorologia e técnicas moleculares. Histopatologia foi realizada em tecidos reprodutivos de machos (próstata, vesícula seminal, testículos e epidídimos) e fêmeas (útero e ovários). Cem por cento dos machos apresentaram DNA parasitário em tecidos do aparelho reprodutor ou no sangue, mas apenas um macho inoculado com 100 oocistos e dez inoculados com 500 e 1000 oocistos soro converteram, respectivamente. Transtornos reprodutivos também foram observados nas fêmeas acasaladas, contudo essas não apresentaram anticorpos anti-T. gondii e 75% delas (23/40) foram positivas na PCR-Nested. Os resultados obtidos nesse estudo permitem concluir que a transmissão venérea do parasita ocorre em camundongos experimentalmente infectados com a cepa ME49 nas doses utilizadas.

Submitted by Jaqueline Silva (jtas29@gmail.com) on 2014-12-12T19:43:22Z No. of bitstreams: 2 license_rdf: 23148 bytes, checksum: 9da0b6dfac957114c6a7714714b86306 (MD5) Tese-Osvaldo José da Silveira Neto-2013.pdf: 1426753 bytes, checksum: ab57d8d017693119d65b51e7930afc99 (MD5) / Approved for entry into archive by Jaqueline Silva (jtas29@gmail.com) on 2014-12-16T09:25:50Z (GMT) No. of bitstreams: 2 license_rdf: 23148 bytes, checksum: 9da0b6dfac957114c6a7714714b86306 (MD5) Tese-Osvaldo José da Silveira Neto-2013.pdf: 1426753 bytes, checksum: ab57d8d017693119d65b51e7930afc99 (MD5) / Made available in DSpace on 2014-12-16T09:25:50Z (GMT). No. of bitstreams: 2 license_rdf: 23148 bytes, checksum: 9da0b6dfac957114c6a7714714b86306 (MD5) Tese-Osvaldo José da Silveira Neto-2013.pdf: 1426753 bytes, checksum: ab57d8d017693119d65b51e7930afc99 (MD5) Previous issue date: 2013-12-06 / The objective of this work was to evaluate the epidemiological situation of T. gondii in domestic and synanthropic birds in the metropolitan region of Goiânia, Goiás, by means of serological and molecular tests. By using modified agglutination and indirect hemagglutination techniques, samples from 450 domestic poultry (Gallus gallus) were evaluated, of which 150 birds were free-range (subsistence conditions), 150 were laying hens and 150 were broiler fowl. Research was also carried out, using direct agglutination (MAT) and PCR, on the occurrence of T. gondii in 80 free-range hens sold in open markets and on 150 common pigeons (Columba livia) in the Goiânia region. Antibodies for the parasite were found in all types of birds investigated, and there was a statistical difference in relation to positivity (p<0.05), which ranged in ascending order, thus: broilers (4.7%), layers (11.3%) and free-range fowl (38%). As regards birds sold at fairs, positivity was high, increasing proportionally with the number of fragments tested, without differences (p>0.05) in heart or brain samples (38.75% positive in MAT and 70 % positive in PCR). There was an association between chickens found positive in the modified agglutination and PCR tests, and it was noted that the higher the titer in the serology, the greater was the chance of positivity in the PCR. The pigeons presented positivity of 22.6% in the serology and low positivity in PCR (2%), with cysts only detected in brain samples. Occurrence of T. gondii was detected in all types of birds and rearing systems analyzed. Research into T. gondii in domestic chickens and in pigeons in this work proves the importance of these birds as indicators of environmental contamination, as well as providing evidence of the potential risks that they bring to public health in the region of Goiânia, Goiás. / O objetivo da realização deste trabalho foi avaliar a situação epidemiológica do T. gondii em aves domésticas e sinantrópicas da região metropolitana de Goiânia, Goiás, através de testes sorológicos e moleculares. Pelo uso das técnicas de aglutinação modificada e hemaglutinação indireta foram avaliadas amostras de 450 aves domésticas (Gallus gallus), sendo 150 aves criadas na forma de subsistência, 150 galinhas de postura e 150 frangos de corte. Também foi pesquisada através do uso da aglutinação direta (MAD) e da PCR a ocorrência de T. gondii em 80 galinhas caipiras vendidas em feiras livres e em 150 pombos domésticos (Columba livia) da região de Goiânia. Anticorpos para o parasito foi encontrado em todos os tipos de aves pesquisadas, sendo que houve diferença estatística em relação a positividade (p<0,05), sendo a mesma crescente quando se analisou frangos de corte (4,7%), galinhas de postura (11,3%) e galinhas de criações de subsistência (38%). Em relação às aves vendidas em feiras, a positividade foi elevada, aumentando proporcionalmente ao número de fragmentos testados, não tendo diferenças (p>0,05) em amostras de coração ou cérebro (38,75% positivas na MAD e 70 % positivos na PCR). Houve associação de galinhas positivas no teste de aglutinação modificada e na PCR, constatou-se que quanto mais elevado o título da ave na sorologia maior a chance de positividade na PCR. Os pombos apresentaram positividade de 22,6% na sorologia e baixa positividade na PCR (2%) sendo detectados parasitos apenas em amostras de cérebro. A ocorrência de T. gondii foi detectada em todos os tipos de aves e criações analisadas. A pesquisa de T. gondii em galinhas domésticas e em pombos neste trabalho comprova a importância destas aves como indicadoras da contaminação ambiental, assim como evidencia o risco potencial que as mesmas impõem a saúde pública na região de Goiânia, Goiás.

Submitted by Marlene Santos (marlene.bc.ufg@gmail.com) on 2016-08-01T17:22:48Z No. of bitstreams: 3 Dissertação - Heloisa Ribeiro Storchilo - 2016.pdf: 1886092 bytes, checksum: 0d827ee8679247c63f79b15ce325d19b (MD5) ata de aprovação mestrado - Heloisa Ribeiro Storchilo - 2016.pdf: 1216009 bytes, checksum: 6475e6eeeb9d106946f78b578c1bfa34 (MD5) license_rdf: 0 bytes, checksum: d41d8cd98f00b204e9800998ecf8427e (MD5) / Approved for entry into archive by Luciana Ferreira (lucgeral@gmail.com) on 2016-08-02T12:04:36Z (GMT) No. of bitstreams: 3 Dissertação - Heloisa Ribeiro Storchilo - 2016.pdf: 1886092 bytes, checksum: 0d827ee8679247c63f79b15ce325d19b (MD5) ata de aprovação mestrado - Heloisa Ribeiro Storchilo - 2016.pdf: 1216009 bytes, checksum: 6475e6eeeb9d106946f78b578c1bfa34 (MD5) license_rdf: 0 bytes, checksum: d41d8cd98f00b204e9800998ecf8427e (MD5) / Made available in DSpace on 2016-08-02T12:04:36Z (GMT). No. of bitstreams: 3 Dissertação - Heloisa Ribeiro Storchilo - 2016.pdf: 1886092 bytes, checksum: 0d827ee8679247c63f79b15ce325d19b (MD5) ata de aprovação mestrado - Heloisa Ribeiro Storchilo - 2016.pdf: 1216009 bytes, checksum: 6475e6eeeb9d106946f78b578c1bfa34 (MD5) license_rdf: 0 bytes, checksum: d41d8cd98f00b204e9800998ecf8427e (MD5) Previous issue date: 2016-06-16 / Toxoplasma gondii is a protozoan which presents a high worldwide prevalence. This parasite is able to pass the placental barrier which results in fetal infection with severe sequelae. The diagnostics of the congenital infection is complex and should be performed precociously. The newborn screening detects several diseases in the newborns (NB) and the implantation of the toxoplasmosis detection in this set of exams enables the precocious detection of this disease. Therefore the aim of this study was to perform the toxoplasmosis serologic triage (IgM and IgG) in blood collected in filter paper; to evaluate and compare the sensitivity of serologic analysis from peripheric blood collected in filter paper; to perform confirmatory serologic tests (IgM and IgG) and complementary (PCR) to confirm the NB with serologic indication of congenital toxoplasmosis and to speed the precocious diagnostics of congenital toxoplasmosis in NB blood. At the moment of the newborn screening blood collection a second sample of blood was collected in filter paper from NB attended in Clinics Hospital from the Federal University of Goias, Maternity Hospital Dona Iris both located in Goiania, Goias, and Cais Nova Era located in Aparecida de Goiania, Goias. These samples were processed and ELISA test was performed. The NB which presented results with absorbance titers equal or higher than 3.0 were submitted to a new peripheric blood collection alongside with the blood collection from their mothers and the PCR technique was performed as to confirm the congenital infection. A total of 949 blood samples were collected in filter paper and 432 (45.52%) were IgG positive while 1 (0.10%) was IgM positive. In the IgG positive NB (432/949) which presented ELISA titers ≥ 3.0; 104 pairs of peripheric blood were analyzed. From these 104 samples of peripheric blood, 5 pairs (4.80%) presented IgG and IgM negative results, four (3.84%) presented discrepant results, i.e., NB sample negative and mother sample IgG positive, in 95 pairs (91.34%) there were accordant results with both IgG positives. The PCR technique was performed in the 95 samples of IgG positive children and was possible to detect the parasite’s DNA in one sample of NB peripheric blood. Therefore these results show that the inclusion of the toxoplasmosis serologic test in the newborn screening, which is already performed in SUS to detect other diseases, demonstrated to be effective in the precocious detection of T. gondii infected NB. We highlight that succeed in the infected NB triage several criteria should be taken into account and that a greater sampling should be performed as to ratify these results. / Toxoplasma gondii é um protozoário de elevada prevalência na população mundial. O parasito pode atravessar a barreira transplacentária, resultando em infecção fetal com graves sequelas. O diagnóstico da infecção congênita é complexo e deve ser realizado precocemente. O teste do pezinho detecta patologias em recém-nascidos, dessa forma a implementação do diagnóstico de toxoplasmose nesse conjunto de exames possibilita a detecção precoce dessa doença. Este estudo teve como objetivo: Realizar triagem sorológica para toxoplasmose (IgM e IgG) em sangue coletado em papel filtro; avaliar e comparar a sensibilidade da sorologia em papel filtro com a sorologia realizada com sangue periférico; comparar a concentração de anticorpos detectada pela sorologia do sangue periférico dos recém-nascidos com os resultados de suas respectivas mães; realizar testes sorológicos confirmatórios (IgM e IgG) e complementares como PCR na confirmação dos recém-nascidos com indicação de infecção congênita e dinamizar o diagnóstico precoce da toxoplasmose congênita no sangue de recém-nasidos. Foi coletada uma segunda amostra de sangue em papel filtro de crianças atendidas no Hospital das Clínicas da Universidade Federal de Goiás, Hospital Maternidade Dona Íris, Goiânia, Goiás e Cais Nova Era, Aparecida de Goiânia, Goiás, quando as mesmas foram realizar o teste do pezinho, e realizado o teste de Elisa. Os recém-nascidos que apresentaram resultados com índices de absorbância maiores ou iguais a 3.0 foram submetidos à coleta de sangue periférico, tanto das mães quanto de seus respectivos filhos. Em todas as amostras de sangue periférico dos recém-nascidos foi realizada a técnica de PCR para confirmação de infecção congênita. Do total de 949 amostras de sangue coletadas em papel filtro, detectou-se em 432 (45,52%) amostras a presença de IgG e uma (0,10%) foi detectada a presença IgM. Nos recém-nascidos reagentes para IgG (432/949) que apresentaram índice ≥3,0 pela técnica de Elisa foram realizados 104 pares de coletas de sangue periférico, incluindo mãe e filho. Das 104 amostras de sangue periférico dos recém-nascidos, nove (8,65%) não apresentaram IgG anti-T.gondii e 95 (91,34%) apresentaram resultado positivo para IgG, concordando com os resultados encontrados anteriormente em papel filtro. Dos 104 pares de amostras de sangue periférico, cinco pares (4,80%) tiveram resultados negativos para IgG e IgM, em quatro pares (3,84%), os resultados foram discrepantes, sendo a amostra da criança negativa e a da mãe IgG positivo, em 95 pares (91,34%) das amostras analisadas, foram concordantes na detecção de IgG. Foi realizada a técnica de PCR nas 95 amostras de sangue periférico das crianças com sorologia confirmada e foi possível detectar o DNA do parasito em uma amostra de sangue periférico dos recém-nascidos. Diante dos resultados obtidos nesse trabalho, a adição da sorológica para toxoplasmose ao teste do pezinho que já é disponibilizado pelo SUS para outras infecções, se mostrou eficaz na detecção precocemente de recém-nascidos infectados pelo T. gondii. Salientamos que para se obter êxito na triagem dos recém-nascidos infectados, vários critérios deverão ser considerados, e que uma amostragem maior devera ser analisada para ratificar os resultados obtidos.

Os isolados de Toxoplasma gondii encontrados no Brasil apresentam grande variedade genética. No país, foram verificadas quatro linhagens clonais, denominadas tipo BrI, BrII, BrIII e BrIV. Dentre elas, a virulência para camundongos varia, sendo BrI virulenta, BrIII não virulenta e, as linhagens BrII e BrIV são consideradas de virulência intermediária. A definição da virulência desses isolados é feita, na maioria dos estudos, a partir do isolamento por bioensaio, com a determinação da mortalidade de camundongos infectados. No entanto, a dose de T. gondii inoculada nesses animais é desconhecida e, assim, trata-se de um método impreciso para caracterização da virulência. Dessa maneira, este estudo tem por objetivo avaliar a virulência, em camundongos, de 22 isolados brasileiros de T.gondii, utilizando inóculos padronizados. Para o teste de virulência, utilizou-se taquizoítas de cada um dos isolados, em três concentrações (10¹, 10² e 10³). Cada dose foi inoculada via intraperitoneal em grupos formados por quatro camundongos heterogênicos fêmeas, de oito semanas de idade, da linhagem Swiss Webster. A mortalidade dos animais foi observada por 30 dias e, baseando-se nesses dados, além do tempo decorrido pós-inoculação até a morte dos animais, determinou-se a virulência dos isolados. Dos 22 isolados brasileiros incluídos nesse estudo, sete (32%) foram definidos como de virulência intermediária, pois houve sobrevivência de animais infectados e a mortalidade foi dose-dependente. Além disso, 15 (68%) foram considerados virulentos, uma vez que causaram a morte de todos os camundongos independente da dose analisada. Comparando as classificações definidas pelo bioensaio e pelo teste de virulência, 83% dos isolados virulentos analisados se mantiveram como virulentos, em contrapartida os isolados não virulentos e de virulência intermediária pelo bioensaio mostraram um fenótipo de maior virulência no teste. Devido à predominância de isolados virulentos no Brasil, o uso de uma metodologia padronizada para determinação da virulência em camundongos é de pouca utilidade epidemiológica. / The isolates of Toxoplasma gondii found in Brazil present a great genetic variety. In the country, four clonal lineages, denominated type BrI, BrII, BrIII and BrIV were verified. Among them, virulence for mice varies, with virulent BrI and non-virulent BrIII, and the BrII and BrIV strains are considered as intermediate virulence. The determination of the virulence of these isolates is made, in the majority of the studies, from the isolation by bioassay, with the determination of the mortality of infected mice. However, the dose of T. gondii inoculated in these animals is unknown and thus is an imprecise method for characterization of virulence. Thus, this study aims to evaluate the virulence of 22 Brazilian isolates of T. gondii in mice using standardized inocula. For the virulence test, tachyzoites from each of the isolates were used in three concentrations (10¹, 10² and 10³). Each dose was inoculated intraperitoneally into groups consisting of four 8-week-old female heterogenic mice of the Swiss Webster strain. The mortality of the animals was observed for 30 days and, based on these data, in addition to the time elapsed post-inoculation until the death of the animals, the virulence of the isolates was determined. Of the 22 Brazilian isolates included in this study, seven (32%) were defined as intermediate virulence, since there was survival of infected animals and mortality was dose-dependent. In addition, 15 (68%) were considered virulent, since they caused the death of all mice regardless of the dose analyzed. Comparing the classifications defined by the bioassay and the virulence test, 83% of the virulent isolates analyzed remained virulent. In contrast, the non virulent isolates and intermediate virulence by the bioassay showed a phenotype of greater virulence in the test. Due to the predominance of virulent isolates in Brazil, the use of a standardized methodology for the determination of virulence in mice is of little epidemiological utility.

Made available in DSpace on 2014-08-20T14:31:28Z (GMT). No. of bitstreams: 1 dissertacao_laura_maria_jorge_santos.pdf: 1428533 bytes, checksum: e3c51067725ef21be5a8179e067d8e11 (MD5) Previous issue date: 2012-02-10 / Toxoplasmosis is a common zoonosis worldwide caused by Toxoplasma gondii, and high infection prevalence in humans and animals. It is usually asymptomatic, however in immunocompromised individuals and in fetuses it may cause severe injury. Wild and domestic felids are the definitive hosts for the parasite, and they shed oocysts in their faeces. Carnivorism, fecal-oral and congenital is the main route of toxoplasmosis transmission. Further studies are needed to investigate the sanity of buffaloes in relation to T. gondii infection, because of the growing demand for buffalo meat and meat products. This work aims to know the prevalence of T. gondii infection in buffaloes and cattle that share the same area in southern Rio Grande do Sul state, and correlate data obtained, including age factor, to identify possible sources of infection. Blood samples were collected by means of jugular venipuncture in 169 buffaloes and 121 beef cattle of different ages, living in a farm in southern Brazil. T. gondii were performed by the indirect fluorescent-antibody (IFA) technique, according to Camargo (1964), using a WAMA Diagnostic® kit. Positive and negative control serum to T. gondii and conjugated Anti-bovine IgG (whole molecule) FITC produced in rabbits, Sigma/F7887 were used. The animals were considered positive from a dilution of 1:64. Significant levels of antibodies to T. gondii were detected in 27.2% of buffaloes and 17.4% of cattle. Statistical difference p≤ 0.05 The presence of cats may also indicate the likelihood of a contaminated environment. Age of animals was significantly associated with seropositivity for toxoplasmosis detected in older buffaloes, due to longer exposure. Buffaloes and cattle are strict herbivores, and high prevalence of T. gondii suggests contamination of the environment by oocysts, featuring horizontal transmission. / A toxoplasmose é uma zoonose causada pelo protozoário Toxoplasma gondii, de ocorrência mundial, com alta prevalência da infecção em seres humanos e animais, geralmente na forma assintomática, entretanto, em indivíduos imunodeprimidos e fetos podem ocorrer lesões severas. Os Felídeos são os hospedeiros definitivos do parasito e eliminam oocistos em suas fezes. A principal via de transmissão da toxoplasmose é carnivorismo, fecal-oral e congênita. Devido à crescente procura pela carne de bubalinos e seus derivados e a já existente pecuária bovina no Rio Grande do Sul, são necessários estudos mais aprofundados para investigar a sanidade destas espécies com relação à infecção por T. gondii. Este trabalho teve como objetivos conhecer a prevalência da infecção por Toxoplasma gondii em bubalinos e bovinos que compartilham a mesma área no sul do Rio Grande do Sul e correlacionar os dados obtidos entre ambas as espécies, incluindo o fator idade, visando identificar possíveis fontes de infecção. Foram coletadas amostras de sangue por punção venosa da jugular em 169 búfalos e 121 bovinos de corte de diferentes idades que convivem em uma propriedade no sul do Brasil. Foram realizados exames sorológicos para T. gondii através da técnica da Reação de Imunofluorecência Indireta (RIFI) segundo Camargo (1964) utilizando o ―kit‖ WAMA Diagnóstica®. Utilizou-se soros controle positivo e negativo para T. gondii previamente conhecidos, assim como conjugado anti-IgG bovina (molécula inteira com FITC, produzido em coelhos, Sigma/F-7887). Os animais foram considerados positivos a partir da diluição 1:64. Níveis significativos de anticorpos para T. gondii foram detectados em 27,2% dos bubalinos e 17,4% dos bovinos. Foi considerada diferença estatística p ≤0,05. A presença dos felídeos pode indicar a possibilidade de um ambiente contaminado. A idade dos bubalinos foi significativamente associada à soropositividade detectada para toxoplasmose devido possivelmente ao maior tempo de exposição, o que não foi constatado nos bovinos. Bubalinos e bovinos são estritamente herbívoros e, a alta prevalência de T. gondii sugere contaminação do meio ambiente com, oocistos caracterizando a transmissão horizontal.

Made available in DSpace on 2014-08-20T14:37:51Z (GMT). No. of bitstreams: 1 dissertacao_luciana_siqueira_silveira_dos_santos.pdf: 545435 bytes, checksum: e09bdef2a48bc7fe96cad83e7836838b (MD5) Previous issue date: 2012-08-24 / Toxoplasma gondii is causative agent of a protozoonosis of public health importance, toxoplasmosis, that may have serious consequences on species infected. Cats are definitive hosts of the protozoan, when they become infected they eliminate oocysts and may become a source of infection for humans. There are controversies in the results of different authors about living with pet cats as a risk factor for human infection. This study analyzed serum samples from 108 individuals who have or had cats and from 110 individuals who do not like cats and never had one. An epidemiological questionnaire was applied. The results indicated seroprevalence of 39.8% for the individuals who live with cats and 26.4% for the 110 individuals who never had these animals. The analysis of risk factors showed significant association between seropositivity and of variables: aged over 31 years (p = 0.0000), living with cats (p = 0.0143) and handling of raw meat (p = 0.0290). It was concluded that even in a population with a high level of education, living with cats may increase twice the chance of infection by T. gondii, when the animals are not kept in the household and in adequate sanitary conditions. / Toxoplasma gondii é causador de uma protozoonose de importância em saúde pública, a toxoplasmose, que pode causar graves consequências nas espécies infectadas. Os felídeos são hospedeiros definitivos do protozoário que ao se infectarem, eliminam oocistos podendo se tornar fonte de infecção para humanos. Existem controvérsias nos resultados de diferentes autores sobre o convívio com gatos de estimação, como fator de risco para a infecção humana. Neste estudo, foram avaliadas amostras de soro de 108 pessoas que têm/tiveram gatos e de 110 pessoas que não gostam e nunca tiveram gatos. Um questionário epidemiológico também foi aplicado. Os resultados indicam soroprevalência de 39,8% para as 108 pessoas que convivem com gatos e 26,4% para as 110 pessoas que nunca tiveram esses animais. Na análise dos fatores de risco, foi constatada associação significativa com a soropositividade das variáveis: idade superior a 31 anos (p = 0,000), convívio com gatos (p = 0,0143) e manuseio de carne crua (p = 0,0290). Conclui-se que mesmo em uma população com escolaridade elevada, conviver com gatos pode aumentar duas vezes a chance de infecção por T. gondii, desde que esses não sejam mantidos no interior do domicílio e em condições higiênico-sanitárias adequadas.

Toxoplasmosis, caused by the intracellular protozoan Toxoplasma gondii is an infectious disease, and this triggers the activation of the immune system. The pregnancy, in turn, shows characteristics of systemic inflammatory response. The ecto-enzymes as E-NTPDase and E- ADA activities in addition to possessing important in regulating the levels of adenine nucleotides and nucleoside, have shares extremely important in the immune system. Thus, the aim of this study was to determine the activity of enzymes that degrade adenine nucleotides and nucleoside in lymphocytes of women with antibodies to Toxoplasma gondii. Were included in the study, pregnant women seropositive (immune) and seronegative (susceptible) to toxoplasmosis in the last trimester of pregnancy, previously diagnosed service prenatal HUSM. Also, non-pregnant women seropositive and seronegative for toxoplasmosis, in the period from March to December 2012. We determined the enzymatic activities of ecto-enzymes: E-NTPDase and E-ADA in lymphocytes of pregnant and non-pregnant. The results showed an increase of the E-NTPDase activity and may lead to decreased levels of nucleotides ATP and ADP, and an increase in the activity of E-ADA, which may cause a decrease in the concentration of adenosine in groups: III (seronegative pregnant women toxoplasmosis) and IV (seropositive pregnant women for toxoplasmosis) when compared to the control group (I: non-pregnant women seronegative for toxoplasmosis). Pregnant women seropositive for toxoplasmosis compared with seronegative pregnant women did not change, thus revealing that toxoplasmosis in its chronic phase, may not interfere with purinergic signaling. In conclusion, the third trimester of pregnancy appears to be a physiological condition that involves purinergic signaling and toxoplasmosis in its chronic phase does not seem to be able to change this signaling. / A toxoplasmose, causada pelo protozoário intracelular Toxoplasma gondii é uma doença infecciosa,e com isso, desencadeia a ativação do sistema imune. A gestação, por sua vez, demonstra características da resposta inflamatória sistêmica. As ectoenzimas como: E-NTPDase e E-ADA, além de possuírem importante atividade na regulação dos níveis de nucleotídeos e nucleosídeo da adenina, possuem ações extremamente importantes no sistema imunológico. Sendo assim, o objetivo deste estudo foi determinar a atividade de enzimas que degradam nucleotídeos e nucleosídeo da adenina em linfócitos de gestantes com anticorpos para Toxoplasma gondii. Foram incluídas na pesquisa, gestantes com sorologia positiva (imunes) e com sorologia negativa (suscetíveis) para toxoplasmose, no último trimestre gestacional, previamente diagnosticadas no serviço pré-natal do HUSM. E também, mulheres não gestantes com sorologia positiva e com sorologia negativa para toxoplasmose, no período de março a dezembro de 2012. Foram determinadas as atividades enzimáticas das ectoenzimas: E-NTPDase e E-ADA nos linfócitos das gestantes e das não gestantes. Os dados encontrados revelaram uma alteração nas atividades das ectoenzimas do sistema purinérgico no grupo de gestantes. Os resultados demonstraram um aumento da atividade da E-NTPDase, podendo levar a uma diminuição dos níveis de nucleotídeos ATP e ADP; e um aumento na atividade da E-ADA, podendo ocasionar uma diminuição da concentração de adenosina nos grupos: III (gestantes soronegativas para toxoplasmose) e IV (gestantes soropositivas para toxoplasmose) quando comparados ao grupo controle (I: mulheres não gestantes soronegativas para toxoplasmose). As gestantes soropositivas para toxoplasmose quando comparadas com as gestantes soronegativas não apresentaram alteração, revelando assim, que a toxoplasmose na sua fase crônica, possivelmente não interfere na sinalização purinérgica. Em conclusão, o terceiro trimestre gestacional mostra-se uma condição fisiológica que envolve a sinalização purinérgica e que a toxoplasmose em sua fase crônica não parece ser capaz de alterar esta sinalização.