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Estudo do Movimento Ciliar de Macrostomum Tuba Utilizando Métodos de Microscopia Eletrônica\". / Study of ciliary movement of Tuba macrostomum using electron microscopy methods

Aragão, Pedro Henrique Arruda 12 September 1996 (has links)
Nossa proposta de trabalho visava estudar as propriedades do movimento ciliar, aplicando técnicas de microscopia eletrônica de varredura.. Escolheu-se como material de estudo a espécie Macrostomum tuba (turbelário), bastante comum em ambientes naturais de água doce, e em aquários. Sua superfície é inteiramente revestida por cilios, que o animal usa como meio locomoção suave e rápida. Cílios são estruturas em forma de projeções delgadas de células, com uma notável organização interna, constante em todas as espécies animais, e são dotados de movimento oscilatório rítmico e autônomo. O batimento ciliar coordenado origina ondas na superfície das células, e por conseguinte, na superfície do organismo, conhecidas como ondas metacrônicas. No caso em estudo, estas ondas são sufícientes para promover o deslocamento do organismo no meIO. Estudou-se a estrutura [ma destes cílios por microscopia eletrônica de transmissão, e a sua forma durante o batimento, por microscopia eletrônica de varredura. A frequência do batimento ciliar foi determinada por microscopia de luz com fonte estroboscópica, e o movimento do organismo em meio de diferentes viscosidades, foi registrado com câmara de vídeo. Os métodos utilizados neste trabalho permitiram obter-se as seguintes informações sobre o movimento ciliar de M. tuba: 1. Os cílios têm cerca de 5f..lm de comprimento, e estruruta interna típica (\"9+2\"). 2. Os cílios em meio aquoso, batem com frequência de 15 Hz, sendo esta reduzida de modo exponencial para os meios de viscosidade maior. 3. Os cilios trabalham de modo coordenado, produzindo ondas \"metacrônicas\" que apresentam um estágio de batimento efetivo e outro de recôbro, bem distintos. O comprimento de onda é da ordem de 4 a 5 f..lm e pode ser medido diretamente nas imagens de varredura. 4. Os cílios se distribuem ao longo da face ventral em campos, onde as ondas se orientam de modo conspícuo. 5. A velocidade de propagação da onda é da ordem de 78-80 ,.!In/s. e a velocidade média de deslocamento do animal em meio aquoso é cerca de 4 mmls, caindo a menos da metade para meios de viscosidades altas. 6. Os cílios podem ser removidos por diferentes métodos experimentais, tornando acessivel a superfície da célula: isto facilitou a observação de perfis de onda com mutio boa resolução, bem assim, pennitiu contagens de densidade ciliar (cerca de 200/célula ). / The aim of this study was to investigate the properties of ciliary motion in the flatwonn, Macrostomum tuba, using electron microscopy. This is a quite common species inhabiting freshwater ponds and fish aquaria. Its suface is entirely covered with cilia, that povide a smooth and fast gliding motion for the anima!. The fme structure of the cilia has been studied by use of transmission electron microscopy. The profiles assumed by the organelle during its undulatory motion have been described by use of special scanning microscopy techniques. Frequency of the ciliary beating has been detennined with a stroboscope system, and the gliding motion ofthe animal was recorded with a vide o camera. The several approaches used in the present study provide the following conclusions: 1. The cilia are 5 11m long; ultrastructurally they confonn to the \"9+2\" mode!. 2. The beating frequency in water is 15 Hz. This value is exponentially reduced for higher viscosity media. 3. The coordinated beating of a field of cilia gives rise to \"metachronal waves\" of about 4 to 5 11m in wavelength. A distinctive effective and another recovery stroke were characterized in the scanning images. 4. Along the ventral surface of the animal, oriented metachronal waves point to the directions ofwater flow. 5. Calculated metachronal wave velocity is 78-80 l1m/s, and the animal speed in water reaches some 4 mm/s; it slows down rapidly for higher viscosity fluids. 6. Experiments with deciliation have allowed a clear cut view of the wavefronts, as well as, the counting of ciliary density (about 200/cell).
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Estudo do Movimento Ciliar de Macrostomum Tuba Utilizando Métodos de Microscopia Eletrônica\". / Study of ciliary movement of Tuba macrostomum using electron microscopy methods

Pedro Henrique Arruda Aragão 12 September 1996 (has links)
Nossa proposta de trabalho visava estudar as propriedades do movimento ciliar, aplicando técnicas de microscopia eletrônica de varredura.. Escolheu-se como material de estudo a espécie Macrostomum tuba (turbelário), bastante comum em ambientes naturais de água doce, e em aquários. Sua superfície é inteiramente revestida por cilios, que o animal usa como meio locomoção suave e rápida. Cílios são estruturas em forma de projeções delgadas de células, com uma notável organização interna, constante em todas as espécies animais, e são dotados de movimento oscilatório rítmico e autônomo. O batimento ciliar coordenado origina ondas na superfície das células, e por conseguinte, na superfície do organismo, conhecidas como ondas metacrônicas. No caso em estudo, estas ondas são sufícientes para promover o deslocamento do organismo no meIO. Estudou-se a estrutura [ma destes cílios por microscopia eletrônica de transmissão, e a sua forma durante o batimento, por microscopia eletrônica de varredura. A frequência do batimento ciliar foi determinada por microscopia de luz com fonte estroboscópica, e o movimento do organismo em meio de diferentes viscosidades, foi registrado com câmara de vídeo. Os métodos utilizados neste trabalho permitiram obter-se as seguintes informações sobre o movimento ciliar de M. tuba: 1. Os cílios têm cerca de 5f..lm de comprimento, e estruruta interna típica (\"9+2\"). 2. Os cílios em meio aquoso, batem com frequência de 15 Hz, sendo esta reduzida de modo exponencial para os meios de viscosidade maior. 3. Os cilios trabalham de modo coordenado, produzindo ondas \"metacrônicas\" que apresentam um estágio de batimento efetivo e outro de recôbro, bem distintos. O comprimento de onda é da ordem de 4 a 5 f..lm e pode ser medido diretamente nas imagens de varredura. 4. Os cílios se distribuem ao longo da face ventral em campos, onde as ondas se orientam de modo conspícuo. 5. A velocidade de propagação da onda é da ordem de 78-80 ,.!In/s. e a velocidade média de deslocamento do animal em meio aquoso é cerca de 4 mmls, caindo a menos da metade para meios de viscosidades altas. 6. Os cílios podem ser removidos por diferentes métodos experimentais, tornando acessivel a superfície da célula: isto facilitou a observação de perfis de onda com mutio boa resolução, bem assim, pennitiu contagens de densidade ciliar (cerca de 200/célula ). / The aim of this study was to investigate the properties of ciliary motion in the flatwonn, Macrostomum tuba, using electron microscopy. This is a quite common species inhabiting freshwater ponds and fish aquaria. Its suface is entirely covered with cilia, that povide a smooth and fast gliding motion for the anima!. The fme structure of the cilia has been studied by use of transmission electron microscopy. The profiles assumed by the organelle during its undulatory motion have been described by use of special scanning microscopy techniques. Frequency of the ciliary beating has been detennined with a stroboscope system, and the gliding motion ofthe animal was recorded with a vide o camera. The several approaches used in the present study provide the following conclusions: 1. The cilia are 5 11m long; ultrastructurally they confonn to the \"9+2\" mode!. 2. The beating frequency in water is 15 Hz. This value is exponentially reduced for higher viscosity media. 3. The coordinated beating of a field of cilia gives rise to \"metachronal waves\" of about 4 to 5 11m in wavelength. A distinctive effective and another recovery stroke were characterized in the scanning images. 4. Along the ventral surface of the animal, oriented metachronal waves point to the directions ofwater flow. 5. Calculated metachronal wave velocity is 78-80 l1m/s, and the animal speed in water reaches some 4 mm/s; it slows down rapidly for higher viscosity fluids. 6. Experiments with deciliation have allowed a clear cut view of the wavefronts, as well as, the counting of ciliary density (about 200/cell).
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Aspectos hematológicos, bioquímicos, morfológicos e citoquímicos de células sangüíneas em Viperídeos neotropicais dos gêneros Bothrops e Crotalus mantidos em cativeiro / Hematological, biochemical, morphological and cytochemical aspects of blood cells in neotropical Viperidae from Bothrops and Crotalus genus mantained in captivity

Luciana Carla Rameh-de-Albuquerque Zanotti 09 March 2007 (has links)
Este estudo apresenta um painel de dados hematológicos, bioquímicos, morfológicos e citoquímicos para um grupo de serpentes dos gêneros Bothrops e Crotalus mantidas em cativeiro no Instituto Butantan. Para tanto, amostras de sangue foram colhidas da veia coccígea ventral e processadas de acordo com métodos padronizados. Os resultados alcançados foram analisados para determinar diferenças interespecíficas e sexuais. A avaliação citoquímica incluiu Sudan Black B (SBB), Ácido Periódico de Schiff (PAS) e Benzidina Peroxidase (BP). Os resultados hematológicos e bioquímicos mais relevantes indicaram um número significativamente mais alto de basófilos em B. jararaca e níveis mais altos de cálcio nas fêmeas da maioria das espécies. Os azurófilos marcaram positivamente para todas as colorações. A diferenciação entre trombócitos e linfócitos foi facilmente obtida com PAS. Os basófilos marcaram positivamente apenas com PAS em Bothrops alternatus. A marcação em heterófilos variou consideravelmente entre as espécies. Ultra-estruturalmente, os leucócitos foram semelhantes ao já descrito em literatura com algumas variações no tipo dos grânulos dos basófilos e heterófilos. Os grânulos dos basófilos apresentaram-se redondos em sua maioria, com tamanho e densidade variadas, enquanto que os nos heterófilos foram heterogêneos em forma, tamanho e densidade. / This study reports a panel for hematological, biochemical, morphological and cytochemical data for a group of captive snakes belonging to the genus Bothrops and Crotalus mantained at Instituto Butantan, São Paulo, Brazil. Blood samples were collected from ventral coccigeal vein and were processed according to standard protocols. Cytochemical staining including Sudan Black B (SBB), Periodic Acid-Schiff (PAS) and Benzidine peroxidase (BP) were conducted. Blood values were evaluated to determine interspecific and sex differences. We found a significant increase of basophils in Bothrops jararaca and higher levels of calcium in females. Azurophils stained positively for all stains and a differentiation between lymphocytes and thrombocytes was easily obtained with PAS stain. Basophils stained positively only with PAS in Bothrops alternatus. Heterophils staining varied between species. The ultrastructure of leucocytes were similar within described in literature, with some variations on granules of basophils and heterophils. Basophils granules were round, with heterogeneous size and density; whereas, heterphils granules were heterogeneous in shape, size and density.
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Ultra-estrutura da região anterior do intestino médio em abelhas corbiculadas (Hymenoptera: Apidae) / Ultrastructure of anterior midgut region in corbiculate bees (Hymenoptera: Apidae)

Rönnau, Milton 23 February 2007 (has links)
Made available in DSpace on 2015-03-26T13:30:54Z (GMT). No. of bitstreams: 1 01 - capa_resultados.pdf: 56161 bytes, checksum: 89932d2a2d5a8cad69600a6e72a9cae4 (MD5) Previous issue date: 2007-02-23 / The peritrophic membrane forms a thin layer that lines the midgut of the insects isolating the food of the midgut epithelium. The peritrophic membrane has mechanical function as well as a physical barrier against microorganisms and performs some physiological roles during food digestion. In bees the origin of peritrophic membrane is unclear and this work described the ultrastructure of the anterior midgut region in corbiculate bees for the understanding of the function of this section of the digestive tract. The species studied were Apis mellifera, Melipona quadrifasciata nanthidioides, Bombus morio and Euglossa. townsendi. The results showed that the anterior midgut region is a specialized strucuture only in Meliponini that has cells tall and thin. Meanwhile in Melipona quadrifasciata anthidioides and the others studied species cells of this midgut region show ultrastrucutural features of digestive cells. The basal plasma membrane infoldings have many openings to the haemocel, suggesting an absorption role in this midgut region. The anterior midgut region of bees is characterized for the presence of the cardiac valve, a foregut section that protrudes into the midgut. The cells of the anterior midgut region of Meliponini (cardia), despite be a section anatomically and histologically differentiated, has cells with ultrastructure featrures similar to those of Bombini and Apini, and they may play a role in water and food absorption. / A membrana peritrófica forma uma camada fina que reveste o intestino médio dos insetos separando o alimento do epitélio do intestino, tem função mecânica e função de barreira física contra infestação de microorganismos. Considerando que a membrana peritrófica tem sua origem discutida nas abelhas este trabalho analisou a ultra-estrutura da porção anterior do intestino médio em abelhas corbiculadas para a compreensão da função desta região do trato digestivo. Foram estudadas espécies de abelhas corbiculadas: Apis mellifera, Melipona quadrifasciata anthidioides, Bombus morio e Euglossa townsendi. Os resultados ultra-estruturais da porção anterior do ventrículo das abelhas corbiculadas obtidos neste trabalho mostram que esta região é diferenciada apenas em Meliponini, que se caracteriza por células altas e finas. Entretanto, tanto em Melipona quadrifasciata anthidioides e nas demais espécies estudadas estas células apresentam características típicas de células digestivas. O comprimento dos canais formado pelas invaginações da membrana plasmática basal apresenta muitas aberturas para a hemocela, indicando atividade absortiva nesta região do intestino médio. A porção anterior do intestino médio de abelhas é caracterizada pela presença da válvula cárdiaca, a qual corresponde a uma porção do estomodeu que se projeta no interior do intestino. As células da porção anterior do intestino médio de Meliponini (cárdia) apesar de ser uma região diferenciada anatomicamente e histologicamente é ultra-estruturalmente semelhante àquelas células da porção anterior do ventrículo de Bombini e Apini, estando envolvidas na absorção de água do alimento.
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Caracterização do ciclo nucleolar e da formação do corpo cromatóide na espermatogênese de alguns vertebrados

Peruquetti, Rita Luiza [UNESP] 26 February 2009 (has links) (PDF)
Made available in DSpace on 2014-06-11T19:32:14Z (GMT). No. of bitstreams: 0 Previous issue date: 2009-02-26Bitstream added on 2014-06-13T20:43:02Z : No. of bitstreams: 1 peruquetti_rl_dr_sjrp.pdf: 4798980 bytes, checksum: 183f2f2646027bae2081cc27764e1c82 (MD5) / Conselho Nacional de Desenvolvimento Científico e Tecnológico (CNPq) / O corpo cromatóide (CB) é uma organela citoplasmática que, aparentemente, possui um papel no estoque de RNA e proteínas para a diferenciação final dos espermatozóides. Existem algumas teorias que tentam explicar a origem do material que compõe essa organela. Uma dessas teorias, proposta por alguns autores, sugere que o CB se origine a partir de material nucleolar, que se fragmenta nas etapas iniciais da espermatogênese e, em seguida, migra para o citoplasma. O objetivo do presente estudo foi acompanhar o ciclo nucleolar por meio de análises citoquímicas – hematoxilina-eosina (HE); azul de toluidina (AT); variante da concentração crítica de eletrólitos (CEC); reação de Feulgen; impregnação por íons prata (AgNOR); citogenéticas – impregnação por íons prata (AgNOR), e análises ultra-estruturais – microscopia eletrônica de transmissão (MET), para verificar a relação da fragmentação do material nucleolar com a formação do corpo cromatóide (CB), em algumas espécies de vertebrados: Tilapia rendalli (Teleostei, Cichlidae); Dendropsophus minutus (Amphibia, Anura); Phrynops geoffroanus (Reptilia, Testudines) e coelho albino da raça Nova Zelândia – Oryctolagus cuniculus (Mammalia, Lagomorpha). Por meio das análises citoquímicas foi possível observar que ocorre uma fragmentação do material nucleolar no início da prófase I, em todas as espécies analisadas, e uma posterior reorganização do nucléolo no núcleo de espermátides iniciais, com uma área significantemente menor do que a área do nucléolo das espermatogônias. Três fenômenos podem contribuir para essa diferença significante entre as áreas nucleolar de espermatogônias e espermátides: a) Modificação no estado funcional da célula; b) Diminuição no número de RONs nas espermátides; c) Migração de material nucleolar fragmentado... / The chromatoid body (CB) is a cytoplasmic organelle that has a function related to RNA and protein accumulation and ⁄ or storage for later germ-cell differentiation. Many theories have been postulated in order to explain the origins of the CB material. One of the most accepted theory describes that it originates from a nucleolar material, where it was fragmented in the early spermatogenesis, and finally, this fragmented nucleolar material migrates to cytoplasm. The aims of the present study were: 1) monitoring the nucleolar material distribution by means of cytochemical techniques (hematoxylin–eosin (HE), toluidine blue (TB), modified Critical Electrolyte Concentration for detecting RNA (CEC), silver-ion impregnation (AgNOR) and Feulgen reaction), and by ultrastructural analysis (Transmission Electron Microscopy – TEM); and 2) comparing the nucleolar material distribution with the formation of CB in some vertebrate species: Tilapia rendalli (Teleostei, Cichlidae); Dendropsophus minutus (Amphibia, Anura); Phrynops geoffroanus (Reptilia, Testudines); and Oryctolagus cuniculus (Mammalia, Lagomorpha). For all analyzed species, the cytochemical techniques showed that the nucleolar fragmentation occurred during the beginning of prophase I, and the nucleolus reorganization occurred in the early spermatids nucleus. Statistical tests evidenced that area of the early spermatids nucleolus were smaller than the spermatogonia nucleolus area. Three phenomena can contribute for the statistical difference between the spermatogonia nucleolar area and the early spermatids nucleolar area: a) Modification of cell activity; b) Decrease of the number of NORs in the spermatids; c) Migration of the fragmented nucleolar material from the nucleus to the cytoplasm. This nucleolar material will participate in the CB formation process. The ultrastructural analysis showed an ...(Complete abstract click electronic access below)
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Características estruturais, ultra-estruturais e morfoquantitativas dos músculos tibial anterior e sóleo de ratos jovens submetidos à imobilização da articulação talocrural. / Structural, Ultrastructural and morphoquantitative features of tibials anterior and soleus muscle fibers of young rats subjected to talocruralis joint immobilization.

William Paganini Mayer 04 November 2008 (has links)
Avaliou-se a tipificação das fibras musculares e determinou-se parâmetros morfoquantitativos dos efeitos da imobilização por 2 e 4 semanas. Após o período experimental, os músculos (mm.) foram corados por HE e Picro-sírius. Para a tipificação das fibras, utilizou-se as reações da ATPase e NADH-tr; a análise ultraestrutural procedeu-se com microscopia eletrônica de transmissão. Nos resultados, alguns mm. imobilizados (Im) exibiram núcleos centralizados e fibras tipo IIB com formas elusivas. O perimísio destes mm. se espessou, sendo constituído por fibras colágenas tipo III. Os fusos musculares apresentaram espessamento da cápsula. Houve alterações nas linhas Z e modificação de outras ultraestruturas como as mitocôndrias. A área de secção transversa dos mm. Im por 4 semanas foi menor. As fibras do tipo IIB reduziram a área de perfil e aumentaram a densidade, além disso, se ampliou a porcentagem das fibras do tipo IIA. Portanto, a imobilização promoveu alterações nos fusos e esqueleto fibroso muscular, assim como transformou fibras do tipo IIB em IIA. / The effects of muscle immobilization for 2 and 4 weeks were studied by determining morphoquantitative parameters and muscle fiber-typing. After the trial period the muscles (mm.) were subject to HE and Picrosirius stain. The reactions of ATPase and NADH-tr were used for muscles fiber-typing. The ultrastructural analyses were made by transmission electron microscopy. The results showed changes in some of immobilized (Im) mm., it exhibited centralized nuclei cells and type IIB fibers took indefinite forms. The perimisium of Im mm. thicker up, and consisted of type III collagen fibers. Also the muscle spindles capsule thickened. Changes in the Z lines and other ultrastructures such as mitochondria were noticed. The cross-section area of Im mm. for 4 weeks was lower. The type IIB fibers reduced the profile area and density increased. Also the percentage of type IIA fibers expanded. Therefore the immobilization promoted changes in muscle spindles, fibrous skeleton morphology and provide an interconversion of muscle fibers type IIB into IIA.
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Avaliação histológica e imunohistoquímica da ATM de ratos wistar adultos após meniscectomia unilateral com enxerto de cartilagem auricular autógena. / Histological and imunohistochemical evaluations of the TMJ in adult wistar rats after unilateral meniscectomy with autogenous auricular cartilage graft.

Dorival Terra Martini 28 January 2008 (has links)
Através da meniscectomia no lado esquerdo, seguida ou não de enxerto, objetiva-se verificar as possíveis alterações nas superfícies articulares da ATM. Os animais formaram os grupos: GI (meniscectomia); GII (meniscectomia e enxerto); GIII (somente o acesso cirúrgico) que originaram subgrupos conforme o período pós-operatório (10 e 30 dias) e lado (direito e esquerdo). Nos animais GIII, GId, GIId, a Cm e a superfície articular da fossa mandibular (Fm) estavam organizadas em camadas com o predomínio de fibras colágenas do tipo I. Alterações morfológicas como erosão da Cm e Fm e amplos cistos subcondrais no osso subjacente foram verificadas nos animais GIe e GIIe. Em GIIe, a Cm apresentou um nível razoável de organização sob o enxerto. Fibras colágenas do tipo I constituíam as camadas articular e condroblástica nos animais GIe e GIIe e fibras do tipo III predominaram na camada pré-condroblástica. Amplos espaços vasculares eram evidentes na zona bilaminar dos animais GI e GII. / The morphological features of the temporomandibular joint (TMJ) of rats were studied after meniscectomy in the left side of the joint. The specimens were submitted or not to an interpositional auricular cartilage graft. The animals formed the following groups: GI (meniscectomy); GII (meniscectomy and graft); GIII (sham). The post-operative periods (10, 30 days) and the side allowed to form the subgroups. The articular surface of the TMJ exhibited organized layers (GIII, GId, GIId groups) where the type I collagen fibers arranged in regular nets prevailed. Morphological changes as erosion of the articular surface with large subchondral cysts in the subjacent bone were verified (GIe, GIIe). The condyle\'s surface of GII was regular and structurally preserved under the graft. The type I collagen fibers constituted the articular and chondroblastic layers in the GIe and GIIe animals where the type III collagen fibers were predominant in the prechondroblastic layer. Wide vascular spaces were evident in the bilaminar zone of the GI and GII animals.
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Podridão floral dos citros: histopatologia de Colletotrichum acutatum / Postbloom fruit drop: histopatology of Colletotrichum acutatum

Marques, João Paulo Rodrigues 09 August 2012 (has links)
A podridão floral dos citros (PFC) é uma doença causada pelo fungo Colletotrichum acutatum responsável por causar grandes danos à produção de citros no Brasil. A doença surge apenas em botões florais com 8mm de comprimento ou maiores, levando a formação de lesões alaranjadas nas pétalas, lesões necróticas no estigma, promove a queda prematura dos frutos e a retenção do cálice e pedúnculo, sendo este último sintoma denominado estrelinha. Este trabalho tem por objetivo: observar o modo de penetração do fungo no hospedeiro Citrus sinensis Valência e os estágios posteriores da colonização, verificar se há fatores estruturais e químicos pré-formados que expliquem o porquê do fungo não conseguir infectar botões florais com menos de 8mm, caracterizar anatomicamente o sintoma estrelinha e estigmas lesionados, investigar ultraestruturalmente pétalas inoculadas, analisar se há o estabelecimento de uma infecção quiescente nos tecidos foliares, analisar grãos de pólen após a inoculação in vivo e in vitro com o fungo. Botões florais sadios, pétalas e estigmas com e sem lesões, foram submetidos às técnicas convencionais de microscopia de luz e eletrônica. Folhas e grãos de pólen foram inoculados e analisados. Foi desenvolvida uma nova técnica de coloração para tecidos vegetais infectados por fungos. A resistência dos botões florais menores que 8mm pode estar associada às barreiras químicas e estruturais pré-formadas. O ápice, nesses botões, apresenta papilas entremeadas, cristais de oxalato de cálcio no mesofilo e câmara subestomática e cavidades de óleo localizadas muito próximas umas das outras. Botões com 8mm e 12mm possuem, no ápice, papilas com arranjo frouxo, ausência de cristais e maior distanciamento entre as cavidades de óleo. No ápice da pétala, verificou-se que as células papilosas são osmóforos. No sintoma estrelinha, nota-se sob a região de abscisão do ovário a instalação de um meristema de cicatrização. A lignificação das paredes das células da medula do receptáculo e do pedúnculo floral está associada à retenção destas estruturas na planta. Nas pétalas infectadas, o C. acutatum pode penetrar intra, intercelularmente e via estômato. O fungo pode crescer de modo subcuticular e intramural e coloniza todos os tecidos da pétala. A nova técnica de coloração se mostrou muito útil nas análises histopatológicas. O fungo associa-se aos tecidos vasculares. Acérvulos ocorrem em ambas as faces das pétalas. A cutícula nos estágios mais avançados da lesão apresenta-se alterada, ou seja, ocorre a perda da ornamentação estriada e maior deposição de material lipofílico. A síntese de materiais lipofílicos envolve o retículo endoplasmático liso e rugoso e plastídios. Vesículas provenientes de dictiossomos e de corpos multivesiculares são observadas ao longo da parede celular e estão associadas ao depósito de material lipofílico na cutícula. No estigma lesionado há a formação de uma camada de proteção. O fungo apresenta quimiotropismo e cresce em direção aos grãos de pólen infectando-os 24 horas após a inoculação. Sugere-se que C. acutatum pode utilizar grãos de pólen para a sua dispersão. Após 48 horas da inoculação as folhas apresentam conídios germinados com apressórios. / The postbloom fruit drop (PFD) is a disease caused by Colletotrichum acutatum responsible for causing great damage to citrus crops in Brazil. The disease appears only in flower buds 8 mm in length or greater, leading to orange lesions in petals, necrotic lesions on the stigma, promoting the young fruit drop and the retention of the calyx and peduncle, which is called buttons. In this context, this study aimed to: observe the fungus penetration mode into the host Citrus sinensis \'Valência\' and the later stages of colonization; study the presence of preformed structural and chemical factors to explain why the fungus cannot infect floral buds with less than 8 mm in length; characterize anatomically the symptom \"buttons\" and injured stigmas; investigate the ultrastructural changes in tissues of inoculated petals; analyze whether there is the establishment of a quiescent infection in leaf tissues, analyze pollen grains after inoculation in vivo and in vitro with the fungus. Healthy buds, petals and stigmas with and without lesions, were processed and analyzed using conventional light and electron microscopy techniques. Leaves and pollen grains were also inoculated and analyzed with light microscopy. It was developed a new staining method for fungal-infected plant tissues. The resistance of flower buds smaller than 8mm may be associated with preformed structural and chemical barriers. These buttons display the apex with interspersed papillae, with crystals in mesophyll and substomatic chamber and oil cavities, which are located very close to each other on the abaxial surface. In 8mm and 12mm flower buds, the papilas in the apex become weakly interspaced, the crystals are not observed and there is the increase of the distance between the oil cavities. The papillose cells are osmophores. In the symptom \"button\", it is noted in the abscission of the ovary, an installation of wound meristem. There is also the lignification in the pith of receptacle and pedicel that can be associated with the retention of these structures in the plant. In infected petals, it was found that C. acutatum can penetrate intra and intercelullar or via stomata. The fungus may grow subcuticular and intramural and colonize all tissues of petal. The new staining technique developed has proved very useful for histopathological analysis. The fungus is closely associated with vascular tissues. The acervulli occur on both surfaces of petals. The cuticle in the later stages of the lesion is altered, i.e., there is loss of striated ornamentation and increased deposition of lipophilic material. The synthesis of lipophilic materials involves rough and smooth endoplasmic reticulum and plastids. Vesicles from dictyosomes and multivesicular bodies were observed throughout the cell wall and are associated with the deposit of lipophilic material in the cuticle. There is the formation of protective layer over the stigma damaged area. The fungus shows chemotropism and grows toward the pollen infecting it 24 hours after inoculation. It is suggested that C. acutatum can use pollen grains for dispersal. After 48 hours of inoculation, the leaves have germinated conidia with appressoria.
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Ultraestrutura do aparelho reprodutor feminino e mecanismos de transmissão transovariana de endossimbiontes de Diaphorina citri Kuwayama, 1908 (Hemiptera: Psyllidae) / Ultrastructure of the female reproductive system and mechanisms of transovarial transmission of endosymbionts of Diaphorina citri Kuwayama, 1908 (Hemiptera: Psyllidae)

Dossi, Fábio Cleisto Alda 30 January 2009 (has links)
Diaphorina citri Kuwayama, 1908 (Hemiptera: Psyllidae) tornou-se um psilídeo de grande importância para a citricultura paulista após a constatação da bactéria Candidatus Liberibacter sp., causadora do Huanglongbing (greening). Sabe-se que esse inseto abriga microrganismos endossimbiontes, os quais desempenham papel fundamental em sua ecologia nutricional, sendo transmitidos verticalmente à progênie. Dessa forma, propomos caracterizar a morfologia do aparelho reprodutor feminino durante o seu desenvolvimento para embasar a identificação do processo de migração dos simbiontes do bacterioma aos tecidos reprodutivos. D. citri possui ovário do tipo telotrófico, com ovaríolos organizados em bouquet e características gerais semelhantes às observadas para outros Sternorrhyncha. Os trofócitos parecem ser desprovidos de delimitação por membrana no ovaríolo desenvolvido. Um único oócito se desenvolve por ciclo no vitelário, o qual mantém-se em contato com a câmara trófica por um prolongamento citoplasmático, denominado cordão trófico. As informações morfo-estruturais do aparelho reprodutor de D. citri obtidas indicam similaridades importantes a de outros membros de Sternorryncha. Nesse contexto, a migração de simbiontes do bacterioma para os oócitos em maturação de D. citri, ocorre de modo semelhante ao descrito para aleirodídeos, caracterizandose pela migração de bacteriócito intacto. Este último, atravessa o epitélio de revestimento do oócito, formado por células foliculares, e invade o oócito, liberando as bactérias nele contidas. Entretanto, os simbiontes associados ao sincício do bacterioma, são liberados na hemocele através de uma pequena abertura formada no epitélio de revestimento dessa estrutura, invadindo o oócito por um mecanismo distinto. Os simbiontes contidos no oócito, formam um agrupamento de aspecto arredondado (= symbiont ball) na região posterior do oócito, próximo ao pedicelo. / Diaphorina citri Kuwayama, 1908 (Hemiptera: Psyllidae) became a serious problem to the citrus industry in São Paulo State once the Huanglongbing disease (greening), which is caused by the bacteria Candidatus Liberibacter sp., was detected. Psyllids are known to harbor endosymbiont microorganisms, which are vertically transmitted to the progeny and play a key role in the nutritional ecology of their hosts. Therefore, we aimed to characterize the morphology of the reproductive system during D. citri development as a tool for further investigation on the symbiont migration from the bacteriome to the reproductive tissues. D. citri has telotrophic ovaries with ovarioles organized in a bouquet, sharing all other characteristics with the remaining Sternorrhyncha. In developed ovarioles, trophocytes seems to lack any membrane delimitation. Only one oocyte develops at a time in the vitellarium, remaining in communication with the trophic chamber by a citoplasmatic brigde, named trophic cord. The morphostructural information reported in here on the D. citri reproductive system shows important similarities with other Sternorryncha. Symbionts associated to the bacteriome of D. citrus migrate to the ovaries and invade the oocytes during ovary maturation, as previously reported for aleyrodids. In this case, symbionts will move within the bacteriocyte as it detaches from the bacteriome and moves through the oocyte follicular epithelium, releasing the contained bacteria into the oocyte. However, symbionts associated to the bacteriome syncitium are relased into the hemocoel through small openings on the bacteriome epithelium, invading the oocyte by a different mechanism. All symbionts that invaded or were discharged into the oocyte aggregate into a balllike symbiont structure at the posterior pole close to the egg pedicel.
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Análise histopatológica e ultra-estrutural de órgão de hamster golden (Mesocricetus auratus) infectados com isolados de Leishmania do complexo Braziliensis

Romão, Raquel Peralva Ribeiro 31 January 2008 (has links)
Leishmaniasis are zoonosis with different clinical manifestations according to the Leishmania species involved and the host immune response. Leishmania braziliensis complex is responsible for the majority of human Tegumentary Leishmaniasis cases in Brazil and it is endemic in the Triângulo Mineiro region. Our aim was to compare the pathogeny of two different isolates of Leishmania braziliensis complex, obtained from cutaneous lesions of patients from Triângulo Mineiro region, with Leishmania (Viannia) braziliensis reference strain (MHOM/BR/75/M2903). Comparision was done by histopathological and ultrastructural analisys of organs of experimentally infected Hamster golden (Mesocricetus auratus). For that, 106 stationary promastigotes of the two isolates and the reference strain were subcutaneously innoculated in the hind forepaw of Hamster that were killed after 15, 30, 60 e 120 days post infection and then were collected fragments of the skin, popliteal lymph node, liver, spleen and bone marrow. The organs were processed for histopathological and ultrastructural analysis. The results showed differents pathogeny between both isolates and the reference strain, characterized for differences in prepatent period of the macroscopy lesions, in the outcome of the histophatological lesions, in the parasitism and in the capacity to produce metastatic lesions in the lymph node, liver and spleen. / As leishmanioses são zoonoses que produzem diferentes manifestações clínicas dependendo da espécie de Leishmania envolvida e da resposta imune do hospedeiro. O complexo Leishmania braziliensis é responsável pela maioria dos casos da leishmaniose tegumentar humana no Brasil e é endêmica na região do Triângulo Mineiro. Este trabalho teve como objetivo comparar a patogenia de dois diferentes isolados do complexo Leishmania braziliensis, provenientes de lesões cutâneas de pacientes da região do Triângulo Mineiro (MG), com a cepa de referência Leishmania (Viannia) braziliensis MHOM/BR/75/M2903, através de análise histopatológica e ultra-estrutural de órgãos de Hamster golden (Mesocricetus auratus) infectados experimentalmente. Para isto, 106 promastigotas na fase estacionária de desenvolvimento de cada isolado e da cepa de referência foram inoculadas em coxim plantar de Hamsters, os quais, após períodos de 15, 30, 60 e 120 dias de infecção, foram sacrificados e destes retirados fragmentos de pele, linfonodo poplíteo, fígado, baço e medula óssea. Os órgãos foram processados para avaliação histopatológica e ultra-estrutural. Os resultados obtidos dessas análises revelaram diferentes patogenias entre os dois isolados e a cepa de referência, caracterizadas por diferenças no período de prepatência das lesões macroscópicas, no aparecimento das lesões histopatológicas, no parasitismo e na capacidade de produzir lesões metastáticas no linfonodo, fígado e baço. / Mestre em Ciências da Veterinárias

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