INTRODUÇÃO: Bexiga neurogênica (BN) é um distúrbio da função vesical que pode causar danos renais irreversíveis. O diagnóstico precoce e o tratamento visam proteger a função renal e promover a independência do portador de BN. Já os biomarcadores urinários NGF e BDNF tem desempenhado um papel fundamental no tratamento e na avaliação clínica desses pacientes. Devido as limitações da própria patologia, como as alterações físicas e dificuldades sociais que prejudicam o aspecto emocional, crianças e adolescentes portadores de BN tendem a ter a qualidade de vida (QV) prejudicada em relação a outras crianças. OBJETIVO: Avaliar a QV entre os participantes do grupo Bexiga Neurogênica (G1) e o grupo Controle (G2) e analisar as concentrações dos biomarcadores NGF e BDNF entre os grupos. METODOLOGIA: Avaliamos 168 pessoas sendo 84 pacientes com idade entre 0 e 16 anos que são acompanhadas no Ambulatório de Urologia do HC-FMUSP e 84 responsáveis. Esses pacientes foram divididos em dois grupos sendo o G1 composto por 44 pacientes e seus responsáveis; e o G2 com 40 pacientes sem diagnóstico de BN e seus responsáveis. Os participantes da pesquisa responderam ao questionário validado PedsQLTM e um questionário socioeconômico. Foram coletadas 84 amostras de urina para análise dos biomarcadores NGF e BDNF. Os dados dos questionários após organização em planilhas de excel, foram enviados para análise estatística e as amostras de urina foram analisadas pelo teste ELISA (Enzyme-linked immunosorbent assay). Para análise estatística dos dados foi realizado o Teste T - Student e Mann-Whitney. RESULTADOS: Encontramos a mãe sendo a principal acompanhante durante as entrevistas, predominando o estado civil casada e com mais de 2 filhos sem diferença significativa entre os grupos. A renda familiar concentrou-se entre 1 e 3 salários mínimos, não tendo diferença entre os grupos. Quanto a escolaridade das crianças, a maioria estuda (77,3 do G1 e 97,5 do G2), e o nível de escolaridade predominante é o primário incompleto. O início do acompanhamento com urologista foi mais precoce no G1 (p=0,005). Houve diferença significativa entre os grupos na altura (p=0,02), peso (p=0,008), incontinência miccional (p=0,002) e intestinal (p=0,005) e no uso de medicamentos (p=0,018). O CIL foi encontrado apenas no G1 e o tipo de BN mais prevalente foi a hiperativa. Na análise estatística das respostas ao questionário PedsQLTM demonstrou que no grupo G1 os aspectos físico, social e escolar tiveram diferença significativa (p < 0,0001) em relação ao G2. Já nas amostras de urina não houve diferença significativa na concentração das proteínas NGF e BDNF entre os grupos. CONCLUSÃO: O estudo demonstrou que a QV dos portadores de BN e sua família é afetada em relação a pacientes com diagnóstico de outras patologias urológicas e a aplicação do questionário PedsQL confirmou ser eficiente apontando semelhança nos resultados de diferentes trabalhos de QV que utilizaram outros instrumentos de avaliação. Já em relação a concentração dos biomarcadores, não encontrou-se diferença significativa entre os grupos. Pesquisas futuras em crianças com BN poderão verificar a relação entre os biomarcadores e os tratamentos utilizados / INTRODUCTION: Neurogenic bladder (NB) is a disorder of bladder function which can cause irreversible kidney damage. Early diagnosis and treatment are intended to protect kidney function and promote the NB carrier independence. As for the urinary biomarkers NGF and BDNF has played a key role in the treatment and clinical evaluation of these patients. Because of the limitations of the disease, such as physical changes and social problems that undermine the emotional aspect, children and adolescents with NB tend to have impaired QoL in relation to other children without this anomaly. OBJECTIVE: To evaluate the quality of life among the members of the group Neurogenic Bladder (G1) and the control group (G2) and analyze the concentrations of NGF and BDNF biomarkers between groups. METHODS: 170 people participated in the study and 85 patients aged 0 to 16 who are accompanied in the Urology Clinic of HC-FMUSP and 85 guardians. These patients were divided into two groups G1 is composed of 44 patients and 44 surrogates; and G2 with 41 patients without a diagnosis of BN and 41 guardians. The participants answered the questionnaire validated PedsQLTM and socioeconomic questionnaire. They collected 85 urine samples of children and adolescents participating in the study for analysis of NGF and BDNF biomarkers. Questionnaire data were organized in spreadsheets and urine samples were analyzed by ELISA (Enzyme-linked immunosorbent assay). Statistical analysis was performed Student\'s t-test and Mann-Whitney Test. OUTCOME: We found the mother is the primary caregiver during the interviews, predominating the married marital status and with more than 2 children with no significant difference between groups. Family income is concentrated between 1 and 3 minimum wages, with no difference between groups. Most of children are attending to school (77.3 G1 and 97.5 G2) and the incomplete primary level of education are majoritary. The beginning of the follow-up with urologist was earlier in G1 (p = 0.005). There was a significant difference between the groups in height (p = 0.02), weight (p = 0.008), urinary incontinence (p = 0.002) and bowel (p = 0.005) and the use of medications (p = 0.018). The CIL was found only in G1 and the most prevalent type of BN was overactive. Statistical analysis of the responses to the questionnaire demonstrated that PedsQLTM in G1 physical, social and educational aspects had significant difference (p < 0.0001) compared to G2. However, in urine samples there was no significant difference in the concentration of NGF and BDNF proteins between groups. CONCLUSION: The study showed that the QOL of patients with BN and your family is affected compared to patients with other urological diseases. The application of PedsQL questionnaire confirmed to be efficient and it points similarity in the results of different QOL studies using other instruments evaluation. Regarding the concentration of NGF and BDNF, it wasn´t found a significant difference between the groups. Therefore, further research can verify the relationship to the biomarkers and applied treatment in children with NB

Introdução: A disfunção neurogênica do trato urinário inferior (DNTUI) é comum, tendo como causa diversas doenças neurológicas e se apresentando de maneira diversa e heterogênea. O tratamento da DNTUI pode incluir medicamentos, utilização de toxina botulínica intravesical e tratamento cirúrgico. A cirurgia de ampliação vesical é uma alternativa consagrada, usada principalmente no caso de bexigas fibrosadas ou em pacientes refratários ao tratamento conservador ou minimamente invasivo. Os mecanismos que levam à progressão da fibrose vesical e à refratariedade aos tratamentos conservadores nessa população de pacientes não são bem conhecidos. Objetivos: Avaliar a expressão gênica dos fatores relacionados à hipóxia e fibrose nos pacientes com DNTUI e correlacionar o padrão de expressão gênica com as características urodinâmicas dos pacientes estudados. Métodos: Foram avaliados prospectivamente 17 pacientes com DNTUI que foram submetidos à cirurgia de ampliação vesical pelo Departamento de Urologia do HCFMUSP. Os pacientes foram avaliados de acordo com os sintomas clínicos, exames laboratoriais e avaliação urodinâmica completa. Durante a cirurgia foi obtido um fragmento vesical interessando todas as camadas da bexiga para análise de expressão gênica com utilização de qRT-PCR de MMP-1, TIMP-1, HIF1alfa, HIF2alfa, HIF3alfa, iNOS, eNOS, VEGF e CTGF. Amostras vesicais de 9 doadores cadavéricos foram utilizados como controles. Resultados: A média dos pacientes estudados foi de 37,5 anos, com complacência vesical variando entre 3,8 e 50 ml/cmH20, com média de 11,16ml/cmH20. Os pacientes apresentaram superexpressão estatisticamente significativa de TIMP-1 e HIF3alfa e subexpressão estatisticamente significativa de MMP-1. A expressão gênica de HIF1alfa e HIF2alfa também apresentou uma tendência à superexpressão, apesar de não ser estatisticamente significativa (p = 0,14 e p = 0,11). Os outros genes avaliados foram expressos de forma heterogênea. Conclusão: Em pacientes com DNTUI associados a fibrose vesical e/ou refratariedade ao tratamento conservador, que foram submetidos à cirurgia de ampliação vesical, os fatores relacionados ao aumento da deposição da matriz extracelular e à hipóxia parecem ser relevantes na progressão da disfunção vesical. Esse achados são compatíveis com estudos em modelos animais de obstrução infravesical e hipóxia e reforçam a necessidade de estudos complementares para o melhor entendimento da fisiopatologia da progressão da disfunção vesical na DNTUI / Introduction: The neurogenic lower urinary tract dysfunction (NLUTD) is a common complication of a variety of neurological diseases and can present itself in a diverse and heterogeneous way. NLUTD can be treated with anticholinergic or alfa3 agonists drugs, intravesical botulinum toxin and/or surgical treatment. The bladder augmentation surgery is a classic alternative, used mainly in cases of fibrotic bladders or in patients with refractory symptoms with conservative treatment. The mechanisms that lead to the progression of bladder fibrosis and to conservative treatments failure are not well known. Objectives: To evaluate the expression of fibrosis and hypoxia related genes in patients with NLTUD and correlate the pattern of gene expression with urodynamic data of the population studied. Methods: We analyzed bladder specimens of 17 patients with NLUTD undergoing bladder augmentation surgery due to bladder fibrosis or conservative treatment failure. Urodynamic tests were performed in all patients. A bladder fragment was obtained during surgery for relative gene epression with quantitative real-time polymerase chain reaction (qRT-PCR) of MMP-1, TIMP-1, HIF1alfa, HIF2alfa, HIF3alfa, iNOS, eNOS, VEGF e CTGF. 9 cadaveric organ donors composed the control group. Results: The mean age of the patients was 37.5 years. Bladder compliance ranged form 3,8 to 50 ml/cmH20, with a mean of 11,16 ml/cmH20. Patients undergoing bladder augmentation surgery presented a statistically significant overexpression of TIMP-1 and HIF3alfa. MMP-1 was statistically significant underexpressed. The gene expression of HIF1alfa and HIF2alfa also showed a tendency to overexpression, although it was not statistically significant (p = 0,14 and p = 0,11). The other genes were expressed heterogenously. Discussion: In patients with NLUTD associated with bladder fibrosis and/or failure to conservative treatment, the gene expression of factors related to increased extracellular matrix deposition and hypoxia appears to be relevant in the progression of bladder dysfunction. These findings are comparable with studies in animal models of bladder oulet obstrucion and hypoxia and reinforces the need for complentary studies to better understand the pathophysiology of the progression of bladder dysfunction in the NLTUD

O cateterismo vesical intermitente limpo é uma técnica terapêutica que vem sendo amplamente utilizada na prática urológica nos últimos trinta anos em pacientes com disfunção vesicoesfincteriana. Mesmo apresentando diversos benefícios, como: continência funcional, melhora da imagem corporal, diminuição do número de infecções do trato urinário, redução das complicações renais a longo prazo, promoção de um impacto positivo na qualidade de vida, é um procedimento que acarreta mudanças na vida dos pacientes e familiares e/ou cuidadores, podendo alterar sua qualidade de vida. O objetivo deste estudo foi identificar os fatores que interferem na qualidade de vida dos pacientes com disfunção vesicoesfincteriana em programa de cateterismo vesical intermitente limpo. Sessenta e seis pacientes foram incluídos no estudo e responderam um formulário com dados sociodemográficos e clínicos, o questionário de avaliação de qualidade de vida WHOQOL-bref e o Inventário de Depressão de Beck. Não há relação entre tempo de cateterismo e gênero, faixa etária, anos de estudo, situação conjugal, renda familiar, etiologia da disfunção vesicoesfincteriana, comorbidades, locomoção, agente que executa o procedimento e continência nos intervalos do procedimento. Baixa escolaridade reflete negativamente na percepção de qualidade de vida (p=0,040). A qualidade de vida afeta negativamente o domínio psicológico tanto quando há coexistência de comorbidades (p=0,011) como na doença adquirida (p=0,020). Pacientes vítimas de trauma e doença adquirida têm o domínio relações sociais prejudicado (p=0,032), e pacientes com doença congênita apresentam melhores escores neste domínio. Pacientes cadeirantes apresentam transtornos no domínio físico em sua qualidade de vida (p=0,001). A dependência na realização do procedimento afeta negativamente a qualidade de vida nos domínios físico (p<0,001), psicológico (p=0,022) e na percepção de qualidade de vida (p=0,042). Infecções urinárias sintomáticas acarretam transtornos no domínio meio ambiente (p=0,029). 71,9% dos pacientes que reutilizam o cateter após o uso não relataram infecções urinárias sintomáticas múltiplas (p=0,006). Sintomas depressivos não estão associados a gênero, anos de estudo, renda familiar, etiologia da disfunção vesicoesfincteriana, tempo no programa de cateterismo, locomoção, agente que executa o procedimento, continência nos intervalos do cateterismo e frequência. Adultos de 41 a 60 anos apresentam mais sintomas depressivos do que idosos (p=0,038), assim como aqueles que vivem com companheiro(a) (p=0,014) e os que apresentam comorbidades (p=0,006). Pacientes com sintomas depressivos apresentam todos os domínios de qualidade de vida piores do que aqueles sem sintomas depressivos, principalmente no domínio psicológico (p<0,001), relações sociais (p=0,001) e na percepção de qualidade de vida (p=0,001). Na análise multivariada, encontrou-se que a presença de sintomas depressivos, a necessidade de um cuidador para a realização do cateterismo vesical intermitente limpo, o fato de ser incontinente e cadeirante, estar há mais tempo no programa e ter uma baixa renda familiar, são preditores de uma pior qualidade de vida. Entendemos que a avaliação das condições sociais e clínicas, além da presença de sintomas depressivos é importante e necessário para se assegurar uma adequada adesão ao tratamento e acompanhamento dos pacientes em programa de cateterismo vesical intermitente limpo / Clean intermittent catheterization is a therapeutic technique that has been widely used in urological practice in the past thirty years in patients with bladder dysfunction. Despite presenting a number of benefits as: functional continence, improved corporal image, decreased level of urinary tract infections, reduction of renal complications in the long term, promotion of a positive tracks impact on quality of life, it is a procedure that entails changes in the lives of patients, family members and/or caretakers and it may impair his/her quality of life. The objective of this study was to identify factors that affect quality of life of patients with bladder dysfunction on program of clean intermittent catheterization. Sixty-six patients included in this study fulfilled a social-demographic and clinical form, and they answered questionnaires on quality of life WHOQOL-bref and Beck Depression Inventory. There is no relationship among time of catheterization, gender, age range, years of study, marital status, income family, etiology of bladder dysfunction, clinical illness, and locomotion, agent that performs the procedure and the intervals of continence procedure. Low education reflects negatively on the perception of quality of life (p=0.040). The quality of life negatively affects both the psychological domain well when there is clinical illness coexistence (p=0.011) as the disease acquired (p=0.020). Patients suffering from trauma and disease acquired have the social relationship domain harmed (p=0.032), and patients with congenital disease present the best scores in this domain. Wheelchair patients have disorders in the physical domain in their quality of life (p=0.001). The accomplishments dependence on the procedure negatively affects his/her quality of life in physical (p<0.001) and psychological domains (p=0.022) and perception of quality of life (p=0.042). Symptomatic urinary infections lead to disorders in environment domain (p=0.029). 71.9% of patients after using the catheter did not present a multiple symptomatic urinary infection (p=0.006). Depressive symptoms are not associated to gender, years of study, income family, etiology of bladder dysfunction, time in program of clean intermittent catheterization, locomotion, agent that performs the procedure, continence in intervals of the catheterization and frequency. Adults 41 to 60 years have more depressives symptoms than elders (p=0.038), just as those living with a partner (p=0.014) and those with clinical illness (p=0.006). Patients with depressive symptoms have all domains of quality of life worse than those who do not have depressive symptoms, mainly in the psychological domain (p<0.001), social relationships (p=0.001) and perception of quality of life (p=0.001). The multivariate analysis the presence of depressive symptoms, a caretaker\'s need for the accomplishment of the clean intermittent catheterization, the fact of being incontinent and wheelchair patients, to be there is more time in the program and to have a low family income, they are predictors of a worse life quality. It is believable that the evaluation of social and clinical conditions, besides the presence of depressive symptoms, is important and necessary to assure an appropriate adhesion to the treatment and patients\' attendance in program of clean intermittent catheterization

INTRODUÇÃO: A avaliação da Qualidade de Vida tem se destacado de modo crescente em pesquisas clínicas de pacientes com transplante renal. O WHOQOLAbreviado é um dos instrumentos usados para avaliar a Qualidade de Vida em várias populações. O objetivo deste estudo foi avaliar e comparar a Qualidade de Vida nos pacientes transplantados renais submetidos à ampliação vesical e transplantados renais utilizando o WHOQOL-Abreviado e verificar a co-interferência de outros fatores sua Qualidade de Vida desses grupos. MÉTODOS: este é um estudo caso-controle e foi realizado na Unidade de Transplante Renal da Divisão de Clínica Urológica do Instituto Central da Faculdade de Medicina da Universidade de São Paulo, de julho a novembro de 2007. Foram incluídos no estudo todos os pacientes transplantados renais submetidos à Ampliação Vesical entre 1972 e 2004 com enxerto funcionante (Grupo Caso) e seus respectivos pares (Grupo Controle). Participaram 15 pacientes no Grupo Caso e 27 no Grupo Controle. Através do prontuário médico e de uma ficha de caracterização foram coletados os dados demográficos, sociais e econômicos. A Qualidade de Vida foi avaliada apenas uma vez durante a entrevista com a pesquisadora. RESULTADOS: Os grupos foram muito semelhantes entre si na maioria das variáveis analisadas. No Grupo Caso observou-se menor renda pessoal (p=0,013) e menor IMC (p=0,022). A avaliação da Qualidade de Vida foi semelhante em quase todos os domínios do WHOQOLAbreviado, a única diferença ocorreu no Domínio Relações Sociais, onde o Grupo Caso teve um escore menor que o Grupo Controle (p=0,058). Houve uma integração significativa entre o Domínio Relações Sociais e a faceta suporte (apoio) social (r=0,703; p=0,004). CONCLUSÃO: A Qualidade de Vida foi muito semelhante entre os dois grupos de transplantados renais. O Grupo Caso apresentou menor resultado no Domínio Relações Sociais, sendo que esse resultado parece estar diretamente ligado à particularidade da patologia urológica do grupo / The evaluation of health-related Quality of Life is fundamental when searching for better treatment in renal transplantation. The WHOQOL-Bref is used questionnaire to assessment for many population. The purpose of this study was evaluated and compared the Quality of Life of renal transplant patients with bladder augmentation using WHOQOL-Bref and check the co-interference of other factors their Quality of Life of these groups. METHODS: This is case-control study, performed in a Unit of Renal Transplant of the Division of Urology of the Central Institute of the Hospital of the Clinics of the College of Medicine of the University of São Paulo. Were included in the study all patients of the renal transplant with bladder augmentation between 1972 and 2004 with functioning graft (Case Group) and their peers (Control Group). Fifteen Case Group and 27 Control Group patients were enrolled. Through the medical records and a form of characterization data were collected demographic, social and economic. The Quality of Life was assessed once an interview with one of the authors. RESULTS: Both groups were very similar in most of the analyzed domains. In Case Group if it was observed lower personal income (p = 0,013) and lower BMI (p = 0,022). The assessment of Quality of Life was similar in almost all areas of WHOQOL-Bref, the only difference occurred in Social Relations Domains, where the Case Group if had a score lower than the Control Group (p=0,058). There was a significant integration between the Social Relations Domains facet support social (r = 0,703 and p = 0,004). CONCLUSION: The Quality of Life was very similar between the two groups of renal transplant. The Case Group presented result in lower Social Relations Domains, and that outcome appears to be directly connected to the peculiarity of urological pathology of the group

Orientador: Edson Antunes / Dissertação (mestrado) - Universidade Estadual de Campinas, Faculdade de Ciências Médicas / Made available in DSpace on 2018-08-25T08:33:02Z (GMT). No. of bitstreams: 1 Alexandre_EduardoCosta_M.pdf: 1619659 bytes, checksum: 6844ca6a5644be1025879f062b675420 (MD5) Previous issue date: 2014 / Resumo: Estudos clínicos vêm relacionando a síndrome metabólica / obesidade a sintomas do trato urinário inferior, também referidos como LUTS (da sigla Lower Urinary Tract Symptoms), os quais compreendem diversas queixas relacionadas a problemas de armazenamento e/ou esvaziamento da bexiga urinária. Estes sintomas acometem milhares de pessoas em todo o mundo, estando relacionados à frequência, urgência e noctúria, e frequentemente associados à bexiga hiperativa, que pode evoluir para incontinência urinária. O trato urinário inferior (TUI) é composto basicamente pela bexiga e uretra. A dinâmica vesicoesfincteriana compreende duas fases: Fase de armazenamento e Fase de eliminação. Estes processos envolvem uma sincronia de ações do músculo liso detrusor e uretra para um correto ciclo miccional. A despeito dos estudos epidemiológicos apontarem para uma correlação positiva entre síndrome metabólica/obesidade e LUTS, os mecanismos fisiopatológicos envolvidos permanecem pouco compreendidos. Portando, utilizando um modelo animal de obesidade associada à bexiga hiperativa, procuramos analisar as alterações causadas pela obesidade no trato urinário inferior antes e após o tratamento com o ativador da GCs, BAY 60-2770. O BAY 60-2770 faz parte de uma nova classe de drogas, denominadas ativadores da GCs. Essas drogas são capazes de ativar a GCs de maneira independente do NO e/ou grupamento heme, e apresentam uma potência aumentada quando o ferro se encontra em sua forma oxidada (Fe3+). Especificamente, realizamos os seguintes experimentos em camundongos controles e obesos: 1) cistometria; 2) curvas concentração-resposta a diferentes agentes contráteis e relaxantes na bexiga e/ou uretra; 3) determinação dos níveis de GMPc; 4) expressão das subunidades de ?1 e/ou ?1 da GCs; 5) medida das espécies reativas de oxigênio. O camundongo obeso apresentou um padrão miccional irregular caracterizado pelo aumento do número de contrações miccionais e de contrações involuntárias, alterações normalizadas após o tratamento com BAY 60-2770. Na bexiga, o carbacol, KCl e CaCl2 produziram contrações de forma concentração-dependente em tiras isoladas de bexiga, contrações que foram maiores em animais obesos quando comparado aos controles. O tratamento com BAY 60-2770 normalizou as contrações da bexiga em animais obesos. Um aumento de 78% nas espécies reativas de oxigênio foi observado em bexigas de animais obesos, resultado não alterado pelo BAY 60-2770. O tratamento com BAY 60-2770 gerou um aumento de 10 vezes nos níveis de GMPc em bexiga de animais obesos, sem afetar a produção desse nucleotídeo cíclico nos animais controles. A expressão protéica das subunidades ?1 e ?1 da GCs estava 40% diminuída em bexiga de animais obesos, esse resultado foi normalizado após o tratamento com BAY 60-2770. Em uretra, relaxamentos induzidos por NO (nitrito de sódio acidificado), doadores de NO (s-nitrosoglutationa e nitroglicerina) e BAY 41-2272 (estimulador da GCs) se apresentaram reduzidos em obeso quando comparado ao grupo controle. O relaxamento uretral por BAY 60-2770 apresentou um padrão diferente e foi 43% maior em camundongos obesos, resultado acompanhado pelo aumento nos níveis de GMPc. A oxidação da GCs potencializou o relaxamento uretral induzido por BAY 60-2770. O tratamento crônico reverteu completamente as disfunções uretrais dos animais obesos. A produção de espécies reativas de oxigênio estava aumentada e a expressão da subunidade ?1 da GCs diminuída na uretra do animal obeso, ambas as alterações foram revertidas pelo tratamento com BAY 60-2770. Concluímos então que as contrações aumentadas da bexiga e a disfunção no relaxamento uretral estão associadas com a produção de espécies reativas de oxigênio e "downregulation" da sinalização GCs ¿ GMPc. A prevenção da degradação da GCs pelo tratamento crônico com BAY 60-2770 melhora as disfunções miccionais de camundongos obesos. Portanto, o BAY 60-2770 pode ser de grande valor terapêutico no tratamento de complicações urológicas associadas à obesidade / Abstract: Clinical studies have shown an association between metabolic syndrome / obesity and lower urinary tract symptoms (LUTS), name given to a group of symptoms affecting the bladder during urine storage and voiding. These symptoms affect thousands of people throughout the world and are related with frequency, urgency, nocturia and often associated with overactive bladder (OAB), which may result in urinary incontinence. The low urinary tract consists of the bladder and urethra. Vesical sphincter dynamics is divided into two phases: storage and voiding phase. Each phase requires a coordinated interaction between urethra and bladder to allow a healthy urinary function. Despite epidemiological studies suggest a positive correlation between metabolic syndrome / obesity and LUTS, its pathophysiological mechanisms are still poorly studied. Therefore, using an animal model of obesity associated OAB we studied low urinary tract before and after treatment with the sGC activator BAY 60-2770. BAY 60-2770 is a novel class of drugs, classified as soluble guanylyl cyclase (sGC) activators. This class of drugs acts by NO- and heme-independent mechanisms and present a higher potency to oxidated form of sGC heme iron (Fe3+). More specifically we conducted the fallowing experiments: 1) cystomettry; 2) concentration ¿ response curves to contractile and relaxing agents in bladder and/or urethra; 3) determination of cGMP levels; 4) evaluated expressions of ?1 and/or ?1 sGC subunits; 5) measurement of reactive oxygen species. Obese mice displayed an irregular micturition pattern characterized by significant increases in voiding and non-voiding contractions, both of wich were normalized by BAY 60-2770 treatment. In the bladder, carbachol, KCl and CaCl2 produced concentration-dependent contractions in isolated bladder strips that were markedly greater in obese compared with control group. BAY 60-2770 treatment normalized the bladder contractions in obese group. A 78% increase in reactive-oxygen species (ROS) generation in bladder tissues of obese mice was observed, and that was unaffected by BAY 60-2770. Treatment with BAY 60-2770 generated a 10-fold increase in GMPc levels in bladder from obese mice, without affecting this nucleotide level in lean group. Protein expression of ?1 and ?1 subunits of sGC was decreased by 40% in bladder tissues of obese animals, which was restored by BAY 60-2770. In the urethra, relaxations induced by NO (acidified sodium nitrite), NO-donors (S-nitrosolutathione and glyceryl trinitrate) and BAY 41-2272 (sGC stimulator) were markedly reduced in obese compared with control mice. As opposed, urethral relaxations induced by BAY 60-2770 were 43% greater in obese mice, which was accompanied by increases in cGMP levels. Oxidation of sGC with potentiated BAY 60-2770-induced USM responses in control group. Long-term oral BAY 60-2770 administration fully prevented the impairment of urethral relaxations in obese mice. Reactive-oxygen species (ROS) production was enhanced, whereas protein expression of ?1 sGC subunit was reduced in USM from obese mice, both of which were restored by BAY 60-2770 treatment. In conclusion, enhanced bladder contractions and impaired urethral relaxations in obese mice are associated with ROS generation and downregulation of sGC- cGMP signaling. Prevention of sGC degradation by long-term BAY 60-2770 administration ameliorates the micturition dysfunction in obese mice. Therefore, BAY 60-2770 could be of great therapeutic value in the treatment of urological complications associated with obesity / Mestrado / Farmacologia / Mestre em Farmacologia

Orientador: Gustavo Pereira Fraga / Dissertação (mestrado) - Universidade Estadual de Campinas, Faculdade de Ciências Médicas / Made available in DSpace on 2018-08-21T03:01:48Z (GMT). No. of bitstreams: 1 Pereira_BrunoMonteiroTavares_M.pdf: 4626301 bytes, checksum: 9451595a344efa48b56d290e6bb08e5d (MD5) Previous issue date: 2012 / Resumo: Objetivos: este estudo revisa o estado atual e as implicações do trauma de bexiga nas últimas duas décadas e traz à tona o significado do uso de escores de trauma como uma ferramenta neste cenário, bem como expõe o impacto pouco explorado das lesões associadas ao trauma de bexiga, principalmente lesões do reto, sobre a morbidade e sobrevida. Métodos: gênero, idade, mecanismo / localização dalesão, lesões associadas, pressão arterial sistólica (PAS), Escore de Trauma Revisado (Revised Trauma Score - RTS), Escore de Gravidadade da Lesão (InjurySeverity Score - ISS), Escore de Severidade da Lesão no Trauma (Trauma InjurySeverity Score - TRISS), complicações e tempo de permanência hospitalar, foram analisados em estudo prospectivo de lesões vesicais coletados no período entre 1990 a 2009 em um centro de referência para trauma. Resultados: Entre 2.575 pacientes que foram submetidos à laparotomia após trauma, 111 (4,3%) apresentaram lesões de bexiga grau II ou maior, sendo 83,8% (n = 93) homens, idade média de 31,5 anos (± 11,2). Mecanismo contuso foi responsável por 50,5% (n = 56) - acidentes com veículos automotores (47,3%) e atropelamentos (29,1%). Ferimentos causados por projétil de arma de fogo representaram 87,3% dos casos de mecanismo penetrante. A lesão mais freqüente foi grau IV (51 pacientes, 46%) de acordo com a classificação da Associação Americana para Cirurgia do Trauma (AAST - OIS). A média do ISS foi de 23,8 (± 11,2), TRISS 0,90 (± 0,24), e RTS 7,26 (± 1,48). Gravidade da lesão da bexiga, mecanismo, localização da lesão da bexiga, e nem lesão do reto concomitantemente foram associadas a complicações, maior tempo de permanência hospitalar ou morte. A taxa de mortalidade foi de 10,8%. ISS > 25 (p = 0,0001), PAS <90 mmHg (p = 0,0001), RTS <7,84 (p = 0,0001) e fratura pélvica (p = 0,0011) foram altamente associados com o prognóstico sombrio e morte com razão de risco de 5,46, 2,70, 2,22, e 2,06, respectivamente. Conclusões: Escores de trauma e fratura pélvica demonstraram impacto na sobrevida no trauma de bexiga. A taxa de mortalidade manteve-se estável durante as últimas duas décadas / Abstract: Objectives: this study reviews the current status and implications of bladder trauma in the past two decades and brings out the significance of using trauma scores as a tool in this scenario as well as exposes the unexplored impact of injuries associated with trauma to the bladder, especially lesions of the rectum, on morbidity and survival Methods Gender, age, mechanism/location of damage, associated injuries, systolic blood pressure (SBP), Revised Trauma Score (RTS), Injury Severity Score (ISS), Trauma Injury Severity Score (TRISS), complications, and length of stay (LOS) were analyzed in a prospective collected bladder injuries AAST-OIS grade II database (American Association for the Surgery of Trauma Organ Injury Scaling) from 1990 to 2009 in a trauma reference center. Results Among 2,575 patients experiencing laparotomy for trauma, 111 (4.3 %) presented bladder ruptures grade II, being 83.8 % (n = 93) males, mean age 31.5 years old (±11.2). Blunt mechanism accounted for 50.5 % (n = 56)- motor vehicle crashes 47.3 % (n = 26), pedestrians hit by a car (29.1 %). Gunshot wounds represented 87.3 % of penetrating mechanism. The most frequent injury was grade IV (51 patients, 46 %). The mean ISS was 23.8 (±11.2), TRISS 0.90 (±0.24), and RTS 7.26 (±1.48). Severity (AAST-OIS), mechanism (blunt/penetrating), localization of the bladder injury (intra/extraperitoneal, associated), and neither concomitant rectum lesion were related to complications, LOS, or death. Mortality rate was 10.8 %. ISS > 25 (p = 0.0001), SBP < 90 mmHg (p = 0.0001), RTS < 7.84 (p = 0.0001), and pelvic fracture (p = 0.0011) were highly associated with grim prognosis and death with hazard ratios of 5.46, 2.70, 2.22, and 2.06, respectively. Conclusions Trauma scores and pelvic fractures impact survival in bladder trauma. The mortality rate has remained stable for the last two decades / Mestrado / Fisiopatologia Cirúrgica / Mestre em Ciências da Cirurgia

Abstract This study examined the role of tumor suppressor neurofibromin and Protein kinase C (PKC) in urinary bladder cancer, and the effect of PKC inhibitors on cancer cell behaviour. Tumor suppressor protein neurofibromin is a product of the NF1 gene, a mutation of which causes the most common hereditary tumor syndrome, type 1 neurofibromatosis. NF1 gene mutations and changes in expression have been demonstrated in malignancies, unrelated to type 1 neurofibromatosis. The best known function of neurofibromin is its Ras GTPase accelerating function. Thus, it functions as a Ras inactivator. This study demonstrated for the first time that the NF1 gene is expressed in normal and malignant urinary bladder epithelium and in cultured bladder carcinoma cells in mRNA and at the protein level. Furthermore, neurofibromin expression is decreased during bladder carcinogenesis. It can be speculated that this may lead to increased Ras activity in urinary bladder cancer. The PKC family is composed of several different isoenzymes which are responsible for a number of important intracellular events and cellular functions. Many of these are also important in cancer development and progression. The results demonstrate changes in expression of PKC α and βI isoenzymes in urinary bladder carcinoma. Furthermore, the results relate the increased expression of isoenzymes to increased PKC enzyme activity and the high proliferation rate of the cancer cells. In addition, this study utilizes small molecular inhibitors of PKC isoenzymes in order to study the effect of the inhibition of these isoenzymes on cancer cell behaviour in vitro and in vivo. The study mainly focuses on the function of PKC α and βI isoenzymes and on the effects of inhibition of these by using Go6976. The results show that Go6976 inhibits cancer cell growth, migration and invasion in vitro, and tumor growth in a mouse model. The use of Go6976 induces changes in desmosomes and adherens junctions, and in focal adhesions and hemidesmosomes. The results also show that Go6976 functions as a cell cycle checkpoint abrogator and increases the cytotoxicity of two classical chemotherapeutic agents, doxorubicin and paclitaxel. In the future, it may be possible that Go6976 or related drugs could be used in clinical cancer treatments.

Orientadores: Carlos Arturo Levi D'Ancona, Cássio Luíz Zanettini Riccetto / Dissertação (mestrado) - Universidade Estadual de Campinas, Faculdade de Ciências Médicas / Made available in DSpace on 2018-08-26T23:13:06Z (GMT). No. of bitstreams: 1 Kos_RodolfoSilva_M.pdf: 2065885 bytes, checksum: 76b4bdc123fa42204d321a899cd184f6 (MD5) Previous issue date: 2015 / Resumo: Mielomeningocele (MMC) é a principal causa de bexiga neurogênica na infância, descrita por disfunção na inervação vésico-esfincteriana e da musculatura perineal, interferindo no funcionamento correto do trato urinário inferior e alterando o processo de micção normal. O tratamento urológico conservador é orientado com base nos resultados de todos os exames relacionados à função vesical e deve-se levar em consideração os sintomas apresentados pelo paciente. A disfunção vesical sem o adequado tratamento pode inibir o indivíduo socialmente e contribuir para influências negativas sobre a qualidade de vida de seus portadores, definida por sensação subjetiva de felicidade e satisfação pessoal do indivíduo. Pela imaturidade da criança com MMC as responsabilidades relacionadas ao tratamento urológico são atribuídas ao cuidador, sendo possível observar aumento da sobrecarga global neste. O objetivo deste trabalho foi avaliar a influência do tratamento urológico conservador na qualidade de vida de crianças com MMC e na sobrecarga de seus cuidadores. Foram estudadas 24 crianças com MMC, divididos em grupos de acordo o tratamento urológico em que a criança estava atualmente de cateterismo intermitente limpo ou uso contínuo de fraldas. Os procedimentos da avaliação contaram com ficha para caracterização da amostra, Teste do Absorvente, Diário Miccional, além dos questionários Burden Interview feito com o cuidador, e AUQUEI e Qualiveen, feitos com a criança. Os resultados obtidos demonstraram que não houve diferença significativa com relação à qualidade de vida da criança quando comparadas entre os grupos de tratamentos urológicos diferentes, entretanto, os cuidadores do grupo que realizava o cateterismo intermitente limpo apresentaram maior sobrecarga global, sendo afetados pelo tratamento urológico com mais ênfase que as próprias crianças / Abstract: Myelomeningocele (MMC) is the leading cause of neurogenic bladder in children, described by dysfunction in vesical-sphincter innervation and the perineal muscles, interfering in the proper function of the lower urinary tract and altering the normal urination process. The conservative urological treatment is targeted based on the results of all tests related to bladder function and should take into account the symptoms presented by the patient. A bladder dysfunction without proper treatment can inhibit the individual socially and contribute to adverse effects on the quality of life of their patients, defined by subjective feeling of happiness and satisfaction of the individual. Because of the immaturity of the children with MMC, the responsibilities related to urological treatment are assigned to the caregiver and are recording increasing global burden on them. The objective of this study was to evaluate the influence of conservative urological treatment on quality of life of children with MMC and overload on their caregivers. 24 children with MMC were studied, divided into groups according to the current urological treatment of clean intermittent catheterization or continuous use of diapers. The evaluation procedures relied on file for sample characterization, Pad Test, Voiding Diary, and the questionnaires Burden Interview done with the caregiver, and AUQUEI and Qualiveen, made with the child. The results showed no significant difference with regard to the quality of a child's life when compared between different urological treatment groups, however, the group of caregivers who performed clean intermittent catheterization showed higher overall burden, being affected by the distinct urological treatment with more emphasis that children themselves / Mestrado / Fisiopatologia Cirúrgica / Mestre em Ciências

Orientadores: Ubirajara Ferreira, Wagner José Fávaro / Tese (doutorado) - Universidade Estadual de Campinas, Faculdade de Ciências Médicas / Made available in DSpace on 2018-08-27T12:56:11Z (GMT). No. of bitstreams: 1 Stopiglia_RafaelMamprin_D.pdf: 6417556 bytes, checksum: 52b7e5f09e9aa811c8597b3dbd50aae3 (MD5) Previous issue date: 2015 / Resumo: Em diferentes tipos de cânceres uma população muito pequena de células tem sido reconhecida como células-tronco, por apresentarem capacidade de auto-renovação e diferenciação. Para o seu mapeamento, nos tumores uroteliais, diversos marcadores de superfície celular são utilizados para caracterizar tanto células-tronco normais (CTU) quanto cancerosas (CTC), destacando-se entre eles os antígenos de superfície CD44, CD117 e CD133 e o transportador de membrana do tipo ATP Binding Cassette (ABCG2). Com relação a sinalização dos receptores toll-like (TLRs) no câncer, ainda é uma questão controvertida, pois dados conflitantes os apontam como reguladores negativos ou positivos da carcinogênese. Assim, os objetivos principais do presente estudo foram caracterizar e comparar os perfis das potenciais células-tronco uroteliais e correlacioná-los com a expressão e sinalização dos TLRs 2 e 4 no câncer da bexiga urinária. Para isso, foram selecionados tecidos de bexiga humana sem lesões uroteliais e outras com tumores não-músculo invasivos e músculo invasivos e separadas 30 (trinta) amostras obtidas de homens na faixa etária de 50 a 80 anos (média de 61 anos). Dez dessas amostras de bexiga foram provenientes de necropsia de pacientes sem diagnóstico de lesão urotelial ou doença urológica. As outras 20 amostras vesicais foram obtidas de pacientes submetidos à ressecção transuretral (RTU) e cistectomia radical. Em seguida, divididos em 3 grupos com 10 amostras cada e assim denominados: Grupo Normal, Grupo Câncer Não-Músculo Invasivo e Grupo Câncer Músculo Invasivo de bexiga. E por fim, as amostras foram processadas e submetidas às análises histopatológicas e imunohistoquímicas. Os resultados observados são os seguintes: As imunorreatividades para CD44 e CD133 foram significativamente intensas no grupo câncer músculo invasivo quando relacionadas aos demais grupos. O biomarcador ABCG2 apresentou intensa imunorreatividade nos grupos não-músculo e músculo invasivos, enquanto que no grupo normal a imunorreatividade para esse biomarcador foi ausente. Fraca imunorreatividade para o biomarcador CD117 foi verificada tanto no grupo normal quanto nos grupos não-músculo e músculo invasivos. Assim, as potenciais CTC apresentaram positividade para CD44/CD133/ABCG2 e ocorreram somente nos grupos tumores não-músculo e músculo invasivos. Com relação à caracterização das células-tronco uroteliais normais (CTU), estas foram positivas para CD44/CD133/CD117 e ocorreram com maior frequência no grupo normal em relação aos grupos não-músculo e músculo invasivos. Portanto, os 4 receptores analisados foram reconhecidos como possíveis identificadores de células tronco normais e cancerosas na bexiga. Com relação a análise dos receptores toll-like, as imunorreatividades para TLR2 e TLR4 foram significativamente reduzidas no grupo de pacientes com câncer não-músculo e músculo invasivos, sendo que a imunorreatividade para TLR2 foi ausente neste último. Assim, verificamos que no desenvolvimento dos tumores vesicais a partir de células tronco cancerosas, essas puderam ser identificadas com os marcadores propostos neste estudo e também que a expressão dos receptores TLR 2 e 4 nesta população celular foi mínima ou ausente, atuando, provavelmente, como receptores negativos na carcinogênese urotelial. Como os TLR2 e 4 provavelmente atuaram como reguladores negativos da carcinogênese urotelial pode-se concluir que possivelmente a ocorrência das CTC foi sensível ao decréscimo das imunorreatividades para os TLR2 e TLR4 / Abstract: In different cancers a very small population of cells has been recognized as stem cells , since they have the capacity for self - renewal and differentiation. For their mapping in urothelial tumors, several cell surface markers are used to characterize both normal stem cells ( CTU ) and cancer ( CTC ) , foremost among them the surface antigens CD44 , CD117 and CD133 and membrane transporter ATP Binding Cassette type ( ABCG2 ) . Relationship with the signaling of toll-like receptors ( TLRs ) in cancer is still a controversial issue because conflicting data indicate them as negative or positive regulators of carcinogenesis . Thus, the main objectives of this study were to characterize and compare the profiles of urothelial stem cells and correlates them with the expression and signaling of TLRs in cancer of the urinary bladder . Tissues of human bladder urothelial lesions and no other separate tumors with invasive and invasive non- muscle and muscle were selected thirty (30 ) samples of men aged 50-80 years (mean 61 years). Ten of these samples were derived from autopsy bladder of patients without a diagnosis of urothelial injury or urologic disease. The other 20 bladder samples were obtained from patients undergoing transurethral resection (TURP ) and radical cystectomy. After this, divided into 3 groups with 10 samples each and named as follows: Normal Group , Group Non- Muscle Invasive Cancer Group and Muscle Invasive Bladder Cancer . Then, the samples were processed and subjected to histological and immunohistochemical analysis. The observed results are as follows: The imunorreatividades for CD44 and CD133 were significantly intense in group Muscle Invasive Cancer as related to the other groups. The ABCG2 biomarker groups showed intense immunoreactivity in Non- Muscle Invasive and muscle, while in the Normal group immunoreactivity was absent for that biomarker . Weak immunoreactivity for CD117 biomarker was observed both in the Normal group and the groups Non-Muscle Invasive and Muscle. Thus, CTC were positive for CD44/CD133/ABCG2 and occurred only in tumors groups Non- Muscle Invasive and Muscle. Regarding the characterization of normal urothelial stem cells ( CTU ), these were positive for CD44/CD133/CD117 and occurred more frequently in the Normal group in relation to groups and Non-Muscle Invasive Muscle. Therefore, the four receptors were analyzed for possible identifiers recognized as normal stem cells and bladder cancer . Regarding the analysis of toll-like receptors, TLR2 and TLR4 to imunorreatividades were significantly reduced in patients with Cancer and Non- Muscle Invasive Muscle, and the TLR2 immunoreactivity was absent in the latter . Thus, we see that the development of bladder tumors from stem cells cancerous, these cells could be identified with markers and also proposed that the expression of TLR receptors 2 e 4 this cell population was minimal or absent, acting probably as receptors negative in urothelial carcinogenesis. As TLR2 and 4 probably acted as negative regulators of urothelial carcinogenesis can be concluded that most likely the occurrence of the CTC was sensitive to the decrease in imunorreactivities for TLR2 and TLR4 / Doutorado / Fisiopatologia Cirúrgica / Doutor em Ciências

Harnblase. Weiterhin bestärkt die beobachtete Kopplung die Hypothese, dass das Myofibroblastennetzwerk afferente Signale Verstärken und modulieren kann. Die Verbesserung des Verständnisses der Harnblasenfunktion ist von grundlegendem Interesse für die Behandlung von Miktionsstörungen. Eine Störung von mechanischer Stimulierbarkeit und Kopplung der suburothelialen Myofibroblasten kann eine Störung der Sensorik der Harnblase plausibel erklären und stellt einen neuen Therapieansatz dar.:1 Abkürzungsverzeichnis 2 Einführung 2.1 Hintergrund 2.2 Anatomische und physiologische Grundlagen der Harnblasenfunktion 2.2.1 Aufbau der Harnblasenwand 2.2.2 Terminologie und Klassifikation interstitieller Zellen der Harnblase 2.2.3 Phänotypisierung der suburothelialen Myofibroblasten 2.2.4 Funktionsweise der Myofibroblasten 2.2.5 Innervation des unteren Harntraktes und neuronale Kontrolle der Harnblasenfunktion 2.2.6 Lokale sensorische Netzwerke der Harnblase 3 Aufgabenstellung 4 Material und Methoden 4.1 Gewinnung und Zellkultur suburothelialer Myofibroblasten 4.2 Lösungen und Chemikalien 4.3 Calcium imaging 4.4 Datenanalyse 4.4.1 Erzeugung der FI-Ratio Datensätze 4.4.2 Automatische Fluoreszenz-Signal-Analyse 4.5 Aufbau und Anordnung der Experimente 4.5.1 Spontanaktivität 4.5.2 Mechanische Stimulation mittels Glasmikropipette 4.5.3 Mechanische Stimulation durch Scherstress 4.5.4 Hypoosmolare Stimulation 5 Ergebnisse 5.1 Spontane Kalziumaktivität humaner suburothelialer Myofibroblasten 5.2 Mechanische Stimulierbarkeit durch Druck mittels Glasmikropipette 5.2.1 Intrazelluläre Ausbreitung mechanisch induzierter Kalziumsignale 5.2.2 Interzelluläre Ausbreitung mechanisch induzierter Kalziumsignale in kultivierten humanen suburothelialen Myofibroblasten 5.3 Mechanische Stimulierbarkeit durch Scherstress 5.4 Mechanische Stimulierbarkeit durch osmotischen Stress 6 Diskussion 6.1 Beobachtete Kalziumsignale suburothelialer Myofibroblasten 6.2 Bedeutung der mechanischen Stimulierbarkeit 6.3 Identifikation der stretch-activated channels 6.4 Bedeutung der interzellulären Kopplung 6.5 Konzept zur Rolle der suburothelialen Myofibroblasten 6.6 Methodischer und experimenteller Ansatz 6.6.1 Selbst entwickelte Fluoresence Analysis Software 6.6.2 Methoden der mechanischen Stimulierbarkeit 6.7 Pathophysiologische Aspekte 7 Zusammenfassung der Arbeit 8 Literaturverzeichnis 9 Anlagen 9.1 Selbstständigkeitserklärung 9.2 Lebenslauf 9.3 Publikationen 9.4 Danksagung