Made available in DSpace on 2015-03-26T13:30:18Z (GMT). No. of bitstreams: 1 texto completo.pdf: 598716 bytes, checksum: d6fd3f536714334d84a8944a61d08272 (MD5) Previous issue date: 2008-02-28 / Conselho Nacional de Desenvolvimento Científico e Tecnológico / Lutzomyia (Lutzomyia) longipalpis (Lutz & Neiva 1912) has wide distribution in the Brazilian territory and is incriminated as transmitting the Leishmania (Leishmania) infantum chagasi (Cunha & Chagas 1937). Considering the inconsistency of information about the possibility of L. (L.) longipalpis to be a complex or not of species for Brazilian populations, and that information on the biology of this phlebotomine sand fly are still insufficient for the success of the shares to control the LVA, this paper aims to contribute to the knowledge of some Brazilian populations of L. (L.) longipalpis of Teresina (PI), Jequié (BA), and Sobral Massapé (CE) (the latter two were considered four populations, according to the pattern of abdominal spots in males), studying the morphology and morphometry of specimens adult males, and the eating habits of females. In morphology and morphometry were considered 21 characters, distributed by the head, thorax and abdomen, analyzed by ANOVA and Student-Newman-Keuls (SNK). For the knowledge of the blood sources of females the ELISA test was applyied. Data obtained through morphology revealed, among the six populations analyzed, individuals with one par and two pairs of abdominal spots, within the predominance of "one-pair" males. The most frequent palpal formula was 1.2.4.3.5; other two formulae were also observed, although in a few specimens, 1.4.2.3.5 and 1. (2.4) .3.5. In morphometric analysis, through SNK test, were found unions, disjunctions and intersections among populations analyzed. Based on the analysis of six characters, could observe that the Jequié and Teresina populations produced an individual set from those formed by the Ceará populations. In population of Jequié, when compared to population of Ceará (Massapê and Sobral), it can be observed that 79 to 95% of the characters revealed significant differences. By ANOVA, at the crossroads between the population of Ceará, few significant differences were detected. The dendogram created by TFPGA, revealed a split between the Ceará and others populations, and verified that Sobral populations, S1P and S2P, were in isolated arms. Values of bootstrap showed that the populations of Ceará (S1P, S2P, M1P and M2P) in Teresina/Jequié branches are isolated, with a confidence level of 100%. The populations of Sobral, S1P and S2P, have become isolated arms, with 53% of bootstrap. About the blood feeeding sources studies, 609 females were tested, obtaining an index of general positivity of 40.72%. In the municipality of Jequié, the females showed greater positive for the anti-serum of bird, followed by the human, dog and opossum. In Teresina, was found the highest rate of positivity, although with reactivity only for the anti- serum from bird (higher percentage), followed by the dog anti-serum. In sand flies from Sobral, once again, bird anti- serum showed a higher percentage of positivity, followed by dog and opossum. In specimens from Massapê, it was found the greatest diversity of blood sources combinations, being the only population who got reactivity for all anti-sera. Also, in Teresina, Jequié and Sobral, females were identified with reactivity for more than one anti-serum. / Lutzomyia (Lutzomyia) longipalpis (Lutz & Neiva, 1912) possui ampla distribuição no território brasileiro e está incriminada como transmissora da Leishmania (Leishmania) infantum chagasi (Cunha & Chagas 1937). Considerando a discordância de informações quanto à hipótese de L. (L.) longipalpis ser ou não um complexo de espécies em relação às populações brasileiras, e que informações sobre a biologia deste flebotomíneo, ainda, são insuficientes para o sucesso das ações de controle da LVA, o objetivo deste trabalho foi o de contribuir com o conhecimento de algumas populações brasileiras de L. (L.) longipalpis de Teresina (PI), Jequié (BA), Sobral e Massapê (CE) (as duas últimas foram consideradas quatro populações, de acordo com o padrão de manchas abdominais nos machos), estudando a morfologia e morfometria de espécimes adultos machos, e os hábitos alimentares das fêmeas. Na morfologia e morfometria foram considerados 21 caracteres, distribuídos pela cabeça, tórax e abdome, analisados pelos testes ANOVA e Student-Newman- Keuls (SNK) e para conhecimento das fontes alimentares utilizou-se a técnica de ELISA. Os dados obtidos através da morfologia revelaram, nas seis populações analisadas, exemplares com um par e dois pares de manchas abdominais, havendo sempre a predominância de machos da forma um- par . A fórmula palpal mais freqüente foi 1.2.4.3.5; outras duas fórmulas, também, foram observadas, ainda que em poucos exemplares, 1.4.2.3.5 e 1.(2.4).3.5. Na análise morfométrica, através do teste de SNK foram encontradas uniões, disjunções e intersecções entre as populações analisadas. Baseado na análise de seis caracteres foi possível observar que as populações de Jequié e Teresina formavam um conjunto disjunto daqueles formados pelas populações do Ceará. Na população de Jequié, quando comparada às populações do Ceará (Massapê e Sobral), pode-se observar que 79 a 95% dos caracteres revelaram diferenças significativas. Através da ANOVA, no cruzamento entre as populações do Ceará, foram detectadas poucas diferenças significativas. O dendograma gerado a partir do programa TFPGA, revelou separação entre as populações do Ceará e as demais, bem como evidenciou as populações de Sobral, S1P e S2P, em ramos isolados. Valores de bootstrap demonstraram que as populações do Ceará (S1P, S2P, M1P e M2P) e Teresina/ Jequié constituem ramos isolados, com um nível de confiança de 100%. As populações de Sobral, S1P e S2P se apresentaram como ramos isolados, com bootstrap de 53%. Com relação aos estudos das fontes alimentares, foram testadas 609 fêmeas, obtendo-se um índice geral de positividade de 40,72%. No município de Jequié, as fêmeas revelaram maior positividade para o anti-soro de ave, seguido de humano, cão e de gambá. Em Teresina obteve-se o mais alto índice de positividade, embora com reatividade, apenas, para o anti-soro de ave (maior percentual), seguido do anti- soro de cão. Nos flebotomíneos procedentes de Sobral, mais uma vez, o anti-soro de ave revelou maior percentual de positividade, seguido de cão e gambá. Nos espécimes procedentes de Massapê foi encontrada a maior diversidade de combinações de fontes alimentares, sendo esta a única população que obteve reatividade para todos os anti-soros. Também, em Teresina, Jequié e Sobral, foram identificadas fêmeas com reatividade para mais de um anti-soro.

Orientador: Mary Marcondes Feitosa / Banca: Márcia Dalastra Laurenti / Banca: Aparecido Antonio Camacho / Resumo: A importância do diagnóstico da leishmaniose visceral canina no Brasil reside no fato de que, dentre as estratégias de controle da doença indicadas pela Fundação Nacional de Saúde, encontra-se a eliminação do cão doméstico sorologicamente positivo. Desta forma, torna-se necessário o conhecimento da sensibilidade e da especificidade das provas sorológicas utilizadas para a correta identificação destes animais. Para avaliar o desempenho dos métodos sorológicos no diagnóstico da leishmaniose visceral canina, foram determinadas e comparadas as características dos métodos de ELISA, reação de imunofluorescência indireta (RIFI) e imunocromatografia, adotando-se como padrão o método parasitológico. Para tanto, foram utilizados 50 cães naturalmente acometidos por leishmaniose visceral e 45 cães sadios provenientes de área não endêmica para a doença. A RIFI revelou sensibilidade de 98% e especificidade de 91,1%, além de ótima concordância com o método parasitológico (Kappa = 0,893). Os métodos de ELISA e de imunocromatografia apresentaram boa concordância com o método parasitológico (coeficientes Kappa de 0,788 e 0,769, respectivamente) e valores de sensibilidade de 94% e 86% e especificidade de 84,4% e 91,1%, respectivamente. Com relação à ocorrência de reações cruzadas com leishmaniose visceral, das 14 amostras de soro positivas para doença de Chagas, nove (64,3%) foram consideradas positivas pela técnica de ELISA e seis (42,9%) pela RIFI, não se observando resultados positivos por imunocromatografia. Das 13 amostras de soros de animais portadores de erliquiose, uma (7,7%) apresentou resultado positivo por meio dos métodos de ELISA e de imunocromatografia. / Abstract: The importance of canine visceral leishmaniasis diagnosis in Brazil is based on the fact that, according to the Ministry of Health, a seropositive dog must be culled. Thus, itþs important to know the sensitivity and specificity values of the methods employed for the diagnosis of the disease. To evaluate the performance of the available sorological tests for the diagnosis of canine leishmaniasis it was determined and compared the sensitivity and specificity of ELISA, indirect immunofluorescent antibody test (IFAT) and immunochromatographic test using the parasitological test as the gold standard. For this purposal, the study was carried out with a group of 50 naturally infected dogs from an endemic area and 45 healthy dogs from a non endemic area for visceral leishmaniasis. The IFAT was 98% sensitive and 91,1% specific, and showed a very good concordance with the parasitiological test (k = 0,893). The ELISA showed a sensitivity of 94% and specificity of 84,4% and when kappa index was analysed, a good concordance was obseved (k = 0,788). The immunochromatographic test was 86% sensisitive and 91,1% specific and showed a good concordance with the parasitiological test (k = 0,769). About the occurrence of cross reaction with visceral leishmaniasis, nine (64,3%) out of 14 positive samples for Chagas’ disease were positive by ELISA and six (42,9%) out of 14 were positive by IFAT, while the immunocromatographic test didn’t yield any positive result. One (7,7%), out of 13 positive samples for ehrlichiosis, was positive by ELISA and immunocromatografic test. Five (83,3%) out of six positive samples for ehrlichiosis and babesiosis were positive by ELISA and three (50%) by immunocromatography, while IFAT didnþt yield any positive result. Five (50%) out of 10 positive samples for toxoplasmosis were positive by IFAT and one (10%) by immunocromatography. / Mestre

Submitted by Socorro Pontes (socorrop@ufersa.edu.br) on 2017-01-30T13:39:15Z No. of bitstreams: 1 GiselleSCO_DISSERT.pdf: 1058104 bytes, checksum: 89fd1032b2b20bfc50ba7056a41faafa (MD5) / Made available in DSpace on 2017-01-30T13:39:15Z (GMT). No. of bitstreams: 1 GiselleSCO_DISSERT.pdf: 1058104 bytes, checksum: 89fd1032b2b20bfc50ba7056a41faafa (MD5) Previous issue date: 2016-01-15 / The visceral leishmaniasis (VL) is an infectious disease and a zoonosis. It is still considered a public health challenge, due to the frequency and mortality caused on the population. The overall objective is to develop an instrument for prevention of Visceral Leishmaniasis in the context of the Family Health Strategy, analyzing the knowledge of health professionals. The specific objectives are characterizing the profile of health professionals on the Family Health Strategy Program; developing an instrument to assess the interest of Health Professionals in the Family Health Strategy Program (FHS) on measures to prevent visceral leishmaniasis in their community; identifying the influencing factors which come into play when those professionals take actions to prevent visceral leishmaniasis; identifying areas of greatest prevalence of visceral leishmaniasis in Mossoró and evaluating the influence of health professionals’ knowledge on the prevalence of visceral leishmaniasis. It is an exploratory, descriptive and quantitative research which was carried out in 30 Basic Health Centers (BHC) of the Family Health Strategy Program in the urban area in the town of Mossoró-RN. The population were health professionals from the FHSP, and the sample composed by 227 elements. Two questionnaires have been administered, one related to knowledge on VL and the other one for identifying the factors that guide health professionals. Data were expressed on standard average and deviation, minimum, maximum, simple frequencies and percentages obtained through the software Statistical Package for Social Science (SPSS) version 20.0. The instrument was developed and submitted to content validation with application of Kappa Index and Content Validity Index. Then, the instrument was applied to health professionals. Being validated with 20 items, divided into five factors such as the work process, environment, socio-personal difficulties, financing, prevention and control. The instrument is suitable and can be used for research in primary health care regarding to prevention and control of visceral leishmaniasis, particularly in endemic areas. Regarding to the knowledge on VL, it was identified that health professionals know the animals that may be affected, enabling an increase in the identification of cases of this disease (OR: 2.74; IC95%=1.17 – 6.41). Knowing the symptoms of the disease in animals is the key to realize its existence (OR: 2.75; IC95%=1.09 – 6.89). In addition, the fact of knowing prevention is a contributing factor to detect the disease in the regions (OR: 2.38; IC95%=1.07 – 5.31). Regarding the transmission times of the disease, it was most relevant to a greater detection of VL cases (OR: 2.75; IC95%=1.24 – 6.05). In conducting an active search for HVL and Canine Visceral Leishmaniasis (CVL), there is a greater risk of finding positive cases of the disease (OR: 2.57; IC95%=1.13 – 5.61). After the crude analysis of the O.R., the adjusted data revealed that these variables are more important. The health professionals have a limited knowledge about the VL, there are still gaps to be considered, especially on the prevention and control of disease in the researched areas. Thus, requiring an ongoing training and implementation of incisive governmental actions / A Leishmaniose Visceral (LV) é uma doença infecciosa e uma zoonose. Considerada um desafio à saúde pública pela frequência e morbimortalidade ocasionada. Objetiva-se desenvolver um instrumento para prevenção da Leishmaniose Visceral no âmbito da Estratégia de Saúde da Família, analisando o conhecimento dos profissionais de saúde. Mais especificamente, caracterizar o perfil dos Profissionais de Saúde da Estratégia de Saúde da Família; elaborar um instrumento que avalie o interesse dos Profissionais de Saúde da Estratégia de Saúde da Família (ESF) sobre as ações de prevenção da Leishmaniose Visceral da sua comunidade; identificar os fatores influenciadores dos Profissionais de Saúde da Estratégia de Saúde da Família (ESF) sobre as ações de prevenção da Leishmaniose Visceral; avaliar a influência do conhecimento dos Profissionais de Saúde da Estratégia de Saúde da Família (ESF) sobre a prevalência de Leishmaniose Visceral; realizar um levantamento das áreas de maior prevalência da Leishmaniose Visceral em Mossoró, Rio Grande do Norte. Trata-se de uma pesquisa exploratória, descritiva e quantitativa. Foi realizada em 30 Unidades Básicas de Saúde (UBS) da ESF na zona urbana, no Município de Mossoró-RN. A população foi composta pelos profissionais de saúde das ESF, sendo a amostra composta por 227 elementos. Foram aplicados dois questionários, um relacionado ao conhecimento sobre LV e outro para identificação de fatores que norteiam os profissionais de saúde. Os dados foram expressos em média e desvio padrão, valores mínimos, máximos, frequência simples e porcentagem obtidos através do programa (SPSS) versão 20.0. O instrumento foi desenvolvido, sendo submetido à validação de conteúdo com aplicação do Índice Kappa e Índice de Validade de Conteúdo. Em seguida, foi aplicado o instrumento aos profissionais de saúde. Ficando validado com 20 itens, subdividido em cinco fatores caracterizados em processo de trabalho, ambiente, dificuldades sócios pessoais, financiamento, prevenção e controle. O instrumento encontra-se adequado, podendo ser utilizado em pesquisas na atenção primária de saúde em relação à prevenção e controle da Leishmaniose visceral, principalmente em áreas endêmicas. Em relação ao conhecimento da LV, foi identificado que os profissionais de saúde conhecem os animais que podem ser acometidos, possibilitando um aumento na identificação de casos da doença (OR: 2,74; IC95%=1,17 – 6,41). O conhecimento da sintomatologia da doença no animal é um determinante para perceber a sua existência (OR: 2,75; IC95%=1,09 – 6,89). Além disso, o fato de conhecer a prevenção é um fator que contribui para detectar a doença nas regiões. (OR: 2,38; IC95%=1,07 – 5,31). Em relação aos horários de transmissão da doença foi relevante para uma maior detecção de casos de LV (OR: 2,75; IC 95%1,24 – 6,05). Na realização de busca ativa de LVH e Leishmaniose Visceral Canina (LVC), existe um maior risco de encontrar casos positivos da doença (OR: 2,57; IC95%=1,13 – 5,61). Após a análise bruta do OR, o ajustado revelou que essas variáveis são mais importantes. Os profissionais de saúde possuem um conhecimento restrito acerca da LV, existindo ainda lacunas a serem consideradas, principalmente sobre a prevenção e controle da doença nas áreas estudadas, necessitando assim, de capacitação continuada por parte das ações governamentais contudentes / 2017-01-27

Submitted by Ana Maria Fiscina Sampaio (fiscina@bahia.fiocruz.br) on 2012-08-01T21:22:36Z No. of bitstreams: 1 Nivea Farias Luz Papel da proteína hemeoxigenase....pdf: 1624634 bytes, checksum: 6f830105c144bc3c799743a490e5a511 (MD5) / Made available in DSpace on 2012-08-01T21:22:36Z (GMT). No. of bitstreams: 1 Nivea Farias Luz Papel da proteína hemeoxigenase....pdf: 1624634 bytes, checksum: 6f830105c144bc3c799743a490e5a511 (MD5) Previous issue date: 2011 / Fundação Oswaldo Cruz. Centro de Pesquisas Gonçalo Moniz. Salvador, Bahia, Brasil / A leishmaniose visceral (LV) apresenta ampla distribuição geográfica e é fatal caso não seja tratada. As manifestações hematológicas são constantes na LV e em casos não tratados os pacientes evoluem à óbito por sangramento maciço ou anemia grave. Neste cenário, mecanismos ligados à hemólise, metabolismo do heme e atividade da enzima heme oxigenase podem estar envolvidos na imunopatogênese da LV, no entanto essa perspectiva ainda não foi explorada. A heme oxigenase (HO) tem importantes propriedades regulatórias e está envolvida em processos fisiológicos e patofisiológicos como citoproteção e inflamação. Apesar de sua sugestiva participação no contexto da infecção por Leishmania, uma rápida pesquisa no PubMed com as palavras heme oxigenase e Leishmania remete a somente três trabalhos até a presente data. Nesse projeto testaremos a hipótese de que a ativação da enzima heme oxigenase-1 (HO-1) favorece a infecção por Leishmania (L) chagasi, principal agente etiológico da LV humana no Brasil. Nossas observações nesse trabalho indicam que a enzima HO-1 é induzida em macrófagos durante a infecção por L. chagasi e que a indução farmacológica da HO-1, pela CoPP aumenta a carga parasitária de macrófagos infectados por L. chagasi e reduz a produção de mediadores pró-inflamatórios frente à estimulação por LPS, tais como TNF, NO, PGE2, MCP-1, IL-1β e IL-6. Além disso, a HO-1 favorece um ambiente anti-inflamatório onde prevalece a presença de IL-10 sobre a de TNF. Macrófagos derivados de medula óssea de camundongos deficientes no gene HO-1 tem menor carga parasitária, quando infectados por L. chagasi em comparação aos macrófagos de camundongos selvagens. Esses achados indicam um potencial deletério para a HO-1 na infecção por L. chagasi, bem como sugerem possíveis mecanismos envolvidos na imunopatogênese da LV. / Visceral leishmaniasis (VL) is a widespread disease and is fatal if left untreated. Hematological manifestations are common in VL and untreated patients evolve to death from massive bleeding and severe anemia. In this scenario, mechanisms related to hemolysis, heme metabolism and enzyme activity of heme oxygenase may be involved in the immunopathogenesis of VL. But that panorama has not been explored. Heme oxygenase (HO) has important regulatory properties and is involved in patho-physiological processes such as cytoprotection and inflammation. Despite HO participation in the context of Leishmania infection is suggestive, a quick search on PubMed with the words heme oxygenase and Leishmania refers to only three papers to date. This project will test the hypothesis that heme oxygenase- 1 (HO-1) activation favors Leishmania (L) chagasi, the main etiology agent of human VL in Brazil. Our observations indicate that HO-1 is induced in macrophages during L. chagasi infection and pharmacological induction of HO-1 by CoPP increases parasite load of infected macrophages and results in inhibition of TNF- α, IL-1β, IL-6, MCP-1, PGE2 and Nitrite levels upon LPS stimulation and simultaneously induced a higher IL-10/TNF-α ratio in peritoneal macrophages contributing to the anti inflammatory pathway that favors L. chagasi replication. Beyond this, we observed that bone marrow derived macrophages knockout to HO-1 gene have a significant low parasite load when infected by L. chagasi than their wild type counterparts. In summary, our findings suggest that this enzyme can play a deleterious role in VL and clarify one of the immunoregulatory mechanisms involved in VL.

Submitted by Ana Maria Fiscina Sampaio (fiscina@bahia.fiocruz.br) on 2016-06-21T17:33:38Z No. of bitstreams: 1 Naiara Carvalho Teixeira Bagues Contribuição para o ... 2016.pdf: 2270065 bytes, checksum: ee36fb7fb8ecab2b0af558caddf66435 (MD5) / Approved for entry into archive by Ana Maria Fiscina Sampaio (fiscina@bahia.fiocruz.br) on 2016-06-21T17:33:56Z (GMT) No. of bitstreams: 1 Naiara Carvalho Teixeira Bagues Contribuição para o ... 2016.pdf: 2270065 bytes, checksum: ee36fb7fb8ecab2b0af558caddf66435 (MD5) / Made available in DSpace on 2016-06-21T17:33:56Z (GMT). No. of bitstreams: 1 Naiara Carvalho Teixeira Bagues Contribuição para o ... 2016.pdf: 2270065 bytes, checksum: ee36fb7fb8ecab2b0af558caddf66435 (MD5) Previous issue date: 2016 / Made available in DSpace on 2016-07-22T13:19:17Z (GMT). No. of bitstreams: 3 Naiara Carvalho Teixeira Bagues Contribuicao para o 2016.pdf.txt: 243367 bytes, checksum: 9df9a4fb8bc7a3cd21d749f05648f537 (MD5) Naiara Carvalho Teixeira Bagues Contribuicao para o 2016.pdf: 2270065 bytes, checksum: ee36fb7fb8ecab2b0af558caddf66435 (MD5) license.txt: 2991 bytes, checksum: 5a560609d32a3863062d77ff32785d58 (MD5) Previous issue date: 2016 / Fundação Gonçalo Moniz, Instituto de Pesquisas Gonçalo Moniz. Salvador, BA, Brasil / INTRODUÇÃO: A Leishmaniose visceral (LV) é uma doença infecciosa e parasitária que se encontra em expansão no Brasil. A espécie que causa a doença no Brasil é a Leishmania infantum. O cão é o principal reservatório do parasita. Uma vacina contra leishmaniose visceral canina (LVC) pode favorecer o controle da doença. Este trabalho tem como objetivo contribuir para o desenvolvimento de uma vacina contra LVC. OBJETIVO: O estudo do primeiro capítulo visou o desenvolvimento de um modelo para a avaliação de antígenos candidatos à vacina contra LVC. METODOLOGIA: Um experimento foi realizado para obtenção de cães resistentes a LVC. Os linfócitos dos animais deveriam ser capazes de reconhecer antígenos potencialmente úteis para o desenvolvimento de uma vacina. Para isso, uma cepa de L.infantum foi isolada de cão naturalmente infectado e doente (Camaçari, Bahia). Seis cães adultos e sadios foram inoculados com 1x108 formas promastigotas em fase estacionária de cultura por via dérmica e acompanhados por dois anos. RESULTADOS: Os animais apresentaram: 1) área de induração e ulceração rasa no local da inoculação do parasita com cura espontânea em um período inferior a três meses, 2) ausência de manifestações clínicas e de alterações hematológicas e bioquímicas séricas, 3) produção baixa e flutuante de anticorpos da classe IgG reativos a antígenos de Leishmania, 4) resposta linfoproliferativa (em 4 de 6 cães) frente a estimulação com antígenos de Leishmania, 5) produção baixa de IFN-γ em um ensaio realizado com sangue total incubado por 24h com antígenos de Leishmania (4 de 5 cães), 6) carga parasitária baixa em aspirado de baço, detectada por PCR em tempo real. CONCLUSÃO: Os animais desenvolveram uma forma subclínica da infecção ao lado de resposta imune humoral e celular fracas. OBJETIVO: No segundo capítulo foi testado um ensaio de avaliação da produção de citocinas por células de sangue de cães naturalmente infectados por Leishmania infantum. O quantiFERON modificado permite a avaliação in vitro e de maneira rápida da produção de citocinas contra Leishmania em animais de área endêmica. METODOLOGIA: Antígeno solúvel e antígenos recombinantes de L. infantum (rLci2-NT-5R-CT e rLci2-NT-CT) foram produzidos e utilizados no ensaio para a estimulação do sangue total de27 cães de área endêmica e não endêmica para LVC por 24h. O plasma foi coletado e a produção das citocinas caninas IFN-γ, IL-2, IL-6, IL-10 e TNF-α foram quantificadas. RESULTADO: Devido a problemas técnicos não foi possível avaliar os dados obtidos e, consequentemente, não foi possível caracterizar grupos de animais susceptíveis e resistentes. OBJETIVO: No terceiro capítulo, a carga parasitária e aspectos histológicos em diferentes regiões do baço de cães com LVC foi analisada. METODOLOGIA: A carga parasitária e alterações histológicas no baço de 6 cães com LVC foram avaliados por amostragem de três secções inferior, média e superior do órgão. RESULTADO: Observou-se uma variação na distribuição na carga parasitária do baço do mesmo animal. Avaliações histológicas (desorganização polpa branca, granulomas, periesplenite, células plasmáticas, e infiltração polimorfonuclear) mostraram uma variação na freqüência (granulomas) ou intensidade (perisplenite) no baço de 2 dos 6 cães. CONCLUSÃO: Conclui-se que a distribuição da carga parasitária e as alterações histológicas no baço de cães com LV mostram um certo grau de heterogeneidade. / INTRODUCTION: Visceral Leishmaniasis (VL) is an infectious parasitic disease which is increasing in Brazil. The species that causes the disease in Brazil is Leishmaniainfantum. The dog is the main reservoir of the parasite. A canine visceral leishmaniasis vaccine (CVL) may favor the control of the disease. This paper aims to contribute to the development of a vaccine against CVL. OBJECTIVE: The first chapter study aimed the development of a model for the evaluation of candidate antigens for a vaccine against CVL. An experiment was conducted to obtain resistant dogs to CVL. Lymphocytes of these animals should be able to recognize potentially useful antigens for a vaccine development. METHODOLOGY: For this, a strain of L. infantum was isolated from naturally infected and sick dog (Camaçari, Bahia). Six dogs and healthy adults were intradermally inoculated with 1 x 108 promastigotes in the stationary phase culture and were followed for two years. RESULTS: The animals showed: 1) induration area and shallow ulceration in parasite inoculation site with spontaneous healing in a period of less than three months, 2) absence of clinical symptoms and hematological and biochemical changes, 3) low and floating production of antibodies IgG reactive to Leishmania antigens, 4) lymphoproliferative response (in 4 of 6 dogs) compared to stimulation with leishmanial antigens, 5) low IFN-γ in a test performed on whole blood incubated for 24 h with antigen Leishmania (4 of 5 dogs), 6) a low parasite load in spleen aspirates, detected by realtime PCR. CONCLUSION: These animals developed a subclinical form of the infection alongside with a weakspecific humoral and cellular immune response and weak cell. OBJECTIVE: The second section was tested in a trial evaluating cytokine production by blood cells of dogs naturally infected with Leishmaniainfantum. The modified QuantiFERON allows evaluation both in vitro and quickly production of cytokines against Leishmania in animals in an endemic area. METHODOLOGY: Soluble antigen and recombinant antigens of L. infantum (rLci2-5R-NT-CT and rLci2-NT-CT) were produced and used in the assay for the stimulation of whole blood of 27 animals from endemic and nonendemic area for LVC for 24h. Plasma was collected and cytokine production of canine IFN- γ, IL-2, IL-6, IL-10 and TNF-α cytokines were quantified. RESULTS: Due to technical some problems, it was not possible to characterize groups of animals susceptible and resistant in relation to modified QuantiFERON assay results. OBJECTIVE: In the third chapter, the parasite load and histological aspects in different regions of the spleen of dogs with CVL were analyzed. METHODOLOGY: The parasite load and histological changes in the spleen of 6 dogs with CVL were evaluated by sampling three sections of the spleen (lower, middle and upper section of the organ). RESULTS: There was a variation in parasitic load distribution in the spleen of the same animal. Histological evaluations (disorganized white pulp, granulomas, periesplenite, plasma cells, and polymorphonuclear infiltration) showed a variation in the frequency (granulomas) or intensity (perisplenite) in spleen in 2 of 6 dogs. CONCLUSION: Therefore, the distribution of the parasitic load and histological changes in dogs spleen with VL show a certain degree of heterogeneity.

Made available in DSpace on 2014-06-11T19:25:37Z (GMT). No. of bitstreams: 0 Previous issue date: 2006-10-04Bitstream added on 2014-06-13T18:53:46Z : No. of bitstreams: 1 zanette_mf_me_araca.pdf: 477117 bytes, checksum: 33b9b6dcc94d610c9edaafc75071b1a8 (MD5) / Coordenação de Aperfeiçoamento de Pessoal de Nível Superior (CAPES) / A importância do diagnóstico da leishmaniose visceral canina no Brasil reside no fato de que, dentre as estratégias de controle da doença indicadas pela Fundação Nacional de Saúde, encontra-se a eliminação do cão doméstico sorologicamente positivo. Desta forma, torna-se necessário o conhecimento da sensibilidade e da especificidade das provas sorológicas utilizadas para a correta identificação destes animais. Para avaliar o desempenho dos métodos sorológicos no diagnóstico da leishmaniose visceral canina, foram determinadas e comparadas as características dos métodos de ELISA, reação de imunofluorescência indireta (RIFI) e imunocromatografia, adotando-se como padrão o método parasitológico. Para tanto, foram utilizados 50 cães naturalmente acometidos por leishmaniose visceral e 45 cães sadios provenientes de área não endêmica para a doença. A RIFI revelou sensibilidade de 98% e especificidade de 91,1%, além de ótima concordância com o método parasitológico (Kappa = 0,893). Os métodos de ELISA e de imunocromatografia apresentaram boa concordância com o método parasitológico (coeficientes Kappa de 0,788 e 0,769, respectivamente) e valores de sensibilidade de 94% e 86% e especificidade de 84,4% e 91,1%, respectivamente. Com relação à ocorrência de reações cruzadas com leishmaniose visceral, das 14 amostras de soro positivas para doença de Chagas, nove (64,3%) foram consideradas positivas pela técnica de ELISA e seis (42,9%) pela RIFI, não se observando resultados positivos por imunocromatografia. Das 13 amostras de soros de animais portadores de erliquiose, uma (7,7%) apresentou resultado positivo por meio dos métodos de ELISA e de imunocromatografia. / The importance of canine visceral leishmaniasis diagnosis in Brazil is based on the fact that, according to the Ministry of Health, a seropositive dog must be culled. Thus, itþs important to know the sensitivity and specificity values of the methods employed for the diagnosis of the disease. To evaluate the performance of the available sorological tests for the diagnosis of canine leishmaniasis it was determined and compared the sensitivity and specificity of ELISA, indirect immunofluorescent antibody test (IFAT) and immunochromatographic test using the parasitological test as the gold standard. For this purposal, the study was carried out with a group of 50 naturally infected dogs from an endemic area and 45 healthy dogs from a non endemic area for visceral leishmaniasis. The IFAT was 98% sensitive and 91,1% specific, and showed a very good concordance with the parasitiological test (k = 0,893). The ELISA showed a sensitivity of 94% and specificity of 84,4% and when kappa index was analysed, a good concordance was obseved (k = 0,788). The immunochromatographic test was 86% sensisitive and 91,1% specific and showed a good concordance with the parasitiological test (k = 0,769). About the occurrence of cross reaction with visceral leishmaniasis, nine (64,3%) out of 14 positive samples for Chagas disease were positive by ELISA and six (42,9%) out of 14 were positive by IFAT, while the immunocromatographic test didn t yield any positive result. One (7,7%), out of 13 positive samples for ehrlichiosis, was positive by ELISA and immunocromatografic test. Five (83,3%) out of six positive samples for ehrlichiosis and babesiosis were positive by ELISA and three (50%) by immunocromatography, while IFAT didnþt yield any positive result. Five (50%) out of 10 positive samples for toxoplasmosis were positive by IFAT and one (10%) by immunocromatography.

Submitted by Marcio Emanuel Paixão Santos (marcio.santos@ucsal.br) on 2017-02-17T23:08:31Z No. of bitstreams: 1 CARREIRA, C.A..pdf: 2903543 bytes, checksum: 4e26432df50eaf861aa2bdb236c62a8c (MD5) / Approved for entry into archive by Maria Emília Carvalho Ribeiro (maria.ribeiro@ucsal.br) on 2017-02-22T15:23:51Z (GMT) No. of bitstreams: 1 CARREIRA, C.A..pdf: 2903543 bytes, checksum: 4e26432df50eaf861aa2bdb236c62a8c (MD5) / Made available in DSpace on 2017-02-22T15:23:51Z (GMT). No. of bitstreams: 1 CARREIRA, C.A..pdf: 2903543 bytes, checksum: 4e26432df50eaf861aa2bdb236c62a8c (MD5) Previous issue date: 2011-09-27 / No Brasil, a Leishmaniose Visceral (LV) é uma doença causada pelo protozoário Leishmania chagasi, típica de regiões tropicais com condições ambientais propícias para a reprodução do agente transmissor, um pequeno inseto, o flebotomíneo da espécie Lutzomyia longipalpis. O presente trabalho trata de uma pesquisa realizada no Distrito de Monte Gordo, Município de Camaçari, Litoral Norte do Estado da Bahia, a qual tem por objetivo evidenciar e fazer conhecer a presença da referida patologia, correlacionando-a à devastação ambiental, em decorrência do crescimento urbano desordenado na localidade em questão. Com base em índices da evolução da LV, obtidos mediante pesquisas em banco de dados governamentais e aplicação de 200 questionários por amostragem intencional junto à população nativa, foram elaborados quadros e tabelas para melhor visualização da situação em que se encontra a região. Os mesmos serviram de suporte para a utilização de ferramentas de Geoprocessamento, a fim de pontuar a realidade da doença dentro do espaço territorial em pauta. A partir dos resultados encontrados, foram apresentadas propostas de solução para fins de subsídio com vistas à melhoria da qualidade de vida da população local. / In Brazil, the Visceral Leishmaniasis (VL) is a disease caused by a protozoan named Leishmania chagasi, typical from tropical areas under favourable environmental conditions to the transmitting agent reproduction, a insect, phlebotomine Lutzomyia longipalpis. Its a search that covers Monte Gordo District, Camaçari County, Northern Coast of Bahia - which aims to highlight the presence of this pathology, relating to the environmental destruction, due to urban sprawl in the locality concerned. Based on the index of the evolution of LV, obtained through the government database and 200 sample questionnaires collected from the local community, research tables and charts were created to more effectively visualize the situation that the region is facing. The research tables and charts will indicate the utilization of Geoprocessing tools intended to present the reality of this disease within the territorial space in question. Based on the results found, solutions were presented in order to improve the quality of life of the local community.

Made available in DSpace on 2015-03-26T13:46:46Z (GMT). No. of bitstreams: 1 texto completo.pdf: 1379407 bytes, checksum: d5005cc4450b0eb6d68a115e4f3fa732 (MD5) Previous issue date: 2005-02-03 / The objective of this study was to investigate the extracelular matrix changes in skin of dogs naturally infected by Leishmania chagasi. Fourty dogs were selected naturally infected with L. chagasi come from São Luis-MA, contained in agreement with the clinical symptoms, 20 symptomatic dogs with cutaneous lesions (group I), 20 oligosymptomatic with cutaneous lesions (group II) with positive serologically for Leishmania by Indirect Immunofluorescence Assay (IFAT) and by enzyme-linked immunosorbence assay (ELISA), and 20 dogs negative for leishmaniasis (group III), dogs not infected. Skin biopsies were accomplished for analyses of the histological alterations by technique of Hematoxylin and Eosin (HE), analyses of the collagen system for technical Picrus Sirius Red and Reticulin of Gordon & Sweets. The elastic system was evaluated by the technique of Verhoeff. Indirect Immunoperoxidase for detection of Leishmania in the cutaneous tissue. The fibers adhesive fibronectin (FN) and laminin (LN) they were detected by immunohistochemical technique with the use of the monoclonal antibodies anti-fibronectin and anti-laminin, respectively. The averages of the reactivity serologycal of the animals measure for ELISA were: 0,44 ± 0,21, for the group I; 0,23 ± 0,08 for the group II and 0,037 ± 0,007, group III, with cutoff=0,09, results were significant statistically. The largest frequencies of clinical signs presented by the dogs of the group I and II were: weight loss, generalized alopecia, dermatitis, located and widespread ulcers, opaque coat and onychogryphosis, clinical signs have been objectives of great discussions in the literature, observed so much in natural infections as in experimental. The histological alterations observed in the skin of the dogs of the groups I and II were hiperqueratose that varied of accentuated at discreet, acantosys generally accentuated, vacuolization of the basal membrane. In the derme it was observed an infiltrated inflammatory diffuse constituted mainly by neutrophils, lynphocytes, macrophages and in some cases, mast cell associated to the presence of the parasite. It was proven the prevalence of the collagen of the type III in the skin of the dogs of the group I (79,5 ± 10,0), while in the animals of the group II the collagens of the type I and of the type III was observed in variable proportions, results considered statistically significant. The presence of the collagen of the type III was confirmed by the technique of Reticulin of Gordon & Sweets. The elastic fibers of the groups I and II seemed more disforms and thicken when compared the one of the group III. The expression of the fibronectin and of the laminin it was reduced in the skin of the infected animals, being associated to the presence of parasites. These results demonstrate the intense degradation of the extracelular matrix in the skin caused by Leishmania. / O objetivo deste estudo foi investigar as alterações da matriz extracelular em pele de cães naturalmente infectados por Leishmania chagasi. Foram selecionados 40 cães naturalmente infectados com L. chagasi provenientes de São Luís-MA, agrupados de acordo com a sintomatologia clínica: 20 cães sintomáticos com lesões cutâneas (Grupo I), 20 oligossintomáticos com lesões cutâneas (grupo II) com sorologia positiva para Leishmania pela RIFI e por ELISA e 20 cães sorologicamente negativos para leishmaniose (grupo III), não infectados. Foram realizadas biopsias de pele para análises das alterações histológicas através da técnica de Hematoxilina e Eosina (HE), análises do sistema colágeno pela técnica Picrus Sirius Red e Reticulina de Gordon & Sweets. O sistema elástico foi avaliado pela técnica de Verhoeff. Utililizou-se a Imunoperoxidase Indireta para detecção de Leishmania no tecido cutâneo. As fibras adesivas fibronectina (FN) e laminina (LN) foram detectadas através da técnica de imunohistoquímica com o uso dos anticorpos monoclonais anti-fibronectina e antilaminina, respectivamente. As médias da reatividade sorológica dos animais medida pelo ELISA foram: 0,44 ± 0,21, para o grupo I; 0,23 ± 0,08 para o grupo II e 0,037 ± 0,007, grupo III, com cut-off=0,09, resultados estatisticamente significativos. As maiores freqüências de sinais clínicos apresentados pelos cães do grupo I e II foram: emagrecimento, alopecia generalizada, dermatite furfurácea, úlceras localizadas e generalizadas, pelagem opaca e onicogrifose, sendo que estes sinais clínicos têm sido alvos de grandes discussões na literatura, observados tanto em infecções naturais como em experimentais. As alterações histológicas observadas na pele dos cães dos grupos I e II foram hiperqueratose que variava de acentuada a discreta, acantose geralmente acentuada, vacuolização da camada basal. Na derme observou-se um infiltrado inflamatório difuso constituído principalmente por neutrófilos, linfócitos, macrófagos e em alguns casos, mastócitos associados à presença do parasita. Comprovou-se a predominância do colágeno do tipo III na pele dos cães do grupo I (79,5 ± 10,0), enquanto nos animais do grupo II os colágenos do tipo I e do tipo III foram observados em proporções variáveis, resultados considerados estatisticamente significativos. A presença do colágeno do tipo III foi confirmada pela técnica da Reticulina de Gordon & Sweets. As fibras elásticas dos grupos I e II apresentavam-se mais desuniformes e espessas quando comparadas as do grupo III. A expressão da fibronectina e da laminina foi reduzida na pele dos animais infectados, estando associada à presença de parasitas. Estes resultados demonstram a intensa degradação dos constituintes da MEC da pele causadas por Leishmania.

Made available in DSpace on 2014-12-17T14:13:42Z (GMT). No. of bitstreams: 1 HenioGL_TESE.pdf: 1861952 bytes, checksum: 59df83a02a682e8397eb8b241531d77b (MD5) Previous issue date: 2011-11-16 / Visceral leishmaniasis (VL) is a disease caused by protozoa of the Leishmania donovani complex, whose infection has clinical spectrum ranging from asymptomatic infection to active disease characterized by fever, cachexia, hepatosplenomegaly, and immunosuppression. The healing or protective immunity require an antigen-specific type 1. The Montenegro skin test (DTH) has been interpreted as a marker of protective immunity. However, there is no known correlation between the DTH response to type 1 and DTH and immunity of type 1 are maintained in the long term. Thus, a longitudinal study of 8 years, nested in a cohort family held in Brazil, documented the status of DTH and cytokine production by peripheral blood mononuclear cells in response to antigen-specific stimulation. This study was the interdisciplinary approach of physicians, biochemists, nutritionists, veterinary medicine, biology and statistics. The results show that 46.2% of subjects were analyzed DTH positive at baseline. The prevalence of positive and DTH induration size increased with age (p = 0.0021). 15.7% of individuals positive DTH "retro-converted" the negative and 50.4% (64) of individuals negative DTH became positive. The size of DTH induration was correlated significantly with the antigen-induced production of IFN-γ (r = 0.6186, p = 0.0001). IL-6 was secreted at higher levels in peripheral blood mononuclear cells of individuals who "retro-converted" DTH positive to negative than individuals who remained stable DTH status (p = 0.005). Thus, IFN-γ produced by peripheral blood mononuclear cells, may be a surrogate marker for protective immunity instead of the DTH response. In addition, differences in innate immune response may determine whether individuals maintain or eliminate the infection by Leishmania infantum chagasi in asymptomatic patients / A leishmaniose visceral (LV) ? uma doen?a ocasionada por protozo?rios do complexo Leishmania donovani, cuja infec??o possui espectro cl?nico variando desde infec??o assintom?tica a doen?a ativa caracterizada por febre, caquexia, hepatoesplenomegalia e imunossupress?o. A cura ou prote??o exigem uma imunidade ant?geno espec?fica do tipo 1. O teste cut?neo de Montenegro (DTH) tem sido interpretado como um marcador de imunidade protetora. No entanto, n?o se sabe a correla??o do DTH com a resposta tipo 1 e se o DTH e a imunidade do tipo 1 s?o mantidos a longo prazo. Assim, um estudo longitudinal de 8 anos, aninhado a uma coorte familiar realizada no Brasil, documentou o status do DTH e a produ??o de citocinas por c?lulas mononucleares do sangue perif?rico em resposta a estimulo ant?geno-espec?fico. Os resultados obtidos mostram que 46,2% dos indiv?duos analisados foram DTH positivos no in?cio do estudo. A preval?ncia do DTH positivo e o tamanho da endura??o aumentaram com a idade (p = 0,0021). 15,7% dos indiv?duos DTH positivos retroconverteram a negativos e 50,4% (64) dos indiv?duos DTH negativos tornaram-se positivos. O tamanho da endura??o do DTH correlacionou-se significativamente com a produ??o ant?geno induzida de IFN-γ (r=0,6186, p=0,0001). IL-6 foi secretado em n?veis mais elevados por c?lulas mononucleares do sangue perif?rico dos indiv?duos que retroconverteram de DTH positivo para negativo do que os indiv?duos que mantiveram o status de DTH est?vel (p=0,005). Assim, o IFN-γ, produzido por c?lulas mononucleares do sangue perif?rico, pode ser um marcador substituto para a imunidade protetora em vez da resposta DTH. Al?m disso, as diferen?as na resposta imune inata podem determinar se os indiv?duos mant?m ou eliminam a infec??o por L. infantum chagasi em assintom?ticos

Infection is the major complication for neutropenic patients, and cause of morbidity and mortality. Clinical signs are nonspecific and fever may be a late marker for the early use of antibiotics, which may complicate the prognosis. The approaches of most protocols focus on adult patients. Thus, to improve safety in the clinical approach in pediatric neutropenic patients, this work was performed in order to evaluate biomarkers involved in the inflammatory response in pediatric patients. In the period 2010 to 2012 were included 70 children with neutropenia with neutrophil count ≤ 1000 cells / mm ³, 35 pediatric patients with visceral leishmaniasis (VL) and 35 patients with onco-hematological disease, ranging in age from 0 to 18, from the oncology service of the Hospital Emergency ward Segipe and Pediatrics Diseases, University Hospital of Sergipe. Serum levels of biomarkers were evaluated following: Interferon gamma (IFN-γ), interleukin-5 (IL-5), interleukin-6 (IL-6), interleukin-10 (IL-10), lactate, ultrasensitive CRP (hsCRP), nprocalcitonina (PCT) and Tumor Necrosis Factor-α (TNF-α). The results showed that the average of the groups was no significant difference with biomarkers IFN-γ, IL-10 and TNF-α with p <0.001, IL-5 and p = 0.020, p = 0.002 with lactate and p = 0.011 PCT The hsCRP and IL-6 did not show statistical significance. Correlating CAN groups with the average of biomarkers, there was no statistical significance. This study suggests that biomarkers biomarkers that IFN-γ, IL-5, IL-10, lactate, procalcitonin and TNF-α, laboratory values showed a significant difference between the group of patients neutropenic patients with LV disease and onco- hematologic, this is not happening with the results presented by biomarkers IL-6 and hsCRP, leading us to observe that although the groups have in common neutropenia, interpretation of these biomarkers should be performed separately for each group. Except for lactate and procalcitonin, all other biomarkers showed increased results when comparing the mean of the two groups, which leads us to conclude that studies with larger numbers of subjects are important to verify the use of IFN-γ biomarkers, IL- 5, IL-6, IL-10 and TNF-α in the diagnosis of infection in neutropenic patients. / A infecção constitui a maior complicação para o paciente neutropênico, sendo causa de morbidade e mortalidade. Sinais clínicos são inespecíficos e febre pode ser um marcador tardio para início do uso de antibióticos, podendo complicar o prognóstico. As abordagens da maioria dos protocolos focam-se em pacientes adultos. Desta forma, para reforçar a segurança na abordagem clínica em pacientes neutropênicos pediátricos, foi realizado este trabalho com o objetivo de avaliar os biomarcadores envolvidos na resposta inflamatória em pacientes pediátricos. No período de 2010 a 2012 foram incluidos 70 crianças portadoras de neutropenia, com contagem de neutrófilos ≤ 1000 cel/mm³, sendo 35 pacientes pediatricos portadores de Leishmaniose visceral(LV) e 35 portadores de doença onco-hematológica , com idade variando de 0 a 18 anos, oriundos do serviço de oncologia do Hospital de Urgência de Sergipe e da enfermaria de Pediatria do Hospital Universitário de Sergipe. Os níveis séricos dos seguintes biomarcadores foram avaliados: Interferon gamma (IFN-γ), Interleucina-5(IL-5), interleucina-6(IL-6), interleucina-10(IL-10), lactato, Proteina C Reativa ultrassensível(PCR-US),procalcitonina(PCT) e Fator de Necrose Tumoral alfa(TNF-α) . Os resultados mostraram que na média dos grupos estudados houve diferença significativa com os biomarcadores IFN-γ, IL-10 e TNF-α com p <0,001, IL-5 com p=0,020, lactato com p=0,002 e PCT com p=0,011 A PCR-US e a IL-6 não apresentaram estatiscamente significância. Correlacionando a CAN dos grupos com a média dos biomarcadores, não foi observado significancia estatística. Este trabalho sugere que os biomarcadores que os biomarcadores IFN-γ, IL-5, IL-10, lactato, procalcitonina e TNF-α, apresentaram valores laboratoriais com diferença significativa entre o grupo de pacientes neutropênicos portadores de LV e doença onco-hematológica, o mesmo não acontecendo com os resultados apresentados pelos biomarcadores IL-6 e a PCR-US, levando-nos a observar que apesar dos grupos terem a neutropenia em comum, a interpretação destes biomarcadores deve ser realizada de forma distinta para cada grupo. Excetuando-se o lactato e a procalcitonina, todos os demais biomarcadores apresentaram resultados aumentados quando comparadas as médias dos dois grupos, fato que nos faz concluir que estudos com um número maior de indivíduos são importantes para verificar o uso dos biomarcadores IFN-γ, IL-5, IL-6, IL-10 e TNF-α no diagnóstico de infecção em pacientes neutropênicos.