Tese (doutorado) - Universidade Federal de Santa Catarina, Centro de Ciências Biológicas, Programa de Pós-Graduação em Farmacologia, Florianópolis, 2011 / Made available in DSpace on 2012-10-26T00:13:28Z (GMT). No. of bitstreams: 1 292958.pdf: 4044585 bytes, checksum: 30597a5b732a080b5e5766348b28d352 (MD5) / Atualmente, drogas com atividade antidepressiva, como os inibidores seletivos da recaptação de serotonina, são os fármacos de primeira escolha no tratamento de um amplo espectro dos transtornos de ansiedade. Resultados pré-clínicos demonstraram que o tratamento agudo ou crônico com [Nphe1,Arg14,Lys15]N/OFQ-NH2 (UFP-101), antagonista peptídico competitivo do receptor NOP para nociceptina, apresentou um efeito do tipo antidepressivo. Entretanto, existem poucas evidências sobre os efeitos do bloqueio dos receptores NOP com UFP-101 nos comportamentos relacionados com medo e ansiedade. Assim, este trabalho teve como objetivo inicial avaliar os efeitos da administração central de UFP-101 no comportamento de ratos avaliados no labirinto em T elevado (LTE). O LTE é um modelo animal que permite a medida simultânea de dois comportamentos defensivos - a esquiva inibitória e a fuga, que estão relacionadas com o transtorno de ansiedade generalizada e o transtorno de pânico, respectivamente. A administração no ventrículo lateral de UFP-101 (1 e 3 nmol) promoveu, via receptor NOP, um efeito do tipo ansiolítico, pois o pré-tratamento com N/OFQ (3 nmol), agonista NOP, preveniu a redução da latência de esquiva inibitória promovida pelo UFP-101. A latência de fuga e a atividade locomotora avaliada no campo aberto (CA) não foram alteradas por nenhum tratamento. O tratamento prévio com os inibidores de peptidase, bestatina (2 nmol) e fosforamidon (2 pmol) sugeriu que o efeito comportamental produzido pela administração no ventrículo lateral de UFP-101 (1 nmol) no LTE parece ser proveniente de um fragmento C-terminal produto da degradação enzimática do peptídeo, pois a bestatina, um inibidor de aminopeptidase-N, impediu esse efeito. Já o tratamento prévio com fosforamidon e a interação bestatina+fosforamidon não alterou o efeito do UFP-101 no LTE. Além disso, a latência de fuga no LTE e a atividade locomotora no CA não foram alteradas por nenhum tratamento. A inibição da síntese de serotonina com 4-cloro-DL-fenilalanina (PCPA, 100 mg/Kg, I.P., 4 dias) preveniu o efeito do tipo ansiolítico do UFP-101 (1 nmol) no LTE, indicando a participação do sistema serotonérgico neste efeito. A administração de UFP-101 (1, 3 ou 10 pmol) no núcleo dorsal da rafe reduziu a latência de esquiva inibitória no LTE. Novamente, a latência de fuga no LTE e a atividade locomotora no CA não foram alteradas. No teste de esconder esferas (TEE), a administração central de UFP-101 (0,3, 1 e 3 nmol) reduziu significativamente o número de esferas escondidas, indicando um efeito do tipo ansiolítico. Este efeito foi resistente ao bloqueio por naloxona (1 mg/Kg, I.P., sem efeito per se), um antagonista não seletivo de receptores opióides, não preveniu este efeito no TEE. Entretanto, as doses de 1 e 3 nmol de UFP-101 prejudicaram a atividade locomotora no CA. A participação dos neurônios noradrenérgicos do loco cerúleo (LC) no efeito do tipo ansiolítico do UFP-101 foi investigada através do registro dos potenciais de ação. A redução na taxa de disparo dos neurônios do LC promovida pela administração no ventrículo lateral de UFP-101 (0,3 e 1 nmol) foi prevenida com a administração endovenosa de naloxona (1 mg/Kg, sem efeito per se), indicando que esse efeito ocorre via receptores opióides e que a modulação da atividade elétrica dos neurônios noradrenérgicos do LC não parece ser um dos mecanismos responsáveis pelo efeito do tipo ansiolítico do UFP-101. Em resumo, o efeito do tipo ansiolítico observado no LTE após a administração central de UFP-101 parece ser proveniente de um fragmento C-terminal da degradação enzimática do peptídeo e ocorre via receptor NOP, sendo que o sistema serotonérgico, mas não o noradrenérgico, parece exercer um papel modulatório essencial nesse efeito.

Dissertação (mestrado) - Universidade Federal de Santa Catarina, Centro de Ciências Biológicas, Programa de Pós-Graduação em Farmacologia, Florianópolis, 2011 / Made available in DSpace on 2012-10-26T00:14:09Z (GMT). No. of bitstreams: 1 294494.pdf: 954814 bytes, checksum: 4480650b30613691b6dff38445673f4b (MD5) / A legislação brasileira estabelece que para um medicamento ser registrado como genérico, é necessário que se comprove sua equivalência e bioequivalência farmacêutica em relação ao medicamento de referência indicado pela ANVISA. Para comprovação de bioequivalência são analisados entre as formulações os parâmetros farmacocinéticos de Cmáx, ASC 0-t e ASC 0-inf. A principal via de administração avaliada neste aspecto é a oral, onde basicamente, o fármaco precisa se solubilizar em fluídos gastrointestinais e permear as membranas biológicas, para ser absorvido. Dados de solubilidade e de permeabilidade de fármacos são distribuídos em quatro classes de acordo com o Sistema de Classificação Biofarmacêutica, que estima a correlação in vitro/in vivo de cada classe. Tendo em vista que os ensaios in vitro simulam, porém não predizem resultados de bioequivalência, o modelo animal pode ser a alternativa mais viável a ser utilizada para predizer comportamento de formulações em humanos. O presente trabalho teve como objetivo realizar um estudo de bioequivalência de formulações contendo Nimesulida (classe II) em ratos para avaliar a confiabilidade do modelo animal para predizer a bioequivalência deste fármaco em humanos. Para isso, foram utilizadas formulações previamente submetidas a estudos de bioequivalência em humanos, para avaliar a reprodutibilidade dos parâmetros farmacocinéticos. O experimento foi realizado em ratas Wistar, através de administração oral dos fármacos e posteriores coletas sanguíneas, as quais tiveram suas concentrações determinadas pelo método de CL-EM/EM, previamente validado. Os resultados foram tratados estatisticamente e os parâmetros farmacocinéticos avaliados quanto a bioequivalência. Para a formulação bioequivalente em humanos os resultados obtidos em ratos indicaram a não-bioequivalência das formulações. Em adição, para a formulação não-bioequivalente em humanos os dados de concentração plasmática não permitiram calcular os parâmetros farmacocinéticos, ficando este estudo prejudicado. Assim concluiu-se que o protocolo experimental não foi capaz de predizer com segurança o comportamento in vivo do fármaco Nimesulida. Entretanto, é possível que estudos complementares possam revelar informações adicionais que conduzam a uma conclusão diferente.

Dissertação (mestrado) - Universidade Federal de Santa Catarina, Centro de Ciências Biológicas, Programa de Pós-Graduação em Biologia Celular e do Desenvolvimento, Florianópolis, 2015. / Made available in DSpace on 2016-05-24T17:30:37Z (GMT). No. of bitstreams: 1 337731.pdf: 898021 bytes, checksum: fa1c709f8c1a2c8ea3ab0c7d65f61457 (MD5) Previous issue date: 2015 / Existem evidências dos efeitos benéficos do exercício físico, tanto nos humanos como nos animais experimentais, que podem ser dependentes do nível de emocionalidade de cada um dos indivíduos. A literatura especializada também relata efeitos contraditórios associados a diferentes protocolos de exercício físico e efeitos dependentes do genótipo. Os ratos das linhagens isogênicas Lewis (LEW) e SHR (Spontaneously Hypertensive Rats) diferem em uma série de aspectos comportamentais, incluindo a ansiedade/emocionalidade. Então, nós realizamos um estudo com o objetivo de observar os efeitos do exercício físico forçado (EFF; em esteira) e voluntário (EFV; em rodinhas de correr) nos comportamentos relacionados à ansiedade/emocionalidade exibidos pelos ratos LEW e SHR no teste do campo aberto (CA) e labirinto em cruz elevado (LCE). No EFF, apenas 20% dos animais da linhagem LEW e 63% dos animais SHR completaram o treinamento. Nestes animais, nós observamos um aumento significativo de locomoção no teste do CA e um aumento de locomoção central no CA e entradas nos braços abertos do LCE. Isso sugere um aumento de atividade locomotora e uma diminuição de ansiedade/emocionalidade, nos animais das duas linhagens, após o treinamento. O EFV parece diminuir os índices de ansiedade/emocionalidade, porém apenas na linhagem SHR e no teste do CA. Entretanto, a distância total percorrida pela linhagem SHR, nas rodinhas de correr, foi significativamente maior que a percorrida pela LEW. O pré-tratamento com a talidomida, melhorou a resistência física da linhagem LEW fazendo com que 100% dos animais LEW completassem o protocolo de EFF, diminuiu o número de retrocessos na esteira, mas não afetou as medidas de ansiedade/emocionalidade. Assim, nós podemos concluir que os animais das duas linhagens exercitados em um protocolo de EFF apresentam redução de ansiedade/emocionalidade e aumento de locomoção. Também, a linhagem SHR parece ser composta de animais que correm voluntariamente, ao contrário da LEW, mas este tipo de exercício físico (EFV) não gerou alteração comportamental visível. Por fim, a talidomida parece ter aumentado a capacidade dos animais LEW em suportar todo o período de EFF em esteira, mas não causou alterações na ansiedade/emocionalidade nestes animais.<br> / Abstract : There is evidence of the beneficial effects of physical exercise, both in humans and in experimental animals that can be dependent on the level of emotionality of each individual. The literature also reports negative effects associated with different exercise protocols and genotype-related effects. Lewis (LEW) and SHR (Spontaneously Hypertensive Rats) inbred rat strains differ in a number of behavioral aspects, including anxiety/emotionality. So we carried out a study in order to observe the effects of forced (FPE; treadmill) and voluntary (VPE; on running wheels) physical exercise on the behaviors related to anxiety/emotionality exhibited by LEW and SHR rats in the open field (CA) and elevated plus maze (EPM) test. In the FPE, only 20% of the animals of the LEW strain and 63% of SHR animals completed the training. In these animals, we observed a significant increase in total and central locomotion in CA and entries into the open arms of the EPM, which suggests an increase in locomotor activity and a decrease in anxiety/emotionality in these two strains, after training. In the VPE, the results showed decreased anxiety/emotionality but only in SHR rats tested in the CA. However, the total distance traveled by the SHR, on running wheels, was significantly higher than that from LEW counterparts. Pre-treatment with thalidomide improved physical strength of the LEW strain. It made 100% of the animals LEW fulfilled the FPE protocol and diminish the number of setbacks in the treadmill, but did not affect measures of anxiety/emotionality. Thus, we can conclude that animals of both strains exercised in an FPE protocol have reduced anxiety/emotionality and increased locomotion. Also, the SHR strain seems to be composed of animals that voluntarily run, unlike LEW, but this type of exercise yielded no visible behavioral changes. Finally, the thalidomide appears to have increased physical capacity of LEW in the FPE, but did not cause changes in anxiety/emotionality in these animals.

Dissertação (mestrado) - Universidade Federal de Santa Catarina, Centro de Ciências da Saúde. Programa de Pos-Graduação em Nutrição. / Made available in DSpace on 2013-03-04T19:16:15Z (GMT). No. of bitstreams: 1 309620.pdf: 932193 bytes, checksum: 150e8339439d186a2f3d2151a584ca49 (MD5) / Introdução: A prole é vulnerável às agressões associadas ao consumo de etanol durante a lactação. Este pode estar relacionado à redução de antioxidantes, aumento na produção de espécies reativas de oxigênio e a peroxidação lipídica. Objetivo: Avaliar o efeito do consumo de etanol por ratas lactantes no estresse oxidativo da prole nas diferentes fases do desenvolvimento. Método: Ratas adultas Wistar foram randomizadas em Grupo Controle (GC) (n= 3) e Grupo Experimental (GE) (n= 3). As respectivas proles (n= 36) foram randomizadas em 6 sub-grupos: grupo controle lactação (GCL), grupo controle jovem (GCJ), grupo controle adulto (GCA) e grupo experimental lactação (GEL), grupo experimental jovem (GEJ), grupo experimental adulto (GEA). Durante o estudo ambos os grupos receberam dieta comercial e água "ad libitum". GE recebeu água com 20% de etanol até o 12 dia de lactação. O desenvolvimento foi avaliado pelo peso. Avaliou-se a atividade hepática e sanguínea da superóxido dismutase (SOD), glutationa S-transferase (GST), glutationa peroxidase (GPx), catalase (CAT), e a concentração das substâncias reativas ao ácido tiobarbitúrico (TBARS) no plasma. Pelo teste "t" de Student (p< 0,05) observou-se as diferenças entre os grupos. Resultados: No dia 8 (GEL: 0,17 g; GCL: 0,19 g; p< 0,001) e no dia 12 (GEL: 0,19 g; GCL: 0,22 g; p< 0,001) o ganho de peso do GEL foi menor em relação ao GCL. No grupo GEL (1,15 ± 0,01; p< 0,001) e GEJ (1,82 ± 0,03; p= 0,001) o ganho de peso foi significativamente inferior em relação ao GCL (1,30 ± 0,01) e GCJ (1,96 ± 0,02). A atividade sanguinea da SOD foi menor no GEJ (GEJ: 2,04 ± 0,05; GCJ: 2,23 ± 0,04; p= 0,018) e GEA (GEA: 2,11 ± 0,03; GCA: 2,32 ± 0,02; p< 0,001), não havendo alteração significativa a nível hepático. A atividade sérica da GST foi significativamente menor apenas no GEJ em relação ao GCJ (GEJ: 1,20 ± 0,01; GCJ: 2,31 ± 0,04; p<0,001). Com relação à atividade hepática da GST, foi significativamente menor em relação ao controle nas fases jovens (GCJ: 1,62 ± 0,02; GEJ: 1,60 ± 0,01; p= 0,008) e adulta (GCA: 1,71 ± 0,01; GEA: 1,50 ± 0,03; p< 0,001). A atividade da GPx hepática foi significativamente menor em relação ao controle nas fases jovens (GCJ: 1,06 ± 0,02; GEJ: 0,91 ± 0,04; p= 0,008) e adulta (GCA: 0,98 ± 0,06; GEA: 0,81 ± 0,03; p= 0,017), sem diferença a nível sanguineo. A atividade da CAT foi significativamente menor em relação ao controle apenas a nível hepático nos grupos jovem (GCJ: 0,99 ± 0,02; GEJ: 0,90 ± 0,05; p= 0,035) e adulto (GCA: 1,70 ± 0,01; GEA: 0,94 ± 0,05; p= 0,053). Com relação ao TBARS, foi significativamente menor apenas durante a lactação a nível hepático (GCL: 1,70 ± 0,03; GEL: 1,60 ± 0,01; p= 0,019). Conclusão: O consumo de etanol por ratas lactantes causou menor ganho de peso da prole durante as fases lactação e jovem, além de diminuir a atividade das enzimas SOD no sangue e das enzimas, GST, GPx e CAT, no fígado, nas fases, jovem e adulta. / Backgroud: The offsprings is vulnerable to and insults by ethanol during lactation. This may be related to the depletion of antioxidants, increased production of oxigen reactive species and lipid peroxidation. Aims: To evaluate the effect of ethanol consumption by lactating rats on oxidative stress in the offspring in different stages of development. Methods: Adult Wistar rats were randomized into control group (CG) (n= 3) and Experimental Group (EG) (n= 3). Their offspring (n= 36) were randomized into six sub-groups: lactation control group (LCG), young control group (YCG), adult control group (ACG) and lactation experimental group (LEG), young experimental group (YEG), adult experimental group (AEG). During the study both groups received a commercial diet and water "ad libitum". GE received water with 20% ethanol until the 12th day of lactation. The growth was evaluated by weight gain. There were evaluated blood and hepatic activity of superoxide dismutase (SOD), glutathione S -transferase (GST), glutathione peroxidase (GPx), catalase (CAT), and the concentrations of thiobarbituric acid reactive substances in plasma (TBARS). By using the "t" Student test (p< 0.05) differences between the groups were measured. Results: On 8th day (LEG: 0.17 g; LCG 0.19 g; p<0.001) and day 12th (LEG: 0.19 g; LCG: 0.22 g; p< 0.001) weight gain of LEG was lower than in the LCG. In LEG (1.15 ± 0.01; p< 0.001) and YEG (1.82 ± 0.03; p= 0.001) weight gain were significantly lower in relation to LCG (1.30 ± 0.01), and YCG (1.96 ± 0.02). The activity of SOD in blood was lower in YEG (YEG: 2.04 ± 0.05; YCG: 2.23 ± 0.04; p= 0.018) and AEG (AEG: 2.11 ± 0.03; CGA: 2.32 ± 0.02; p< 0.001), with no significant change in the liver. The activity of blood GST was significantly lower only in YEG in relation to the YCG (YEG: 1.20 ± 0.01; YCG: 2.31 ± 0.04; p< 0.001). With respct to the activity of hepatic GST, it was significantly lower in the young stages (YEG: 1.60 ± 0.01; YCG: 1.62 ± 0.02; p= 0.008) and in adults (AEG: 1.50 ± 0.03; CGA: 1.71 ± 0.01; p< 0.001) in relation to the control. The activity of GPx hepatic was significantly lower in relation to controls in young stages (YEG: 0.91 ± 0.04; YCG: 1.06 ± 0.02; p= 0.008) and in adults (AEG: 0.81 ± 0.03; ACG: 0.98 ± 0.06; p=0.017), with no difference in the blood. CAT activity was significantly lower compared to controls only in the liver in youngs (YEG: 0.90 ± 0.05; YCG: 0.99 ± 0.02; p= 0.035) and adults (AEG: 0.94 ± 0.05; ACG: 1.70 ± 0.01; p= 0.053). With respct to TBARS, it was significantly lower only in the liver during lactation (LEG: 1.60 ± 0.01; CGL: 1.70 ± 0.03; p= 0.019). Conclusion: Ethanol consumption by lactating rats caused less weight gain in offspring during lactation and young stages, and also decreased the activity of SOD in the blood, GST, GPx and CAT in the liver, in young and adult stages.

Dissertação (mestrado) - Universidade Federal de Santa Catarina, Centro de Ciências Biológicas, Programa de Pós-Graduação em Neurociências, Florianópolis, 2013. / Made available in DSpace on 2013-07-16T21:04:50Z (GMT). No. of bitstreams: 0Bitstream added on 2014-09-24T20:23:03Z : No. of bitstreams: 1 317335.pdf: 1887308 bytes, checksum: 421041b2efb7f64e205632cace865239 (MD5) / A vitamina E tem varias funcoes fisiologicas nos humanos, incluindo acao antioxidante e anti-inflamatoria, alem de ser um nutriente importante para o sistema nervoso central (SNC). O papel dessa vitamina na prevencao e/ou tratamento de algumas doencas neurologicas tem sido sugerido em estudos pre-clinicos e clinicos. Alem disso, o envolvimento da vitamina E na modulacao da depressao, uma doenca neuropsiquiatrica prevalente no mundo ocidental, e um assunto que tem emergido nos trabalhos recentes. Muitos fatores tem sido implicados na fisiopatologia da depressao, incluindo a inflamacao e a apoptose neuronal. Desse modo, o objetivo desse trabalho foi investigar o efeito antidepressivo do a-tocoferol, uma das formas mais abundantes da vitamina E, em um modelo animal de comportamento depressivo induzido pela citocina pro-inflamatoria fator de necrose tumoral-a (TNF-a), avaliar o possivel efeito sinergico do a-tocoferol com antidepressivos (fluoxetina, imipramina e bupropiona), bem como o envolvimento dos receptores N-metil-D-aspartato (NMDA) e da oxido nitrico sintase neuronal (nNOS). Alem disso, foi investigada a influencia da administracao aguda de TNF-a e/ou a-tocoferol sob os niveis de proteinas envolvidas na apoptose (Bax, Bcl2) e a fosforilacao da glicogenio sintase cinase-3B (GSK-3B) no hipocampo de camundongos. Os resultados demonstraram que: a) o TNF-a administrado de forma aguda (0,001 fg/sitio, i.c.v.) aumentou o tempo de imobilidade no teste de suspensao pela cauda (TSC); b) administracao aguda de diferentes doses de a-tocoferol (10, 30 e 100 mg/kg; p.o.) impediu o aumento no tempo de imobilidade induzido pelo TNF-a; c) uma dose subativa de a-tocoferol (10 mg/kg) e/ou doses subativas de fluoxetina (5 mg/kg, p.o.; inibidor seletivo da recaptacao de serotonina), imipramina (0,1 mg/kg, p.o.; antidepressivo triciclico), bupropiona (1 e 10 mg/kg, p.o.; inibidor da recaptacao de dopamina e noradrenalina), MK-801 (0,001 mg/kg, p.o.; antagonista de receptores NMDA); ou 7-nitroindazol (25 mg/kg, i.p.; inibidor da nNOS) preveniu o comportamento tipo depressivo induzido por TNF-a; d) nenhum dos tratamentos alterou o numero de cruzamentos no teste do campo aberto (TCA), demonstrando que a atividade locomotora dos camundongos nao foi afetada; e) o tratamento agudo com TNF-a ou a-tocoferol nao alterou os niveis hipocampais de Bax e Bcl2 ou a fosforilacao de GSK-3B. Em conjunto, os resultados sugerem um efeito tipo antidepressivo sinergico do a-tocoferol com antidepressivos em um modelo de comportamento tipo depressivo induzido por um insulto inflamatorio, sugerindo que esta vitamina e uma canditada para otimizar a farmacoterapia convencional da depressao.<br> / Abstract : Vitamin E has various functions in humans, including antioxidant and anti-inflammatory actions, besides being an important nutrient for the central nervous system (CNS). The role of this vitamin in the prevention and/or treatment of some neurological diseases has been suggested by several preclinical and clinical studies. Furthermore, the involvement of vitamin E in the modulation of depression, a prevalent neuropsychiatric disease in the occidental world, is an issue that has been emerging in recent studies. Many factors have been implicated in the pathophysiology of depression, including inflammation and neuronal apoptosis. Thus, the aim of this study was to investigate the antidepressant effect of á-tocopherol, one of the most abundant forms of vitamin E, in an animal model of depressive behavior induced by the inflammatory cytokine tumor necrosis factor-á (TNF-á), and to evaluate the possible synergistic effect of á-tocopherol with antidepressants (fluoxetine, bupropion and imipramine), and the involvement of N-methyl-D-aspartate (NMDA)-receptor and the neuronal nitric oxide synthase (nNOS). Furthermore, it was investigated whether TNF-á and/or á-tocopherol might influence the expression of proteins involved in apoptosis (Bax, Bcl2) and glycogen synthase kinase-3â (GSK-3â) phosphorylation, in the hippocampus of mice. The results showed that: a) TNF-á administered acutely (0.001 fg/site, i.c.v.) increases the immobility time in the tail suspension test (TST); b) Acute administration of different doses of á-tocopherol (10, 30 and 100 mg/kg; p.o.) prevented the behavioral effect induced by TNF-á; c) sub-effective dose of á-tocopherol (10 mg/kg, p.o.) and/or sub-effectives doses of fluoxetine (5 mg/kg, p.o.; selective serotonin reuptake inhibitor), imipramine (0.1 mg/kg, p.o.; tricyclic antidepressant), bupropion (1 mg/kg, p.o.; dopamine and norepinephrine reuptake inhibitor), MK-801 (0.001 mg/kg, p.o.; NMDA receptor antagonist) or 7-nitroindazole (25 mg/kg, i.p.; nNOS inhibitor) prevented the depressive-like effect induced by TNF-á; d) none of the treatments altered the number of crossings in the open field test, demonstrating that the locomotor activity of mice was not affected, e) acute treatment with TNF-á and/or á-tocopherol did not alter the levels of Bax and Bcl2 or the phosphorylation of GSK-3â. Together, our results show a synergistic antidepressant-like effect of á-tocopherol with antidepressants against the depressive-like behavior induced by an inflammatory insult, suggesting that this vitamin may be interesting to optimize conventional pharmacotherapy of depression.

Dissertação (mestrado) - Universidade Federal de Santa Catarina, Centro de Ciências Biológicas, Programa de Pós-Graduação em Farmacologia, Florianópolis, 2013. / Made available in DSpace on 2013-12-05T23:38:43Z (GMT). No. of bitstreams: 1 320469.pdf: 1539301 bytes, checksum: 495962461e1ce4deb22d4971d767008a (MD5) Previous issue date: 2013 / O enfrentamento comportamental é definido como a estratégia utilizada para reduzir o impacto negativo do estresse sobre o bem estar de um indivíduo. O desenvolvimento de estratégias bem sucedidas para a redução ou eliminação do evento estressante depende de fatores como experiência prévia, processos mediadores, variabilidade individual e previsibilidade. Assim, comportamentos adotados frente a eventos estressantes revelam processos associativos de aprendizado, vulnerabilidade ao ambiente, flexibilidade comportamental e tomada de decisões. Os estudos sobre as estratégias de enfrentamento desenvolvidas por animais de laboratório, visando a resolução de eventos aversivos, favorecem a análise das variações individuais presentes em um grupo, caracterizando padrões comportamentais reconhecíveis. O modelo de condicionamento olfatório aversivo, padronizado por nosso grupo, é muito utilizado para o estudo das memórias aversivas, uma vez que o paradigma envolve processos cognitivos e emocionais. O condicionamento ocorre através da associação entre um estímulo incondicionado e um estímulo olfatório neutro que, após alguns pareamentos, adquire a capacidade de evocar respostas defensivas que tipicamente são expressas na presença de perigo. Como os animais são expostos a situações aversivas tanto para a aquisição do condicionamento quanto para a expressão das respostas defensivas, o modelo se apresenta como uma excelente ferramenta para o entendimento das definições de estratégias comportamentais adotadas. Portanto, o objetivo do presente estudo foi analisar as estratégias de enfrentamento desenvolvidas pelos animais em situações estressantes confrontadas no modelo de condicionamento olfatório aversivo. Para este propósito, a análise dos comportamentos exibidos pelos animais foi ampliada, de acordo com as condições experimentais do laboratório. Em seguida, a análise do novo conjunto de estratégias comportamentais foi realizada em grupos submetidos às condições experimentais Pareado e Não Pareado durante três sessões de teste do protocolo experimental, bem como em grupos tratados com o benzodiazepínico midazolam, administrado antes ou imediatamente após a aquisição do condicionamento, e antes da expressão das respostas defensivas. Os resultados demonstraram que o perfil comportamental analisado nas três sessões de teste apresenta diferenças claras entre as sessões, já que os animais foram capazes de desenvolver uma estratégia de enfrentamento ao ambiente, modificando-a sempre que novos estímulos estressantes foram confrontados. Também, o aparecimento de comportamentos como agachar-cheirar, agachar, head-out e stretch-attend se mostrou característico na expressão de comportamentos de defesa no modelo proposto, quando os animais foram expostos ao odor condicionado. Esses resultados levaram a conclusão de que o condicionamento olfatório aversivo é um modelo capaz de avaliar as estratégias comportamentais de enfrentamento em situações estressantes, bem como caracterizar comportamentos defensivos específicos capazes de aprimorar a análise já executada. Os resultados também demonstraram que a estratégia de enfrentamento comportamental pode ser afetada, de acordo com a condição experimental e/ ou tratamento farmacológico utilizado. <br>

Dissertação (mestrado) - Universidade Federal de Santa Catarina, Centro de Ciências Biológicas, Programa de Pós-Graduação em Biologia Celular e do Desenvolvimento, Florianópolis, 2015. / Made available in DSpace on 2016-10-19T12:52:41Z (GMT). No. of bitstreams: 1 337731.pdf: 898021 bytes, checksum: fa1c709f8c1a2c8ea3ab0c7d65f61457 (MD5) Previous issue date: 2015 / Existem evidências dos efeitos benéficos do exercício físico, tanto nos humanos como nos animais experimentais, que podem ser dependentes do nível de emocionalidade de cada um dos indivíduos. A literatura especializada também relata efeitos contraditórios associados a diferentes protocolos de exercício físico e efeitos dependentes do genótipo. Os ratos das linhagens isogênicas Lewis (LEW) e SHR (Spontaneously Hypertensive Rats) diferem em uma série de aspectos comportamentais, incluindo a ansiedade/emocionalidade. Então, nós realizamos um estudo com o objetivo de observar os efeitos do exercício físico forçado (EFF; em esteira) e voluntário (EFV; em rodinhas de correr) nos comportamentos relacionados à ansiedade/emocionalidade exibidos pelos ratos LEW e SHR no teste do campo aberto (CA) e labirinto em cruz elevado (LCE). No EFF, apenas 20% dos animais da linhagem LEW e 63% dos animais SHR completaram o treinamento. Nestes animais, nós observamos um aumento significativo de locomoção no teste do CA e um aumento de locomoção central no CA e entradas nos braços abertos do LCE. Isso sugere um aumento de atividade locomotora e uma diminuição de ansiedade/emocionalidade, nos animais das duas linhagens, após o treinamento. O EFV parece diminuir os índices de ansiedade/emocionalidade, porém apenas na linhagem SHR e no teste do CA. Entretanto, a distância total percorrida pela linhagem SHR, nas rodinhas de correr, foi significativamente maior que a percorrida pela LEW. O pré-tratamento com a talidomida, melhorou a resistência física da linhagem LEW fazendo com que 100% dos animais LEW completassem o protocolo de EFF, diminuiu o número de retrocessos na esteira, mas não afetou as medidas de ansiedade/emocionalidade. Assim, nós podemos concluir que os animais das duas linhagens exercitados em um protocolo de EFF apresentam redução de ansiedade/emocionalidade e aumento de locomoção. Também, a linhagem SHR parece ser composta de animais que correm voluntariamente, ao contrário da LEW, mas este tipo de exercício físico (EFV) não gerou alteração comportamental visível. Por fim, a talidomida parece ter aumentado a capacidade dos animais LEW em suportar todo o período de EFF em esteira, mas não causou alterações na ansiedade/emocionalidade nestes animais.<br> / Abstract : There is evidence of the beneficial effects of physical exercise, both in humans and in experimental animals that can be dependent on the level of emotionality of each individual. The literature also reports negative effects associated with different exercise protocols and genotype-related effects. Lewis (LEW) and SHR (Spontaneously Hypertensive Rats) inbred rat strains differ in a number of behavioral aspects, including anxiety/emotionality. So we carried out a study in order to observe the effects of forced (FPE; treadmill) and voluntary (VPE; on running wheels) physical exercise on the behaviors related to anxiety/emotionality exhibited by LEW and SHR rats in the open field (CA) and elevated plus maze (EPM) test. In the FPE, only 20% of the animals of the LEW strain and 63% of SHR animals completed the training. In these animals, we observed a significant increase in total and central locomotion in CA and entries into the open arms of the EPM, which suggests an increase in locomotor activity and a decrease in anxiety/emotionality in these two strains, after training. In the VPE, the results showed decreased anxiety/emotionality but only in SHR rats tested in the CA. However, the total distance traveled by the SHR, on running wheels, was significantly higher than that from LEW counterparts. Pre-treatment with thalidomide improved physical strength of the LEW strain. It made 100% of the animals LEW fulfilled the FPE protocol and diminish the number of setbacks in the treadmill, but did not affect measures of anxiety/emotionality. Thus, we can conclude that animals of both strains exercised in an FPE protocol have reduced anxiety/emotionality and increased locomotion. Also, the SHR strain seems to be composed of animals that voluntarily run, unlike LEW, but this type of exercise yielded no visible behavioral changes. Finally, the thalidomide appears to have increased physical capacity of LEW in the FPE, but did not cause changes in anxiety/emotionality in these animals.

Tese (doutorado) - Universidade Federal de Santa Catarina, Centro de Ciências Biológicas. Programa de Pós-Graduação em Farmacologia. / Made available in DSpace on 2012-10-21T14:20:37Z (GMT). No. of bitstreams: 1 207434.pdf: 549000 bytes, checksum: 1b8bfb8bb1089351f2e5ac7abd155919 (MD5) / Este trabalho demonstrou que a contração induzida pela BK na íris isolada de porco é mediada pelos receptores B2, com liberação neuronal de ACh, noradrenalina, neuropeptídeos e derivados do ácido araquidônico, através das vias das COX-1, COX-2, LOX e TXA2. Além disso, demonstrou o envolvimento do influxo de cálcio do meio extracelular, através dos canais de cálcio do tipo L, N e P, bem como a possível participação das PKA e PKC mediando as ações da BK na íris. Os estudos também mostram que os receptores B1 não são constitutivos nessa preparação, no entanto, após 4 h de incubação com LPS, ocorre a ativação dos receptores B1, por meio de mecanismos dependentes da síntese protéica e de fatores de transcrição, como o NF-kB. A via das MAPKs, especialmente MEK-1, p38-MAPK e fosfatidilinositol 3-quinase, além de estarem envolvidas na indução dos receptores B1, também participam dos mecanismos que regulam as ações do receptor B1 após a indução com LPS. Além disso, confirma-se a participação das MEK-1 e p38-MAPK por meio dos estudos de biologia molecular. Por outro lado, demonstra-se que os neuropeptídeos como o NK1, NK2, NK3 e CGRP não participam das respostas contráteis induzidas pela des-Arg9-BK nessa preparação. Todavia, apresentam dependência significativa do cálcio extracelular, através dos canais de cálcio do tipo L e não do tipo N. Os resultados contribuem para melhor compreensão de alguns dos mecanismos envolvidos na regulação dos receptores de cininas B1 e B2 na íris isolada de porco. Além disso, geram subsídios para o melhor entendimento dos processos inflamatórios e dolorosos, como também para o desenvolvimento futuro de terapias antiinflamatórias e analgésicas.

Made available in DSpace on 2014-06-11T19:31:10Z (GMT). No. of bitstreams: 0 Previous issue date: 2012-08-10Bitstream added on 2014-06-13T18:41:53Z : No. of bitstreams: 1 tranquilim_mv_dr_botfmvz_parcial.pdf: 77099 bytes, checksum: 4e1043cfff5e2929639a4964f3d22f97 (MD5) Bitstreams deleted on 2014-08-22T14:57:01Z: tranquilim_mv_dr_botfmvz_parcial.pdf,Bitstream added on 2014-08-22T15:02:06Z : No. of bitstreams: 1 000695803.pdf: 984235 bytes, checksum: f35e20c1dbe65bfcbbb52a2625aa5e6c (MD5) / Universidade Estadual Paulista (UNESP) / A presente pesquisa foi realizada com o objetivo de desenvolver e adaptar técnicas diagnósticas em neurologia para primatas não humanos, da espécie Alouatta guariba (bugio-ruivo) saudáveis e mantidos em cativeiro. Foram realizadas análises físico-químicas em fluido cerebroespinhal, medição da pressão liquórica na cisterna magna, tomografia computadorizada de crânio e encéfalo, angiotomografia contrastada e reconstrução em três dimensões das imagens. Utilizou-se oito animais para as análises do fluído cerebroespinhal e cinco animais para as imagens tomográficas. Em todos os procedimentos, utilizou-se contenção química e anestesia com associação de cetamina, xilazina e midazolam e anestesia inalatória com isoflurano para realização dos exames. Os resultados das análises do fluído cerebroespinhal demonstraram os seguintes valores médios de: proteína (14,343 mg/dL ± 9,2), glicorraquia (131,25 mg/dL ± 106,7), pH (8,4 ± 0,7), células nucleadas (0,5/mL ± 0,7559), hemácias (49,374/mL ± 111,76) e pressão liquórica cisternal de 7,375 cm H2O ± 1,767. A tomografia computadorizada de crânio e encéfalo não permitiu a visualização de muitas estruturas encefálicas, sendo possível a medição dos valores de atenuação dos ossos frontal, parietal e temporal, e dos córtex frontal e parietal encefálicos. Nas imagens em 3D obtidas na angiotomografia contrastada, observaram-se importantes seios venosos, não sendo observadas artérias. O trabalho demonstrou a segurança e eficácia da colheita de fluído cerebroespinhal de Alouatta guariba, e seus valores. Além disso, concluiu-se que a tomografia computadorizada não permite uma visualização de estruturas encefálicas nesta espécie animal, e que as imagens em 3D dos vasos encefálicos pode ser uma importante ferramenta diagnóstica e de auxílio terapêutico / This survey was conducted with the objective of developing and adapting diagnostic techniques in neurology for non-human primates, of the species Alouatta guariba (howler monkey) healthy and kept in captivity. Physicalchemical analyses were carried out in cerebrospinal fluid and its pressure measurement in the cisterna magna. Also was made a computed tomography of skull and brain, and a contrasted angiotomography reconstruction in three dimensions images. The eight animals were used for the analysis of cerebrospinal fluid and five animals for tomographic images. In all procedures, were used chemical restraint and anesthesia with ketamine, xylazine and association of midazolam and inhalational anesthesia with isoflurane for carrying out the examinations. The results of the analysis of cerebrospinal fluid showed average values: protein (14.343 mg/dL ± 9.2), glucose (131.25 mg/dL ± 106.7), pH (0.7 ± 8.4), nucleated cells (0.5/mL ± 0.7559), red blood cells (49.374/mL ± 111.76) and CSF cisternal pressure 7.375 cm H2O ± 1.767. Computed tomography of skull and brain did not allow the viewing of many brain structures, however, was possible the measurement of the attenuation values of frontal parietal and temporal bones, and the frontal cortex and parietal brain. In 3D images obtained in contrasted angiotomography, was observed the venous sinuses, but not the arteries. This work demonstrated the safety and efficacy of cerebrospinal fluid collection of Alouatta guariba, and their values. In addition, it was concluded that CT does not allow a preview of intracranial structures in this animal species, and that the images in 3D brain vessel can be an important tool

Made available in DSpace on 2014-11-10T11:09:40Z (GMT). No. of bitstreams: 0 Previous issue date: 2014-02-07Bitstream added on 2014-11-10T11:58:48Z : No. of bitstreams: 1 000788566.pdf: 21022540 bytes, checksum: d6b25eb7f401d2f54ea65ced1d872cd6 (MD5) / Fundação de Amparo à Pesquisa do Estado de São Paulo (FAPESP) / Coordenação de Aperfeiçoamento de Pessoal de Nível Superior (CAPES) / Devido à falta de conhecimento estatístico, muitos pesquisadores utilizam métodos empíricos ou subjetivos para a tomada de decisão, ignorando o processo de casualização e, consequentemente, influenciando seus resultados, nomeadamente no processo de homogeneização de amostras, imprescindível para a randomização em pesquisas que envolvem animais como unidade experimental. esse processo, tem-se o hábito errôneo de fazê-lo de maneira fragmentada ou intencional, utilizando-se de apenas um parâmetro conveniente para classificar o grupo como homogêneo. Fato que, além de resultar numa homogeneização viesada e inadequada, favorece a possibilidade de descartar animais por um simples valor espúrio do que por semelhança ou dessemelhança biológica. Tendo em vista essa problemática, este trabalho sugere um critério estatístico multivariado elaborado com a finalidade de rescindir o paradigma biológico que avalia o animal (unidade experimental) de maneira fragmentada. Nesse critério, considera-se a situação biológica do animal como um todo, já que o organismo reage de maneira conjunta a qualquer intervenção ou tratamento, ou seja, analisam-se conjuntamente todos os parâmetros do animal, pois estes são correlacionados, e a melhor forma de entender o comportamento animal está expressa em um conjunto de informações numéricas que represente suas características biológicas. Esse modelo foi aplicado a um conjunto de dados de animais induzidos à estenose aórtica que possibilitou a identificação de seis espúrios ao grupo. Sua importante contribuição explica-se pelo melho!amento na qualidade de homogeneização e por assegurar com máxima acurácia a inclusão de animais semelhantes e pequena frequência de descartes, motivando maximizar o lote homogêneo para posterior submissão ao delineamento experimental por processo simples de casualização dos tratamentos. / Due to lack of statistical knowledge, many researchers use empirical or subjective methods to make a decision, ignoring the randomization process and thus influencing its results, particularly in the process of samples homogenization, essential for randomization in research involving animals as experimental unit. In this process, researchers have the erroneous habit of doing it in a fragmented or intentional manner, using only one convenient parameter to classify the group as homogeneous. Fact that besides resulting in inadequate homogenization, favors the possibility of discarding animals by simple spurious value than by bialogical similarity or dissimilarity. Considering this problem, this work suggests a multivariate statistical criterion of high accuracy developed in order to rescind the biological paradigm that evaluates the animal (experimental unit) in a fragmented manner. In this criterion, it is considered the animal biological condition as a whole, since the body reacts conjointly to any intervention ar treatment, in other words, all the parameters of the animal are analyzed together, as they are correlated, and the best way to understand animal behavior is expressed in a set of numerical information that faithfully represents its biological characteristics. This model was applied to a data set of animais with aortic stenosis and allowed the identification of six animais spurious to the group. It's remarkable contribution is explained by the improvement in the quality of homogenization and by ensuring with maximum accuracy the inclusion of similar animais and small frequency discards, motivating to maximize the homogeneous batch for subsequent submission to the experimental design by simple randomization process of the treatments. / FAPESP: 12/11976-6