Orientador: Edésio Luiz Simionatto. / Dissertação (Mestrado em Química) - Programa de Pós-Graduação em Química, Centro de Ciências Exatas e Naturais, Universidade Regional de Blumenau, Blumenau.

A importância terapêutica e os resultados promissores apresentados pelos antineoplásicos são inquestionáveis, porém a ampla e crescente utilização desses fármacos, em terapia combinada entre duas ou mais destas substâncias químicas, é considerada um importante risco químico para os profissionais expostos. São recomendadas várias medidas, dentre elas a monitorização, visando a proteção à saúde dos trabalhadores e o controle da exposição. Nesse contexto, é de suma importância o desenvolvimento de métodos capazes de identificar e /ou quantificar os fármacos simultaneamente. Assim, este trabalho teve como objetivo desenvolver métodos analíticos para determinação simultânea de antineoplásicos em superfícies e luvas, uma vez que a via dérmica é a principal para a absorção dessas substâncias. Após vários testes, as condições otimizadas para o método de determinação de CF (ciclofosfamida), doxorrubicina (DOX), 5-FU (5-fluoruracila), IFO (ifosfamida) e MTX (metotrexato), em superfícies, utilizando a cromatografia líquida de alta eficiência (CLAE) foram: detecção a 195 nm (UV); coluna C18 (250 x 4,5 mm, 5 μm) com pré-coluna similar; fase móvel constituída de água pH 4,0: metanol: acetonitrila (70:13:17, v/v/v) com vazão de 0,4 mL min-1 até 13 minutos e, 1 mL min-1 até o final da corrida; solução de acetonitrila: metanol (50:50, v/v), como líquido de limpeza das superfícies de trabalho, sem extração prévia. Esse método demonstrou-se linear para a 5-FU e MTX, no intervalo de 0,25 a 20 μg mL-1 e, para DOX, CF e IFO, de 0,5 a 20 μg mL-1, com coeficientes de correlação linear superiores a 0,99. A recuperação obtida foi em torno de 74 a 106% e o coeficiente de variação foi inferior a 11%, na avaliação da repetibilidade. Para o método cromatográfico de determinação em luvas, as condições otimizadas foram, para os analitos 5-FU, MTX e paclitaxel (PAC): detecção em DAD (detector por arranjo de diodos) e quantificação em UV, sendo 195 nm, 265 nm e 302 nm, os comprimentos de onda utilizados para o PAC, 5-FU e MTX, respectivamente; coluna C18 (250 x 4,5 mm, 5 μM) com pré-coluna similar; fase móvel constituída de água pH 4,0: metanol: acetonitrila (35:15:50, v/v/v), com vazão de 1 mL min-1. Recuperação satisfatória foi obtida, para os analitos 5-FU e PAC, quando a amostra foi submetida à ELL, com acetato de etila e, para o MTX, quando submetida ao procedimento de extração em fase sólida (SPE), utilizando-se sílica modificada com C18 e eluição com metanol. O método demonstrou-se linear no intervalo de 0,25 a 20 μg mL-1, com coeficientes de correlação linear superiores a 0,99. A eficiência da extração foi em torno de 71 a 115% e a repetibilidade foi inferior a 15%. O método revelou-se eficiente na quantificação de amostras com concentração igual ou superior a 0,25 μg mL-1 e, na detecção daquelas com valores abaixo do LQ, através da utilização do DAD. Os resultados sugerem que os métodos podem ser utilizados na determinação simultânea de antineoplásicos, nas matrizes estudadas, e constituem ferramentas úteis na monitorização da exposição ocupacional à tais substâncias. / Therapeutic importance and benefits obtained from antineoplastic drugs are unquestionable. However, their side effects are not well-known and extensive use and exposure to multiple agents may put health care workers involved in the preparation and administration of these drugs at risk. Therefore, it is important to have accurate methods for simultaneous analysis and evaluation of the occupational exposure. The aim of this study was to develop methods for simultaneous determination of antineoplastics in surfaces and gloves since, in the occupational exposure, the main contamination route is dermal contact, which may occur by prolonged contact with contaminated surfaces or instruments/materials. The assay was performed by High Performance Liquid Chromatography (HPLC) and the optimized conditions for 5-fluorouracil (5-FU), methotrexate (MTX), doxorrubicin (DOX), cyclophosphamide (CP) and ifosfamide (IFO), in surface samples, were: detection in 195 nm, C18 column (5 μm, 250 x 4 mm) with a similar guard column; mobile phase was constituted by water, pH 4: methanol: acetonitrile (70:13:17, v/v/v) with a flow of 0.4 mL min-1 up to 13 minutes and after this 1 mL min-1 and cleaning of surfaces with acetonitrile: methanol (50:50), without previous extraction. The method presented a linear calibration range from 0.25 to 20 μg mL-1 for 5-FU and MTX and from 0.5 to 20 μg mL-1 for IFO, DOX and CP with determination coefficients (r2) higher than 0.99. The repeatability, expressed in terms of percent relative standard deviation was 11% and extraction efficiency ranged from 74 to 106%. Optimized conditions for 5-FU, MTX and paclitaxel (PAC), in gloves, were: diode array (DAD) detection and UV quantification in 195 nm to PAC, 265 nm to 5-FU and 302 nm to MTX; C18 column (5 μm, 250 x 4 mm) with a similar guard column; mobile phase was constituted by water, pH 4: methanol: acetonitrile (35:15:50, v/v/v) with a flow of 1 mL min-1. The method presented a linear calibration range from 0.25 to 20 μg mL-1 with determination coefficients (r2) higher than 0.99. Extraction efficiency was between 71 to 115% and repeatability, expressed in terms of percent relative standard deviation was 15% and satisfactory extraction efficiency was obtained when liquid extraction, with ethyl acetate, was used for 5-FU and PAC and solid phase, with C18 cartridges and elution with methanol, for MTX. DAD detector allowed drugs detection at concentration below 0.25 μg mL-1, in glove samples. The results obtained suggest that the developed methods can be applied for simultaneous determination of the drugs studied and are considered useful in exposure assessment for health care workers. / Coordenação de Aperfeiçoamento de Pessoal de Nível Superior - CAPES

Orientador: Douglas Soares Galvão / Tese (doutorado) - Universidade Estadual de Campinas, Instituto de Fisica Gleb Wataghin / Made available in DSpace on 2018-09-11T20:51:08Z (GMT). No. of bitstreams: 1 Barone_PauloMonteiroVieiraBraga_D.pdf: 1587481 bytes, checksum: cafea1db3503e2f14be02c7d3b302052 (MD5) Previous issue date: 1996 / Resumo: O termo câncer é aplicado a um grupo de doenças de organismos multicelulares, caracterizadas pela multiplicação das células de forma aparentemente descontrolada, que pode levar à formação e ao crescimento de tumores. A principal causa do câncer é a exposição a agentes químicos, chamados carcinogênicos. 0s primeiros com postos carcinogênicos identificados foram os Hidrocarbonetos Aromáticos Policíclicos, que estão entre os mais potentes carcinogênicos conhecidos. Neste trabalho, estudamos a relação entre topologia molecular/estrutura eletrônica e atividade carcinogênica de uma família de Hidrocarbonetos Aromáticos Policíclicos, por meio do método de Huckel simplificado e dos métodos semi-empíricos PM3 e ZINDO/CI. Desenvolvemos critérios, baseados em indicadores eletrônicos das moléculas, capazes de identificar entre os Hidrocarbonetos Aromáticos Policíclicos quais têm atividade carcinogênica. Mostramos, comparando diferentes métodos, que esses critérios são essencialmente determinados pela topologia das moléculas, e que a atividade carcinogênica está relacionada com a diferença em energia entre o orbital ocupado de mais alta energia e os demais orbitais ocupados. Abordamos também o problema correlato da obtenção de relações estrutura-atividade para uma família de drogas antitumorais, a elipticina e seus derivados. Utilizando os métodos semi-empíricos PM3 e ZINDO/CI, confirmamos a correlação entre o momento de dipolo dessas moléculas e sua atividade antitumoral, já obtida anteriormente por meio de outros métodos semi-empíricos / Abstract: The term cancer is applied to a group of diseases of multicellular organisms characterized by the abnormal cell pro1iferation in an uncontrolled way. The main cause of cancer is the exposition to chemical compounds, called carcinogens. The Polycyclic Aromatic Hydrocarbons were the first compounds to be recognized as chemical carcinogens, and are among the most active known carcinogens. In this work we study the relationship between the carcinogenic activity and the molecular topology and electronic structure of a family of Polycyclic Aromatic Hydrocarbons by means of the simple Huckel method and the semiempirical methods PM3 e ZINDO/CI. We develop simple rules, based on electronic indices of the molecules, in order to identify carcinogenic activity in Polycyclic Aromatic Hydrocarbons. We show through the comparison between different methods that these rules are essentially determined by the molecular topology , and that the carcinogenic activity is related to the energy difference between the highest occupied molecular orbital and the other occupied orbitals. We also study the similar problem of structure-activity relationship for a family of antitumor drugs, the ellipticine and their derivatives. We confirm, using the semiempirical methods PM3 and ZINDO/CI, the correlation between the dipole moment and the activity of theses molecules which was obtained before by means of other semiempirical methods / Doutorado / Física / Doutor em Ciências

Doctor en Ciencias Biomédicas / Melanoma es la neoplasia cutánea más agresiva, con una incidencia ascendente a pesar de numerosos esfuerzos de prevención. En la actualidad existen diversas estrategias de tratamiento, sin embargo, no todos los pacientes responden a ellas. En nuestro laboratorio se ha ensayado una inmunoterapia basada en células dendríticas (DCs) maduradas con un lisado de líneas celulares de melanoma (TRIMEL), que ha incrementado hasta 3 veces la sobrevida en pacientes que desarrollan una respuesta inmunológica de hipersensibilidad retardada (DTH+). Hasta la fecha no se han desarrollado avances en el estudio de la fracción no peptídica de este lisado ni de su capacidad de activar células iNKT, capaces de reconocer antígenos glicolipídicas en contexto CD1d. Hipótesis: Células iNKT infiltran tumores de pacientes con melanoma avanzado y son capaces de ser activadas in vitro por células dendríticas utilizadas en inmunoterapia antitumoral. Objetivo General: Determinar el rol en pacientes con melanoma de células iNKT infiltrantes de tumor y activadas por células dendríticas maduradas ex vivo utilizadas en inmunoterapia antimelanoma. Métodos: Se determinaron células iNKT infiltrantes de tumor mediante inmunofluorescencia y se correlacionó su presencia en lesiones de melanoma primario en todos los estadios según Breslow con la sobrevida de la enfermedad. Se evaluó la capacidad de las fracciones glicolipídica y proteica de TRIMEL para inducir maduración en células dendríticas. Para este fin, las fracciones se obtuvieron mediante gradiente de densidad con MTBE (Metil-terbutil-éter) y se usaron para estimular DCs generadas en base a rhIL-4 y GM-CSF. En estas condiciones se evaluó la presencia de diversas moléculas de superficie y la producción de citoquinas. Para evaluar la capacidad de estas DCs de activar células iNKT, desde PBMC se aisló la población CD3+ mediante cell-sorting y cultivadas con distintas DCs generadas. Se analizó la proliferación celular utilizando el ensayo CFSE. También se evaluó la presencia de células iNKT mediante inmunofluorescencia en tacos de parafina de las DTH realizadas a pacientes de inmunoterapia. Resultados: Encontramos infiltración por células iNKT en todos los estadíos de la enfermedad, siendo mayor en Breslow avanzados, sin una correlación con la sobrevida global. Al evaluar la maduración de DCs, esta fue mayor en el grupo estimulada con la fracción peptídica de TRIMEL. DCs estimuladas con la fracción glicolipídica de TRIMEL no mostraron diferencias con la condición no tratada. Al evaluar mediante ensayo de proliferación realizado con CFSE, se evidenció mayor proliferación en la condición tratada con la fracción peptídica. Finalmente, sólo en 1 de 3 pacientes en los que se analizó la presencia de iNKT en las DTH se encontraron estas células. Conclusiones: unificando todos los hallazgos discutidos previamente, células iNKT infiltran tumores de melanoma, las que podrían ser inducidas a proliferar por DCs estimuladas con la fracción peptídica de TRIMEL y de esa forma migrar a sitios inflamados como representan las lesiones DTH. / Melanoma is the most aggressive skin tumor, with a growing incidence worldwide, despite of prevention strategies. Nowadays, there are several new therapies to treat it, however the overall survival continues to be low. Our lab has been studying a Dendritic Cell (DC) based immunotherapy maturated with a melanoma cell lines lysate (TRIMEL), which has increased survival up to 3 times in patients that developed a delayed type hypersensitivity response (DTH+). To this date no studies have been made regarding the non peptidic fraction of this lysate or its capability to activate a subpopulation of T Cells called iNKT cells, characterized by their ability to recognize glycolipids in a CD1d manner. Hypothesis: iNKT Cells infiltrate melanoma patient’s tumors and are capable to be activated in vitro by Dendritic cells Main Objective: To determinate the role of tumor infiltrating iNKT cells activated by matured Dendritic Cells ex vivo used in antimelanoma immunotherapy in melanoma patients Methods: The presence of tumor infiltrating iNKT Cells in primary melanoma in all of Breslow stages was evaluated by expression of TCR Vα24Jα18 by Immunofluorescence microscopy. To evaluate the capability of glycolipid and peptidic TRIMEL fraction to induce DCs maturation, they were isolated from TRIMEL using a MTBE (Metil-terbutil-ether) density gradient. Afterwards, these fractions were used to stimulate DCs generated with a rhIL-4 and GM-CSF protocol and surface molecules expression were assessed, as well as cytokine secretion. To evaluate DCs effectiveness to activate iNKT Cells’ proliferation, CD3+ population was isolated from Buffy Coats using cell-sorting technology and they were cultured with DCs. Proliferation was accessed with CFSE dye assay. Finally, DTH infiltrating iNKT cells were asessed in paraffined embedded samples by immunofluorescence microscopy. Results: We found that iNKT cells infiltrated melanoma tumors in every Breslow stage, with higher infiltration on advanced stages,with no correlation with overall survival. The peptidic fraction of TRIMEL induced higher expression of maturation related surface molecules in addition to cytokine secretion, whereas glycolipidic fraction showed no difference with the untreated condition. iNKT cell had a higher proliferation rate when cultured with DCs treated with the peptidic fraction of TRIMEL. And finally, we found the infiltration of iNKT in 1 of the 3 patients DTH. Conclusions: Taking together all the previous results, iNKT cells infiltrate melanoma Tumors, and they could be induced to proliferate by DCs stimulated with the peptidic fraction of TRIMEL and as well supporting their migration to inflamed tissues like the DTH samples. / 2021

Made available in DSpace on 2013-08-07T19:05:17Z (GMT). No. of bitstreams: 1 000439149-Texto+Completo-0.pdf: 1490829 bytes, checksum: bd616615ee5265db0a960d6f77c8581d (MD5) Previous issue date: 2012 / Glioblastoma multiforme (GMB) is the most malignant and common type of all astrocytic tumours. Current standard treatment for GBM patients involves maximum surgical resection of the tumour, followed by radiotherapy and chemotherapy, usually containing the alkylating agent Temozolomide (TMZ). Despite this aggressive combination therapy, the survival rate of GBM patients is still low. This work consisted in investigating the cytotoxic effects of Akt-inhibition by MK-2206 with irradiation (RT) and TMZ on in vitro human malignant glioma. Seven malignant glioma cell lines were cultured and tested for clonogenic survival, invasion inhibition, tumour spheroid growth and proliferation. The Akt-inhibitor MK-2206 and TMZ were added at different time treatments and in varying doses. Cultures were irradiated with single dose and with fractionated γ-irradiation. Cellular modulation of Akt and p-Akt were assessed by Western blot analysis. MK-2206 reduced the levels of phospho- Akt key protein in the PI3Kinase-Akt pathway, decreased cell survival, and inhibited invasion, proliferation and cell growth. The combination of MK-2206 and RT lead to enhanced inhibition of cell proliferation and invasion, which is not observed with RT alone. The radioenhancing effect of MK-2206 was most striking in inhibition of spheroid volume growth by fractionated RT; the radiosensitizing effect of MK-2206 was stronger than that of TMZ. MK-2206 enhanced the in vitro effects of RT and TMZ in terms of decreased cell survival, invasion, proliferation and growth in malignant glioma. Effects could be ascribed to inhibition of PI3K-Akt pathway. / O Glioblastoma multiforme (GBM) é o tipo mais maligno e mais comum de todos tumores astrocíticos. O tratamento atual para pacientes de GBM envolve máxima remoção cirúrgica, seguida de radio e quimioterapia, normalmente com o agente alquilante Temozolamida (TMZ). Apesar da agressividade da terapia combinada, o tempo de sobrevivência dos pacientes ainda é baixo. Este trabalho procurou investigar os efeitos citotóxicos do inibidor de Akt MK-2206 em combinação com irradiação (RT) e TMZ em um painel de células de gliomas humanos. Sete linhagens de glioma foram cultivadas e testadas em ensaio de sobrevivência clonogênica, inibição de invasão, e modelos de proliferação e crescimento de volume em esferóides. O inibidor MK-2206 e TMZ foram adicionados em diferentes tempos de tratamento e diferentes doses. As culturas foram irradiadas com doses únicas ou em terapias fracionadas com irradiação γ. A modulação celular de Akt e fosfo-Akt foi checada via Western Blot. O composto MK-2206 reduziu a fosforilação da proteína chave Akt na via PI3K, diminuindo a sobrevivência celular e inibindo invasão, proliferação e crescimento celular. A combinação de MK-2206 com RT levou a uma maior inibição de invasão e proliferação, o que não é observado somente com a RT. O efeito radiosensível de MK-2206 foi ainda maior na inibição do volume dos esferóides em terapia combinada com RT fracionada, sendo ainda maior do que o efeito combinado com TMZ. MK-2206 aumentou os efeitos in vitro de RT e TMZ em termos de redução de sobrevivência celular, invasão, proliferação e crescimento celular em gliomas malignos. Os efeitos podem ser atribuídos a inibição da via PI3KAkt.

O objetivo geral desta pesquisa foi estudar os efeitos neurocomportamentais associados à administração de agentes antineoplásicos. Mais especificamente, investigamos os possíveis efeitos da cisplatina sobre a memória aversiva em ratos, medidos através das tarefas da esquiva inibitória. Diversos estudos associam à ação dos quimioterápicos as disfunções cognitivas constatadas em pacientes submetidos a tratamentos antineoplásicos. Cogita-se que eles teriam a capacidade de ultrapassar a barreira hematoencefálica e estariam relacionados ao aumento do estresse oxidativo e dos níveis de citocinas. Além disso, fatores como deficiências no reparo do DNA, encurtamento dos telômeros, disfunções nos mecanismos de restauração neural e de liberação de neurotransmissores e a diminuição nos níveis de estrógeno e testosterona podem potencializar seus efeitos sobre a cognição. Em modelos animais, embora não haja unanimidade, há a indicação da existência de efeitos cognitivos, que aparecem na maioria das vezes em curto prazo e são reversíveis, e que variam de acordo com a dose utilizada. Além disso, os estudos começam a indicar que os quimioterápicos agem sobre funções cognitivas específicas. Em relação à cisplatina, estudos neurofisiológicos sugerem que ela pode influenciar a nocicepção, aumentar a excitabilidade dos neurônios de ampla faixa dinâmica da medula espinhal, diminuir a condução nervosa e afetar os neurônios do gânglio da raiz dorsal. No experimento realizado, foram administradas três doses de cisplatina (0,1, 0,3 e 1 mg/Kg i.p.) em ratos Wistar machos adultos, que em seguida realizaram a habituação em campo aberto. Uma semana depois, foram treinados na tarefa de esquiva inibitória e testados 24h e uma semana após. Os resultados mostram que a cisplatina não afetou o comportamento dos ratos em campo aberto, mas induziu um aumento de desempenho na tarefa da esquiva inibitória, medido uma semana após o treino, o que leva à conclusão de que essa droga pode induzir uma facilitação da memória de longo prazo.

Submitted by Reginaldo Soares de Freitas (reginaldo.freitas@ufv.br) on 2017-11-23T10:37:41Z No. of bitstreams: 1 texto completo.pdf: 2300731 bytes, checksum: d8cd620baef33c7e3c5968d3accaefda (MD5) / Made available in DSpace on 2017-11-23T10:37:41Z (GMT). No. of bitstreams: 1 texto completo.pdf: 2300731 bytes, checksum: d8cd620baef33c7e3c5968d3accaefda (MD5) Previous issue date: 2017-08-16 / Coordenação de Aperfeiçoamento de Pessoal de Nível Superior / O melanoma cutâneo é um problema de saúde pública mundial, por ser um tumor sólido altamente metastático. Compostos sintéticos têm sido desenvolvidos no intuito de combater atividades das células tumorais, como migração, invasão, adesão e proliferação. Dentre eles, compostos derivados do ácido cinâmico e isobenzofuranonas têm apresentado importante atividade antimetastática. Por isso, o objetivo deste estudo foi avaliar a atividade antimetastática in vitro de dois grupos de compostos, 26 compostos derivados do ácido cinâmico e 25 isobenzofuranonas, frente ao comportamento metastático de células de melanoma cutâneo murino B16-F10. Inicialmente, determinou-se a concentração não citotóxica de derivados destes dois grupos químicos frente à linhagem B16-F10. Como a concentração de 100 μmol L −1 foi aquela considerada não citotóxica, todos os ensaios subsequentes foram realizados utilizando concentrações inferiores ou iguais a esta. Posteriormente, os compostos derivados do ácido cinâmico e as isobenzofuranonas foram avaliados quanto ao efeito antimigratório sobre células B16-F10. Os compostos 9a e 1f foram mais efetivos nas concentrações de 100 μmol L −1 e 50 μmol L −1 . Tanto o composto 9a, um derivado do ácido cinâmico com porção 1,2,3-triazólica contendo um grupo fenilo, quanto o composto 1f, uma isobenzofuranona funcionalizada na posição C3 contendo hidroxilas nas posições C-2' e C-6' do anel aromático, apresentaram atividade antimetastática e antiproliferativa significativa contra células B16-F10. No caso do composto 9a, seu efeito biológico foi atribuído à sua interação com o sítio ativo das metaloproteinases -9 e -2 pelo estudo de docking molecular. Já para o composto 1f, sugerimos que seu efeito inibidor é devido à sua interação com proteínas PKC. Os dois compostos derivados apresentam uma característica em comum, que é a presença de estruturas químicas heterocíclicas na sua composição. Em conclusão, nossos resultados mostraram que derivados do ácido cinâmico podem inibir o comportamento metastático de células B16-F10 in vitro, possivelmente por interferir na atividade de metaloproteinases de matriz. Adicionalmente, nossos resultados mostraram pela primeira vez que isobenzofuranonas sintéticas podem inibir a invasividade de células B16-F10 in vitro. Portanto, os compostos 9a e 1f apresentam potencial para o uso no desenvolvimento de novos candidatos para o tratamento do melanoma cutâneo. / Cutaneous melanoma is a worldwide public health problem because it is a highly metastatic solid tumor. Synthetic compounds have been developed in order to inhibit activities of tumor cells, such as migration, invasion, adhesion and proliferation. Among them, compounds derived from cinnamic acid and isobenzofuranones have shown important antimetastatic activity. Therefore, the objective of this study was to evaluate the in vitro antimetastatic activity of two groups of compounds, 26 compounds derived from the cinnamic acid and 25 isobenzofuranones, against the metastatic behavior of murine cutaneous melanoma cells B16- F10. Initially, the non-cytotoxic concentration of the derivatives was determined against the B16-F10 cells. As the concentration of 100 μmol L −1 was non-cytotoxic, all subsequent assays were performed using concentrations below or equal to this. Subsequently, the compounds derived from cinnamic acid and isobenzofuranone were evaluated for the anti-migratory activity on B16-F10 cells. Compounds 9a and 1f were more effective at 100 μmol L −1 and 50 μmol L −1 concentrations. Both compound 9a, a 1,2,3-triazolic-cinnamic acid derivative containing a phenyl group, and compound 1f, a isobenzofuran derivative functionalized at C-3 position, showed significant antimetastatic and antiproliferative activities against B16-F10 cells. In the case of compound 9a, its biological effect was attributed to its interaction with the active site of metalloproteinases -9 and -2 by the molecular docking study. For compound 1f, we suggest that its inhibitory effect is due to its interaction with PKC proteins. Both derivatives have one feature in common, which is the presence of heterocyclic chemical structures in their composition. In conclusion, our results showed that cinnamic acid derivatives can inhibit the metastatic behavior of B16-F10 cells in vitro, possibly by interfering with the activity of matrix metalloproteinases. In addition, our results showed for the first time that synthetic isobenzofuranone derivatives can inhibit the invasiveness of B16- F10 cells in vitro. Therefore, compounds 9a and 1f have potential structures for the development of novel candidates for the treatment of cutaneous melanoma. / O autor não colocou seu nome completo na ficha catalográfica. Faltou "de Almeida".

Unidad de práctica para optar al título de Químico Farmacéutico / Autor no autoriza el acceso a texto completo de su documento / El presente trabajo propone el diseño de un Programa de Orientación para el personal Técnico Paramédico del Instituto Nacional del Cáncer (INC), el cual se realizó a través del análisis de los medicamentos que componen el Arsenal Farmacológico de la Institución. La redacción del programa se realizó por medio del diagnóstico de un programa piloto ya existente, que además fue complementado a partir de la observación participante y búsqueda bibliográfica de los medicamentos en cuestión. Para la evaluación del conocimiento previo del personal Técnico Paramédico, se creó un material de apoyo y pautas de evaluación en donde se seleccionaron 15 medicamentos por criterio de bajo consumo y por observación de problemática en el ejercicio de la dispensación. Se observó que los funcionarios de la Subunidad de Farmacia Ambulatoria, que además era el grupo de funcionarios que más años de trabajo en la institución llevaban, son los que mayor conocimiento base poseían. Luego del material de apoyo, se incrementó el conocimiento por parte de todos los funcionarios de la Unidad de Farmacia, lo que lleva a pensar que una vez realizado el Programa de Orientación al personal podrán adquirir conocimiento con respecto a la utilización de los medicamentos. Con todos los antecedentes recopilados, se diseñó el nuevo Programa de Orientación, que constaba de 12 módulos distintos donde se incluyó un alto porcentaje de los medicamentos que componen el Arsenal Farmacológico (312 medicamentos), indicando dosis utilizada en hospital, vía de administración, efectos adversos, uso intrahospitalario, contraindicaciones e indicando la Subunidad de dispensación. El Programa de Orientación aquí planteado, será un aporte, ya que permitirá cumplir con el ámbito R.H.2.2, logrando así obtener un 75% en su umbral de cumplimiento, valor mínimo necesario para calificar

Submitted by denise santos (denise.santos@ufc.br) on 2011-06-15T16:12:33Z No. of bitstreams: 1 2004_tese_vlima.pdf: 1553610 bytes, checksum: a31b2181820a5c0e44eb7c75a9bfd2e8 (MD5) / Approved for entry into archive by Eliene Nascimento(elienegvn@hotmail.com) on 2011-06-15T16:15:40Z (GMT) No. of bitstreams: 1 2004_tese_vlima.pdf: 1553610 bytes, checksum: a31b2181820a5c0e44eb7c75a9bfd2e8 (MD5) / Made available in DSpace on 2011-06-15T16:15:40Z (GMT). No. of bitstreams: 1 2004_tese_vlima.pdf: 1553610 bytes, checksum: a31b2181820a5c0e44eb7c75a9bfd2e8 (MD5) Previous issue date: 2004 / A mucosite é caracterizada por úlceras e sintomas orais e intestinais causados por drogas citotóxicas, onde prostaglandinas (PG) e citocinas podem exercer efeitos pró-inflamatórios. O objetivo desse estudo foi verificar os efeitos do celecoxib (CLX) e indometacina (IND), inibidores da síntese de PG, e de pentoxifilina (PTX) e talidomida (TLD), inibidores da síntese de citocinas, em mucosites induzidas por antineoplásicos. Injetou-se 5-fluorouracil (FU 60 e 40 mg/kg-ip) em hamsters Golden machos, para a mucosite oral (MO); e metotrexato (MTX 2,5 mg/kg-sc) em ratos Wistar e em camundongos C57 machos, para a mucosite intestinal (MI). Grupos de hamsters com MO foram tratados sc com CLX (7,5, 15 ou 30 mg/kg), IND (0,25, 0,5 ou 1 mg/kg), PTX (5, 15 ou 45 mg/kg) ou TLD (10, 30 ou 90 mg/kg) diariamente durante 10 d e avaliados os seguintes parâmetros: análises macroscópica e histopatológica, atividade da mieloperoxidase (MPO), leucograma e variação de massa corpórea. O FU causou pico das ulcerações e abscessos no 10º dia (P<0,05), sendo confirmado pela análise histológica e atividade da MPO. Observou-se leucocitose, às custas de neutrófilos, e perda acentuada de massa corpórea. CLX (7,5 e 15 mg/kg), mas não IND, reduziu as úlceras e abscessos (66,6%), a leucocitose e a perda de peso. No entanto, CLX 30 mg/kg apresentou perda de eficácia antiinflamatória, causando aumento da mucosite oral. PTX (45 mg/kg) e TLD (90 mg/kg) reduziram a intensidade dos achados (66,6%), diminuindo as ulcerações e abscessos no 10º dia. Apenas PTX reduziu a leucositose induzida pela mucosite oral induzida. Na mucosite intestinal, ratos foram tratados ip com CLX (7,5, 15 ou 30 mg/kg), PTX (15, 30 ou 60 mg/kg) ou TLD (10, 30 ou 90 mg/kg) durante 5 dias, e avaliados pela análise morfométrica, permeabilidade intestinal via teste da lactulose e manitol, imunohistoquímica para detecção de TNF-α, leucograma e variações de massa corpórea, de ingestões de líquidos e alimentos dos animais. O MTX causou encurtamento dos vilos, aumento da profundidade das criptas, e perda da integridade do epitélio, com conseqüente redução da área absortiva intestinal, principalmente no duodeno, seguido pelo jejuno e em menor grau, no íleo. Observou-se leucopenia no 5º dia, além de redução de massa corpórea e das ingestões de líquidos e alimentos. CLX (30 mg/kg) preveniu a redução da área absortiva duodenal em 37%, além de diminuir a leucopenia. Não reduziu, porém, a perda de peso, nem alterou as ingestões de líquidos ou alimentos. PTX (15 mg/kg) foi capaz de inibir a redução da relação vilos/criptas em 38% no duodeno, com diminuição da solução de continuidade do epitélio, do infiltrado inflamatório e conseqüente proteção da área absortiva. Apesar de não ter prevenido a leucopenia ou as baixas ingestões de líquidos e alimentos, PTX foi capaz de reduzir a perda de massa corpórea significantemente. TLD (30 e 90 mg/kg) reduziu em 37% e 29%, respectivamente, a relação vilos/criptas duodenais induzida por MTX. TLD (90 mg/kg) causou redução significativa da marcação de TNF-α tanto ao nível de epitélio como na lâmina própria, quando comparado a mucosite não tratada. Entretanto, TLD não reduziu a leucopenia vista no 5º dia, nem preveniu a redução de massa corpórea e ingestões de líquidos ou alimentos. Camundongos C57BL/6 knockout para receptor R1 de TNF-α (TNF-R1-/-) apresentam relação vilos/criptas reduzida em relação a animais normais. Estes foram submetidos a MI por MTX e mostraram menores alterações ao nível de jejuno e íleo. Assim, os resultados demonstraram que os modelos animais de mucosites oral e intestinal reproduziram importantes aspectos dessa patologia em humanos. PTX e TLD e em menor grau, CLX, reduziram a inflamação nas mucosas induzidas por antineoplásicos, sugerindo-se que o TNF-α possa ser um mediador importante nas mucosites, enquanto que as prostaglandinas possuam uma função dependente de sua concentração

GONDIM, A. C. S. Atividade antitumoral e antiviral de lectinas de leguminosas (tribo Phaseoleae, subtribo Diocleineae): ConBr, ConM, DLasiL e DSclerL. 2014. 135 f. Tese (Doutorado em Bioquímica) - Centro de Ciências, Universidade Federal do Ceará, Fortaleza, 2014. / Submitted by Francisco Lacerda (lacerda@ufc.br) on 2014-12-03T10:56:53Z No. of bitstreams: 1 2014_tes_acsgondim.pdf: 4061405 bytes, checksum: 9553740277f9cb8e23f6fc7c6697bd11 (MD5) / Approved for entry into archive by José Jairo Viana de Sousa(jairo@ufc.br) on 2015-01-20T17:06:28Z (GMT) No. of bitstreams: 1 2014_tes_acsgondim.pdf: 4061405 bytes, checksum: 9553740277f9cb8e23f6fc7c6697bd11 (MD5) / Made available in DSpace on 2015-01-20T17:06:28Z (GMT). No. of bitstreams: 1 2014_tes_acsgondim.pdf: 4061405 bytes, checksum: 9553740277f9cb8e23f6fc7c6697bd11 (MD5) Previous issue date: 2014 / Several compounds isolated from plants, including proteins called lectins, have exhibited many types of biological activities. These proteins are specific recognizing and binding to carbohydrates found onto the cell surface. During the last decades, lectins have become promising sources for antitumor and antiviral studies. This study aimed to investigate legumineous lectins, ConBr (Canavalia brasiliensis), ConM (Canavalia maritima), DLasiL (Dioclea lasiocarpa) and DSclerL (Dioclea sclerocarpa) as potential anti-cancer and anti-viral agents, as well as studying structurally DLasiL using fluorescence, circular dichroism and its initial mechanism of anticancer activity. DLasiL lectin was characterized showing 237 amino acid residues with high similarity to lectin from the Diocleinae subtribe. Electron paramagnetic resonance of DLasiL showed a typical signal for manganese (Mn+2), while ICP-MS provided its actual amount along with calcium (Ca2+), whose values were below those found for the other lectins. Intrinsic fluorescence studies using three quenchers showed a better accessibility of neutral species to tryptophans of DLasiL, while extrinsic fluorescence using bis-ANS exhibited a dose-dependent conformational changes promoted by sugars. Circular dichroism showed very expressive thermal stability of DLasiL with mid-point for thermal denaturation at 72 °C. These lectins were used to treat human ovarian carcinoma (A2780), Human Lung Carcinoma (A549), Human Breast Carcinoma (MCF7), Human Prostate Carcinoma (PC3) and cell viability was determined. These proteins showed potent activity on inhibiting cell growth at nanomolar concentrations. Among these lectins, DLasiL was the most effective showing potent cytotoxicity against A2780 cell line with IC50 of 52 nM. The mechanism of cytotoxicity action of DLasiL was investigated by specific apoptosis assay. Cell cycle studies showed DLasiL causes significant changes in the levels of S and G2/M. A virus screening investigation was carried out showing promissing antiviral activity. / Muitos compostos isolados de plantas apresentam diversos tipos de atividades biológicas, como tem sido o caso de proteínas conhecidas como lectinas. Essas proteínas fazem parte de um grupo de moléculas que reconhecem e se ligam a carboidratos contidos na superfície das células de forma específica e reversível. Nas últimas décadas as lectinas vêm se tornando ferramentas promissoras com ação antitumoral e antiviral. Esse trabalho objetivou investigar a possível ação anticancerígena e antiviral das lectinas isoladas das sementes de Canavalia brasiliensis (ConBr), Canavalia marítima (ConM), Dioclea lasiocarpa (DLasiL) e Dioclea sclerocarpa (DSclerL), o possível mecanismo inicial de ação anticancerígena da lectina DLasiL, além de estudar a estrutura da DLasiL através das técnicas de fluorescência e dicroísmo circular e seu mecanismo para atividade anticâncer. A lectina DLasiL foi particularmente caracterizada, apresentando 237 resíduos de aminoácidos com alta similaridade com as lectinas da subtribo Diocleinae. Ressonância paramagnética de elétrons mostrou sinal característico da presença do íon manganês (Mn2+), enquanto medidas de ICP-MS confirmaram a quantidade deste íon, além de cálcio (Ca2+), cuja quantidade foi inferior ao medido nas outras lectinas. Estudos de fluorescência intrínseca indicaram melhor acessibilidade aos triptofanos por moléculas neutras, provando que a vizinhança possuui caráter não carregado, enquanto que fluorescência extrínseca usando Bis-ANS ilustrou a alteração conformacional provocada pela interação a açúcares, concluindo que é possível utilizar esse tipo de medida para a constatação desse fenômeno. Medidas de Dicroísmo Circular confirmam a significativa estabilidade térmica da DLasiL no qual perdeu 50% de sua atividade a 72 oC. Para investigar a ação antitumoral das lectinas em estudo, células de carcinoma de ovário humano (A2780), carcinoma caucasiano de pulmão humano (A549), carcinoma de mama humano (MCF7), carcinoma de próstata humano (PC3) foram cultivadas com DLasiL. Além disso, foi determinada a viabilidade celular. Os resultados mostraram que as lectinas foram efetivas em inibir o crescimento celular das linhangens testadas utilizando concentração nanomolar. Dentre as lectinas testadas, a mais efetiva em inibir o crescimento celular foi a DLasiL, demonstrando um maior índice de citotoxicidade contra células da linhagem A2780 com IC50 de 52 nM. O mecanismo de ação da DLasiL foi investigado através de ensaios específicos de apoptose. Dados de ciclo celular mostraram que a DLasiL apresenta mudanças significativas nos níveis S e G2/M. Adicionalmente, ensaios com uma série de conjuntos de vírus apresentaram resultados bastante promissores.