Submitted by Andresa Graciutti Botan (andresabotan@yahoo.com.br) on 2018-06-06T18:58:46Z No. of bitstreams: 1 Dissert Andresa G Botan.pdf: 1532972 bytes, checksum: af162b8b131f0fd6e440d9ae810290fc (MD5) / Approved for entry into archive by Silvana Alvarez null (silvana@ict.unesp.br) on 2018-06-06T19:37:16Z (GMT) No. of bitstreams: 1 botan_ag_me_sjc.pdf: 1532972 bytes, checksum: af162b8b131f0fd6e440d9ae810290fc (MD5) / Made available in DSpace on 2018-06-06T19:37:16Z (GMT). No. of bitstreams: 1 botan_ag_me_sjc.pdf: 1532972 bytes, checksum: af162b8b131f0fd6e440d9ae810290fc (MD5) Previous issue date: 2018-05-03 / Coordenação de Aperfeiçoamento de Pessoal de Nível Superior (CAPES) / As plantas medicinais e seus extratos têm sido utilizados na medicina tradicional para fins terapêuticos e como uma atrativa fonte de pesquisa em diversas vertentes ciêntíficas, dentre elas, a atividade anti-inflamatória. O objetivo deste estudo foi analisar a citotoxicidade e ação anti-inflamatória in vitro dos extratos glicólicos das plantas medicinais Morus nigra (amora), Ziziphus joazeiro (juá) e Vitis vinifera (uva) em macrófagos de camundongo RAW 264.7. A citotoxicidade dos extratos foi analisada pelo teste de viabilidade celular MTT em dois períodos de tratamento, 5 min e 24 h. A ação anti-inflamatória dos extratos foi avaliada em macrófagos RAW 264.7 estimulados pelo lipopolissacarídeo (LPS) por meio da quantificação das citocinas pró-inflamatórias fator de necrose tumoral (TNF-α) e interleucina-6 (IL-6) pelo teste imunoenzimático (ELISA), e da quantificação do óxido nítrico pela reação de Griess. Os valores obtidos foram submetidos à análise estatística ANOVA ou Kruskal-Wallis com comparação múltipla de Tukey ou Dunn, com nível de significância de 5%. Concentrações não citotóxicas foram observadas após exposição por 5 min e 24 h, respectivamente, para os extratos de M. nigra (≤ 50 mg/mL e ≤ 1,56 mg/mL), Z. joazeiro (≤ 6,25 mg/mL e ≤ 3,12 mg/mL) e V. vinifera (≤ 25 mg/mL e ≤ 3,12 mg/mL). Em relação à resposta anti-inflamatória, 0,78 e 1,56 mg/mL do extrato de M. nigra e 3,12 mg/mL de V. vinifera apresentaram inibição significativa na produção da citocina TNF-α, e o extrato de Z. joazeiro suprimiu de modo significativo a expressão da citocina TNF-α (3,12 mg/mL) e do óxido nítrico (1,56 e 3,12 mg/mL). O presente trabalho demonstrou que os extratos glicólicos de M. nigra, Z. joazeiro e V. vinifera apresentaram concentrações não citotóxicas em ambos os tempos de tratamento e exerceram efeito anti-inflamatório em macrófagos de camundongo RAW 264.7. / Medicinal plants and theirs extracts have been used in traditional medicine for therapeutic purposes and as a source of research in several scientific aspects, e.g. the anti-inflammatory activity. This study aimed to analyze the in vitro cytotoxicity and anti-inflammatory action of the glycolic extracts of the medicinal plants Morus nigra (black mulberry), Ziziphus joazeiro (juá) and Vitis vinifera (grape) in mouse macrophages cells RAW 264.7. The cytotoxicity of the extracts was analyzed by MTT cell viability assay in two periods, 5 min and 24 h. The anti-inflammatory action of the extracts was evaluated in lipopolysaccharide (LPS) stimulated RAW 264.7 cells by quantifying the pro-inflammatory cytokines tumor necrosis factor (TNF-α) and interleukin-6 (IL-6) by enzyme-linked immunosorbent assay (ELISA) and nitric oxide by Griess reagent. The values obtained were submitted to statistical tests ANOVA or Kruskal-Wallis with post-test Tukey or Dunn multiple comparisons with the significance level of 5%. After exposure for 5 min and 24 h, respectively, non-cytotoxic concentrations were observed for M. nigra (≤ 50 mg/mL and ≤ 1.56 mg/mL), Z. joazeiro (≤ 6.25 mg/mL and ≤ 3.12 mg/mL) and V. vinifera (≤ 25 mg/mL and ≤ 3.12 mg/mL) extracts. Concerning the anti-inflammatory response, 0.78 and 1.56 mg/mL of M. nigra extract and 3.12 mg/mL of V. vinifera extract showed significant inhibition of TNF-α cytokine production. Z. joazeiro extract suppressed significantly the TNF-α cytokine (3.12 mg/mL) and the nitric oxide (1.56 and 3.12 mg/mL) expression. In conclusion, the glycolic extracts of M. nigra, Z. joazeiro, and V. vinifera presented non-cytotoxic concentrations in both treatment periods and showed an anti-inflammatory effect in RAW 264.7 cells.

Orientador: Vera Lucia Borges Isaac / Banca: Marcos Antonio Correa / Banca: Gislaine Ricci Leonarodo / Resumo: Cosméticos são usados pelo homem desde a antiguidade e o consumo desse segmento vem aumentando a cada ano, praticamente imune a crises. O Brasil é o quarto maior mercado de cosméticos no mundo, ficando atrás apenas dos Estados Unidos, China e Japão, segundo dados da Associação Brasileira de Higiene Pessoal, Perfumaria e Cosméticos. Dentre as matérias primas que mais causam reações alérgicas estão os conservantes, corantes e composições aromáticas. Assim sendo, a preocupação com a segurança dos conservantes cosméticos deve ser intensificada. Grande importância é dada ao assunto atualmente, existindo a preocupação com o potencial de irritação e toxicidade para o consumidor e não apenas com o aspecto microbiológico. Desta forma, o presente trabalho teve por objetivo avaliar a citotoxicidade e potencial de irritação de conservantes antimicrobianos que são utilizados em cosméticos. Foram realizados ensaios de citotoxicidade, através do método MTT, em células de fibroblastos humano (HDFa), células de queratinócitos humano (HaCaT) e células de carcinoma hepatocelular humano (HepG2) e potencial de irritação em ovos embrionados de galinha através do método HET-CAM. Foram utilizados os conservantes: fenoxietanol, mistura de fenoxietanol e metilisotiazolinona (Fenox/Mit), mistura de metilcloroisotiazolinona e metilisotiazolinona (CMit/Mit), metilparabeno e propilparabeno, que são amplamente utilizados em cosméticos. Os conservantes mais citotóxicos e com maior pontuação de irritação (PI... (Resumo completo, clicar acesso eletrônico abaixo)... / Abstract: Cosmetics have been used by man since antiquity and the consumption of this segment has been increasing every year, practically immune to crises. Brazil is the fourth largest cosmetics market in the world, behind only the United States, China and Japan, according to data from the Brazilian Association of Personal Hygiene, Perfumery and Cosmetics. Among the raw materials that most cause allergic reactions are preservatives, dyes and aromatic compositions. Therefore, concern about the safety of cosmetic preservatives should be intensified. Great importance is given to the subject nowadays, there being concern about the potential for irritation and toxicity to the consumer and not just with the microbiological aspect. Thus, the present work aimed to evaluate the cytotoxicity and irritation potential of antimicrobial preservatives that are used in cosmetics. Cytotoxicity were assessed by MTT assay method using human fibroblast cells (HDFa), human keratinocytes cells (HaCaT) and using human hepatoma cells (HepG2) and irritation potential in embryonated chicken eggs using the HET-CAM method. Preservatives were used: phenoxyethanol, a mixture of phenoxyethanol and methylisothiazolinone (Fenox/Mit), a mixture of methylchloroisothiazolinone and methylisothiazolinone (CMit / Mit), methylparaben and propylparaben, which are widely used in cosmetics. The most cytotoxic and highest irritation score (IS) preservatives considered irritants, were: phenoxyethanol (HaCat IC50: 0,237 mg/mL; HDFa IC50: 0,200 mg/mL; HepG2 IC50: 0,248 mg/mL; IS: 16) and Fenox/Mit (HaCat IC50: 0,156 mg/mL; HDFa IC50: ~0,056 mg/mL; HepG2 IC50: 0,119 mg/mL; IS: 10). The other preservatives, CMit/Mit (HaCat: non-toxic; HDFa: non-toxic; HepG2: >0,0045 mg/mL), propylparaben (HaCat IC50: ~0,200 mg/mL; HDFa IC50: >0,200 mg/mL; HepG2: >0,400 mg/mL)... (Complete abstract click electronic access below) / Mestre

Orientador: Maria Aparecida Marin Morales / Coorientadora: Grasiela Dias de Campos Severi Aguiar / Banca: Cintya Aparecida Christofoletti de Figueiredo / Banca: Daniela Morais Leme / Banca: Edson Luis Maistro / Banca: Karen Cristiane Martinez de Moraes / Resumo: A qualidade das águas superficiais e subterrâneas tem sido ameaçada por diferentes fontes de contaminação ambiental. Os cemitérios têm se destacado neste quesito, principalmente por disponibilizar para o ambiente um líquido produzido pela decomposição cadavérica, denominado de necrochorume. O necrochorume é rico em substâncias químicas, dentre elas a poliamina putrescina, uma substância que desempenha importantes funções fisiológicas nos organismos. Porém, se essa substância se apresenta em concentrações maiores que as fisiológicas, pode desencadear problemas para os organismos expostos, pois, devido à sua alta bioatividade, passa a ser um contaminante perigoso para os seres vivos. Como esse tipo de contaminação tem sido pouco estudada ecotoxicologicamente, este trabalho é pioneiro nesta abordagem. Para a avaliação dos efeitos biológicos desencadeados pela exposição à diferentes concentrações de putrescina, foram realizados diversos ensaios com diferentes bioindicadores. Ensaios biológicos, in vitro e in vivo, foram desenvolvidos com os organismos testes Allium cepa, Salmonella typhimurium, cultura de células humanas (HepG2) e ratos Wistar. Em células meristemáticas de A. cepa foram avaliados o potencial genotóxico, por meio do teste de aberrações cromossômicas, e mutagênico, por meio da análise de micronúcleos. As células meristemáticas expostas a concentração de 23 mg/kg de putrescina apresentaram aumento significativo no índice de mutagenicidade e aumento na frequência de aderências cromossômicas, indicando uma ação aneugênica da substância. O potencial mutagênico da putrescina foi avaliado pelo teste de Ames, com as linhagens de S. typhimurium TA 98 e TA 100 (com e sem fração metabolizadora). Foi observada uma resposta positiva para as duas linhagens utilizadas, após ativação ... (Resumo completo, clicar acesso eletrônico abaixo) / Abstract: The quality of surface water and groundwater has been threatened by different sources of environmental contamination. The cemeteries have stood out in this question, mainly for making available to the environment a liquid produced by the cadaveric decomposition, denominated of necroslurry. Necroslurry is rich in chemicals, among them a polyamine called putrescine, a substance that plays important physiological functions in organisms. However, if this substance is present in higher concentrations than the physiological ones, it can cause problems for the exposed organisms, because, due to its high bioactivity, it becomes a contaminant dangerous to living beings. As this type of contamination has been little studied ecotoxicologically, this work is pioneering in this approach. For the evaluation of the biological effects triggered by the exposure to different concentrations of putrescine, several tests with different bioindicators were carried out. Biological assays, in vitro and in vivo, were developed with the test organisms Allium cepa, Salmonella typhimurium, culture of human cells (HepG2) and Wistar rats. The genotoxic potential were evaluted in meristematic cells of A. cepa by the chromosomal aberration test and the mutagenic potencial by the micronucleus analysis. The meristematic cells exposed to the concentration of 23 mg/kg of putrescine showed a significant increase in the index of mutagenicity and increase in the frequency of chromosomal adherence, indicating aneugenic action of the substance. The mutagenic potential of putrescine was evaluated by the Ames test, with S. typhimurium TA 98 and TA 100 strains (with and without metabolizing fraction). A positive response was observed for the two strains used after metabolic activation, showing that the metabolic process of putrescine increases its potential to cause mutations in the DNA ... (Complete abstract click electronic access below) / Doutor

Orientador: Rosangela Gonçalves Peccinini / Resumo: A Doxorrubicina (Dox) é uma antraciclina modelo amplamente utilizada em diversos tipos de neoplasias e, assim como a maioria dos quimioterápicos antineoplásicos, a Dox apresenta uma série de efeitos adversos, dentre eles os mais significativos são os efeitos cardiovasculares como hipotensão, taquicardia e insuficiência cardíaca congestiva (ICC), que limitam a terapia com este fármaco. A cardiotoxicidade é favorecida pela sua ampla distribuição no miocárdio, e a Dox tem sidoconsiderada a de maior efeito tóxico sobre o tecido cardíaco. A utilização de recursos em tecnologia farmacêutica que modifiquem o perfil farmacocinético e a toxicidade é uma importante ferramenta para a introdução de um novo produto no mercado cuja resulte em desfecho clínico mais favorável ao paciente. Pesquisadores da Universidade Federal do Rio Grande do Norte (UFRN) desenvolveram um sistema de nanopartículas (Np) para a veiculação de Dox com o intuito de modificar suas características farmacocinéticas e de toxicidade. No presente trabalho o objetivo foi avaliar a nova formulação proposta e compará-la às formulações comerciais de Dox (na forma de cloridrato e lipossomal) quanto a atividade antitumoral in vitro e in vivo e quanto às suas características farmacocinéticas. Foi abordada a atividade in vitro em ensaios de citotoxicidade como o ensaio de Resazurina (RSZ), sulforrubina B (SRB) e a determinação de Trisfosfato de Adenosina (ATP) realizados em cardiomiblasto (H9c2 (2-1), ATCC® CRL 1446™) e célula... (Resumo completo, clicar acesso eletrônico abaixo) / Doutor

Made available in DSpace on 2016-08-15T20:31:37Z (GMT). No. of bitstreams: 1 MairaCJSL_DISSERT.pdf: 420836 bytes, checksum: 822f4cc895779b5cc7c308d8152a664d (MD5) Previous issue date: 2011-02-25 / Coordenação de Aperfeiçoamento de Pessoal de Nível Superior / This study aimed to evaluate the spontaneous cases of poisoning in goats, rats and toxicity in vitro cytotoxicity of Aspidospema pyrifolium. In all spontaneous cases studied, the plant is ingested and the abortion cases occurred exclusively in goats. Most cases of abortion occurred during the dry season and early rainy season, and experienced the goats were less affected than the young goats. We used male and female rats of Wistar strain. The extract of the plant A. pyrifolium was administered in females at day 15 of gestation or from the 15th to the 17th day of gestation, which showed reduced fetal weight and strong evidence of maternal toxicity. Rats subjected to intraperitoneal injection of the extract of A. pyrifolium showed motor dysfunction and death, male rats were more resistant than females. The administration of atropine, diazepam and xylazine did not help in preventing the effects of toxicity. The evaluation of osmotic fragility of red blood cells was performed with the plant extract in different concentrations. In addition, we used larvae from a day of brine shrimp, which were incubated with different concentrations of the extract. It was found that the extract of A. pyrifolium promoted hemolysis and was lethal to A. saline. These in vitro tests may be useful as adjunct tests for further studies with this plant. / O presente trabalho teve por objetivo avaliar casos espontâneos de intoxicação em caprinos, toxicidade em ratos e citotoxicidade in vitro da Aspidospema pyrifolium. Em todos os casos espontâneos estudados, a ingestão da planta e os casos de aborto ocorreram exclusivamente em caprinos. A maioria dos casos de aborto ocorreu durante a estação seca e início da estação chuvosa, e as cabras experientes eram menos afetadas do que as cabras jovens. Foram utilizados ratos machos e fêmeas da linhagem Wistar. O extrato obtido da planta A. pyrifolium foi administrado nas fêmeas no 15º dia de gestação ou a partir do 15º ao 17º dia de gestação, que apresentaram redução do peso fetal e fortes indícios de toxicidade materna. Ratas submetidas a injeção intraperitoneal do extrato da A. pyrifolium apresentaram distúrbios motores e morte; ratos machos foram mais resistentes do que as fêmeas. A administração de atropina, xilazina e diazepam não auxiliou na prevenção dos efeitos de toxicidade. A avaliação da fragilidade osmótica das células vermelhas do sangue foi realizada com o extrato da planta em diferentes concentrações. Além disso, utilizou-se larva de um dia de Artemia salina, que foram incubadas com diferentes concentrações do extrato. Verificou-se que o extrato de A. pyrifolium promoveu hemólise e foi letal para A. salina. Estes testes in vitro podem ser úteis como testes adjuntos de mais estudos com esta planta.

Submitted by Lara Oliveira (lara@ufersa.edu.br) on 2017-08-08T21:47:01Z No. of bitstreams: 1 EliezerFSF_DISSERT.pdf: 825442 bytes, checksum: 4e1f858f4401bb5bd1feb35cb8a2ae1e (MD5) / Approved for entry into archive by Vanessa Christiane (referencia@ufersa.edu.br) on 2017-08-17T22:39:18Z (GMT) No. of bitstreams: 1 EliezerFSF_DISSERT.pdf: 825442 bytes, checksum: 4e1f858f4401bb5bd1feb35cb8a2ae1e (MD5) / Approved for entry into archive by Vanessa Christiane (referencia@ufersa.edu.br) on 2017-08-17T22:41:48Z (GMT) No. of bitstreams: 1 EliezerFSF_DISSERT.pdf: 825442 bytes, checksum: 4e1f858f4401bb5bd1feb35cb8a2ae1e (MD5) / Made available in DSpace on 2017-08-17T22:41:55Z (GMT). No. of bitstreams: 1 EliezerFSF_DISSERT.pdf: 825442 bytes, checksum: 4e1f858f4401bb5bd1feb35cb8a2ae1e (MD5) Previous issue date: 2015-02-11 / Coordenação de Aperfeiçoamento de Pessoal de Nível Superior / How do Genus Species Ipomoea station included between as weeds commonly found in cultivated areas, especially Ipomoea asarifolia (salsa) reported as a toxic plant species and causes que neurological disorders. There is little studies on the toxicity quantity make consumer cellular and genetic level these plants nos production animals semi-arid region. It was assessed a toxic capacity, cytotoxic and mutagenic of the aqueous extract of species leaves I. asarifolia (Convolvulaceae) about growth roots in Allium cepa bulbs; and about the frequency of micronucleated erythrocytes in bone marrow cells in vivo rodent (micronucleus test). Also it enrolled a median lethal dose (LD50) and studied the effect of weight in males and females and analyzed the behavior of animals (Hippocratic screening). Aqueous extracts of dried leaves (EFS) and Fresh (EFF) of I. asarifolia not presented toxic effects or cytotoxic in Allium cepa bulbs roots strain. Were observed allelopathic effects nos growth of roots. Aqueous extracts of dried leaves showed sublethal effects 5mg/L concentration and 300 mg/L. And the fresh leaves showed stimulatory effects all as concentrations studied. The aqueous extract of dried leaves and fresh not caused toxic effects and cytotoxic. There is not cytotoxic effect or in mutagenic rodent cells. The LD50 was found 754.26 mg/kg. From: No influence of gender (male and female) on the toxic effect, but at concentrations of 300 mg/kg and 600 mg/kg of weight was lost. The results against knowledge producers qua not like dry leaves not harm the production of animals / As espécies do gênero Ipomoea estão inclusas entre as plantas daninhas comumente encontradas em áreas de cultivo, especialmente Ipomoea asarifolia (salsa) relatada como uma espécie vegetal tóxica e que causa distúrbios neurológicos. Existe pouca quantidade de estudos sobre a toxicidade do consumo a nível celular e genético dessas plantas nos animais de produção da região do Semiárido. Foi avaliada a capacidade tóxica, citotóxica e mutagênica do extrato aquoso de folhas da espécie I. asarifolia (Convolvulaceae) sobre crescimento de raízes em bulbos de Allium cepa; e sobre a frequência de eritrócitos micronucleados em células da medula óssea de roedores in vivo (teste do micronúcleo). Também foi obtida a Dose Letal Mediana (DL50) e foi estudado o efeito do peso em machos e fêmeas e analisado o comportamento dos animais (screening hipocrático). Os extratos aquosos de folhas secas (EFS) e frescas (EFF) de I. asarifolia não apresentaram efeitos tóxicos nem citotóxicos em raízes de bulbos de Allium cepa. Foram observados efeitos alelopáticos nos crescimentos de raízes. Os extratos aquosos de folhas secas apresentaram efeitos subletais nas concentrações de 5mg/L e 300mg/L. E o das folhas frescas apresentaram efeitos estimulatórios em todas as concentrações estudadas. O extrato aquoso de folhas secas e frescas não provocou efeitos tóxicos e citotóxicos. Não houve efeito citotóxico nem mutagênico nas células de roedores. A DL50 encontrada foi 754,26 mg/Kg. Não houve influência do gênero (Macho e fêmea) sobre o efeito tóxico, mas nas concentrações de 300 mg/Kg e 600 mg/Kg houve perda de peso. Os resultados vão de encontro ao conhecimento dos produtores no qual as folhas secas não prejudicam o animal de produção / 2017-08-08

Submitted by Jos? Henrique Henrique (jose.neves@ufvjm.edu.br) on 2018-03-23T20:57:00Z No. of bitstreams: 2 license_rdf: 0 bytes, checksum: d41d8cd98f00b204e9800998ecf8427e (MD5) dayana_barbosa_cruz.pdf: 3792008 bytes, checksum: ccf297a5a3923b0c17236ccee6687c49 (MD5) / Approved for entry into archive by Rodrigo Martins Cruz (rodrigo.cruz@ufvjm.edu.br) on 2018-03-29T13:28:53Z (GMT) No. of bitstreams: 2 license_rdf: 0 bytes, checksum: d41d8cd98f00b204e9800998ecf8427e (MD5) dayana_barbosa_cruz.pdf: 3792008 bytes, checksum: ccf297a5a3923b0c17236ccee6687c49 (MD5) / Made available in DSpace on 2018-03-29T13:28:53Z (GMT). No. of bitstreams: 2 license_rdf: 0 bytes, checksum: d41d8cd98f00b204e9800998ecf8427e (MD5) dayana_barbosa_cruz.pdf: 3792008 bytes, checksum: ccf297a5a3923b0c17236ccee6687c49 (MD5) Previous issue date: 2017 / Universidade Federal dos Vales do Jequitinhonha e Mucuri (UFVJM) / Coordena??o de Aperfei?oamento de Pessoal de N?vel Superior (Capes) / As plantas medicinais t?m sido utilizadas pela humanidade, desde seus prim?rdios, com finalidades terap?uticas. Atualmente, cerca de 25% dos medicamentos s?o obtidos de esp?cies vegetais. Considerando a enorme biodiversidade do nosso pa?s destaca-se o potencial para a descoberta de novas mol?culas bioativas oriundas de produtos naturais. Esp?cies radicalares s?o produzidas continuamente em processos metab?licos fisiol?gicos, no entanto o desequil?brio entre agentes pr?-oxidantes e defesas antioxidantes provoca o aumento de esp?cies reativas circulantes conduzindo ao estresse oxidativo relacionado a etiologia de doen?as cardiovasculares, inflamat?rias, imunol?gicas, e relacionadas ao processo de envelhecimento como o Alzheimer e Parkinson. Para prevenir esse processo e as consequ?ncias ao organismo, tem-se aumentado a busca de compostos antioxidantes. Assim, o presente trabalho teve como objetivo avaliar o potencial antioxidante de cinco extratos etan?licos brutos de partes a?reas ou ra?z de esp?cies vegetais j? utilizadas na medicina popular da regi?o. Estas esp?cies foram: Gomphrena arborescens L.f. e Gomphrena virgata Mart. (Amarantaceae),Miconia ferruginata DC. (Melastomataceae) e Vochysia elliptica Mart. (Vochysiaceae), coletadas no munic?pio de Diamantina ? MG e regi?es subjacentes. Utilizando a metodologia de Folin-Ciocalteau pode-se observar que todos os extratos, exceto G. virgata ra?z, apresentaram teores de compostos fen?licos totais (CFT) com destaque para V. elliptica e M. ferruginata (792,36 e 561,89 mg EAG/g extrato, respectivamente). A atividade redutora dos extratos avaliada pela captura de radicais DPPH? e ABTS?+ demonstrou maior captura para os extratos com maior teor de CFT, sendo esta correla??o forte e positiva. Realizou-se ainda, avalia??o da interfer?ncia dos extratos na atividade sequestradora de radicais gerados em um sistema HRP/Luminol/H2O2 e tamb?m os efeitos sobre o burst oxidativo de neutr?filos humanos isolados, ativados com PMA. Apenas os extratos de V. elliptica e M. ferruginata foram testados, apresentando atividade protetora frente as esp?cies radicalares produzidas tanto pelo sistema, quanto pelo burst oxidativo. A avalia??o da viabilidade celular de neutr?filos em cultura na presen?a de todos os extratos sem est?mulos exteriores demonstrou que estes n?o s?o citot?xicos mesmo na maior concentra??o testada (1000 ?g/mL), tendo a V. elliptica apresentado poss?vel atividade citoprotetora nesta concentra??o. / Disserta??o (Mestrado) ? Programa de P?s-gradua??o em Ci?ncias Farmac?uticas, Universidade Federal dos Vales do Jequitinhonha e Mucuri, 2017. / Medicinal plants have been used by mankind since its beginnings for therapeutic purposes. Currently, about 25% of medicines are obtained from plant species. Considering the enormous biodiversity of our country stands out the potential for the discovery of new bioactive molecules coming from natural products. Radical species are continuously produced in physiological metabolic processes, however the imbalance between pro-oxidant agents and antioxidant defenses causes the increase of circulating reactive species leading to oxidative stress related to the etiology of cardiovascular diseases, inflammatory, immune, and related to the aging process such as Alzheimer?s and Parkinson's. To prevent this process and the consequences to the body, the search for antioxidant compounds has increased. Thus, the present work had as objective to evaluate the antioxidant potential of five crude ethanolic extracts of aerial parts or root of vegetal species already used in the popular medicine of the region. These species were: Gomphrena arborescens L.f. and Gomphrena virgata Mart. (Amarantaceae), Miconia ferruginata DC. (Melastomataceae) and Vochysia elliptica Mart. (Vochysiaceae), collected in the municipality of Diamantina - MG and subjacent regions. Using the methodology of Folin-Ciocalteau it can be observed that all extracts except G. virgata roots, presented total phenolic compounds (CFT), with emphasis on V. elliptica and M. ferruginata (792.36 and 561.89 mg EAG / g extract, respectively). The reductive activity of the extracts evaluated by the DPPH? and ABTS?+radical capture showed higher capture for extracts with higher CFT content, being this correlation strong and positive. We also evaluated the interference of the extracts in the sequestering activity of radicals generated in an HRP/Luminol/H2O2 system and also the effects on the oxidative burst of isolated human neutrophils activated with PMA. Only the extracts of V. elliptica and M. ferruginata were tested, presenting protective activity against the radical species produced by both the system and the oxidative burst. The evaluation of the cell viability of neutrophils in culture in the presence of all the extracts without external stimuli, demonstrated that they are not cytotoxic even at the highest concentration tested (1000 ?g / mL), and V. elliptica presented possible cytoprotective activity at this concentration.

O câncer é a principal causa de morte nos paises economicamente desenvolvidos e a segunda em paises em desenvolvimento, resultado, em parte, da grande falta de especificidade dos tratamentos atualmente disponíveis. Por outro lado, uma aplicação clínica muito específica, denominada letalidade sintética, foi recentemente proposta. Nesta abordagem terapêutica os inibidores de poli(ADP-ribose) polimerases (PARP), também conhecidos como PARPis, mostraram-se capazes de induzir a morte celular seletiva em células tumorais com defeitos em BRCA1 e BRCA2 (ambas envolvidas no reparo de quebras duplas - DSBR). Assim, a excitante possibilidade de eliminar as células cancerígenas de maneira seletiva fez com que os PARPis passassem de interessantes ferramentas moleculares às mais promissoras drogas anticâncer da atualidade. Contudo, os mecanismos básicos envolvidos na citotoxicidade dos PARPis continuam pouco conhecidos e suas aplicações restritas a um pequeno grupo de cânceres. Por este motivo, neste trabalho, a citotoxicidade do Olaparib (um inibidor de PARP) foi investigada em um painel de linhagens de câncer colorretal (CRC). Os resultados demonstraram que o Olaparib é uma droga de ação lenta, cuja citotoxicidade pode ser modulada por defeitos genéticos em MLH1 (envolvido no reparo de bases mal-emparelhadas) e no supressor tumoral PTEN. Por outro lado, observou-se que o fenótipo MSI (Instabilidade de microssatélites) e os defeitos genéticos em p53 não influenciaram a citotoxicidade do Olaparib. Além disso, linhagens com resistência adquirida a Oxaliplatina (Oxp) e a 5-Fluorouracil (5- Fu) não apresentaram efeito refratário ao Olaparib, enquanto que linhagens com resistência adquirida a SN-38 (metabólito ativo do Irinotecano) apresentaram um forte efeito refratário. Finalmente, as associações de Oxp ou 5-Fu com Olaparib foram capazes de sensibilizar células com resistência relativa e adquirida. Juntos, estes resultados sugerem uma série de novas possibilidades para o emprego de inibidores de PARP no tratamento de CRC. / Cancer is the main cause of death in developed countries and the second in lessdeveloped countries, that results in part from the low specific treatments available. However, a very specific therapeutic approach, called synthetic lethality, was recently proposed. The best documented synthetic lethal interaction was reported between poly(ADP-ribose) polymerases inhibitors (PARPis) and defects in BRCA1 and BRCA2 (both involved in double-strand break repair - DSBR), which may induce selective cancer cells death. Therefore, the exciting possibility to selectively kill cancer cells has been moving PARPis from interesting molecular tools to the forefront of cancer therapy research. However, the basic mechanisms involved in PARPis cytotoxicity are still poorly studied and its clinical applications are restricted to a small number of malignances. Herein, the Olaparib (PARPi) cytotoxicity was investigated in a colorectal cancer (CRC) cell line panel. The results demonstrated that Olaparib is a slow action drug, which may have its effects increased in cells with MLH1 (involved in mismatch repair) and PTEN (tumor supressor) defects. On the other hand, neither the MSI (microsatellite instability) phenotype nor the p53 defects were observed to influence on Olaparib cytotoxicity. Further, neither Oxp nor 5-Fu resistant cell lines presented cross-resistance to Olaparib, whereas a pronounced cross-resistance was observed for SN-38 (Irinotecan metabolite) resistant cell line. Finally, Olaparib associations with Oxaliplatin or 5-Fluorouracil were shown to sensitize cells with both relative and acquired resistances. Together, these results suggest a series of new possible uses for PARP inhibitors in CRC treatment.

Nanoemulsões catiônicas têm sido recentemente propostas como sistemas carreadores de DNA. O presente trabalho teve por objetivo avaliar a influência de diferentes fosfolipídeos sobre propriedades dos complexos formados entre nanoemulsões e pDNA (pTracerTMCMV2). Em uma primeira etapa, nanoemulsões catiônicas constituídas de triglicerídeos de cadeia média, estearilamina, lecitina de gema de ovo ou fosfolipídeos isolados (DSPC, DOPC, DSPE ou DOPE), glicerol e água foram preparadas através do procedimento de emulsificação espontânea. Independente do tipo de fosfolipídeo empregado, esse procedimento conduziu à obtenção de nanoemulsões catiônicas monodispersas com diâmetro de gotícula e potencial zeta de cerca de 250 nm e +50 mV, respectivamente. A complexação do pDNA com as nanoemulsões catiônicas, avaliada através do retardamento de migração do pDNA em gel de agarose por eletroforese, foi total quando o complexo apresenta uma relação de cargas [+/-] ≥ 1,0. Nestas condições, os complexos formados foram protegidos da degradação pela enzima DNase I. Em uma segunda etapa, a citotoxicidade das nanoemulsões e dos complexos com o pDNA sobre células Hep G2 foi avaliada, através do ensaio de MTT. Os resultados obtidos demonstraram que a adição de quantidades crescentes das nanoemulsões, conduz a uma toxicidade progressiva sobre as células, independente do pH do meio. Dentre as formulações estudadas, aquelas estabilizadas pelos fosfolipídeos DSPC e DSPE, de elevada temperatura de transição de fases, foram marcadamente menos tóxicas, em comparação com as formulações obtidas com lecitina, DOPC e DOPE. Essa mesma tendência foi detectada para os complexos formados com o pDNA. Em uma última etapa, foi realizado um estudo preliminar de transferência gênica em células Hep G2, utilizando a técnica de PCR em tempo real. Dentre as diferentes formulações testadas, a maior quantidade de DNA de GFP detectada parece ser para a formulação obtida com o fosfolipídeo DSPC, ilustrando as potencialidades de uso das nanoemulsões desenvolvidas como reagentes de transfecção de pDNA em células Hep G2. Em conclusão, o conjunto dos resultados obtidos demonstra o efeito dos fosfolipídeos empregados sobre propriedades físico-químicas, complexação, estabilidade, citotoxicidade e transfecção de nanoemulsões catiônicas como sistemas carreadores de pDNA. / Cationic nanoemulsions have been recently considered as potential delivery systems for DNA. The aim of the present work was to evaluate the influence of different phospholipids on the properties of complexes formed between nanoemulsions and pDNA (pTracerTM-CMV2). First, cationic nanoemulsions composed of medium chain triglycerides, stearlyamine, egg lecithin or isolated phospholipids (DSPC, DOPC, DSPE or DOPE), glycerol and water were prepared through spontaneous emulsification process. Independently of the type of phospholipid used this procedure results in monodisperses cationic nanoemulsions with droplet size and zeta potential of about 250 nm and +50 mV, respectively. The complexation of pDNA with cationic nanoemulsions, analyzed by agarose gel retardation assay was total when the complex possesses a charge relation [+/-] ≥ 1.0. In these conditions the complexes were protected from enzymatic degradation by DNase I. After that, the cytotoxicity of the nanoemulsion and the complexes with pDNA in Hep G2 cells was evaluated through MTT assay. The results showed that the addition of increasing amount of nanoemulsion leads to a progressive toxicity on the cells independently of the media’s pH. Among the studied formulations the ones stabilized with the phospholipids DSPC and DSPE, that have elevated phase transition temperatures, were much less cytotoxic in comparison with the formulations obtained with lecithin, DOPC and DOPE. This same trend was detected for the complexes formed with pDNA. Finally a preliminary study of gene transfer to Hep G2 cells was performed using real-time PCR technique. Among the different formulations tested, the major quantity of reporter DNA detected seems to be for the formulation obtained with the DSPC phospholipid. This shows the potentialities of the use of nanoemulsions as transfection reagents of pDNA in Hep G2 cells. In conclusion, the overall results show the effect of the phospholipids on physicochemical properties, complexation, stability, cytotoxicity and transfection of cationic nanoemulsions as delivery systems for pDNA.

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