Atualmente tem-se dado grande ênfase aos alimentos funcionais, pois atuam na prevenção e auxiliam na recuperação de várias doenças, como doenças inflamatórias crônicas, cardiovasculares e câncer, por apresentarem principalmente flavonoides, que previnem lesões oxidativas, propiciando benefícios à saúde. O Brasil é o maior produtor mundial do maracujá, e em vista disto é de suma importância o desenvolvimento de métodos analíticos e estudos de atividade antioxidante e anti-inflamatória do fruto de maracujá, visando sua possível utilização como alimento funcional e produção de possíveis fármacos. Passiflora edulis Sims. f. flavicarpa Degener, conhecida como maracujá azedo ou amarelo é a espécie mais cultivada e comercializada no Brasil. Desta forma, os objetivos deste trabalho foram: desenvolver e validar um método analítico por CLAE-UV/DAD (cromatografia líquida de alta eficiência acoplada detector de arranjo de fotodiodos) para quantificação da flavona isoorientina, presente na polpa de P. edulis; quantificação dos flavonoides totais desta espécie, usando um padrão de baixo custo (rutina); comparar as técnicas CLAE e CCDAE (cromatografia em camada delgada de alta eficiência) e analisar a isoorientina nas cascas dos frutos de P. edulis infectada com o vírus PWV e cascas sadias por CCDAE; quantificar as proteínas totais e avaliar as atividades antioxidantes e anti-inflamatória dos extratos de cascas de P. edulis e da polpa dos frutos de P. edulis e P. alata, empregando-se o método do DPPH•, e os ensaios de QLluc (quimioluminescencia dependente de lucigenina), ELISA (Enzyme Linked Immunosorbent Assay), e SIEFED (Specific Immunologic Extraction Followed by Enzymatic Detection). Os resultados mostraram que o método desenvolvido por CLAE-UV/DAD foi adequado e eficiente para quantificação de isoorientina e de flavonoides totais na polpa de P. edulis, apresentando especificidade, linearidade, exatidão, precisão, dentro das faixas internacionalmente aceitas. Além disso, este método foi aplicado com sucesso nas análises de flavonoides em cascas de P. edulis e polpa de P. alata. O trabalho mostrou as vantagens da utilização da técnica CCDAE, como a realização de análises mais rápida e econômica, com baixo consumo de solvente e resíduos gerados frente à CLAE-UV/DAD. Por meio da técnica CL-EM/EM (cromatografia líquida acoplada à espectrometria de massas em tandem) foi possível identificar as flavonas isoorientina e isovitexina na polpa de P. edulis. Os extratos de cascas de P. edulis apresentaram maior capacidade redutora de radicais (método do DPPH•), seguido das polpas de P. edulis e P. alata, respectivamente. Os extratos de cascas também mostraram maior inibição da produção de EROs (espécies reativas de oxigênio) pelos neutrófilos ativados e da atividade da MPO (mieloperoxidase) isolada, porém verificou-se que todos os extratos testados não modificaram a desgranulação dos neutrófilos, não influenciando a liberação de MPO no plasma. Assim, concluiu-se que a atividade antioxidante pode estar diretamente relacionada com a concentração de isoorientina presente nos extratos. A grande quantidade de proteínas e isoorientina encontrada nas cascas de P. edulis, se comparada à polpa de P. edulis, aliada à elevada atividade antioxidante e anti-inflamatória, sugere o potencial das cascas de P. edulis como um alimento funcional, ou como possível fonte de flavonoides naturais para a produção de fármacos, sugerindo assim o aproveitamento deste grande resíduo industrial. / Functional foods have been the focus of many studies nowadays, because they act preventing and assisting in the recovery of several diseases, such as chronic inflammatory, cardiovascular and cancer, due to they have mainly flavonoids, which prevent oxidative damage, providing health benefits. Brazil is the largest producer of passion fruit; therefore, it is very important to develop analytical methods and studies of antioxidant and anti-inflammatory activities of passion fruit, intending to its use as a functional food and in the development of drugs. Passiflora edulis Sims. f. flavicarpa Degener, known as yellow passion fruit, is the most cultivated and marketed species in Brazil. Therefore, the objectives were: to develop and validate an analytical method by HPLC-UV/DAD (high-performance liquid chromatography with photo-diode array detection) for quantification of isoorientin present in the pulp of P. edulis and quantification of total flavonoids of this specie, using a low-cost standard (rutin); to compare HPLC and HPTLC (high-performance thin layer chromatographic) techniques and to analyze isoorientin in the peels of P. edulis fruits infected by PWV virus and healthy peels by HPTLC; to quantify the proteins and to evaluate the antioxidant and anti-inflammatory activities of the extracts of P. edulis peels and P. edulis and P. alata pulp, using the method of DPPH•, QLluc (chemiluminescence dependent of lucigenin), ELISA (enzyme linked immunosorbent assay), and SIEFED (specific immunologic extraction followed by enzymatic detection). The results showed that the HPLC-UV/DAD method was suitable and efficient for isoorientin quantification and total flavonoids in the P. edulis pulp, with specificity, linearity, accuracy, precision, within internationally acceptable limits. Moreover, this method was successfully applied to the analysis of flavonoids in the P. edulis peels and P. alata pulp. The study presented the advantages of using the HPTLC technique such as to perform faster and cheaper analysis, with low solvent consumption and waste generated compared to HPLC-UV/DAD. Using LC-MS/MS technique (liquid chromatography with tandem mass spectrometry detection) the flavones isoorientin and isovitexin were identified in the pulp of P. edulis. The extracts of peels of P. edulis showed the higher radical scavenging ability (DPPH• method), followed by P. edulis and P. alata pulps, respectively. The peels extracts also showed greater inhibition of ROS (reactive oxygen species) production by neutrophils activated and isolated MPO activity, but it was found that the extracts did not alter the neutrophils degranulation and does not influence the MPO release in the plasma. Therefore, it was concluded that the antioxidant activity might be directly related to the concentration of isoorientin present in the extracts. The high amount of protein and isoorientin found in the P. edulis fruit peels, compared with P. edulis pulp, and the high antioxidant and anti-inflammatory activities, suggests the potential of the P. edulis fruit peels as functional food or a possible source of natural flavonoids for drugs production, suggesting the use of this substantial industrial waste.

Conselho Nacional de Pesquisa e Desenvolvimento Científico e Tecnológico - CNPq / The methodology developed in the present work, through chromatographic fingerprint by LC-DAD and Principal Component Analysis (PCA), was adequate for the chemical differentiation of Lippia alba (Mill) NE Brown accessions, considering the extraction method (infusion and maceration hydroalcoholic) and the collection season (summer and winter), allowing to evaluate the influence of these variables on the chemical composition of extracts obtained. In addition, all extracts were submitted to cytotoxic tests against two tumor cell lines, HL-60 (human leukemia) and HepG2 (human hepatocellular carcinoma), and to inhibition tests against the enzyme acetylcholinesterase (AChE) in order to evaluate the form of extraction and which access is the most promising from a pharmacological point of view. Among the extracts analyzed against tumor cells, eight of them, two from the infusion: 01IW and 02IW and six from the hydroalcoholic extraction: 02HW, 24HW, 39HW, 54HW, 01HS and 24HS, presented better cell inhibition performances against HL-60, with percentage of inhibition between 40.0 and 52.0%, suggesting that these extracts are potentially promising against this lineage. With respect to the anticholinesterase tests, all extracts studied had low AChE inhibitory effect when compared to galantamine (87.4%), highlighting only the samples 01HW (28.4%), 02HW (27.2%), 54HW (29.3%), 01HS (32.7%), 02HS (27.4%) and 24HS (30.3%). Through the analyzes performed by Nuclear Magnetic Resonance (NMR) it was possible to identify the structures of some compounds isolated from this species: flavone tricin and phenylpropanoid verbascoside/isoverbascoside. In addition, the classes of three other metabolites were proposed: two phenylpropanoid derivatives and one flavonoid diglucoside. / A metodologia desenvolvida no presente trabalho, utilizando fingerprint cromatográfico por CL-DAD e Análise de Componentes Principais (PCA), se mostrou adequado para a diferenciação química de acessos de Lippia alba (Mill) N. E. Brown, considerando o método de extração (infusão e maceração hidroalcoólica) e a época de coleta (verão e inverno), permitindo, ainda, avaliar a influência destas variáveis na composição química dos extratos obtidos. Adicionalmente, todos os extratos foram submetidos a testes citotóxicos frente a duas linhagens de células tumorais, HL-60 (leucemia humana) e HepG2 (carcinoma hepatocelular humano), e de inibição enzimática frente a acetilcolinesterase (AChE) com o intuito de avaliar qual a forma de extração e qual acesso é o mais promissor do ponto de vista farmacológico. Entre todos os extratos analisados frente as células tumorais, dois provenientes da infusão: 01II e 02II e seis da extração hidroalcoólica: 02HI, 24HI, 39HI, 54HI, 01HV e 24HV, apresentaram melhores desempenhos de inibição frente a HL-60, com percentual de inibição entre 40,0 e 52,0%, sugerindo que estes extratos são potencialmente promissores contra esta linhagem. Com relação aos testes anticolinesterásicos, todos os extratos estudados apresentaram baixo efeito inibidor da AChE quando comparados a galantamina (87,4%), com destaque para os extratos 01HI (28,4%), 02HI (27,2%), 54HI (29,3%), 01HV (32,7%), 02HV (27,4%) e 24HV (30,3%). Através das análises realizadas por Ressonância Magnética Nuclear (RMN) foi possível identificar as estruturas de alguns dos compostos isolados a partir desta espécie: a flavona tricina e o fenilpropanóide verbascosídeo/isoverbascosídeo. Além disso, foram propostas as classes de outros três metabólitos: dois derivados de fenilpropanóides e um flavonóide diglicosilado. / São Cristóvão, SE

Atualmente tem-se dado grande ênfase aos alimentos funcionais, pois atuam na prevenção e auxiliam na recuperação de várias doenças, como doenças inflamatórias crônicas, cardiovasculares e câncer, por apresentarem principalmente flavonoides, que previnem lesões oxidativas, propiciando benefícios à saúde. O Brasil é o maior produtor mundial do maracujá, e em vista disto é de suma importância o desenvolvimento de métodos analíticos e estudos de atividade antioxidante e anti-inflamatória do fruto de maracujá, visando sua possível utilização como alimento funcional e produção de possíveis fármacos. Passiflora edulis Sims. f. flavicarpa Degener, conhecida como maracujá azedo ou amarelo é a espécie mais cultivada e comercializada no Brasil. Desta forma, os objetivos deste trabalho foram: desenvolver e validar um método analítico por CLAE-UV/DAD (cromatografia líquida de alta eficiência acoplada detector de arranjo de fotodiodos) para quantificação da flavona isoorientina, presente na polpa de P. edulis; quantificação dos flavonoides totais desta espécie, usando um padrão de baixo custo (rutina); comparar as técnicas CLAE e CCDAE (cromatografia em camada delgada de alta eficiência) e analisar a isoorientina nas cascas dos frutos de P. edulis infectada com o vírus PWV e cascas sadias por CCDAE; quantificar as proteínas totais e avaliar as atividades antioxidantes e anti-inflamatória dos extratos de cascas de P. edulis e da polpa dos frutos de P. edulis e P. alata, empregando-se o método do DPPH•, e os ensaios de QLluc (quimioluminescencia dependente de lucigenina), ELISA (Enzyme Linked Immunosorbent Assay), e SIEFED (Specific Immunologic Extraction Followed by Enzymatic Detection). Os resultados mostraram que o método desenvolvido por CLAE-UV/DAD foi adequado e eficiente para quantificação de isoorientina e de flavonoides totais na polpa de P. edulis, apresentando especificidade, linearidade, exatidão, precisão, dentro das faixas internacionalmente aceitas. Além disso, este método foi aplicado com sucesso nas análises de flavonoides em cascas de P. edulis e polpa de P. alata. O trabalho mostrou as vantagens da utilização da técnica CCDAE, como a realização de análises mais rápida e econômica, com baixo consumo de solvente e resíduos gerados frente à CLAE-UV/DAD. Por meio da técnica CL-EM/EM (cromatografia líquida acoplada à espectrometria de massas em tandem) foi possível identificar as flavonas isoorientina e isovitexina na polpa de P. edulis. Os extratos de cascas de P. edulis apresentaram maior capacidade redutora de radicais (método do DPPH•), seguido das polpas de P. edulis e P. alata, respectivamente. Os extratos de cascas também mostraram maior inibição da produção de EROs (espécies reativas de oxigênio) pelos neutrófilos ativados e da atividade da MPO (mieloperoxidase) isolada, porém verificou-se que todos os extratos testados não modificaram a desgranulação dos neutrófilos, não influenciando a liberação de MPO no plasma. Assim, concluiu-se que a atividade antioxidante pode estar diretamente relacionada com a concentração de isoorientina presente nos extratos. A grande quantidade de proteínas e isoorientina encontrada nas cascas de P. edulis, se comparada à polpa de P. edulis, aliada à elevada atividade antioxidante e anti-inflamatória, sugere o potencial das cascas de P. edulis como um alimento funcional, ou como possível fonte de flavonoides naturais para a produção de fármacos, sugerindo assim o aproveitamento deste grande resíduo industrial. / Functional foods have been the focus of many studies nowadays, because they act preventing and assisting in the recovery of several diseases, such as chronic inflammatory, cardiovascular and cancer, due to they have mainly flavonoids, which prevent oxidative damage, providing health benefits. Brazil is the largest producer of passion fruit; therefore, it is very important to develop analytical methods and studies of antioxidant and anti-inflammatory activities of passion fruit, intending to its use as a functional food and in the development of drugs. Passiflora edulis Sims. f. flavicarpa Degener, known as yellow passion fruit, is the most cultivated and marketed species in Brazil. Therefore, the objectives were: to develop and validate an analytical method by HPLC-UV/DAD (high-performance liquid chromatography with photo-diode array detection) for quantification of isoorientin present in the pulp of P. edulis and quantification of total flavonoids of this specie, using a low-cost standard (rutin); to compare HPLC and HPTLC (high-performance thin layer chromatographic) techniques and to analyze isoorientin in the peels of P. edulis fruits infected by PWV virus and healthy peels by HPTLC; to quantify the proteins and to evaluate the antioxidant and anti-inflammatory activities of the extracts of P. edulis peels and P. edulis and P. alata pulp, using the method of DPPH•, QLluc (chemiluminescence dependent of lucigenin), ELISA (enzyme linked immunosorbent assay), and SIEFED (specific immunologic extraction followed by enzymatic detection). The results showed that the HPLC-UV/DAD method was suitable and efficient for isoorientin quantification and total flavonoids in the P. edulis pulp, with specificity, linearity, accuracy, precision, within internationally acceptable limits. Moreover, this method was successfully applied to the analysis of flavonoids in the P. edulis peels and P. alata pulp. The study presented the advantages of using the HPTLC technique such as to perform faster and cheaper analysis, with low solvent consumption and waste generated compared to HPLC-UV/DAD. Using LC-MS/MS technique (liquid chromatography with tandem mass spectrometry detection) the flavones isoorientin and isovitexin were identified in the pulp of P. edulis. The extracts of peels of P. edulis showed the higher radical scavenging ability (DPPH• method), followed by P. edulis and P. alata pulps, respectively. The peels extracts also showed greater inhibition of ROS (reactive oxygen species) production by neutrophils activated and isolated MPO activity, but it was found that the extracts did not alter the neutrophils degranulation and does not influence the MPO release in the plasma. Therefore, it was concluded that the antioxidant activity might be directly related to the concentration of isoorientin present in the extracts. The high amount of protein and isoorientin found in the P. edulis fruit peels, compared with P. edulis pulp, and the high antioxidant and anti-inflammatory activities, suggests the potential of the P. edulis fruit peels as functional food or a possible source of natural flavonoids for drugs production, suggesting the use of this substantial industrial waste.

Conselho Nacional de Desenvolvimento Cient?fico e Tecnol?gico - CNPq / Propolis is a resinous material collected by bees from different parts of plants. Both its composition as its biological properties are dependent on factors such as climate, soil, vegetation and species of collecting bees. Propolis has great potential for therapeutic use due to its chemical composition and pharmacological properties. Herein it was determined the contents of phenolic compounds, antioxidant capacity and chemical composition (assessed by HPLC-PAD) of twelve green propolis samples from beekeepers and sixteen commercial propolis extracs from different regions of Southeast Brazil. The antioxidant abilities of the extracts were qualitatively determined through the total phenolic contents using the Folin?Ciocalteau method. Total flavonoids were assessed by the method of complexation with aluminium chloride. The quantitative antioxidant activiti of propolis extracts were determined both by trapping the organic radicals DPPH and ABTS.+ as well by the iron reduction method (FRAP). High pressure liquid chromatography allowed the identification and quantification of chlorogenic acid, caffeic acid, ferulic acid, para-coumaric acid, rosmarinic acid, vanillin, hesperidin, naringenin, pinobanksin, kaempferol, 4-hydroxy-3,5-diprenyl cinnamic acid (Artepillin-C), kampheride and pinostrobin. Artepillin C, a well known chemical marker of propolis, was present in all propolis extracts analyzed. We highlight that the presence of rosmarinic acid in propolis samples from Rio de Janeiro was reported for the first time in this work. The discrimination between green propolis in natura and commercial green propolis extracts was performed using PCA (Principal Component Analysis) statistical method. The antioxidant capacity in vivo of propolis extracts were evaluated using Saccharomyces cerevisiae as biological system model, assessing important parameters as stress tolerance and lipid peroxidation rate. The antifungal activity of ethanol extracts of propolis in natura were tested against the phytopathogenic fungus Fusarium oxysporium. / A pr?polis ? um material resinoso coletado pelas abelhas de diferentes partes das plantas, sua composi??o e as suas propriedades biol?gicas dependem do clima, solo, vegeta??o e da esp?cie da abelha. A pr?polis tem grande potencial de aplica??o terap?utica, devido ? sua composi??o e propriedades farmacol?gicas. Nesse trabalho foi determinado o teor de subst?ncias fen?licas, a capacidade antioxidante e composi??o qu?mica por CLAE-DAD de doze amostras de pr?polis verde, adquiridas de apicultores, e dezesseis extratos de pr?polis comerciais, provenientes de diferentes regi?es do Sudeste do Brasil. A capacidade antioxidante dos extratos foi avaliada qualitativamente atrav?s do teor de fen?licos totais, pelo m?todo de Folin?Ciocalteau, e flavonoides pelo m?todo de complexa??o com cloreto de alum?nio. A quantifica??o do potencial antioxidante foi realizada pela captura dos radicais org?nicos DPPH e ABTS.+, al?m do m?todo de redu??o do ?on f?rrico (FRAP). An?lises por cromatografia l?quida de alta efici?ncia permitiram a identifica??o e quantifica??o de ?cido clorog?nico, ?cido cafeico, ?cido fer?lico, ?cido para-cum?rico, ?cido rosmar?nico, ?cido 3,5-diprenil-4-hidroxicin?mico (Artepillin C), vanilina, hesperidina, naringenina, pinobanksina, canferol, canferide e pinostrobina. Em todos os extratos de pr?polis analisados foi identificado o Artepillin C, marcador qu?mico para pr?polis verde. Destacamos que neste trabalho foi reportada pela primeira vez a presen?a de ?cido rosmar?nico em pr?polis do Rio de Janeiro. M?todos quimiom?tricos de an?lise explorat?ria, utilizando ?nalise por Componentes Principais foram utilizados para discriminar extratos de pr?polis verde in natura daqueles extratos comerciais. O potencial antioxidante in vivo dos extratos etan?licos de pr?polis foram avaliados utilizando cepas controles de Saccharomyces cerevisiae como modelo de sistema biol?gico e foram avaliados toler?ncia ao estresse e proxida??o lip?dica. A atividade antif?ngica dos extratos etan?licos de pr?polis in natura foram avaliados, e inibiram o crescimento in vitro do fungo fitopat?geno Fusarium oxysporum.

CAPES / Honey is generally known for its therapeutic value and the determination of its main floral source allows the certification to the consumer the properties related to its origin. Thus, the aim of this work was to evaluate the quality and characterize eleven honeys from Apis mellifera from the state of Rio de Janeiro according to physico-chemical parameters, to phenolics profile, to the antioxidant activity and also through the use of chemonetric analysis applied to 1H NMR data and HPLC-DAD. Two samples of assa peixe, six samples of cambara and three samples of morr?o-de-candeia honeys from diferente regions of Rio de Janeiro were analyzed. The physico-chemical parameters determined were: HMF content and color through a spectrophotometric method, free acidity and pH. The content of free amminoacids was also determined through the c?dmium-ninhydrine together with total proteins via the Bradford method. The antioxidant ability of honeys and their extracts was qualitatively determined through the total phenolics content using the Folin-Denis method. Total flavonoids were determined by the complexation method with aluminium chloride. The quantitative antioxidant activity of honeys was determined by the trapping of the 2,2-diphenyl-1-picryl-hydrazyl (DPPH) radical, by trapping of the ABTS.+ radical and also by the iron reduction method (FRAP). The identification and quantitation of polyphenols in the extracts were done by HPLC-PDA. The use of multivariate analysis for the 1H NMR data and HPLC enabled the distinction of the honeys analyzed in this work. Thus, the use of 1H NMR and HPLC data combined with multivariate analysis may be employed as a new strategy for the fast and non-destructive typification of Brazilian honeys. / No mercado, m?is s?o conhecidos pelo seu poder terap?utico e a designa??o de sua principal fonte floral permite atestar ao consumidor as propriedades de sua origem. Assim, o objetivo deste trabalho foi avaliar a qualidade e caracterizar onze m?is de Apis mellifera provenientes do Estado do Rio de Janeiro, por meio de par?metros f?sico-qu?micos, do perfil de subst?ncias fen?licas, de seus potenciais antioxidantes, al?m de usar m?todos quimiom?tricos aplicados aos dados de RMN de 1H e CLAE-DAD. Para tanto, utilizou-se duas amostras de mel de assa peixe, seis de cambar? e tr?s de morr?o de candeia de diferentes munic?pios do Rio de Janeiro. Os par?metros f?sico-qu?micos avaliados foram: teor de HMF e a cor utilizando m?todo espectrofotom?trico, acidez livre e pH. Al?m dessas determina??es, o conte?do de amino?cidos livre foi avaliado pelo m?todo de c?dmio-ninidrina, e prote?nas totais pelo m?todo de Bradford. A capacidade antioxidante dos m?is e de seus extratos foi avaliada qualitativamente atrav?s do conte?do de fen?licos total pelo m?todo de Folin-Denis, e de flavon?ides total pelo m?todo de complexa??o com cloreto de alum?nio. A quantifica??o do potencial antioxidante foi realizada pela captura do radical 2,2-difenil-1-picril-hidrazil (DPPH), captura do radical livre ABTS.+, al?m do m?todo de redu??o do ?on f?rrico (FRAP). A identifica??o e quantifica??o das subst?ncias polifen?licas dos extratos foi feita por cromatografia l?quida de alta efici?ncia com detector de arranjo de diodos (CLAE-DAD). A aplica??o da an?lise multivariada aos dados de RMN de H e de CLAE-DAD distinguiu os m?is de assa peixe, cambar? e morr?o de candeia produzidos no Estado do Rio de Janeiro. Assim, o uso de RMN de 1H e CLAE-DAD combinado com a quimiometria pode ser uma nova estrat?gia para tipifica??o de m?is brasileiros de forma r?pida e n?o destrutiva.

The Diploma thesis deals with selection of appropriate methods and tools for planning research projects. The theoretical part focuses on the general theory and the specifics of individual approaches, models and project management tools. Analytical part on the selection of appropriate managemenet elements based on examining enterprise environment. The practical part on the creation of a methodology and its projection to the work with supporting software.

Made available in DSpace on 2015-05-14T12:59:32Z (GMT). No. of bitstreams: 1 arquivototal.pdf: 3288068 bytes, checksum: 0a30af77d23fdb0cbfe338a83f189634 (MD5) Previous issue date: 2012-02-10 / Coordenação de Aperfeiçoamento de Pessoal de Nível Superior - CAPES / Population´s commonsense regards crack cocaine as an impure byproduct of cocaine. In Brazil, the cocaine levels in crack samples or the profiling of its adulterants is not a mandatory analysis of official forensic laboratories. The state of Paraiba has shown a marked increase in the number of analyses done on crack cocaine samples seized by the police forces between 2007 and 2010, rising from 250 to 575 analyses. On the other hand, there is no literature data on the concentration of cocaine on these samples. The present study aimed at developing and validating a method based on quantitative hydrogen nuclear magnetic resonance spectroscopy (1H-qNMR) to determine cocaine in crack cocaine samples seized within the state of Paraiba. 1H-qNMR is a primary analytical method and can become accurate and precise when certain acquisition and processing parameters are properly set. The 1H-qNMR method was compared to a high performance liquid chromatography method with photodiode array detection (HPLC-PDA). The results from both methods allowed us to determine that the average concentration of cocaine in the samples was higher than 70%. The average concentration determined by the 1H-qNMR method was 71.9%, with samples ranging from 5.2 to 89.1%. The results from the HPLC-PDA method were slightly higher, with an average figure of 74.4% and samples ranging from 4.9 to 93.8%. The best correlation between HPLC-PDA and 1H-qNMR data was obtained when integration from region 7 of the spectrum was used (singlet signal at 3.6 ppm from the methyl protons of the ester function) yielding a Pearson´s correlation coefficient of 0.83. Precision and accuracy of the 1H-qNMR method was sensitive to several acquisition and processing parameters that need to be optimized. The HPLC-PDA method developed proved to be fast, accurate and precise for the quantification of cocaine in 47 samples of seized crack cocaine. In addition, the analysis of crack cocaine samples by gas chromatography coupled to mass spectrometry (GC/MS) revealed that the main adulterant present in the samples was phenacetin, a result that was confirmed by the 1H-NMR data. / O senso comum da população tem o crack como um subproduto impuro da cocaína. No Brasil, a análise do teor de cocaína em amostras de crack ou a pesquisa de adulterantes adicionados não constitui rotina nos laboratórios oficiais das perícias forenses. O estado da Paraíba apresentou um crescente número de análises em amostras de crack apreendidas pelas forças policiais entre os anos de 2007 e 2010, passando de 250 para 575 exames. Por outro lado, não existem na literatura dados sobre o teor de cocaína nestas amostras. O presente trabalho teve como objetivo desenvolver uma metodologia baseada no uso da espectroscopia de ressonância magnética nuclear quantitativa de hidrogênio (RMNq-1H) para avaliar o grau de pureza de amostras de crack apreendidas no estado da Paraíba. A RMNq-1H é um método analítico primário e pode tornar-se exata e precisa quando satisfeitos parâmetros de aquisição e processamento dos dados. O método de RMNq-1H foi comparado à metodologia desenvolvida e validada baseada em cromatografia líquida de alta eficiência acoplada a detector de arranjo de diodos (CLAE-DAD). Os resultados das duas metodologias permitiram determinar que o teor médio de cocaína nas amostras foi superior a 70%. O teor médio de cocaína determinado pelo método de RMNq-1H foi de 71,9%, com amostras variando entre 5,2 a 89,1%. Os resultados do método de CLAE-DAD foram ligeiramente superiores, onde o teor médio de todas as amostras foi de 74,4%, com amostras variando entre 4,9 e 93,8% de cocaína. A melhor correlação obtida entre os resultados de CLAE-DAD e RMNq-1H foi aquela que utilizou a região 7 (singleto em 3,6 ppm correspondente a metila da função éster), com coeficiente de correlação de Pearson de 0,83. A precisão e exatidão da RMNq-1H mostrou-se sujeita a diversos parâmetros de aquisição que precisam ser otimizados. Por sua vez a metodologia por CLAE-DAD mostrou-se rápida, exata e precisa para quantificação de cocaína em 47 amostras de crack analisadas. Além disso, as amostras foram submetidas a análise por cromatografia a gás acoplada a espectrometria de massas (CG/EM), mostrando que o principal adulterante nas amostras foi a fenacetina, dado confirmado por RMN-1H.

Syfte: Jag vill skapa förståelse för situationen som uppstår när den nya ägaren balanserar kraven som ställs i ett generationsskifte. Metod: Denna uppsats har skett via en kvalitativ undersökning som kommer inhämta information från kvalitativa intervjuer. Uppsatsen baseras även på en fallstudie som är en process där studien strävar efter att beskriva och analysera en viss kvalitativ och komplex händelse under en viss period. Uppsatsens mål med detta arbete var att få svaret på ovanstående syfte där jag följer en blivande ägare som skall genomföra ett generationsskifte i familjeföretag. Det jag som författare hade observerat via den nära relation jag har med den blivande ägaren ville jag få mer information om. Hur kan dessa krav påverka varandra via generationsskifte och hur balanseras kraven mot varandra. Slutsats: För att slutligen sammanfatta balansen mellan kraven som den blivande ägaren står inför är min tolkning följande. ICA:s krav ger startsträckan, erfarenheten och tiden som den blivande ägare behöver för att samla och förbereda sig inför dagen då det slutliga övertaget av företaget sker. Kortfattat hjälper ICA att balansera samtliga av kraven som ställs på den blivande ägaren.  Kravet från pappan hjälper till på så vis att pappan kan hjälpa till med sin erfarenhet gällande personal och ledarskapet. Via pappans närvaro finns även en trygghet som hjälper den blivande ägaren personligen att känna stöd. Personalkravet och ledarkravet hjälper inte direkt något annat krav. Att relationen är en viktig pusselbit i detta generationsskifte kan författaren förstå via tolkning att inget krav kan påverka relationen mellan den blivande ägaren och pappan utan relationen måste finnas där för att underlätta de övriga kraven. Personalen och ledarskapet byggs upp med erfarenhet och trygghet vilket i grunden åter bottnar i relationen. Relationen kan ingen hjälpa den blivande ägaren med utan det måste den blivande ägaren hantera själv. Balansen mellan kraven blir därför viktig och allt bottnar sig i relation för att kunna genomföra generationsskiftet så smidigt som möjligt. / Purpose: I want to create an understanding of the situation that arises when the new owner balances the requirements set in a generational shift. Method: This essay has been through a qualitative survey that will gather information from qualitative interviews. The essay is also based on a case study as a process where the study strives to describe and analyze a certain qualitative and complex event for a certain period. The aim of this essay with this work was to get the answer to the above purpose in which I follow a prospective owner who will carry out a generational shift in family businesses. What I, as a writer, had observed through the close relationship I have with the prospective owner, I wanted to get more information about how these requirements affect generational change and how the requirements balance each other. Conclusion: To finally summarize the balance between the requirements that the prospective owner is facing, my interpretation as follows. ICA's requirements provide the starting distance, experience and time that the prospective owner needs to gather and prepare for the day when the final takeover of the company takes place. In short, ICA helps to balance all the requirements that are posed to the prospective owner. The requirement of the father helps the father to help with his experience of staff and leadership. Through the dad's presence there is also a security that will help the prospective owner personally to feel support. Personnel requirements and management requirements do not directly support any other requirements that neither the father nor the ICA has, but the claim must be handled separately with the help of ICA and the dad. The fact that the relationship is an important piece of puzzles in this generational shift, I, as a writer, can understand by my interpretation that no requirement can affect the relationship between the prospective owner and the father, but it must be there to facilitate the other requirements. The staff and leadership are built with experience and security, which basically rests in the relationship. The relationship cannot help the prospective owner without it, the prospective owner must handle himself. The balance between the requirements is therefore important and everything is in a relationship to make the change of generation as smooth as possible

Orientadores: Cesar Costapinto Santana, Isabel Cristina Sales Fontes Jardim / Dissertação (mestrado) - Universidade Estadual de Campinas, Faculdade de Engenharia Quimica / Made available in DSpace on 2018-08-08T01:29:34Z (GMT). No. of bitstreams: 1 Maldaner_Liane_M.pdf: 1508589 bytes, checksum: 3a427ebd108b6fdad8d08be5f356992c (MD5) Previous issue date: 2007 / Resumo: A soja é um dos principais produtos de exportação do Brasil, sendo muito empregada na alimentação, por ser um alimento funcional, rico em vitaminas, proteínas e sais minerais. A crescente demanda e a busca da qualidade da soja exigem a aplicação constante, de agrotóxicos durante o seu cultivo, sendo as vezes abusiva. Por outro lado, para garantir o bem estar da população, uma vez que a maioria dos agrotóxicos são prejudiciais à saúde, as principais agências reguladoras impõem limites máximos de resíduos para os agrotóxicos que podem estar presentes nos alimentos. Em vista disso, neste trabalho, foi desenvolvido e validado um método para determinação dos principais agrotóxicos (imazetapir, imazaquim, metsulfurom-metil, carboxim, clorimurom-etil e tebuconazol) usados nas lavouras de soja, empregando a dispersão da matriz em fase sólida (DMFS) como técnica de extração, seguida de uma etapa de cIean-up e posterior análise por cromatografia líquida de alta eficiência com detecção por arranjo de diodos (CLAE-DAD). Os resultados mostraram que a DMFS é adequada para amostras sólidas e complexas, como a soja, é rápida e simples, entretanto, exige a otimização de várias variáveis durante o processo de desenvolvimento da metodologia. A etapa de cIean-up foi necessária devido a quantidade de int~rferentes provenientes da matriz, que foram, na sua maioria, eliminados com o uso de uma co-coluna de C8. Permaneceram interferentes que co-eluíram nos tempos de retenção do imazetapir e do'metsulfurom, que não invalidaram suas determinações, mas prejudicaram suas quantificações. A validação da metodologia mostrou bons resultados de recuperação para todos os agrotóxicos (60 -120 %), com exceção para o metsulfurom e tebuconazol no nível mais baixo de concentração; precisão < 15 % para todos os compostos, com exceção do imazetapir e metsulfurom; boa linearidade, coeficientes de correlação> 0,90 e nenhuma tendência foi visualizada no gráfico de resíduos. O limite de quantificação do método permitiu que os limites máximos de resíduos impostos pelas agências reguladoras para todos os compostos estudados fossem atingidos, com exceção para o imazetapir, devido a co-eluição do interferente. As amostras provenientes de uma cultura de soja analisadas não apresentaram contaminação pelos agrotóxicos em estudo / Abstract: Soy is one of principal Brazilian exportation products of Brazil as it is much used as a foodstuff because of its functional properties: rich in vitamins, proteins and minerais. The increasing quantity and quality of soy demands a constant and even expressive application of pesticides during soy cultivation. On the other hand, for preservation of public heath, since most pesticides may be prejudicial to health, the main regulatory agencies impose the maximum residues limits of pesticides in food. Thus, in this work, a method to determine the main pesticides applied in soy cultivation (imazethapyr, imazaquin, metsulfuron-methyl, carboxin, chlorimurom-ethyl and tebuconazole) using matrix solid phase dispersion (MSPD) as the extraction technique, followed by a clean-up step and subsequent chromatographic analysis by high performance liquid chromatography - diode array detection (HPLC-DAD), was developed and validated. The results have shown that MSPD is a suitable extraction procedure for solid and complex matrices, as is the case of soy and is a rapid and simple technique. However, it requires the optimization of some variables during the process of methodology development. The clean-up step was necessary because of the amount of matrix impurities, but the majority was eliminated using a C8 co-column. Remaining im.purities with the same retention time as imazethapyr and metsulfuron do not invalidate the determination but prejudice the quantification of these compounds. The validated method has shown good -results of recuperation for ali pesticides (60 - 120 %) except for metsulfuron and tebuconazole at the lowest concentration levei, precision < 15 % for ali compounds, except for imazethapyr and metsulfuron, good linearity and correlation coefficients > 0.90 without visible bias. The quantification limit of the method allows determinations below the maximum residues limits for ali pesticides, except for the imazethapyr, due to the presence of an impurity. Soy samples from soy cultivation were analyzed and did not present contamination for the pesticides under study / Mestrado / Desenvolvimento de Processos Biotecnologicos / Mestre em Engenharia Química

Specialized microbial metabolites are described as low-molecular-weight bioactive compounds, which are dispensable for the growth, evolution, or reproduction of its producer. This group of substances includes the lincosamides, which are produced mainly by the bacteria of the Streptomyces genera. Apart from other precursors, two low-molecular-weight thiols, ergothioneine and mycothiol, are essential participants of the lincosamide biosynthesis. Mycothiol (MSH) serves in this pathway as a source of sulphur, on the other hand, ergothioneine (ESH) constitutes a conjugate with the aminosugar moiety of lincosamide structure. The conjugate is condensed with an activated amino acid, which is catalyzed by an unusual enzyme to form a core of the lincosamide molecule. The objective of this diploma thesis is to isolate the conjugate of ESH and aminooctose, which serves as a substrate of the LmbD biosynthetic protein. Another aim is to study the links between the thiol metabolism and the biosynthesis of three lincosamides, lincomycin, celesticetin, and intervencin, which are produced by different bacterial strains. Bacterial strains were cultivated under laboratory conditions and methods of liquid chromatography with UV and MS detection were used for the analysis. The parameters of the methods were developed...