Orientador: Marcos Lutz Muller / Tese (doutorado) - Universidade Estadual de Campinas, Instituto de Filosofia e Ciencias Humanas / Made available in DSpace on 2018-08-03T16:37:31Z (GMT). No. of bitstreams: 1 Araujo_PauloRobertoMonteirode_D.pdf: 10564655 bytes, checksum: d5f06afc4fb95f39bead0335ad029150 (MD5) Previous issue date: 2003 / Resumo: É em tomo do problema da identidade que Charles Taylor desenvolve as suas concepções em relação ao problema das ações humanas. Para o presente trabalho, a pergunta de fundo que colocamos foi a de saber se o arcabouço argumentativo de Taylor, sustentado pelas teorias expressivistas, consegue manter conceitualmente a tese de que os agentes morais agem motivados não pela racionalidade autofundante do sujeito, mas sim pelos sentimentos significativos morais que os mesmos desejam realizar sob a forma de bem no espaço político. Deste modo, a nossa proposta de tese foi analisar até que ponto a teoria de Taylor fornece as bases para a construção de conceitos que dão abertura para a renovação das práticas políticas nas sociedades atuais, visando, assim, à realização da liberdade humana por meio das suas diversas formas de expressão. Sendo assim, o que fizemos, primeiramente, ao longo dos seis capítulos que compõem o trabalho, foi propor um modo de sistematizar o encadeamento dos pontos básicos da teoria de Taylor, como expressão, ação, avaliação, bem, self, espaço público e político, com o objetivo de analisar a construção ontológica da identidade do agente humano. A segunda preocupação ficou centrada no problema da relação entre identidade e os posicionamentos dos agentes no espaço público. Por último, a nossa intenção foi mostrar que a teoria da política do reconhecimento de Taylor resguarda a liberdade expressiva dos indivíduos sem comprometer ao mesmo tempo as formas universais da vida pública / Abstract: Charles Taylor develops his conceptions about the problem of human actions around the identity problem. For the present work, the basic question made was to know if the argumentative framework of Taylor, sustained by the expressivity theories, can support conceptually the thesis that the moral agents act driven not by the subjects' selfrationality, but by the significative moral feelings that they wish to carry through under the form of good in the political space. This way, our thesis proposal was to analyze to what extent Taylor's theories supply the basis for the construction of concepts which provide an opening for the renovation of the political practices in current societies, aiming, in this way, at the accomplishment of human freedom by the means of its diverse forms of expression. Thus, what we did in the first place, throughout the six chapters which com pose the work, was to propose a way to systemize the chaining of the basic points of Taylor's theory, such as expression, action, evaluation, good, self, and political and public space, with the objective of analyzing the ontological construction of the identity of the human agent. The second concem focused on the problem of relationship between identity and the positionings of the agents in the public space. Finally, our intention was to show that Taylor's theory of recognition politics protects the expressive freedom of the individuais without compromising at the same time the universal forms of the public life / Doutorado / Filosofia / Doutor em Filosofia

Orientador: Sara Pereira Lopes / Dissertação (mestrado) - Universidade Estadual de Campinas, Instituto de Artes / Made available in DSpace on 2018-08-03T21:22:28Z (GMT). No. of bitstreams: 1 Aleixo_FernandoManoel_M.pdf: 2251454 bytes, checksum: dc80cb1e33e81981af0799753612f8ff (MD5) Previous issue date: 2004 / Resumo: Este material é o resultado da investigação prática da voz realizada a partir do desenvolvimento do princípio da sabedoria sensível do corpo. O texto expõe as etapas percorridas no levantamento de experiências e reflexões pedagógicas sobre a voz do ator, no estabelecimento de referências sobre o corpo e o aprendizado sensível e, também, no processo de composição poética do espetáculo teatral Voz Mercê / Abstract: This material springs from a practical investigative work on voice based on the principie of natural, intuitive sensorial knowledge of the body. The text explains the various investigative stages in the process of collecting and analysing both experiments and pedagogical theories on the actor's voice, in establishing guidelines on the issues of body awareness and sensorial learning and also in the development of the artistic/poetic composition of the theatrical play "Voz Mercê" / Mestrado / Mestre em Artes

Orientador: Jose Camillo Novello / Tese (doutorado) - Universidade Estadual de Campinas, Instituto de Biologia / Made available in DSpace on 2018-08-04T00:20:33Z (GMT). No. of bitstreams: 1 Kassab_BaykiHussein_D.pdf: 1712667 bytes, checksum: 635db4ddccf22f18ef236c2bbd4e53b9 (MD5) Previous issue date: 2004 / Resumo: As lectinas presentes nos venenos ofídicos são classificadas como lectinas tipo-C e são formadas por cadeias polipeptídicas relativas ao CRD (carbohydrate recognition domain) livre, sem domínios adicionais. BJcuL é uma lectina presente no veneno da serpente Bothrops jararacussu, isolada e caracterizada em nosso laboratório. Trata-se de um homodímero, com grande afinidade à galactose e apresenta atividades tóxica sobre células tumorais e endoteliais. Este trabalho teve como proposta: (1) determinar a seqüência completa do cDNA da lectina do veneno da serpente Bothrops jararacussu; (2) desenvolver um sistema de expressão, solubilização e purificação para a produção de BJcuL recombinante; (3) comparar a atividade da BJcuL recombinante com a nativa. Concomitante ao trabalho acima, foi também de nosso interesse: (4) investigar o efeito de BJcuL nativa sobre células tumorais do cólon quanto a proliferação/viabilidade, e produção de espécies reativas de oxigênio (ROS). O cDNA-BJcuL foi isolado da biblioteca de cDNA a partir da glândula de veneno de B. jararacussu. A seqüência do cDNA-BJcuL (GenBank acesso No. AY388642); apresentou uma região codificadora de aminoácido correspondente a BJcuL nativa e com um elevado grau de identidade com outras lectinas do tipo-C. O cDNA-BJcuL foi amplificado por PCR e ligado ao vetor de pET15b e usado para transformar E. coli BL21 (DE3). Uma proteína ,insolúvel e inativa, de 18,5 kDa foi expressa após a adição de 1 mM de IPTG. A rBJcuL foi desnaturada com 6 M de uréia, purificada e renaturada em coluna de afinidade, seguida de diálise e cromatografia em gel. A eficiência no processo de renaturação foi confirmada através de ensaios biológicos, dicroísmo circular e análise dos peptídios de rBJcuL. As células tumorais do cólon HT-29 D4 e Caco-2, após a adesão, foram incubadas com BJcuL (0 - 10 mM com 5% de FBS) por diferentes períodos (24, 48 e 72h). Ensaios de proliferação foram feitos usando o Kit BrdU-Elisa e uma interessante diminuição na incorporação de BrdU foi observada em ambas as células. BJcuL (2,5 µM) foi capaz de inibir aproximadamente 50% da proliferação em Caco-2 e 30% em HT-29 D4 em 24h. Este efeito, aparentemente não foi relacionado ao tênue desequilíbrio celular de ROS, cerca de 20% na presença de 2,5 µM de BJcuL, medido em fluorímetro (excitação em 490 nm e emissão a 538 nm) após a adição da sonda DCFH-DA. Ensaios com o reagente MTT confirmaram que BJcuL apresenta fraca citotoxicidade e não é capaz de diminuir a viabilidade dessas células. Com base nos resultados obtidos, buscamos desenvolver um estudo mais detalhado da estrutura molecular de BJcuL e suas funções, por meio da clonagem, seqüenciamento e expressão de rBJcuL, na intenção de fornecer dados para o esclarecimento das particularidades estruturais dessas proteínas / Abstract: Snake venom lectins are classified as C-type lectins and their molecular structure consist in at least one carbohydrate recognition domain - CRD per subunit. BJcuL is a lectin from Bothrops jararacussu snake venom, which have been isolated and characterized in our laboratory. The lactose-binding BJcuL is a homodimer, and show toxic activity on cancer cells and endothelial cell lines. The aim of this work was: (1) to determine the complete cDNA sequence that encode the lectin from B. jararacussu snake venom; (2) to develop a methodology for the expression, solubilization, and purification of recombinant BJcuL; (3) to compare recombinant and native BJcuL activity. In addition to the work described we have investigated (4) native BJcuL effect on colon tumor cells concerning the proliferation and reactive oxygen species production (ROS). The cDNA-encoding BJcuL has been isolated of the cDNA phage library, constructed from B. jararacussu venom glands. The mature protein-coding region was amplified by PCR with specific oligonucleotides, and subcloned into the pET-15b vector to express the recombinant BJcuL in Escherichia coli BL21 (DE3). The deduced amino acid sequence exhibits a high degree of sequence identity with c-type lectins (CTLs) and c-type lectin-like domains (CTLDs). An insoluble and inactive 18.5-kDa protein was overexpressed after 1.0 mM IPTG induction. The recombinant BJcuL was recovered and denatured in a buffer with 6 M urea and purified on a nickel-affinity column. Protein refolding was carried out on this column, during procedure purification, followed by dialysis against CTBS and then by gel filtration for separation of the active dimmer. The refolding process of rBJcuL and the analysis of its structure were confirmed by biological assay, circular dichroism and Maldi-Tof. HT-29 D4 and Caco-2 cells, after adhesion, were treated with BJcuL (0 - 10 mM with 5%FBS) in 24, 48 and 72h. Proliferation assays were performed using BrdU-Elisa kit. An interesting decrease in BrdU incorporation was observed for both cells. At 2.5 µM BJcuL inhibited cell proliferation by approximately 50% for Caco-2 and 30% for HT-29 D4 in 24 h. This effect apparently was unrelated to subtle (20%) cellular redox imbalance induced by 2.5 µM BJcuL. In addiction, BJcuL showed a weak cytotoxic effect on these cell lines, since MTT assay did not show any decrease in cell viability. Together with the results presented, we are interested in a more detailed study of the molecular structure of BJcuL and its functions, through cloning and expression of rBJcuL, intending to clarify the structural particularities of these proteins / Doutorado / Bioquimica / Doutor em Biologia Funcional e Molecular

Orientador : Paulo Arruda / Tese (doutorado) - Universidade Estadual de Campinas, Instituto de Biologia / Made available in DSpace on 2018-08-04T00:25:29Z (GMT). No. of bitstreams: 1 Nogueira_FabioTebaldiSilveira_D.pdf: 10338280 bytes, checksum: 37792b86af8630dc08c3fdb7b9c7918d (MD5) Previous issue date: 2004 / Resumo: Estresses ambientais representam um dos principais fatores limitantes para a produtividade agrícola. Sendo assim, fazem-se importantes estudos que têm por objetivo analisar ao nível molecular os efeitos causados por esses estresses. Neste trabalho, analisamos o perfil de expressão gênica em plântulas de cana-de-açúcar submetidas a baixas temperaturas. Inicialmente, membranas de alta densidade (DNA macroarrays) contendo 1536 ESTs (Etiquetas de Seqüências Expressas) do projeto SUCEST (Sugarcane EST Project) foram hibridadas com sondas de cDNAs obtidas a partir de RNA total de tecido foliar de plântulas de cana-de-açúcar crescidas in vitro e submetidas a 4 oC por 3, 6, 12, 24 e 48 h. Como controle, foram utilizadas plântulas in vitro crescidas a 26 oC. O experimento foi repetido duas vezes, utilizando-se RNA total de novas plântulas tratadas e controle. Somente ESTs que apresentaram padrão de indução ou repressão semelhantes nos dois experimentos foram considerados para posterior análise. Desta forma, os resultados permitiram a identificação de 59 ESTs que foram induzidos ou reprimidos pelo estresse abiótico, dentre os quais alguns ESTs sem homólogos no GenBank. Alguns genes selecionados tiveram seu perfil de expressão confirmado por RNA-blot. Utilizando o banco de dados do SUCEST e seqüências de proteínas oriundas do NCBI, foi gerado um banco de dados contendo 33 proteínas de cana-de-açúcar relacionadas ao frio. Dentre essas proteínas foi identificada proteína similar a PUMP (Plant Uncoupling Mitochondrial Protein), a qual está envolvida em mecanismos de redução da produção de espécies reativas de oxigênio durante estresses abióticos. Posteriormente, quatro outras proteínas pertencentes à família PUMP foram identificadas no banco de dados do SUCEST, além de quatro proteínas pertencentes à família AOx (alternative oxidase). Análises filogenéticas corroboraram a hipótese da existência de novos membros de ambas as famílias de proteínas em cana-de-açúcar (Saccharum sp. PUMPs e AOxs, ou seja, SsPUMPs e SsAOxs, respectivamente) e em Arabidopsis (AtPUMPs e AtAOxs). Análise do perfil de expressão desses genes sugere que PUMPs e AOxs são expressos em órgãos diferentes em cana-de-açúcar e em Arabidopsis. Adicionalmente, resultados de RNA-blot sugeriram que dois membros da família de PUMPs (SsPUMP4 e SsPUMP5) e um membro da família AOx (SsAOx1c) foram induzidos por baixa temperatura (4 oC), enquanto que, em Arabidopsis, dois membros da família PUMP (AtPUMP4 e AtPUMP5) e um membro da família AOx (AtAOx1a) foram também induzidos pelo estresse abiótico, entretanto, com perfis diferentes. Interessantemente, o gene AtAOx1d foi reprimido após exposição das plantas a baixas temperaturas. Análises in silico demonstraram a existência de 26 membros da superfamília de proteínas NAC em cana-de-açúcar, incluindo um gene identificado em estudos de expressão gênica, denominado SsNAC23 (Saccharum sp. NAC23). Este gene foi completamente seqüenciado e posteriormente analisado. Resultados de RNA-blot sugerem que o gene SsNAC23 é regulado por baixa temperatura (4 oC), mas não por 12 °C, além de herbivoria (Diatraea saccharalis) e estresse hídrico (Polietilenoglicol, PEG 6000, 20%). Ensaios de localização subcelular demonstraram que a proteína SsNAC23 localizou-se preferencialmente no núcleo de células epidérmicas de cebola (Allium cepa). A construção de um modelo molecular do domínio NAC da proteína SsNAC23 permitiu a análise de determinantes estruturais possivelmente envolvidos em ligação a DNA, sugerindo seu papel como fator de transcrição. Alinhamento desses determinantes de outras proteínas contendo domínio NAC revelou alta conservação de importantes aminoácidos envolvidos no contato entre proteína e molécula de DNA. Em conjunto, nossos resultados sugerem que a proteína SsNAC23 é um fator de transcrição envolvido em mecanismos de resposta a estresses bióticos e abióticos / Abstract: Environmental stresses represent one of the main factors limiting crop productivity, being very important studies that aim to analyze, at a molecular level, the effects caused by these stresses. In the present project, we analyzed the sugarcane gene expression profiles in response to low temperature. Initially, high-density filter arrays containing 1536 ESTs (Expressed Sequence Tags) from SUCEST (Sugarcane EST Project) were hybridized with P33-labeled cDNA probes obtained from total RNA of sugarcane plantlets growing at 4 oC during 3, 6, 12, 24, and 48 h. As a control, plantlets growing at 26 oC were utilized. The experiment was repeated twice, being total RNA extracted from novel cold-treated and untreated plantlet sets. Only those ESTs, which presented similar expression profiles in both experiments, were taken into consideration for a further analysis. The results allowed identifying 59 ESTs that were induced or repressed by chilling stress. Selected genes had their expression profiles confirmed by RNA-blot analysis. Using SUCEST database and protein sequences from NCBI, a database containing 33 sugarcane proteins related to cold temperatures was generated. Among those proteins, we identified a PUMP (Plant Uncoupling Mitochondrial Protein) gene family member. This protein was reported to be involved in oxidative stress responses. Further, in SUCEST database, four additional proteins belonging to PUMP and four proteins belonging to AOx family (alternative oxidase) were identified. Phylogenetic analyses confirmed the existence of novel members of both protein families in sugarcane (Saccharum sp. PUMPs and AOxs: SsPUMPs and SsAOxs) and Arabidopsis (AtPUMPs and AtAOxs). Gene expression profile analyses suggested that PUMPs and AOxs are expressed in different plant organs. RNAblot results suggested that two members of sugarcane PUMP gene family (SsPUMP4 and SsPUMP5) and one member of AOx family (SsAOx1c) were induced by low temperature (4 oC). Arabidopsis PUMP4 and PUMP5 orthologs and one member of AOx family (AtAOx1a) were also induced by cold stress. Interestingly, AtAOx1d was down-regulated after plantlets were exposed In silico analyses demonstrated the existence of 26 members of sugarcane NAC domain protein family, including the cold-inducible SsNAC23 (Saccharum sp. NAC23). This gene was completely sequenced and analyzed. RNA-blot results suggested that SsNAC23 is modulated by extreme low temperatures (4 oC), but not at moderate ones (12 oC). SsNAC23 transcripts also accumulated in response to herbivory (Diatraea saccharalis) and PEG-induced water stress. Nuclear localization essays demonstrated that SsNAC23 was targeted to nucleus of onion cells (Allium cepa). A molecular model of the NAC domain of SsNAC23 allowed analyzing the structural determinants putatively involved in DNA-binding, evidencing the SsNAC23 transcriptional activator nature. Alignment of other NAC domain proteins revealed high structural determinants conservation in different plant species. In summary, our results indicated that the SsNAC23 is a transcription factor involved in biotic and abiotic stress response / Doutorado / Genetica Vegetal e Melhoramento / Doutor em Genetica e Biologia Molecular

Made available in DSpace on 2014-06-12T18:02:07Z (GMT). No. of bitstreams: 2 arquivo2255_1.pdf: 1144434 bytes, checksum: decfcd6acddf2d650924454d4c0f8277 (MD5) license.txt: 1748 bytes, checksum: 8a4605be74aa9ea9d79846c1fba20a33 (MD5) Previous issue date: 2009 / A Dialética do Esclarecimento é considerada um marco teórico no pensamento de Theodor W. Adorno e Max Horkheimer. Nesse livro, escrito a quatro mãos por esses dois membros do grupo de intelectuais conhecido por Escola de Frankfurt, é feita uma crítica radical ao processo de formação da racionalidade ocidental. Eles denominam de esclarecimento o movimento histórico da formação da razão e da luta que esta trava para retirar o homem de um estado de medo e menoridade diante das forças naturais. Diante dos fenômenos históricos do século XX, que indicam uma ameaça de queda da civilização na barbárie, Adorno e Horkheimer examinam a aliança entre razão e poder que pode aniquilar as possibilidades de uma humanidade emancipada. Entretanto, diversos opositores do pensamento de Adorno e Horkheimer, entre os quais se poderia mencionar Jürgen Habermas, chegaram a acusar esses autores de anularem a própria crítica. Segundo tais opositores, a Dialética do Esclarecimento invalidaria seus próprios argumentos ao vincular totalmente razão e poder. Entretanto, o presente trabalho procura indícios que permitam vislumbrar uma proposta de uma nova escrita filosófica na Dialética do Esclarecimento, que demonstre uma relação menos possessiva entre a razão e o não idêntico. Essa escrita seria resultante de uma influência de Walter Benjamin sobre os dois frankfurtianos, mas principalmente sobre Theodor Adorno. A componente ensaística na Dialética do Esclarecimento indicaria que essa obra não entra num beco sem saída pessimista em relação às possibilidades emancipatórias da história. A própria forma de exposição desse livro convidaria a pensar uma nova relação entre sujeito e objeto, espírito e natureza, arte e filosofia

Made available in DSpace on 2014-06-12T22:58:16Z (GMT). No. of bitstreams: 2 arquivo3877_1.pdf: 1470825 bytes, checksum: d4471614b096f2b03634d06a22ce6d64 (MD5) license.txt: 1748 bytes, checksum: 8a4605be74aa9ea9d79846c1fba20a33 (MD5) Previous issue date: 2008 / Conselho Nacional de Desenvolvimento Científico e Tecnológico / Os estudos sobre emoções são realizados há muito tempo, mas apesar disso não há um consenso sobre um conceito devido às muitas questões envolvidas nesse complexo processo. Um ponto controverso é sobre a existência de emoções básicas e sua universalidade. Alguns autores defendem a idéia de emoções inatas e universais, outros opinam sobre os fatores culturais presentes no desenvolvimento das emoções. Apesar dessa discussão todos concordam que as pessoas expressam externamente suas emoções através de gestos, ações, reações fisiológicas, expressões faciais e vocais. Existem vários relatos sobre crianças que foram privadas de convívio social e passaram a viver com animais ou em isolamento social e foram consideradas selvagens. Estes casos despertam no mínimo a curiosidade da população em geral e dos acadêmicos, pois representam uma forma de se tentar entender o papel da sociedade e do convívio com outros da mesma espécie para o desenvolvimento das funções únicas do ser humano. Os participantes desta pesquisa foram dois jovens descobertos num curral com suínos no interior de Pernambuco. Permaneceram nessa situação por aproximadamente sete anos. A presente pesquisa é um estudo de caso, de caráter exploratório que visou investigar as expressões emocionais nesses sujeitos no sentido de se produzir evidências para o estudo do desenvolvimento das emoções e o debate acerca da sua universalidade e/ou relatividade. Comparando os dois irmãos em relação às emoções esperadas e as observadas para as situações geradoras de emoções encontradas nos vídeos analisados, chegamos ao resultado que a congruência total entre esses tipos de emoção foi semelhante para os dois sujeitos, porém existem diferenças entre os irmãos na congruência de emoções esperadas específicas. A alegria foi a emoção mais observada nos participantes em detrimento das outras. A emoção de tristeza não foi observada nas análises, porém foi relatada pela cuidadora. Pedro demonstrava tristeza, mas João só a demonstrou quando o irmão morreu. Não houve evidências da emoção de nojo nos sujeitos deste estudo, esse fato nos levou a questionar a universalidade das emoções. O tipo de emoção (agradáveis, desagradáveis, neutras ou nenhuma; mais elaboradas ou menos elaboradas ) não interferiu na congruência dos participantes, porém se só considerarmos as emoções agradáveis e as desagradáveis observamos que Pedro demonstra ser mais incongruente nas emoções desagradáveis. João não demonstrou variação da congruência em função da época da observação, mas Pedro apresentou congruência significativamente maior a partir de 2005. Podemos concluir que após quatorze anos de ressocialização, Pedro demonstrou ser mais apático que João apesar de ter sido colocado no cativeiro numa idade maior (6/7 anos de idade). Neste caso a privação do convívio social mais tardia trouxe mais dano ao que diz respeito à expressão emocional

Orientador: Regina Aparecida Polo Muller / Dissertação (mestrado) - Universidade Estadual de Campinas, Instituto de Artes / Made available in DSpace on 2018-07-25T18:36:11Z (GMT). No. of bitstreams: 1 Lomakine_Luciana_M.pdf: 6316655 bytes, checksum: aeeda03a96705137f8202e7eb7c55098 (MD5) Previous issue date: 1999 / Resumo: A Dança inserida em um contexto educacional, mais especificamente no contexto da EducaçãoFísica, deve ter por objetivo fazer com que o aluno perceba que é capaz de dançar, levando-oa (re)descobrir as possibilidades de seu corpo, tomando o caminho oposto ao do adestramento, baseado no ensino de técnicas rígidas e codificadas. Tomar decisões de diferentes dinâmicas de espaço e tempo em relação aos movimentos significa ter que se valer da cognição para a escolha da melhor movimentação. Em outras palavras, significa religar o raciocínio ao movimento, ou a mente ao corpo, unindo a esta ação, seu aspecto emocional, o querer ou não se expor, o se permitir vivenciar algo, ainda que não seja novo. É acordar o sentido cinestésico, aquele da propriocepção consciente,e não somente o sentido da visão, que é o mais utilizadona cópiae repetição mecânica de movimentos. Este trabalho descreve as reflexões acerca de um processo que se encaminhou, no qual os alunos foram convidados a descobrir e exteriorizar sua dança pessoal, estimulando suas investigações e explorações de movimentação, tendo como base a consciência corporal, e como meios, estratégias de dança fundamentadas em poéticas modernas e pós-modernas / Abstract: Dance inserted in na educational context, specifically in the context of Physical Education, should not have as target rigid teaching and coded technicals, but instead of this shold make the students to observe that they are able to dance, as well as leading them up rediscovering the possibilities of their own bodies, taking the opposite way to schooling. Taking decisions of different dynamics of time and space concerning movements, it means that somebody has to use its cognition to choose the best movement. In other words, it means that reunite the reasoning to the movement or the mind to the body, joining to this action its emotional aspect, wishing or not to expose themselves, allowing them to live something else, though it is not new. Waking up the kinesthetic sense, that of conscient proprioception, and not only eye sense, that is the most useelone in copying and in mechanical repetition of movements. Here are the described reflections conceming a working proposal, where students were invited to discover and to exteriorize their personal dancing, stimulating their own investigations and explorations of moving, having as basis the conscience of the body, and as means, dance strategies baseei on modern and post-modern poetics / Mestrado / Mestra em Artes

Orientador: Paulo Arruda / Tese (doutorado) - Universidade Estadual de Campinas, Instituto de Biologia / Made available in DSpace on 2018-08-04T13:40:18Z (GMT). No. of bitstreams: 1 RosaJunior_VicenteEugeniode_D.pdf: 4416236 bytes, checksum: b2b792d03cc519d4aa503ad7894937e1 (MD5) Previous issue date: 2005 / Resumo: Os jasmonatos (JAs) são compostos derivados de lipídeos que regulam o crescimento, o desenvolvimento e a resposta a estresses em plantas. Sua principal atividade é a indução da expressão gênica, embora pouco seja conhecido sobre os componentes que ativam e os que transmitem sinais que desencadeiam respostas fisiológicas. Através da técnica de macroarranjos de DNA, estudamos a expressão de 1536 ESTs de cana-de-açúcar em resposta à aplicação de metil-jasmonato (MeJA). Mudanças significativas foram observadas em 26 ESTs, cujas seqüências codificam proteínas que atuam na fotossintese, senescência, síntese protéica e resposta a estresses, além de proteínas com funções desconhecidas. Uma dessas enzimas catalisa a produção de sinapoilmalato. um composto de defesa contra UV. Entre as novas proteínas com domínios de sinalização, encontramos uma proteína zinc finge r (SCZF), que foi estudada mais detalhadamente, sendo esta induzida também por ABA e mais expressa em plantas com menor teor de sacarose. Além dos macroarranjos. usamos a técnica de data-mining para estudar o banco de dados do SUCEST, a procura de vias metabólicas relacionadas aos JAs. Inicialmente, foi gerado um banco de dados contendo seqüências das proteínas reguladas por JAs. Tal banco foi usado para o desenvolvimento de uma página da intemet contendo informações sobre a biossíntese e a ação dos JAs na expressão gênica (htto://est.cbmea.unicamp.brliasmonatos). Através da análise deste banco de dados e do "data mining" descobriu-se a presença da via de síntese da durrina, um glicosídeo cianogênico. A análise filogenética das enzimas da via foi realizada, sugerindo a produção da durrina em cana-de-açúcar. Uma análise dos extratos foliares de cana-de-açúcar confirmou a presença do glicosídeo na concentração de aproximadamente 2 ng por grama de peso fresco. Através de experimentos com ferimento foliar observamos que o nível de durrina é relativamente estável, sugerindo uma fina regulação das enzimas de sua síntese e degradação. Para avaliar essa regulação, analisamos a expressão do gene que codifica a enzima a UDP-GLU, que catalisa o último passo metabólico de síntese de durrina, e do gene que codifica a enzima durrinase (DHR) , a qual catalisa sua degradação. em resposta a lagarta (Diatraea sacchara/is) e ao metil-jasmonato (MeJA). Observamos que a concentração dos transcritos das duas enzimas é aumentada após a exposição a esses . estresses. Para obter mais informações sobre a trascrição dos genes que participam da via entre os tecidos/órgãos, utilizamos a técnica de Digital mRNA Expression Profile, sendo que a expressão dos genes UDP-glu e dhr foi confirmada por Northern 810f. Esses resultados permitiram concluir que a durrina ocorre em cana-deaçúcar, possivelmente agindo como uma fitoanticipina (composto pré-formado), associada aos tecidos jovens, e que a via dos JAs pode estar envolvida em sua regulação. Em conjunto, nossos resultados ampliam o conhecimento sobre a atuação dos JAs em plantas / Abstract: Jasmonates (JAs) are lipid-derivative compounds that regulate growth, development and tolerance against stresses in plants. They are powerful inducers of gene expression, although little information is available about the components that activate its biosynthesis and mediate its signal transduction. Through macroarray technique, we studied the expression profile of 1,536 sugarcane ESTs, generated by the SUCEST (Sugarcane EST Project) in response to methyJ jasmonate (MeJA) treatment. Significant changes were observed in 26 ESTs, encoding proteins acting in diverse processes such as photosynthesis, senescence, protein synthesis, stresses responses, as well as those coding proteins with unknown fundions. Among them, we identified one enzyme catalyzing the last step in the production of sinapoylmalate, a compound responsible for UV tolerance. We also identified genes coding novel proteins presenting signaling domain(s), such as a ZINC FINGER protein (SCZF) , that was studied in details and observed to be induced by ABA and more expressed in plants with smaller sucrose levels. We also used data mining approach to anaJyze the SUCEST data base. A search for metabolic pathways regulated by JAs was performed. Initially, we generated a database containing sequences of proteins reported to be modulated by JAs. This bank was used for development ofthe homepage (http://est.cbmea.unicamp.brliasmonatos) related to JAs responsive genes. Data mining analysis detected the presence of dhurrin, a cyanogenic compound originally described in sorghum. Evolutionary studies of the sugarcane enzyme resulted in the possibility that dhurrin was a conserved compound in sugarcane. To test this hypothesis, we analyzed sugarcane leaf extracts by High Performance Uquid Chromatography (HPLC), and confirmed the presence of dhurrin in a concentration of -2 ng for gram of fresh weight. To evaluate dhurrin concentration afier stress stimulation in sugarcane, we performed a leaf wounding experimento This study showed a relative stability in dhurrin contents in sugarcane, suggesting a fine regulation of dhurrin levels by the synthesis and degradation enzymes. To evaluate this regulation we analyzed gene transcription of two genes in response to herbivory attack (Diatraea saccharalis) and MeJA The genes evaluated were UDP-glu, a gene that encodes a glucosyJtransferase An'7Vm... ,.::ri~lv7inn thF! I~st steo in dhurrin biosvnthesis. and dhurrinase (dht), that encodes by exposition to MeJA To investigate the tissue-specificity of genes of dhurrin pathway, we used the Digital mRNA expression profile approach. and observed the induction of UDP-glu and dhr genes, both dhr genes, both confirmed by Northem blot. These results allowed us to hypothesize that dhurrin acts in sugarcane as a phytoanticipin (a preformed defense compound) that is associated to young tissues and regulated by JAs. In conclusion, these results extend our knowledge conceming JAs action in plants, helping to understand the functionality of some sugarcane genes, and open perspectives for identification of new compounds / Doutorado / Genetica Vegetal e Melhoramento / Genetica e Biologia Molecular

Submitted by Israel Vieira Neto (israel.vieiraneto@ufpe.br) on 2015-03-05T18:09:39Z No. of bitstreams: 2 Dissertação Arthur Clark.pdf: 949278 bytes, checksum: 78006d0f73ffcf14fef6406e3d4a8c16 (MD5) license_rdf: 1232 bytes, checksum: 66e71c371cc565284e70f40736c94386 (MD5) / Made available in DSpace on 2015-03-05T18:09:39Z (GMT). No. of bitstreams: 2 Dissertação Arthur Clark.pdf: 949278 bytes, checksum: 78006d0f73ffcf14fef6406e3d4a8c16 (MD5) license_rdf: 1232 bytes, checksum: 66e71c371cc565284e70f40736c94386 (MD5) Previous issue date: 2012-08-03 / Poli-N-lactosamina (poliLacNAc) é uma estrutura fundamental nos glicoconjugados expressa especificamente em células/tecidos de forma associada ao desenvolvimento e carcinogênese. Beta-1,3-N-acetilglucosaminil transferases (β3GnTs) possuem um importante papel na síntese de poliLacNAc, entretanto a ação das β3GnTs na síntese in vivo continuam desconhecidos. A expressão de duas glicosiltransferases, β3GnT2 e β3GnT3, foram avaliadas em amostras cervicais uterinas normais e com lesões malignas (carcinoma escamoso) e prémalignas (NIC 1, 2 e 3) usando imunohistoquímica. Histoquímica com lectinas, com Phytolacca americana lectin (PWM) e Wheat germ agglutinin (WGA), também foi realizada para a análise da presença de cadeias de poliLacNAc e de N-acetilglucosamina (GlcNAc), respectivamente. β3GnT3 foi expressa em quase todas as amostras (99%) e β3GnT2 foi mais expressa nas amostras com lesões (p = 0,0093). A expressão de poliLacNAc (p = 0,0002) e GlcNAc (p = 0,0001) também se mostrou mais frequente nas amostras com lesões. Nossos dados sugerem que a β3GnT2 seja a principal enzima responsável pela síntese de cadeias de poliLacNAc na cérvice uterina e que ela possa ser utilizada como um potencial biomarcador para a presença de lesões.

Submitted by Paula Quirino (paula.quirino@ufpe.br) on 2015-03-05T18:57:05Z No. of bitstreams: 1 DISSERTAÇÃO Pâmela Rocha Bagano Guimarães.pdf: 1767266 bytes, checksum: 803acc98b4a2e966ff0e682a3fd12008 (MD5) / Made available in DSpace on 2015-03-05T18:57:05Z (GMT). No. of bitstreams: 1 DISSERTAÇÃO Pâmela Rocha Bagano Guimarães.pdf: 1767266 bytes, checksum: 803acc98b4a2e966ff0e682a3fd12008 (MD5) Previous issue date: 2014 / O estudo sobre as emoções por muito tempo foi esquecido em favorecimento das investigações sobre a razão. Por anos o dualismo de Descartes fez esses aspectos da constituição humana esquecidos. Contudo, nos últimos anos, o interesse, em especial pela expressividade emocional através de gestos e expressões, vem crescendo e se especializando cada vez mais, especificamente sobre o reconhecimento de expressões faciais emocionais. Estudos transculturais corroboraram a ideia de universalidade das emoções defendidas por Darwin, e conceberam que pelo menos seis emoções possuem traços semelhantes entre a espécie humana: Alegria, Tristeza, Raiva, Medo, Surpresa e Nojo. Atualmente os métodos de investigação desenvolvidos para mensurar o reconhecimento emocional são bem variados, passando de técnicas visuais, auditivas e até fisiológicas. A literatura atual aponta para técnicas mais dinâmicas, como vídeos, para melhor avaliar o reconhecimento emocional. Neste contexto, buscou-se com esse trabalho elaborar um instrumento que apresentasse mais pistas situacionais, com imagens dinâmicas para o reconhecimento emocional. No instrumento são apresentados estímulos dinâmicos em diferentes intensidades para cada uma das seis emoções. Neste aspecto, em especial, o instrumento construído se diferencia das outras técnicas de mensuração de reconhecimento emocional. Para construção deste instrumento dois estudos foram realizados. O primeiro estudo contou com a colaboração de 23 jovens adultos da cidade de Petrolina-PE. Nesta etapa foi realizada a criação do instrumento, partindo da seleção dos vídeos disparadores das emoções básicas, até as análises de juízes das imagens capturadas e construção da versão informatizada do instrumento. O segundo estudo contou com a colaboração de 201 jovens adultos da cidade de Petrolina. Os resultados apontaram para uma boa adequação do instrumento. Determinou-se um fator geral composto por todas as seis emoções. Quando as emoções foram analisadas separadamente, a emoção de Surpresa apresentou um resultado pouco satisfatório, sendo apontada a necessidade de um melhoramento dos itens. Com relação às variáveis dependentes do estudo, identificou-se influência da intensidade das expressões no reconhecimento das emoções, com exceção dos itens da emoção medo. Quanto ao sexo do participante, o estudo encontrou um melhor desempenho dos homens. Por fim, considera-se que a pesquisa atingiu seu objetivo construindo e testando um instrumento de reconhecimento emocional, que considera a influência da intensidade da expressão e o sexo do ator no estímulo desencadeador.