O presente trabalho descreve o preparo, a caracterização e o uso de eletrodo modificado com polímero de azul de metileno (PMB) imobilizado sobre a superfície de eletrodo de carbono vítreo (GCE-PMB) na análise do herbicida glifosato. O método utilizado para a preparação dos filmes do PMB foi a eletropolimerização. Os filmes preparados por este método apresentam características diferenciadas tais como robustez, estabilidade e propriedade redox satisfatória. As condições experimentais otimizadas foram a velocidade de varredura (50 mV s-1), o intervalo de potencial (-0,4 a +1,2 V), o número de ciclos (30) e o pH da solução do eletrólito suporte (pH 8). A solução de eletrólito suporte foi preparada a partir das soluções de tampão fosfato (0,05 mol L-1) e NaNO3 (0,1 mol L-1), pH 8. A mesma foi utilizada no preparo da solução de azul de metileno (MB) (0,25 x 10-3 mol L-1), no pré-tratamento do eletrodo de carbono vítreo (GC) por voltametria cíclica (CV) e no preparo de soluções para os estudos iniciais com o GCE-PMB. O pré-tratamento da superfície do eletrodo de GC foi realizado aplicando + 0,9 V por 240 s seguido de várias varreduras cíclicas de -0,4 a +1,0 V com velocidade de varredura de 50 mV s-1 até obter um perfil estável do voltamograma do eletrodo. Após o preparo do GCE-PMB, a atividade eletrocatalítica do eletrodo foi investigada para o Ácido Ascórbico (AA) e a L-Cisteína (L-Cys) por CV de -0,4 a +0,6. Foi observado aumento da corrente de pico e diminuição do sobrepotencial em relação ao eletrodo de GC. Nos estudos na presença do glifosato, o GCE-PMB apresentou resposta eletroquímica direta, por voltametria cíclica, para o glifosato (1,0 x 10-3 mol L-1) em solução de KCl 0,1 mol L-1 (pH 5,3) de -0,4 a +0,6 V e velocidade de varredura 50 mV s-1. A resposta voltamétrica apresentou picos anódico e catódico em 0,2 e 0, respectivamente. Para os estudos realizados por meio da técnica de voltametria de onda quadrada (SWV), os parâmetros freqüência, amplitude e incremento de varredura foram otimizados. A partir desses estudos foi possível obter informações relevantes sobre a interação do GCE-PMB com o glifosato. Os resultados mostraram que é possível observar a eletroatividade do herbicida glifosato sobre uma superfície eletródica sem a presença de metais como agentes complexantes. / This work describes the preparation, characterization and the use of the modified electrode with methylene blue polymer (PMB) immobilized onto the surface of glassy carbon electrode (GCE-PMB) in the analysis of the herbicide glyphosate. Concerning the methodology aspects, the method used for the preparation of the films PMB was the electropolymerization. The films prepared by this method present a differentiated characteristic such as robustness, stability and good redox properties. The optimized experimental conditions are the scan rate (50 mV s-1), the potential range (-0.4 to +1.2 V), the number of cycles (30) and the pH of the supporting electrolyte (pH 8). The supporting electrolyte solution was prepared from phosphate buffer solutions (0.05 mol L-1) and NaNO3 (0.1 mol L-1), pH 8. The same solution was used to prepare the solution of methylene blue (MB) (0.25 x 10-3 mol L-1), the pretreatment of the GC electrode by cyclic voltammetry (CV). It was also utilized in preparing solutions for the initial studies with GCE-PMB. The pre-treatment of the electrode surface of GC was performed, considering 0.9 V during 240 s, followed by several cyclic scans from -0.4 to 1.0 V (with scan rate of 50 mV s-1) until a stable profile of the voltammogram. After preparing the GCE-PMB, electrocatalytic activity it was investigated for Ascorbic Acid (AA) and L-Cysteine (L-Cys) by CV from -0.4 to +0.6 V. It was observed increase in peak current and decrease the overpotential comparing to glassy carbon electrodes. The GCE-PMB presented direct electrochemical response, for glyphosate (1 x 10-3 mol L-1) in KCl 0.1 mol L-1 (pH 5.3) from -0.4 to +0.6 V and scan rate 50 mV s-1. The voltammetric response showed anodic and cathodic peaks in 0.2 and 0, respectively. Using the square wave voltammetry (SWV), the parameters frequency, amplitude and scan increment were optimized. It was possible to find relevant information about the interaction between GCE-PMB and glyphosate. These results showed that is possible observe the electroactivity of glyphosate on a modified electrodic surface in absence of metals or complexing agents.

Orientador: Caio Antonio Carbonari / Banca: Edivaldo Domingues Velini / Banca: Ricardo Victória Filho / Resumo: A tecnologia EnList foi desenvolvida pela empresa Corteva Agriscience, e permite a aplicação dos herbicidas 2,4-D e haloxyfop-methyl sobre o milho, devido à presença do gene aad-1, além da resistência ao glyphosate e amônio glufosinato. O objetivo deste trabalho foi avaliar a seletividade de diferentes herbicidas sobre a cultura do milho com a tecnologia EnList. Os experimentos foram conduzidos em campo e casa de vegetação. Os herbicidas aplicados foram: haloxyfop-methyl, 2,4-D, e glyphosate. Os ensaios realizados em casa-de-vegetação foram organizados em delineamento inteiramente casualisado, constituídos por cinco repetições. Os herbicidas foram aplicados em pós-emergência (V4), e obteve-se as seguintes variáveis: taxa de transporte de elétrons do Fotossistema II (Electron Transport Rate - ETR), injúria visual, e altura aos 7, 14, 21 e 28 dias após aplicação (DAA). Aos 28 DAA, foram coletadas as plantas para a obtenção da massa seca final. Os experimentos 1 e 2 corresponderam a aplicação de todos os herbicidas acima, tanto de forma isolada como em misturas. Neste mesmo estudo, foi instalado um ensaio adicional a campo para testar os parâmetros produtivos, porém com a adição de amônio-glufosinato. Os demais experimentos constituíram-se de ensaios de dose-resposta para cada um dos três herbicidas estudados, comparando-se um material com a tecnologia EnList, e sua isolinha sem o gene aad-1. Portanto, os ensaios 3 e 4 se referiram a aplicação de doses crescentes de 2,4-D, que f... (Resumo completo, clicar acesso eletrônico abaixo) / Abstract: The EnListTM traits were developed by Corteva Agriscience, and provide both 2,4-D and haloxyfop-methyl resistance for maize due to the aad-1 gene. In addition, it presents glyphosate and ammonium-glufosinate resistance. The objective of this research was to assess the selectivity of different herbicides for EnListTM maize. The experiments were conducted both in the field and in greenhouse. The herbicides applied were: haloxyfop-methyl, 2,4-D, and glyphosate. The greenhouse treatments were arranged in a completely randomized design and consisted of five replications. The herbicides were applied in post-emergence (V4), and the variables obtained were: Electron transport rate of photosystem II (Electron Transport Rate - ETR), visual injury, and plant height at 7, 14, 21 and 28 days after application (DAA). At 28 DAA, the plants were cut for obtaining the final dry mass. The experiments 1 and 2 corresponded to the application of all the herbicides cited above, both alone and in mixtures. In this same study, an additional field trial was conducted for testing the production parameters, adding ammonium-glufosinate to some treatments. The other experiments consisted of dose-response assays for each of the herbicides cited, comparing a material with the EnListTM technology, and its isoline (non aad-1 material). The experiments 3 and 4 referred to increasing doses of 2,4-D application, which were: 0; 456; 912; 1.824; 3,648 and 7,296 g a.e ha-1. Experiments 5 and 6 corresponded to the following doses of haloxyfop-methyl: 0; 63; 126; 252; 504 and 1.008 g a.i ha-1, and in addition to the variables above, the total lipid content was analyzed by ethereal extract analysis. In experiment 7, six doses of glyphosate (0; 480; 960; 1,920; 3,840; 5,760 g a.a ha-1) were tested for each material. In the first study, the applications did not result on visual injuries or decrease of the other parameters, such as yield ... / Mestre

Las técnicas cromatográficas acopladas se encuentran entre las más sensibles y selectivas disponibles para la determinación de residuos de pesticidas en muestras medioambientales.El principal objetivo de esta Tesis es estudiar el potencial de la cromatografía líquida acoplada a cromatografía líquida (CL-CL) para el análisis de residuos de herbicidas polares seleccionados (fenoxiácidos, glufosinato, glifosato y el principal metabolito de éste último, AMPA). La aplicación de un procedimiento con acoplamiento CL-CL para la determinación de los residuos de estos herbicidas presenta numerosas ventajas, como son: menor tiempo de análisis, menor manipulación de la muestra, menor uso de disolventes orgánicos, mayor selectividad y sensibilidad y automatización de la etapa de purificación.La combinación de dos procedimientos de EFS y el acoplamiento CL-CL proporcionan un procedimiento global capaz de determinar ocho herbicidas fenoxiácidos a nivel de 0.1 g.l-1 en diferentes muestras de agua con una elevada capacidad de análisis. El procedimiento está basado en la extracción en fase sólida mediante cartucho C18 de 50 ml de muestra de agua previamente acidificada. Posteriormente, se purifica el extracto mediante un cartucho relleno de silicagel. Una alícuota de 400 µl se inyecta en el cromatógrafo líquido con columnas acopladas y detección UV a 228 nm. Se realiza una purificación sobre una pequeña columna de 10 mm rellena de la fase ISRP y se transfiere la fracción que contiene los analitos a la segunda columna de 100 mm rellena de Microspher C18, 3 µm.La aplicación de derivatización con FMOC antes de CL con columnas acopladas y detección fluorescente utilizando una columna de fase reversa acoplada a una de intercambio iónico es útil para la determinación de pesticidas muy polares como glufosinato, glifosato y AMPA en muestras de aguas a nivel de sub-ppb. La derivatización de la muestra de agua con FMOC se efectúa en medio tamponado borato; tras 30 min de reacción, se diluye con tampón borato y se inyectan 2 ml en el cromatógrafo líquido con columnas acopladas y detección fluorescente con ex = 263 nm y em = 317 nm. Se realiza una purificación sobre una columna de 30 mm rellena de fase reversa C18 y se transfiere la fracción que contiene los analitos a la segunda columna de 250 mm rellena de Adsorbosphere NH2 de 5 µm.La rapidez del procedimiento de prederivatización y el corto tiempo de análisis posterior proporciona una elevada capacidad de análisis, de al menos 50 muestras por día. El método parece ser muy robusto ya que, durante el tiempo que duraron las experiencias, la columna C18 (C-1) mantuvo su resolución y el reajuste de las condiciones de purificación y transferencia no fue necesario. La columna amino (C-2) sufrió una pérdida gradual de eficiencia, sólo advertible tras dos meses de uso continuado.

Orientador: Percília Cardoso Giaquinto / Resumo: As abelhas têm grande importância na polinização; no entanto, o desaparecimento e morte de colônias de Apis mellifera Linnaeus, 1758 (Hymenoptera: Apidae) têm aumentado em várias regiões do mundo, prejudicando a sobrevivência da espécie e a estrutura dos ecossistemas. O uso de agrotóxicos em cultivos agrícolas vem sendo apontado como um dos fatores responsáveis pela intensificação do desaparecimento das abelhas. No presente estudo, avaliou-se a toxicidade, as alterações comportamentais e motoras de abelhas campeiras de A. mellifera expostas aos herbicidas 2,4-D e glifosato, isolados ou associados, por testes de ingestão e contato. Para determinação da dose letal (DL50) foi analisada a mortalidade de abelhas expostas a diferentes doses dos herbicidas por contato e ingestão por 24 horas. A atividade motora das abelhas expostas aos herbicidas glifosato, 2,4-D e associação de ambos foi avaliada 4 e 24 horas após sua exposição utilizando caixa de observação comportamental. As DL50 encontradas dos herbicidas glifosato e 2,4-D foram respectivamente: 273,93 e 127,70 µg/abelha para ingestão e 255,73 e 97,09 µg/abelha para contato. As doses subletais dos herbicidas glifosato e 2,4-D foram, respectivamente: 5,47 e 2,55 µg/abelha para ingestão e 5,11 e 1,94 µg/abelha para contato. A dose letal de 4 horas e subletal de 24 horas foram altamente tóxicas para as abelhas causando alterações locomotoras, as quais em campo podem influenciar o forrageamento das campeiras. Dos testes de doses sub... (Resumo completo, clicar acesso eletrônico abaixo) / Abstract: Bees are very important for pollination, however, disappearance and death of Apis mellifera hives in many regions of the world has increased, damaging the species survival and ecosystems maintenance. The use of herbicides in agricultural crops has been accused as one of the factors responsible for this disappearance. This study aimed to evaluate the toxicity, behavioral and motor abnormalities on foraging honey bees Apis mellifera exposed to 2,4-D and glyphosate alone and combined. To determine the lethal dose (LD50), bees were exposed to different herbicides doses by contact or ingestion and mortality was analyzed. After 24 hours, the mortality results were analyzed. The glyphosate and 2,4-D LD50 found were, respectively: 273,93 and 127,70 μg/bee for ingestion and 255,73 and 97,09 μg/bee for contact. The sublethal doses for glyphosate and 2,4-D were, respectively: 5,47 and 2,55 μg/bee for ingestion and 5,11 and 1,94 μg/bee for contact. The bee’s motor activity was assessed 4 and 24 hours after herbicides and combination exposure, using a behavioral observation box. The 24 hours lethal and sublethal doses were highly toxic to bees causing locomotors changes, which in the field can influence the bees foraging activity. Only the 4h sublethal herbicide association test showed additive effect, however this fact deserves attention because when carried to the colony, the herbicides can influence other bees behavior and cause weakening or even death of the hive. / Mestre

Orientador: Caio Antonio Carbonari / Banca: Edivaldo Domingues Velini / Banca: Marcelo de Almeida Silva / Banca: Natália Corniani / Banca: Marcelo Rocha Corrêa / Resumo: O emprego de substâncias tóxicas as plantas, como o glyphosate, em doses muito menores que as recomendadas comercialmente pode ocasionar alterações em varáveis como crescimento, acúmulo de biomassa, altura, conteúdo de proteína e resistência a doenças. Desta forma, os objetivos deste trabalho foram realizar estudos para uma melhor compreensão das alterações bioquímicas, fisiológicas e fenológicas do arroz causadas por subdoses de glyphosate. O experimento 1 foi realizado à campo, na Fazenda Experimental Lageado, pertencente à Faculdade de Ciências Agronômicas, FCA/UNESP, Botucatu/SP, nos anos agrícolas de 2015/2016 e 2016/2017. O delineamento experimental utilizado foi o de blocos casualizados, arranjado em esquema fatorial 2x7, sendo o primeiro fator época de aplicação do glyphosate (V3 ou R1) e, o segundo, as doses do herbicida (0; 7,5; 15; 30; 60; 120 e 240 g e.a. ha-1), com quatro repetições. Foram avaliados a produtividade, o comprimento de panículas, número de perfilhos por m², peso de 1000 grãos, número de grãos por panícula, a fertilidade de espiguetas e o número de dias entre a aplicação e o início de cada fase fenológica. Os experimentos 2 e 3 foram realizados em casa de vegetação, no Núcleo de Pesquisas Avançadas em Matologia (NUPAM), pertecentente à Faculdade de Ciências Agronômicas, FCA/UNESP, Botucatu/SP. O experimento 2 seguiu delineamento inteiramente casualizado em esquema fatorial (7x3) com cinco repetições. Os tratamentos foram constituídos por sete doses d... (Resumo completo, clicar acesso eletrônico abaixo) / Abstract: / Doutor

Dissertação (mestrado) - Universidade Federal de Santa Catarina, Centro de Ciências Biológicas. Programa de Pós-Graduação em Neurociências / Made available in DSpace on 2012-10-22T13:26:26Z (GMT). No. of bitstreams: 1 232039.pdf: 624510 bytes, checksum: a2f82d223fba309422fd55ef43672f5a (MD5) / O glifosato é um herbicida sistêmico, pós-emergente e não seletivo, derivado da glicina, amplamente utilizado no Brasil para o controle de plantas daninhas, sendo comumente comercializado na forma de sal de isopropilamina. Toxicologicamente é classificado como produto da Classe IV - Pouco Tóxico, sendo sua DL50 para camundongos de 1.570 mg/kg de peso corporal, e pertence à Classe III - Produto Perigoso em relação à periculosidade ambiental. Dados da literatura referentes aos efeitos deste produto sobre a saúde humana são contraditórios e em alguns aspectos, como imunológico e comportamental, escassos. Desta maneira o objetivo deste trabalho foi avaliar o efeito da exposição sub-crônica ao glifosato sobre a resposta imune humoral, a barreia hematoencefálica e o comportamento de camundongos. Para isso quatro grupos de animais receberam o agrotóxico por via oral em doses equivalentes a 1/100 e 1/10 da DL50 do produto, em intervalos de 48 horas, por um período de 30 dias. Posteriormente um grupos de cada dosagem foram inoculados com 180 g/0,2ml de OVA por via intraperitonial nos dias 0, 7, 14, 21 do experimento este mesmo protocolo de inóculo de OVA foi repetido para o grupo que só recebeu OVA. Ao grupo controle foi administrado salina. Ao término do período de trinta dias foram realizados os testes comportamentais e coletadas amostras de sangue e cérebro. Foram realizadas as seguintes análises: os testes de campo aberto, labirinto em cruz elevado, nado forçado, dosagens de IgM e IgG totais e anti-OVA presentes no plasma e no cérebro. Os animais tratados com glifosato apresentaram redução dos valores de IgM e aumento dos de IgG, uma permeabilidade seletiva da barreira hemato-encefálica e uma tendência a menor exposição a lugares abertos, porém sem afetar o comportamento relacionado a ansiedade, e tendo uma atuação "antidepressiva", que é revertida quando há a inoculação de OVA. Os resultados demonstraram que a exposição ao glifosato compromete os parâmetros imune humoral, afeta a barreira hemato-encefálica de maneira específica e o comportamento. Isto pode levar ao comprometimento da efetividade do sistema imune e de outros sistemas, facilitando o aparecimentos de patologias. The glyphosate is a systemic, post-emergent and nonselective herbicide, derived from glycine, widely used in Brazil for the control of weeds, being commonly commercialized in the form of isopropylamine salt. Toxicologically it is classified as a Class IV product - Little Toxic - being its LD50 1570 mg/kg of body weight for mice, and belonging to Class III - Dangerous Products regarding to environmental dangerousness. Literature data referent to the effects of this product over human health are contradictory and in some aspects, as the immunological and behavior ones, rare. In this way the objective of this study was the evaluation of the effect of sub-chronic exposure to glyphosate to the humoral immune response, the blood-brain barrier and the behavior of mice. For this, four groups of animals were given the pesticide by gavage in doses equivalent to 1/100 and 1/10 of the glyphosate LD50, in intervals of 48 hours, during a period of 30 days. From this groups, two were inoculated intraperitonialy with 180 g/0,2ml of OVA in the days 0, 7, 14 and 21 of the experiment. The same protocol was applied in the group which received only OVA. To the control group only saline was given. By the end of the period, the behavior tests was applied and blood and brain samples were collected. The following analyses were made: open field, plus maze and forced swimming test, and the determination of total and anti- OVA IgM and IgG in the serum and brain samples. The glyphosate treated animals presented a reduction of IgM and an increase of IgG, a selective permeability of the bloodbrain barrier and a tendency to less exposure a open places, although without alterations in the anxiety parameters, and having an "ant depressive" actuation, which are reversed when we have the OVA inoculation. The results demonstrated that the exposure to glyphosate compromises parameters of the humoral immune system, affects the bloodbrain barrier and the behavior. This can lead to the immune system effectiveness compromising and of others systems, facilitating the surging of pathologies.

Submitted by Marco Antônio de Ramos Chagas (mchagas@ufv.br) on 2017-02-08T17:39:13Z No. of bitstreams: 1 texto completo.pdf: 1765842 bytes, checksum: 53b7eb966688033d7b494466f16ef5bc (MD5) / Made available in DSpace on 2017-02-08T17:39:13Z (GMT). No. of bitstreams: 1 texto completo.pdf: 1765842 bytes, checksum: 53b7eb966688033d7b494466f16ef5bc (MD5) Previous issue date: 2002-08-13 / Coordenação de Aperfeiçoamento de Pessoal de Nível Superior / A aplicação de herbicidas em lavouras de café em formação constitui uma prática bastante difundida. No entanto, essa prática torna-se arriscada porque faltam produtos seletivos e equipamentos que forneçam proteção adequada à planta. Dessa forma, o objetivo do presente trabalho foi projetar e construir um pulverizador de tração animal para aplicação de herbicidas em lavouras de café, em formação, oferecendo proteção à planta contra os efeitos da deriva. O trabalho foi conduzido no Laboratório de Mecanização Agrícola do Departamento de Engenharia Agrícola da Universidade Federal de Viçosa (UFV) e em uma lavoura de café (Coffea arábica, L.), variedade Catuaí com 18 meses de plantio. O equipamento construído constitui-se de dois reservatórios com capacidade individual de 50 L, uma bomba de diafragma acionada por uma bateria de 40 A/h, um conjunto regulador de pressão com manômetro, uma barra de pulverização com capacidade para dois bicos, um dispositivo protetor contra deriva e dois bicos de jato plano com distribuição uniforme. Foram avaliados: o desempenho do equipamento, o perfil da distribuição volumétrica dos bicos utilizados, a exigência energética da bomba, o dimensionamento da barra de pulverização, o dispositivo protetor contra deriva, a capacidade de retorno para agitação da calda e o dimensionamento de um suporte para o equipamento. Para a avaliação do desempenho, estudou-se o espectro da população de gotas produzidas pelo equipamento, a faixa de aplicação, a capacidade operacional, a proteção proporcionada à cultura contra danos mecânicos, os efeitos da deriva e a eficácia dos tratamentos, utilizando-se um herbicida não-seletivo. Todos os bicos apresentaram o coeficiente de variação da distribuição volumétrica superiores ao limite máximo de 9%, estabelecido para uma boa distribuição, para todas as alturas e pressões estudadas. A demanda máxima de potência requerida pela bomba a 500 kPa foi estimada em 61,71 W, sendo 26,54% inferior ao valor indicado pelo fabricante e a vazão máxima estimada foi de 3,94 Lmin -1 à pressão de 100 kPa. A menor faixa de aplicação foi de 1,16 m, proporcionada pelos bicos 80-EF-015 na pressão de 100 kPa, e a maior foi de 1,60 m com os bicos 80-EF-03. A barra de pulverização, juntamente com o dispositivo protetor, possibilitou a aplicação da calda nas duas laterais do cafeeiro, simultaneamente, com eficácia superior a 98%. A proteção contra a deriva foi considerada excelente, sendo que nenhum sinal de intoxicação pelo herbicida foi detectado na cultura. O equipamento abastecido pesou 133 kg, proporcionando uma capacidade operacional teórica de 0,43 ha h -1. / The application of herbicides on initial -stadium coffee crops is a widespread practice. However, this practice can be risky due to the lack of selective tools to provide adequate protection to the plant. Thus, this work aimed to design and build an animal -transported sprayer to apply herbicide on initial-stadium coffee crops, that could offer protection to the plant against drift effects. The work was conducted at the Laboratory of Agricultural Mechanization of the Department of Agricultural Engineering of the Universidade Federal de Viçosa (UFV), using an 18 month-old coffee (Coffea arabica, L) crop, variety Catuai. The equipment built consisted of two tanks with individual capacity of 50 L, a diaphragm pump activated by a 40 Ah battery, a manometer pressure regulator set, a spraying boom with capacity for two nozzles, a protective device against drift and two fan-type nozzles, with uniform distribution. The following aspects were evaluated: equipment performance, volumetric distribution profile of the nozzles, energetic demand of the pump, spraying bar dimensioning, drift-protecting device, the return capacity for stirring the liquid and the equipment support dimensioning. Performance was evaluated by studying the range of drops produced by the equipment, the range of application, operational capacity, protection provided to the culture against mechanical damage, drift effects and treatment efficiency, by using a non-selective herbicide. All the nozzles showed a volumetric distribution variation coefficient higher than the maximum limit of 9%, which was established for a good distribution, for all the heights and pressures studied. The maximal potency demand required by the pump at 500 kPa was estimated in 61.71 W, with 26.54% being lower than the value recommended by the manufacturer, and the maximum flow estimated was 3.94 Lmin -1 at 100 kPa pressure. The lowest application surface was 1.16 m, provided by nozzle 80-EF-015 at 100 kPa pressure, and the highest was 1.60 m, using nozzles 80-EF-03. The spraying bar, combined with the protective device, allowed the application of the liquid on both sides of the crop, simultaneously, showing an efficacy higher than 98%. Protection against drift was found to be excellent, with no signs of herbicide intoxication being detected in the culture. The full equipment weighed 133 Kg, providing a theoretical operational capacity of 0.43 ha h -1. / Dissertação importada do Alexandria

Submitted by Marco Antônio de Ramos Chagas (mchagas@ufv.br) on 2017-11-22T17:47:36Z No. of bitstreams: 1 texto completo.pdf: 2690624 bytes, checksum: 510c039d99315e52653361f40c93b221 (MD5) / Made available in DSpace on 2017-11-22T17:47:36Z (GMT). No. of bitstreams: 1 texto completo.pdf: 2690624 bytes, checksum: 510c039d99315e52653361f40c93b221 (MD5) Previous issue date: 2017-07-28 / Coordenação de Aperfeiçoamento de Pessoal de Nível Superior / O milho (Zea mays L.), além de ser um dos grãos de maior importância econômica no mundo, é um importante modelo em diversos estudos com plantas. Em virtude da sua grande importância econômica, a minimização da perda na produtividade tem sido priorizada em pesquisas e em programas de melhoramento dessa cultura. O advento do uso de defensivos agrícolas é uma das alternativas adotadas mundialmente para assegurar aumento de produtividade, principalmente em plantações de milho. Os pesticidas são muito eficazes no controle das pragas e na manutenção do nível de produção, mas podem gerar danos a nível genético na planta. Uma forma de avaliar a ocorrência de danos na molécula de DNA tem sido pelo uso da técnica de ensaio cometa, ou eletroforese de célula única. A aplicação dessa metodologia é relativamente rápida, sensível e simples para quantificar danos e reparo no DNA, conforme verificado com sucesso em testes com células humanas e de diversos outros organismos. Portanto, torna-se imperativo e de grande importância a padronização desta técnica para a avaliação da genotoxicidade em plantas, principalmente em culturas de grande importância econômica. O presente trabalho adaptou a metodologia de ensaio cometa em milho, utilizando tanto folha como raízes. Nas adaptações envolvendo raízes, foram avaliados dois métodos de isolamento nuclear, utilizando protoplasto e chopping, incluindo testes para verificar o efeito da sincronização nuclear com hidroxiureia (HU) nas raízes. O uso de núcleos oriundos de protoplasto se mostrou mais eficiente nos ensaios, bem como o tratamento com HU gerou núcleos sincronizados sem danos detectáveis no DNA. Tal procedimento foi útil para padronização do tamanho dos núcleos analisados. Nas adaptações metodológicas envolvendo núcleos oriundos de folhas, o ensaio cometa foi utilizado para avaliar a genotoxicidade associada ao tratamento com Roundup®, herbicida a base de glifosato, em dois híbridos de milho, um resistente à aplicação do herbicida e ou suscetível ao mesmo. Ambos os híbridos apresentaram danos nas moléculas de DNA. A planta não-resistente apresentou sinais de genotoxicidade associado a todos os tratamentos com glifosato. Já o híbrido resistente só teve danos genotóxicos nos tratamentos com as doses mais altas, indicando que a dose recomendada para uso do herbicida não gera danos no DNA deste híbrido. / Maize (Zea mays L.), besides being one of the greater economic importance grains in the world, is an important model in several studies with plants. Due to its great economic importance, the minimization of productivity loss has been prioritized in research and in breeding programs of this crop. The advent of the use of pesticides is one of the alternatives adopted worldwide to ensure increased productivity, especially in maize plantations. The pesticides are very effective in controlling pests and maintaining the production level, but can cause genetic damage to the plant. One way to assess the occurrence of DNA molecule damage has been through the use of the comet assay technique, or single cell electrophoresis. The application of this metodology is relatively fast, sensitive and simple to quantify DNA damage and repair, as successfully verified in tests with human cells and several other organisms. Therefore, it is imperative and of great importance the standardization of this technique for genotoxicity evaluation in plants, especially in great economic importance crops. The present work adapted the comet assay methodology in maize, using both leaf and roots. In the adaptations involving roots, two methods of nuclear isolation were evaluated, using protoplast and chopping, including tests to verify the effect of nuclear synchronization with hydroxyurea (HU) on the roots. The use of protoplast nuclei proved to be more efficient in the assays, as well as the treatment with HU generated synchronized nuclei without detectable DNA damage. Such procedure was useful for standardizing the size of the nuclei analyzed. In the methodological adaptations involving nuclei originating from leaves, the comet assay was used to evaluated the genotoxicity associated with Roundup® treatment, glyphosate-based herbicide, in two maize hybrids, one resistant to herbicide application and the other susceptible to it. Both hybrids showed DNA molecules damages. The non-resistant plant showed genotoxicity signs associated with all glyphosate treatments. However, the resistant hybrid only had genotoxic damages in the highest doses treatments, indicating that the recommended dose for use of the herbicide does not generate damage in the DNA of this hybrid.

Submitted by Reginaldo Soares de Freitas (reginaldo.freitas@ufv.br) on 2016-10-03T17:45:35Z No. of bitstreams: 1 texto completo.pdf: 2405112 bytes, checksum: 3e37b54e3cf7fdf6148affe908cfa620 (MD5) / Made available in DSpace on 2016-10-03T17:45:35Z (GMT). No. of bitstreams: 1 texto completo.pdf: 2405112 bytes, checksum: 3e37b54e3cf7fdf6148affe908cfa620 (MD5) Previous issue date: 2003-07-18 / Coordenação de Aperfeiçoamento de Pessoal de Nível Superior / O desenvolvimento, através de planejamentos experimentais, de um procedimento voltamétrico de análise, simples, rápido, sensível e de baixo custo, para a determinação do herbicida glifosato, é descrito. O comportamento eletroquímico deste herbicida exibe a corrente baseada na redução do grupo N-nitroso, adicionado à sua molécula. Os parâmetros de duas diferentes técnicas voltamétricas, a voltametria com onda quadrada (S WV) e a voltametria com pulso diferencial (DP V), foram otimizados. As variáveis selecionadas para o estudo foram: incremento de voltagem (V), amplitude (V), freqüência (Hz), concentração do eletrólito de suporte (mol L -1) e a área da gota (mm2), para a S WV, além das variáveis, incremento de voltagem (V), amplitude do pulso (V), tempo de pulso (s), tempo do incremento de voltagem (s) e concentração do eletrólito de suporte (mol L -1), para a DP V. Um estudo preliminar, dos níveis dos fatores, foi executado antes da etapa de triagem, que empregou neste último, um planejamento fatorial 25 completo, tanto para a S WV quanto para a DP V. Nesta etapa, após avaliação dos efeitos, as variáveis selecionadas para o estudo da superfície de resposta, que empregou o planejamento C C D- central composite design, para a voltametria com onda quadrada foram: incremento de voltagem, amplitude e concentração do eletrólito de suporte; e para a voltametria com pulso diferencial, foram: incremento de voltagem, amplitude do pulso e tempo de pulso. As condições ótimas encontradas para se obter a melhor resposta voltamétrica foram para a S WV: 0,02502 volt, 0,125 volt, 70 Hz e 1,25 mol L -1 para os fatores, incremento de voltagem, amplitude, freqüência e concentração do eletrólito de suporte, respectivamente, e para a DP V foram: 0,026 volt, 0,175 volt, 0,0075 seg., 0,50 seg e 1,00 mol L -1 para os fatores incremento de voltagem, amplitude do pulso, tempo do pulso, tempo do incremento de voltagem e concentração do eletrólito de suporte, respectivamente. O parâmetro área da gota, foi fixado nas duas técnicas em 0,60 mm 2. Aplicando as condições otimizadas, a faixa linear foi de 0,050 a 100,0 μ g mL -1 para a S WV e de 0,010 a 100,0 μ g mL -1 para a DP V. Os limites de detecção e de quantificação foram, respectivamente, de 1,20 e 60,0 μ g L -1 para a S WV e de 22,0 e 53,8 μ g L -1 para a DP V. Finalmente, o método voltamétrico com pulso diferencial foi usado para determinar a concentração do herbicida glifosato em amostras de água, solo e vegetais, naturais e/ou fortificadas, sendo que as mesmas foram previamente purificadas em uma coluna cromatográfica com resina de troca-iônica, seguido de tratamento do eluato com carvão ativado e posterior derivatização. A BSTRACT TE ÓFILO, R einaldo Francisco, M.S ., Universidade Federal de Viçosa, J uly, 2003. / The development, by experimental design, of a voltammetric procedure of analysis, in a simple, fast, sensible and low cost way to determine the glyphosate herbicide is described. The electrochemical behavior of this herbicide exhibits the current based on the reduction of the N-nitroso group added to its molecule. The parameters of two different voltammetric techniques, the square wave voltammetry (S WV) and the differential pulse voltammetry (DP V), were optimized. The selected variables to the study were the voltage step (V), the amplitude (V), the frequency (Hz), the supporting electrolyte concentration (mol L -1) and the drop size (mm2), in the S WV case, besides the following variables, voltage step (V), pulse amplitude (V), pulse time (s), voltage step time (s) and the supporting electrolyte concentration (mol L -1), to the DP V. A preliminary study of the factor levels was performed before the screening phase, which applied to the last one a 2 5 full factorial design, to the S WV as the DP V. In this stage, after checking the effects the selected variables to the response surface study that used the C C D - C entral C omposite Design, to the square wave voltammetry were: voltage step, amplitude and support electrolyte concentration, and to the differential pulse voltammetry they were the voltage step, the pulse amplitude and the pulse time. The optimum conditions that allowed the best voltammetric response to the S WV were 0,02502 volt, 0,125 volt, 70 Hz and 1,25 mol L -1 to the factors voltage step, amplitude, frequency and support electrolyte concentration, respectively, and to the DP V were 0,026 volt, 0,175 volt, 0,075 seg. and 1,00 mol L -1 to the factors voltage step, pulse amplitude, pulse time, voltage step time and supporting electrolyte concentration, respectively the drop size parameters was fixed in both techniques in 0,60 mm2. Applying the optimized conditions, the linear range was from 0,050 to 100,0 μ g mL -1 to the S WV and from 0,010 to 100,0 μ g mL -1 to the DP V. The detection and quantification limits were, respectively, 1,20 and 60,0 μ g mL -1 to the S WV, and 22.0 and 53,8 μ g mL -1 to the DP V. Finally, the differential pulse voltammetry was used to determine the glyphosate herbicide in water, soil and vegetables samples, being these ones natural, some of them fortified, which was previously purified by a chromatographic column on ion-exchange resin, followed of an eluato treatment using activated charcoal and later derivatization.

Dissertação (mestrado) - Universidade Federal de Santa Catarina, Centro de Ciências Biológicas, Programa de Pós-Graduação em Biologia Celular e do Desenvolvimento, Florianópolis, 2015. / Made available in DSpace on 2015-10-06T04:06:43Z (GMT). No. of bitstreams: 1 334702.pdf: 1926534 bytes, checksum: e711854e530b3173555ba9ad179c9cfd (MD5) Previous issue date: 2015 / O glifosato é um herbicida utilizado para inibir o crescimento de plantas daninhas. Este herbicida é solúvel em água e, quando aplicado em sistemas terrestres, infiltra no solo atingindo os ecossistemas aquáticos e consequentemente, afetando organismos não-alvo. O objetivo deste estudo foi caracterizar os efeitos de 65 µg/L glifosato sobre a organização estrutural e ultraestrutural das células somáticas e germinativas durante a espermatogênese de Danio rerio. A concentração de glifosato utilizada corresponde ao limite máximo estabelecido pelo CONAMA para águas de abastecimento par consumo humano. Os resultados mostram aumento significativo de micronúcleos, além de aumento significativo no índice gonadossomático (IGS) nos machos expostos por 360 h. A análise estrutural permitiu o reconhecimento em todos grupos de três estágios de cistos germinativos organizados próximos a parede dos testículos, que correspondem aqueles compostos por: (i) espermatogônias, (ii) espermatócitos, (iii) espermátides (iniciais e tardias); além da presença de espermatozoides no lúmen do túbulo seminífero. Na análise ultraestrutural observou-se alterações nas células de Sertoli, com perda da densidade do citoplasma e das organelas, bem como o aparecimento de estruturas com aspecto vesicular. Além dessas, foram observadas alterações das interações entre células de Sertoli e células germinativas e perda das pontes citoplasmáticas entre as células germinativas. Na análise de expressão da proteína envolvida no estresse celular foi observado no grupo exposto por 144 h, aumento significativo de HSP70 induzível, a qual não foi mais observado em 360 h. Na quantificação de FASL, envolvida na indução à apoptose, observou-se aumento significativo nos machos expostos por 360 h. Embora neste estudo, tenha sido reconhecido uma aumento de FASL, não foram observadas modificações na expressão nenhuma das proteínas de ativação à apoptose investigadas (BCL2, BAK e caspase 3). Os efeitos adversos do glifosato sobre os testículos, principalmente sobre células de Sertoli, são um importante indicativo sobre as consequências na reprodução de peixes, que podem abranger desde o nível celular, sistêmico e populacional. Por fim, este estudo demonstrou a importância de se investigar a toxicidade do glifosato sobre a reprodução masculina, utilizando testículos de peixe como modelo experimental.<br> / Abstract : Glyphosate is herbicide used to inhibit the growth of weeds. This herbicide is soluble in water, and when applied in terrestrial systems, glyphosate infiltrates into the soil, reaching aquatic ecosystems and consequently affecting nontarget organisms. The aim of this study was to characterize the effect of 65 µg/L glyphosate on the structural and ultrastructural organization of somatic and germ cells during Danio rerio spermatogenesis. Glyphosate concentration used corresponds to the maximum level stated by CONAMA for waters for human consumption. Our results showed significant increase of the micronuclei, as well as, significant increase in GSI on males exposed to glyphosate for 360 h. Structural analysis allowed the recognition in all groups of three germ cysts stages, organized near to the testes wall, that correspond to those that contains: (i) spermatogonia, (ii) spermatocytes (iii) spermatids (early and late), and the presence of sperm in the lumen of the seminiferous tubule. On the ultrastructural analysis, alterations were observed in Sertoli cells, with density loss of the cytoplasm and organelles, as well as, the appearence of structures with vesicular aspect. Moreover, alterations on interactions between Sertoli and germ cells and loss of cytoplasmic bridges between the germ cells. On the analysis of protein expression involved in cell stress, was observed after 144 h a significant increase in the inducible HSP70 protein, which is no observed at 360 h. In the quantification of FASL, involved in apoptosis induction, there was a significant increase in males exposed for 360 h. Although in this study has been recognized a FASL increasing, there was no observed modifications on expression of the investigated proteins that activate apoptosis (BCL2, BAK and Caspase 3). The adverse effects of glyphosate on the testicles, mainly on Sertoli cells, are an important indicative of the consequences on fish reproduction, which may include from the cellular, systemic and population levels. Finally, this study demonstrated the importance of investigating the glyphosate toxicity on male reproduction, using fish testicles as experimental model.