Coordenação de Aperfeiçoamento de Pessoal de Nível Superior / Leprosy is a chronic infectious disease caused by Mycobacterium leprae, intracellular bacterium that causes skin lesions and neurological disorders with sensory loss. The disease constitutes a major public health problem, including Brazil. Many aspects of its immunopathogenesis are still unclear. The inability of growth in culture of bacillus impedes a greater number of experimental studies. The use of recombinant antigens is an important tool for the identification of specific proteins of M. leprae with potential for future use in immunodiagnostic tests in immunoprophylaxis and immunotherapy. The aim of this study was to evaluate the immune response to antigens of M. leprae and M. tuberculosis in protection and pathogenesis of leprosy, using a simple assay with whole blood. Patients with confirmed diagnosis of leprosy using clinical, bacteriological and histological were selected. The operational classification of patients and neurological examination to evaluate the degree of disability were performed. Patients were followed up and some of them have evolved with reactions. The controls household contacts of patients were also selected. The peripheral blood of 55 patients with leprosy, without treatment (39 paucib acillary and 16 multibacillary)and 31 controls were stimulated with antigen crude sonicate of M. leprae (MLCs), purified antigen derived from M. tuberculosis (PPD), 12 recombinant antigens of M. leprae (ML0276, ML2028, ML2055, ML2258, ML2531, ML2629, ML82F, ML2044, ML2380, ML2331, and LID1 PADL) and 2 M. tuberculosis (ID93, ID83). After 24 hours of incubation supernatants were collected and concentrations were determined cytokines IL-2, IL-4, IL-5, IL-6, IL-10, IL-12p70, IL-13, IL-15, 1L-17A, IL-23, IL-27, IFN-γ, TNF-α and TGF-β, and the chemokine eotaxin, MCP-1 and MIP-1α by Luminex technique. We observed a high concentration of IFN-γ and IL-2 (response Th1) in response to antigens MLCs and PPD in patients with paucibacillary forms and controls in contacts of patients, compared to those with multibacillary forms of the disease. However, no statistically significant differences were observed when analyzing the response to such antigens in patients who subsequently developed with leprosy reactions (n=26) and did not develop leprosy reaction (n = 16) and had the beginning of treatment, degree of disability Physical 0 (n=22) in comparison with the first and second (n=33). Higher concentrations of IFN-γ were detected in patients paucibacillary PADL in response to antigen when compared with patients multibacillary. There was also increased production of MCP-1 in response to ML2531 ID93 and in patients who developed reactions. In conclusion, the production of MCP1 in response to antigens ML 2531 and ID93 can be assayed as a marker of leprosy reactions, antigen MLCs shows a behavior similar to PPD antigen and may be a marker of protective response in leprosy. The PADL antigen may be associated with induction of protective response, suggesting that PADL and MLCs are promising antigens for use in immunotherapy or immunoprophylaxis in leprosy. / A hanseníase é uma doença infecciosa crônica causada pelo Mycobacterium leprae, bactéria intracelular que causa lesões cutâneas e neurológicas com perda de sensibilidade. A doença se constitue num importante problema de saúde pública, inclusive no Brasil. Muitos aspectos da sua imunopatogênese ainda não foram esclarecidos. A impossibilidade de crescimento do bacilo em cultura inviabiliza um maior número de estudos experimentais. O uso de antígenos recombinantes é uma importante ferramenta na identificação de proteínas específicas do M. leprae com potencial para utilização futura em testes imunodiagnósticos, em imunoprofilaxia e imunoterapia. O objetivo desse trabalho foi avaliar a resposta imune a antígenos de M. leprae e M. tuberculosis na proteção e patogênese da hanseníase, utilizando um ensaio simples com sangue total. Pacientes com diagnóstico confirmado de hanseníase utilizando critérios clínicos, baciloscópico e histopatológico foram selecionados. A classificação operacional dos pacientes e o exame neurológico para avaliação do grau de incapacidade física foram realizados. Os pacientes foram acompanhados e alguns deles evoluíram com reações hansênicas. Os controles intradomiciliares contactantes dos pacientes foram também selecionados. O sangue periférico de 55 pacientes com hanseníase, sem tratamento (39 paucibacilar e 16 multibacilar) e 31 controles foram estimulados com o antígeno bruto sonicado de M. leprae (MLCS), antígeno purificado derivado de M. tuberculosis (PPD), 12 antígenos recombinantes de M. leprae (ML0276, ML2028, ML2055, ML2258, ML2531, ML2629, ML82F, ML2044, ML2380, ML2331, LID1 e PADL) e 2 de M. tuberculosis (ID93, ID83). Após 24h de incubação os sobrenadantes foram coletados e foram determinadas as concentrações das citocinas IL-2, IL-4, IL-5, IL-6, IL-10, IL-12p70, IL-13 IL-15, 1L-17A, IL- 23, IL-27, IFN-γ, TNF-α e TGF-β, e das quimiocinas eotaxina, MCP-1 e MIP-1α, pela técnica de Luminex. Foi observada uma elevada concentração de IFN-γ e IL-2 (resposta Th1) em resposta aos antígenos MLCS e PPD em pacientes com as formas paucibacilares e nos controles contactantes dos doentes, quando comparados àqueles com as formas multibacilares da doença. Porém, não foi observado diferenças estatisticamente significativas quando analisada a resposta a esses mesmos antígenos em pacientes que posteriormente evoluíram com reações hansênicas (n=26) e não evoluíram com reação hansênica (n=16) e que tinham ao início do tratamento, grau de incapacidade física 0 (n=22) em comparação com 1 e 2 (n=33). Maiores concentrações de IFN-γ foram detectadas em pacientes paucibacilares em resposta ao antígeno PADL, quando comparado com os pacientes multibacilares. Houve também maior produção de MCP-1 em resposta ao ID93 e ML2531 nos pacientes que evoluíram com reações hansênicas. Em conclusão, a produção de MCP1 em resposta aos antígenos ID93 e ML 2531 pode ser testada como marcador de reações hansênicas, o antígeno MLCS apresenta um comportamento semelhante ao antígeno PPD e pode ser um marcador de resposta protetora na hanseníase. O antígeno PADL pode estar associado à indução de resposta protetora, sugerindo que MLCS e PADL são antígenos promissores para utilização em imunoterapia ou imunoprofilaxia na hanseníase.

Leprosy still constitutes a major problem of public health, in view of its prevalence, morbidity and mortality determined by its complications and its enormous social and economic impact. It is a chronic, infectious disease with long incubation period, caused by Mycobacterium leprae, required intracytoplasmic parasite that affects peripheral nerves and skin. Meet the histological pattern of injury is extremely important for the knowledge base, characterization and treatment of the disease. This research aimed to study the morphology and morphometry of collagen fibers of the extracellular matrix biopsy of patients with leprosy tuberculoid and lepromatous poles. For both experimental and descriptive research was carried out. A total of 20 paraffin blocks, biopsies of patients with leprosy. From these blocks were made in microtome histological sections serially to 5 mm thick, which were submitted to staining: hematoxylin-eosin and hematoxylin-picrosirius. Analyses were performed using images captured by video camera attached to a light microscope Olympus, with an increase of 100 X. From the images obtained from the slides stained with hematoxylin picrosírius- was performed morphometric analysis of collagen fibers through the software Image J®. The information collected was codified and entered into a database for statistical analysis. Significant differences were observed in the inflammatory infiltrate of default in the distribution of collagen fibers and collagen density between the polar forms of leprosy. The tuberculoid form is characterized by inflammatory infiltrate with multiple well-formed and defined granulomas, basically composed of lymphocytes and epithelioid macrophages. Intense inflammatory infiltrate is observed in lepromatous leprosy, distributed diffusely, formed by irregular plates with ill-defined boundaries, composed largely of foamy macrophages. The two poles of the disease, there is a predominance of type I collagen fibers arranged interlaced form. Type III collagen fibers are distributed evenly between the type I, but in less proportion. Type III collagen is more abundant in lepromatous than in tuberculoid form. The degree of collagenization is greater in tuberculoid leprosy compared to lepromatous pole of the disease. / A hanseníase ainda se constitui em um relevante problema de saúde coletiva, em vista de sua prevalência, morbidade e mortalidade determinadas por suas complicações e seu enorme impacto social e econômico. É uma doença crônica, infecciosa com período de incubação prolongado, causada pelo Mycobacterium leprae, parasita intracitoplasmático obrigatório, que afeta nervos periféricos e pele. Conhecer o padrão histológico da lesão é de extrema importância para a base do conhecimento, caracterização e tratamento adequado da doença. A presente pesquisa teve como objetivo estudar a morfologia e a morfometria das fibras colágenas da matriz extracelular de biópsia de indivíduos com hanseníase dos polos tuberculóide e virchowiano. Foram selecionados 20 blocos de parafina, biópsias de pacientes com diagnóstico de hanseníase. A partir destes blocos foram realizados no micrótomo cortes histológicos de forma seriada de 5 µm de espessura, os quais foram submetidos às colorações hematoxilina-eosina e picrosírius -hematoxilina. As análises foram realizadas através de imagens capturadas por câmera de vídeo acoplada a um microscópio de luz com um aumento de 100 X. A partir das imagens obtidas das lâminas coradas com picrosírius - hematoxilina, foi realizada a análise morfométrica das fibras colágenas através do programa computacional Image J®. As informações obtidas foram codificadas e digitadas em um banco de dados para tratamento estatístico. Foram observadas diferenças significativas no padrão de infiltrado inflamatório, na distribuição das fibras colágenas e densidade de colágeno entre as formas polares da hanseníase. A forma tuberculóide é caracterizada por infiltrado inflamatório com múltiplos granulomas bem formados e delimitados, constituídos basicamente por linfócitos e macrófagos epitelióides. Intenso infiltrado inflamatório é observado na hanseníase virchowiana, distribuido de forma difusa, formado por placas irregulares com limites mal definidos, compostas em grande parte por macrófagos espumosos. Nos dois polos da doença, há predominância de fibras de colágeno tipo I disposto de forma entrelaçada. Fibras de colágeno tipo III são distribuídas de forma homogênea entre as do tipo I, porém em proporção inferior. O colágeno tipo III é mais abundante na forma virchowiana do que na forma tuberculóide. O grau de colagenização é maior na hanseníase tuberculóide se comparado ao polo virchowiano da doença.

Leprosy it mainly affects the skin and the peripheral nervous system, causes multiple deformities and body disfigurations, interfering directly in the individual’s personal and professional life. The International Classification of Functioning, Disability and Health (ICF) is an instrument that classifies and assists to describe function and disability related to health conditions, reflecting a new approach to identify dysfunctions, classifying them in the biological, individual and social context. The objective of this study is to identify, through a clinical study, the main dysfunctions presented in cases of leprosy and thus to select categories to develop the core set of the ICF for leprosy. The type of this study is clinical descriptive, cross-sectional with quantitative and qualitative analysis. The sample was composed of patients with leprosy, who were recruited at the Centers of leprosy in Sergipe. For data collection with the quantitative approach, validated and standardized functional evaluations were used that represented each ICF domain. In the data collection of the qualitative approach, a structured, standardized questionnaire developed by WHO was used. The data were recorded in Office 2010 program to calculate means, frequencies and percentages. The dysfunctions prevalent in at least 5% of the participating volunteers were selected to be extracted the categories of the ICF with their respective codes to compose the core set. Participants in this study were 29 patients with leprosy. The mean age of the participants was 44.9 (± 13.72), predominance of 60% men. In the study with a quantitative approach, the most relevant functional disabilities were in the body structure domain, where "Structures of areas of skin - s810" was the most prevalent with 78%, in the body function domain the most representative category were "Touch function - b265" with 100% prevalence of participants who presented deficits in sensory. In the field of activity and participation the category: “Carrying, moving and handling objects - d430” had 100% of the participants with limitations. In the area related to participation the category: “Recreation and Leisure - d920”, 89% of the participants had restriction to participate. Regarding environmental impact, the category "Health services, systems and policies - e580" represented a barrier to 56% of participants. Different from what was found in the quantitative study, the results collected in the qualitative study demonstrated a greater number of categories in the environmental factors domain. However, when the amount of categories in the two studies were compared considering the total number of categories of the ICF, with the relative frequency of categories, we observed that the environmental domain is the “incapacity” most prevalent in both studies with the quantitative and qualitative approach. The ICF categories in each domain found in the quantitative study and the qualitative study help to map the functional disabilities of patients with leprosy. / Hanseníase afeta principalmente a pele e o sistema nervoso periférico, provocando múltiplas deformidades e desfigurações no corpo, interferindo diretamente na vida pessoal e profissional do indivíduo. A Classificação Internacional de Funcionalidade, Incapacidade e Saúde (CIF) é um instrumento que classifica e auxilia na descrição da funcionalidade e da incapacidade relacionadas às condições de saúde, classificando-as no âmbito biológico, individual e social. O objetivo deste estudo é identificar através de um estudo clínico as principais disfunções apresentadas em casos de hanseníase e com isso selecionar categorias para desenvolver o core set da CIF para hanseníase. Trata-se de um estudo observacional, transversal, com abordagem de análise quantitativa e qualitativa, composta por pacientes com hanseníase, que foram recrutados nos centros de referência em hanseníase do Estado de Sergipe. Para coleta de dados da abordagem quantitativa foram utilizadas avaliações funcionais validadas que representassem cada domínio da CIF. Já na coleta de dados da abordagem qualitativa foi utilizado um questionário estruturado, padronizado, desenvolvido pela OMS. Os dados foram registrados no programa Office 2010 para cálculo das médias, frequências e porcentagens. As disfunções prevalentes em pelo menos 5% dos voluntários participantes foram selecionadas para serem extraídas as categorias da CIF com seus respectivos códigos para compor o core set. Participaram desse estudo 29 pacientes com hanseníase, com idade média de 44,9 (±13,72), predomínio do sexo masculino (60%). No estudo com abordagem quantitativa, as incapacidades funcionais mais relevantes foram no domínio estrutura do corpo, sendo que “Estrutura das áreas da pele - s810” foi a mais prevalente com 78%, no domínio função do corpo a categoria mais representativa foi “Função tátil - b265” com 100% de prevalência dos participantes que apresentaram déficit na sensibilidade. No domínio atividade e participação a categoria: “Levantar e carregar objetos - d430” apresentou limitação em 100% dos participantes. Já no domínio relativo a participação a “Recreação e Lazer - d920” foi observada como restrição a participação em 89% dos participantes. Em relação ao impacto ambiental a categoria “Serviços, sistemas e políticas de saúde - e580” representou uma barreira para 56% dos participantes. Diferente do encontrado no estudo quantitativo, os resultados coletados no estudo qualitativo demonstraram um número maior de categorias no domínio fatores ambientais. Porém, quando as quantidades de categorias nos dois estudos são comparadas considerando o número total de categorias da CIF, obtendo uma frequência relativa de categorias, observou-se que as incapacidades relativas ao domínio ambiente são prevalentes nos dois estudos tanto na abordagem quantitativa quanto na qualitativa. As categorias da CIF, em cada domínio, encontradas no estudo quantitativo e no estudo qualitativo auxiliam a mapear as incapacidades funcionais de pacientes com hanseníase. / Lagarto, SE

Leprosy is a chronic, infectious and systemic disease caused by the bacillus Mycobacterium leprae, which can affect both genders, at all ages, leading to physical disabilities of several degrees. It is a worldwide sanitary problem and, in Brazil, is considered as endemic. The aim of this study was describe the clinical and epidemiological profiles of the disease, investigate the risk factors associated with the cases of leprosy, as well as analyze spatially the distribution of cases in the town of Nossa Senhora do Socorro. The study is observational and case-control. We considered as cases all the individuals diagnosed with leprosy who resided in the town and who were notified in the town´s Basic Heath Units and in Aracaju´s University Hospital and Center of Medical Specialties, in 2014. As control group, we considered individuals without diagnostic of the disease and who resided in the same house or in houses on the same street as the cases. For the data collection, we used the Inquiry on Risk Factors, the SINAN`s Leprosy Investigation/Notification Forms and the method of instantaneous positioning from a point collected by GPS. There was the analysis of the clinical and epidemiological variables, and the logistics regression described the association between the exposition variables and the leprosy cases. The average age found was 48.1±19 years and individuals were mostly male, brown-skinned and had multibacillary operational classification, with predominance of the Virchowian clinical form. We found a significant association between the presence of the current cases of leprosy in the town and the presence of other diseases in the individual, with infection through leprosy. Likewise, by analyzing schooling, family average income, presence of old cases of leprosy in the town and other diseases associated, a significant influence of such variables was observed upon the appearance of leprosy cases. The location of the leprosy cases showed heterogeneous spatial distribution in the town´s urban area. Also, four important clusters were observed in the region studied: two in the north and two in the south, highlighting the Marcos Freire II region. Socioeconomic factors may be associated with the leprosy cases in the town of Nossa Senhora do Socorro. / A hanseníase é uma doença crônica, infecciosa, sistêmica, causada pelo bacilo, Mycobacterium leprae, que pode afetar ambos os sexos, em todas as idades, levando a incapacidades físicas de graus variados. É um problema sanitário mundial e, no Brasil, é considerada endêmica. O objetivo deste estudo foi descrever o perfil clínico e epidemiológico da hanseníase, investigar os fatores de risco associados as casos, bem como analisar espacialmente a distribuição dos casos no município de Nossa Senhora do Socorro. Trata-se de um estudo observacional, caso-controle. Foram considerados casos todos os indivíduos diagnosticados com hanseníase residentes no município, e, notificados nas UBS’s do mesmo, Hospital Universitário e Centro de Especialidades Médicas de Aracaju, no ano de 2014, e como grupo controle, indivíduos sem diagnóstico da doença e que residiam no mesmo domicílio ou em casas do mesmo logradouro de casos. Para a coleta dos dados, utilizou-se o Inquérito de Fatores de Risco, as Fichas de Notificação/Investigação da Hanseníase do SINAN, e o método de posicionamento instantâneo de um ponto coletado pelo GPS. Houve a análise das variáveis clínicas e epidemiológicas, e a regressão logística descreveu a associação entre as variáveis de exposição e os casos de hanseníase. A média de idade encontrada foi de 48,1±19 anos, eram, na maioria, do gênero masculino, pardos e possuíam classificação operacional multibacilar, com predomínio da forma clínica virchowiana. Uma associação significativa entre a presença de casos atuais de hanseníase no domicílio e a presença de outras doenças no indivíduo, com a infecção pela hanseníase, foi encontrada. Da mesma forma, analisando em conjunto, escolaridade, rendimento médio familiar, presença de casos antigos de hanseníase no domicílio e outras doenças associadas, verificou-se influência significativa dessas variáveis sobre o surgimento de casos de hanseníase. A localização dos casos de Hanseníase demonstrou distribuição espacial heterogênea na zona urbana do município e pôde-se observar quatro aglomerados importantes na região estudada, dois ao norte e dois ao sul, com destaque para a região do Marcos Freire II. Fatores socioeconômicos parecem estar associados ao aparecimento de casos de hanseníase no município de Nossa Senhora do Socorro.

CD163, the receptor for haptoglobin–hemoglobin complex, is expressed on monocytes/macrophages and neutrophils. A soluble form (sCD163) has been associated with the M2 macrophage phenotype. M2 macrophages down-modulate the inflammatory response and has previously been described in the most severe, lepromatous (LL) clinical presentation of leprosy as well as tuberculosis. We hypothesized that sCD163 would correlate with severity of diseases caused by intracellular pathogens. Our general objective was to verify the presence of sCD163 in sera of Leprosy and Visceral leishmaniasis (VL) patients. Sera of patients with diferent clinical forms of leprosy (n = 47), and VL (n = 65) were tested for the presence of sCD163. The levels of sCD163 were compared in the diferent clinical forms of leprosy (Indeterminate - IL, Tuberculoid-TL, Boderline-BL and Lepromatous leprosy-LL). The levels of sCD163 were also compared in sera of VL patients before treatment (D0) (n = 46), and at D30 post treatment (n = 19), and also compared at D0, between patients with classical VL (n = 33) and severe VL (n = 13). High levels of sCD163 were detected in sera from leprosy patients as compared to contact controls, and confirmed the association of sCD163 with LL leprosy, finding it at elevated levels in this clinical form. ROC curves showed high sensitivity and specificity for the association between higher levels of this molecule with the most severe LL clinical form. VL patients also presented with high levels of sCD163 in sera at D0 as compared with healthy individuals, and even higher in sera from severe VL patients. Further stratification on infection and disease status revealed a clear association with clinical parameters of disease severity and clinical cure, with a direct correlation sCD163 concentration and liver and spleen sizes. ROC curves also demonstrated high sensitivity and specificity of this molecule to associate this molecule with disease severity of VL. Additionally, sCD163 concentrations reduces after treatment (D30). In vitro cultures indicated that Leishmania infection induced CD163 expression on the surface of monocyte/macrophages and neutrophils, suggesting these cells as possible sources of sCD163 in the sera. Interestingly, the association of sCD163 levels with disease status was not mirrored by levels of haptoglobin, heme-oxygenase, or arginase. Taken together, our data support the use of sCD163 as a biomarker of disease and severity in both leprosy and VL, and indicate a role of Leishmania infection in induce the expression of CD163 in macrophages and neutrophils. This data also suggest CD163 as a marker for M2 and N2, which down modulate inflammatory responses and interfere in the outcome of intracellular infections and the severity of their associated diseases. / O marcador CD163, receptor para o complexo Haptoglobina-Hemoglobina, é expresso em monócitos/macrófagos e neutrófilos. Sua forma solúvel (sCD163) tem sido associada com o fenótipo de macrófagos M2, que modulam negativamente a resposta inflamatória e descritos como relacionados à apresentação Virchowiana da Hanseníase bem como à Tuberculose. Este trabalho se baseou na hipótese de que sCD163 poderia se correlacionar com a gravidade de doenças provocadas por patógenos intracelulares. O objetivo geral foi verificar a presença e caracterizar a associação do marcador CD163 com apresentação clínica da Hanseníase e Leishmaniose Visceral (LV). Soros de pacientes com diferentes formas clínicas de hanseníase (n = 47), e de pacientes com LV foram testados para a presença do sCD163. Foram comparadas as concentracões do sCD163 entre as formas clínicas da hanseníase (Indeterminada - HI, Tuberculóide - HT, Dimorfa - HD e Virchowiana - HV). A presença do sCD163 foi também avaliada nos soros de pacientes com LV (n = 46) no D0 (antes do tratamento) (n = 33), D30 (pós-tratamento) (n = 19) e comparada entre os pacientes no D0 com LV grave (n = 13). Foram observados altos níveis do sCD163 nos soros dos pacientes com hanseníase em comparação com controles contactantes, e confirmou-se a associação desta molécula com a forma HV. Curvas ROC demontraram alta sensibilidade e especificidade da dosagem desta molécula para a associação com a forma mais grave HV da doença. Na LV, foram observadas concentrações elevadas do sCD163 no D0, sendo estas ainda mais elevadas nos pacientes com LV grave. Além disso, observou-se redução do sCD163 após o tratamento (D30). Análises de correlação confirmaram inter-relação entre o biomarcador e parâmetros de gravidade da LV, sendo observadas correlacões diretas entre as concentrações de sCD163 e as medidas do fígado e do baço. Curva ROC, também confirmou a associação entre o nível sérico alto desta molécula com a forma mais grave da LV. Adicionalmente, há uma redução significativa do sCD163 com cura clínica pós-tratamento. Experimentos in vitro indicaram indução da expressão de CD163 na superfície de macrófagos e neutrófilos por Leishmania amazonensis, sugerindo que estas células sejam possíveis fontes para a molécula sérica encontrada nos pacientes com LV. Não houve diferenças nos níveis de haptoglobina, heme-oxigenase-1 e arginase-1 entre os pacientes com LV clássico e LV grave. Em conjunto, esses dados um possível papel da molécula de sCD163 como biomarcador de doença e de gravidade na hanseníase e LV, e sugere um papel da leishmania na indução da expressão dessa molécula. Além disso, os achados sugerem que CD163 pode serum marcador de macrófagos e neutrófilos M2 e N2, os quais podem modular a resposta imune e contribuir para a apresentação clínica de infecções por patógenos intracelulares.

Conselho Nacional de Desenvolvimento Científico e Tecnológico / Leprosy is an infectious disease of great global impact. It is associated with significant morbidity, related to both the occurrence of leprosy reactions and the development of peripheral neurological disabling injuries. Leprosy reactions are immunologically mediated complications, which presents inflammatory and potentially serious clinical forms and may also be associated with the onset of physical disabilities. There are still many gaps regarding their clinical and immunological determinants, which hinders its control. The use of recombinant antigens has been shown as an important tool for the elucidation of various immunological aspects of leprosy. This study aimed to evaluate the clinical profile associated with leprosy reactions and the immune response to recombinant antigens from Mycobacterium leprae associated with reactions. Specific objectives were: 1) to evaluate the clinical characteristics that are associated with leprosy reactions, 2) to evaluate the clinical characteristics that correlate with physical disabilities at the end of treatment, 3) to compare the immune response to recombinant antigens of M. leprae between patients with and without reactions. For evaluation of objectives 1 and 2 was developed a retrospective study based on chart analysis of leprosy patients treated at two centers of medical specialties in Sergipe. For the third objective, we developed a cross sectional study that compared the immune response (IL-2, IL-4, IL-5, IL-6, IL-10, IL-12p70, IL-13, IL-15 , IL-17a, IL-23, IL-27, INF-γ, TNF-α,TGF-β, MCP-1 and MIP-1α) after stimulation with recombinant antigens of M. leprae (MLCS, ML0276, ML2028, ML2055, ML2258, ML2531, ML2629, ML82F, ML2044, ML2380, ML2331, and LID1 PADL) and M. tuberculosis (ID93, ID83, PPD) among patients who developed or not reactions. The results of objective 1 and 2 revealed the occurrence of leprosy reactions in 40% of patients and physical disabilities in 30% of patients. It was observed that the male sex was associated with multibacillary forms and reactions. The use of low doses of corticosteroid for the treatment of reactions was independently associated with the presence of physical disability at the end of treatment for leprosy. The results of objective 3 showed that inflammatory chemokines such as MCP-1, after stimulation of recombinant antigens like ML2531 and ID93, were higher in patients who developed reactions. Thus, we emphasize the need for greater vigilance of males, as well as most appropriate treatment for patients who develop reactive episodes in order to prevent physical disabilities. The production of MCP-1 in response to antigens ML2531 and ID93 can be assayed as a marker of reactions. / A hanseníase é uma doença infecciosa de grande impacto mundial. A doença se associa a importante morbidade, relacionada tanto à ocorrência das reações hansênicas, quanto ao desenvolvimento de lesões neurológicas periféricas incapacitantes. As reações hansênicas são complicações imunologicamente mediadas, que além de apresentarem quadros clínicos inflamatórios e potencialmente graves, podem se associar também ao surgimento de incapacidades físicas. Ainda existem muitas lacunas quanto aos seus determinantes clínicos e imunológicos, o que dificulta o seu controle. O uso de antígenos recombinantes tem se revelado como importante ferramenta para elucidação de diversos aspectos imunológicos da hanseníase. Esse estudo objetivou avaliar o perfil clínico e a resposta imunológica, a antígenos recombinantes de Mycobacterium leprae, associados às reações hansênicas. Os objetivos específicos foram: 1) Avaliar as características clínicas que se associam às reações hansênicas; 2) Avaliar as características clínicas que se relacionam com incapacidades físicas ao final do tratamento; 3) Comparar a resposta imune a antígenos recombinantes de M. leprae entre pacientes com e sem reações hansênicas. Para avaliação dos objetivos 1 e 2 foi desenvolvido um estudo retrospectivo, baseado na análise de prontuários de pacientes com hanseníase, atendidos em dois centros de especialidades médicas em Sergipe. Para o objetivo 3, desenvolveu-se um estudo transversal no qual se comparou a resposta imunológica (IL-2, IL-4, IL-5, IL-6, IL-10, IL-12p70, IL-13, IL-15, IL-17a, IL-23, IL-27, INF-γ, TNF-α, TGF-β, MCP-1 e MIP-1α) após estimulação de antígenos recombinantes de M. leprae (MLCS, ML0276, ML2028, ML2055, ML2258, ML2531, ML2629, ML82F, ML2044, ML2380, ML2331, LID1 e PADL) e de M. tuberculosis (ID93, ID83, PPD) entre os pacientes que desenvolveram ou não reações hansênicas. Os resultados do objetivo 1 e 2 revelaram a ocorrência de reações hansênicas em 40% dos pacientes e de incapacidades físicas em 30% dos pacientes. Observou-se que o sexo masculino se associou com formas multibacilares e com reações hansênicas. O uso de subdosagem de corticosteróides para o tratamento das reações se associou de forma independente à presença de incapacidades físicas ao final do tratamento para hanseníase. Os resultados do objetivo 3 demonstraram que quimiocinas inflamatórias como MCP-1, após estímulo dos antígenos recombinantes ID93 e ML2531, foram mais elevadas nos pacientes que desenvolveram reações hansênicas. Assim, ressaltamos a necessidade de maior vigilância do gênero masculino, bem como de tratam ento mais adequado aos pacientes que evoluem com episódios reacionais, a fim de prevenir incapacidades físicas. A produção de MCP-1, em resposta aos antígenos ID93 e ML2531, pode ser testada como marcador de reações hansênicas.

Submitted by Geyciane Santos (geyciane_thamires@hotmail.com) on 2015-07-09T13:57:35Z No. of bitstreams: 1 Tese - Sandra Lúcia Euzébio Ribeiro.pdf: 2096473 bytes, checksum: f91d4ac32c47ec6b75b46a090c06dd46 (MD5) / Approved for entry into archive by Divisão de Documentação/BC Biblioteca Central (ddbc@ufam.edu.br) on 2015-07-09T14:19:30Z (GMT) No. of bitstreams: 1 Tese - Sandra Lúcia Euzébio Ribeiro.pdf: 2096473 bytes, checksum: f91d4ac32c47ec6b75b46a090c06dd46 (MD5) / Approved for entry into archive by Divisão de Documentação/BC Biblioteca Central (ddbc@ufam.edu.br) on 2015-07-09T14:22:48Z (GMT) No. of bitstreams: 1 Tese - Sandra Lúcia Euzébio Ribeiro.pdf: 2096473 bytes, checksum: f91d4ac32c47ec6b75b46a090c06dd46 (MD5) / Made available in DSpace on 2015-07-09T14:22:48Z (GMT). No. of bitstreams: 1 Tese - Sandra Lúcia Euzébio Ribeiro.pdf: 2096473 bytes, checksum: f91d4ac32c47ec6b75b46a090c06dd46 (MD5) Previous issue date: 2014-09-02 / SUFRAMA - Superintendência da Zona Franca de Manaus / Antiphospholipid (aPL) antibodies may be detected during the course of many infections, but are usually transient. In leprosy, however, these antibodies are found to linger for longer periods. The aim of this study was to evaluate the persistence of anticardiolipin (aCL) and anti-β2 glycoprotein I (anti-β2GPI) antibodies in leprosy patients, and disclose epidemiologic, immunologic and clinical features associated with it. Thirty-eight APL antibody positive leprosy patients completed polychemotherapy and were followed for an average of 66,9 months, when a second sample was drawn for a new aPL testing. Enzima -linked immunosorbent assay (ELISA) was used to measure aCL and anti-β2GPI antibodies. Epidemiologic and clinical data were analyzed with logistic regression. Persistence of aPL antibodies was demonstrated in 32 out of 38 leprosy patients thoroughly treated and considered cured, studied after an average of 66,9 months of follow up. All of these sera were IgM isotype. Sixteen of these patients (50%) presented lepromatous clinical form. Reactional state was present in three patients (9,4%). Seventeen (53,1%) were in use of prednisone and/or thalidomide. Observed median values of aPL antibodies were rather high (64U/mL for aCL and 62U/mL for aβ2GP). Occurrence of vascular thrombosis, gestational morbidity, diabetes, tobacco use and alcoholism were not different in positive and negative aPL patients. Logistic regression showed significant association of aPL antibodies persistence and age (p=0,045, OR=0,91 e IC 95% 0,82 - 1,00), lepromatous clinical form (p=0,034; OR=0,02 e IC 95% = 0,0 - 0,76) and bacillary index (p=0,044; OR=2,74 e IC 95% = 1,03 – 7,33). aPL antibodies in leprosy patients do persist many years after treatment. Patients’ age, lepromatous clinical form and bacillary index were factors that influence persistence. No thromboembolic events were registred. / Anticorpos antifosfolipídeos (aFL) podem ser detectados no curso de diversas infecções, mas costumam ser transitórios. Entretanto, na hanseníase tem-se observado que esses autoanticorpos persistem por mais tempo. Os objetivos do presente estudo foram verificar a persistência de anticorpos anticardiolipina (aCL) e anti-β2glicoproteína  (anti-β2GP) em pacientes com hanseníase, e avaliar as características epidemiológicas, clínicas e imunológicas associadas. Trinta e oito pacientes com diagnóstico de hanseníase e positivos para anticorpos aFL completaram o tratamento de poliquimioterapia (PQT) e foram acompanhados por um tempo médio de 66,9 meses, quando coletou-se outra amostra para nova pesquisa da anticorpos aFL. A detecção de anticorpos aCL e anti-β2GP foi feita pela a técnica de ELISA. A análise dos dados epidemiológicos e clínicos foi feita por regressão logística binária multivariada. Persistência de anticorpos aFL foi demonstrada em 32 (84%) dos 38 pacientes com hanseníase, tratados com PQT e em alta do tratamento PQT, seguidos por um tempo médio de 66,9 meses. Todos os soros positivos eram do isotipo IgM, sendo que 16 desses pacientes (50%) apresentavam a forma virchowiana (VV). Episódios reacionais estavam presentes em três pacientes (9,4%). Dezessete (53,1%) continuavam usando medicação (prednisona e/ou talidomida). Os valores médios de IgM foram altos, 64U/mL para aCL e 62U/mL para anti-β2GP. Em relação às variáveis trombose vascular, morbidade gestacional, diabetes, tabagismo e etilismo não foram observadas diferenças significativas entre os pacientes positivos e negativos para aFL. Na regressão logística demonstrou-se significância estatística para as variáveis idade: (p=0,045, OR=0,91 e IC 95% 0,82-1,00), forma clínica VV (p=0,034; OR=0,02 e IC 95% = 0,0-0,76) e índice baciloscópico (p=0,044; OR=2,74 e IC 95% = 1,03 - 7,33). Portanto, anticorpos aFL na hanseníase, diferentemente de outras infecções, persistem anos após o tratamento em pacientes considerados “curados”. Essa persistência foi influenciada pela idade, forma clínica VV e índice baciloscópico. Não houve associação com fenômenos trombóticos.

Submitted by Geandra Rodrigues (geandrar@gmail.com) on 2018-01-17T17:29:15Z No. of bitstreams: 1 alinemotafreitasmatos.pdf: 2642148 bytes, checksum: 97ec5fb8925f2abd9bf61640fb47e1be (MD5) / Approved for entry into archive by Adriana Oliveira (adriana.oliveira@ufjf.edu.br) on 2018-01-23T14:13:52Z (GMT) No. of bitstreams: 1 alinemotafreitasmatos.pdf: 2642148 bytes, checksum: 97ec5fb8925f2abd9bf61640fb47e1be (MD5) / Made available in DSpace on 2018-01-23T14:13:52Z (GMT). No. of bitstreams: 1 alinemotafreitasmatos.pdf: 2642148 bytes, checksum: 97ec5fb8925f2abd9bf61640fb47e1be (MD5) Previous issue date: 2017-11-28 / A hanseníase ainda representa um sério problema de saúde pública no Brasil e no mundo. Apesar da expressiva redução da prevalência da doença a nível global, de 5,4 milhões nos anos 80 para menos de 200 mil casos atualmente, a taxa de detecção de casos novos se mantém quase a mesma em diferentes regiões ao longo dos anos. Juiz de Fora, uma cidade com mais de 500 mil habitantes, é referência para o tratamento de hanseníase, abrangendo diversas cidades mineiras. Esse trabalho analisou a situação epidemiológica da hanseníase em Juiz de Fora, comparando dois períodos marcados por mudanças demográficas e na estratégia de prevenção. Foram avaliados 379 casos novos, sendo 238 casos diagnosticados no período I (1995 a 2004) e 141 no período II (2005 a 2015). O estudo analisou o banco de dados das notificações de hanseníase (SINAN, Ministério da Saúde), avaliou as tendências e georreferenciou os casos para análise ecológica de forma espacializada. O georreferenciamento dos casos utilizou o programa ArcGis (versão 10.2.2) e a ocorrência dos casos foi avaliada em relação ao índice de vulnerabilidade da saúde (IVS), indicador que agrupa fatores socioeconômicos e de saneamento. Os resultados mostram queda da prevalência da doença e redução da taxa de detecção de casos novos. O número de casos novos com grau 2 de incapacidade ao diagnóstico, que sinaliza para diagnóstico tardio, mostrou redução significativa no período II, mas ocorreram picos nos anos 1997, 2007 e 2015. Ocorreu diminuição relativa no percentual de casos multibacilares (de 80,2% para 61,5%) e aumento da forma clínica tuberculóide. Análise por regressão logística demonstrou associação das taxas de detecção com IVS elevado. Em conclusão, os indicadores epidemiológicos direcionam para a eliminação da hanseníase no município de Juiz de Fora, os fatores envolvidos e as evidências de casos ocultos da doença na região são apresentados neste estudo. / Leprosy still represents a serious public health problem in Brazil and in the world. Despite the significant reduction in global disease prevalence from 5.4 million in the 1980s to less than 200,000 cases today, the rate of detection of new cases remains almost the same in different regions over the years. Juiz de Fora, a city with more than five hundred thousand people, is a referral point for leprosy treatment for several nearby cities in Minas Gerais. This study analyzed the epidemiological situation of leprosy in Juiz de Fora, comparing two periods marked by demographic changes and adjustments in prevention strategies. A total of 379 new cases were evaluated, of which 238 were diagnosed in period I (1995 to 2004) and 141 in period II (2005 to 2015). The study analyzed the database of leprosy reports (SINAN, Ministry of Health), assessed trends and georeferenced the cases for spatialised ecological analysis. The georeferencing of the cases used the ArcGis program (version 10.2.2) and the occurrence of the cases was evaluated in relation to the Health Vulnerability Index (HVI), an indicator that categorizes socioeconomic and sanitation factors. The results show decrease in the prevalence of the disease and reduction in the rate of detection of new cases. The number of new leprosy cases with grade II disabilities, that signal for late diagnosis, showed significant reduction in period II, but with peaks in the years 1997, 2007 and 2015. A relative decrease in the percentage of multibacillary cases (from 80.2 to 61.5%) and increase for the tuberculoid clinical form was observed. Logistic regression analysis showed association of detection rates with elevated HVI. In conclusion, the epidemiological indicators point to the elimination of leprosy in the municipality of Juiz de Fora, the factors involved and the evidences of hidden cases of the disease in the region are presented in this study.

As consequências mais graves da hanseníase resultam do acometimento neurológico. Recentemente a ultrassonografia (US) têm ganhado importância na avaliação da neuropatia hansênica. O objetivo deste trabalho foi avaliar por US nervos periféricos de pacientes com hanseníase antes e após o tratamento. Buscou-se caracterizar alterações ao diagnóstico e evolução da doença, controlando os efeitos de fatores confundidores e investigando fatores de risco para progressão das alterações (classificação, episódios reacionais, sexo, tempo de evolução). Foram sistematicamente examinados por US os nervos ulnares (regiões pré-túnel cubital UPT e túnel UT), medianos e fibulares comuns bilateralmente para mensuração das áreas de secção transversa (CSA) e cálculo das medidas de assimetria delta CSA (diferença absoluta entre CSAs dos lados direito e esquerdo de cada nervo) e delta Utpt (diferença absoluta entre CSAs de UPT e UT ipsilaterais); também foram analisadas alterações qualitativas (ecogenicidade e Doppler). Foram avaliados 100 pacientes antes do tratamento, sendo 14 paucibacilares (3 indeterminados, 11 tuberculoides) e 86 multibacilares (31 dimorfo-tuberculoides, 34 dimorfo-dimorfos, 13 dimorfo-virchowianos, 8 virchowianos); destes, 73 completaram a avaliação pós-tratamento. Considerando que alterações em pelo menos uma das medidas avaliadas refletem neuropatia, observou-se frequências similares de neuropatia pré-tratamento nos paucibacilares (PB) (35,7 a 57,1%) e multibacilares (MB) (50 a 65,1%). O nervo mais frequentemente acometido nos PB foi o fibular comum, enquanto que nos MB foi o ulnar. As médias de CSA foram maiores nos MB do que nos PB em todos os nervos (p<0,05) e observou-se tendência de maior assimetria (deltas CSA e Utpt) nos MB pré-tratamento. A comparação dos pacientes sem e com alguma reação (tipo 1, tipo 2 e/ou neurite) revelou valores significativamente maiores de CSA, delta CSA e delta Utpt nos pacientes com reações. Constatou-se associação entre presença de sinal Doppler e antecedente de reações (p<0,05). Na avaliação pós-tratamento, nenhum dos fatores de risco foi fortemente relacionado à piora dos achados ultrassonográficos, no entanto algumas análises sugeriram maior risco em pacientes multibacilares (maiores frequências de alterações de CSA nos MB, p>0,05) e com reações hansênicas (odds ratio: 4,67; intervalo de confiança 95%: 1,17-18,64; p<0,05 para alterações de CSA no nervo mediano). Pós-tratamento, os MB apresentaram maior frequência de alterações de ecogenicidade que os PB (p<0,05) e os pacientes sem e com reações apresentaram frequências semelhantes de alterações de ecogenicidade e Doppler, sem aumento significante do odds ratio. O tempo de evolução da doença e o sexo não foram fatores de risco significantes para a progressão das alterações ultrassonográficas. A US demonstrou que o acometimento de nervos periféricos é frequente na hanseníase, independente da classificação e presença de reações. Algumas alterações ultrassonográficas podem não regredir completamente ou mesmo se intensificar apesar do tratamento da infecção. Visto que as consequências mais temidas e estigmatizantes da hanseníase são secundárias à neuropatia, é necessário o aprimoramento de medidas diagnósticas e terapêuticas enfocando o acometimento neurológico. / Leprosy most feared consequences are due to neurological involvement. Recently, ultrasonography (US) is being used to assess imaging findings in leprosy neuropathy. The purpose of this study was to evaluate leprosy patients peripheral nerves using US, before and after treatment. We sought to characterize diagnostic abnormalities and their evolution, controlling the effects of confounding factors and investigating risk factors for progression of US abnormalities (classification, reactions, gender, duration of disease). Ulnar (at pre cubital tunnel area -UPT- and at the tunnel -UT), median and common fibular nerves were systematically and bilaterally scanned in order to measure cross sectional areas (CSA) and to calculate the asymmetry indexes delta CSA (absolute difference between right and left CSAs for each nerve) and delta Utpt (absolute difference between UPT and UT CSAs at the same side). Qualitative abnormalities (echogenicity and Doppler) were also analyzed. One hundred patients underwent US exam before starting treatment: 14 paucibacillary (3 indeterminate, 11 tuberculoid) and 86 multibacillary (31 borderline-tuberculoid, 34 borderline-borderline, 13 borderline-lepromatous, and 8 lepromatous). Seventy-three patients underwent US exam after completing treatment. Considering that abnormalities in at least one US measure reflect neuropathy, we observed similar frequencies of neuropathy between paucibacillary (PB) (35.7-57.1%) and multibacillary (MB) (50-65.1%) patients before treatment. The most frequently involved nerve in PB was common fibular, whereas in MB it was ulnar nerve. Before treatment, MB patients had higher CSA means for all examined nerves (p<0.05) and showed a weak tendency toward greater asymmetry (delta CSA, delta Utpt) compared to PB. Comparing patients with or without leprosy reactions (type 1, type 2 and/or neuritis), we observed greater thickening and asymmetry in the former group; moreover, we detected significant association between Doppler signal and reactions before treatment. After treatment, none of the evaluated risk factors was strongly related to worsening of sonographic findings; however, some analyzes suggested increased risk in MB patients (greater frequency of CSA abnormalities in MB, p>0.05) and in patients with previous leprosy reactions (odds ratio 4.67; 95% confidence interval 1.17-18.64; p<0.05 for CSA abnormalities at the median nerve). MB patients had higher frequencies of echogenicity abnormalities (p<0.05) after treatment and the groups with or without reactions had similar frequencies of echogenicity and Doppler abnormalities, without significant increment in odds ratio. Gender and duration of disease were not significant risk factors for progression of US abnormalities. Peripheral neuropathy demontrated by US is common in all types of leprosy, regardless of classification and presence of reactions. Sonographic abnormalities may not fully improve; they may even worsen despite treatment. As the stigma related to leprosy is due to the consequences of neuropathy, it is essential the improvement of diagnostic and therapeutic procedures focusing peripheral nerve involvement.

A hanseníase é uma doença infecciosa que acomete pele e nervos periféricos. Seu diagnóstico é baseado eminentemente nos seus aspectos clínicos variáveis e poucos são os exames complementares que auxiliam no diagnóstico, como baciloscopia do raspado intradérmico, histopatologia, ELISA anti- PGL1 (APGL1) e anti-LID, geralmente positivos nas formas multibacilares, dificultando o diagnóstico das formas paucibacilares. Busca-se comparar os resultados obtidos com o teste rápido imunológico (LID-NDO) Orange Life® com os resultados da PCR tempo real realizada nas amostras de raspado intradérmico e os resultados do ELISA APGL1 coletadas durante a ação por demanda espontânea (Hanseníase Brasília 2014), além de comparar eficiência entre dois métodos diferentes de conservação destas amostras (papel-filtro x álcool). Foram coletadas 277 amostras de raspado dérmico de 50 pacientes clinicamente diagnosticados com hanseníase durante a ação. Na mesma ocasião, os indivíduos diagnosticados foram submetidos à coleta de sangue periférico para teste rápido sorológico (Orange Life®) e ELISA APGL1. A extração de DNA do raspado intradérmico, armazenado no álcool e no papel-filtro, foi realizada no Laboratório de Dermatologia do HC-FMRP-USP. A PCR em tempo real foi realizada usando par de primers específicos RLEP, e o master mix sybr greenPromega. Dos 50 pacientes diagnosticados clinicamente, 90% são multibacilares. Todos os testes, tanto o teste rápido sorológico como a PCR, apresentaram maior positividade nos pacientes multibacilares. O teste rápido sorológico foi positivo em 64,44% dos pacientes multibacilares e em 40% dos paucibacilares. A PCR nas amostras armazenadas no álcool foi positiva em 19,05% dos pacientes multibacilares e a PCR do papel-filtro em 17,78%; nenhuma PCR foi positiva em pacientes paucibacilares. O ELISA APGL foi positivo em 56% dos pacientes diagnosticados. Na PCR das amostras armazenadas no papel-filtro, o sítio de coleta com maior positividade foram os cotovelos (75%). A concordância entre o teste rápido sorológico e a PCR e a concordância entre o teste rápido e o ELISA APGL1 foram fair (suave). Já a concordância entre a PCR das amostras armazenadas no álcool e a PCR das amostras armazenadas no papel-filtro foi perfeita. Concluímos que o exame clínico é ainda essencial para o diagnóstico da hanseníase, principalmente das formas paucibacilares. Os métodos de armazenamento do material coletado por raspado intradérmico (papel-filtro x álcool) não interferiram no resultado final da PCR, portanto o armazenamento no papel-filtro pode ser feito preferencialmente, pois apresenta menor custo para a extração de DNA. O teste rápido sorológico e o ELISA anti-PGL1 têm baixa especificidade, porém podem ter outras aplicações, diferentes do diagnóstico da hanseníase. / Leprosy is an infectious disease that affects skin and peripheral nerves. Leprosy diagnosis is mainly based on its variable clinical aspects and few complementary tests that aid in the diagnosis, such as bacilloscopy, histopathology, besides the antiPGL1 ELISA (APGL1) and anti-LID, all of which are generally positive in multibacillary forms, confirming the difficulty in diagnosis of paucibacillary patients. The aim of this study was to compare the results obtained with the Orange Life® Immunological Rapid Test (LID-NDO) with the real-time PCR results obtained in the intradermal scraping samples and the results of the ELISA APGL1, collected during the \"Hanseníase\" action in Brasília in January 2014, in addition to comparing efficiency between two different methods of preservation of these samples (filter paper x alcohol). A total of 277 dermal smear samples were collected from 50 patients clinically diagnosed with leprosy during the procedure. At the same time, the individuals diagnosed were submitted to peripheral blood collection for serological rapid test (Orange Life®) and ELISA APGL1. The extraction of DNA from intradermal scrapings, stored in alcohol and filter paper, was carried out at the Dermatology Laboratory of HC-FMRP-USP. Real-time PCR was performed using a pair of primers specific for the RLEP gene, and the master sybr green-Promega. From 50 patients diagnosed clinically, 90% are multibacillary. All tests, both the serological rapid test and the PCR, were more positive in multibacillary patients. The rapid serological test was positive in 64.44% of the multibacillary patients, and in 40% of the paucibacillary. The PCR in the samples stored in the alcohol was positive in 19.05% of the multibacillary patients and the PCR of the filter paper in 17.78%; PCR weren\'t positive in paucibacillary patients. ELISA APGL was positive in 56% (28) of the diagnosed patients. In the PCR of the samples stored in the filter paper, the collection site with the highest positivity was the elbows (75%). The agreement between the rapid serological test and the PCR and the agreement between the rapid test and the ELISA APGL1 were fair. The agreement between the PCR of the samples stored in the alcohol and the PCR of the samples stored on the filter paper was perfect. We conclude that the clinical examination is still essential for the diagnosis of leprosy, especially in paucibacillary forms. We also concluded that the methods of storing the material collected by intradermal scraping (filter paper x alcohol) do not interfere in the final result of the PCR, therefore the storage in the filter paper can be done preferentially because it presents a lower cost for the extraction of DNA. Rapid serological test and the anti-PGL1 ELISA have low specificity, but may have other different applications than the diagnosis of leprosy.