Submitted by PPG Engenharia e Tecnologia de Materiais (engenharia.pg.materiais@pucrs.br) on 2018-11-16T17:04:36Z No. of bitstreams: 1 Disserta??o homologa??o Viviane Bettanin 14.11.2018.pdf: 3436850 bytes, checksum: 12199a52b8023657a598a8254ca85c0f (MD5) / Approved for entry into archive by Sheila Dias (sheila.dias@pucrs.br) on 2018-11-19T13:58:36Z (GMT) No. of bitstreams: 1 Disserta??o homologa??o Viviane Bettanin 14.11.2018.pdf: 3436850 bytes, checksum: 12199a52b8023657a598a8254ca85c0f (MD5) / Made available in DSpace on 2018-11-19T14:07:36Z (GMT). No. of bitstreams: 1 Disserta??o homologa??o Viviane Bettanin 14.11.2018.pdf: 3436850 bytes, checksum: 12199a52b8023657a598a8254ca85c0f (MD5) Previous issue date: 2018-08-29 / Coordena??o de Aperfei?oamento de Pessoal de N?vel Superior - CAPES / In order to reduce the environmental impacts caused by chemical harmful to the environmental and to human health, the development of natural substances that are able to substitute these dangerous components have been increased. Tannins are a group of natural poliphenolic components extracted from plants that could be used as corrosion inhibitors. This study investigates the utilization of two bark of black wattles (Acacia mearnsii) as corrosion inhibitors, Weibull and Macrospec, in acidic medium and in atmospheric environment and in aqueous CO2 rich medium under high pressure. API 5L X65 steel samples were exposed to a corrosive medium (0.1 M HCl) with different tannin concentrations. The best results were duplicate to an environmental with CO2 saturated water at 15 MPa and 50?C. In order to characterize the specimens scanning electron microscopy by gun field emission, energy dispersive spectroscopy, X ray diffraction, mass loss tests and potenciodynamic polarization tests were used. The results indicated that both tannins, at atmospheric pressure and 0.1 M HCl corrosive environment have similar performance as corrosion inhibitors, and the higher dosage tested (12 g/L) exhibited the best efficiency. However, when the tannins were tested in environment with presence of CO2 under high pressure (15 MPa) and 50?C the results were different, and only Macrospec tannin had an inhibitory action under the conditions tested. / Visando diminuir os impactos ambientais causados por subst?ncias qu?micas nocivas ao meio ambiente e ? sa?de humana, a procura por substitutos naturais destes compostos em diversas aplica??es vem sendo intensificada. Taninos compreendem uma classe de compostos polifen?licos naturais extra?dos de plantas, podendo ser usados como inibidores de corros?o em meio aquoso. Neste estudo avaliou-se a utiliza??o de dois taninos vegetais da ac?cia negra (Acacia mearnsii), Weibull (em p?) e Macrospec (l?quido), como inibidores de corros?o em meios ?cidos em ambiente atmosf?rico e em ambiente com a presen?a de CO2 a alta press?o. Corpos de prova de a?o API5L X65 foram expostos a meio acidificado com HCl 0,1 M com diferentes concentra??es de taninos e o melhor resultado no que se refere ? concentra??o do tanino para a inibi??o de corros?o foi replicado para um meio com ?gua saturada com CO2 a 15 MPa e 50?C. Para caracteriza??o foram realizadas as an?lises de microscopia eletr?nica de varredura, difra??o de raios X, medidas eletroqu?micas de polariza??o potenciodin?mica, e testes de perda de massa. Os resultados indicaram que ambos os taninos, em meio de HCl 0,1 M e press?o atmosf?rica, apresentaram desempenho similar no que diz respeito aos efeitos de inibi??o da corros?o e a maior dosagem utilizada (12 g/L) foi a que apresentou melhor efici?ncia de inibi??o. Por?m, quando testados em meio de ?gua saturada com CO2 a 50?C e 15 MPa o comportamento dos taninos foi distinto, sendo que apenas o tanino Macrospec teve a??o inibit?ria nas condi??es testadas.

Made available in DSpace on 2015-07-22T20:49:28Z (GMT). No. of bitstreams: 0 Previous issue date: 2010-11-24. Added 1 bitstream(s) on 2015-08-11T03:26:29Z : No. of bitstreams: 1 Publico-393.pdf: 1637068 bytes, checksum: 4fe3757007f6a049eac930eb08b63c88 (MD5) / O melanoma é o tipo de câncer de pele menos frequente, mas que tem um grande poder de letalidade devido ao seu potencial de formar metástases. Para as células adquirirem a capacidade de formar metástases, estas precisam ter a característica de sobreviver independente de interações com a matriz extracelular e consequentemente apresentar resistência ao anoikis. Por isso, a importância de se estudar as alterações que ocorrem com células tumorais que adquirem essa capacidade. Em nosso laboratório foi desenvolvido um modelo que nos permite estudar diferentes etapas da gênese do melanoma. Melanócitos murinos melan-a que sobreviveram depois de 1, 2, 3 e 4 ciclos de impedimento de ancoragem por 96 horas apresentaram modificações na morfologia e crescimento independente de PMA, e foram denominadas 1C, 2C, 3C e 4C, respectivamente. Diferentes linhagens de melanoma (4C11-, 4C11+, Tm1, Tm5, etc) foram estabelecidas após submeter os esferóides sobreviventes da 4C à diluição limitante. Dados prévios de nosso laboratório mostraram aumento da expressão de Timp1 ao longo da transformação maligna de melanócitos e aumento da resistência ao anoikis. Melanócitos melan-a superexpressando o gene Timp1 adquirem fenótipo de resistência ao anoikis. No entanto, o mecanismo pelo qual Timp1 medeia essa sinalização de sobrevivência não é conhecido. Dados da literatura mostram interação entre CD63, Timp1 e 1-integrinas em células epiteliais de mama humana e que essa interação regula processos fisiológicos como apoptose. Além disso, a glicosilação aberrante em moléculas de adesão celular, como integrinas, pode conferir às células capacidade de sobreviver em condições independentes de ancoragem. O objetivo do presente estudo foi analisar a possível interação entre CD63, Timp1 e 1-integrinas ao longo da transformação maligna de melanócitos, a presença de N-glicosilação aberrante em β1-integrinas e o impacto da N-glicosilação aberrante na resistência ao anoikis. Observou-se interação entre CD63 e Timp1 e CD63 e 1-integrinas nas linhagens 4C, 4C11- e 4C11+, estabelecidas após ciclos de impedimento de ancoragem, já a interação entre Timp1 e 1-integrinas foi observada somente nas linhagens de melanoma 4C11- e 4C11+. A expressão de 1-integrinas na superfície celular está aumentada na linhagem de melanoma agressivo 4C11+, assim como a expressão de Mgat-V e N-glicosilação aberrante. Além disso, o perfil eletroforético da 1-integrina sugere que a mesma apresenta aumento de N-glicosilação aberrante na linhagem de melanoma metastático 4C11+. O tratamento de células de melanoma 4C11+ com o inibidor de N-glicosilação swainsonine resulta em menor capacidade destas células em resistir ao anoikis. Este parece ser o primeiro estudo descrevendo a interação entre Timp1, CD63 e 1-integrinas em células tumorais. Assim, o presente trabalho favorece o entendimento de como Timp1 regula resistência ao anoikis ao longo da transformação maligna de melanócitos. / Although malignant melanoma is the less frequently diagnosed skin cancer, it shows a poor prognosis due its chemoresistance and metastasis development. One of the adquired abilities of transformed cells is anoikis resistance and this property is closely related to metastasis formation. In our laboratory, we developed a model that allows us to study different steps of melanocyte malignant transformation. Melan-a melanocytes surviving after 1, 2, 3 and 4 deadhesion cycles showed modified morphology and independent PMA growth and have been named, 1C, 2C, 3C and 4C cells, respectively. Different melanoma cell lines were established after submitting 4C spheroids to limiting dilution. Previous results of our group showed increased expression of Timp1 along melanoma genesis and its correlation with anoikis resistance. However, the mechanism involved in this signaling is unknown. Published data demonstrated interaction between CD63, Timp1 and 1-integrins in human breast epithelial cells and its role in apoptosis. Furthermore, aberrant glycosylation in cell adhesion molecules such as integrins provides to cells the ability to survive under anchorage-independent conditions. The aim of this work was analyze the possible interaction among CD63, Timp1 and 1-integrins along melanocyte malignant transformation, possible aberrant N-glycosylation patterns of β1-integrins and their impact in anoikis resistance. Aberrant N-glycosylation patterns were observed in tumorigenic cells. We observed interaction between CD63 and Timp1 and between CD63 and 1-integrins in the melan-a-derived cells 4C, 4C11, and 4C11 +, and interaction between Timp1 and 1-integrins only in melanoma cell lines 4C11 - and 4C11 +. The presence of Timp1 in supernatant from 4C11+ conferred to melan-a cells anoikis resistance. The expression of 1-integrins in our study model is increased in aggressive melanoma lineage, 4C11+, as well as the expression of Mgat-V and aberrant N-glycosylation on cell surface. Moreover, the electrophoretic profile of  1-integrin suggests that melanoma metastatic 4C11+. Lineage present increased aberrant N-glycosylation in this molecule. Treatment of melanoma cells 4C11 + with the N-glycosylation inhibitor, swainsonine, resulted in reduced capacity of these cells to resist to anoikis. This seems to be the first study describing the interaction between Timp1, CD63 and 1-integrin in tumor cells and may contribute to a better understanding of how Timp1 regulates resistance to anoikis during the melanocyte malignant transformation. / TEDE / BV UNIFESP: Teses e dissertações

O gênero Leishmania apresenta espécies capazes de desenvolver doenças de grande importância para a saúde pública, as leishmanioses, que apresentam prevalência mundial de 12 milhões de pessoas. Quando os parasitos entram em contato com o hospedeiro humano passam por um processo de metaciclogênese adquirindo capacidade de interagir com os macrófagos. Inúmeras atividades biológicas são desencadeadas pela ativação de sistemas de transdução de sinais, onde as proteínas cinases e fosfatases desempenham papel fundamental. A proteína cinase CK2 parece estar presente em todas as células eucarióticas (núcleo, citoplasma e superfície). É caracterizada como enzima serina/treonina cinase, embora também seja capaz de fosforilar resíduos de tirosina em suas proteínas-alvo. No presente trabalho, demonstramos que o principal inibidor da CK2, TBB, foi capaz de inibir o crescimento de formas promastigotas de L. donovani e mostrou um mecanismo de ação irreversível, entretanto não foi capaz de induzir apoptose nas formas promastigotas de L. donovani. O pré-tratamento dos parasitos e macrófagos, assim como a adição do TBB durante o processo de infecção induziram uma redução significativa no número de amastigotas por macrófagos possivelmente pelo mecanismo de morte celular programada demosntrada pela técnica do TUNEL. O tratamento de macrófagos com TBB não induziram o aumento de óxido nítrico. Ensaios de imunofluorescência demonstraram a presença de CK2α em promastigotas. Macrófagos não infectados demonstraram pouca marcação para CK2α. Após a interação, a enzima mostrou-se distribuída preferencialmente na periferia dos macrófagos. Os dados do trabalho sugerem que a CK2 é uma importante enzima para a atividade biológica da Leishmania donovani, tendo seu estudo importante relevância para a descoberta de novos alvos terapêuticos. / The genus Leishmania contains multiple species that are responsible for a group of diseases, leishmaniasis. Current estimates suggest that 12 million people are infected. When parasites enter a human host, they undergo metacyclogenesis and acquire the ability to interact with macrophages. This interaction activites signal transduction pathways inducing numerous biological activities, including protein kinase CK2. CK2 has been observed in all eukaryotic cells residing in the nucleus, the cytoplasm and on the cell surface. It appears to have an essential function and recognizes serine/threonine or tyrosine residues in target proteins for phosphorylation. In the present study, we demonstrate that the treatment of L. donovani promastigotes with TBB resulted in inhibition of cell growth and showed an irreversible mechanism of action, however was not able to induce apoptosis in L. donovani promastigotes. The pre-treatment of promastigotes and macrophages, as well as the addition of TBB during infection induced a significant reduction in the number of amastigotes per macrophages, possibly via the mechanism of programmed cell death showed by TUNEL technique. Treatment of macrophages with TBB did not induce the increase of nitric oxide. Immunofluorescence assays demonstrated the presence of CK2α distributed throughout the surface the promastigotes. Uninfected macrophages showed little to no CK2α. After initiating the interaction of parasites with macrophages, CK2α was observed distributed preferentially in the nucleus of macrophages. Job data suggest that CK2 is an important enzyme for the biological activity of Leishmania donovani, and its study important relevance to the discovery of new therapeutic targets.

Processos corrosivos geram perdas incalculáveis para a sociedade. Existe, portanto, uma incessante busca por métodos cada vez mais econômicos, eficientes e que não gerem impacto ao meio-ambiente. Polímeros heterocíclicos são macromoléculas de elevada performance que vêm sendo estudados como inibidores de corrosão por atenderem as premissas citadas acima. Neste trabalho realizou-se a modificação química da poliacrilonitrila com a incorporação de grupos 2-vinil-2-oxazolina no teor teórico de 20%. O copolímero obtido e a poliacrilonitrila não modificada foram caracterizados por espectroscopia na região do infravermelho e avaliados como inibidores de corrosão para alumínio e aço carbono em meio salino em temperatura de 60C. As concentrações utilizadas foram de 20, 50, 100 e 200 ppm e os períodos de checagem: 1, 2, 3 e 4 semanas. Os polímeros estudados apresentaram atividade inibitória de corrosão apenas para o aço carbono. Para o alumínio, o ensaio em branco apresentou a menor taxa de corrosão dentre todos os ensaios realizados / Corrosive processes, still generate unmeasurable losses to society. There is therefore a constant search for methods that are more economical, efficient and that does not generate impact to the environment. High performance heterocyclic polymers are macromolecules which have been studied as corrosion inhibitors for meeting the premises mentioned above. In this work, a chemical modification of polyacrylonitrile with the incorporation of 2-vinyl-2-oxazoline groups at the theoretical rate of 20% is proposed. The obtained copolymer and not modified polyacrylonitrile were characterized qualitatively by infrared spectroscopy and evaluated as corrosion inhibitors for aluminum and carbon steel in saline medium at 60 C. The concentrations used were 20, 50, 100 and 200ppm and checking timeline of: 1, 2, 3 and 4 weeks. The results indicate that the studied polymers showed corrosion inhibiting activity only for carbon steel. For aluminum, blank test showed the lowest rate of corrosion of all tests performed

Conselho Nacional de Desenvolvimento Científico e Tecnológico / The manipulation of oocytes enclosed in follicles Ovarian Pre-Antral, allows increasing the reproductive potential of females from the isolation and cultivation. The follicular viability can be affected negatively correlated with age, malnutrition, exposure to radio or chemotherapy and health conditions. The alternatives are to use these research for development of culture media which provides the maintenance of viability allows the activation and follicular development in vitro, for subsequent fertilization. Physiologically various growth factors are involved in the process of folliculogenesis, many of which have so far not been tested in goats. Among them the Sphingosine 1-phosphate (S1P) and Leukemia Inhibitory Factor (LIF), since, follicular development were obtained with these factors in other species, allowing follicular growth and ant apoptotic effect on ovarian tissue. The aim of this study was to evaluate the addition of different concentrations of S1P and the LIF to culture media separately, evaluating the maintenance of viability, activation and follicular development. Thus, the preantral follicle cultured with S1P in situ LIF for 7 days and follicular development as possible to maintain viability, activation and growth of preantral follicle in vitro. Concluding that the S1P 1 ng/ml LIF and 10ng/ml, were the concentration that the maintenance of viability and follicular activation of in situ and grown in vitro for 7 days improved the viability, activation and preantral follicular growth. / A Manipulação de Oócito Incluso em Folículos Ovariano Pré-Antral (MOIFOPA) possibilita o aumento do potencial reprodutivo das fêmeas a partir do isolamento e cultivo de FOPA. A viabilidade folicular pode sofrer influências negativas com a idade, desnutrição, exposição a rádio ou quimioterápicos e condições sanitárias adversas. As alternativas para aproveitamento desses FOPA são pesquisas voltadas para elaboração de meios de cultivos que proporcione o manutenção da viabilidade a possibilite a ativação e o desenvolvimento folicular in vitro, para posterior fertilização. Fisiologicamente vários fatores de crescimento estão envolvidos durante o processo da foliculogênese, muitos dos quais até o momento não foram testados em cabras. Dentre eles, a Esfingosina 1-fosfato (S1P) e o Fator Inibidor da Leucemia (LIF), uma vez que, o desenvolvimento folicular foram obtido com esses fatores em outras espécies, possibilitando crescimento folicular e efeito anti-apoptótico no tecido ovariano. O objetivo desse trabalho foi avaliar a adição de diferentes concentrações de S1P e o do LIF separadamente aos meios de cultivo, avaliando a manutenção da viabilidade, ativação e desenvolvimento folicular. Dessa forma, os FOPA cultivados in situ com S1P e LIF por 7 dias possibilitaram desenvolvimento folicular conforme a manutenção da viabilidade, ativação e crescimento dos FOPA in vitro. Concluindo que a S1P 1ng/ml e o LIF 10ng/ml, foram as concentração que condicionaram a manutenção da viabilidade e a ativação dos FOPA in situ cultivados in vitro por 7 em dias melhor mantiveram a viabilidade, ativação e crescimento folicular.

Coordenação de Aperfeiçoamento de Pessoal de Nível Superior / Weed control is one of the main agricultural practices indispensable to ensure profitability and crop success. In paddy rice field, red rice is the most important weed due to its difficult control. A widespread control method is the use of rice cultivars resistant to herbicides which are inhibitors of ALS, since it is possible to have a selective chemical control. Studies showed that the late control with imazamox promotes efficient control of red rice escapes. Thus, the objective of this research was to check the effects of imazamox application in the reproductive phase of two rice cultivars that differ in the level of resistance to imidazolinones. Two studies were carried out at the Federal University of Santa Maria in the years of 2009/10 and 2010/11. Imazamox was applied in different stadium of development and doses. At the end of the application the final dose was 80 g a.i ha-1 for all treatments. Results showed that independent of the date of the imazamox application in the reproductive phase of rice, the grain yield reduced and spikelet sterility of IRGA 422 CL increased. In general, the parameters 1000-grain weight, flag leaf length, panicule length, fresh and dry weight of panicles, and panicles per m2 showed a reduction in practically all imazamox treatments in the IRGA 422 CL cultivar. Changes in the biochemical parameters (chlorophyll, carotenoids, thiobarbituric acid reactive substances, superoxide dismutase, catalase and ascorbate peroxidase) were observed in leaves and panicles from main culm in some treatments, demonstrating that the oxidative stress promoted by imazamox may have contributed to grain yield reduction and the high percentage of sterile spikelet from IRGA 422 CL cultivar. Morphologic and anatomical changes showed that imazamox application in the panicle differentiation promoted similar changes to homeotic changes observed in rice mutant. Moreover, in the other treatments different morphologic and anatomical changes were observed. Therefore, morphologic and anatomical changes were likely to be responsible for grain yield reduction and high percentage of spikelet sterile from IRGA 422 CL. / O controle de plantas daninhas é uma das práticas agrícolas indispensáveis para garantir rentabilidade e sucesso no cultivo. No cultivo de arroz irrigado, o arroz vermelho é a planta daninha de maior importância, devido sua dificuldade de controle. Um método de controle bastante difundido é o uso de cultivares resistentes aos herbicidas inibidores da ALS, pois permite um controle químico seletivo. Estudos demonstram que o controle tardio com o herbicida imazamox promove controle eficiente de escapes de arroz vermelho. Por isso, o objetivo deste trabalho foi verificar os efeitos da aplicação do imazamox na fase reprodutiva de duas cultivares de arroz irrigado (IRGA 422 CL e PUITÁ INTA CL) que diferem quanto ao nível de resistência as imidazolinonas. Em vista do exposto, foram conduzidos dois estudos na área experimental da Universidade Federal de Santa Maria (2009/10 e 2010/11). O imazamox foi aplicado em diferentes estádios de desenvolvimento e doses, sendo que a dose final foi de 80 g i.a ha-1. Com os resultados obtidos conclui-se que independente da data de aplicação do imazamox na fase reprodutiva da cultura ocorreu redução da produtividade de grãos e aumentou a esterilidade de espiguetas da cultivar IRGA 422 CL. De maneira geral, os parâmetros: peso de mil grãos, comprimento da folha bandeira, comprimento de panícula, peso fresco e seco de panículas, e número de panículas por metro quadrado mostraram redução em praticamente todos os tratamentos na cultivar IRGA 422 CL. Alterações nos parâmetros bioquímicos (clorofila, carotenoides, substâncias reativas ao ácido tiobarbitúrico, superóxido dismutase, catalase e ascorbato peroxidase) foram observadas em folhas e panículas do colmo principal em alguns tratamentos, demonstrando que o estresse oxidativo provocado pela aplicação do imazamox pode ter contribuído para a redução da produtividade de grãos e o elevado percentual de espiguetas estéreis da cultivar IRGA 422 CL. A cultivar PUITÁ INTA CL não sofreu alterações em todos os parâmetros avaliados neste estudo. As alterações morfológicas e anatômicas demonstraram que a aplicação de 80 g i.a ha-1 imazamox na diferenciação da panícula promoveu alterações semelhantes às alterações homeóticas observadas em arroz mutante. Além disso, nas plantas que receberam a dose de 80 g i.a ha-1 após 14 dias da diferenciação do primórdio floral (DPF) e as plantas que receberam a dose de 80 g i.a ha-1 em aplicação fracionada (metade da dose 7 dias após DPF e metade da dose aos 14 dias após DPF) mostraram alterações morfológicas e anatômicas do grão de pólen. Dado o exposto, os resultados obtidos sugerem que as alterações morfológicas e anatômicas foram responsáveis pela redução da produtividade de grãos e alto percentual de espiguetas estéreis da cultivar IRGA 422 CL.

Submitted by Vasti Diniz (vastijpa@hotmail.com) on 2017-09-08T14:21:13Z No. of bitstreams: 1 arquivototal.pdf: 1859059 bytes, checksum: b132aa4cd1f20f233d8bac438414a9bc (MD5) / Made available in DSpace on 2017-09-08T14:21:13Z (GMT). No. of bitstreams: 1 arquivototal.pdf: 1859059 bytes, checksum: b132aa4cd1f20f233d8bac438414a9bc (MD5) Previous issue date: 2015-04-30 / Coordenação de Aperfeiçoamento de Pessoal de Nível Superior - CAPES / The mutual ineffective for many antibiotics called multidrug resistance (MDR), has undermined the therapeutic value of existing antibacterial. With the identification and characterization of efflux systems that confer clinical resistance to antimicrobial, has emerged interest in developing a new class of agents enhancers the antibiotic action that act as inhibitors of efflux pumps, this are also called antibiotic activity modifiers or antibiotics adjuvantes. In this study, were evaluated synthetic guanylhydrazones derivatives as antibacterial and agents modulators of drug resistance in strains of Staphylococcus aureus. The bacterial strains used express the genes NorA, MrsA or TetK encoding proteins efflux for norfloxacin and ethidium bromide (NorA), erythromycin (MsrA) and tetracycline(TetK), respectively. The minimum inhibitory concentrations (MIC) values of the antibiotics and synthetic derivatives were determined in nutrient broth by the microdilution assay, and to evaluate the modulator activity, the MIC of antibiotics and ethidium bromide were determined in the absence and presence of subinibitory concentrations of guanylhydrazones. The compounds tested did not display relevant antibacterial activity for majority compounds at the concentrations tested, showing MIC ranging from (16 to > 256 μg/mL). When combined with the antibiotics tetracycline and erythromycin some compounds reduced their MIC 2-fold and 4-fold respectively. However, when combined with norfloxacin, except only one compound, all guanylhydrazones derivatives in different ratios and degrees of sensitivity, were able to potentiate the effect of this antibiotic, with three compounds which reduced its MIC 16-fold to norfloxacin, 32-fold to ethidium bromide and 8-fold for berberine used as positive controls for NorA pump. The molecular docking studies showed that both norfloxacin and compound 13 are recognized by the same binding site on the NorA pump, suggesting a competitive mechanism. The results presented here reported for the first time its great potential of guanylhydrazones derivatives to be putative inhibitors of bacterial efflux systems, especially for strains Staphylococcus aureus. / A ineficácia mútua para diversos antibióticos chamada de resistência múltipla as drogas (MDR), tem minado o valor terapêutico dos antibacterianos existentes. Com a identificação e caracterização de sistemas de efluxo que conferem resistência clínica aos antimicrobianos, tem surgido interesse no desenvolvimento de uma nova classe de agentes potenciadores da ação antibiótica que atuem como inibidores de bombas de efluxo, estes também são chamados de modificadores de atividade antibiótica ou adjuvantes de antibióticos. No presente trabalho, foram avaliados derivados sintéticos guanilhidrazônicos como antibacterianos e agentes moduladores da resistência à drogas em linhagens de Staphylococcus aureus. As linhagens bacterianas utilizadas expressam o gene norA, msrA ou tetK codificadores das proteínas de efluxo para norfloxacina e brometo de etídeo (NorA), eritromicina (MsrA) e tetraciclina (TetK), respectivamente. Foram determinadas por meio da técnica de microdiluição em caldo nutritivo os valores das concentrações inibitória mínima (CIM) dos antibióticos e dos derivados sintéticos, e para avaliar a atividade moduladora, as CIM dos antibióticos e do brometo de etídeo foram determinadas na ausência e na presença de concentrações subinibitórias dos compostos sintéticos. Os compostos ensaiados não mostraram atividade antibacteriana efetiva para a maioria dos compostos nas concentrações testadas, exibindo CIM variando entre (16 à >256 μg/mL). Quando combinados com os antibióticos tetraciclina e eritromicina alguns reduziram suas CIM em 2 e 4 vezes respectivamente. Entretanto quando combinado com norfloxacina, exceto apenas um composto, todos os derivados guanilhidrazônicos em diferentes proporções e graus de sensibilidade, foram capazes de potencializar o efeito deste antibiótico, apresentando três compostos que reduziram sua CIM até 16 vezes, 32 vezes para brometo de etídeo e 8 vezes para berberina usados como controles positivos para bomba NorA. Os estudos de docking molecular mostrou que tanto a norfloxacina quanto o composto 13 reconhecem o mesmo sítio de ligação na bomba NorA, sugerindo um mecanismo competitivo para atividade moduladora a drogas. Estes resultados aqui apresentados relatam pela primeira vez, o potencial de derivados guanilhidrazônicos em ser putativos inibidores dos sistemas de efluxo bacterianos, em especial para estirpes de Staphylococcus aureus.

Made available in DSpace on 2016-12-08T15:50:04Z (GMT). No. of bitstreams: 1 PGMS14DA020.pdf: 1241701 bytes, checksum: 696adecfb227383e0ee8edb226ce8b1e (MD5) Previous issue date: 2014-01-27 / Coordenação de Aperfeiçoamento de Pessoal de Nível Superior / Practices of soil management and use of animal manure as a source of fertilizer affect emissions of greenhouse gases (GHG), which contribute to global warming. The main greenhouse gases produced in agriculture, in addition to carbon dioxide, are nitrous oxide (N2O) and methane (CH4), being issued mainly by the use of animal manure and rice cultivation, respectively. Therefore, three studies were conducted to evaluate the effect of management practices on emissions of N2O and CH4. In study I, the soil was a Humic Dystrudept and the effect of conventional tillage (CT) and no tillage (NT) with and without the application of liquid swine manure systems (DLS) was evaluated. In study II, under the same soil type, the effect of addition of nitrification inhibitor dicyandiamide (DCD) to liquid swine manure (DLS) on the mitigation of greenhouse gases was evaluated. In study III, the soil was a Typic Albaqualf, the effect of continuous and intermittent flooding systems in emissions of CH4 and N2O emissions during the rice cultivation systems were evaluated. Air samples were collected in static chambers and concentration of N2O and CH4 determined by gas chromatography. Approximately 2/3 of the annual N2O emission occurred during the first 90 days after application of DLS. At the end of about a year, the emission factor for N2O in treatments with and without the application of DLS ranged 1-5% of the N applied. The N2O emissions were controlled mainly by the availability of nitrate, total soil porosity filled with water, soil temperature and microbial activity (CO2 flux). The use of DCD with manure reduced approximately 60% of cumulative N2O emissions from NT. The soil revolving on CT may have reduced the efficiency of the inhibitor on N2O emissions, suggesting the need for increased dose of DCD in this soil management. The DCD, delays the onset of nitrate in the soil after application of DLS, reducing N losses and pollution potential of manure. On the Study III, it was found that intermittent irrigation with 60% saturated soil reduced emissions of CH4 about 90% compared to continuous flooding. This system can represent a promising practice in mitigating N2O and CH4 emissions without reducing productivity in rice / Práticas de manejo do solo e utilização de dejetos animais como fonte de fertilizantes afetam as emissões de gases de efeito estufa (GEE), as quais agravam o aquecimento global. Os principais gases de efeito estufa produzidos na agricultura, além do gás carbônico, são o óxido nitroso (N2O) e metano (CH4), sendo emitidos principalmente pela utilização de dejetos animais e no cultivo do arroz irrigado, respectivamente. Diante disso, três estudos foram conduzidos com o objetivo de avaliar o efeito de práticas de manejo nas emissões de N2O e CH4. No estudo I, em um Cambissolo Húmico, avaliou-se o efeito dos sistemas de preparo convencional (PC) e plantio direto (PD) com e sem a aplicação de dejeto líquido de suínos (DLS). No estudo II, em um Cambissolo Húmico, foi avaliado o efeito da adição do inibidor de nitrificação dicianodiamida (DCD) a dejetos suínos na mitigação dos gases. No estudo III, em um Planossolo Háplico, foi avaliado o efeito dos sistemas de alagamento contínuo e intermitente nas emissões de CH4 e N2O durante o cultivo de arroz. Amostras de ar foram coletadas em câmaras estáticas e a concentração de N2O e CH4 foi determinada por cromatografia gasosa. Aproximadamente 2/3 da emissão anual de N2O ocorreu durante os primeiros 90 dias após a aplicação do DLS. Ao final de aproximadamente um ano o fator de emissão de N2O nos tratamentos com e sem a aplicação de DLS variou de 1 a 5% do N aplicado. As emissões de N2O foram controladas principalmente pela disponibilidade de nitrato, porosidade total do solo preenchida por água, temperatura do solo e atividade microbiana (fluxo de CO2). A utilização de DCD junto aos dejetos reduziu aproximadamente 60% das emissões acumuladas de N2O no PD. O 10 revolvimento do solo no PC pode ter reduzido a eficiência do inibidor nas emissões de N2O, sugerindo a necessidade de maior dose de DCD neste sistema de manejo do solo. A DCD, ao retardar o aparecimento de nitrato no solo após a aplicação de DLS, reduz as perdas de N e o potencial poluidor dos dejetos. Com relação ao estudo III, verificou-se que o sistema de irrigação intermitente com 60% de saturação do solo reduziu as emissões de CH4 em cerca de 90% em relação ao sistema de alagamento contínuo. Esse sistema pode ser uma prática promissora na mitigação das emissões de N2O e CH4, sem redução de produtividade na cultura do arroz

Made available in DSpace on 2014-12-17T14:03:28Z (GMT). No. of bitstreams: 1 LudovicoM.pdf: 1651172 bytes, checksum: 32d873e29ab629d06ae3a79806c6523e (MD5) Previous issue date: 2008-07-02 / Coordena??o de Aperfei?oamento de Pessoal de N?vel Superior / Serines proteinases inhibitors (PIs) are widely distributed in nature and are able to inhibit both in vitro and in vivo enzymatic activites. Seed PIs in than leguminous are classified in seven families, Bowman-Birk and Kunitz type families that most studied representing an important role in the first line of defense toward insects pests. Some Kunitz type inhibitors possess activities serine and cysteine for proteinases named bifunctional inhibitor, as ApTKI the inhibitor isolate from seed of Adenanthera pavonina. The A. pavonina inhibitor presenting the uncommon property and was used for interaction studies between proteinases serine (trypsin) and cysteine (papain). In order to determinate the in vitro interaction of ApTKI against enzymes inhibitor purification was carried cut by using chromatographic techniques and inhibition assays. The 3D model of the bifunctional inhibitor ApTKI was constructed SWISS-MODEL program by homology modeling using soybean trypsin inhibitor (STI, pdb:1ba7), as template which presented 40% of identity to A. pavonina inhibitor. Model quality was evaluated by PROCHECK program. Moreover in silico analyzes of formed complex between the enzymes and ApTKI was evaluated by HEX 4.5 program. In vitro results confirmed the inhibitory assays, where the inhibitor presented the ability to simultaneously inhibit trypsin and papain. The residues encountered in the inhibitor model of folder structural three-dimensional that make contact to enzymes target coud explain the specificity pattern against serine and cysteine proteinases / Os inibidores de proteinases ser?nicas (IPs) est?o extensamente distribu?dos na natureza e inibem a atividade enzim?tica in vitro e in vivo. Estes IPs em sementes de leguminosas compreendem sete fam?lias, no entanto as fam?lias Bowman-Birk e do tipo Kunitz s?o as mais estudadas e representam um papel importante na primeira linha de defesa contra insetos pragas. Alguns inibidores do tipo Kunitz possuem atividades para proteinases ser?nicas e ciste?nicas sendo denominados inibidores bifuncionais, como o inibidor ApTKI da semente de Adenanthera pavonina. O inibidor de A. pavonina por apresentar essa caracter?stica incomum aos inibidores dessa fam?lia foi utilizado para o estudo da intera??o entre as proteinases ser?nica (tripsina) e ciste?nica (papa?na). Para determinar a intera??o in vitro de ApTKI e as enzimas alvo foi realizada a purifica??o do inibidor a partir de t?cnicas cromatogr?ficas e ensaios de inibi??o. O modelo 3D do inibidor bifuncional ApTKI foi constru?do pelo programa SWISS-MODEL atrav?s da metodologia de modelagem por homologia utilizando como molde o inibidor de tripsina de soja (STI, pdb:1ba7) que apresentou 40% de identidade com a prote?na alvo. A qualidade do modelo foi avaliada pelo programa PROCHECK. Para a an?lise do complexo in silico entre as enzimas alvo e o inibidor foi utilizado o programa HEX 4.5. Estes resultados confirmaram os ensaios inibit?rios in vitro, onde ApTKI apresentou a capacidade de inibir simultaneamente tripsina e papa?na. Algumas das diferen?as observadas nos res?duos do sitio reativo explicam a forte afinidade para tripsina e a fraca para papa?na

Made available in DSpace on 2014-12-17T14:09:15Z (GMT). No. of bitstreams: 1 MariaBMCF_TESE.pdf: 3590314 bytes, checksum: 61ee9a18f02d6eff55991bb6b1c735a8 (MD5) Previous issue date: 2012-07-31 / Coordena??o de Aperfei?oamento de Pessoal de N?vel Superior / Actually in the oil industry biotechnological approaches represent a challenge. In that, attention to metal structures affected by electrochemical corrosive processes, as well as by the interference of microorganisms (biocorrosion) which affect the kinetics of the environment / metal interface. Regarding to economical and environmental impacts reduction let to the use of natural products as an alternative to toxic synthetic inhibitors. This study aims the employment of green chemistry by evaluating the stem bark extracts (EHC, hydroalcoholic extract) and leaves (ECF, chloroform extract) of plant species Croton cajucara Benth as a corrosion inhibitor. In addition the effectiveness of corrosion inhibition of bioactive trans-clerodane dehydrocrotonin (DCTN) isolated from the stem bark of this Croton was also evaluated. For this purpose, carbon steel AISI 1020 was immersed in saline media (3,5 % NaCl) in the presence and absence of a microorganism recovered from a pipeline oil sample. Corrosion inhibition efficiency and its mechanisms were investigated by linear sweep voltammetry and electrochemical impedance. Culture-dependent and molecular biology techniques were used to characterize and identify bacterial species present in oil samples. The tested natural products EHC, ECF and DCTN (DMSO as solvent) in abiotic environment presented respectively, corrosion inhibition efficiencies of 57.6% (500 ppm), 86.1% (500 ppm) and 54.5% (62.5 ppm). Adsorption phenomena showed that EHC best fit Frumkin isotherm and ECF to Temkin isotherm. EHC extract (250 ppm) dissolved in a polar microemulsion system (MES-EHC) showed significant maximum inhibition efficiency (93.8%) fitting Langmuir isotherm. In the presence of the isolated Pseudomonas sp, EHC and ECF were able to form eco-compatible organic films with anti-corrosive properties / Na ind?stria petrol?fera problemas relacionados a processos corrosivos em estruturas met?licas representam um desafio voltado para quest?es biotecnol?gicas. Esses processos podem ser significantemente influenciados pela presen?a de microorganismos que afetam a cin?tica eletroqu?mica da interface ambiente/superf?cie met?lica (biocorros?o). Neste contexto, a substitui??o de inibidores sint?ticos t?xicos por produtos naturais bioaceit?veis constitui uma alternativa economicamente importante com minimiza??o de impactos ambientais. No presente trabalho um dos objetivos principais est? vinculado ao emprego de qu?mica verde, em que foram avaliados extratos da casca do caule (extrato hidroalco?lico denominado de EHC) e folhas (extrato clorof?rmio, ECF) da esp?cie vegetal Croton cajucara Benth. Em adi??o a efic?cia de inibi??o ? corros?o do clerodano bioativo trans-desidrocrotonina (DCTN) isolado das cascas do caule deste Croton tamb?m foi avaliada. Para tanto, utilizou-se a?o carbono AISI 1020 imerso em solu??o salina, sob influ?ncia de microrganismo recuperado de uma amostra de petr?leo, bem como na sua aus?ncia. As efici?ncias de inibi??es ? corros?o e seus mecanismos foram investigados atrav?s das t?cnicas de voltametria de varredura linear e imped?ncia eletroqu?mica. T?cnicas dependentes de cultura e de biologia molecular foram utilizadas na identifica??o de esp?cies bacterianas presentes em amostras de petr?leo. Os extratos EHC, ECF e o composto DCTN veiculados em DMSO, apresentaram respectivamente, efici?ncias de inibi??es ? corros?o em meio abi?tico, com m?ximas de 57,6% (500 ppm), 86,1% (500 ppm) e 54,5% (62,5 ppm). Com rela??o ao processo de adsor??o, EHC se ajustou a isoterma de Frumkin e ECF a isoterma de Temkin. No entanto, o extrato EHC (250 ppm) veiculado em uma microemuls?o polar (SME-EHC) com efici?ncia m?xima de inibi??o 93,8%, se ajustou a isoterma de Langmuir. Na presen?a da esp?cie bacteriana caracterizada Pseudomonas sp., os extratos EHC e ECF formaram filmes ecocompat?veis protetores com a??o anti-corrosiva