Orientador: Ricardo Pasquini / Co-orientador: Giovanni Loddo / Dissertação (mestrado) - Universidade Federal do Parana, Setor de Ciencias da Saude, Programa de Pós-Graduação em Medicina Interna / Resumo: Neste trabalho foram estudadas as necropsias realizadas nos pacientes submetidos ao transplante de medula óssea no período de 15 de outubro de 1979 à 26 de dezembro de 1989. Neste período foram realizados 206 transplantes de medula óssea no Serviço de Transplante de Medula Óssea do Hospital de Clínicas da Universidade Federal do Paraná. Destes 206 pacientes transplantados, 115 haviam falecido até 31 de dezembro de 1989 sendo que 66 tinham sido submetidos à necropsia. Conseguimos reunir 62 pacientes, que constituem a base deste estudo. Este grupo desenvolveu complicações variadas que culminaram com a morte. Necropsia completa foi realizada e do material anatomopatológico disponível estudamos as alterações morfológicas no parênquima pulmonar. As alterações observadas foram agrupadas segundo uma codificação para os achados anatomopatológicos que criamos. De posse do conjunto de alterações as classificamos em padrões histopatológicos de comprometimento do parênquima pulmonar, segundo uma tabela obtida na literatura e por nós modificada. As complicações pulmonares contribuíram de maneira significativa para o óbito dos pacientes em estudo sendo que a maior parte deles morreu nos primeiros dois meses após o transplante. Nestes óbitos precoces predominaram os padrões histopatológicos de dano alveolar difuso, hemorragia pulmonar difusa e congestão-edema-hemorragia, que são inespecíficos, indicando apenas que os pulmões sofreram injúrias. Em todos os casos foi feita uma busca minuciosa no sentido de identificar agentes causais das alterações observadas porém em apenas 22 pacientes conseguimos identificar microorganismos presentes no parênquima pulmonar e determinando alterações. O encontro de fungos e células infectadas por Citomegalovirus em áreas alteradas do parênquima pulmonar permitiu-nos dizer que estes microorganismos foram os responsáveis pelos danos causados. A freqüente presença das complicações pulmonares nos pacientes que apresentavam infecções, doença enxerto contra hospedeiro e rejeição no período que antecedeu ao óbito alerta-nos para a importância da profilaxia destas situações, que possibilitará uma melhoria na sobrevida. Mesmo com a realização da necropsia, muitos pacientes permaneceram sem diagnóstico definitivo das alterações pulmonares, principalmente com relação aos fatores etiológicos. Devido à importância do comprometimento pulmonar nos pacientes submetidos ao transplante de medula óssea, estudos posteriores devem ser implementados para um melhor entendimento e tratamento das complicações pulmonares.

Made available in DSpace on 2016-08-12T18:48:43Z (GMT). No. of bitstreams: 0 Previous issue date: 2015-03-25. Added 1 bitstream(s) on 2016-08-12T18:50:56Z : No. of bitstreams: 1 000865035.pdf: 2885145 bytes, checksum: 58689c1127487cd6a684985eb3d90f7a (MD5) / Fundação de Amparo à Pesquisa do Estado de São Paulo (FAPESP) / Introdução: a dexmedetomidina é um enantiômero dextrógiro da medetomidina, possui importantes ações sedativas e analgésicas. A dexmedetomidina é empregada como medicação pré-anestésica ou associada à anestesia pelas vias intravenosa, muscular, peridural ou subaracnoidea. Estudos clínicos mostram que quando utilizada no espaço peridural de seres humanos a dexmedetomidina não desencadeou lesões neurológicas. Pela via subaracnoidea a associação de pequenas doses do fármaco (3-10 g) com o anestésico resultou em aumento no tempo dos bloqueios sensitivo e motor, com manutenção da estabilidade hemodinâmica e algum grau de sedação. Os estudos sobre os efeitos da dexmedetomidina introduzida no espaço subaracnoideo, além de escassos, não asseguram que o agente não causa lesões neurológicas. Objetivo: avaliar os efeitos que a dexmedetomidina, administrada pela via subaracnoidea em dose única, determina sobre a medula espinal e as meninges de coelhos. Método: vinte coelhos adultos jovens, fêmeas, pesando entre 3200 a 4900 gr com comprimento de coluna vertebral entre 36 e 40 cm foram divididas, por sorteio, em dois grupos (G): G1 solução fisiológica 0,9%, G2 dexmedetomidina (10 μg). Após anestesia venosa com cetamina e xilazina foi realizada punção subaracnoidea em S1-S2 guiada por ultrassom e injetada a solução sorteada. Os animais permaneceram em cativeiro por 21 dias sob observação clínica e foram sacrificados por decapitação e retirada a porção lombo-sacral da medula espinal para exame histológico [Hematoxilina e eosina (HE) e imuno-histoquímica para proteína glial fibrilar ácida (GFAP)]. Resultados: nenhum animal apresentou lesão histológica de tecido nervosa, entretanto 9 animais apresentaram alterações em meninges. Conclusão: neste modelo experimental em coelhos, a dexmedetomidina administrada no espaço subaracnoideo em dose única, não desencadeou alterações histológicas sobre o... / Background: dexmedetomidine is a dextrorotatory enantiomer of medetomidine, has important sedative and analgesic actions. This drug is used as premedication or associated with anesthesia by intravenous, muscular, epidural or subarachnoid. Clinical studies show that when used in the epidural space of human's dexmedetomidine did not cause neurological damage. By subarachnoid way the association of small drug doses (3-10 μg) with the anesthetic resulted in an increase in the time of sensory and motor block, maintaining hemodynamic stability and some degree of sedation. Studies on the effects of dexmedetomidine introduced into the subarachnoid space, besides scarce do not ensure that the agent does not cause neurological damage. Objective: to evaluate the effects of dexmedetomidine, administered by the intrathecal route in single dose, determines on the spinal cord and meninges of rabbits. Method: twenty young adult female rabbits, weighing 3200-4900 g with 36 spine length and 40 cm were divided by lot into two groups (G ): 0.9% saline G1, G2 dexmedetomidine (10 μg). After intravenous anesthesia with ketamine and xylazine spinal puncture was performed in S1 - S2 ultrasound guided and injected a random solution. The animals remained in captivity for 21 days under medical observation and were sacrificed by decapitation and removal of the lumbosacral portion of the spinal cord for histologic examination [hematoxylin and eosin (HE)] and immunohistochemistry for glial fibrillary acidic protein (GFAP). Results: no animal showed histological lesions of nerve tissue; however 9 animals showed changes in meninges. Conclusions: in this experimental model in rabbits dexmedetomidine triggered no histological lesions of nerve tissue, but showed changes in meninges / FAPESP: 11/22262-1

Made available in DSpace on 2015-07-08T03:25:37Z (GMT). No. of bitstreams: 1 000471698-Texto+Completo-0.pdf: 569 bytes, checksum: 66364ee4f5c85986f21271079f0ad4cf (MD5) Previous issue date: 2015 / Parkinson’s disease is characterized by the progressive loss of dopaminergic neurons from the substantia nigra, a process that leads to a dopamine deficiency in the striatum. This deficiency is responsible for the development of motor symptoms, including resting tremor, bradykinesia, rigidity and postural instability. New alternatives to Parkinson’s disease treatment have been studied, including cell-based therapies. The present study aimed to assess the therapeutic potential of intravenous and intrastriatal transplant of bone marrow mononuclear cells in a mouse model of Parkinson’s disease. Animals underwent stereotaxic surgery and 1μl of 6-hidroxidopamine (6-OHDA) was injected into their medial forebrain bundle. Two weeks later, mice were evaluated in the apomorphine rotation test to confirm the model induction. In the next week, animals’ pre-transplant motor function was assessed by Rotarod test. Then, BMMC or saline injection was carried out through the tail vein or directly into animals’ striatum. Motor function was also assessed using the Rotarod and apomorphineinduced rotation tests, 10 and 30 days post-transplant. Our results showed that intravenous BMMC did not restore the motor function in PD mice. In addition, transplanted cells were found only 24h after transplant in the brain tissue. On the other hand, the BMMC intracerebral transplant prevented the dopaminergic deficit progress, induced by 6-OHDA injection, effect seen in apomorphine-induced rotation test, only 10 days post-transplant. This potential was not seen on Rotarod test, showing dissociation between dopaminergic response and motor function. In addition, it was carried out a BMMC double transplant into parkinsonian mice’s striatum. It was shown, however, an increase in the apomorphineinduced rotations number, 30 days after the first transplant, even after a second injection of BMMC at 20 days. It was also shown, that, BMMC can be detected for at least 30 days after the intrastriatal transplant. Further experiments are needed to elucidate the mechanisms involved in these effects. / A doença de Parkinson (DP) é caracterizada pela perda progressiva dos neurônios dopaminérgicos da substancia negra, a qual leva a uma deficiência de dopamina no estriado. Essa deficiência é responsável pelo desenvolvimento de sintomas motores como tremor em repouso, bradicinesia, rigidez e instabilidade postural. Novas alternativas para o tratamento da DP têm sido estudadas e uma possibilidade promissora é o transplante de células-tronco. O presente estudo teve como objetivo avaliar o potencial terapêutico do transplante intravenoso e intracerebral de células mononucleares de medula óssea (CMMO) em um modelo lesional da DP. Os animais foram submetidos à estereotaxia e 1μl de 6-hidroxidopamina (6-OHDA) foi injetado no feixe prosencefálico medial. Duas semanas após, os camundongos foram avaliados no teste de rotação induzida por apomorfina para confirmação da indução do modelo. Na semana seguinte, os animais foram submetidos à avaliação da função motora, prétransplante, pelo teste de Rotarod. Em seguida, a injeção de CMMO ou salina foi realizada através da veia da cauda ou diretamente no estriado dos animais. A função motora póstransplante foi avaliada através do teste de Rotarod e do teste de rotação induzida por apomorfina, 10 e 30 dias após o transplante. Nosso estudo demonstrou que as CMMO, transplantadas através da veia da cauda em camundongos parkinsonianos, não foram capazes de melhorar a função motora desses animais. Além disso, essa células foram encontradas no tecido encefálico, apenas 24h após o transplante. Por outro lado, o transplante intracerebral das CMMO impediu a progressão do déficit dopaminérgico induzido pela 6-OHDA, efeito observado através do teste de rotação induzida por apomorfina, apenas 10 dias após. Esse efeito não refletiu, entretanto, na melhora do desempenho dos animais no teste de Rotarod, demonstrando uma dissociação da resposta dopaminérgica e da função motora. Além disso, foi realizado também um transplante duplo de CMMO no estriado de camundongos parkinsoniano. Foi observado, porém, um aumento no número de rotações induzidas por apomorfina, 30 dias após o primeiro transplante, mesmo após uma segunda injeção de CMMO aos 20 dias. Foi demonstrado, também, que as CMMO podem ser detectadas por pelo menos 30 dias após o transplante intraestriatal. Estudos adicionais são necessários para elucidar os mecanismos envolvidos no efeito das CMMO observados no modelo animal da DP.

Made available in DSpace on 2016-06-02T12:30:27Z (GMT). No. of bitstreams: 1 000478920-Texto+Completo-0.pdf: 4958315 bytes, checksum: 38858f11b57077cc60813c0fa01390dd (MD5) Previous issue date: 2016 / The gastrin-releasing peptide (GRP) and its receptor (GRPR) were recently identified as specific components of pruritus, suggesting an important pharmacological potential for this system; however, the mechanisms underlying GRP/GRPR activity remain undefined. Herein, we evaluated GRPR localization and downstream signaling pathways. Our data show that GRP directly activates small-size capsaicin-sensitive DRG neurons, an effect that translates into transient calcium flux and membrane depolarization. Expression profile revealed that PI3KΎ is downstream of the GRP/GRPR axis, observed by GRP-induced Akt phosphorylation in ex vivo naive mouse spinal cords and in GRPR transiently expressing HEK293 cells. However, ex vivo mouse spinal cord stimulation by GRP failed to induce the activation of MAP-kinases, namely ERK 1/2 and p38. Intrathecal GRP administration led to intense scratching behavior, an effect significantly reduced by either GRPR antagonism or the PI3KΎ inhibition. We assessed whether the GRP/GRPR system is involved in chronic itching using the dry skin model and found that GRPR blockade or PI3KΎ inhibition reversed the scratching. We also found that p-Akt and GRPR are co-expressed in the spinal cord and in DRG neurons from dry skin mice, and that p-Akt levels are increased in these animals, an effect prevented by GRPR blockade. The intradermal injection of GRP also triggers scratching behavior, which was significantly decreased after treatment with PI3KΎ inhibitor. The itching response was also induced by the intrathecal injection of an Akt activator. Altogether, these findings are highly suggestive that GRPR is expressed by the peripheral and central terminals of DRG nociceptive afferents, which transmit itch via the PI3KΎ/Akt pathway. / O peptídeo liberador de gastrina (GRP) e seu receptor (GRPR) foram recentemente identificados como componentes específicos do prurido, com importante potencial farmacológico; no entanto, os mecanismos intracelulares que medeiam a atividade do sistema GRP/GRPR permanecem desconhecidos. O presente estudo avaliou a localização do GRPR e as vias de sinalização downstream ativadas por este receptor. Os dados obtidos mostram que o GRP ativa diretamente neurônios de pequeno diâmetro do DRG, sensíveis a capsaicina, um efeito demonstrado pelo fluxo transitório de cálcio e pela despolarização da membrana. O perfil de expressão observado sugere que a PI3KΎ é ativada downstream ao sistema GRP/GRPR, como indicado pela fosforilação de Akt (marcador de atividade de PI3KΎ) induzida por GRP, em medulas de camundongos ex vivo e, em células HEK293 transfectadas com GRPR. Contudo, a aplicação de GRP em medulas de camundongos, ex vivo, não parece depender da ativação das MAP-quinases, ERK1/2 ou p38. A injeção intratecal de GRP leva a um comportamento de coçar intenso, que é significativamente reduzido por antagonistas de GRPR ou pela inibição farmacológica de PI3KΎ.Para avaliar se o sistema GRP/GRPR estaria envolvido no prurido crônico, foi empregado o modelo de pele seca em camundongos. Neste paradigma experimental, o bloqueio de GRPR ou de PI3KΎ reverteu o comportamento de coçar. Os dados obtidos também mostram que p-Akt e GRPR estão co-localizados na medula espinhal e em neurônios do DRG de animais com pele seca e, que os níveis de p-Akt estão aumentados nesses animais, um efeito que foi prevenido pelo bloqueio de GRPR. A injeção intradérmica de GRP também induziu o comportamento de coçar, que foi significativamente reduzido após o tratamento com inibidor de PI3KΎ. Finalmente, foi demonstrado que a injeção intratecal de um ativador de Akt foi capaz de induzir coceira em camundongos. O conjunto de resultados obtidos sugere que o GRPR é expresso por terminais periféricos e centrais de neurônios nociceptivos do DRG, transmitindo o prurido através da ativação da via PI3KΎ/Akt.

Orientador: Aureo Evangelista Santana / Banca: Mirela Tinucci Costa / Banca: Thiago Demarchi Munhoz / Banca: Daniela Gomes da Silva / Banca: Geórgia Modé Magalhães / Resumo: Este estudo teve como objetivo a quantificação sérica de hormônios e citocinas indutores (eritropoietina e IL-3) e supressores (paratormônio, IL-1β, TNFα e IFNγ) da eritropoiese, correlacionando-os com as variáveis eritrocitárias periféricas e centrais. Amostras de sangue periférico, urina e medula óssea foram obtidas de 10 cães com doença renal crônica estádio 2 (DRC2), 10 cães com DRC estádio 3 (DRC3), 10 cães com DRC estádio 4 (DRC4) e 10 cães adultos saudáveis (grupo controle) com vistas à realização de hemograma, análise bioquímica sérica e urinária, urinálise, ensaios imunoenzimáticos e análise citológica da medula óssea. As concentrações dos fatores indutores e supressores da eritropoiese, assim como os resultados do mielograma dos cães do DRC2 assemelharam-se aos do grupo controle, e apesar de não terem manifestado anemia, a presença de reticulocitose alerta para o fato de fatores externos a medula óssea estarem precocemente causando perda ou destruição dos eritrócitos. A anemia em cães com DRC está relacionada ao aumento nas concentrações de paratormônio e TNFα, e a exacerbação dos referidos fatores supressores, bem como à hipoplasia da série eritróide, representada principalmente pela redução da população de eritroblastos policromatofílicos e ortocromáticos, constituem, parcialmente, a base da gênese e do agravamento do estado anêmico nas fases mais avançadas da DRC em cães / Abstract: The aim of this study was to evaluate bone marrow precursor cells, circulating concentrations of cytokines and hormones that can stimulate (erythropoietin and IL-3) and suppress (parathyroid hormone, IL-1β, TNF and IFN) erythropoiesis, and make their correlation with the peripheral and central erythrocyte variables. Peripheral blood samples, urine and bone marrow were obtained from 10 dogs with chronic kidney disease stage 2 (CKD2), 10 dogs with CKD stage 3 (CKD3), 10 dogs with CKD stage 4 (CKD4), and 10 healthy adult dogs (control group) for complete blood count (CBC), serum and urinary biochemical analysis, urinalysis, immunoassays and cytological analysis of bone marrow. The concentrations of erythropoiesis stimulator and suppressor factors, and cytological bone marrow results from CKD2 dogs were similar to those of the control group. This group also exhibited reticulocytosis even though not have expressed anemia, which means that extrinsic factors are early cause of blood loss or destruction of red blood cells. The anemia in dogs with CKD is related to increased parathyroid hormone and TNFα serum concentrations. The increases of such suppressor factors in association with erythroid hypoplasia are considered as part of the genesis and the aggravation of the anemic state in the end stages of CKD in dogs / Doutor

Orientador: Júlio Carlos Canola / Banca: Paola Castro Moraes / Banca: Rosana Zanatta / Resumo: Lesões da medula espinhal ocorrem frequentemente em pequenos animais em razão de causas exógenas ou endógenas. A lesão medular é classificada em extradural, intradural-extramedular e intramedular. Este estudo tem como objetivo determinar as lesões que envolvem a medula espinhal e seus diferentes achados e frequências à mielografia. Paralelamente, um outro estudo com seis pacientes com exames inconclusivos à mielografia foram submetidos à tomografia computadorizada contrastada e seus achados foram confrontados com a mielografia. Neste estudo foram reavaliados 154 casos de cães com suspeita clínica neurológica envolvendo a medula espinhal, os quais foram submetidos a exames radiográficos convencionais e à mielografia com composto iodado não iônico no período de 2008 a 2012. Os exames imaginológicos foram desenvolvidos no Setor Diagnóstico por Imagem do Hospital Veterinário "Governador Laudo Natel" da Faculdade de Ciências Agrária e Veterinária de Jaboticabal - Unesp. Entre as diferentes raças de cães, a Teckel foi mais acometida com a apresentação de 58 pacientes (38%). A faixa etária de maior ocorrência foi de cinco a oito anos, totalizando 67 cães (43,5%). A coluna cervical foi o segmento de maior ocorrência das lesões encontradas com 88 lesões (44%). A localização mais frequente das lesões foi extradural, correspondente a 191 lesões do total analisado (95,5%) e nove lesões foram intradurais-extramedulares (4,5%). Das lesões extradurais, 175 (91,6%) foram de origem degenerativa do disco intervertebral, protrusão/extrusão. Com exceção dos 154 casos, no primeiro semestre de 2013, em seis outros pacientes foram realizados, sequencialmente, mielografias e tomografia computadorizada. Nestes casos as lesões foram em região cervical: três casos (50%), dois na região lombar (33%) e um toracolombar (17%). Todas as lesões foram extradurais, três casos de extrusão do disco (50%), dois de... / Abstract: Spinal cord injuries often occur in small animals due to exogenous or endogenous causes. Spinal cord injury is classified into extradural, intradural-extramedullary and intramedullary. This study aims to determine the lesions involving the spinal cord and its findings and different frequencies to myelography. At the same time, another study with six patients with inconclusive examinations to myelography underwent computed tomography contrasting and their findings were compared with myelography. In this study were reassessed 154 cases of dogs with neurological clinical suspicion surrounding the spinal cord, which underwent conventional radiographs and myelography with nonionic iodinated compound in the period 2008 to 2012. The imaging studies were developed in Sector Diagnostic Imaging Veterinary Hospital "Governador Laudo Natel" of the Faculdade de Ciências Agrárias e Veterinárias Jaboticabal - Unesp. Among the different breeds of dogs, the Teckel were the most affected with the presentation of 58 patients (38%). The age group most frequent was 5-8 years, totaling 67 dogs (43.5%). The cervical column was the most frequent segment of the lesions found in 88 lesions (44%). The most common location of lesions was extradural corresponding to lesions of the total analyzed 191 (95.5%) and nine lesions were intradural extramedullary (4.5%). Extradural lesions of 175 (91.6%) were degenerative intervertebral disc protrusion / extrusion. Aside from the 154 cases in the first half of 2013, in six other patients were performed sequentially myelography and computed tomography. In these cases the lesions were in the neck: three cases (50%), two in the lower back (33%) and one thoracolumbar (17%). All lesions were extradural three cases of disc extrusion (50%), two protrusion (33.3%) and one for cancer/osteomyelitis (16.7%). The myelography permits, in most cases lead to a definitive diagnosis in patients with spinal cord compression injury. Computed ... / Mestre

Orientador: Carlos Augusto Araújo Valadão / Banca: André Escobar / Banca: Juan Carlos Duque Moreno / Resumo: A utilização de opioides produz analgesia, porém esta classe de fármacos possui uso restrito na espécie equina, pois pode desencadear alterações gastrintestinais e excitação em equinos. A utilização de opioides pela via epidural minimiza os efeitos adversos. Assim, oito equinos hígidos pesando 336,3 ± 33,4 kg foram utilizados em três grupos experimentais, com o objetivo de avaliar os efeitos clínicos, e no trânsito gastrintestinal da injeção epidural de morfina (0,2 mg/kg) ou tramadol (1,0 mg/kg) ou NaCl 0,9%. Foram avaliados os parâmetros clínicos, que compreenderam a frequência cardíaca, frequência respiratória, temperatura retal, motilidade intestinal, altura de cabeça e latência para defecar. Manifestações de desconforto abdominal também foram investigadas após administração do opioide pela via epidural. Para a avaliação do trânsito intestinal foi utilizado o método Lipe®. Submeteram-se os dados à análise estatística entre momentos e entre os grupos, submetendo os dados paramétricos à análise de variância de uma via, com o reteste de Student-Newman-Keuls e os dados não paramétricos ao teste de Friedman ou Kruskal-Wallis seguido pelo teste de Dunn's, ambos com significância estabelecida em p ≤ 0,05. A frequência cardíaca, frequência respiratória, temperatura retal e altura de cabeça não apresentaram variações significativas. O escore de motilidade total (somatória dos quatro quadrantes) diminuiu em 40% aos 30, 60 e 90 minutos, após a injeção epidural de morfina. A morfina ou tramadol administrados pela via epidural não alteraram o trânsito intestinal. Nenhum quadro de desconforto abdominal foi evidenciado. Diante de tais achados, conclui-se que a morfina reduziu a motilidade intestinal sem alterar o trânsito intestinal de fase líquida enquanto o tramadol não alterou a motilidade ou trânsito intestinal / Abstract: Opioids provide analgesia, but have restricted use in horses because may lead to ileus and axcitement. Epidural opioids minimize side effects. Eight healthy horses (336.3 ± 33.4 kg) were used in three experimental groups to evaluate clinical, behavioral and gastrointestinal transit after epidural morphine (0.2 mg/kg) or tramadol (mg/kg) or NaCl 0.9%. Heart rate, respiratory rate, rectal temperature, intestinal motility, head height and time to first production of feces were evaluated. Intestinal transit was evaluated with the Lipe® method. The data were analyzed by a one-way analysis of variance or Friedman or Kruskal-Wallis and Student-Newman Keuls or Dunn's tests as a post hoc. A value of p≤0.05 was considered significant. Tramadol or morphine produced did not change change in heart rate, respiratory rate, rectal temperature, head height and time to first production of feces. Epidural morphine decreased the gastrointestinal sounds score of four quadrants at 30, 60 and 120 minutes. Epidural morphine or tramadol did not change the intestinal transit. Opioid epidural did not cause ileus or colic. It is concluded that morphine reduced intestinal motility without changing the intestinal transit while the tramadol did not change intestinal motility or gastrointestinal transit / Mestre

Orientador: Eliana Marisa Ganem / Banca: Yara Marcondes Machado Castiglia / Banca: Lais Helena Camacho Navarro e Lino / Banca: José Admirço Lima Filho / Banca: Jose Eduardo Bagnara Orosz / Resumo: Introdução: a dexmedetomidina é um enantiômero dextrógiro da medetomidina, possui importantes ações sedativas e analgésicas. A dexmedetomidina é empregada como medicação pré-anestésica ou associada à anestesia pelas vias intravenosa, muscular, peridural ou subaracnoidea. Estudos clínicos mostram que quando utilizada no espaço peridural de seres humanos a dexmedetomidina não desencadeou lesões neurológicas. Pela via subaracnoidea a associação de pequenas doses do fármaco (3-10 g) com o anestésico resultou em aumento no tempo dos bloqueios sensitivo e motor, com manutenção da estabilidade hemodinâmica e algum grau de sedação. Os estudos sobre os efeitos da dexmedetomidina introduzida no espaço subaracnoideo, além de escassos, não asseguram que o agente não causa lesões neurológicas. Objetivo: avaliar os efeitos que a dexmedetomidina, administrada pela via subaracnoidea em dose única, determina sobre a medula espinal e as meninges de coelhos. Método: vinte coelhos adultos jovens, fêmeas, pesando entre 3200 a 4900 gr com comprimento de coluna vertebral entre 36 e 40 cm foram divididas, por sorteio, em dois grupos (G): G1 solução fisiológica 0,9%, G2 dexmedetomidina (10 μg). Após anestesia venosa com cetamina e xilazina foi realizada punção subaracnoidea em S1-S2 guiada por ultrassom e injetada a solução sorteada. Os animais permaneceram em cativeiro por 21 dias sob observação clínica e foram sacrificados por decapitação e retirada a porção lombo-sacral da medula espinal para exame histológico [Hematoxilina e eosina (HE) e imuno-histoquímica para proteína glial fibrilar ácida (GFAP)]. Resultados: nenhum animal apresentou lesão histológica de tecido nervosa, entretanto 9 animais apresentaram alterações em meninges. Conclusão: neste modelo experimental em coelhos, a dexmedetomidina administrada no espaço subaracnoideo em dose única, não desencadeou alterações histológicas sobre o... / Abstract: Background: dexmedetomidine is a dextrorotatory enantiomer of medetomidine, has important sedative and analgesic actions. This drug is used as premedication or associated with anesthesia by intravenous, muscular, epidural or subarachnoid. Clinical studies show that when used in the epidural space of human's dexmedetomidine did not cause neurological damage. By subarachnoid way the association of small drug doses (3-10 μg) with the anesthetic resulted in an increase in the time of sensory and motor block, maintaining hemodynamic stability and some degree of sedation. Studies on the effects of dexmedetomidine introduced into the subarachnoid space, besides scarce do not ensure that the agent does not cause neurological damage. Objective: to evaluate the effects of dexmedetomidine, administered by the intrathecal route in single dose, determines on the spinal cord and meninges of rabbits. Method: twenty young adult female rabbits, weighing 3200-4900 g with 36 spine length and 40 cm were divided by lot into two groups (G ): 0.9% saline G1, G2 dexmedetomidine (10 μg). After intravenous anesthesia with ketamine and xylazine spinal puncture was performed in S1 - S2 ultrasound guided and injected a random solution. The animals remained in captivity for 21 days under medical observation and were sacrificed by decapitation and removal of the lumbosacral portion of the spinal cord for histologic examination [hematoxylin and eosin (HE)] and immunohistochemistry for glial fibrillary acidic protein (GFAP). Results: no animal showed histological lesions of nerve tissue; however 9 animals showed changes in meninges. Conclusions: in this experimental model in rabbits dexmedetomidine triggered no histological lesions of nerve tissue, but showed changes in meninges / Doutor

Orientador: Maria Cecilia Rui Luvizotto / Banca: Fabio dos Santos Nogueira / Banca: Suely Regina Mogami Bomfim / Resumo: O objetivo dessa pesquisa foi analisar a resposta imune celular de cães negativos (GI), vacinados (GII) e positivos (GIII) para a LVC por meio da imunocitoquímica para os anticorpos anti-CD4, anti-CD8 e FOXP3 na capa leucocitária e medula óssea. Na capa leucocitária, quando comparados os grupos entre si, não houve diferença estatística para as células T CD4. Os grupos I e III apresentaram maior imunomarcação para anti-CD8. Embora não tenha sido observada diferença estatística (p>0,05), a imunomarcação para FOXP3 mostrou os menores valores percentuais nos três grupos estudados. Os grupos I e II apresentaram maior imunomarcação para anti-CD4, seguida do anti-CD8, quando comparados os anticorpos em cada grupo separadamente. Nos animais do grupo III, foi observada maior expressão de células imunorreativas ao anti-CD8 seguida do anti-CD4, e valores reduzidos para FOXP3. Nas células da medula óssea não foi verificada diferença estatística na expressão dos anticorpos anti-CD4, anti-CD8 e FOXP3 quando comparados os grupos entre si. Na análise comparativa entre os anticorpos testados, entretanto, foi observada maior marcação para o anticorpo anti-CD4 em GI, ausência de diferença estatística em GII e maior percentual de células positivas para anti-CD8 em GIII. Os valores de FOXP3 também se mantiveram reduzidos em todos os grupos. A técnica de cito inclusão foi padronizada com sucesso, obtendo 68% de viabilidade para amostras da capa leucocitária e medula óssea. Os resultados obtidos neste estudo indicam que a presença de células T CD4+ e CD8+ em animais vacinados, em associação à expressão reduzida do marcador de células T regulatórias FOXP3, sugerem que a vacina Leishmune® exerce um efeito estimulatório na resposta imune celular de cães, promovendo um incremento da resposta protetora Th1 / Abstract: The aim of this research was to analyze the cellular immune response of negative (GI), vaccinated (GII) and positive (GIII) dogs for VCL by immunocytochemistry for CD4, CD8 and FOXP3 antibodies on the buffy coat and bone marrow. In the buffy coat, when compared the three groups together, there was no statistical difference in CD4+ T cells. Groups I and III showed higher immunostainning for anti-CD8. Although no statistical difference was observed, immunostainning for FOXP3 showed the lowest percentages in all three groups. Groups I and II showed higher immunoreactivity to anti-CD4 followed by anti-CD8 antibodies when compared each group separately. In group III, we observed increased expression of immunoreactive cells to anti- CD8 followed by anti-CD4, and reduced values for FOXP3. In bone marrow cells there was no statistical difference in the expression of anti-CD4, anti-CD8 and FOXP3 antibodies in the three groups. The comparative analysis between the antibodies tested, however, revealed greater cellularity expressing anti-CD4 in GII, and higher percentage of anti-CD8 positive cells in GIII. The group II showed no statistical difference between the antibodies analyzed. FOXP3 values also remained low in all groups. The results of this study indicate that the presence of CD4 + and CD8 + T lymphocytes in the vaccinated animals, combined with reduced expression of the marker of regulatory T cells FOXP3 suggest that Leishmune ® vaccine exerts a stimulatory effect on immune response of dogs, promoting an increase in the protective Th1 response / Mestre

Made available in DSpace on 2011-12-27T14:14:01Z (GMT). No. of bitstreams: 2 000388585-0.pdf: 2402252 bytes, checksum: 61c5f710d7d456a08638eac157bdc111 (MD5) license.txt: 581 bytes, checksum: 44ea52f0b7567232681c6e3d72285adc (MD5) / The bone marrow besides having a high number of heterogenic cells, like connective, hematopoietics, and neuronal cells, also presents a great number of stem cells. These cells are pluripotent, so can differentiate in any connective cell when a stimulus is given. The aim of this study was to evaluate bone marrow stem cells adhesion, proliferation, and differentiation to osteoblast in vitro, over a collagen membrane and a poli-lactic (glycolic) acid scaffold (PLGA), using either recombinant human bone morphogenetic protein (rhBMP-4) and platelet rich plasma (PRP). Bone marrow cells were aspirated from iliac crest and purify using specifics techniques. These cells were separated in main big groups cultured over collagen membrane and PLGA scaffold. Each culture had 4 distinct treatments: (1) with rhBMP-4; (2) with rhBMP-4 and PRP; (3) with PRP; and (4) control (only standard medium). The groups were evaluated after 6, 9 14 and 21 days. Microscopic analysis of collagen membrane and PLGA scaffold were performed using either Propidium Iodide, and Eosin and Hematoxilin. Real time PCR was performed to identify the expression level of osteopontin and osteocalcin, and standard PCR to osteopontin. The results showed cellular adhesion in both biomaterials, and suggest a higher cell proliferation and differentiation in rhBMP-4 and PRP, and PRP groups. The groups with rhBMP-4 had more differentiate cells that control group. The data obtained here indicate that PRP and/ or rhBMP-4 induce adhesion, proliferation and differentiation of bone marrow stem cells into osteogenic lineage. / O estroma da medula óssea, além de conter uma população heterogênea de células conjuntivas, nervosas e hematopoiéticas, mantém uma quantidade de células com características de células tronco (células mesenquimais indiferenciadas). Estas possuem capacidade de se diferenciarem em qualquer célula de natureza conjuntiva quando estimuladas pelo organismo. Esta pesquisa teve como objetivo avaliar a adesão, a proliferação e a diferenciação de células mesenquimais da medula óssea cultivadas sobre membrana de colágeno bovino e sobre arcabouço de ácido poliglicólico polilático (PLGA) com a adição do gel de plasma rico em plaquetas (PRP) e/ ou da proteína morfogenética óssea recombinante humana (rhBMP-4). As células foram coletadas da medula óssea da crista do osso ilíaco humana e separadas por técnica específica. As células foram cultivadas em dois suportes: membrana de colágeno e arcabouço de PLGA, e receberam 4 tratamentos distintos: (1) com rhBMP-4, (2) com rhBMP-4 e PRP, (3) com PRP e (4) controle (somente meio de cultura). Os subgrupos foram avaliados em 6, 9, 14 e 21 dias. Foram realizadas análises microscópicas das membranas e arcabouços com as colorações de Iodeto de Propídio e de Hematoxilina e Eosina. Foi feito PCR em tempo real a fim de se avaliar a expressão de osteopontina e osteocalcina e PCR convencional para osteopontina. Os resultados mostraram adesão celular tanto na membrana de colágeno como no arcabouço de PLGA. Sugere-se haver uma maior proliferação e diferenciação celular nos grupos que foram adicionados PRP, e rhBMP-4 e PRP juntos. Nos grupos com rhBMP-4 parece haver uma maior diferenciação celular que o grupo controle. Os dados obtidos indicam que o PRP e/ ou a presença de rhBMP-4 induzem adesão, proliferação e diferenciação de células da medula óssea em células de linhagem osteogênica.