Tese (doutorado) - Universidade Federal de Santa Catarina, Centro de Ciências Biológicas. Programa de Pós-Graduação em Farmacologia / Made available in DSpace on 2012-10-26T00:16:52Z (GMT). No. of bitstreams: 1 299102.pdf: 1115675 bytes, checksum: 1561537b124aa393233ecf22c382c035 (MD5) / Os sistemas endocanabinóide e adenosinérgico, através dos receptores A1 e CB1, compartilham uma série de características. Ou seja, ambos os receptores ativam proteínas Gi/o para mediar suas principais ações, inibem a liberação de diferentes neurotransmissores e são expressos em grandes concentrações no córtex, hipocampo e cerebelo. Além disso, agonistas dos dois receptores prejudicam processos relacionados à memória espacial enquanto que antagonistas induzem melhora cognitiva. Apesar das semelhanças entre os dois sistemas e da importância da memória espacial na fisiopatologia de diferentes doenças, poucos estudos avaliaram a possível interação entre ambos os sistemas no controle da memória espacial. Desta forma o objetivo deste trabalho foi avaliar a interação entre os sistemas adenosinérgico e endocanabinóide, através dos receptores A1 e CB1, na modulação da memória espacial. Para isso validou-se o modelo da localização de objetos em camundongos, o qual pareceu sensível a drogas amnésicas ou pró-mnemônicas. Além disso, demonstrou-se que a região CA1 do hipocampo participa da aquisição da memória de localização de objetos em camundongos. Posteriormente, utilizou-se o modelo recém validado e o labirinto aquático para avaliar o efeito pró-mnemônico da co-administração de antagonistas dos receptores A1 e CB1. Esta interação melhora o aprendizado de camundongos em doses até 20 vezes menores do que aquelas utilizadas para produzir o mesmo efeito quando administradas isoladamente. Na sequência demonstrou-se que as ações da co-administração são mediadas, pelo menos em parte, pela liberação de glutamato e a interação deste com os receptores NMDA no hipocampo e no córtex pré-frontal. No último grupo de experimentos, demonstrou-se que os receptores A1 e CB1 do hipocampo interagem para modular a amnésia induzida por agonistas de ambos. Ou seja, o efeito amnésico do agonista A1 é bloqueado pelo antagonista CB1, enquanto que o prejuízo de aprendizado induzido pelo agonista CB1 é atenuado pelo agonista A1. Sugerindo que tanto o tônus adenosinérgico quanto o endocanabinóide interagem para a modulação da amnésia induzida por agonistas dos receptores CB1 e A1, respectivamente. Por fim, conclui-se que os sistemas adenosinérgico e endocanabinóide, através de seus receptores A1 e CB1, interagem para o controle de processos associados à memória espacial de camundongos. / The adenosinergic and endocannabinoid systems share different characteristics through the A1 and CB1 receptors. For example, both are densely expressed in areas such as the cerebellum, prefrontal cortex, and hippocampus. The binding of agonists to them activates Gi/o proteins and similar mechanisms of signal transduction. Functionally, A1 and CB1 receptor activation inhibits the release of different neurotransmitters. In animal models of spatial learning, A1 and CB1 receptor agonists and antagonists have been reported to impair and to facilitate learning and memory, respectively. Despite these evidences, there are no studies evaluating the interaction between both systems in spatial memory processes. Initially, we have done a pharmacological validation of the object-location task in mice. This task is sensitive to amnesic and pro-mnemonic drugs, and the expression of memory seems to be dependent on the CA1 hippocampus. In a second set of results, we have shown that coadministration of subeffective doses of A1 and CB1 antagonists improves acquisition of spatial learning evaluated either in the water maze or in the object-location task. This effect was dependent on glutamate release into the hippocampus and prefrontal cortex. The blockade of NMDA receptors in the CA1 hippocampus and prefrontal cortex counteracts the effects of the coadministration evaluated in the object-location task. This suggests that the simultaneous blockade of the adenosinergic and endocannabinoid tonuses might enhance memory, and that the mechanism of this effect is dependent on glutamate release into the hippocampus and prefrontal cortex. The last group of experiments evaluated the interaction between A1 and CB1 receptors in the amnesia induced by the agonists of both. The result suggests that the amnesia induced by an A1 agonist is blocked by a CB1 receptor antagonist. On the other hand, the learning deficits induced by the CB1 receptor agonist are attenuated by the A1 receptor activation. This suggests that the adenosinergic and endocannabinoid systems might modulate amnesia induced either by A1 or CB1 agonists. Finally, these results also suggest that the adenosinergic and endocannabinoid systems interact to modulate behavioral processes associated with spatial memory.

Tese (doutorado) - Universidade Federal de Santa Catarina, Centro de Ciências da Saúde. Programa de Pós-Graduação em Farmacologia. / Made available in DSpace on 2012-10-23T13:57:58Z (GMT). No. of bitstreams: 1 243424.pdf: 1240520 bytes, checksum: 3b288558382f6a4199b323f0be477200 (MD5)

Made available in DSpace on 2018-07-27T18:26:06Z (GMT). No. of bitstreams: 0 Previous issue date: 2015-03-25. Added 1 bitstream(s) on 2018-07-27T18:29:50Z : No. of bitstreams: 1 000865781.pdf: 17935151 bytes, checksum: 7ceb972aa90983bb4105def9cb38d793 (MD5) / Coordenação de Aperfeiçoamento de Pessoal de Nível Superior (CAPES) / Fundação de Amparo à Pesquisa do Estado de São Paulo (FAPESP) / O reflexo auditivo de sobressalto (RAS) é uma reação motora rápida e evidente frente a um estímulo acústico intenso e inesperado. Trata-se de um reflexo acústico-motor do tronco encefálico que está presente em muitas espécies de mamíferos, incluindo o homem. Possui caráter tanto defensivo frente a uma possível agressão quanto de alerta frente a aconteci-mentos não esperados. Além do RAS resultar em uma resposta sobre a musculatura esque-lética, possui ação sobre o sistema nervoso autônomo promovendo aumento da pressão arterial e da freqüência cardíaca. No rato o circuito neural elementar do RAS é constituído por: neurônios do gânglio espiral, neurônios da raiz coclear (CRN), neurônios reticuloespi-nais do núcleo reticular caudal da ponte (PnC) e motoneurônios da medula espinal. O RAS pode ser modulado pela habituação, sensibilização, inibição por estímulo prévio (PPI) e pela potenciação por um estímulo adverso. Estas modulações podem ocorrer mediante a influên-cia de diversas substâncias neuroativas sobre os componentes deste circuito. Neste traba-lho avaliamos a origem de aferências monoaminérgicas (serotonina e noradrenalina) e CART-érgicas para os CRN e PnC. Para isso foram utilizados 54 ratos Wistar, adultos fê-meas, que foram submetidos a injeções de traçadores neuronais anterógrados e retrógrados para mapeamento de vias nervosas e a identificação imuno-histoquímica de substâncias neuroativas. Todos os protocolos experimentais foram aprovados pela Comissão de Ética no Uso de Animais do Instituto de Biociências de Botucatu - UNESP (protocolo no 17/08). Nos-sos resultados demonstram que o grupamento noradrenérgico A5 é uma fonte de aferências noradrenérgicas e CART-érgicas para os CRN e PnC, enquanto que o núcleo dorsal da rafe (DR) é a origem de aferências serotoninérgicas para estas regiões. Existem conexões recí-procas entre o DR, o A5 e o PnC. Além disso,... / The acoustic startle reflex (ASR) is a rapid motor reaction elicited by a sudden intense acoustic stimulus. This is an acoustic-motor reflex of brainstem conserved across mammal's species including man. Moreover the ASR is defensive behavior against both possible ag-gressive and alert to unexpected events. The ASR evokes responses of skeletal muscles as well as of autonomic nervous system with elevation of blood pressure and acceleration of the heart rate. In the rat, the elementary neural circuitry of ASR is mediated by ganglion cells of the organ of Corti, the cochlear root neurons (CRN), the pontine caudal reticular nucleus (PnC) and motoneurons of the spinal cord. The ASR could be modulated by habituation, sensitization, prepulse inhibition (PPI), and fear potentiation. These modulations were medi-ated by the influence of neuroactive substances on components of neuronal circuitry of ASR. In this work we evaluate the origin of monoaminergic (serotonin and noradrenaline) and CART-ergic afferents to CRN and PnC. Adult Female Wistar rats (n=54) were submitted to injections of retrograde and anterograde neuronal tracers in track-tracing experiments and identification of neuroactive substances in brain by immunohistochemistry technique. All ex-perimental protocols are according with Ethics Committee on Animal Use (protocol: 17/08). Our results demonstrate that noradrenergic area A5 (A5) is a source of noradrenergic and CART-ergic afferents to CRN and PnC, and dorsal raphe nucleus (DR) is origin of seroto-ninergic afferents to these regions. There are reciprocal connections between DR, A5 and PnC. Furthermore, after 14 and 21 days of lesion in A5, the percentage of PPI increased during intervals of 100 and 150 milliseconds without modification of ASR. This data suggest that A5 have direct action on elementary circuit of ASR evidenced his connections and modulation of PPI. Moreover, A5 and DR connections bring new insights about modulation ... / FAPESP: 08/02771-6

Orientador: José de Anchieta de Castro e Horta Junior / Banca: Luiz Takase / Banca: Claudio Aparecido Casatti / Banca: Luciana Pinatto / Banca: Mirela Barros Dias / Resumo: O reflexo auditivo de sobressalto (RAS) é uma reação motora rápida e evidente frente a um estímulo acústico intenso e inesperado. Trata-se de um reflexo acústico-motor do tronco encefálico que está presente em muitas espécies de mamíferos, incluindo o homem. Possui caráter tanto defensivo frente a uma possível agressão quanto de alerta frente a aconteci-mentos não esperados. Além do RAS resultar em uma resposta sobre a musculatura esque-lética, possui ação sobre o sistema nervoso autônomo promovendo aumento da pressão arterial e da freqüência cardíaca. No rato o circuito neural elementar do RAS é constituído por: neurônios do gânglio espiral, neurônios da raiz coclear (CRN), neurônios reticuloespi-nais do núcleo reticular caudal da ponte (PnC) e motoneurônios da medula espinal. O RAS pode ser modulado pela habituação, sensibilização, inibição por estímulo prévio (PPI) e pela potenciação por um estímulo adverso. Estas modulações podem ocorrer mediante a influên-cia de diversas substâncias neuroativas sobre os componentes deste circuito. Neste traba-lho avaliamos a origem de aferências monoaminérgicas (serotonina e noradrenalina) e CART-érgicas para os CRN e PnC. Para isso foram utilizados 54 ratos Wistar, adultos fê-meas, que foram submetidos a injeções de traçadores neuronais anterógrados e retrógrados para mapeamento de vias nervosas e a identificação imuno-histoquímica de substâncias neuroativas. Todos os protocolos experimentais foram aprovados pela Comissão de Ética no Uso de Animais do Instituto de Biociências de Botucatu - UNESP (protocolo no 17/08). Nos-sos resultados demonstram que o grupamento noradrenérgico A5 é uma fonte de aferências noradrenérgicas e CART-érgicas para os CRN e PnC, enquanto que o núcleo dorsal da rafe (DR) é a origem de aferências serotoninérgicas para estas regiões. Existem conexões recí-procas entre o DR, o A5 e o PnC. Além disso,... / Abstract: The acoustic startle reflex (ASR) is a rapid motor reaction elicited by a sudden intense acoustic stimulus. This is an acoustic-motor reflex of brainstem conserved across mammal's species including man. Moreover the ASR is defensive behavior against both possible ag-gressive and alert to unexpected events. The ASR evokes responses of skeletal muscles as well as of autonomic nervous system with elevation of blood pressure and acceleration of the heart rate. In the rat, the elementary neural circuitry of ASR is mediated by ganglion cells of the organ of Corti, the cochlear root neurons (CRN), the pontine caudal reticular nucleus (PnC) and motoneurons of the spinal cord. The ASR could be modulated by habituation, sensitization, prepulse inhibition (PPI), and fear potentiation. These modulations were medi-ated by the influence of neuroactive substances on components of neuronal circuitry of ASR. In this work we evaluate the origin of monoaminergic (serotonin and noradrenaline) and CART-ergic afferents to CRN and PnC. Adult Female Wistar rats (n=54) were submitted to injections of retrograde and anterograde neuronal tracers in track-tracing experiments and identification of neuroactive substances in brain by immunohistochemistry technique. All ex-perimental protocols are according with Ethics Committee on Animal Use (protocol: 17/08). Our results demonstrate that noradrenergic area A5 (A5) is a source of noradrenergic and CART-ergic afferents to CRN and PnC, and dorsal raphe nucleus (DR) is origin of seroto-ninergic afferents to these regions. There are reciprocal connections between DR, A5 and PnC. Furthermore, after 14 and 21 days of lesion in A5, the percentage of PPI increased during intervals of 100 and 150 milliseconds without modification of ASR. This data suggest that A5 have direct action on elementary circuit of ASR evidenced his connections and modulation of PPI. Moreover, A5 and DR connections bring new insights about modulation ... / Doutor

Tese (doutorado) - Universidade Federal de Santa Catarina, Centro de Ciencias Fisicas e Matematicas / Made available in DSpace on 2012-10-16T23:22:40Z (GMT). No. of bitstreams: 0Bitstream added on 2016-01-08T20:14:53Z : No. of bitstreams: 1 103890.pdf: 2837071 bytes, checksum: f978949d1d41207e551ad3ceb948d28f (MD5) / Uma série de 11 b-alcoxifeniletilaminas, das quais 7 são compostos novos, foram sintetizadas e caracterizadas na forma de seus cloridratos. Ensaios farmacológicos in vitro destas substâncias permitirarn obter as afinidades aparentes desses compostos por receptores serotonérgicos 5-HT2A e adrenérgicos a1, a partir de medidas de sua capacidade de induzir a contração de aorta torácica de rato. Cálculos teóricos semi-empíricos baseados no método AM1 foram realizados para estes compostos. As conformações mais estáveis foram deduzidas a partir destes cálculos e de estimativas baseadas em espectros de ressonância magnética nuclear de hidrogênio. As conformações resultantes foram então usadas na determinação de propriedades eletrônicas dependentes da estrutura de todos os compostos preparados. Estimativas de suas lipofilicidades globais (log P) foram obtidas a partir de valores de lipofilicidades locais por métodos descritos na literatura para compostos análogos. No estudo da relação estrutura-atividade, a análise estatística dos dados revelou que o valor obtido de afinidade (pD2) mostrou uma significante correlação com a lipofilicidade total das moléculas e a carga calculada para o átomo de carbono em para à cadeia etilamina. As afinidades in vitro correlacionaram pobremente com as energias HOMO dos compostos estudados, questionando um eventual processo de transferência de carga entre o receptor e o anel aromático. Ainda, os valores de afinidade correlacionaram razoavelmente bem com as potências descritas para algumas dessas drogas em humanos.

Dissertação (mestrado) - Universidade Federal de Santa Catarina, Centro de Ciências Biológicas. / Made available in DSpace on 2012-10-17T13:41:25Z (GMT). No. of bitstreams: 0Bitstream added on 2014-09-25T18:31:40Z : No. of bitstreams: 1 173879.pdf: 2608531 bytes, checksum: 4f70098c6505ebef3751499a03bcd3ce (MD5) / O presente trabalho descreve os efeitos comportamentais e sobre o eletroscilograma hipocampal (EOsG-HP) da injeção intracerebroventricular (i.c.v.) de serotonina (5-HT) em pombos domésticos (Columba livia). Foram registrados EOsG-HP, eletroculograma (EOG), eletromiograma (EMG) da musculatura posterior do pescoço e eventos comportamentais, por 20 minutos como período controle, seguidos de 1 hora de registro após a injeção i.c.v. de 5-HT (155 nmol) ou de seu veículo, ácido ascórbico (solução a 1% em H2O). A administração de 5-HT provocou uma intensa ingestão de água que ocorreu logo após a aplicação da droga. Além disso, seguida ou concomitante a ingestão de água estes animais adotaram uma postura típica de sono por longos períodos: permaneciam com os olhos fechados, sem movimentos corporais, a cabeça fletida e apoiada sobre o peito. Contudo, durante estes períodos de sono aparente observou-se aumento dos movimentos da cabeça sem, no entanto, abertura dos olhos. Durante os episódios de vigília ativa (VA) após a injeção de 5-HT, estes animais também apresentaram alteração motora com marcha atáxica além de dificuldade em localizar o bebedouro com água. Comparado ao período controle e ao grupo de veículo, o tratamento com 5-HT diminuiu o tempo em vigília relaxada secundário ao aumento do tempo em postura de sono, não afetando o tempo em VA. Em relação ao EOsG-HP, a injeção de 5-HT induziu o aparecimento de uma atividade dessincronizada prolongada, de freqüência rápida e baixa amplitude e ausência de ondas PGAs concomitante ao estado de sono aparente com postura típica e olhos fechados. Durante este estado o EMG mostrou diminuição do tonus muscular com alterações fásicas decorrentes dos movimentos da cabeça e o EOG mostrou movimentos oculares freqüentes. Este efeitos foram agudos, durando em média 30 minutos. Estes dados sugerem o possível envolvimento do sistema serotoninérgico nos mecanismos do sono paradoxal em pombos.

Dissertação (mestrado) - Universidade Federal de Santa Catarina, Centro de Ciências Biológicas. Programa de Pós-Graduação em Neurociências. / Made available in DSpace on 2012-10-23T14:35:48Z (GMT). No. of bitstreams: 1 237032.pdf: 776463 bytes, checksum: 5061384f459c57e4b6c83c527fc384eb (MD5) / Efeito da variação do nível de luminosidade entre os braços abertos e fechados (A/F?lux) e entre os braços fechados (F/F?lux) do labirinto em cruz elevado (LCE) no comportamento exploratório de ratos, bem como as implicações sobre a validade de predição do modelo.

Dissertação (mestrado) - Universidade Federal de Santa Catarina, Centro de Ciências Biológicas. Programa de Pós-Graduação em Neurociências. / Made available in DSpace on 2012-10-26T11:06:33Z (GMT). No. of bitstreams: 1 304291.pdf: 899522 bytes, checksum: f8d04f7af92d65b7db1f9261f0ba65e5 (MD5) / A doença de Alzheimer (DA) é uma enfermidade neurológica que afeta grande parte da população mundial. É caracterizada por perda de memória, demência progressiva, alterações de comportamento e incapacidade para as atividades rotineiras e consistem em duas particularidades conhecidas atualmente: formação de placas ß-amilóide (Aß) e (2) emaranhados neurofibrilares. Dados do nosso laboratório mostraram que o tratamento com atorvastatina (10mg/kg) durante 7 dias após a infusão de Aß protege contra a morte neuronal. A atorvastatina promove um aumento na expressão dos transportadores de glutamato GLAST e GLT-1, embora não apresente alteração na captação de glutamato e melhora no déficit cognitivo causado pela Aß. O objetivo deste estudo foi avaliar se um tratamento com atorvastatina durante 7 dias antes da infusão de Aß apresenta alterações na perda de memória cognitiva e parâmetros do sistema glutamatérgico, colinérgico e atividades de enzimas antioxidantes. Camundongos albinos Swiss machos adultos (3 meses/ 40-50g) foram pré-tratados com atorvastatina 10 mg/kg/dia, oralmente, ou veículo (solução salina, 0,9%) durante 7 dias. No sétimo dia a forma agregada de Aß 1-40 (i.c.v., 400pmol/sítio) ou PBS (veículo) foi administrada. No dia 21, os animais foram submetidos à tarefa de realocação de objetos e labirinto aquático de Morris e depois mortos para a análise bioquímica. Os dados foram analisados por ANOVA de duas vias seguido do Teste de Newman-Keuls. Na tarefa de realocação de objetos (n=14-21) animais pré-tratados com atorvastatina apresentaram melhora na cognição quando comparados aos animais Aß tanto nos treinos quanto nas sessões de teste. Na captação de glutamato a atorvastatina não reverte a diminuição da captação promovida pela Aß no hipocampo, já a liberação, a atividade da GS e da AChE não apresentaram qualquer alteração entre os grupos. Nas análises das atividades das enzimas GR e GPx a atorvastatina reverteu um aumento na atividade de ambas no córtex pré-frontal induzida pela Aß. Na região hipocampal somente a GR teve alteração, sendo que a atorvastatina aumentou a atividade enzimática em relação aos outros grupos. Estes resultados indicam que a atorvastatina pode ter um papel na melhora dos déficits de memória e aprendizado de animais infundidos com Aß, provavelmente devido a uma neuroproteção exercida pela droga e efeitos relacionados à diminuição da produção ou aumento do sequestro de radicais livres. / Amyloid-beta (Aß) peptides' deposition into specific encephalic structures has been pointed as an important event related to Alzheimer's disease (AD) pathogenesis and such deposits have been associated with the activation of glial cells, neuroinflammation, oxidative responses and cognitive deficits. Aß-induced pro-oxidative damage may down-regulate the activity of glutamate transporters, thus leading to reduced glutamate uptake and, as consequence, excitotoxic events. Herein, we evaluated the effects of the pretreatment of atorvastatin, a HMG-CoA reductase inhibitor, in behavioral and biochemical alterations induced by a single intracerebroventricular (i.c.v.) injection of aggregated A?1-40 in mice. Atorvastatin (10 mg/kg/day v.o.) was administered through 7 consecutive days before Aß1-40 administration (single i.c.v. injection, 400 pmol per mouse). Aß1-40 administration caused a significant cognitive impairment in the object-place recognition task (2 weeks after the i.c.v. injection) and this phenomenon was abolished by atorvastatin pretreatment. Although hippocampal glutamine synthetase (GS) activity were not changed by Aß1-40 administration, a significant decrease of glutamate uptake was observed in Aß1-40-exposed mice. Atorvastatin, which decreased hippocampal glutamate uptake per se, did not change the effects of Aß1-40 on glutamate uptake. However, Aß1-40 treatment significantly increased the cerebrocortical activities of glutathione reductase (GR) and glutathione peroxidase (GPx) and these events were blunted by atorvastatin pretreatment. These results extend the notion of the potential neuroprotective action of atorvastatin against the neuronal toxicity induced by Aß1-40 demonstrating that a pretreatment with atorvastatin prevents the spatial learning and memory deficits induced by A peptide in rodents and promote changes in glutamatergic system in hippocampus and antioxidant system in prefrontal cortex.

Dissertação (Mestrado) - Universidade Federal de Santa Catarina, Centro de Ciências Biológicas. / Made available in DSpace on 2012-10-18T19:03:01Z (GMT). No. of bitstreams: 0Bitstream added on 2013-07-16T17:38:54Z : No. of bitstreams: 1 138325.pdf: 1335220 bytes, checksum: d11d529681b51f29314f341dcfd55543 (MD5)

Dissertação (Mestrado) - Universidade Federal de Santa Catarina, Centro de Ciências Biológicas. / Made available in DSpace on 2012-10-18T21:25:01Z (GMT). No. of bitstreams: 0Bitstream added on 2016-01-09T02:23:58Z : No. of bitstreams: 1 152209.pdf: 6783419 bytes, checksum: 8cfa2c84fe03fad2a0c22f406da919ff (MD5) / A participação do receptor NMDA, presente na subtância cinzenta periaquedutal dorsal (SCPd), na modulação da ansiedade experimental e memória em ratos, foram avaliados no labirinto em T elevado (LTE). Este labirinto consiste de um braço aberto e dois braços fechados, com dimensões similares, e utiliza a esquiva inibitória e a fuga, respectivamente, para avaliar o medo condicionado e medo incondicionado. Os resultados mostraram um efeito ansiolítico, expresso pela diminuição da esquiva inibitória e da avaliação do risco, uma medida adicional que evidenciou a ansiólise obtida. O tratamento também prejudicou a aquisição e a evocação do comportamento condicionado de esquiva inibitória sem, no entanto, ter prejudicado a consolidação da memória. Com a injeção realizada 72 horas após, constatou-se uma diminuição da esquiva inibitória, traduzida como um prejuízo na evocação da memória. Foi averiguada também uma participação SCPd na aquisição da esquiva inibitória, sugerindo-se um possível papel dessa estrutura na memória emocional.