Submitted by Marcos Anselmo (marcos.anselmo@unipampa.edu.br) on 2016-04-04T17:21:32Z No. of bitstreams: 1 Lucian Del Fabbro.pdf: 1272289 bytes, checksum: 12f1723b46015bc56a5601039de65844 (MD5) / Made available in DSpace on 2016-04-04T17:21:32Z (GMT). No. of bitstreams: 1 Lucian Del Fabbro.pdf: 1272289 bytes, checksum: 12f1723b46015bc56a5601039de65844 (MD5) Previous issue date: 2014-03-02 / As micotoxicoses ocorrem através do consumo de alimentos contaminados, sendo uma questão de saúde pública em todo o mundo. A contaminação dos alimentos depende de crescimento fúngico, além de condições climáticas ideais para o desenvolvimento das micotoxinas. A ingestão de micotoxinas por seres humanos ocorre principalmente pela ingestão de produtos vegetais contaminados, bem como pelo consumo de produtos derivados destes alimentos. A Zearalenona (ZEA) é uma lactona do ácido fenólico resorcílico e pode ser produzida por várias espécies de Fusarium, sendo que Fusarium graminearum, proliferatum e culmorum são os principais produtores. A ZEA é um composto estrogênico, cujo os efeitos tóxicos e seus metabólitos têm sido atribuídos principalmente à sua estrutura química semelhante a dos estrógenos naturais. O sistema reprodutivo é um dos principais alvos de toxicidade da ZEA, sendo os órgãos reprodutores, como útero, ovários e testículos os principais órgãos afetados. Frente a esta problemática, o estudo de substâncias naturais capazes de prevenir tal micotoxicose se faz necessária. A crisina é um flavonoide da classe das flavonas. Possui hidroxila livre nos carbonos 5 e 7 do anel, está presente em níveis elevados no maracujá do mato, mel e no própolis. Possui conhecidos efeitos benéficos como atividades antioxidante e anti-inflamatória, além de aumentar níveis de testosterona. Este estudo teve por objetivo avaliar o efeito protetor da crisina frente aos efeitos tóxicos da micotoxina ZEA nos testículos de camundongos Swiss. Para isto, os camundongos foram tratados durante 10 dias consecutivos com crisina (5 e 20 mg/Kg, via gavagem), no 11° dia os animais receberam uma dose de ZEA (40 mg/Kg, via gavagem). Após 48 horas, os animais receberam uma dose de pentobarbital (180 mg/Kg, intraperitoneal, i.p.) e o sangue foi coletado por punção cardíaca e os testículos removidos, pesados e homogeneizados em tampão para as determinações dos níveis de testosterona, contagem e avaliação da motilidade dos espermatozoides, determinação de indicadores de estresse oxidativo por métodos colorimétricos: catalase (CAT), superóxido dismutase (SOD), glutationa peroxidase (GPx), glutationa redutase (GR), glutationa-S-transferase (GST) e não enzimáticos glutationa reduzida, TRAP (capacidade de reatividade antioxidante total) e TAR (capacidade antioxidante total) e 4-Hydroxynonenal (4-HNE). Foram determinados interleucinas (IL-1β, IL6 e IL10), o fator de necrose tumoral alfa (TNF-α) e a enzima mieloperocidase (MPO). Foram determinados parâmetros apoptóticos, as atividades das Caspases 3 e 6 além de dos níveis de 8-hydroxy-2'-deoxyguanosina (8-OHdG). O tratamento com crisina reverteu a redução dos níveis de testorenona, da contagem e da motilidade dos espermatozoides. O tratamento com crisina reverteu a inibição das enzimas antioxidantes GPx, GR, e GST, além de normalizar os níveis de GSH e 4-HNE. A alteração nos parâmetros inflamatórios causados pela administração de ZEA foi prevenida pela administração da crisina restaurando os níveis xi de IL-1β e IL-6 e TNF-α e reduzindo os níveis de IL-10 e a atividade da MPO. O tratamento com crisina atenuou os danos apoptóticos causados pela ZEA, inibindo a atividade das caspases 3 e 6 e reduzindo os níveis de 8-OHdG. Desta forma o tratamento com crisina preveniu os danos causados pela micotoxina ZEA em camundongos swiss através da modulação do estresse oxidativo, acarretando em uma redução do processo inflamatório e consequentemente apoptótico. Desta forma espera-se que a crisina possa vir a ser um possível tratamento auxiliar no combate a micotoxicoses seja em humanos ou animais. / Ace mycotoxicoses occur through the consumption of contaminated food being a public health issue worldwide. Contamination of food depends on fungal growth beyond the ideal climatic conditions for the development of mycotoxins. The ingestion of mycotoxins by humans occurs primarily by ingestion of contaminated plant products, as well as the consumption of food products derived therefrom. Zearalenone (ZEA) is a phenolic resorcylic acid lactones and can be produced by various Fusarium species, and Fusarium graminearum, culmorum and proliferatum are the main producers. ZEA is an estrogenic compound, whose the toxic effects and its metabolites have been mainly attributed to their similar chemical structure of natural estrogens. The reproductive system is one of the main targets of toxicity of ZEA and the reproductive organs such as the uterus, ovaries and testes those most affected organs. Faced with this problem, the study of natural substances capable of preventing such mycotoxicosis is required. Chrysin is a flavonoid of the flavones class. It has free hydroxyl at carbons 5 and 7 ring, is present at high levels in passion fruit bush honey and propolis. Chrysin has known beneficial effects as an antioxidant activities and anti-inflammatory and it has increased testosterone levels. This study aimed to evaluate the protective effect of chrysin forward to the toxic effects of the mycotoxin ZEA in the testes of Swiss mice. For this, the mice were treated for 10 consecutive days with chrysin (5 and 20 mg / kg by gavage) on day 11, the animals received ZEA, a dose (40 mg / kg by gavage). After 48 hours, the animals received an overdose of pentobarbital (180 mg / kg, intraperitoneal, i.p.) and blood was collected by heart puncture and removed, weighed and homogenized testis for determination of testosterone, count and assessment of sperm motility, determination of oxidative stress indicators by colorimetric methods: catalase (CAT), superoxide dismutase (SOD), glutathione peroxidase (GPx), glutathione reductase (GR), glutathione-S-transferase (GST) and non-enzymatic reduced glutathione, TRAP (reactivity total antioxidant capacity) and TAR (total antioxidant capacity) and 4-hydroxynonenal (4-HNE). Were determined, interleukins (IL-1β, IL-6 and IL-10), tumor necrosis factor (TNF-α) and mieloperoxidase enzyme (MPO). Apoptotic parameters were determined, Caspases 3 and 6 beyond the levels of 8-hydroxy-2'-deoxyguanosine (8-OHdG). The treatment with chrysin reversed the reduction of testorenone levels, count and motility of sperm. Treatment with chrysin reversed the inhibition of antioxidant enzymes GPx, GR, and GST, as well as normalizing levels of GSH and 4-HNE. The alteration in inflammatory parameters caused by the administration of ZEA was xiii prevented by administration of chrysin, restoring IL-1β and IL-6 and reducing IL-10 levels, and reduce TNF-α levels and MPO activity. Treatment with chrysin attenuated apoptotic damage ZEA, inhibiting the activity of caspases3 and 6, reducing levels and 8-OHdG. Thus, the treatment with chrysin prevented the damage caused by mycotoxins ZEA in Swiss mice probably through modulation of the oxidative stress, resulting in a reduction of the inflammatory process and hence apoptosis. Thus it is expected that chrysin may be a possible treatment support combat in mycotoxicosis both in humans and animals.

Submitted by Marcos Anselmo (marcos.anselmo@unipampa.edu.br) on 2016-04-18T17:12:12Z No. of bitstreams: 1 Michelle da Silva Antunes.pdf: 1249773 bytes, checksum: c6cabdf0b8b789e160dc1913359bb015 (MD5) / Made available in DSpace on 2016-04-18T17:12:13Z (GMT). No. of bitstreams: 1 Michelle da Silva Antunes.pdf: 1249773 bytes, checksum: c6cabdf0b8b789e160dc1913359bb015 (MD5) Previous issue date: 2013-07-05 / A doença de Parkinson (DP) é uma doença neurodegenerativa crônica que tem como principal característica neuropatológica a depleção de dopamina (DA) estriatal. Essa diminuição de DA leva ao aparecimento dos sintomas motores da doença, tais como instabilidade postural, tremores em repouso, rigidez, bradicinesia, entre outros. É uma doença de causa multifatorial relacionada ao envelhecimento, fatores genéticos e ambientais. Existe um grande número de evidências correlacionando o estresse oxidativo com a DP, na qual se observa um desequilíbrio entre a geração de espécies reativas (ER) e os mecanismos de defesa celular, e é esse desequilíbrio que leva ao envelhecimento precoce, morte celular e desenvolvimento de patologias neurodegenerativas. Estudos demonstram que o consumo de uma dieta rica em flavonoides pode diminuir a incidência e sintomas de doenças neurodegenerativas. O objetivo do presente trabalho foi investigar o efeito da administração do flavonoide hesperidina sobre o comportamento em testes de memória, de depressão, e marcadores de estresse oxidativo em um modelo de DP induzida por 6-hidroxidopamina (6-OHDA) em camundongos com dezoito meses de idade da linhagem C57B/6J. Os animais foram 5 distribuídos aleatoriamente em quatro grupos: (1) veículo/veículo; (2) 6-OHDA/veículo; (3) veículo/hesperidina; (4) 6-OHDA/hesperidina. A neurotoxina 6-OHDA ou o veículo salina foram infundidos por injeção intracerebroventricular (i.c.v.) em uma só concentração (4 μg/2 μL em 0.9% NaCl com 0.2 μg/μL de ácido ascórbico). Após a injeção, os camundongos tiveram um período de recuperação de sete dias até o começo do tratamento. A hesperidina ou o veículo (50mg/kg) foram administrados pela via oral (gavagem) durante 28 dias. Após este período, os camundongos foram submetidos aos testes comportamentais (locomoção, memória e depressão) e à eutanásia. Os resultados demonstraram que o tratamento oral com hesperidina na dose de 50 mg/kg foi efetivo em diminuir o déficit cognitivo, o comportamento tipo depressivo; a diminuição dos níveis de espécies reativas (RS); o aumento das enzimas antioxidantes glutationa peroxidase (GPx), e catalase (CAT), além das defesas antioxidantes não enzimáticas totais (TRAP) e níveis de glutationa (GSH); na prevenção do aumento da glutationa redutase (GR). Além disso, o tratamento aumentou os níveis de DA, DOPAC e HVA no estriado em relação aos camundongos que não receberam o tratamento. Em conclusão, nós sugerimos que a administração com hesperidina foi eficaz em rever os danos cognitivos e marcadores de estresse oxidativo induzidos por 6-OHDA em camundongos, podendo contribuir como terapia alternativa na redução dos sintomas da DP. / Parkinson's disease (PD) is a chronic neurodegenerative disorder which has as main characteristic neuropathological depletion of dopamine (DA) striatal. This loss of DA leads to the onset of motor symptoms, such as postural instability, resting tremor, rigidity, bradykinesia, among others. It is a multifactorial disease in age-related, genetic and environmental factors. There is a large evidences correlating oxidative stress with the DP, where there is an imbalance between the generation of reactive species (RS) and cellular defense mechanisms, and it is this imbalance that leads to premature aging, cell death and development of neurodegenerative disorders. Studies show that consumption of a diet rich in flavonoids can reduce the incidence and symptoms of neurodegenerative diseases. The objective of this study was to investigate the effect of administration of the flavonoid hesperidin on behavior in tests of memory, depression, and markers of oxidative stress in a model of PD induced by 6-hydroxydopamine (6-OHDA) in mice eighteen months old lineage C57B/6J. The animals were randomly divided into four groups: (1) vehicle / vehicle, (2) 6-OHDA/veículo, (3) vehicle / hesperidin, (4) 6-OHDA/hesperidina. The neurotoxin 6-OHDA or vehicle saline were infused intracerebroventricular (icv) in one concentration (4 mg / 2 ¶ l in 0.9% NaCl 7 with 0.2 mg / uL ascorbic acid). After injection, the mice have had a recovery period of seven days until the start of treatment. The hesperidin or vehicle (50mg/kg) was administered orally (gavage) for 28 days. After this period, the mice were subjected to behavioral tests (locomotion, memory and depression) and euthanasia. The results demonstrate that oral treatment with hesperidin dose of 50 mg / kg was effective in reducing the cognitive deficits, behavior depressive-like; reduced levels of reactive species (RS), the increase of antioxidant enzyme glutathione peroxidase (GPx) and catalase (CAT), and the total non-enzymatic antioxidant defenses (TRAP) and glutathione (GSH), in the prevention an increase of glutathione reductase (GR). Furthermore, the treatment increased the levels of DA, DOPAC and HVA in striatum compared to mice that received no treatment. In conclusion, we suggest that administration with hesperidin was effective in reviewing the cognitive damage and markers of oxidative stress induced by 6-OHDA in mice, which may contribute as an alternative therapy in reducing symptoms of PD.

Submitted by Marcos Anselmo (marcos.anselmo@unipampa.edu.br) on 2016-04-18T19:23:38Z No. of bitstreams: 1 Micheli Stéfani Zarzecki.pdf: 2027524 bytes, checksum: 535aae8d63b5c3ca4ac4debb8ecb1f6f (MD5) / Made available in DSpace on 2016-04-18T19:23:38Z (GMT). No. of bitstreams: 1 Micheli Stéfani Zarzecki.pdf: 2027524 bytes, checksum: 535aae8d63b5c3ca4ac4debb8ecb1f6f (MD5) Previous issue date: 2016-02-19 / A Doença Inflamatória Intestinal (DII) é uma doença crônica, recidiva e de etiologia desconhecida. Fatores ambientais, estresse oxidativo e fatores imunológicos podem estar relacionados as causas dessa doença, e a colite ulcerativa e a doença de Crohn são exemplos dessa patologia. O mecanismo patogênico da DII é assumido como sendo um desequilíbrio da resposta imunológica a antígenos no ambiente intestinal. Os principais tratamentos das DII não são geralmente bem tolerados já que demonstram causar efeitos colaterais e, além disso, apresentam alta taxa de reincidências. A DII induzida por ácido 2,4,6-trinitrobenzeno sulfônico (TNBS) em modelos de roedores é caracterizada por aumento dos níveis de marcadores inflamatórios como TNF-α e interleucinas (IL-1β, IL-12, IL-17, IL-18 e IL-6). Tendo em vista a busca por alternativas eficazes nos tratamentos destas DII, os compostos orgânicos de selênio vêm se destacando como substâncias com potencial terapêutico, devido às suas atividades farmacológicas, como anti-inflamatória e antinociceptiva. Aliado a isso, o estudo de compostos de selênio combinados à oxiesteróis tem evidenciado resultados promissores. Demonstrou-se recentemente que o composto p-cloro-fenil-selenoesterol possui efeito antioxidante e anti-inflamatório em um modelo de dor e inflamação em camundongos. O objetivo desse trabalho foi investigar o efeito anti-inflamatório do composto p-cloro-fenil-viii selenoesterol (PCS), no modelo de DII induzida pelo TNBS em camundongos Swiss fêmeas. Os camundongos receberam o composto PCS) (10mg/kg; p.o.) durante todo o experimento (9 dias) por via oral. No quinto dia induziu-se a colite utilizando 2 mg de TNBS dissolvido em 0,1mL de uma solução de etanol a 50%, o qual foi administrado pela via intrarretal. No décimo dia, os camundongos foram eutanasiados e as amostras de sangue e cólon foram coletadas para as respectivas dosagens dos marcadores inflamatórios, de estresse oxidativo, analise histopatológica e sinais clínicos da doença. Os resultados obtidos demonstram que os animais tratados com TNBS apresentaram redução do comprimento colônico e aumento nos níveis da citocina pró inflamatória interleucina 6 (IL-6) e fator de necrose tumoral (TNF-α), e aumento dos níveis da enzima mieloperoxidase (MPO), tratamento com PCS foi capaz de reduzir os níveis das citocinas pró inflamatórias IL-6 e do TNF-α aos níveis do controle, além de evitar a redução do comprimento colônico que é um dos sinais da colite experimental induzida por TNBS. Nesse estudo também se observou uma melhora nos danos histológicos nos animais tratados com PCS em comparação com o grupo induzido por TNBS. Além disso, o tratamento com o PCS foi capaz de diminuir o estresse oxidativo e prevenir a diminuição das defesas antioxidantes no cólon de animais com DII induzida por TNBS. Portanto, nossos resultados sugerem que o tratamento com PCS apresentou uma melhora no quadro clínico da DII experimental em camundongos e que pode, futuramente e após mais estudos sobre este composto, tornar-se um potencial agente terapêutico para o tratamento de doenças inflamatórias, bem como as intestinais, colite ulcerativa e doença de Crohn. / The Inflammatory Bowel Disease (IBD) is a chronic, recurrent disease and of unknown etiology. Factors that may relate the causes of this disease are environmental factors, oxidative stress and immune factors. Example of this disease is the Ulcerative Colitis and Crohn's Disease. The main treatments of IBD are not generally well tolerated, they have side effects and have a high rate of relapse. The pathogenesis of IBD is assumed to be an imbalance of the immune response to antigens in the intestinal environment. IBD induced by 2,4,6-trinitrobenzene sulfonic acid (TNBS) in rodent models is characterized by increased levels of inflammatory markers such as TNF-α and interleukins (IL-1β, IL-12, IL-17, IL- 18 and IL-6). The organic selenium compounds have been highlighted as substances with therapeutic potential because of their pharmacological activities such as anti-inflammatory and antinociceptive. Allied to this, the study combined with the selenium compounds oxiesteróis has shown promising results, it was demonstrated recently that PCS compound has antioxidant and anti-inflammatory effect in a model of pain and inflammation in mice. The aim of this study was to investigate the anti-inflammatory effect of p-chloro-phenyl-selenoesterol compound in IBD model induced by TNBS in Swiss female mice. The mice received the p-chlorophenyl-selenoesterol compound (PCS) (10mg / kg; po) throughout the experiment (9 days) orally. On the fifth day colitis was induced using 2 mg of TNBS dissolved in 0.1 mL of a 50% ethanol x solution, which was administered via intrarectal. On the tenth day, mice were euthanized and samples of blood and colon were collected for the respective levels of inflammatory markers of oxidative stress, histopathological and clinical signs of disease. The results show that animals treated with TNBS showed a reduction in colonic length, and increased levels of interleukin pro-inflammatory cytokine-6 (IL-6) and tumor necrosis factor (TNF-α) and increased levels of Myeloperoxidase enzyme (MPO), treatment with PCS was able to reduce the levels of pro inflammatory cytokines IL-6 and TNF-α levels to control and avoids the reduction in colonic length which is one of signs of experimental colitis induced by TNBS. In this study there was also an improvement in the histological analysis the animals treated with PCS compared with the group induced by TNBS. Furthermore, combined with improvements in inflammatory and histological parameters, treatment with PCS was able to decrease oxidative stress and prevent the decrease of antioxidant defenses in the colon of animals with TNBS-induced IBD. This finding suggests that treatment with PCS showed an improvement of the clinical picture in IBD in experimental mice and which could be a potential therapeutic agent for the treatment of inflammatory diseases, and intestinal, Ulcerative Colitis and Crohn's Disease.

Submitted by Marcos Anselmo (marcos.anselmo@unipampa.edu.br) on 2016-09-13T14:54:11Z No. of bitstreams: 2 license_rdf: 1232 bytes, checksum: 66e71c371cc565284e70f40736c94386 (MD5) Andréia Caroline Fernandes Salgueiro.pdf: 2621645 bytes, checksum: 0835456528c6dfea11748817f9bcdbf5 (MD5) / Approved for entry into archive by Marcos Anselmo (marcos.anselmo@unipampa.edu.br) on 2016-09-13T14:54:28Z (GMT) No. of bitstreams: 2 license_rdf: 1232 bytes, checksum: 66e71c371cc565284e70f40736c94386 (MD5) Andréia Caroline Fernandes Salgueiro.pdf: 2621645 bytes, checksum: 0835456528c6dfea11748817f9bcdbf5 (MD5) / Made available in DSpace on 2016-09-13T14:54:28Z (GMT). No. of bitstreams: 2 license_rdf: 1232 bytes, checksum: 66e71c371cc565284e70f40736c94386 (MD5) Andréia Caroline Fernandes Salgueiro.pdf: 2621645 bytes, checksum: 0835456528c6dfea11748817f9bcdbf5 (MD5) Previous issue date: 2013-01-15 / O Diabetes mellitus (DM) é uma desordem metabólica caracterizada pela deficiência absoluta ou relativa na produção de insulina pelas células β do pâncreas, ou ainda por uma incapacidade de utilização da insulina produzida. Acredita-se que a hiperglicemia crônica no DM esteja envolvida na gênese de diversos eventos bioquímicos, os quais resultam em um desequilíbrio entre a produção de espécies reativas de oxigênio e a capacidade dos sistemas de defesa antioxidante em neutralizá-las, levando a um estado de estresse oxidativo. Popularmente, muitas plantas conhecidas como medicinais, são utilizadas para tratar os sintomas do DM. Dentre estas plantas, estão as do gênero Bauhinia (Fabaceae, Leguminosae), cuja atividade antioxidante tem sido comprovada em modelos utilizando diferentes formas de extração de compostos químicos. Porém, pouco se sabe sobre os efeitos do chá das folhas de Bauhinia, tal como a mesma é popularmente utilizada. Com base no exposto, este trabalho teve como 13 objetivos investigar a atividade antioxidante da infusão das folhas de Bauhinia forficata (subsp. pruinosa) (BF), popularmente conhecida como “Pata de vaca” e largamente utilizada sob a forma de chá pela população, sobre o dano oxidativo induzido por altas concentrações de glicose em eritrócitos humanos (Manuscrito 1) e pela estreptozotocina (ETZ) em camundongos (Manuscrito 2). Os resultados do Manuscrito 1 mostraram que o chá de BF foi efetivo em reduzir o dano lipídico e em manter, ou mesmo aumentar, os níveis de antioxidantes em eritrócitos humanos incubados com elevadas concentrações de glicose (0 a 500mM). Acreditamos que estes resultados estejam diretamente relacionados aos elevados níveis de polifenóis e flavonoides presentes no chá de BF, os quais podem explicar a sua significativa atividade quelante de ferro e de neutralização de radicais hidroxilas (OH•), seja via neutralização do radical DPPH• seja via neutralização da reação de Fenton. Além de reduzir o dano oxidativo determinado por elevadas concentrações de glicose em eritrócitos humanos in vitro, observamos que o efeito antioxidante do chá de BF foi mantido em um modelo ex vivo de intoxicação por ETZ em camundongos (Manuscrito 2). Os resultados do Manuscrito 2 mostraram que o chá de BF foi capaz de minimizar as alterações oxidativas e morfológicas em diferentes órgãos, e também em reduzir a perda de peso e a hiperglicemia provocada pela ETZ em camundongos. O chá das folhas de BF foi bem aceito pelos animais e não teve efeitos per se sobre os achados bioquímicos ou histológicos deste trabalho. Acreditamos que os resultados observados estejam diretamente relacionados aos níveis de polifenóis e flavonoides previamente relatados. Em resumo, os efeitos antioxidantes do chá de BF foram observados tanto in vitro quanto ex vivo, e estes resultados contribuem para ressaltar e justificar os benefícios do uso do chá das folhas desta planta medicinal, tal como a mesma é popularmente 14 utilizada, em minimizar as alterações oxidativas de processos patológicos com incidência crescente na sociedade contemporânea, a exemplo do DM. / Diabetes mellitus (DM) is a metabolic disorder characterized by an absolute or relative deficiency in insulin production by pancreatic β cells, or by an inability to use the insulin produced. It is believed that the chronic hyperglycemia in DM is involved in the genesis of several biochemical events that result in an imbalance between the production of reactive oxygen species and the antioxidant defense systems capacity to neutralize them, leading to an oxidative stress state. Many plants known as medicinal are used to alleviate the symptoms of DM. Among these are the plants of the Bauhinia genus (Fabaceae, Leguminosae), which antioxidant activity was already proven in models of different extractions of chemical compounds. However, little is known about the effects of Bauhinia leaves tea, as it is popularly used. Based on the above, this study aimed to investigate the antioxidant activity of Bauhinia forficata (subsp. pruinosa) 16 (BF) leaves infusion, popularly known as “Paw cow” and used as tea in folk medicine, on the oxidative damage induced by high glucose concentrations in human erythrocytes (Manuscript 1) and by streptozotocin (STZ) in mice (Manuscript 2). The results of Manuscript 1 showed that the BF tea was effective in reducing lipid damage and maintain, or even increase, the antioxidant levels in human erythrocytes incubated with high glucose concentrations. We believe that these results are directly related to high levels of polyphenols and flavonoids present in BF tea, which can explain its significant iron chelating activity and hydroxyl radical (OH •) neutralization, either via DPPH• radical scavenger or via Fenton reaction neutralization. More than the oxidative damage reduction determined by high glucose concentrations in human erythrocytes in vitro, we found that the antioxidant potential of BF tea was kept in an ex vivo model of STZ intoxication in mice (Manuscript 2). The results of Manuscript 2 showed that BF tea was able to minimize the oxidative and morphological damage in various organs, and also to reduce the weight loss and hyperglycemia caused by STZ in mice. BF leaves tea was well accepted by the mice and had no per se effect on biochemical or histological findings of this study. We believe that the observed results are directly related with the polyphenols and flavonoids levels previously reported. In summary, the antioxidant effects of BF tea were observed both in vitro and ex vivo, and these results help to highlight and explain the benefits of using leaves tea of this medicinal plant, as it is popularly used, to minimize oxidative changes of pathological processes with increasing incidence in contemporary society, such as the DM.

Submitted by Marcos Anselmo (marcos.anselmo@unipampa.edu.br) on 2016-09-13T19:44:23Z No. of bitstreams: 2 license_rdf: 1232 bytes, checksum: 66e71c371cc565284e70f40736c94386 (MD5) Renata Giacomeli.pdf: 1026894 bytes, checksum: b5f9c6a47c7fdc580b5b82dbafdcf4a8 (MD5) / Approved for entry into archive by Marcos Anselmo (marcos.anselmo@unipampa.edu.br) on 2016-09-13T19:44:45Z (GMT) No. of bitstreams: 2 license_rdf: 1232 bytes, checksum: 66e71c371cc565284e70f40736c94386 (MD5) Renata Giacomeli.pdf: 1026894 bytes, checksum: b5f9c6a47c7fdc580b5b82dbafdcf4a8 (MD5) / Made available in DSpace on 2016-09-13T19:44:46Z (GMT). No. of bitstreams: 2 license_rdf: 1232 bytes, checksum: 66e71c371cc565284e70f40736c94386 (MD5) Renata Giacomeli.pdf: 1026894 bytes, checksum: b5f9c6a47c7fdc580b5b82dbafdcf4a8 (MD5) Previous issue date: 2015-07-23 / A doença de Alzheimer (DA) é uma desordem neurodegenerativa crônica caracterizada clinicamente pela perda progressiva de função cognitiva, distúrbios neuropsiquiátricos e comportamentais. Patologicamente esta doença caracteriza-se pelo acúmulo anormal do peptídeo β-amilóide (Aβ) no córtex e no hipocampo, emaranhados neurofibrilares intracelulares formados por Tau hiperfosforilada, disfunção progressiva sináptica e, posteriormente perda neuronal. As opções terapêuticas disponíveis melhoram os sintomas, mas não impedem a progressão da doença, portanto, ainda está faltando uma estratégia terapêutica efetiva para DA. A Crisina (5, 7-dihidroxiflavona) é um flavonoide natural encontrada em extratos de plantas (tais como Passiflora caerulea e Populus tremula), própolis e mel que apresenta propriedades farmacológicas relevantes, incluindo efeito antioxidante, antiinflamatório, hipolipidêmico, anti-aterogênico, anticâncer e, de forma mais significativa, efeito neuroprotetor. Porém, existem algumas desvantagens que podem limitar a sua potencial aplicação na terapêutica tais como baixa solubilidade e má absorção intestinal. Somando-se a isso, um fato determinante na neuroterapia é o efeito restritivo da barreira hematoencefálica (BHE), a qual limita a eficácia de tratamentos. Muitos estudos têm-se centrado sobre este problema fundamental através da concepção de estratégias diferentes para 5 facilitar a passagem de ativos em todo a BHE. Entre estes, as abordagens baseadas em nanotecnologia ganharam impulso significativo, já que podem efetivamente transportar substâncias ativas através da BHE. Assim, o objetivo deste trabalho foi preparar um sistema baseado em nanopartículas, capaz de veicular a crisina, bem como investigar os efeitos biológicos em um modelo de DA induzida por injeção intracerebroventricular (icv) do peptídeo beta amiloide1-42 (Aβ1-42) em camundongos Swiss fêmeas com idade entre 18 e 22 meses. Para tanto, determinou-se parâmetros de estresse oxidativo, neuroinflamação e níveis do fator neurotrófico derivado do cérebro (BDNF) no córtex pré-frontal e hipocampo, também verificou-se os efeitos comportamentais cognitivos dos camundongos. Os animais foram divididos em 10 grupos: (1) veículo/tampão phosphate-buffered saline (PBS); (2) veículo/nanocápsula (NC)-branca; (3) veículo/crisina livre (5 mg/kg); (4) veículo/NC-crisina (1 mg/kg); (5) veículo/NC-crisina (5 mg/kg); (6) Aβ1-42/PBS; (7) Aβ1-42/NC-branca; (8) Aβ1-42/crisina livre (5 mg/kg); (9) Aβ1-42/NC-crisina (1 mg/kg) e; (10) Aβ1-42/NC-crisina (5 mg/kg). O peptídeo Aβ1-42 ou o veículo foram infundidos por injeção icv e, um dia depois, iniciou-se o tratamento, por via oral, durante 14 dias. Após o fim do tratamento, os animais foram submetidos aos testes comportamentais. Os resultados demonstraram que os efeitos neuroprotetores do crisina foram mais elevados quando administrada em nanopartículas. O nanossistema melhorou as concentrações de crisina nos tecidos cerebrais, bem como a eficácia farmacológica. O presente estudo demonstrou que o tratamento com crisina, principalmente na formulação de nanopartículas, foi eficaz em atenuar as seguintes alterações resultantes da exposição de camundongos à Aβ1-42: o comprometimento da memória em testes de comportamento, o aumento dos níveis de espécies reativas (RS), fator de necrose tumoral α (TNF-α) e interleucina-1β (IL-1β), a redução dos níveis de tióis não-proteicos (NPSH), BDNF e IL-10; o aumento da atividade de glutationa peroxidase (GPx) e glutationa redutase (GR) em córtex pré-frontal e hipocampo. Em conclusão, esses resultados demonstram que a atenuação da neuroinflamação e do estresse oxidativo está envolvido no efeito neuroprotetor da crisina neste modelo de DA, além disso, sugerem que a formulação de nanopartículas potencializa seus efeitos, o que pode fornecer uma nova abordagem terapêutica para o tratamento e prevenção de DA. / Alzheimer's disease (AD) is a chronic neurodegenerative disorder characterized clinically by progressive loss of cognitive function, neuropsychiatric and behavioral disorders. Pathologically the disease is characterized by abnormal accumulation of β-amyloid peptide (Aß) in cortex and hippocampus, intracellular neurofibrillary tangles consisting of hyperphosphorylated Tau, and synaptic dysfunction progressively later neuronal loss. The therapeutic options available improve symptoms but did not prevent disease progression, therefore, is still missing an effective therapeutic strategy for AD. Chrysin (5, 7-dihidroxiflavone) is a flavonoid found in natural plant extracts (such as Passiflora caerulea and Populus tremula), honey and propolis which has significant pharmacological properties including antioxidant, anti-inflammatory, hypolipidemic, anti-atherogenic, anti-cancer effects and, more significantly, neuroprotection. However, there are some disadvantages that may limit their potential application in therapeutics such as low solubility and intestinal malabsorption. Adding to this, a key fact in Neurotherapy is the restrictive effect of the blood-brain barrier (BBB), which limits the effectiveness of treatments. Many studies have focused on this fundamental problem by designing different strategies to facilitate the transition of assets across the BBB. Among these, nanotechnology-based approaches have gained significant momentum as they can effectively carry active substances through the BBB. The 7 objective of this work was to prepare a system based on nanoparticles, capable of relaying chrysin, as well as investigating the biological effects in a model of AD induced by intracerebroventricular injection (icv) of Beta amyloid1-42 peptide (Aβ1-42) in swiss mice females aged between 18 and 22 months. Therefore, it was determined parameters of oxidative stress, neuroinflammation and levels of brain-derived neurotrophic factor (BDNF) in the prefrontal cortex and hippocampus, it was also observed cognitive behavioral effects in mice. The animals were divided into 10 groups: (1) vehicle/phosphate-buffered saline (PBS); (2) Vehicle/blank-nanocapsule (NC); (3) vehicle/free chrysin (5 mg / kg); (4) Vehicle/NC-chrysin (1 mg / kg); (5) vehicle/NC-chrysin (5 mg / kg); (6) Aβ1-42/PBS; (7) Aβ1-42/blank-NC; (8) Aβ1-42/free chrysin (5 mg / kg); (9) Aβ1-42/NC-chrysin (1mg / kg) and; (10) Aβ1-42/NC-chrysin (5 mg / kg). The Aβ1-42 peptide or vehicle were infused icv injection and, one day later, treatment began, orally, for 14 days. After the end of treatment, animals were subjected to behavioral testing. The results showed that the neuroprotective effects of chrysin were higher when administered in nanoparticles. The nano system improved chrysin concentrations in the brain tissue as well as the pharmacological effectiveness. The present study demonstrated that treatment with chrysin, especially in nanoparticle formulation was effective in attenuating the following shortcomings arising from exposure of mice to Aβ1-42: the memory impairment in behavioral tests; the increased reactive oxygen species (RS), tumor necrosis factor α (TNF-α) and interleukin-1β (IL-1β) levels, reduction non-thiol protein (NPSH), BDNF, and IL-10 levels; increasing the glutathione peroxidase (GPx) and glutathione reductase (GR) activity in the prefrontal cortex and hippocampus. In conclusion, these results demonstrate that blocking neuroinflammation and oxidative stress is involved in the neuroprotective effect of chrysin in this model, moreover, suggest that the nanoparticle formulation potentiates their effects, which may provide a new therapeutic approach for the treatment and prevention of AD.

A fenilcetonúria (PKU) é uma doença metabólica causada pela deficiência da enzima fenilalanina hidroxilase, levando ao acúmulo de fenilalanina. As principais características clínicas dos pacientes com PKU não tratados são o comprometimento neuropsicológico e o retardo no desenvolvimento. O estresse oxidativo tem sido detectado em muitos erros inatos do metabolismo, incluindo PKU. A silibinina é um flavonoide proveniente da planta cardo de leite (Silybum marianum) que apresenta propriedades antioxidantes e que, após administração, é amplamente distribuída pelos tecidos. Neste trabalho, nós investigamos os efeitos da silibinina in vivo e in vitro contra o estresse oxidativo causado por elevados níveis de fenilalanina. Ratos machos e fêmeas, com 12 dias de vida no início dos experimentos, receberam injeções subcutâneas de α- metilfenilalanina e fenilalanina para realizar o modelo agudo de hiperfenilalaninemia, e o tratamento com silibinina consistiu em injeções intraperitoniais da substância na dose de 20 mg/kg. Os animais foram mortos no 14° dia de vida. Para realizar os experimentos in vitro, homogeneizados de córtex cerebral de ratos de 14 dias de vida foram incubados com fenilalanina e silibinina. In vitro e in vivo, a silibinina foi capaz de prevenir a inibição provocada pela fenilalanina nas atividades das enzimas catalase, glutationa peroxidase e glicose-6-fosfato desidrogenase. Não foram verificadas diferenças entre os grupos nas atividades da superóxido dismutase e da glutationa redutase. Além disso, a silibinina preveniu as alterações provocadas pela fenilalanina no conteúdo de carbonilas proteicas, nas substâncias reativas ao ácido tiobarbitúrico e na produção de espécies reativas. A silibinina preveniu o dano oxidativo induzido pela fenilalanina e pode ser uma potencial terapia complementar para o tratamento da PKU. / Phenylketonuria (PKU) is a metabolic disorder caused by a deficiency of phenylalanine hydroxylase, leading to accumulation of phenylalanine. The main clinical features of non-treated PKU patients are neuropsychological impairment and developmental retardation. Oxidative stress has been related to many inborn errors of metabolism including PKU. Silibinin is a flavonoid derived from the herb milk thistle (Silybum marianum) which presents antioxidant properties and is widely distributed into tissues after administration. In this study, we investigated the in vivo and in vitro effects of silibinin against oxidative stress caused by high levels of phenylalanine. Male and female rats, 12 days old at the beginning of experiments, received subcutaneous injections of α- methylphenylalanine and phenylalanine to produce hyperphenylalaninemia, and intraperitoneal injections of 20 mg/kg silibinin. The animals were killed on the 14th day of life. To perform in vitro experiments, cerebral cortex homogenates of 14 days old rats were incubated with phenylalanine and silibinin. In vivo and in vitro, silibinin was able to prevent the inhibition provoked by phenylalanine on the activities of catalase, glutathione peroxidase and glucose-6-phosphate dehydrogenase. No differences were found among the groups in the activities of superoxide dismutase and glutathione reductase. Moreover, silibinin prevented the alterations provoked by phenylalanine on protein carbonyl content, thiobarbituric acid-reactive substances and production of reactive species. Silibinin prevented oxidative damage induced by phenylalanine and may be a potential adjunctive therapy to PKU treatment.

A isquemia seguida de reperfusão está associada com a ativação de uma cascata de eventos danosos intimamente relacionados ao estresse oxidativo. Durante a isquemia, ocorre o aumento da produção de espécies reativas de oxigênio (EROs), que durante a reperfusão, é favorecida pelo restabelecimento da tensão de oxigênio. Uma vez que a utilização de antioxidantes exógenos parece exercer efeitos benéficos apenas nas fases iniciais das doenças cardiovasculares, o sulforafano (SFN) é uma nova estratégia terapêutica que atua estimulando a produção da maquinaria antioxidante endógena. Este composto é um isotiocianato natural encontrado em vegetais crucíferos, como o broto de brócolis, que demonstra ter um efeito cardioprotetor associado a sua ação estimulatória sobre a reserva antioxidante endógena. Poucos estudos até o momento evidenciaram o potencial cardioprotetor do SFN na isquemia e reperfusão miocárdica. O objetivo deste estudo, portanto, foi testar a hipótese de que o pré-tratamento com SFN poderia modular a função ventricular pós-isquêmica, atenuando o estresse oxidativo de corações isolados de ratos submetidos à isquemia e reperfusão. Ratos Wistar machos pesando entre 250 – 300g foram tratados por três dias com SFN (10mg/kg/dia i.p.) ou veículo. Vinte e quatro horas após a última injeção, os ratos foram mortos e seus corações foram retirados rapidamente e submetidos à isquemia global em aparelho do tipo Langendorff. Os corações foram perfundidos com solução Krebs-Henseleit por um período pré-isquêmico de 20 minutos (estabilização), seguido por isquemia global normotérmica de 20 minutos e 20 minutos de reperfusão. Foram avaliados os seguintes parâmetros: frequência cardíaca (FC), pressão sistólica do ventrículo esquerdo (PSVE), pressão diastólica final do ventrículo esquerdo (PDFVE), índice de contratilidade (+dP/dt), índice de relaxamento (-dP/dt) e pressão de perfusão coronariana (PP). Ao final do protocolo, os corações foram pesados e congelados a -80ºC para posteriores análises bioquímicas e moleculares. Foram analisadas a expressão da SOD, CAT, GPx e heme oxigenase-1 (HO-1) e atividade da SOD, CAT, GPx, TrxR, Grx e GST, bem como a produção de EROs totais e lipoperoxidação evidenciada pelas substâncias reativas ao ácido tiobarbitúrico em homogeneizados dos corações pós isquêmicos. Os resultados deste trabalho mostram que o SFN foi capaz de estimular a 6 maquinaria antioxidante intracelular através do aumento significativo de 66% da expressão de ambas as enzimas SOD e HO-1. Ainda, foi capaz de diminuir a produção de EROs totais em 7%. Entretanto, não foi capaz de estimular a expressão de enzimas como a CAT e a GPx. As atividades destas enzimas, bem como das enzimas TrxR, Grx e GST também não apresentaram diferença significativa entre os grupos. Não foram encontradas diferenças entre os grupos também na lipoperoxidação. Quanto à mecânica cardíaca, o SFN não foi capaz de modular a função ventricular pós isquêmica no regime de tratamento utilizado. Como conclusão, o pré tratamento com SFN na dose de 10 mg/kg/dia foi capaz de estimular a expressão de antioxidantes endógenos importantes, tais como a HO-1 e a SOD. Entretanto, o aumento na expressão não repercutiu em suas atividades enzimáticas e, dessa forma, não se observou modificação na função ventricular pós-isquêmica dos corações submetidos à isquemia-reperfusão. / Ischemia followed by reperfusion activates a cascade of injurious events closely related to oxidative stress. During ischemia, generation of reactive oxygen species increases and even more in reperfusion with the reestablishment of oxygen tension. Once exogenous antioxidants seem to exert beneficial effects only in initial phases of cardiovascular diseases, sulforaphane (SFN) is a new therapeutic strategy which acts stimulating endogenous antioxidant machinery. This compound is a natural occurring isothiocyanate, found in cruciferous vegetables as broccoli sprouts, which demonstrates a cardioprotective capacity associated with its capacity of stimulating the antioxidant endogenous reserve. There are few studies until the moment evidenciating the cardioprotective role of SFN on ischemia-reperfusion. The aim of this study was to test the hypothesis that pre-treatment with SFN could modulate the post-ischemic ventricular function, attenuating oxidative stress in isolated hearts submitted to ischemia-reperfusion. Male Wistar rats weighing between 250 – 300g were treated for three days with SFN (10mg/kg/day i.p.) or vehicle. Twenty four hours after the last injection, rats were decapitated and their hearts were rapidly excised and submitted to global ischemia in a Langendorff’s apparatus. Hearts were perfused with a Krebs-Henseleit solution for a pre-ischemic period of 20 minutes (stabilization), followed by normotermic global ischemia of 20 minutes and 20 minutes of reperfusion. The following parameters were evaluated: heart rate (HR), left ventricular systolic pressure (LVSP), left ventricular end diastolic pressure (LVEDP), contractility index (+dP/dt), relaxation index (-dP/dt) and coronary perfusion pressure (PP). At the end of protocol, hearts were weighed and frozen at -80ºC for posterior biochemical and molecular analysis. The expression of SOD, CAT, GPx and heme oxygenase-1 (HO-1) and activity of SOD, CAT, GPx, TrxR, Grx and GST, as well as total reactive oxygen species production and lipid peroxidation evidenciated by thiobarbituric reactive substances analysis were performed in homogenates of post-ischemic hearts. The results of the present study show that SFN was capable to stimulate the antioxidant intracellular machinery due to a significant increase of 66% in the expression of both SOD and HO-1 enzymes. Moreover, it was capable to reduce ROS production by about 7%. Although, it was not capable to induce CAT and GPx expression. The activities of these enzymes, as well as TrxR, Grx and GST did not present significant differences between groups. 8 No differences between groups were found in lipid peroxidation. Regarding to mechanical function, SFN was not capable to modulate post-ischemic ventricular function with the treatment regimen used. In summary, pre-treatment with 10 mg/kg/day SFN was capable to stimulate the expression of important endogenous antioxidants, such as HO-1 and SOD. However, the increase on the expression did not reflect in its enzymatic activities and, thereby, no modification on post-ischemic ventricular function of the hearts submitted to ischemia-reperfusion was observed.

Made available in DSpace on 2017-05-12T14:36:24Z (GMT). No. of bitstreams: 1 EFEITO DA QUERCETINA OVARIECTOMIZADAS.pdf: 2103814 bytes, checksum: ae46af8ec18f6634ae18e23c19f6e393 (MD5) Previous issue date: 2015-12-07 / Tamoxifen was discovered in 1970 and classified as selective estrogen receptor modulator (SERM) being used as therapy in the treatment of breast cancer. Although benefits has been proven, side effects are intense, and are related to different mechanisms of toxic action, such as oxidative stress and changes in the glycolytic pathway that induce a hyperglycemia and liver damage. The administration of quercetin, a flavonoid with antioxidant potential, that has inhibitory effect on enzyme butyrylcholinesterase, an enzyme possibly associated with hepatotoxicity and hyperglycemia, has benefits on the adverse effects caused by tamoxifen. Thus, first to determine the effect of quercetin on the hyperglycemia caused by tamoxifen, ovariectomized rats were treated orally, with tamoxifen and quercetin; concluding that effects of quercetin are dependent on ratio quercetin/tamoxifen coadministered and the 4.5 ratio is more effective. After, trying to elucidate the mechanisms involved in changes in the glycolytic pathway, oxidative stress and liver damage perfusion was performed in rat liver, studying especially glycogenolysis and gluconeogenesis, using as an indicator of liver damage of butyrylcholinesterase activity and monitoring the oxidative stress. The results showed that quercetin has inhibitory effect on glucose production and enhances the effects generated by tamoxifen in gluconeogenesis, concluding that although quercetin is known for antioxidant activity, in certain concentrations (400 μM) intensifies the damage initially caused by tamoxifen, this effect doesn't occur with lower concentrations of quercetin (200 μM). Therefore, although quercetin has shown to be effective in reducing hyperglycemia caused by tamoxifen, the interaction of quercetin with tamoxifen should be viewed with caution since the effect of this interaction in carbohydrate metabolism is intense, can alter the intracellular redox environment, compromising its integrity and causing serious damage to liver tissue. / O tamoxifeno, descoberto em 1970 foi classificado como modulador seletivo de receptor de estrógeno (SERM) sendo utilizado no tramento e prevenção do câncer de mama e embora seja terapia de escolha no período pós-menopausa seus efeitos colaterais são intensos, e estão relacionados a diferentes mecanismos de ação tóxica, como o estresse oxidativo e alterações na via glicolítica que induzem a hiperglicemia e causam danos hepáticos. A coadministração de quercetina, um flavonoide com potencial antioxidante e que possui efeito inibitório na enzima butirilcolinesterase, enzima essa possivelmente associada a hepatotoxicidade e a hiperglicemia, traria benefícios diante dos efeitos adversos gerados pelo tamoxifeno. Sendo assim, primeiramente, para determinar o efeito da quercetina diante da hiperglicemia causada pelo tamoxifeno, ratas ovariectomizadas foram tratadas via oral com quercetina e tamoxifeno; concluindo que os efeitos da quercetina são dependentes da razão Quercetina/Tamoxifeno coadministrado, e na razão 4,5 a quercetina mostra-se altamentente eficaz. Após, buscando elucidar os mecanismos envolvidos nas alterações na via glicolítica, os danos hepáticos e o estresse oxidativo, foram realizados perfusão em fígado isolado de ratas, estudando em especial a glicogenólise e a gliconeogênese, utilizando como indicador dos danos hepáticos a atividade da butirilcolinesterase e monitorando o estresse oxidativo. Os resultados mostraram que a quercetina possui efeito inibitório (200 μM) sobre a produção de glicose e intensifica os efeitos gerados pelo tamoxifeno na gliconeogênese, concluindo que embora a quercetina seja reconhecida pela sua atividade antioxidante, em determinadas concentrações (400 μM) ela acentua os danos inicialmente causados pelo tamoxifeno, não ocorrendo esse efeito com concentrações mais baixas de quercetina (200 μM). Sendo assim, embora a quercetina tenha se mostrado eficaz, reduzindo a hiperglicemia causada pelo tamoxifeno via oral, a interação da quercetina com tamoxifeno deve ser vista com cautela, pois os resultados mostram que o efeito dessa interação no metabolismo de carboidratos é intenso, podendo alterar o ambiente redox intracelular, comprometer a integridade celular e causar danos graves no tecido hepático.

Made available in DSpace on 2017-07-10T13:59:28Z (GMT). No. of bitstreams: 1 EFEITO DA QUERCETINA OVARIECTOMIZADAS.pdf: 2103814 bytes, checksum: ae46af8ec18f6634ae18e23c19f6e393 (MD5) Previous issue date: 2015-12-07 / Tamoxifen was discovered in 1970 and classified as selective estrogen receptor modulator (SERM) being used as therapy in the treatment of breast cancer. Although benefits has been proven, side effects are intense, and are related to different mechanisms of toxic action, such as oxidative stress and changes in the glycolytic pathway that induce a hyperglycemia and liver damage. The administration of quercetin, a flavonoid with antioxidant potential, that has inhibitory effect on enzyme butyrylcholinesterase, an enzyme possibly associated with hepatotoxicity and hyperglycemia, has benefits on the adverse effects caused by tamoxifen. Thus, first to determine the effect of quercetin on the hyperglycemia caused by tamoxifen, ovariectomized rats were treated orally, with tamoxifen and quercetin; concluding that effects of quercetin are dependent on ratio quercetin/tamoxifen coadministered and the 4.5 ratio is more effective. After, trying to elucidate the mechanisms involved in changes in the glycolytic pathway, oxidative stress and liver damage perfusion was performed in rat liver, studying especially glycogenolysis and gluconeogenesis, using as an indicator of liver damage of butyrylcholinesterase activity and monitoring the oxidative stress. The results showed that quercetin has inhibitory effect on glucose production and enhances the effects generated by tamoxifen in gluconeogenesis, concluding that although quercetin is known for antioxidant activity, in certain concentrations (400 μM) intensifies the damage initially caused by tamoxifen, this effect doesn't occur with lower concentrations of quercetin (200 μM). Therefore, although quercetin has shown to be effective in reducing hyperglycemia caused by tamoxifen, the interaction of quercetin with tamoxifen should be viewed with caution since the effect of this interaction in carbohydrate metabolism is intense, can alter the intracellular redox environment, compromising its integrity and causing serious damage to liver tissue. / O tamoxifeno, descoberto em 1970 foi classificado como modulador seletivo de receptor de estrógeno (SERM) sendo utilizado no tramento e prevenção do câncer de mama e embora seja terapia de escolha no período pós-menopausa seus efeitos colaterais são intensos, e estão relacionados a diferentes mecanismos de ação tóxica, como o estresse oxidativo e alterações na via glicolítica que induzem a hiperglicemia e causam danos hepáticos. A coadministração de quercetina, um flavonoide com potencial antioxidante e que possui efeito inibitório na enzima butirilcolinesterase, enzima essa possivelmente associada a hepatotoxicidade e a hiperglicemia, traria benefícios diante dos efeitos adversos gerados pelo tamoxifeno. Sendo assim, primeiramente, para determinar o efeito da quercetina diante da hiperglicemia causada pelo tamoxifeno, ratas ovariectomizadas foram tratadas via oral com quercetina e tamoxifeno; concluindo que os efeitos da quercetina são dependentes da razão Quercetina/Tamoxifeno coadministrado, e na razão 4,5 a quercetina mostra-se altamentente eficaz. Após, buscando elucidar os mecanismos envolvidos nas alterações na via glicolítica, os danos hepáticos e o estresse oxidativo, foram realizados perfusão em fígado isolado de ratas, estudando em especial a glicogenólise e a gliconeogênese, utilizando como indicador dos danos hepáticos a atividade da butirilcolinesterase e monitorando o estresse oxidativo. Os resultados mostraram que a quercetina possui efeito inibitório (200 μM) sobre a produção de glicose e intensifica os efeitos gerados pelo tamoxifeno na gliconeogênese, concluindo que embora a quercetina seja reconhecida pela sua atividade antioxidante, em determinadas concentrações (400 μM) ela acentua os danos inicialmente causados pelo tamoxifeno, não ocorrendo esse efeito com concentrações mais baixas de quercetina (200 μM). Sendo assim, embora a quercetina tenha se mostrado eficaz, reduzindo a hiperglicemia causada pelo tamoxifeno via oral, a interação da quercetina com tamoxifeno deve ser vista com cautela, pois os resultados mostram que o efeito dessa interação no metabolismo de carboidratos é intenso, podendo alterar o ambiente redox intracelular, comprometer a integridade celular e causar danos graves no tecido hepático.

Os mecanismos propostos para a gama de ações deletérias provocadas pelo etanol são decorrentes de alterações bioquímicas ocorridas nos hepatócitos tais como: 1) aumento da geração de radicais livres; 2) produção exacerbada de intermediários de alta reatividade vindos de peroxidação de macromoléculas, e 3) depleção de substâncias da defesa antioxidante. A utilização de antioxidantes visando restaurar o sistema antioxidante é uma das linhas de tratamento para os danos provocados pelo etanol. Recentemente, estudos têm apontado para um possível papel antioxidante da tiamina e benfotiamina com efeitos benéficos principalmente em doenças crônicas-degenerativas. Assim este estudo verificou o papel da tiamina ou benfotiamina no sistema antioxidante hepático em ratos com intoxicação aguda por etanol. Verificou-se que o tratamento com tiamina e benfotiamina teve influencia no metabolismo do etanol ficando este mais circulante sem metabolização. Os tratamentos foram eficazes em aumentar os valores hepáticos de tiamina, o que resultou em diminuição dos danos hepáticos e diminuição de vitaminas antioxidantes do fígado. Além disso, a benfotiamina foi capaz de aumentar em 25 vezes os níveis eritrocitários de tiamina não fosfatada em relação à administração de tiamina hidrocloreto. Desta maneira ficou constatada a atividade antioxidante da tiamina frente ao estresse oxidativo provocado pela intoxicação aguda por etanol e a alta biodisponibilidade da benfotiamina. Assim sendo seria recomendada a utilização da benfotiamina como antioxidante mais biodisponível que a tiamina. / The proposed arrangements for the range of deleterious actions caused by ethanol are due to biochemical changes occurring in hepatocytes such as: 1) increasing in generation of free radicals; 2) production exacerbated an intermediary of high reactivity from peroxidation of macromolecules, and 3) depletion of substances of antioxidant defense system. The use of antioxidants aimed at restoring the antioxidant system is a line of treatment for the damage caused by ethanol. Recently, studies have pointed to a possible role of thiamine and benfotiamine as antioxidant with beneficial effects especially in chronic and degenerative diseases. So, the aim of this study was verify the role of thiamine or benfotiamine in the liver antioxidant system in rats treated with acute ethanol. It has been verified that treatment with thiamine and benfotiamine had influence on the metabolism of ethanol leaving it more circulating without metabolism. The treatments were effective in increasing the values of liver thiamine, which resulted in reduction of liver damage and decrease of the consumption of antioxidant vitamins of the liver. In addition, the benfotiamine was able to increase at 25 times the levels of erythrocyte free thiamine in relation to the administration of thiamine hydrochloride. Thus was established the antioxidant activity of thiamine front of the oxidative stress caused by acute ethanol and high bioavailability of benfotiamine. Therefore it recommended the use of more bioavailable benfotiamine as an antioxidant that thiamine.