Ruptura da placa aterosclerótica e trombose, processos frequentemente desencadeados por atividades do paciente, são atualmente reconhecidos como as causas que desencadeiam as síndromes coronarianas agudas. O entendimento deste fenômeno desencadeante poderia ser melhorado se dispuséssemos de modelos animais confiáveis de ruptura de placa e trombose. O objetivo do presente trabalho foi reproduzir e melhor caracterizar um modelo animal de aterosclerose e trombose arterial induzida agudamente, em coelhos, descrito por Constatinides e Chakravarti há mais de 30 anos e não mais utilizado. Também foi avaliada a viabilidade deste modelo para testes de intervenção farmacológica e o efeito da lesão arterial com cateter balão sobre o tempo requerido para indução do processo de ruptura de placa e trombose arterial. A aterosclerose foi induzida por dieta enriquecida com colesterol, pela lesão mecânica do vaso arterial ou por ambas intervenções. O desencadear de trombose foi feito pela administração de veneno da víbora Russellis, um proteolítico e procoagulante, assocado à histamina, um vasoconstritor em coelhos. No estudo 1, testou-se o modelo de 8 meses, descrito originalmente, e o efeito da lesão arterial com cateter balão, associada ou não à dieta rica em colesterol, sobre a fraquência e a extensão da trombose, independentemente de ter recebido, ou não, a dieta rica em colesterol. No estudo 2, relizou-se um experimento piloto com oácido lisino-salicílico, um reconhecido agente antitrombótico, para testar a viabilidade deste modelo para testes de intervenção farmacológica. Não se detectou diferença significativa tanto no número, quanto no tamanho dos trombos, prossivelmente em função do pequeno número de animais estudados. No estudo 3, verificou-se o efeito da lesão com balão, sem intervenção dietética, sobre a produção de placas vulneráveis à trombose, após 4 meses. Demonstrou-se 80% de trombose nos animais que tiveram sua aorta lesada e uma forte correlação entre um escore de intensidade das lesões histológicas e a extensão da trombose arterial. No estudo 4, testou-se o efeio da vitamina E, um reconhecido agente antioxidadente, sobre a extensão da trombose arterial e a intensidade das lesões histológicas após 4 meses sem intervenção dietética. A vitamina E não reduziu a extensão da trombose nem a intensidade das lesões histológicas. Conclui-se que este modelo pode ser reproduzido e presta-se ao estudo do fenômeno da ruptura de placa e trombose. A lesão mecânica arterial com balão, associada ou não à dieta rica em colesterol, propicia um forte estímulo à formação de placas vulneráveis ao desendeamento agudo de trombose arterial. Por outro lado, as artérias normais foram resistentes ao tramento indutor de trombose. Este modelo represneta um método que pode ser útil para avaliar agentes que diminuem a ocorrência de plavas vulneráveis ou que diminuem a extensão da trombose formada após indução. Este modelo pode ser útil para identificar aspectos relacionados à vulnerabidlidade das placas à ruptura e os agentes farmacológicos que desencadeiam ruptura de placa e trombose. Entretanto, em função do intenso estímulo trombogênico gerado, sugere-se a redução da intensidade da lesão ou das alterações da coagulação ou da vasoconstrição.

Objetivo: Avaliar a incidência de tromboembolismo e as condições clínicolaboratoriais associadas em pacientes pediátricos internados em um hospital terciário. Pacientes e métodos: Estudo retrospectivo onde foram revisados os prontuários de todas as 6140 crianças de 0 à 13 anos que internaram entre fevereiro de 2007 à janeiro de 2009. Foram identificadas 31 crianças que tiveram 34 casos de tromboembolismo confirmado por diagnóstico de imagem, e estas foram incluídas no banco de dados para análise. Resultados: A incidência de tromboembolismo foi de 43,3 (intervalo de confiança de 95%: 30,0-60,4) para cada 10.000 internações. Vinte e seis (83,9%) crianças tinham condições clínicas associadas, sendo que 11 (35,4%) tinham apenas 1 condição associada, 5 (16,1%) tinham 2 condições associadas, 6 (19,3%) tinham 3 condições associadas, 4 (12,9%) tinham 4 condições associadas e 5 (16,1%) não tinham condições associadas. As frequências das principais condições clínico-laboratoriais foram: sepse, 41,9%; trombofilias, 35,5%; cardiopatia acianótica, 29,9%; e cateter central, 22,5%. Conclusão: O presente estudo evidenciou uma incidência de tromboembolismo muito mais alta do que a descrita na literatura, provavelmente devido ao estudo ter sido realizado em um hospital terciário, com maior complexidade e complicações associadas mostrando a importância de considerar este diagnóstico. Observamos também uma alta taxa de trombofilias nos pacientes que tiveram tromboembolismo, salientando que a associação de fatores de risco e predisposição genética ou fatores intrínsecos devem ser considerada no diagnostico e manejo destes pacientes. / Objective: To assess the incidence of thromboembolism and associated clinical conditions and laboratory abnormalities in a sample of pediatric patients admitted to a tertiary referral center. Methods: This was a retrospective chart review study. The medical records of all 6140 children between the ages of 0 and 13 years admitted to the study facility from February 2007 through January 2009 were reviewed. A total of 34 cases of imaging-confirmed thromboembolism were identified in 31 children and included for analysis. Results: The incidence of thromboembolism was 43.3 (95%CI, 30.0–60.4) per 10,000 admissions. Twenty-six children (83.9%) had associated clinical conditions: 11 (35.4%) had only 1 associated condition, 5 (16.1%) had 2 associated conditions, 6 (19.3%) had 3 associated conditions, 4 (12.9%) had 4 associated conditions, and 5 (16.1%) had no associated conditions. The main associated conditions were sepsis (41.9%), thrombophilia (35.5%), acyanotic heart disease (29.9%), and central venous catheterization (22.5%). Conclusion: In the sample studied herein, the incidence of thromboembolism was much higher than that reported in the literature, most likely due to the study setting (tertiary referral hospital) and its implications (greater case complexity and frequency of complications), stressing the importance of considering the diagnosis. Furthermore, among patients who developed thromboembolism, there was a high rate of thrombophilia, highlighting the importance of the association between risk factors and genetic predispositions or intrinsic factors in the diagnosis and management of these patients.

Made available in DSpace on 2014-06-11T19:31:07Z (GMT). No. of bitstreams: 0 Previous issue date: 2013-09-19Bitstream added on 2014-06-13T18:41:43Z : No. of bitstreams: 1 santos_njn_dr_botfm.pdf: 3800006 bytes, checksum: 5db7301475ce7a51d65a53c0fbd39b26 (MD5) / A trombose venosa profunda (TVP) é doença frequente e importante causa de morbidade e mortalidade, apresentando complicações potencialmente fatais como o tromboembolismo pulmonar. A dificuldade no diagnóstico é um dos aspectos mais problemáticos. Por se tratar de uma doença com sintomas e sinais inespecíficos, a realização de exames complementares é mandatória para o diagnóstico de certeza e início da terapia anticoagulante. Avaliar a eficácia do protocolo de Wells et al. (2003) e do Dímero-D (DD) como métodos diagnósticos para TVP em comparação ao mapeamento dúplex (MD) e analisar alterações da Proteína C Reativa (PCR) comparando ao DD. Foram selecionados 203 pacientes com sintomas e sinais sugestivos de TVP, atendidos no setor de emergência de dois prontos-socorros de referência em Manaus/AM, durante o período de 13 meses. Após serem submetidos a anamnese e exame físico geral para preenchimento da ficha de avaliação e do protocolo de Wells et al e coleta de material para dosagem de DD e PCR, os pacientes foram submetidos ao MD para confirmação ou exclusão da TVP.Dos 203 pacientes estudados, 133 (65,5%) tiveram o diagnóstico de TVP confirmado por MD e os outros 70 (34,5%), o MD Resumo não foi compatível com TVP. No grupo com TVP, 75 (56,4%) eram do sexo feminino e 58 (43,6%) eram do sexo masculino. A média de idade foi de 51,7 (± 17,5) anos. No grupo sem TVP, 36 (51,4%) eram do sexo feminino e 34 (48,6%) eram do sexo masculino. A média de idade foi de 51,8 (±16,2) anos. Não houve diferenças significativas entre sexo e idade nos grupos (p = 0,500 e p = 0,987, respectivamente). A sensibilidade encontrada para o protocolo de Wells foi de 100% (IC 95%: 99,6 – 100,0) e a especificidade foi de 72,9% (IC 95%: 61,7 – 84,0). O Valor Preditivo Positivo (VPP) foi de 87,5% (IC 95%: 81,9 – 93,1) e o Valor Preditivo Negativo... / Deep vein thrombosis (DVT) is common and important cause of morbidity and mortality, presenting potentially fatal complications such as pulmonary thromboembolism. Diagnosis is one of the most problematic aspects. As disease signs and symptoms are non-specific, complementary exams must be performed to confirm diagnosis and start of anticoagulant treatment. to evaluate the efficacy of the Wells et al. protocol (2003) and D Dimer test (DD) as diagnostic methods for DVT compared to Duplex Mapping (DM) and analyse changes in C-reactive protein (CRP) compared to DD. We selected 203 patients with signs and symptoms suggesting DVT, seen in two reference emergency units in Manaus/AM, Brazil over 13 months. After being submitted to anamnesis and general physical examination to fill out the Wells et al. evaluation protocol card and collection of material for DD and CRP measurements, patients were submitted to DM to confirm or exclude DVT. From the 203 patients studied, 133 (65.5%) had DVT diagnosis confirmed by DM and in the other 70 (345%), DM was not compatible with DVT. In the DVT group, 75 (56.4%) were female and 58 (43.6%) masculine. Mean age was 51.7 ± 17.5 years. In the without DVT group, 36 (51.4%) were female and 34 (48.6%) masculine. Mean age was 51.8 ± 16.2 years. Abstract There were no significant differences between gender and age in the groups (p = 0.500 and p = 0.987, respectively). Wells protocol sensitivity was found to be 100% (IC 95%: 99.6 – 100.0) and specificity was 72.9% (IC 95%: 61.7 – 84.0). Positive Predictive Value (PPV) was 87.5% (IC 95%: 81.9 – 93.1) and Negative Predictive Value (VPN) was 100% (IC 95%: 99.0 – 100.0). DD sensitivity was 100% (IC 95%: 99.6 – 100.0) and specificity was 98.6% (IC 95%: 95.1 – 100.0). PPV was 99.3% (IC 95%: 97.4 – 100.0) and NPV was 100.0% (IC 95%: 99.3 – 100.0)... (Complete abstract click electronic access below)

Made available in DSpace on 2014-06-11T19:32:44Z (GMT). No. of bitstreams: 0 Previous issue date: 2010-05-24Bitstream added on 2014-06-13T21:04:42Z : No. of bitstreams: 1 matida_ck_dr_botfm.pdf: 889840 bytes, checksum: e2fb39fd0a8e59a674752ea187a4c74b (MD5) / A importância do estudo da trombose venosa profunda (TVP) em crianças e adolescentes reside no impacto desta doença sobre a qualidade de vida desta população, tendo em vista sua longa expectativa de vida e a morbidade associada ao tromboembolismo venoso. Com o passar dos anos, a síndrome pós-trombótica e a recorrência podem deixar sequelas que vão desde dor crônica nos membros, edema e até úlceras de difícil cicatrização. A TVP em crianças está sendo melhor estudada nos últimos anos. Até então, seu diagnóstico e tratamento eram baseados em experiências individuais, pequenas séries de casos ou extrapolados das recomendações para adultos. Realizamos a presente revisão para melhor compreensão da epidemiologia, fisiopatologia, etiologia, diagnóstico, tratamento desta doença / The study of deep vein thrombosis (DVT) in children and adolescents assesses the important impact of this disease on the quality of life of this population considering its long life expectancy and morbidity associated to venous thromboembolism. Within the years, the pos-thrombotic syndrome and recurrence can cause sequelae including chronic lower limb pain, edema and even hard cicatrization ulcer. Recently, DVT in children has been studied more appropriately. Previously, its diagnosis and treatment were based on individual experience, some serial cases or comparisons with recommendations to the adult treatments. This present study has been presented to better comprehend the epidemiology, physiopathology, etiology, diagnosis, treatment and prophylaxis of the deep vein thrombosis

Made available in DSpace on 2015-06-17T19:34:49Z (GMT). No. of bitstreams: 0 Previous issue date: 2014-10-30. Added 1 bitstream(s) on 2015-06-18T12:47:02Z : No. of bitstreams: 1 000830279.pdf: 326839 bytes, checksum: 4e04cae007ca77e6e81e1cd802eea78f (MD5) / As neoplasias mamárias são consideradas os tumores mais frequentes em cadelas, podendo frequentemente predispor estes animais a complicações hemostáticas secundárias à neoplasia. Neste contexto, a trombose é uma das maiores alterações hemostáticas de pacientes com câncer, e muitas vezes é descoberta tardiamente. Testes hemostáticos vêm sendo utilizados na medicina humana para um diagnóstico mais precoce, permitindo um melhor prognóstico das condições neoplásicas. Entretanto, em cães com neoplasias raramente utilizam-se testes para diagnosticar estados de hipercoagulabilidade. Na medicina veterinária a correlação entre neoplasia e hipercoagulabilidade tem sido um achado constante em cães, porém na maioria das vezes sem alterações clínicas evidentes como ocorre na medicina. A necessidade da avaliação hemostática para se estabelecer um melhor protocolo terapêutico e prognóstico nos diferentes tipos de neoplasia fica evidente nestes pacientes. Com o objetivo de avaliar o perfil hemostático e os possíveis sinais de hipercoagulabilidade em cadelas com carcinoma mamário foram selecionadas 30 cadelas, sendo 15 fêmeas saudáveis (grupo controle) e 15 fêmeas com carcinoma mamário, confirmada por exame citológico e histopatológico. Ambos os grupos foram submetidos à avaliação hemostática por meio do teste da tromboelastrometria (intem, extem, fibtem), agregação plaquetária, TP e TTPa. Os resultados foram submetidos à análise descritiva e, em seguida, foi realizada a comparação das médias dos grupos para as variáveis, pelo teste T, ao nível de significância de p<0,01 e p<0,05. Observou-se diferença significativa nos testes hemostáticos de rotina resultando em hiperagregabilidade plaquetária e aumento do TP. Na tromboelastometria houve diminuição significativa no CT (EXTEM, FIBTEM), CFT (INTEM, EXTEM), e ML (INTEM, EXTEM) e elevação no ângulo α (INTEM EXTEM) e MCF (INTEM, EXTEM). Após a ... / Mammary tumuor are considered the most common tumors in dogs and can often predispose these animals to hemostatic complications secondary to neoplasia. In this context, thrombosis is a major hemostatic abnormality in patients with cancer, that is often discovered late. Hemostatic tests have been used in human medicine for an earlier diagnosis, allowing a better prognosis of neoplastic conditions. However, in dogs with cancer tests to diagnose hypercoagulable states are rarely used. In veterinary medicine the correlation between cancer and hypercoagulability has been a constant finding in dogs, but most of the times, unlike human medicine, it is devoided of clear clinical signs. The need for hemostatic evaluation to establish a better treatment protocol and prognosis in different types of cancer is evident in these patients. Aiming to evaluate the hemostatic profile and the possible hypercoagulable states in dogs with mammary carcinoma, 30 female dogs were selected, 15 healthy female (control group) and 15 females dogs with breast carcinoma confirmed by cytology and histopathology. Both groups were submitted to underwent hemostatic evaluation by the tromboelastrometry (INTEM, EXTEM, FIBTEM), platelet aggregation, PT and aPTT. The results collected, were submitted to descriptive analysis, and then the means between groups was compared by the t test at the level p<0,01 and p<0,05. The results, showed significant differences in hemostatic routine tests resulting in increased platelet aggregability and TP. Thromboelastometry had demonstrated a significant reduction in CT (EXTEM, FIBTEM), CFT (INTEM, EXTEM), and ML (INTEM, EXTEM) and an elevation in α angle (INTEM, EXTEM) and MCF (INTEM, EXTEM). It is concluded that dogs with mammary carcinoma present a higher thrombotic state risk associated to a hipergoagulable state

O papel dos nucleotídeos da adenina na função vascular e plaquetária já está bem estabelecido. Apirase (CD39) faz parte de uma família de ecto-enzimas capazes de hidrolisar nucleosídeos di- e trifosfatados da adenosina e sua participação no sistema tromborregulador tem sido estudada. Nós utilizamos um modelo experimental in vivo de trombose arterial aguda para testar a hipótese de que a administração de apirase solúvel pode prevenir a formação de trombos. Vinte e cinco coelhos brancos Nova Zelândia foram submetidos à lesão arterial com cateter balão e, após 15 dias, a um protocolo indutor de trombose. Treze animais receberam duas administrações intravenosas de apirase solúvel (com 90 minutos de intervalo) e 12 animais foram utilizados como controle. Após 3 horas do protocolo indutor de trombose, os animais foram mortos e a taxa e área de trombose foram avaliadas. A taxa de trombose no grupo apirase foi significativamente menor que no grupo controle (69% vs. 16,7%, respectivamente, P=0,015) assim como a área de trombose (1,7 mm2 ± 4,3 vs. 21,7 mm2 ± 37,4, respectivamente, P=0,008). Nossos resultados confirmam a participação da apirase na homeostasia através de um potente efeito antitrombótico. / The role of adenine nucleotides on vascular and platelet functions has long been established. Apyrase (CD39) takes part of a family of ecto-enzymes that hydrolyze adenosine di and triphosphate and its participation on thromboregulatory system is under study. We used an in vivo experimental model of acute arterial thrombosis to test the hypothesis that administering soluble form of potato apyrase could prevent thrombus formation. Twenty five white New Zealand male rabbits suffer balloon aortic endothelium denudation and fifteen days after were submitted to a thrombosis triggering protocol with a procoagulant (Russel’s viper venom) and epinephrine. After the thrombosis triggering protocol 13 animals received two soluble apyrase administration (with 90 minutes interval) and 12 animals that received no treatment were used as controls. Three hours after the triggering protocol, the animals were killed and the rate and area of arterial thrombosis were analyzed. The rate of thrombosis in the apyrase group was significantly lower than the control group (69% vs. 16,7%, respectively, P= 0,015) as well as the area of thrombosis (1,7 mm2 ± 4,3 vs. 21,7 mm2 ± 37,4, respectively, P=0,008). Our results confirm that apyrase do participate in homeostasis through a potent antithrombotic effect.

Introdução: Embora a imagem com segunda harmônica esteja largamente disponível na maioria dos aparelhos de ultra-sonografia, sua acurácia para avaliar a morfologia e a função do apêndice atrial esquerdo (AAE) permanece precariamente caracterizada. Objetivos: Explorar o desempenho diagnóstico da ecocardiografia transtorácica com segunda harmônica (ETTsh) na avaliação do AAE após eventos neurológicos agudos. Métodos: Realizamos um estudo transversal em pacientes com eventos neurológicos isquêmicos agudos, encaminhados para realização de ETTsh e Ecocardiografia Transesofágica (ETE). As análises da área longitudinal máxima e do pico da velocidade de esvaziamento de fluxo do AAE foram realizadas por observadores cegos. Resultados: Foram avaliados 51 pacientes (49% femininas, 62 ± 12 anos) com eventos neurológicos isquêmicos agudos. Contraste ecocardiográfico espontâneo foi observado em 11 (22%) pacientes no AE, em 7(14%) no AAE e em 3 (6%) na aorta torácica descendente. Trombo no AAE foi identificado em apenas 2 (4%) pacientes. O mapeamento e a análise do AAE foi factível na maioria dos casos (98%), tanto para o estudo com Doppler quanto para avaliação da área do AAE. Observamos uma associação positiva e significativa entre o ETTsh e o ETE, tanto para a avaliação das velocidades máximas de esvaziamento do AAE (r=0,63; p<0,001) quanto para a área longitudinal máxima do AAE (r=0,73; p<0,001). Ademais, todos os pacientes com trombos no AAE ou contraste espontâneo (n=7) tiveram velocidade de esvaziamento inferior a 50 cm/s no mapeamento transtorácico (valor preditivo negativo de 100%). Na análise multivariada ajustada para diversos potenciais preditores transtorácicos de risco, a velocidade máxima de esvaziamento do AAE permaneceu independentemente associada com trombos no AAE ou contraste espontâneo. Conclusão: ETTsh pode fornecer informações relevantes a respeito da morfologia e dinâmica do AAE. Em particular, pacientes com velocidades altas de esvaziamento do AAE podem não necessitar de avaliação adicional com ETE. / Background. Although second harmonic imaging is widely available in most ultrasound systems, its accuracy to evaluate the left atrial appendage (LAA) morphology and function remains poorly characterized. Objectives. To explore the performance of second harmonic transthoracic echocardiography (shTTE) in the assessment of LAA after acute neurologic events. Methods. We conducted a cross-sectional survey of patients with acute ischemic neurologic events that underwent both shTTE and transesophageal echocardiography (TEE). Blinded off-line analysis of LAA maximal area and peak emptying velocities were performed. Results. Fifty-one consecutive patients (49% females, 62 ± 12 years) with acute ischemic neurologic events were evaluated. Spontaneous echocardiographic contrast was observed in 11(22%) patients in the LA, in 7(14%) in the LAA and in 3 (6%) in the thoracic aorta. LAA thrombus was identified in only 2(4%) patients. Scanning and analysis of the LAA was feasible in most patients (98%) both for Doppler and LAA area assessment. We observed a positive and significant association between shTTE and TEE assessment of both LAA peak emptying velocities (r=0.63, p<0.001) and LAA maximum area (r=0.73, p<0.001). In addition, all patients (n=7) with LAA thrombus or spontaneous contrast had peak emptying velocities inferior to 50 cm/s on transthoracic scanning (negative predictive value of 100%). In multivariate analysis adjusted for several potential transthoracic predictors of risk, LAA peak-emptying velocity remained independently associated with LAA thrombus or spontaneous contrast. Conclusions. shTTE can provide valuable information of LAA morphology and dynamic. In particular, patients with high peak emptying velocities might not need additional TEE imaging.

Submitted by Automação e Estatística (sst@bczm.ufrn.br) on 2018-07-02T21:40:20Z No. of bitstreams: 1 RaphaelPaschoalSerquiz_DISSERT.pdf: 1610214 bytes, checksum: 8f23b4e10ee21479e603090f006e88c4 (MD5) / Approved for entry into archive by Arlan Eloi Leite Silva (eloihistoriador@yahoo.com.br) on 2018-07-09T12:09:40Z (GMT) No. of bitstreams: 1 RaphaelPaschoalSerquiz_DISSERT.pdf: 1610214 bytes, checksum: 8f23b4e10ee21479e603090f006e88c4 (MD5) / Made available in DSpace on 2018-07-09T12:09:40Z (GMT). No. of bitstreams: 1 RaphaelPaschoalSerquiz_DISSERT.pdf: 1610214 bytes, checksum: 8f23b4e10ee21479e603090f006e88c4 (MD5) Previous issue date: 2017-10-25 / A hemostasia é o evento pelo qual os mamíferos bloqueiam a perda de volemias sanguíneas e promovem o reparo de lesões, e falhas por excessos contribuem para a propagação de fatores inflamatórios e trombóticos. As consequências da aterosclerose são exemplos de agravos desse tipo e a heparina (Hep) é um fármaco de escolha para esses tratamentos. Pacientes com carência de antitrombina têm resistência aos efeitos anticoagulantes da Hep, então pesquisas por novas moléculas homeostáticas que contribuam com os tratamentos clínicos são necessárias. Inibidores de proteinases vegetais têm sido eficazes em controlar processos biológicos, como coagulação e inflamação. O presente trabalho objetivou isolar um inibidor de tripsina da semente de Juquiri (JTI) verificando sua atividade contra serinoproteinases, e avaliar seus potenciais anticoagulante e anti-inflamatório. O inibidor foi isolado por cromatografia de afinidade e troca-iônica, apresentando duas principais bandas proteicas de 11,9 e 19,2 kDa estimadas por SDS-PAGE, e foi capaz de inibir tripsina e quimotripsina. Na coagulação, o JTI prolongou o tempo de tromboplastina parcial (APTT) em concentrações superiores à 2 µg/100 µL de plasma, sem prolongar o tempo de protrombina (PT). Associado à Hep, o JTI foi capaz de intensificar o efeito anticoagulante do fármaco em ambos os testes. Sem apresentar toxicidade contra eritrócitos humanos o JTI reduziu 40% das concentrações de elastase liberada por neutrófilos induzidos por PAF (fator ativador de plaquetas). O JTI em concentrações entre 20-80 µg/mL estimulou a produção de TNF por macrófagos RAW 264.7 em cultura sem provocar outros estímulos inflamatórios. Macrófagos ativados por LPS tiveram redução nas concentrações de NO, IL-6 e TNF quando tratados com JTI em concentrações entre 20-160 µg/mL. Estes dados apontam o JTI como promissor no tratamento de doenças trombóticas e inflamatórias, tendo sido eficaz como adjuvante da heparina e em promover a redução de estímulos inflamatórios de neutrófilos por vias provavelmente dependentes de MAPK, e em macrófagos por vias do fator de transcrição NF-κB. / Hemostasis is the event that mammals use to block the loss of blood and promote injury repair, and failure by overeating contributes to the spread of inflammatory and thrombotic factors. Atherosclerosis is an example of such diseases, and heparin (Hep) is a treatment drug. Patients with antithrombin deficiency have resistance to the anticoagulant effects of Hep, so researches for novel homeostatic molecules that contribute to clinical treatments are necessary. Plant protease inhibitors have been effective in controlling biological processes, such as coagulation and inflammation. The present work aimed isolate a trypsin inhibitor from the Juquiri (JTI) seed and evaluate its activity against serine proteases, and its anticoagulant and antiinflammatory potentials. JTI was isolated by affinity and ion exchange chromatography, presenting two major protein bands of 11.9 and 19.2 kDa on SDSPAGE, and was able to inhibit trypsin and chymotrypsin. In coagulation, JTI prolonged partial thromboplastin time (APTT) at concentrations greater than 2 μg/100 μL plasma, without prolonging prothrombin time (PT). Associated with Hep, JTI was able to enhance the anticoagulant effect of the drug in both tests. Without toxicity to human erythrocytes, JTI reduced 40% of elastase concentrations released by neutrophils induced by platelet activating factor (PAF). JTI at concentrations between 20-80 μg/mL stimulated TNF production by macrophages (RAW 264.7) in culture without provoking other inflammatory stimuli. LPS-activated macrophages had a reduction in NO, IL-6 and TNF productions when treated with JTI at 20-160 μg/mL concentrations. These data point to JTI as promising in the treatment of thrombotic and inflammatory diseases and have been effective as heparin adjuvant and to promote the reduction of neutrophil inflammatory stimuli likely by MAPK-dependent pathways and in macrophages by NF-κB transcription factor pathways.

Dissertação de Mestrado apresentada ao programa de Pós-Graduação em Ciências da Saúde da Universidade do Extremo Sul Catarinense para a obtenção do título de Mestre em Ciências da Saúde. / A morte tecidual decorrente das alterações isquêmicas é um processo complexo que envolve uma série de eventos celulares. A interrupção do fluxo sanguíneo compromete o suprimento de oxigênio, nutrientes e metabólitos necessários a manutenção fisiológica do tecido muscular. Dentre as causas de isquemia tecidual destacamos a trombose arterial causada pela doença aterosclerótica, responsável por alterações isquêmicas cardíacas, renais, cerebrais e periféricas. A isquemia tecidual causada pela doença aterosclerótica possui grande incidência principalmente na população ocidental atual, sendo responsável por altas taxas de morbidade e de mortalidade. Diante deste cenário, buscamos avaliar o papel do tratamento com N-acetilcisteína (NAC) em animais submetidos ao modelo de isquemia de membros inferior. Para avaliar o efeito de NAC, utilizou-se 21 ratos machos adultos, da linhagem Wistar, com peso variando entre 250-300 g, divididos em três grupos de 7 animais: (1) Sham, (2) Isquemia, (3) Isquemia tratada com NAC. Os animais foram submetidos ao processo de indução de isquemia dos membros posteriores por meio da dupla eletrocoagulação das artérias ilíaca comum e femoral comum e após o procedimento receberam uma dose oral diária de NAC de 30 mg/kg por 30 dias. Ao final dos 30 dias o músculo solear foi retirado para as avaliações de consumo de oxigênio, marcadores de autofagia (ATG16, ATG3, Beclin, LC3 A/B, marcadores de mitofagia PINK e PARKIN, e marcadores de biogênese mitocondrial NRF-1, PGC-1α e TFAM. Nos animais submetidos ao tratamento com NAC, evidenciou-se redução significativa na atividade do PGC1 α e TFAM, marcadores de biogênese mitocondrial, assim como aumento do consumo de oxigênio, em hipóxia, de animais submetidos a isquemia crônica de membros inferiores, o marcador de autofagia beclina também mostrou-se reduzido em ralação aos animais não tratados. Não houve alteração significativa na concentração dos marcadores de autofagia (LC3, ATG3 e ATG16), nos níveis de Pink e PARKIN – marcadores de mitofagia, assim como no marcador NRF1 de biogênese mitocondrial. A baixa concentração de consumo de oxigênio, em normóxia, em animais submetidos a isquemia crônica de membros inferiores não foi revertida pela NAC. Em conclusão, o tratamento com a NAC reverte o aumento do consumo de oxigênio em hipóxia, mas este efeito não parece ser secundário diretamente a modulação dos processos de autofagia, mitofagia ou biogênese mitocondrial.

Made available in DSpace on 2014-06-11T19:23:07Z (GMT). No. of bitstreams: 0 Previous issue date: 2007-02-28Bitstream added on 2014-06-13T19:49:52Z : No. of bitstreams: 1 mangerona_lr_me_botfm.pdf: 551674 bytes, checksum: fa33b5ef943c594fe040a66778a352bd (MD5) / Fundação de Amparo à Pesquisa do Estado de São Paulo (FAPESP) / Ministério da Saúde / Secretaria do Estado da Saúde de São Paulo / A perda gestacional recorrente idiopática é multifatorial, pois envolve fatores de risco clínicos e biológicos. A trombofilia pode ser definida como uma predisposição para trombose. Anormalidades na hemostasia que estão associadas com trombofilias clínicas incluem defeitos hereditários, tais como os anticoagulantes naturais Antitrombina III, Proteína S e Proteína C ou fatores de coagulação, as mutações do fator V Leiden, gene da protrombina G20210A, metilenotetrahidrofolato redutase MTHFR C677T, e defeitos adquiridos, tal como Síndrome Antifosfolípide e a Hiperhomocisteinemia. O presente trabalho foi realizado com 70 mulheres, sendo que 35 mulheres apresentavam 3 ou mais abortos recorrentes inexplicáveis, e 35 mulheres voluntárias clinicamente normais, para todas as mulheres foram feitas as investigações para os anticoagulantes naturais da coagulação e investigação para as mutações do fator V Leiden, gene da protrombina G20210A e metilenotetrahidrofolato redutase MTHFR C677T e as deficiências adquiridas. Em nosso estudo, encontramos resultados estatísticamente significantes para a síndrome do anticorpo antifosfolípide (trombofilia adquirida). Em nosso estudo observamos um grande número de defeitos trombofílicos adquiridos sendo que alguns estão em associação com a mutação do fator V Leiden e MTHFR C677T, porém mais pesquisas são necessárias para confirmar ou contestar as causas das trombofilias,e avaliar a eficiência e segurança da tromboprofilaxia em mulheres grávidas. / The idiopathic appealing gestational loss is multifactorial because it involves clinical and biological risk factors. Thrombophilia can be defined as a predisposition for thrombosis. Abnormalities in homeostasis that are associated with clinical thrombophilia include hereditary defects, such as natural anticoagulants as Antithrombin III, S Protein and C Protein or coagulation factors, mutations of V Leiden factor, gene of G20210A prothrombin, MTHFR C677T methilene redutase tetrahydropholat, and acquired defects just as Antiphospholipid Syndrome and Hyperhomocisteinemy. The present work was accomplished with 70 women, and 35 women showed 3 or more inexplicable appealing abortions, and 35 women voluntary clinically normal. For all women were made investigations for natural anticoagulants of coagulation and investigations for mutations of V Leiden factor, gene of G20210A prothrombin, MTHFR C677T methilene redutase tetrahydropholat, and acquired defects. In study we found statistically significant results for antiphospholipid antibody syndrome (acquired thrombophilia). In our study it was observed a great number of thrombophilics acquired defects, and some of then are associated to mutation of V Leiden factor and MTHFR C677T, however more researches are necessary to confirm or to answer the causes of the thrombophilia and to evaluate the efficiency and safety of the thromboprophylaxis in pregnant women.