Made available in DSpace on 2014-12-17T15:30:56Z (GMT). No. of bitstreams: 1 RodrigoAR_DISSERT.pdf: 1824764 bytes, checksum: fbfdfd8c2f743e113f6663106fda888b (MD5) Previous issue date: 2011-02-04 / In the last years, many scientific researches in implantology have been focused on alternatives that would provide higher speed and quality in the process of osseointegration. Different treatment methods can be used to modify the topographic and chemical properties of titanium surface in order to optimize the tissue-implant reactions by a positive tissue response. This study aimed to evaluate the adhesion and proliferation of mesenchymal cells from human periodontal ligament on two different titanium surfaces, using cell culture techniques. Grade II titanium discs received different surface treatments, forming two distinct groups: polished and cathodic cage plasma nitriding. Human periodontal ligament mesenchymal cells were cultured on titanium discs in 24-well cell culture plates, at a density of 2 x 104 cells per well, including wells with no discs as positive control. Data obtained by counting the cells that adhered to the titanium surfaces (polished group and cathodic cage group) and to the plastic surface (control group), in the 24, 48 and 72-hour periods after plating, were used to analyze cell adhesion and proliferation and to obtain the cell growing curve in the different groups. The data were submitted to nonparametric analysis and the differences between groups were compared by Kruskal-Wallis and Friedman statistical tests. No statistically significant differences were found in the cells counts between the groups (p>0.05). It was concluded that both treatments produced surfaces compatible with the adhesion and proliferation of human periodontal ligament mesenchymal cells / Nos ?ltimos anos, v?rias pesquisas cient?ficas em Implantodontia t?m buscado alternativas que proporcionem maior rapidez e qualidade no processo de osseointegra??o. Diferentes m?todos de tratamento podem ser utilizados para modificar as propriedades topogr?ficas e qu?micas da sua superf?cie do tit?nio, a fim de otimizar as rea??es tecido-implante atrav?s de uma resposta tecidual favor?vel. O presente trabalho teve como objetivo analisar a ades?o e prolifera??o de c?lulas mesenquimais de ligamento periodontal humano a diferentes superf?cies de tit?nio, atrav?s de t?cnicas de cultivo celular. Discos de tit?nio grau II receberam diferentes tratamentos de superf?cie, constituindo dois grupos distintos: polido e nitretado a plasma na configura??o de gaiola cat?dica. C?lulas mesenquimais obtidas do ligamento periodontal de dentes humanos h?gidos foram cultivadas sobre os discos de tit?nio em placas de cultivo de 24 po?os, na densidade de 2 x 104 c?lulas/po?o, incluindo po?os sem discos como controle positivo. Os dados obtidos das contagens das c?lulas aderidas ?s superf?cies de tit?nio (grupo polido e grupo gaiola cat?dica) e ? superf?cie pl?stica (grupo controle), nos intervalos de 24, 48 e 72 horas ap?s o plaqueamento, foram utilizados para analisar a ades?o e prolifera??o celular e obter a curva de crescimento celular nos diferentes grupos. Os dados foram submetidos a an?lises n?o param?tricas e as diferen?as entre os grupos foram comparadas pelos testes estat?sticos Kruskal-Wallis e Friedman. N?o foram encontradas diferen?as estat?sticas significativas nas contagens celulares entre os grupos estudados (p>0,05). Conclui-se que ambos os tratamentos produziram superf?cies compat?veis com ades?o e prolifera??o de c?lulas mesenquimais do ligamento periodontal humano

Submitted by Automa??o e Estat?stica (sst@bczm.ufrn.br) on 2017-03-20T22:18:32Z No. of bitstreams: 1 IsabelleCamposDeAzevedo_DISSERT.pdf: 1420654 bytes, checksum: bdfaecb12b12b0811c4b71d4ba2dfdac (MD5) / Approved for entry into archive by Arlan Eloi Leite Silva (eloihistoriador@yahoo.com.br) on 2017-03-23T21:22:49Z (GMT) No. of bitstreams: 1 IsabelleCamposDeAzevedo_DISSERT.pdf: 1420654 bytes, checksum: bdfaecb12b12b0811c4b71d4ba2dfdac (MD5) / Made available in DSpace on 2017-03-23T21:22:49Z (GMT). No. of bitstreams: 1 IsabelleCamposDeAzevedo_DISSERT.pdf: 1420654 bytes, checksum: bdfaecb12b12b0811c4b71d4ba2dfdac (MD5) Previous issue date: 2016-12-13 / Coordena??o de Aperfei?oamento de Pessoal de N?vel Superior (CAPES) / O Transplante de C?lulas-Tronco Hematopo?ticas (TCTH) ? utilizado como estrat?gia de tratamento para uma s?rie de agravos malignos e n?o malignos herdados ou adquiridos, com possibilidade de cura ou aumento da sobrevida livre da doen?a. O presente estudo objetivou caracterizar o perfil cl?nico e epidemiol?gico dos pacientes que realizaram TCTH em um servi?o de refer?ncia no estado do Rio Grande do Norte (RN), estimar a sobrevida global dos transplantados e identificar as terapias que favorecem o aumento da sobrevida global. A primeira parte ocorreu junto ao servi?o de refer?ncia do estado do RN para realiza??o do TCTH. Trata de um estudo de abordagem quantitativa, do tipo coorte retrospectiva, descritivo e anal?tico, de base hospitalar que abordou 272 pacientes que realizaram TCTH. Os dados foram coletados no Servi?o de Arquivo M?dico e Estat?stica entre os meses de mar?o e setembro de 2016 por meio dos prontu?rios registrados entre os anos de 2008 e 2015, oito anos de execu??o do procedimento. Para a an?lise descritiva foi utilizado software livre estat?stico R vers?o 3.0.0 e para o c?lculo das probabilidades de sobrevida foi empregado o m?todo Kaplan-Meier por meio do Statistic Package for Social Sciences (SPSS) vers?o 22.0. Para o c?lculo da probabilidade de associa??o entre as caracter?sticas analisadas e os ?bitos foi utilizado o teste do Qui-quadrado de tend?ncia. A segunda parte do estudo se deu pela constru??o de uma Revis?o Sistem?tica (RS) da literatura sobre as terapias que favorecem o aumento a sobrevida de pacientes que realizaram o TCTH. O Protocolo de Pesquisa foi aprovado em seus aspectos ?ticos e metodol?gicos pelo Comit? de ?tica em Pesquisa da Universidade Federal do Rio Grande do Norte, com aprova??o em 01 de julho de 2015, sob o parecer no. 1.132.720 e CAAE no. 46202715.7.0000.5537. Dos 272 prontu?rios analisados houve predom?nio do sexo masculino 52,94%, com m?dia de 38,69 anos, 18,38% eram pardos e 47,06% casados. De acordo com as caracter?sticas cl?nicas, 23,16% apresentou como diagn?stico principal o Mieloma M?ltiplo, as toxicidades mais desenvolvidas foram as gastrointestinais (93,38%), todos os pacientes receberam tratamento por meio de antineopl?sticos, o TCTH realizado com maior frequ?ncia foi o alog?nico (54,78%), com c?lulas do sangue perif?rico (77,94%) e doador aparentado (71,81%). Cerca de 9% dos pacientes realizaram mais de um TCTH, 4,04% desenvolveu a Doen?a do Enxerto Contra Hospedeiro (DECH), dentre estes 54,55% apresentou o tipo cr?nico, a causa de morte mais registrada nas declara??es de ?bito foi o choque s?ptico (48,19%) e a sobrevida global dos pacientes transplantados foi de 4,03 meses, sem diferen?a estatisticamente significativa quando comparados os pacientes de acordo com o sexo (p=0,859). Quanto aos achados da RS n?o foi poss?vel identificar um consenso para definir a melhor forma de tratamento para o favorecimento do aumento da sobrevida global nos estudos revisados. A escolha da terap?utica adequada depender? especialmente das caracter?sticas cl?nicas apresentadas pelos indiv?duos. Entretanto, de forma geral, os planos terap?uticos utilizados pelo bra?o experimento dos ensaios cl?nicos analisados obtiveram melhores respostas para o aumento da sobrevida global dos indiv?duos testados. Portanto, conclui-se que h? a necessidade de realiza??o de outros estudos do tipo multic?ntricos que apresentem os perfis epidemiol?gicos e cl?nicos do TCTH no Brasil, haja vista que estes possibilitam a problematiza??o da realidade e a publica??o de evid?ncias confi?veis para atualiza??o dos conhecimentos cient?ficos. / Hematopoietic stem cell transplantation (HSCT) is used as a treatment strategy for a series of inherited or acquired malignant and non-malignant diseases, with the possibility of cure or increase in disease-free survival. The objective of this study was to characterize the clinical and epidemiological profile of the patients who underwent HSCT at a referral service in the state of Rio Grande do Norte (RN), to estimate the overall survival of transplant recipients and to identify therapies that favor increased overall survival. The first part occurred with the reference service of the state of the RN to perform the HSCT. This is a quantitative, retrospective, descriptive and analytical, hospital-based quantitative study that addressed 272 patients who underwent HSCT. The data were collected in the Medical Record and Statistic Service between March and September 2016 through medical records recorded between the years 2008 and 2015, eight years of execution of the procedure. For the descriptive analysis, statistical free software R version 3.0.0 was used and the Kaplan-Meier method was used to calculate survival probabilities using the Statistic Package for Social Sciences (SPSS) version 22.0. The trend chi-square test was used to calculate the probability of association between the characteristics analyzed and the deaths. The second part of the study was the construction of a Systematic Review (SR) of the literature on the therapies that favor the increase in the survival of patients who underwent HSCT. The Research Protocol was approved in its ethical and methodological aspects by the Research Ethics Committee of the Federal University of Rio Grande do Norte, with approval on July 1, 2015, under no. 1,132,720 and CAAE no. 46202715.7.0000.5537. Of the 272 patient charts analyzed, there was a predominance of males 52.94%, with a mean of 38.69 years, 18.38% were brown and 47.06% married. According to the clinical characteristics, 23.16% had as main diagnosis Multiple Myeloma, the most developed toxicities were gastrointestinal (93.38%), all patients received treatment with antineoplastics, the most frequently performed HSCT was (54.78%) with peripheral blood cells (77.94%) and related donor (71.81%). About 9% of the patients had more than one HSCT, 4.04% developed the Graft versus Host Disease (GVHD), of which 54.55% presented the chronic type, the most registered cause of death in the death certificates was Septic shock (48.19%) and overall survival of transplanted patients was 4.03 months, with no statistically significant difference when patients were compared according to sex (p = 0.859). Regarding the SR findings, it was not possible to identify a consensus to define the best form of treatment to favor the increase in overall survival in the reviewed studies. The choice of appropriate therapy will depend especially on the clinical characteristics presented by individuals. However, in general, the therapeutic plans used by the experimental arm of the analyzed clinical trials obtained better answers to increase the overall survival of the individuals tested. Therefore, it is concluded that there is a need to carry out other multicenter studies that present the epidemiological and clinical profiles of HSCT in Brazil, since these make it possible to problematize reality and to publish reliable evidence to update scientific knowledge.

Submitted by Automa??o e Estat?stica (sst@bczm.ufrn.br) on 2017-07-17T13:12:44Z No. of bitstreams: 1 FernandaGinaniAntunes_TESE.pdf: 2184683 bytes, checksum: 53f3cc6dc1251b2dcdc05b91678ae4d3 (MD5) / Approved for entry into archive by Arlan Eloi Leite Silva (eloihistoriador@yahoo.com.br) on 2017-07-18T15:34:49Z (GMT) No. of bitstreams: 1 FernandaGinaniAntunes_TESE.pdf: 2184683 bytes, checksum: 53f3cc6dc1251b2dcdc05b91678ae4d3 (MD5) / Made available in DSpace on 2017-07-18T15:34:49Z (GMT). No. of bitstreams: 1 FernandaGinaniAntunes_TESE.pdf: 2184683 bytes, checksum: 53f3cc6dc1251b2dcdc05b91678ae4d3 (MD5) Previous issue date: 2017-02-23 / O laser de baixa intensidade (LBI) tem apresentado resultados positivos na prolifera??o de diversos tipos celulares in vitro. A primeira parte do trabalho avaliou o efeito do LBI na prolifera??o e viabilidade de c?lulas-tronco da polpa de dentes dec?duos humanos esfoliados (SHED). As c?lulas foram irradiadas ou n?o (controle) com um laser diodo InGaAlP (660 nm, 30 mW, modo de a??o cont?nuo) usando duas diferentes doses (0,5 J/cm2 por 16 segundos e 1,0 J/cm2 por 33 segundos) e os tr?s grupos foram estudados nos intervalos de 0, 24, 48 e 72 h. Foi observado que a dose de 1,0 J/cm2 promoveu um aumento na prolifera??o celular nos intervalos de 48 e 72 h quando comparada ao grupo controle e ? dose de 0,5 J/cm2 e a viabilidade celular n?o foi afetada pela irradia??o ao longo do experimento. Em conjunto, os dados mostraram que os par?metros do LBI utilizados (660 nm, 30 mW, 1,0 J/cm2) promoveram prolifera??o das SHEDs e mantiveram a sua viabilidade. A partir destes resultados favor?veis, a segunda parte do trabalho avaliou o efeito do LBI com os mesmos par?metros na prolifera??o de SHEDs cultivadas sobre arcabou?os nanofibrosos de PLA confeccionados pela t?cnica de eletrofia??o. Este procedimento permite a obten??o de arcabou?os tridimensionais que simulam a matriz extracelular a partir de um biomaterial com propriedades f?sicas favor?veis e baixo custo. Tr?s grupos experimentais (G1 ? n?o irradiado; G2 ? irradiado com 0,5 J/cm2; G3 ? irradiado com 1,0 J/cm2) foram analisados nos intervalos de 24, 48 e 72 h. Os resultados indicaram que o PLA n?o ? citot?xico para as SHEDs e que os grupos submetidos ? laserterapia tiveram maior prolifera??o celular quando comparados com o grupo controle n?o irradiado. Com base nos achados, evidenciou-se que as nanofibras de PLA s?o arcabou?os favor?veis para o cultivo de SHEDs e que a laserterapia estimulou a prolifera??o quando aplicada nas c?lulas cultivadas sobre este arcabou?o. Com base nos dados gerais obtidos, conclui-se que a laserterapia nos par?metros avaliados apresenta efeitos bioestimulat?rios nas SHEDs cultivadas tanto na superf?cie padr?o (pl?stico da placa de cultivo) quanto sobre arcabou?os nanoestruturados de PLA. / The low-level laser therapy (LLLT) has been shown positive results in the in vitro proliferation of several cell types. The first part of the study evaluated the effect of LLLT on the proliferation and viability of stem cells from human exfoliated deciduous teeth (SHED).Cells were irradiated or not (control) with an InGaAlP diode laser (660 nm, 30 mW, continuous action mode) using two different doses (0.5 J/cm2 for 16 seconds and 1.0 J/cm2 for 33 seconds) and the three groups were analyzed at the intervals of 0, 24, 48 and 72 h.It was observed that the dose of 1.0 J/cm2 promoted an increase in cell proliferation at the 48 and 72 h intervals when compared to the control group and the dose of 0.5 J/cm2, and that cell viability was not affected by irradiation throughout the experiment. Taken together, the data showed that the LLLT parameters (660 nm, 30 mW, 1.0 J/cm2) promoted proliferation of SHEDs and maintained their viability. Based on these favorable results, the second part of the study evaluated the effect of LLLT with the same parameters on the proliferation of SHEDs cultured on PLA nanofibrous scaffolds obtained by electrospinning. This procedure allows obtaining three-dimensional scaffolds that mimic the extracellular matrix from a biomaterial with favorable physical properties and low cost.Three experimental groups (G1 - non-irradiated; G2 - irradiated with 0.5 J/cm2; G3 - irradiated with 1.0 J/cm2) were analyzed at 24, 48 and 72 h. The results indicated that PLA is not cytotoxic to SHEDs and that the groups submitted to laser therapy had higher cell growth when compared to the nonirradiated control group. Based on these findings, it was shown that PLA nanofibers are favorable scaffolds for the cultivation of SHEDs and that laser therapy stimulated the proliferation when applied to the cells cultured on this scaffold. Based on the general data obtained, it is concluded that the laser therapy in the evaluated parameters has biostimulatory effects on the proliferation of SHEDs on both the standard surface (plastic of the culture plate) and on nanostructured PLA scaffolds.

Made available in DSpace on 2015-04-14T13:30:39Z (GMT). No. of bitstreams: 1 464699.pdf: 3304843 bytes, checksum: 1c2d736171549331a5af746072affda0 (MD5) Previous issue date: 2014-11-26 / Mesenchymal stem cells hold great promise for tissues repair and regeneration, including bone defects. The association of these cells to a scaffold which resembles bone tissue structure and physiology is a major challenge in bone tissue engineering. The lyophilized bovine bone has a structure, chemical composition and mechanical properties similar to human bone marrow and acts as an excellent osteoconductive material. This in vitro study aimed to evaluate the growth of bone marrow mononuclear cells (BMMC) on a lyophilized bovine bone scaffold (Orthogen? - Baumer S.A., BR) covered with fibronectin; to verify if different cell densities interfere with the adhesion and proliferation of these cells and to evaluate whether the combination of platelet-rich plasma (PRP) interferes with adhesion and proliferation of BMMC grown on the lyophilized bovine bone scaffold. For this purpose, bone marrow cells obtained from a Kyoto rat were grown on blocks of lyophilized bovine bone coated with fibronectin in DMEM culture medium supplemented with 10% inactivated fetal bovine serum. The Orthogen? samples were distributed into four experimental groups, in triplicate, in three 24 wells culture plates and evaluated in three periods: 72 h, 96 h and 192 h. Group 1: lyophilized bovine bone + BMMC (5 x 104 cells / well); Group 2: lyophilized bovine bone + BMMC + PRP; Group 3: lyophilized bovine bone + fibroblasts (3T3); Group 4: lyophilized bovine bone + BMMC (15 x 104 cells / well). Cultures were incubated with the intercalating agent 4',6-diamidino-2-phenylindole (DAPI) for nuclear staining in order to evaluate the cell population density, by detection with confocal microscopy, of the number of cells adhered to the lyophilized bovine bone scaffolds, after 72 h, 96 h and 192 h. The analysis of the lyophilized bovine bone surface and the morphological aspects of the cells adhered to it was performed on one sample from each group, by scanning electron microscopy (SEM). Analysis of variance (ANOVA) with two factors showed a significant interaction between the main effects evaluated: group and time, with p < 0.001. Through the results of Bonferroni statistical test, significant difference was found in the average number of nuclei in the period of culture of 96 h in group 3, and the period of culture of 192 h in group 4, which was higher than the other groups. Through SEM analysis, mononuclear cells adhered to the lyophilized bovine bone scaffold were observed only in the groups 3 and 4, in the last, progressively, being already possible to observe cell morphology differentiation and to identify spherical and fusiform cells with cytoplasmic extensions. We concluded that BMMC cultured on a lyophilized bovine bone scaffold coated with fibronectin adhered and proliferated on the bone surface. BMMC cultured at a density of 15 x 104 cells / well, adhered and proliferated on the bone surface more evidently, when compared to the BMMC cultured at a density 5 x 104 cells / well, in the three culture periods evaluated. The association of PRP to BMMC culture on a lyophilized bovine bone scaffold increased, but not with statistical significance, the adhesion and proliferation on the bone surface. / As c?lulas-tronco mesenquimais det?m grande promessa para a repara??o e regenera??o de tecidos, inclusive de defeitos ?sseos. A associa??o destas c?lulas a um arcabou?o que se assemelhe ? estrutura e ? fisiologia do tecido ?sseo ? um dos grandes desafios da engenharia tecidual ?ssea. O osso bovino liofilizado, com estrutura e composi??o qu?mica similares ao osso humano medular, al?m de possuir propriedades mec?nicas compar?veis ?s do osso humano, atua como excelente material osteocondutor. O presente estudo in vitro teve como objetivos avaliar o cultivo de c?lulas mononucleares de medula ?ssea (CMMO) sobre um arcabou?o de osso bovino liofilizado (OrthoGen? - Baumer S.A., BR) recoberto com fibronectina; verificar se diferentes densidades celulares interferem na prolifera??o e na ades?o destas c?lulas e avaliar se a associa??o de plasma rico em plaquetas (PRP) interfere na ades?o e na prolifera??o das CMMO cultivadas sobre o arcabou?o de osso bovino liofilizado. Para isso, c?lulas da medula ?ssea obtidas de um rato Kyoto foram cultivadas sobre blocos de osso bovino liofilizado, recobertos com fibronectina, em meio de cultura DMEM suplementado com 10% de soro fetal bovino inativado. As amostras do OrthoGen? foram distribu?das em quatro grupos experimentais, em triplicata, em tr?s placas de cultura com 24 po?os e avaliadas em tr?s per?odos: 72 h, 96 h e 192 h. Grupo 1: osso bovino liofilizado + CMMO (5 x 104 c?lulas/po?o); Grupo 2: osso bovino liofilizado + CMMO + PRP; Grupo 3: osso bovino liofilizado + fibroblastos (3T3); Grupo 4: osso bovino liofilizado + CMMO (15 x 104 c?lulas/po?o). As culturas foram incubadas com o agente intercalante 4',6-diamidino-2-phenylindole (DAPI) para colora??o nuclear visando ? avalia??o de densidade populacional, por meio da detec??o por microscopia confocal, do n?mero de c?lulas aderidas aos arcabou?os de osso bovino liofilizado, ap?s 72 h, 96 h e 192 h. A an?lise da superf?cie do osso bovino liofilizado e das caracter?sticas morfol?gicas das c?lulas aderidas sobre ele o foram realizadas em uma amostra de cada grupo, com o aux?lio do microsc?pio eletr?nico de varredura. A an?lise de vari?ncia (ANOVA) com dois fatores mostrou intera??o significativa entre os efeitos principais avaliados: grupo e tempo, com valor de p < 0,001. Atrav?s dos resultados do teste estat?stico de Bonferroni, verificou-se diferen?a significativa da m?dia de n?cleos no per?odo de cultura de 96 h no grupo 3, e no per?odo de cultura de 192 h no grupo 4, a qual foi maior do que as dos demais grupos. Atrav?s da an?lise por microscopia eletr?nica de varredura foram observadas CMMO aderidas ao arcabou?o de osso bovino liofilizado somente no grupo 3 e no grupo 4, neste aumentando de forma progressiva, j? sendo poss?vel evidenciar diferencia??o na morfologia celular e identificar c?lulas esf?ricas e fusiformes com prolongamentos citoplasm?ticos. Conclui-se que as CMMO cultivadas sobre um arcabou?o de osso bovino liofilizado recoberto com fibronectina aderiram e proliferaram sobre a superf?cie ?ssea. As CMMO cultivadas numa densidade de 15 x 104 c?lulas / po?o, aderiram e proliferaram sobre a superf?cie ?ssea de forma mais evidente, quando comparadas ?s CMMO cultivadas numa densidade 5 x 104 c?lulas / po?o, nos tr?s per?odos de cultura avaliados. A associa??o de PRP ? cultura de CMMO sobre um arcabou?o de osso bovino liofilizado aumentou, mas n?o de forma estatisticamente significativa, a ades?o e a prolifera??o celular sobre a superf?cie ?ssea.

Made available in DSpace on 2015-04-14T13:32:46Z (GMT). No. of bitstreams: 1 423495.pdf: 730049 bytes, checksum: 4639035476798082e647607d7fc5174d (MD5) Previous issue date: 2010-03-15 / A asfixia neonatal ? a principal causa de les?o cerebral no per?odo perinatal, tendo como conseq??ncias alta mortalidade e grande n?mero de seq?elas neurol?gicas. Atualmente, v?rias estrat?gias neuroprotetoras est?o sendo avaliadas em modelos animais na tentativa de reduzir a morte celular e melhorar os desfechos neurocomportamentais dos rec?m nascidos, mas os resultados s?o pouco expressivos. Estudos sugerem que o transplante de c?lulas-tronco limitaria a expans?o de les?es e facilitaria o reparo de tecidos lesados, podendo se constituir numa op??o terap?utica em casos de asfixia. Os pesquisadores optaram pelo uso de um modelo em su?nos rec?m-nascidos devido ao f?cil manejo, baixo custo e similaridade de peso e tamanho em rela??o aos beb?s. Objetivo: O objetivo deste estudo ? analisar de que forma c?lulas-tronco de cord?o umbilical humano, infundidas via intra-arterial entram no c?rebro, sobrevivem neste micro ambiente, e promovem a recupera??o da fun??o neurol?gica ap?s insulto hip?xico-isqu?mico, usando dois tipos diferentes de acessos arteriais. Materiais e m?todos: Foram utilizados 36 su?nos com at? dois dias de vida divididos em 4 grupos: Grupo I (Sham), Grupo II de controle, Grupo III tratado com c?lulas-tronco via art?ria umbilical, e Grupo IV com c?lulas-tronco injetadas pela art?ria car?tida comum. Para a indu??o da asfixia utilizou-se a associa??o simult?nea de procedimentos que causavam hip?xia e isquemia. As c?lulas-tronco foram obtidas a partir de sangue umbilical humano. Com 2, 7, 14 e 21 dias de vida os animais eram examinados e era aplicado um escore neurol?gico. O tecido cerebral de animais tratados com c?lulas tronco que morreram antes de completar 21 dias foi utilizado para pesquisa de PCR para DNA humano. Aos 21 dias os animais sobreviventes eram novamente levados a sala cir?rgica, anestesiados profundamente a fim de serem sacrificados e realizar-se uma perfus?o trans-card?aca com paraformalde?do para a extra??o dos enc?falos. Logo ap?s, era aplicada a t?cnica histol?gica de Nissl e realizada a estimativa de volume encef?lico para avalia??o do grau de les?o cerebral. Resultados:. Aos 21 dias houve diferen?a entre a m?dia dos escores do grupo que recebeu c?lulas pela car?tida quando comparada as dos grupos controle e o que recebeu c?lulas pela art?ria umbilical. Na pesquisa atrav?s de PCR em animais do grupo das c?lulas-tronco pela art?ria car?tida comum foi poss?vel a visualiza??o da banda correspondente ao gene &#946;-globina humano em dois dos quatro animais em diversos pontos de tecido cerebral em amostras obtidas 15 e 24 horas ap?s o procedimento de asfixia. N?o se identificou PCR positivo nas coletas realizadas 7 dias e 15 dias deste mesmo grupo bem como em nenhuma das amostras dos animais do outro grupo pesquisado. N?o houve diferen?a entre as m?dias dos volumes encef?licos nos quatro grupos. O volume cerebral e o peso final dos animais apresentaram uma correla??o positiva moderada. Conclus?o: Os resultados deste estudo sugerem que a administra??o de c?lulas-tronco de cord?o umbilical humano via art?ria car?tida comum em modelo de hip?xia-isquemia em su?nos est? associada a presen?a de PCR positivo para o gene da &#946;-grobina humana e a uma melhora na fun??o neurol?gica com 3 semanas embora sem evid?ncia de diminui??o da ?rea de les?o.

Made available in DSpace on 2015-04-14T13:32:50Z (GMT). No. of bitstreams: 1 433015.pdf: 17216538 bytes, checksum: e8444c6061514da24d7de97d9e76a1ce (MD5) Previous issue date: 2011-06-20 / Introdu??o: A les?o cerebral hip?xico-isqu?mica neonatal (HI) ? uma das maiores causas de mortalidade e morbidade neurol?gica em crian?as. O sangue do cord?o umbilical humano, rico em c?lulas-tronco adultas, ? uma fonte potencial para a terapia celular em perinatologia. No entanto, apesar do efeito ben?fico mostrado na maioria dos estudos, ainda n?o h? consenso em rela??o ? dose adequada de c?lulas-tronco de cord?o umbilical humano (CTCUH) no tratamento da HI. Objetivo: Comparar os efeitos comportamentais e morfol?gicos da administra??o intravenosa de tr?s diferentes doses de CTCUH 8 semanas ap?s a indu??o da HI em ratos rec?m-nascidos. Al?m disso, objetivou-se verificar a presen?a das c?lulas no c?rebro dos animais em estudo 7 dias ap?s o transplante. M?todos: Ratos Wistar de 7 dias de vida foram submetidos ? oclus?o da art?ria car?tida direita seguida por exposi??o a ambiente hip?xico (8% O2) por 2 h. Ap?s 24 h, os ratos foram randomizados em 5 grupos experimentais: ratos cirurgia-simulada; ratos HI que receberam ve?culo (HI + ve?culo); e ratos HI que receberam 1 x 106 (HI + dose baixa), 1 x 107 (HI + dose m?dia); or 1 x 108 (HI + dose alta) CTCUH na veia jugular. A mem?ria de orienta??o espacial foi avaliada atrav?s do labirinto aqu?tico de Morris e, posteriormente, os ratos foram sacrificados para as avalia??es morfol?gicas quantitativas. Adicionalmente, a presen?a das CTCUH no c?rebro dos animais tratados foi verificada atrav?s de t?cnicas de imunofluoresc?ncia e da an?lise de PCR. Resultados: Oito semanas ap?s o transplante, o teste do labirinto aqu?tico de Morris mostrou uma significativa recupera??o da mem?ria de orienta??o espacial nos ratos do grupo HI + dose alta quando comparados aos animais n?o tratados (P < 0,05). Al?m disso, a atrofia cerebral foi significativamente menor nos grupos HI + dose m?dia e alta quando comparados aos animais HI + ve?culo (P < 0,01; 0,001, respectivamente). CTCUH foram localizadas no c?rebro dos ratos que receberam o transplante celular 7 dias ap?s a administra??o intravenosa. Conclus?o: Os resultados mostrados neste estudo revelaram que o transplante intravenoso de CTCUH tem potencial dose-dependente para promover o reparo neuro-tecidual e a est?vel recupera??o cognitiva ap?s les?es hip?xico-isqu?micas.

Made available in DSpace on 2015-04-14T13:34:47Z (GMT). No. of bitstreams: 1 418376.pdf: 1759547 bytes, checksum: abe3efb07dc975e78ecba705690c7f76 (MD5) Previous issue date: 2009-06-16 / Introdu??o: O ?nico tratamento curativo dispon?vel atualmente para pacientes cirr?ticos ? o transplante hep?tico. Existem, entretanto, limita??es na aplica??o desta terap?utica, tornando necess?rio o desenvolvimento de novos m?todos. Evid?ncias crescentes t?m demonstrado que o transplante de c?lulas-tronco pode tornar-se uma terapia eficaz em hepatopatias cr?nicas. O objetivo deste estudo ? avaliar o potencial do transplante intraportal de c?lulas mononucleares de medula ?ssea em modelo de cirrose induzida em ratos. Metodologia: Vinte e quatro ratos Wistar f?meas, quatorze dias ap?s a ligadura de ducto biliar comum, foram randomizados para realiza??o de transplante de 1x107 c?lulas mononucleares de medula ?ssea de ratos Wistar machos ou infus?o salina atrav?s da veia porta, orientada por ecografia. No 28? dia do experimento os ratos foram sacrificados, com quantifica??o de albumina, bilirrubinas e aminotransferases s?ricas, al?m da aferi??o quantitativa da ?rea de fibrose hep?tica atrav?s do picrossirius e identifica??o das c?lulas derivadas da medula ?ssea com a realiza??o de imunohistoqu?mica com Anti-Sox 18. Resultados: Ap?s o transplante verificou-se forte repovoamento hep?tico com c?lulas da medula ?ssea do doador em 75% dos ratos. Houve redu??o significativa da ?rea de fibrose no grupo da terapia celular (P=0,036), sem altera??o nos par?metros bioqu?micos. Quando, entretanto, avaliaram-se os grupos pela incorpora??o de c?lulas da medula ?ssea, al?m da redu??o da fibrose (P=0,043) houve aumento dos n?veis s?ricos de albumina (P=0,008) no grupo que apresentou repopula??o. Conclus?o: O transplante intraportal de c?lulas mononucleares de medula ?ssea pode ser uma terap?utica eficaz para repopula??o hep?tica, redu??o da fibrose e aumento da albumina s?rica, podendo torna-se alternativa para o tratamento de cirrose em humanos.

Made available in DSpace on 2015-04-14T13:34:49Z (GMT). No. of bitstreams: 1 419004.pdf: 14090173 bytes, checksum: d314da6ac070fb61b8d51b52a825e2a1 (MD5) Previous issue date: 2009-08-31 / Introdu??o: A cirurgia atingir? todos os seus objetivos se, al?m dos demais resultados, a cicatriz da pele esteja bem, especialmente nas cirurgias pl?sticas. Estudos feitos em fetos submetidos a cirurgias in utero mostraram que, depois do nascimento, as cicatrizes eram m?nimas ou impercept?veis. H? evid?ncias de que ocorrem menor inflama??o e diminui??o do ac?mulo de col?geno na cicatriza??o fetal em compara??o com o adulto. Esses fatos instigam as possibilidades de manipular as solu??es de continuidade da pele no adulto. Cirurgi?es pl?sticos, em especial, t?m direcionado sua aten??o para a cicatriza??o cut?nea. Em suas interven??es, usam procedimentos e terapias ou medidas cosm?ticas para tornar as cicatrizes menos percept?veis. Pacientes e M?todos: Trata-se de um estudo controlado randomizado com o objetivo de avaliar a cicatriza??o da pele ap?s implante de c?lulas-tronco adultas de tecido adiposo. Foram selecionadas 18 pacientes do Servi?o de Cirurgia Pl?stica do HSL-PUCRS, considerando-se crit?rios de inclus?o e exclus?o. As c?lulas-tronco utilizadas eram aut?logas, extra?das do tecido adiposo da regi?o infraumbilical antes da realiza??o de abdominoplastia nas pacientes selecionadas. As c?lulas-tronco adultas extra?das de tecido adiposo antes da s?ntese da pele foram infiltradas na derme da ferida operat?ria, na regi?o suprap?bica. A avalia??o, no p?s-operat?rio, foi realizada com a escala de Draaijers por tr?s avaliadores m?dicos cegados e pelas pr?prias pacientes, por autoavalia??o. Foi tamb?m, realizada avalia??o fotom?trica por fotografia digital. Resultados: Das 18 pacientes operadas 17 tiveram resultados excelentes ou bons (94%) e 1 que teve deisc?ncia de sutura foi considerado mau resultado (5,5%). Outras 5 pacientes foram exclu?das por abandono no decorrer da pesquisa(27%), restando 12 (66,6%) at? o final. Na compara??o dos aspectos fotom?tricos, n?o foi detectada diferen?a estatisticamente significativa. Quando comparadas, as avalia??es das pacientes, foram considerados 6 aspectos (dor, prurido, cor, rigidez, espessura e irregularidade). Considerando todos os eventos de avalia??o ao longo do per?odo de observa??o, obteve-se 42 pontos de medidas. Nestes, foi atingido um n?vel de signific?ncia de P = 0,12 a favor da interven??o por c?lulas-tronco. Na avalia??o dos observadores m?dicos, 5 aspectos foram considerados (vasculariza??o, pigmenta??o, espessura, contratura e elasticidade). Quando foi considerada a distribui??o das avalia??es, ao longo do per?odo de observa??o, obteve-se 35 pontos de medida. Nestes, foi atingido um n?vel de signific?ncia de P = 0,003 a favor da interven??o por c?lulas-tronco. Considerando todas as avalia??es realizadas por m?dicos, pelas pacientes e a fotom?trica, foi encontrada uma diferen?a estatisticamente significativa favor?vel ao implante com c?lulas-tronco adultas do tecido adiposo, p<0,001. Conclus?o: Os resultados da cicatriza??o da pele em ferida p?s-operat?ria de abdominoplastia, ap?s implante de c?lulas-tronco adultas derivadas de tecido adiposo, mostraram-se satisfat?rios.

Made available in DSpace on 2014-12-17T15:43:54Z (GMT). No. of bitstreams: 1 DiegoMS_DISSERT.pdf: 1792102 bytes, checksum: 305ff686e7a1606e27026b528fd1d091 (MD5) Previous issue date: 2013-01-25 / Coordena??o de Aperfei?oamento de Pessoal de N?vel Superior / Low level laser irradiation (LLLI) has been used in Dentistry to promote wound healing and tissue regeneration. The literature shows a positive effect of LLLI on cell proliferation, but little is known about their effectiveness in promoting stem cells proliferation. The aim of this study was to evaluate the effect of LLLI on the proliferative rate of human periodontal ligament stem cells. Extracts of periodontal ligament were isolated from two third molars removed by surgical and/or orthodontic indication. After enzymatic digestion, the cells were grown in &#945;-MEM culture medium supplemented with antibiotics and 15% fetal bovine serum. On the third subculture, the cells were irradiated with a InGaAlP-diode laser, using two different energy densities (0,5J/cm 2 - 16 seconds and 1,0J/cm? - 33 seconds), with wavelength of 660nm and output power of 30mW. A new irradiation, using the same parameters, was performed 48h after the first. A control group (non irradiated) was kept under the same experimental culture conditions. The Trypan blue exclusion test and the mitochondrial activity of the cells measured by MTT [3-(4,5-Dimethylthiazol-2-yl)-2,5-Diphenyltetrazolium Bromide] essay were performed to assess the cell proliferation in the intervals of 0, 24, 48 e 72 h after irradiation. The data of cell counts were submitted to nonparametrical statistical tests (Kruskal-Wallis and Mann-Whitney), considering a confidence interval of 95%. DAPI (4 -6-Diamidino-2-phenylindole) staining of the cells was performed at 72h interval to evaluate possible nuclear morphological changes induced by LLLI. The results of this study show that the energy density of 1,0 J/cm? promoted greater cell proliferation compared to the other groups (control and 0,5 J/cm?) at intervals of 48 and 72h. The mitochondrial activity measured by MTT essay showed similar results to the Trypan blue cell counting test. The group irradiated with 1,0J/cm? exhibited a significantly higher MTT activity in the intervals of 48 and 72h, when compared to the group irradiated with 0,5J/cm?. No nuclear morphological change was observed in the cells from the three groups studied. It is concluded that LLLI has stimulatory effects on the proliferation of human periodontal ligament stem cells. Therefore, the use of laser irradiation in this cell type may be important to promote future advances in periodontal regeneration / O laser de baixa intensidade (LBI) tem sido utilizado na Odontologia com a finalidade de promover cicatriza??o e regenera??o dos tecidos. A literatura mostra um efeito positivo do LBI na prolifera??o celular, por?m pouco se sabe sobre a sua efic?cia na prolifera??o de c?lulas-tronco. O objetivo deste estudo foi avaliar o efeito da irradia??o do LBI na taxa proliferativa de c?lulas -tronco do ligamento periodontal humano. Extratos de ligamento periodontal foram isolados de dois terceiros molares h?gidos removidos por indica? ?o cir?rgica e/ou ortod?ntica. Ap?s a digest?o enzim?tica, as c?lulas foram cultivadas em meio de cultura &#945;-MEM suplementado com antibi?ticos e 15% de soro fetal bovino. No terceiro subcultivo, as c?lulas foram irradiadas com um laser diodo InGaAlP, utilizando-se duas diferentes densidades de energia (0,5J/cm 2 - 16 segundos e 1,0J/cm? - 33 segundos), comprimento de onda de 660nm e pot?ncia de 30mW. Uma nova irradia??o, utilizando os mesmos par?metros, foi realizada 48 h ap?s a primeira. Um grupo controle (n?o irradiado) foi mantido nas mesmas condi??es experimentais de cultivo. O m?todo de exclus?o por azul de Tripan e a atividade mitocondrial das c?lulas medida atrav?s do ensaio de MTT [brometo de 3-(4,5-dimetiltiazol-2-il)-2,5-difeniltetraz?lio], nos intervalos de 0, 24, 48 e 72 h p?s-irradia??o, foram utilizados a fim de avaliar a prolifera??o celular. Os dados das contagens celulares foram submetidos a testes estat?sticos n?o param?tricos de Kruskal-Wallis e Mann-Whitney, considerando um intervalo de confian?a de 95%. Com o objetivo de verificar poss?veis altera??es morfol?gicas nucleares induzidas pelo laser, as c?lulas foram submetidas ? marca??o com DAPI (4 -6-Diamidino-2-phenylindole) no intervalo de 72 h. Os resultados do presente estudo mostraram que a densidade de energia de 1,0 J/cm? promoveu maior prolifera??o das c?lulas em compara??o com os outros grupos (controle e laser 0,5 J/cm?) nos intervalos de 48 e 72 h. A atividade mitocondrial, medida pelo ensaio de MTT, apresentou resultados semelhantes ?s contagem celulares com azul de Tripan, com o grupo irradiado com 1,0 J/cm? exibindo uma atividade significativamente maior do MTT nos intervalos de 48 e 72 h, quando comparado com o grupo irradiado com 0,5 J/cm?. Nenhuma altera??o morfol?gica nuclear foi observada, tanto das c?lulas do grupo controle quanto nas c?lulas irradiadas. Conclui-se que o LBI apresenta efeitos estimulantes sobre a prolifera??o de c?lulas-tronco do ligamento periodontal humano. Portanto, a aplica??o da laserterapia neste tipo celular pode ser importante para futuros avan?os na regenera??o periodontal

Made available in DSpace on 2014-12-17T15:43:54Z (GMT). No. of bitstreams: 1 FernandaGA_DISSERT.pdf: 1532248 bytes, checksum: 8b25b3bf5e0afc796607cf138b0a9885 (MD5) Previous issue date: 2013-02-14 / Coordena??o de Aperfei?oamento de Pessoal de N?vel Superior / Dental pulp stem cells have been widely investigated because of their ability to differentiate into both dental and non-dental cells, with potential use in therapies involving tissue engineering. The technique of cell cryopreservation represents a viable alternative for the conservation of these cells, since it stops reversibly, in a controlled manner, all of cell biological functions in an ultra low temperature. The present study aimed to evaluate, using in vitro experiments, the influence of a cryopreservation protocol on the biologic acti vity of stem cells from human exfoliated deciduous teeth (SHED). Cells obtained from the pulp of three deciduous teeth on end-stage exfoliation or with indicated extraction were expanded in &#945;-MEM culture medium supplemented with antibiotics and 15% fetal bovine serum. At second subculture (P2), a group of cells were submitted to cryopreservation for 30 days in 10% DMSO diluted in fetal bovine serum, at -80? C, while the remind cells continued under normal conditions of cell culture. Cell proliferation was evaluated in both groups (not cryopreserved or cryopreserved) by Trypan blue stain essay at intervals of 24, 48 and 72h after plating. Cell cycle analysis of SHEDs submitted or not to the cryopreservation protocol was performed in the same intervals. Events related to cell death were studied by Annexyn V and PI expression under flow cytometry at the intervals of 24 and 72h. The presence of nuclear morphological changes was evaluated by DAPI staining at 72h interval. It was observed that both groups exhibited an upward cell proliferation curve, without considerable changes in cell viability throughout the experiment. The distribution of cell in the cell cycle phasis was consistent with cell proliferation in both groups. There were no nuclear morphological damages in the end range of the experiment. therefore, it is concluded that the proposed cryopreservation protocol is efficient for storing the studied cell type, allowing its use in future experimental studies / C?lulas-tronco da polpa dental humana t?m sido amplamente investigadas em raz?o da sua capacidade de diferenciar-se tanto em c?lulas dentais quanto n?o dentais, com potencial de utiliza??o em terapias envolvendo a engenharia de tecidos. A t?cnica de criopreserva??o celular representa uma alternativa vi?vel para a conserva??o dessas c?lulas, j? que cessa reversivelmente, de forma controlada, todas as suas fun??es biol?gicas em uma temperatura ultra-baixa. O presente estudo teve como objetivo avaliar, atrav?s de experimentos in vitro, a influ?ncia de um protocolo de criopreserva??o na atividade biol?gica de c?lulas-tronco da polpa de dentes humanos d ec?duos esfoliados (SHED). C?lulas obtidas da polpa de tr?s dentes dec?duos em est?gio final de esfolia??o ou com exodontia indicada foram expandidas em meio de cultivo &#945;-MEM suplementado com antibi?ticos e 15% de soro fetal bovino. No segundo subcultivo (P2), um grupo de c?lulas foi submetido a criopreserva??o por 30 dias em DMSO dilu?do a 10% em soro fetal bovino, a 80?C negativos, enquanto o restante seguiu em condi??es normais de cultivo. A prolifera??o celular em ambos os grupos (criopreservado e n?o criopreservado) foi avaliada atrav?s do m?todo de colora??o por azul de Tripan nos intervalos de 24, 48 e 72 horas ap?s o plaqueamento. Nestes mesmos intervalos foi realizada a an?lise do ciclo celular das SHEDs submetidas ou n?o ao protocolo de criopreserva??o. Os eventos relacionados ? morte celular foram analisados atrav?s da express?o de Anexina V e PI em citometria de fluxo, nos intervalos de 24 e 72 horas. A presen?a de altera??es morfol?gicas nucleares foi avaliada atrav?s da marca??o por DAPI no intervalo de 72 horas. Observou-se que ambos os grupos exibiram uma curva de prolifera??o celular ascendente, sem altera??es consider?veis na viabilidade celular ao longo do experimento. A distribui??o das c?lulas nas fases do ciclo celular foi coerente com c?lulas em prolifera??o nos dois grupos. N?o foram observados danos morfol?gicos nucleares no intervalo final do experimento . Deste modo, conclui-se que o protocolo de criopreserva??o proposto ? eficiente para o armazenamento do tipo celular estudado, permitindo a sua utiliza??o em futuros estudos experimentais