Made available in DSpace on 2014-06-11T19:23:42Z (GMT). No. of bitstreams: 0 Previous issue date: 2008-08-04Bitstream added on 2014-06-13T18:51:10Z : No. of bitstreams: 1 franzen_aa_me_jabo.pdf: 432317 bytes, checksum: 6e76f84b35fefc0d8afc5bb52873a43f (MD5) / Conselho Nacional de Desenvolvimento Científico e Tecnológico (CNPq) / O endotélio corneal é essencial para a manutenção da transparência da córnea, é necessário um número mínimo de células endoteliais para a manutenção desta transparência. As alterações morfológicas e morfométricas do endotélio da córnea de gatos decorrentes do avanço da idade não estão ainda compreendidas e elucidadas. Objetivou-se estudar os parâmetros morfológicos e morfométricos do endotélio da córnea de gatos de diferentes idades, utilizando-se a microscopia especular. Avaliaram-se a densidade celular, a área celular média, o pleomorfismo e o polimegatismo. Empregaram-se 18 animais da espécie felina (Felis catus - LINNAEUS, 1758), machos ou fêmeas, subdivididos em três grupos com 6 animais cada, designados por: G1 (animais com idade entre 1 a 3 meses); G2 (animais com idade entre 5 a 12 meses) e G3 (animais com idades entre 24 a 40 meses). A microscopia especular de contato revelou que com o avanço da idade a densidade celular endotelial diminuiu, a área celular média e o pleomorfismo aumentaram e o polimegatismo apresentou valores constantes nos 3 grupos estudados. / The corneal endothelium is essential to maintain the corneal transparency. Morphological and morphometric changes in the feline corneal endothelium as a function of age are little known. The purpose of this study was investigating the effect of age on endothelial morphology and morphometry in cats. The corneal endothelium was studied throught contact specular microscopy. The exam presented data as cell density, average cell area, polymegathism and pleomorphism. A total of 16 cats were evaluated in this study. The subjects were divided in three groups with six cats (Felis catus - LINNAEUS, 1758): G1 (cats with 1 to 3 months old); G2 (cats with 5 to 12 months old); G3 (cats with 24 to 40 months old). The specular microscopy revealed decrease of cell density with age. The cell area increase and pleomorphism increase as function of age. The polymegathism showed constants values on the three groups.

A preservação da integridade funcional do endotélio da córnea após procedimentos cirúrgicos intraoculares é preconizada para a manutenção da sua transparência. Dessa maneira, o conhecimento e a avaliação da forma do endotélio nas diferentes regiões da córnea é de suma importância, pois os estudos a respeito da córnea de cães limitam-se a região central. Objetivou-se avaliar a forma das células endoteliais de cães (Canis familiaris) de diferentes regiões da córnea. Foram estudados 20 olhos hígidos de cães, machos ou fêmeas de diferentes faixas etárias, separados entre olhos direito e esquerdo. A morfologia do endotélio da córnea das regiões central, superior, inferior, temporal e nasal foi avaliada após a coloração com o vermelho de alizarina. As imagens do endotélio foram obtidas usando um microscópio óptico. O percentual médio de células hexagonais na região central da córnea foi de 80,6 ±4,3% para o olho esquerdo e de 78,8 ±4,7% para o direito; na região superior foi de 78,5 ±4,4% para o olho esquerdo e de 79,4 ±4,9% para o direito; na região inferior foi de 80,2 ±6,0% para o olho esquerdo e de 80,1 ±4,4% para o direito; na região temporal foi de 79,7 ±5,0% para o olho esquerdo e de 78 ±2,9% para o olho direito e, na região nasal, foi de 79,5 ±5,7% para o olho esquerdo e de 76,7 ±6,0% para o direito. O percentual médio de células com cinco lados, na região central da córnea, olho esquerdo, foi 11,9 ±3,0% e para o direito 13,2 ±3,8%; na região superior, no olho esquerdo, 13,6 ±1,8% e para o direito, 13 ±4,1%; na região inferior foi de 11,7 ±3,1% para o olho esquerdo e de 11,7 ±3,5% para o direito; na região temporal, olho esquerdo, 11,9 ±3,8% e para o direito 13,2 ±2,3% e na região nasal, olho esquerdo, 12,6 ±13,1% e, para o direito, 14,1 ±4,0%. O percentual médio de células com sete lados, na região central, olho esquerdo, foi 7,5 ±2,3% e para o direito 8 ±2,2%; na região superior, no olho esquerdo, 7,9 ±4% e para o direito, 7,6 ±2,3%; na região inferior foi de 7,9 ±3,4% para o olho esquerdo e de 8,2 ±3,2% para o direito; na região temporal, olho esquerdo, 8,4 ±2,0%, para o direito 8,8 ±1,3% e na região nasal, olho esquerdo, 8,6 ±2,6% e para o direito 9,2 ±2,9%. Os dados foram submetidos à análise de variância de fator duplo com medidas repetidas. Não houve diferença com relação a forma das células do endotélio nas diferentes regiões da córnea de cães. / The preservation of the functional integrity of the corneal endothelium after intraocular surgical procedures is recommended to maintain its transparency. Thus, assessment and knowledge of corneal endothelial morphology in dog has great importance, because the studies are limited the central areas of the cornea of dogs. This study aimed to evaluate the endothelial cells shape of dogs (Canis familiaris) in to different corneal areas. Twenty healthy dogs eyes were studied, males and females of different age groups, separated between right and left eyes. The corneal endothelium morphology of the central, superior, inferior, temporal and nasal areas was assessed by alizarin red staining 0.2%. The endothelium images were obtained using an optic microscope. The average percentage of hexagonal cells in the central area of the cornea, was 80.6 ±4.3% for the left eye and 78.8 ±4.7% for the right; in the superior area was 78.5 ±4.4% for the left eye and 79.4 ±4.9% for the right; in the inferior area was 80.2 ±6.0% for the left eye and 80.1 ±4.4% for the right; in the temporal area was 79.7 ±5.0% for the left eye and 78 ±2.9% for the right eye and nasal area was 79.5 ±5.7% for the left eye and 767 ±6.0% for the right. The average percentage of cells with five sides, in the central area of the cornea, left eye, was 11.9 ±3.0% and to the right 13.2 ±3.8%; in the superior area in the left eye, 13.6 ±1.8% and to the right, 13 ±4.1%; in the inferior area was 11.7 ±3.1% for the left eye and 11.7 ±3.5% for the right; in the temporal area, left eye, 11.9 ±3.8% and to the right 13.2 ±2.3%; in the nasal area, left eye, 12.6 ±13.1% and 14.1 ±4.0% right. The average percentage of cells with seven sides, central, left eye, was 7.5 ±2.3% and to the right 8 ±2.2%; in the superior area in the left eye, 7.9 ±4% and to the right, 7.6 ±2.3%; in the inferior area was 7.9 ±3.4% for the left eye and 8.2 ±3.2% for the right; in the temporal area, left eye, 8.4 ±2.0% and 8.8 ±1.3% right; in the nasal area, left eye, 8.6 ± 2.6% and to the right 9.2 ±2.9%. The data were subjected to two-way analysis of variance. There was no difference in endothelial cells shape in the different corneal areas of dog.

Um sistema para auxílio à cirurgias oftálmicas foi desenvolvido com o objetivo de se minimizar o astigmatismo induzido devido ao formato irregular da córnea pelo ato de sutura. O sistema projeta 48 pontos de luz no filme lacrimal da córnea, provenientes de LEDs, dispostos num diâmetro precisamente circular. O deslocamento, a dimensão e a deformação da imagem refletida destes pontos luminosos são analisados proporcionando a ceratometria e a circularidade da sutura. O intervalo de medidas do sistema é de 32D - 55D (astigmatismos até 23D podem ser medidos) e um sistema para calibração do sistema foi projetado para manter o sistema calibrado. Esferas de aço de precisão foram submetidas ao sistema e uma correlação de 99% entre as medidas obtidas e os valores dos fabricantes foi obtida. O sistema foi testado em 13 voluntários para avaliação de sua aplicabilidade clínica e comparado a um ceratômetro comercial Topcon OM-4. Os fatores de correlação entre o sistema desenvolvido e o Topcon OM-4, para o astigmatismo, foi de \'R POT.2\' = 0,92, e em relação ao eixo, o fator é \'R POT.2\' = 0,99. O sistema indica que o cirurgião deve obter uma circularidade \'> OU =\' 98% para que astigmatismos acima de 3D não sejam induzidos na sutura. / A system for ophthalmic surgery support has been developed in order to minimize the residual astigmatism due to the induced irregular shape of the cornea by corneal suture. The system projects 48 light spots, from LEDs, displayed in a precise circle at the lachrymal film of the examined cornea. The displacement, the size and deformation of the reflected image of these light spots are analyzed providing the keratometry and the circularity of the suture. Measurements in the range of 32D - 55D (up to 23D of astigmatism are possible to be obtained) and a self-calibration system has been designed in order to keep the system calibrated. Steel precision spheres have been submitted to the system and the results show 99% of correlation with the fabricant\'s nominal values. The system has been tested in 13 persons in order to evaluate its clinical applicability and has been compared to a commercial keratometer Topcon OM-4. The correlation factors are 0,92 for the astigmatism and 0.99 for the associated axis. The system indicates that the surgeon should achieve circularity \'> OR =\' 98% in order to do not induce astigmatisms over 3D.

Foi desenvolvido um sistema inédito para diagnóstico e acompanhamento de Doenças Oculares Externas, particularmente de úlceras de córnea e que foi implementado num Hospital-Escola para uso diário. As úlceras de córnea, até então, eram avaliadas de forma subjetiva e qualitativa, estimando-se a extensão da área afetada. O indicativo de evolução do quadro clínico é basicamente a alteração da área afetada. Com o intuito de se poder avaliar a evolução desta patologia de forma quantitativa e padronizada, foi desenvolvido o presente sistema. O sistema consistiu em acoplar a uma Lâmpada de Fenda (biomicroscópio ocular) um divisor de feixes e um sistema ótico, no caminho ótico onde os feixes da Lâmpada de Fenda são paralelos, de forma que a imagem proporcionada nas oculares da Lâmpada de Fenda é simultaneamente proporcionada num detector do tipo CCD. Esta câmera CCD foi acoplada a um micro computador do tipo PC, via uma interface comercial, e as imagens são disponibilizadas num monitor. Um software dedicado foi desenvolvido e possui as seguintes funções e características: reconhecimento automático e medidas das áreas de ulceração, opcionalmente, medidas interativas de áreas quaisquer, medidas lineares interativas de comprimentos quaisquer e um amplo banco de dados dedicado a este setor da Oftalmologia. Ainda, todos os comandos podem ser realizados através do teclado ou do mouse, particularmente o de capturar imagem também pode ser acionado através de um pedal desenvolvido especialmente para o sistema. O sistema apresentou uma precisão de 5% (o método convencional, para medidas de úlceras perfeitamente elípticas proporcionava uma precisão de no máximo 13%). O protótipo do sistema está em uso no Hospital das Clínicas de Ribeirão Preto (ambulatório de Oftalmologia, setor de Doenças Oculares Externas), tem demonstrado excelente desempenho e estudos clínicos, agora proporcionados pela automação do sistema, começam a ser realizados / A system for diagnostic and follow up of External Ocular Diseases has been developed, particularly for Corneal Ulcers, and has been implemented in a Hospital-School for daily use. The corneal ulcers, until then, have been evaluated in a subjective and qualitative way, just by estimating the affected area. Its clinical evolution is indicated by the increasing/decreasing of the affected area. In order to evaluate quantitatively and standardize the evolution of this pathology we have developed the present system. The system consisted in attaching to a Slit Lamp (ocular biomicroscope) a beam splitter in the parallel rays optical path and an optical system, in order to provide simultaneously the ocular images to the Slit Lamp ocular lenses and to a CCD camera. The camera has been attached to a PC, via a commercial frame grabber and the images are displayed in a monitor. A dedicated software has been developed and it has the following functions and features: corneal ulcers self recognizing and area measurements, optional interactive area and extension measurement of any image and a data bank dedicated for this sector of the Ophthalmology. Also all the commands are available for keyboard or mouse clicking. Particularly, the image capturing command can also be turned ON/OFF by clicking a pedal, which was specially developed for the system. The precision of the measurements of the system is 5% (the conventional method, for perfect elliptical ulcer areas provides a maximum precision of 13%). The system\'s prototype is being used in the Hospital das Clínicas de Ribeirão Preto and it has presented excellent performance. Clinical studies are now being able to be done due to the automation of the clinical evaluations

A preservação da integridade funcional do endotélio da córnea após procedimentos cirúrgicos intraoculares é preconizada para a manutenção da sua transparência. Dessa maneira, o conhecimento e a avaliação da forma do endotélio nas diferentes regiões da córnea é de suma importância, pois os estudos a respeito da córnea de cães limitam-se a região central. Objetivou-se avaliar a forma das células endoteliais de cães (Canis familiaris) de diferentes regiões da córnea. Foram estudados 20 olhos hígidos de cães, machos ou fêmeas de diferentes faixas etárias, separados entre olhos direito e esquerdo. A morfologia do endotélio da córnea das regiões central, superior, inferior, temporal e nasal foi avaliada após a coloração com o vermelho de alizarina. As imagens do endotélio foram obtidas usando um microscópio óptico. O percentual médio de células hexagonais na região central da córnea foi de 80,6 ±4,3% para o olho esquerdo e de 78,8 ±4,7% para o direito; na região superior foi de 78,5 ±4,4% para o olho esquerdo e de 79,4 ±4,9% para o direito; na região inferior foi de 80,2 ±6,0% para o olho esquerdo e de 80,1 ±4,4% para o direito; na região temporal foi de 79,7 ±5,0% para o olho esquerdo e de 78 ±2,9% para o olho direito e, na região nasal, foi de 79,5 ±5,7% para o olho esquerdo e de 76,7 ±6,0% para o direito. O percentual médio de células com cinco lados, na região central da córnea, olho esquerdo, foi 11,9 ±3,0% e para o direito 13,2 ±3,8%; na região superior, no olho esquerdo, 13,6 ±1,8% e para o direito, 13 ±4,1%; na região inferior foi de 11,7 ±3,1% para o olho esquerdo e de 11,7 ±3,5% para o direito; na região temporal, olho esquerdo, 11,9 ±3,8% e para o direito 13,2 ±2,3% e na região nasal, olho esquerdo, 12,6 ±13,1% e, para o direito, 14,1 ±4,0%. O percentual médio de células com sete lados, na região central, olho esquerdo, foi 7,5 ±2,3% e para o direito 8 ±2,2%; na região superior, no olho esquerdo, 7,9 ±4% e para o direito, 7,6 ±2,3%; na região inferior foi de 7,9 ±3,4% para o olho esquerdo e de 8,2 ±3,2% para o direito; na região temporal, olho esquerdo, 8,4 ±2,0%, para o direito 8,8 ±1,3% e na região nasal, olho esquerdo, 8,6 ±2,6% e para o direito 9,2 ±2,9%. Os dados foram submetidos à análise de variância de fator duplo com medidas repetidas. Não houve diferença com relação a forma das células do endotélio nas diferentes regiões da córnea de cães. / The preservation of the functional integrity of the corneal endothelium after intraocular surgical procedures is recommended to maintain its transparency. Thus, assessment and knowledge of corneal endothelial morphology in dog has great importance, because the studies are limited the central areas of the cornea of dogs. This study aimed to evaluate the endothelial cells shape of dogs (Canis familiaris) in to different corneal areas. Twenty healthy dogs eyes were studied, males and females of different age groups, separated between right and left eyes. The corneal endothelium morphology of the central, superior, inferior, temporal and nasal areas was assessed by alizarin red staining 0.2%. The endothelium images were obtained using an optic microscope. The average percentage of hexagonal cells in the central area of the cornea, was 80.6 ±4.3% for the left eye and 78.8 ±4.7% for the right; in the superior area was 78.5 ±4.4% for the left eye and 79.4 ±4.9% for the right; in the inferior area was 80.2 ±6.0% for the left eye and 80.1 ±4.4% for the right; in the temporal area was 79.7 ±5.0% for the left eye and 78 ±2.9% for the right eye and nasal area was 79.5 ±5.7% for the left eye and 767 ±6.0% for the right. The average percentage of cells with five sides, in the central area of the cornea, left eye, was 11.9 ±3.0% and to the right 13.2 ±3.8%; in the superior area in the left eye, 13.6 ±1.8% and to the right, 13 ±4.1%; in the inferior area was 11.7 ±3.1% for the left eye and 11.7 ±3.5% for the right; in the temporal area, left eye, 11.9 ±3.8% and to the right 13.2 ±2.3%; in the nasal area, left eye, 12.6 ±13.1% and 14.1 ±4.0% right. The average percentage of cells with seven sides, central, left eye, was 7.5 ±2.3% and to the right 8 ±2.2%; in the superior area in the left eye, 7.9 ±4% and to the right, 7.6 ±2.3%; in the inferior area was 7.9 ±3.4% for the left eye and 8.2 ±3.2% for the right; in the temporal area, left eye, 8.4 ±2.0% and 8.8 ±1.3% right; in the nasal area, left eye, 8.6 ± 2.6% and to the right 9.2 ±2.9%. The data were subjected to two-way analysis of variance. There was no difference in endothelial cells shape in the different corneal areas of dog.

Submitted by (edna.saturno@ufrpe.br) on 2016-10-06T16:32:53Z No. of bitstreams: 1 Fabio Luiz Silva Pina.pdf: 1678514 bytes, checksum: add96ec2da4d0e8edf4922a29af1bb8c (MD5) / Made available in DSpace on 2016-10-06T16:32:53Z (GMT). No. of bitstreams: 1 Fabio Luiz Silva Pina.pdf: 1678514 bytes, checksum: add96ec2da4d0e8edf4922a29af1bb8c (MD5) Previous issue date: 2007-02-05 / Corneal endotelium cells present the important function of osmotic pump and barrier, thus keeping it transparent. The loss of these cells, either by any reason, becomes the cornea cloudy, influencing negativety in the visual capacity of the individual. For this fact, the conservation of corneas for transplant ends has evolved sufficiently to the long one of the years. Had to the characteristics desirable physicist-chemistries and the low cost of the coconut water, the aim of this work was to investigate the possibility of the use of the coconut water as nutritious medium in corneal preservation medium. A total of 9 cats, without no corneal pathology in course, had been sacrified. One cornea of each pair was evaluated immediately, being the other evaluated after preservation on the medium with coconut on days 3, 7 and 14. The corneas had been processed for optic microscopy. The corneas had become impracticable since day 3 of conservation, having presented morphologic alterations, signals of cellular death and estromal thickness increased, indicating important edema. We conclude that the coconut water did not serve as nutritious medium for corneal storage medium of domestic felines, however the corneas, due to absence of contamination of the medium, can be used in tectonic transplants and lamellar keratoplasty. / As células do endotélio corneal apresentam a importante função de bomba osmótica e barreira, mantendo assim a córnea transparente. A perda destas células, seja por qualquer motivo, tornam a córnea opaca, influenciando negativamente na capacidade visual do indivíduo. Por este fato, a conservação de córneas para fins de transplante tem evoluído bastante ao longo dos anos. Devido às características físico-químicas desejáveis e ao baixo custo da água de coco, o objetivo deste trabalho foi investigar a possibilidade do uso da água de coco como meio nutritivo em conservantes de córnea. Um total de 9 gatos, sem nenhuma patologia corneal em curso, foram eutanasiados. Uma córnea de cada par foi avaliada imediatamente, sendo a outra avaliada após a preservação no meio com água de coco nos dias 3, 7 e 14. As córneas foram processadas para microscopia óptica. As córneas tornaram-se inviáveis a partir do dia 3 de conservação, apresentando alterações morfológicas, sinais de morte celular e espessura estromal aumentada, indicando edema importante. Concluiu-se que a água de coco não serviu como meio nutritivo para conservantes de córneas de felinos domésticos, porém as córneas, devido à ausência de contaminação do meio, podem ser utilizadas em transplantes tectônicos e ceratoplastias lamelares.

The situation of corneal transplants in Brazil resembles that of other countries, where it is observed an insufficient offer of cornea to meet the need of carrying out transplantations. This study aims to characterize cornea donors and patients who underwent transplantation, evaluating epidemiological data, indications from surgery, presence of rejection and length of waiting list. Method: This is an observational, transversal and descriptive study, where data were collected from all donors and receptors charts, filed at the Notification, Catchment and Distribution Center of Sergipe, from January 2000 to April 2009, and these data were summarized as average and standard deviation or medians and percentiles for the quantitative variables, while for categorical variables it were used simple frequency, percentages and trust interval for 95% when necessary. Results: It was observed a total of 272 donors (544 corneas), from which 415 corneas were recovered for transplantation, and that was the total amount of receptors surveyed. The average donors age was 39.4 ± 15.9 years, with male predominance (68%) and the most frequent cause of death was trauma (56%). There was a recovery of 76.2% from the donated corneas, 7.7% among the total donations tested positive for infectious diseases, which prompted its discard. Optsol® was the solution most used for preservation (56%). Among cornea receptors there was a predominance of transplant indication for bullous keratopathy (37.3%), followed by scarring (23%) and keratoconus (18.3%). The average receptors age was 51.4 ± 25.0 years, 51% males and 49% females. The percentage of rejection was 8.7%. The median waiting time for transplantation was 9.9, months, the 25 percentile was 2.2 months and the 75 percentile was 38.6 months. Conclusion: Cornea donors were predominantly young males, victims of trauma, mostly resulting in good quality of the cornea with a high recovery of these donations. The rejection level was considered low. Waiting time for transplantation was considered high, and there has been a large increase in the waiting list, that has tripled over almost 10 years. The main indication for transplant surgery was pseudophakic bullous keratopathy. / A situação dos transplantes de córnea no Brasil se assemelha a de outros países, onde se observa uma oferta de córnea insuficiente para suprir a necessidade de realização dos transplantes. O presente estudo tem como Objetivo: a caracterização dos doadores de córnea e dos pacientes que se submeteram ao transplantes, avaliando dados epidemiológicos, indicações da cirurgia, presença de rejeição, tempo de lista de espera. Método: Trata-se de um estudo observacional, transversal, descritivo, onde foram coletados dados dos prontuários de todos os doadores e receptores de córneas, arquivados na Central de Notificação, Captação e Distribuição de Órgãos de Sergipe, no período de janeiro de 2000 a abril de 2009, sendo esses dados sumarizados como média e desvio padrão ou medianas e percentis para as variáveis quantitativas, enquanto para as categóricas utilizaram-se freqüência simples, percentagens e intervalo de confiança para 95%, quando necessário. Resultados: Foi observado um total de 272 doadores (544 córneas), com um número total de 415 córneas aproveitadas para transplante, e esse foi o número total de receptores pesquisados. A média de idade dos doadores foi de 39,4 ± 15,9 anos, com predomínio do sexo masculino com 68% (185/272) e a causa morte mais freqüente foi o trauma com 56% (152/272). Houve um aproveitamento de 79% (429/544) das córneas doadas, e apenas 415 transplantes foram elegíveis para a análise no presente estudo, de acordo com os critérios de inclusão e exclusão. Verificou-se uma positividade para doenças infecciosas entre o total das doações de 7,7% (44/544), que motivou o descarte das mesmas, além de 13% (70/544), descartadas por baixa qualidade do tecido. A solução mais utilizada para preservação foi o Optsol® (56%). Entre os receptores de córneas houve um predomínio da indicação de transplantes pela ceratopatia bolhosa (37,3%), seguida do leucoma (23,%) e posteriormente o ceratocone (18,3%). A idade média dos receptores foi de 51,4 ± 25,0 anos, sendo o percentual de 51% para o sexo masculino e 49% para o sexo feminino. O percentual de rejeição foi de 8,7%. Quanto ao tempo de espera pelo transplante, a mediana foi 9,9, meses, o percentil 25 foi 2,2 meses e o percentil 75 foi 38,6 meses., além de observa-se um aumento do número de pacientes na fila de espera, que passou de 89 em 2000, a 325, ao final de 2009. Conclusão: Os doadores de córnea foram predominantemente homens, jovens, vítimas de trauma, em sua maioria, implicando em boa qualidade da córnea, com um alto aproveitamento destas doações. O nível de rejeição foi considerado baixo o tempo de espera pelo transplante foi considerado alto, além de se verificar um grande aumento da fila de espera, que triplicou ao longo de quase 10 anos. A principal indicação para a cirurgia de transplante foi a ceratopatia bolhosa do pseudofácico,.

Submitted by Mario BC (mario@bc.ufrpe.br) on 2018-03-08T13:34:35Z No. of bitstreams: 1 Sergio Alves do Nascimento.pdf: 1211419 bytes, checksum: 3bc943600caeb78440095073154d36ca (MD5) / Made available in DSpace on 2018-03-08T13:34:35Z (GMT). No. of bitstreams: 1 Sergio Alves do Nascimento.pdf: 1211419 bytes, checksum: 3bc943600caeb78440095073154d36ca (MD5) Previous issue date: 2016-02-23 / Conselho Nacional de Pesquisa e Desenvolvimento Científico e Tecnológico - CNPq / The objective of this work is to develop serological tests (AGID and ELISA -ELISAi) using antigens of the virus Arthritis Encephalitis Goat (CAEV) obtained from a goat corneal cell line (CorFC cells) grown with 0.1% FBS. For AGID antigens were obtained from cells cultured in MEM, DMEM / F12 and RPMI 1640. Of the 163 tested sera samples (28 positive and 135 negative), 28 (17.17%) were positive for MEM and Ag Ag DMEM / 12 and 29 (17.79%) to Ag is RPMI 1640. Comparing the results obtained with three Ag was observed almost perfect agreement kappa adjusted (0.98 to 1.00). The Ag RPMI 1640 antigen, which showed better quality of precipitation lines in AGID and best performance was evaluated in comparison to a commercial Ag (Kit for the diagnosis of CAE - AGID; Unika biotech, Recife). The test of 797 sera with commercial Ag showed 216 positive and 581 negative; RPMI 1640 with Ag were observed 225 positive and 572 negative, corresponding to sensitivity (Se) and specificity (Es) for 100% and 98.45%, respectively. Globally, there has been adjusted (kappa = 0.97) between the almost perfect results with both Ag. For ELISAi empregandos native viral antigens were obtained by a simple process (clarification, dialysis and the treatment with triton X-100) to from cells cultured in RPMI 1640. After standardization were made the ELISAi performance evaluations. To assess the repeatability of the observed ELISAi RPMI CV entreplacas 4.4 and 17.3 and between 18.4 and 5.1 days for negative and positive sera. The results of 722 sera tested with the kits to diagnose LVPR AGID / commercial ELISAi (Unika biotech, Recife) showed 166 positive and 556 negative; with RPMI were observed ELISAi 171 positive and 551 negative, and if Sp corresponding to about 97.59% and 98.38%, respectively, with agreement adjusted kappa 0.95, considered almost perfect. These results demonstrate that one can establish an AGID an ELISA for highly sensitive and specific diagnosis of LVPR using a simplified model for obtaining of antigens, employing CorFC cells with low levels of FBS. Depending on the cell type and medium used can be produced LVPR antigens with low FCS content, which agrees with the animal welfare, represents a reduction of input costs and protein purification processes. / Objetivou-se com este trabalho desenvolver testes sorológicos (IDGA e ELISA indireto -ELISAi) utilizando antígenos do vírus da Artrite Encefalite Caprina (CAEV) obtidos a partir de uma linhagem de células de córnea caprina (células CorFC) cultivada com 0,1% de SFB. Para a IDGA foram obtidos antígenos a partir de células cultivadas em MEM, DMEM/F12 e RPMI 1640. Das 163 amostras de soros testados (28 positivas e 135 negativas), 28 (17,17%) apresentaram resultados positivos para o Ag MEM e Ag DMEM/12 e 29 (17,79%) para o Ag RPMI 1640. Comparando-se os resultados obtidos com os três Ag foi observada concordância ajustada de kappa quase perfeita (0,98 a 1,00). O antígeno Ag RPMI 1640, que apresentou melhor qualidade das linhas de precipitação na IDGA e melhor rendimento foi avaliado comparativamente com um Ag comercial (Kit para diagnóstico de CAE – IDGA; Unika biotech, Recife). O teste dos 797 soros com o Ag comercial apresentou 216 positivos e 581 negativos; com o Ag RPMI 1640 foram observados 225 resultados positivos e 572 negativos, correspondendo a sensibilidade (Se) e especificidade (Es) relativas de 100% e 98,45%, respectivamente. De forma global, houve uma concordância ajustada (kappa = 0,97) quase perfeita entre os resultados com ambos Ag. Para o ELISAi foram empregandos antígenos virais nativos obtidos por um processo simples (clarificação, diálise e tratamento com triton X-100) a partir de células cultivadas em meio RPMI 1640. Após a padronização foram feitas as avaliações de desempenho do ELISAi. Ao avaliar a repetibilidade do ELISAi RPMI observou-se o CV entreplacas de 4,4 e 17,3 e entre dias de 5,1 e 18,4, para soros negativo e positivo, respectivamente. Os resultados dos 722 soros testados com os Kits para diagnóstico de LVPR IDGA/ELISAi comerciais (Unika biotech, Recife) apresentou 166 positivos e 556 negativos; com o ELISAi RPMI foram observados 171 resultados positivos e 551 negativos, correspondendo a Se e Sp relativas de 97,59% e 98,38%, respectivamente, com concordância ajustada kappa de 0,95, considerada quase perfeita. Esses resultados demonstram que pode-se estabelecer uma IDGA e um ELISA para diagnostico de LVPR altamente sensíveis e específicos utilizando-se um modelo simplificado para obtenção de antígenos, empregando células CorFC cultivadas com baixo teor de SFB. Dependendo do tipo de célula e meio utilizado pode-se produzir antígenos de LVPR com baixo teor de SFB, que corrobora com o bem estar animal, representa redução de custos com insumos e nos processos de purificação de proteínas.

Orientador: Vital Paulino Costa / Tese (doutorado) - Universidade Estadual de Campinas, Faculdade de Ciências Médicas / Made available in DSpace on 2018-08-17T05:07:13Z (GMT). No. of bitstreams: 1 Lupinacci_AlvaroPedrosodeCarvalho_D.pdf: 8725508 bytes, checksum: 4f3d11456e7491230be37c721f4fe7a4 (MD5) Previous issue date: 2010 / Resumo: O presente estudo teve como objetivo medir a espessura corneana central (ECC) de indivíduos com catarata congênita e afacia cirúrgica após extração de catarata congênita. Indivíduos com catarata congênita ou afacia cirúrgica após cirurgia de catarata congênita foram recrutados prospectivamente e divididos em quatro grupos: catarata unilateral (n=14), catarata bilateral (n=18), afacia unilateral (n=32) e afacia bilateral (n=44). Um grupo controle foi selecionado a partir de indivíduos normais pareados por idade, gênero e etnia. Paquimetria ultrassônica foi realizada pelo mesmo observador com o aparelho Micropach 200P+ (Sonomed, Lake Success, Nova Iorque, EUA), após anestesia tópica com uma gota de oxibuprocaína 0,4%. Registrou-se a média de cinco medidas para cada olho. A ECC média do grupo controle (513,57±23,32µm) não foi significativamente diferente da média dos olhos contralaterais normais (526,36±38,52µm) (p=0,747) e dos olhos com catarata (527,00±36,03µm) (p=0,252) do grupo catarata unilateral. A ECC média de ambos os olhos do grupo catarata bilateral (olho direito: 547,69±34,17µm; olho esquerdo: 545,88±36,69µm) foi maior que a observada no grupo controle (olho direito: 516,06±18,66µm; olho esquerdo: 515,53±17,43µm) (p<0,01). A média da ECC dos olhos afácicos (597,25±44,14µm) no grupo afacia unilateral foi significativamente maior que as observadas nos olhos contralaterais saudáveis (523,47±21,42µm) e no grupo controle (511,81±18,81µm) (p<0,001). Ambos os olhos do grupo afacia bilateral apresentaram ECC média (olho direito: 615,75±61,03µm; olho esquerdo: 618,91±61,86µm) significativamente maior que no grupo controle (olho direito: 515,59±18,80µm; olho esquerdo: 515,86±18,51µm) (p<0,001). Observou-se ECC média significativamente maior nos olhos afácicos (uni e bilaterais) que nos olhos com catarata (uni e bilaterais) (p<0,001). Olhos afácicos após extração de catarata congênita apresentam córneas mais espessas que olhos fácicos normais. Olhos afácicos após cirurgia de catarata congênita também apresentam córneas mais espessas que olhos com catarata congênita, sugerindo que o aumento da espessura corneana central ocorra após a cirurgia / Abstract: This study aimed to measure the central corneal thickness (CCT) of patients with congenital cataract and surgical aphakia post congenital cataract extraction. Individuals with congenital cataract or aphakia after surgery for congenital cataract were recruited prospectively and divided into four groups: unilateral cataract (n=14), bilateral cataracts (n=18), unilateral aphakia (n=32) and bilateral aphakia (n=44). A control group was selected from healthy individuals matched for age, gender and ethnicity. Ultrasonic pachymetry was performed by the same observer with the Micropach 200P+ pachymeter (Sonomed, Lake Success, New York, USA) after topical anesthesia with a drop of oxybuprocaine 0.4%. The average of five measurements for each eye was recorded for the analysis. The mean CCT of the control group (513.57±23.32µm) was not significantly different from the contralateral normal eyes (526.36±38.52µm) (p=0.747) and eyes with cataract (527.00±36.03µm) (p=0.252) of the unilateral cataract group. The mean CCTs of both eyes in the bilateral cataract group (right eye: 547.69±34.17µm; left eye: 545.88 ± 36.69µm) were significantly thicker than the observed in the control group (right eye: 516.06±18.66µm; left eye: 515.53±17.43µm) (p<0.01). The mean CCT of aphakic eyes (597.25±44.14µm) in the unilateral aphakia group was significantly thicker than those observed in healthy contralateral eyes (523.47±21.42µm) and the control group (511.81±18.81µm) (p<0.001). Both eyes of the bilateral aphakia group had mean CCT (right eye: 615.75±61.03µm; left eye: 618.91±61.86µm) significantly thicker than the control group (right eye: 515.59±18.80µm; left eye: 515.86±18.51µm) (p<0.001). The mean CCT was significantly thicker in aphakic eyes (unilateral and bilateral) than in eyes with cataract (unilateral and bilateral) (p<0.001). Aphakic eyes after congenital cataract extraction have thicker corneas than normal phakic eyes and eyes with congenital cataract. This suggests that increased central corneal thickness occurs after congenital cataract extraction surgery / Doutorado / Oftalmologia / Doutor em Ciências Médicas

Chemical eye burns are among the most frequently reported causes of ocular damage. These lesions may range from mild conjunctival or corneal unilateral epithelial damage to damage to the conjunctiva and cornea with risk of vision loss. Knowing the importance of new treatment proposals for this affection, the objective was to investigate the potential of membranes based on gelatin / usnic acid / liposomes to promote the healing of corneal burns using animal model. Analysis of the biological activity of gelatin membranes containing usnic acid/liposomes was performed by means of the chorioallantoic membrane (CAM) assay where Gallus domesticus and Ross lineage eggs. For evaluation of ocular tolerance of the gelatin membrane, the Chicken Eggs Test - Coronary Membrane Test (HET-CAM). For the study in animals, 13 female New Zealand rabbits, aged 3 months and weighing 2 kg, were used. The chemical lesion on the corneas of the animals was performed by exposure to absolute ethanol for 30 seconds. The animals were divided into two study groups: group with lesion treated with gelatin membrane containing usnic acid / liposomes (n = 7) and group with lesion treated with gelatin membrane without acidic / liposomes (n = 6). To evaluate the healing, the injured area was demarcated with 1 (one) drop of eye drops fluorescein, later realized the registry. In order to identify dead cells in the cornea, 1 drop of Bengal Rose eye drops (1.0%) was instilled in the eye to be evaluated, after being topically anesthetized, after 1 minute the animals were exposed to white light and then performed the records. Hematoxylin-eosin staining for standard histopathological evaluation and Gomori trichrome stain for evaluation of collagen fibers were used for histological evaluation. It has been observed that the membrane of gelatin containing usnic acid/liposomes promotes neovascularization without promoting toxicity and is biocompatible with the ocular system by CAM and HET-CAM methods. In addition to not promoting ocular irritability, the membranes promoted improved healing of alkaline corneal chemical burn, as well as reduction in the number of dead cells and conjunctival irritability in the treated group when compared to the control group. Moreover, in animals treated with gelatin membrane containing single acid, there was absence of granulation tissue, in addition to organized collagen bundles, a different result from that found in animals treated with the membrane without single acid. Therefore, this work showed that the membrane of gelatin containing usnic acid promotes corneal healing caused by alkaline chemical burn efficiently in rabbits, accompanied by a reduction in the presence of dead cells in the injured cornea and improvement of conjunctival irritability. / As queimaduras oculares químicas estão entre as causas mais frequentemente relatadas de lesões oculares. Essas lesões podem variar desde dano epitelial unilateral leve conjuntival ou corneano até danos à conjuntiva e córnea com risco de perda da visão. Sabendo da importância de novas propostas de tratamento para tal afecção, objetivou-se investigar o potencial de membranas à base de gelatina contendo ácido úsnico carreado em lipossomas em promover cicatrização de queimaduras da córnea utilizando modelo animal. A análise da atividade biológica das membranas de gelatina contendo ácido úsnico foi realizada por meio do ensaio da membrana corioalantóica (MCA) na qual ovos de galinha da espécie Gallus domesticus e da linhagem Ross. Para avaliação de tolerabilidade ocular da membrana de gelatina foi realizado o Teste de Ovos de Galinha - Teste de Membrana Corioalantóica (HET-CAM). Para a realização do estudo em animais, foram utilizadas 13 coelhas da espécie New Zealand, com idade de 3 meses e pesando 2 kg. A lesão química na córnea dos animais foi realizada por exposição ao etanol absoluto durante 30 segundos. Os animais foram divididos em dois grupos do estudo: grupo com lesão tratado com membrana de gelatina contendo ácido úsnico carreado em lipossomas (n=7) e grupo com lesão tratado com membrana de gelatina sem ácido úsnico (n=6). Para avaliação da cicatrização a área lesada foi demarcada com 1 (uma) gota de colírio fluoresceína e exposição à luz de cobalto e então realizado o registro. Afim de identificar células mortas na córnea, 1 (uma) gota de colírio Rosa Bengala (1,0%) foi instilada no olho a ser avaliado, após ser anestesiado topicamente, após 1 minuto os animais foram expostos à luz branca e então realizados os registros. Para avaliação histológica foi utilizado coloração hematoxilina-eosina para avaliação histopatológica padrão e corante tricrômico de Gomori para avaliação de fibras de colágeno. Observou-se que a membrana de gelatina contendo ácido úsnico carreado em lipossomas promove neovascularização sem causar toxicidade e são biocompatíveis com o sistema ocular pelos métodos da MCA e HET-CAM. Além de não promover irritabilidade ocular, as membranas promoveram melhor cicatrização de queimadura química alcalina corneana, bem como uma redução do número de células mortas e irritabilidade conjuntival no grupo tratado quando comparado ao grupo controle. Além disso, nos animais tratados com membrana de gelatina contendo ácido úsnico foi observado ausencia de tecido de granulação, além de feixes de colágeno organizados, resultado diferente do encontrado nos animais tratados com a membrana sem ácido úsnico. Sendo assim este trabalho mostrou que a membrana de gelatina contendo ácido único carreado em lipossoma promove cicatrização corneana provocada por queimadura química alcalina de maneira eficiente em coelhos, acompanhado de uma redução na presença de células mortas na córnea lesada e da melhora da irritabilidade conjuntival. / Aracaju