CARMO, Marta Regina Santos do. Efeito neuroprotetor do antagonismo do receptor P2X7 no Parkinsonismo experimental induzido por 6-OHDA. 2015. 110 f. Tese (Doutorado em Farmacologia) - Faculdade de Medicina, Universidade Federal do Ceará, Fortaleza, 2015. / Submitted by denise santos (denise.santos@ufc.br) on 2015-04-17T13:13:51Z No. of bitstreams: 1 2015_tese_mrscarmo.pdf: 2518438 bytes, checksum: 237c71b94e431515b74c222c224d8c8e (MD5) / Approved for entry into archive by denise santos(denise.santos@ufc.br) on 2015-04-17T13:14:18Z (GMT) No. of bitstreams: 1 2015_tese_mrscarmo.pdf: 2518438 bytes, checksum: 237c71b94e431515b74c222c224d8c8e (MD5) / Made available in DSpace on 2015-04-17T13:14:18Z (GMT). No. of bitstreams: 1 2015_tese_mrscarmo.pdf: 2518438 bytes, checksum: 237c71b94e431515b74c222c224d8c8e (MD5) Previous issue date: 2015 / Parkinson’s disease (PD) is characterized by a progressive degeneration of dopaminergic neurons in the substantia nigra (SN) and a concomitant decrease of dopamine (DA) in the striatum, which can be modeled by 6-OHDA administration. Since ATP released from damaged cells can exert noxious effects on neurons, acting through its P2X7 receptors (P2X7R), the aim of the present study was to investigate the effects of a P2X7R antagonist, Brilliant Blue G (BBG) on 6-OHDA-induced neurotoxicity. Male Wistar rats received stereotaxic injections of 6-OHDA (18 µg/3µl) into the right striatum and were treated with BBG (45 mg/kg, i.p. 48/48 h) for two weeks. In an additional experiment, animals were treated with the selective antagonist A-438079 (10 µM i.c.v.) for two weeks. BBG decreased the number of contralateral rotations in the apomorphine test, an effect mimicked by the selective P2X7R antagonist A438079. BBG has also improved the animals’ performance in the passive avoidance test (short-term memory) and in the cued version of the Morris Water maze. The antagonism of P2X7R by BBG has also prevented the reduction of dopamine content in the striatum and SN as well as the loss of dopaminergic neurons, and microgliosis and astrogliosis in the striatum. BBG treatment also decreased the IL-1β levels in striatum, despite the observed effect not being statistically significant. To grasp the mechanism of action of BBG, we used in vitro models exploring synaptotoxicity (striatal synaptosomes) and neurotoxicity (dopamine-differentiated SH-SY5Y cells). Besides showing that P2X7R are present in striatal dopaminergic terminals, we observed that BBG 100 nM prevented the 6-OHDA-induced synaptosomal dysfunction. Furthermore, we have shown the presence of P2X7 receptors in SH-SY5Y cells, their co-localization with tyrosine hydroxilase, and that BBG attenuates the cell damage, evaluated through lactate dehydrogenase release. The present results suggests that P2X7R contribute to PD pathogenesis through a triple impact on synaptotoxicity, gliosis and neurotoxicity, highlighting the therapeutic potential of P2X7R antagonists in the disease. / A doença de Parkinson (DP) é caracterizada por uma degeneração progressiva dos neurônios da substância negra (SN) e uma concomitante diminuição do conteúdo de dopamina no estriado, que pode ser mimetizada pela administração de 6-OHDA. Visto que o ATP liberado das células danificadas exerce efeitos deletérios diretos sobre os neurônios, agindo através de receptores P2X7, o objetivo do presente trabalho foi estudar os efeitos do Brilliant Blue G (BBG), um antagonista dos receptores P2X7, sobre a neurotoxicidade induzida por 6-OHDA. Ratos Wistar machos receberam injeções estereotáxicas de 6-OHDA (18 µg/3µl) no estriado direito e foram tratados com BBG (45 mg/kg, i.p. 48/48hs) durante 14 dias. Em uma série adicional de experimentos, os animais receberam o antagonista seletivo A-438079 (10 µM i.c.v.) por 14 dias. O tratamento com BBG diminuiu o número de rotações contralaterais no teste da apomorfina, efeito que foi mimetizado pelo antagonista seletivo A-438079. O BBG também melhorou o desempenho dos animais no teste da esquiva passiva (memória de curta duração), assim como na versão com plataforma sinalizada do labirinto aquático. O antagonismo dos receptores P2X7 pelo BBG preveniu ainda a redução do conteúdo de dopamina no estriado e SN, assim como a perda de neurônios dopaminérgicos, a microgliose e astrogliose no estriado. O tratamento com BBG também diminuiu os níveis de IL-1β no estriado, apesar das diferenças observadas entre os grupos não serem estatisticamente diferentes. Com o objetivo de entender melhor o mecanismo de ação do BBG, foram utilizados modelos in vitro explorando a sinaptotoxicidade (sinaptossomas estriatais) e neurotoxicidade (células SH-SY5Y dopaminérgicas diferenciadas). Além da demonstração da presença dos receptores P2X7 nos terminais nervosos estriatais, foi observado que o BBG 100 nM preveniu a disfunção sinaptossomal. Também demonstramos a presença dos receptores P2X7 nas células SH-SY5Y, assim como sua co-localização com tirosina hidroxilase, onde o pré-tratamento com BBG 100 nM diminuiu o dano celular, avaliado através da liberação de lactato desidrogenase. Os resultados obtidos no presente estudo sugerem que os receptores P2X7 contribuem para a patogênese da DP através de um triplo mecanismo sobre a sinaptotoxicidade, gliose e neurotoxicidade, ressaltando o potencial terapêutico dos antagonistas desses receptores na doença.

TÁVORA, Daniel Gurgel Fernandes. Alterações do sono, alteração cognitiva e avaliação de estruturas cerebrais através de ressonância magnética e morfometria baseada em voxel na doença de Parkinson. 2013. Dissertação (Mestrado em Ciências Médicas) - Faculdade de Medicina, Universidade Federal do Ceará, Fortaleza, 2013. / Submitted by denise santos (denise.santos@ufc.br) on 2015-05-11T12:12:03Z No. of bitstreams: 1 2013_dis_dgftavora.pdf: 1263921 bytes, checksum: 941573e2200f549587191c3cc6272a3e (MD5) / Approved for entry into archive by denise santos(denise.santos@ufc.br) on 2015-05-11T12:14:35Z (GMT) No. of bitstreams: 1 2013_dis_dgftavora.pdf: 1263921 bytes, checksum: 941573e2200f549587191c3cc6272a3e (MD5) / Made available in DSpace on 2015-05-11T12:14:35Z (GMT). No. of bitstreams: 1 2013_dis_dgftavora.pdf: 1263921 bytes, checksum: 941573e2200f549587191c3cc6272a3e (MD5) Previous issue date: 2013 / The present study evaluates clinical abnormalities, sleep disturbances, cognitive alterations and structural brain changes using Magnetic Resonance Imaging (MRI) with Voxel Based Morphometry (VBM) in patients with Parkinson`s Disease (PD). In the first phase of the study one hundred patients (71% male), aged between 40 and 80 years (66,1+9,5) were studied. Patients were recruited from a movement disorders clinics at Walter Cantídio University Hospital. The study is part of a larger longitudinal cohort study (Sleep-For-PD study). Sleep abnormalities and their associated and predictive factors were scrutinized. Many clinical questionnaires were used, including the Parkinson`s Disease Sleep Scale (PDSS), Pittsburgh Sleep Quality Index (PSQI), Epworth Sleepiness Scale (ESS) and the Unified Parkinson’s Disease Rating Scale (UPDRS part I, II, III e IV). Depressive symptoms were evaluated with Beck Depression Inventory (IDB-II) and Hospital Anxiety Depression scale (HAD). The Minimental state examination (Folstein) (MMSE) evaluated the extent of cognitive dysfunction. REM sleep symptoms were evaluated by the REM Sleep Behavior Disorder (RBD) Scale. The levodopa equivalent dose was evaluated (DEL). Patients with sleep abnormalities (PDSS) had more diurnal visual hallucinations, cognitive dysfunction, anxiety, depression and worse parkinsonian symptoms (p<0.05). Patients with worse sleep quality (PSQI) had more depressive symptoms. PDSS scores were correlated with cognitive function (MEEM), depressive symptoms (BDI and HAD), sleep quality (PSQI), severity of PD and the RBD scale. PSQI scores were correlated with MMSE scores, activity of daily living symptoms (UPDRS II) and depression / anxiety (BDI e HAD). Activities of daily living (p=0.002), depressive symptoms (p=0.01) and anxiety (p=0.01) were independent predictors of sleep abnormalities (PDSS). The levodopa equivalent dose and MMSE scores were independent predictors of worse sleep quality (p=0.02). The RBD scale (p=0.002) and UPDRS I (p=0.02) were independent predictors of somnolence. We conclude that sleep disorders, disturbed sleep quality and excessive diurnal somnolence are common in PD. The PDSS, PSQI and ESS scales have distinct associated and predictive factors. PDSS scale is associated with a greater number of factors in PD patients. In the second phase of the study thirty-nine PD patients and ten control subjects were evaluated with regard to the presence of cognitive alterations. Structural brain abnormalities were also evaluated with MRI and VBM technique. The Gray matter volume was used as the ending variable. PD patients had more cognitive impairment and more anxiety. Patients with PD and cognitive alterations had worse disease severity. We found no difference in the volume of gray matter between the subgroups of PD patients with and without cognitive alterations, probably due to early brain atrophy in the patients without cognitive abnormalities. A significant reduction in gray matter volume in the left insula and left prefrontal cortex was observed when comparing PD patients in relation to controls. These findings indicate an asymmetrical brain involvement in PD, the left hemisphere being more affected. / O trabalho avalia em duas fases as alterações clínicas, alterações do sono, a alteração cognitiva e as alterações de estruturas cerebrais através de Ressonância Magnética (RM) e morfologia baseada em voxel (VBM) em pacientes com Doença de Parkinson. Foram estudados 100 pacientes (71% masculino), com idade entre 40 e 80 anos (66,1+9,5), recrutados do Ambulatório de Distúrbios do Movimento do Hospital Universitário Walter Cantídio. A amostra faz parte de uma coorte longitudinal (Sleep-For-PD study). Foram estudadas as alterações do sono e seus fatores associados e preditivos. A escala de sono da Doença de Parkinson (PDSS) que avalia alterações de sono na DP, a escala Pittsburgh Sleep Quality Index (PSQI) que avalia a qualidade do sono, a escala Epworth Sleepiness Scale (ESS) que avalia o grau subjetivo de sonolência e a escala Unified Parkinson’s Disease Scale (UPDRS partes I, II, III e IV) que avalia a gravidade da doença foram estudados. Os sintomas depressivos foram avaliados através das escalas Beck Depression Inventory (BDI-II) e Hospital Anxiety Depression (HAD). Os pacientes foram submetidos ao Mini Exame do Estado Mental (MEEM) que avaliou o grau de alteração cognitiva e a escala de distúrbio comportamental do sono REM (RBD). A dose de levodopa (DEL) foi avaliada. Pacientes com alterações do sono (PDSS) apresentaram mais alucinações diurnas, mais alteração cognitiva, mais ansiedade, depressão e maior gravidade dos sintomas parkinsonianos (p<0,05). Pacientes com má qualidade de sono (PSQI) tiveram mais sintomas depressivos. Os escores PDSS correlacionaram-se ainda com a função cognitiva (MEEM), os sintomas depressivos (BDI e HAD), a qualidade do sono (PSQI), a gravidade da doença e com a escala de RBD. Os escores PSQI correlacionaram-se com o MEEM, atividades de vida diária (UPDRS II) e sintomas de depressão/ansiedade (BDI e HAD). Gravidade de sintomas relacionados a atividades da vida diária (p=0,002), sintomas depressivos (p=0,01) e ansiedade (p=0,01) foram fatores independentes preditivos das alterações do sono (PDSS). A DEL e o MEEM foram preditores da má qualidade do sono (p=0,02). A escala RBD (p=0,002) e a UPDRS I (p=0,02) foram preditores do grau de sonolência. Concluímos que alterações de sono, má qualidade de sono e sonolência diurna excessiva são comuns na DP. As escalas PDSS, PSQI e ESS têm fatores associados e preditivos distintos. A escala PDSS apresenta maior abrangência na avaliação do sono na DP. Na segunda fase, foram avaliadas as estruturas cerebrais por RM, a presença de alterações cognitivas e fatores associados em 39 pacientes com DP e em 10 indivíduos controles pareados por idade. As imagens de RM foram processadas de acordo com o protocolo para processamento de VBM. A variável de desfecho usada foi o volume de substância cinzenta. Nossos dados evidenciaram que pacientes com DP apresentaram maior comprometimento cognitivo e maior ansiedade. Pacientes com DP e alterações cognitivas apresentaram maior gravidade da doença. Não houve diferença no volume de substância cinzenta entre os pacientes com DP com e sem alterações cognitivas. Estes achados provavelmente deveram-se a atrofia cerebral precoce nos pacientes cognitivamente intactos. Pacientes com DP, quando comparados aos controles, revelaram reduções de volume de substância cinzenta na ínsula esquerda e córtex pré-frontal esquerdo, demonstrando envolvimento assimétrico do cérebro na DP.

COSTA, R. O. C. Avaliação dos efeitos do exercício físico na lesão estriatal unilateral por 6-ohda em ratos. 2016. 152 f. Dissertação (Mestrado em Ciências Morfofuncionais) - Faculdade de Medicina, Universidade Federal do Ceará, Fortaleza, 2016 / Submitted by Erika Fernandes (erikaleitefernandes@gmail.com) on 2016-05-31T16:05:29Z No. of bitstreams: 1 2016_dis_rocosta.pdf: 3773872 bytes, checksum: af63ba4fd22e7d494abc333510352f54 (MD5) / Approved for entry into archive by Erika Fernandes (erikaleitefernandes@gmail.com) on 2016-05-31T16:05:42Z (GMT) No. of bitstreams: 1 2016_dis_rocosta.pdf: 3773872 bytes, checksum: af63ba4fd22e7d494abc333510352f54 (MD5) / Made available in DSpace on 2016-05-31T16:05:42Z (GMT). No. of bitstreams: 1 2016_dis_rocosta.pdf: 3773872 bytes, checksum: af63ba4fd22e7d494abc333510352f54 (MD5) Previous issue date: 2016-02-19 / Parkinson's disease (PD) is a neurodegenerative disorder caused by the loss of dopaminergic cells in the nigrostriatal tract, with a corresponding reduction in the contents of dopamine (DA) in the striatum. In this scenario, the present study aimed to evaluate the beneficial effects of exercise on unilateral striatal lesion with 6-OHDA. For this, we used male Wistar rats (200-250 g) divided into 4 groups: FO (without exercise), FO (with exercise), 6-OHDA (without exercise), 6-OHDA (with exercise), who received injections 6-OHDA (12 ug / 2μl) or saline (FO) in the right striatum by stereotactic surgery. The exercise was performed for 14 days, for 30 minutes at a speed of 20 cm / second beginning 24 hours after the surgical procedure. Then the animals were submitted to behavioral tests and, after that, they were euthanized and the areas of the brain (prefrontal cortex, hippocampus and striatum) were used for immunohistochemistry and neurochemical measurements. Data were analyzed by ANOVA and Tukey test (post hoc test) and considered significant at p <0.05. The results showed that physical exercise promotes a significant decrease in the number of contralateral rotations induced by apomorphine as well as an improved engine performance, increased horizontal exploratory activity and rearing and decreased grooming number in the open field test. We also observed a reversal of memory deficits when challenged in the Y-maze and object recognition. The levels of dopamine (DA) and metabolites decreased in the striatum of the injured group and this effect was partially reversed by exercise. The results of oxidative stress showed that exercise promoted a reduction in the MDA content and production of nitrite/nitrate. Exercise increased BDNF level when related to the non-exercise group. The immunoreactivity for tyrosine hydroxylase (TH) had a significant reduction on the right (lesioned) side of striatum in the 6-OHDA group when compared to the lesioned and subjected to exercise group. Taken together, the results of this study indicate the potential of physical exercise as a DP modifier, being able to relieve the motor and cognitive deficits in animals submitted to the experimental model of PD by reducing DA depletion in the striatum, significantly increasing BDNF levels, reducing oxidative stress, providing neuroprotection and, thus, contributing to the prevention and treatment as a pharmacological tool that can alleviate the symptoms of PD. / A doença de Parkinson (DP) é uma desordem neurodegenerativa ocasionada pela perda de células dopaminérgicas na via nigroestriatal, com uma correspondente redução no conteúdo de dopamina (DA) no corpo estriado. Neste cenário, o presente estudo teve como objetivo avaliar os efeitos do exercício físico na lesão estriatal unilateral por 6-OHDA. Para este fim, foram utilizados ratos machos Wistar distribuídos em 4 grupos: falso operado (FO) sem exercício (S/E), falso operado (FO) com exercício (C/E), 6-OHDA sem exercício (S/E), 6-OHDA com exercícios (C/E), que receberam injeções de 6-OHDA (12 μg/2μl) ou solução salina (FO), no estriado direito através de cirurgia estereotáxica. O protocolo de exercício foi realizado durante 14 dias, por 30 min em esteira, com velocidade de 20 cm/s iniciando-se 24h após o procedimento cirúrgico. Em seguida, os animais foram submetidos aos testes comportamentais e eutanasiados, as áreas cerebrais (córtex pré-frontal (CPF), hipocampo (HP) e corpo estriado (CE) utilizados para determinações neuroquímicas e imunohistoquímicas. Os dados foram analisados por ANOVA (Newman-Keuls) e considerada significativo valores de p <0,05. Os resultados evidenciaram que o exercício físico promoveu uma diminuição significativa no número de rotações contralaterais induzidas pela apomorfina, assim como uma melhora do desempenho motor, aumento da atividade exploratória horizontal, rearing e diminuição do número de grooming, no teste de campo aberto. O exercício também reverteu os deficits de memória, quando desafiados no teste Y-maze, e reconhecimento de objeto. As concentrações de dopamina (DA) e metabólito diminuíram no corpo estriado dos grupos lesionado. Este efeito foi, em parte, revertido pelo exercício. Quanto ao estresse oxidativo, o exercício promoveu uma redução nos conteúdos de malonodialdeído (MDA) e na produção de nitrito/nitrato. O exercício aumentou as concentrações de fator neurotrófico derivado do cérebro (BDNF) nos grupos com exercício, quando relacionados aos grupos sem exercício. A imunorreatividade para tirosina hidroxilase (TH) e transportador de dopamina (DAT) reduziram-se, de modo significativo, no grupo 6-OHDA, com relação aos lesionados e submetidos ao exercício. Em conjunto, os resultados do presente estudo indicam o potencial do exercício físico como um agente modificador da DP, sendo capaz de aliviar os prejuízos motores e cognitivos em animais submetidos ao modelo experimental da DP. O exercício físico atenuou a diminuição das concentrações de DA no estriado e aumentou significativamente as concentrações de BDNF, além de diminuir significativamente o estresse oxidativo, podendo contribuir assim, como ferramenta não farmacológica, na prevenção sendo capaz de atenuar os sintomas da DP.

Resumo não disponível.

Resumo não disponível.

A doença de Parkinson (DP) é a segunda doença neurodegenerativa mais frequente na espécie humana. A etiologia da DP é multifatorial, com muitos fatores ambientais e genéticos atuando em conjunto para sua determinação. Ao nível patológico ela caracteriza-se pela destruição seletiva de neurônios dopaminérgicos da substantia nigra pars compacta e pelo acúmulo de corpos de Lewy no cérebro. Em aproximadamente 90% dos casos da DP, a suscetibilidade parece ser determinada por variantes comuns no genoma que podem interagir com o ambiente. Dentre os fatores ambientais que modulam o risco para a DP estão: uso de pesticidas, exposição ocupacional a tóxicos, consumo de café e cigarro. A variabilidade na resposta à principal medicação da DP, a levodopa, parece também estar relacionada à genética do indivíduo. Dessa forma, o presente trabalho teve como objetivo a melhor compreensão dos fatores genéticos e suas interações com o ambiente envolvidos na suscetibilidade à DP e no tratamento com levodopa. Pacientes com DP e seus controles foram recrutados no ambulatório de distúrbios do movimento e no ambulatório de medicina interna do Hospital de Clínicas de Porto Alegre e da Universidade Federal de Ciências da Saúde de Porto Alegre, respectivamente. Os resultados obtidos foram organizados em cinco artigos. No primeiro estudo, foram considerados oito polimorfismos previamente associados à DP. Na nossa população, os indivíduos que possuíam sete ou mais alelos de risco desses polimorfismos apresentaram um odds ratio de 2,54 quando comparados a quem possuía seis alelos ou menos (95% IC 1,66-3,89; P = 1,80E−05). Esse ponto de corte foi escolhido porque o número médio de alelos de risco na amostra foi 7. No segundo artigo, portadores do genótipo TT do polimorfismo rs1021463 e dos genótipos TT ou GT do polimorfismo rs30196 do gene SV2C apresentaram um maior risco a DP quando expostos ocupacionalmente a tóxicos, quando comparado a não-expostos (respectivamente, OR 2,53; 95% IC 1,33-4,69; Pinteração = 0,008 e OR 2,30; 95% IC 1,21-4,36; Pinteração = 0,033). O terceiro artigo mostra uma associação em que fumantes com o haplótipo T- não G -T do transportador ABCB1 apresentaram menor risco a DP quando comparados a portadores do 9 haplótipo C-G-C (OR 0,34, 95% IC 0,15-0,72; Pinteração = 0,012). No quarto trabalho, foi constatada uma interação entre o gene NOS1 e a cafeína modulando o risco da DP (OR 0,24; 95% IC 0,10-0,54; Pinteração = 0,0002). O último artigo trata da farmacogenética da levodopa, em que foi proposto um modelo com variáveis genéticas, biológicas e farmacológicas que explicou 23% da variabilidade na dose (F = 11,54; P < 0,000001). Observou-se uma redução da média de dose em aproximadamente 76 mg/dia por cada alelo C nos genótipos do polimorfismo rs30196 do gene SV2C. Estes trabalhos enriqueceram o conhecimento da variabilidade da DP tanto em aspectos de suscetibilidade quanto farmacogenética. Os dados obtidos serão importantes na continuação das pesquisas para identificar biomarcadores para prevenção e tratamento da DP. / Parkinson’s disease (PD) is the second most common neurodegenerative disease in humans. PD etiology is multifactorial, due to several environmental and genetic factors. Pathologically, it is characterized by a selective destruction of dopaminergic neurons in substantia nigra pars compacta and by the accumulation of Lewy bodies in brain. In approximately 90% of PD cases, susceptibility seems to be driven by common variants in the genome that might interact with the environment. Among environmental factors that modulate PD risk, pesticides, occupational exposure to toxics, smoking and coffee consumption were identified. The variability in patients’ response to the main medication of PD, levodopa, seems also to be related to genetics. Therefore, the present work had the objective to understand the genetic factors and their interaction with the environment involved in PD susceptibility and in the treatment with levodopa. Patients and controls were recruited at the movement disorders ambulatory and at the internal medicine ambulatory at the Hospital de Clínicas de Porto Alegre and at Universidade Federal de Ciências da Saúde de Porto Alegre respectively. The main results obtained were organized in five manuscripts. In the first, eight polymorphisms previously associated with PD were considered. In our population, individuals with 7 or more risk alleles presented an odds ratio of 2.54 for PD when compared to those with 6 or less alleles (95% CI 1.66-3.89; P = 1.80E−05). This cut off was chosen because the average number of risk alleles in the sample was 7. In the second manuscript, SV2C rs10214163 TT genotype carriers and SV2C rs30196 TT/GT genotypes carriers showed a higher PD risk in subjects exposed to environmental toxics compared to those not exposed (respectively, OR 2.53; 95% CI 1.33-4.69; Pinteraction = 0.008 and OR 2.30; 95% CI 1.21-4.36; Pinteraction = 0.033). The third manuscript shows the association between ABCB1 T-non G-T haplotype and smoking (OR 0.34, 95% CI 0.15-0.72; Pinteraction = 0.012). In the fourth manuscript, an interaction between NOS1 gene and caffeine, modulating PD risk, was observed (OR 0.24; 95% CI 0.10-0.54; Pinteraction = 0.0002). The last manuscript reports a 11 model with genetic, biological and pharmacological variants in response to levodopa. This model explained 23% of dose variability (F = 11.54; P < 0.000001). The presence of each rs30196 C allele reduced the average dose in approximately 76 mg/day. All these work enriched the knowledge of the variability of PD in both susceptibility and pharmacogenetic areas. The data obtained will be important to identify biomarkers for disease prediction and treatment.

Made available in DSpace on 2016-08-29T15:37:44Z (GMT). No. of bitstreams: 1 tese_6907_Dissertação Lívia.pdf: 1847441 bytes, checksum: b52e9ecbb04f480764d8a1566cdb7d1f (MD5) Previous issue date: 2014-07-31 / FAPES / A doença de Parkinson (DP) é um distúrbio neurodegenerativo causado pela perda dos neurônios dopaminérgicos da substância negra pars compacta, que afeta cerca de 1% das pessoas a partir dos 70 anos. Atualmente, o tratamento principal baseia-se na reposição dos níveis de dopamina (DA) com a administração de levodopa, que ameniza principalmente os distúrbios motores. Outros fármacos, como agonistas dopaminérgicos, são hoje utilizados concomitantemente à levopoda, mas ainda não são efetivos e não previnem o avanço da doença, além de desencadearem diversos efeitos colaterais. Diante disso, existem esforços voltados para a descoberta e identificação de novas moléculas com atividade neuroprotetora, de origem natural, principalmente da biodiversidade da flora brasileira. A planta Combretum leprosum apresenta potencial medicinal vasto com amplo espectro de ação biológica, tais como anti-inflamatória, analgésica, antiepilética, entre outras, porém, seu mecanismo de ação e seus efeitos neuroprotetores ainda não foram completamente elucidados. Neste estudo, exploramos o potencial efeito neuroprotetor do extrato etanólico (EE) de C. leprosum em um modelo murino da DP, utilizando a neurotoxina 1metil4fenill1,2,3,6tetrahidropiridina (MPTP) i.p. na dose de 30 mg/Kg durante 5 dias consecutivos. Foi observada hiperlocomoção exacerbada após a injeção de anfetamina (2 mg/Kg) no grupo tratado com MPTP, efeito este prevenido pelo prétratamento com o EE na dose de 100 mg/Kg. O déficit de força muscular induzido pelo MPTP foi também prevenido pelo prétratamento oral com C. leprosum. No contexto bioquímico, o tratamento com EE não foi capaz de prevenir a depleção dopaminérgica induzida pelo MPTP no estriado. Mas, interessantemente, nossos dados sugerem que o tratamento com EE pode prevenir a depleção induzida pelo MPTP dos metabólitos dopaminérgicos, o ácido homovanílico (HVA) e o ácido 3,4diidroxifenilacético (DOPAC), nesta mesma região. Adicionalmente, o tratamento com EE preveniu as alterações no metabolismo da DA induzidas pelo MPTP. No que tange a parte molecular, o tratamento com EE foi capaz de elevar a expressão do gene da tirosina hidroxilase (TH) na região mesencefálica dos animais. Embora exista tendência de que as diminuídas expressões do transportador de dopamina (DAT) e do receptor dopaminérgico D2 nesta região causada pelo MPTP possam ser prevenidas pelo tratamento com EE, esse dado não foi estatisticamente significativo. Já no estriado, a expressão dos genes da TH, D1 e D2 não diferiu entre os grupos estudados. Nossos resultados evidenciam que o tratamento com o EE na dose de 100 mg/Kg previne alterações motoras e moleculares desencadeadas pelo MPTP, entretanto parcialmente revertendo as alterações bioquímicas. Dessa forma, nosso estudo evidencia um potencial terapêutico da Combretum leprosum na prevenção e tratamento da DP. / The Parkinson’s disease (PD) is a neurodegenerative disturbe caused by neuronal loss of the dopaminergic neurons in the substantia nigra pars compacta, afecting by 1% in people >70 years of age. Currently, the main treatment is based on the replacement of the dopamine levels (DA) with administration of levodopa, which mitigates especially the motor impairment. Other drugs, such as dopamine agonists, are now used concomitantly with levopoda but they are not effective and do not prevent disease progression, beside triggers several side effects. Thus, there are efforts focused on the discovery and identification of new molecules with neuroprotective activity of natural origin, especially of the biodiversity of flora. The plant Combretum leprosum has vast medicinal potential with a wide spectrum of biological action, such as anti-inflammatory, analgesic, antiepileptic, among others, but its mechanism of action and its neuroprotective effects have not been fully elucidated. In this study, we explored the potential neuroprotective effect of ethanol extract (EE) of C. leprosum in a murine model of PD, using the neurotoxin 1-methyl- 4-phenyl-1,2,3,6-tetrahydropyridine (MPTP) i.p. at a dose of 30 mg/Kg for 5 consecutive days. Exacerbated hyperlocomotion was observed after injection of amphetamine (2 mg/kg) in the group treated with MPTP, an effect prevented by pretreatment with EE at a dose of 100 mg/kg. The deficit in muscle strength induced by MPTP was also prevented by pretreatment with C. leprosum. In biochemical context, treatment with EE was not able to prevent MPTP-induced dopamine depletion in the striatum. However, interestingly, our data suggest that treatment with EE can prevent depletion of dopamine metabolites, homovanillic acid (HVA) and 3,4- dihydroxyphenylacetic acid (DOPAC), in the same region. In addition, treatment with EE prevented the alterations in the metabolism of MPTP-induced DA. Regarding the molecular part, treatment with EE was able to increase the expression of tyrosine hydroxylase (TH) gene in the midbrain region of the animals. Although there is a clear tendency that the lower expression of the dopamine transporter (DAT) and the dopamine D2 receptor in this region caused by MPTP can be prevented by treatment with EE, this finding was not statistically significant. In the striatum, the expression of genes TH, D1 and D2 did not differ between groups. Our results show that treatment with EE at a dose of 100 mg/kg prevents motor and molecular alterations induced by MPTP, however partially reversing the biochemical changes. Accordingly, our study demonstrates the therapeutic potential Combretum leprosum in the prevention and treatment of PD.

Dissertação (mestrado) - Universidade Federal de Santa Catarina, Centro de Ciências Biológicas. Programa de Pós-Graduação em Farmacologia. / Made available in DSpace on 2012-10-26T11:54:41Z (GMT). No. of bitstreams: 1 302797.pdf: 900040 bytes, checksum: 1aa20ef2339b32a8ffc00e621612a3a2 (MD5) / A elucidação dos mecanismos responsáveis pelas manifestações não-motoras da Doença de Parkinson (DP) é fundamental na busca por novas terapias. Especialmente pelo fato destes sintomas, como ansiedade e depressão, estarem presentes nas fases iniciais da doença, antecedendo as manifestações motoras clássicas. O presente estudo teve como objetivo avaliar as possíveis alterações comportamentais e neuroquímicas promovidas pela lesão parcial e retrógrada dos neurônios nigroestriatais, em três intervalos de tempo. O modelo experimental utilizado consistiu na injeção bilateral de 6-OHDA no estriado de ratos. Além disso, analisamos a participação do sistema imunológico inato em diferentes regiões encefálicas e, sua possível relação com as alterações promovidas pela lesão, nos seus respectivos intervalos de tempo. Os resultados, no intervalo de três semanas, mostraram a presença de comportamentos do tipo anedonia e ansiedade, com ausência de comprometimento motor, juntamente com um aumento na quantidade de células microgliais. Além disso, os níveis estriatais de dopamina e DOPAC foram reduzidos progressivamente ao longo de 25 dias. Também foram observadas alterações nos níveis estriatais de serotonina e seu metabólito, 5-HIAA. Ainda mais, os resultados ilustraram um aumento na quantidade de células microgliais na substância negra, estriado e hipocampo dos ratos administrados com 6-OHDA. Finalmente, nossos resultados contribuem para a hipótese de que a lesão retrógrada e parcial dos neurônios dopaminérgicos da substância negra pode causar prejuízos comportamentais semelhantes à fase pré-motora da DP, três semanas após a lesão. Em adição, estas manifestações são acompanhadas por alterações neuroinflamatórias, que podem estar influenciando as manifestações comportamentais relatadas, principalmente o efeito anedônico. Além disso, a evidência de neuroinflamação hipocampal, mesmo após 25 dias, pode ser um indicativo de extensão neuroinflamatória da lesão para outras áreas encefálicas, como consequência da degeneração nigroestriatal. / The elucidation of the mechanisms responsible for non-motor manifestations of Parkinson's disease (PD) is crucial in the search for new therapeutic approaches. Specially because some symptoms, such as anxiety and depression, are present in the early stages of the disease, before the classic motor manifestations. The aim of the present study was to evaluate the possible behavioral and neurochemical effects after a retrograde partial lesion of nigrostriatal pathway promoted by 6-OHDA, in three intervals of time. The model used was bilateral injection of 6-OHDA into dorsal striatum. Furthermore, we analyzed the participation of the innate immune system in different brain regions and its relation to the changes promoted by the lesion, in the same time intervals. The results showed that after three weeks, 6-OHDA was able to produce both anhedonic and anxiety behaviors and an increase of microglial density, without motor bias. In addition, striatal levels of dopamine and DOPAC were gradually reduced over 25 days. We also observed changes in the striatal levels of serotonin and its metabolite, 5-HIAA. Furthermore, our data illustrate an increase in the microglial levels in the substantia nigra, hippocampus and striatum in the 6-OHDA-lesioned rats. Finally, our results contribute to the hypothesis that the retrograde and partial damage of dopaminergic neurons in the substantia nigra can resemble premotor symptoms of PD, three weeks after injury. Moreover, these symptoms are accompanied by neuroinflammatory changes, which may be associated with behavioral changes, especially the anhedonic effect. The evidence of hippocampal neuroinflammation may be an indicative of neuroinflammatory extension to other areas of the brain as a consequence of the nigrostriatal degeneration.

Dissertação (mestrado) - Universidade Federal de Santa Catarina, Centro de Desportos. Programa de Pós-Graduação em Educação Física. / Made available in DSpace on 2013-07-16T00:03:37Z (GMT). No. of bitstreams: 1 221025.pdf: 1302578 bytes, checksum: 305963fc7034f439237dd1848e8ae357 (MD5) / O objetivo deste estudo foi estudar os efeitos uma atividade verbal para modulação do movimento sob o comportamento motor relacionado à marcha de um indivíduo com DP. Foi utilizado um delineamento experimental de sujeito único, analisando um portador de DP com 65 anos de idade. Para mensuração das variáveis angulares e espaço-temporais da marcha, utilizou-se o sistema de reconstrução tridimensional de movimento, o Digital Motion Analysis System (DMAS) 5.0 (SPICATek®). As avaliações foram realizadas em dois períodos, pré e pós-intervenção, em duas situações, sem e com a utilização de uma atividade de memória de trabalho com interferência. A intervenção consistiu em orientações verbalizadas, visando à modulação de movimentos da marcha do sujeito. Os dados coletados foram tratados utilizando o pacote estatístico SSPS 10.0® for Windows. Para normalidade dos dados foi aplicado o Teste de Kolmohgorov-Smirnov e de Shapiro-Wilk adotando um p=0,05. Estatística descritiva com média e desvio padrão para caracterização das variáveis espaciais e temporais. Para constatação da estabilidade do comportamento entre as variáveis angulares, foi utilizado a análise de variância (ANOVA) one way, com realização da "post-hoc" análise de "Tukey" adotando um p=0,05. Para analise das diferenças entre cada variável, foi utilizado o teste t para amostras relacionadas "Paired-Samples T Test" adotando um p=0,05. Os resultados indicaram uma participação significativamente maior do membro inferior esquerdo na execução da marcha do sujeito, nas duas situações analisadas após a aplicação da intervenção. Houve maior controle e estabilidade na realização da marcha, indicada pela significativa diminuição nos valores encontrados para as variáveis 1º apoio duplo e 2º apoio duplo. Ocorreu significativa melhora na amplitude articular do quadril esquerdo, além de estabilidade nos valores encontrados, assim como significativo aumento na amplitude articular dos cotovelos esquerdo do sujeito, além de estabilidade comportamental. A aplicação da atividade de memória de trabalho com interferência influenciou no controle motor da marcha do sujeito. Com base nos resultados encontrados concluiu-se que a intervenção utilizando indicações verbais para modulação do movimento, foi capaz de provocar efeito sobre a marcha do sujeito investigado.

Tese (doutorado) - Universidade Federal de Santa Catarina, Centro de Ciências da Saúde, Programa de Pós-Graduação em Ciências Médicas, Florianópolis, 2013. / Made available in DSpace on 2013-12-05T22:58:03Z (GMT). No. of bitstreams: 1 319166.pdf: 895030 bytes, checksum: 007803862da3e48034aa17d9ef9bf890 (MD5) Previous issue date: 2013 / Justificativa: As cefaleias primárias apresentam uma alta prevalência na população geral. Embora o avanço no entendimento das cefaleias tenha sido significativo nas últimas décadas, vários aspectos da sua fisiopatologia permanecem obscuros. Isto se deve em grande parte à complexidade dos mecanismos subjacentes e às limitações metodológicas para abordagem de alterações morfológicas e funcionais em humanos. O estudo das cefaleias em pacientes com doenças neurológicas cuja fisiopatologia é parcialmente conhecida pode auxiliar na elucidação de alguns destes mecanismos. Objetivos: i) Investigar a prevalência de migrânea e cefaleia do tipo tensional (CTT) em pacientes com doença de Parkinson (DP) e com Epilepsia do Lobo Temporal Mesial associada à esclerose do hipocampo refratária ao tratamento farmacológico (ELTM-EH), comparando com indivíduos da população geral; ii) Investigar a concordância entre o lado de predomínio da cefaleia e o lado da EH em pacientes com ELTM-EH; iii) investigar a concordância entre o lado de predomínio da cefaleia e o lado de início dos sintomas motores em pacientes com DP. Desenho dos estudos: Foram realizados três estudos observacionais analíticos, sendo dois casos-controle e um transversal. Métodos: Foram incluídos 100 pacientes consecutivos com ELTM-EH acompanhados no Centro de Epilepsia de Santa Catarina entre 2009 e 2010 e 98 pacientes com DP acompanhados no centro de referência para distúrbios de movimento no Hospital Governador Celso Ramos entre 2010 e 2012. O grupo controle foi composto por 100 indivíduos pareados para idade residentes em Santa Catarina e randomicamente selecionados a partir de um estudo prévio de base populacional para investigação de cefaleia no Brasil. Foi aplicado um questionário padronizado de acordo com os critérios da International Headache Society. O diagnóstico de cefaleia foi baseado na segunda edição da Classificação Internacional das Cefaleias. Resultados: Observou-se uma prevalência significativamente maior (p = 0,001) de cefaleia no último ano nos pacientes com ELTM-EH (92%) quando comparados aos controles (73%). Pacientes com DP apresentaram uma prevalência significativamente menor (40,8%) de cefaleia no último ano do que os controles (69,4%; p = 0,03). Os pacientes com ELTM-EH unilateral (n = 42) apresentaram uma significativa concordância entre o lado de predomínio da cefaleia e o lado da EH (OR 8,5; IC 95% 2,1 ? 35,1; p = 0,003). A cefaleia foi ipsilateral ao lado de início dos sintomas motores da DP em 84% dos pacientes com sintomas unilaterais (p = 0,001). ELTM-EH esteve significativamente associada ao diagnóstico de cefaleia crônica diária (OR 6,1; IC 95% 1,7 ? 22; p = 0,005). Conclusão: Este trabalho demonstrou uma elevada prevalência de cefaleia em pacientes com ELTM-EH quando comparado aos controles, e quando unilateral, é frequentemente ipsilateral ao lado da EH, além de apresentar uma elevada chance de cronificação. A prevalência de cefaleia foi menor em pacientes com PD que nos controles e congruente com o lado de início dos sintomas motores unilaterais. Embora o delineamento do presente estudo não permita afirmar relações de causa e efeito, as associações descritas sugerem a participação da hiperexcitabilidade cortical e da modulação talâmica na fisiopatologia das cefaleias primárias. <br> / Abstract : Justification: Primary headache disorders have a high prevalence in the general population. Although many critical points remain unclear, the understanding of the pathophysiology of headache has advanced greatly during the past years. The reasons for this incomplete knowledge are the complexity of the underlying mechanisms of this condition associated with difficulties in assessing the functional and structural abnormalities of the human brain. The study of headache in patients with other neurological diseases with known pathological abnormalities might help to understand these mechanisms. Objectives: Investigate the prevalence of migraine and tension-type headache (TTH) in patients with Parkinson?s disease (PD) and mesial temporal lobe epilepsy with hippocampal sclerosis (MTLE-HS), compared with individuals from general population. Moreover, we investigate the lateralizing value of headache in MTLE-HS and the concordance between the predominant laterality of the headache and the side of the initial symptoms of PD. Study design: We performed three observational analytical studies, two case-controls and one cross-sectional. Methods: One hundred consecutive MTLE-HS patients under comprehensive presurgical evaluation were evaluated from 2009 to 2010. We also interviewed 98 consecutive patients with an established diagnosis of PD assisted at Hospital Governador Celso Ramos between 2010 and 2012. The control group consisted of 100 age-matched individuals who were randomized from a nationwide Brazilian headache database. A standardized questionnaire was applied according to the criteria of the International Headache Society (IHS). Headache diagnosis was based on the second edition of the International Classification of Headache Disorders (ICHD-II). Results: There was a significantly higher prevalence of headache (92%) among the MTLE-HS patients when compared with the controls (73%; p = 0.001). PD patients showed a significantly lower prevalence (40.8%) of headache in the previous year than controls (69.4%) (p = 0.03). MTLE-HS patients with unilateral HS and predominantly unilateral headache (irrespective of the type), presented pain ipsilateral to the HS (OR 8.5; CI 95% = 2.1-35.1; p=0.003). The headache side was ipsilateral to the side of PD onset in 21 patients (84%), with a concordance of 85.7% on the left side and 81.8% on the right side (p < 0.01). Chronic daily headache (CDH) was significantly associated with MTLE-HS (OR 6.1, CI 95% 1.7 - 22, p = 0.005) but we did not find any association between the diagnosis of migraine or tension-type headache and MTLE-HS. Conclusion: This study demonstrated a high prevalence of headache in MTLE-HS patients, often ipsilateral to the HS side and with an increased likelihood to a chronic course. The prevalence of primary headache was significantly lower in patients with PD than controls and the predominant side of headache was ipsilateral to the side of initial motor signs of PD. Although the design of this study did not allow inferences about causes and effects, the associations described in the both diseases favor the role of the hyperexcitability and the abnormal modulation of thalamus in the pathophysiology of primary headaches.