Orientador: Ângela Maria Victoriano de Campos Soares / Coorientador: Luciane Alarcão Dias-Melício / Banca: Ramon Kaneno / Banca: Sueli Aparecida Calvi / Banca: Fabiane Gal Frantz / Banca: Fatima Regina Vilani Moreno / Resumo: A paracoccidioidomicose é uma micose sistêmica causada pelo fungo dimófico Paracoccidioides brasiliensis, que é endêmico na América Latina. As células fagocitárias desempenham um papel importante durante a resposta imune inata contra o Pb, e se tornaram alvo de estudos neste sentido. Em especial, os neutrófilos são capazes de destruir microrganismos através de três mecanismos: fagocitose, seguida pela morte em fagolisossoma, secreção de agentes microbicidas e através do mais recente mecanismo descoberto, a netose, que consiste na liberação de redes extracelulares a partir dos neutrófilos (NETs), constituídas por proteínas granulares associadas a cromatina. Neste estudo demonstramos pela primeira vez que leveduras de P. brasiliensis induzem NETs in vitro principalmente através da ligação pelo receptor dectina-1 presente nos neutrófilos. Estas estruturas foram demonstrados através de microscopia eletrônica de varredura, e os componentes específicos das NETs: histona, elastase e DNA foram evidenciados a partir da microscopia eletrônica de imunofluorescência confocal. As leveduras foram capturadas pelas NETs, o que revelou um importante papel destas esrtruturas: impedir a disseminação do fungo. Além disso, o tratamento das co-culturas com DNAse, que degradou as NETs evidenciou aumento da sobrevivência do fungo, o que denota sua capacidade microbicida / Abstract: Paracoccidiodomycosis is a systemic mycosis caused by the dimorphic fungus Paracoccidioides brasiliensis, which is endemic in Latin America. Since phagocytic cells play an important role during innate immune response against this fungus, we have studied the relationship between human neutrophils (PMNs) and P. brasiliensis, focusing on the effector mechanisms of these cells. Neutrophils can destroy microrganisms using at least 3 distint mechanisms: phagocytosis followed by destruction in a phagolysossome, secretion of antimicrobial molecules, and the more recently identified netosis, involving the release of neutrophil extracellular traps ( NETs) that are constituted by chromatin associated with different granule proteins with antimicrobial activities. Here, we showed for the first time, that yeast cells from P. brasiliensis strain 18 are able to induce the release of NETs in vitro, by binding to dectin-1 receptor on human neutrophils. These structures were evidenced by scanning electron microscopy, and specific NETs compounds such as histone and elastase were shown by confocal microscopy. Fungi were ensnared by NETs, denotting the role of these structures in confining infection, avoiding dissemination. In addition, disruption of NETs by treatment of cocultures with DNAse increased the fungi survival, evidencing their killing capacity / Doutor

Orientador: Pedro Alves de Souza / Banca: Oswaldo Durival Rossi Júnior / Banca: Valquíria Cação da Cruz / Resumo: Avaliou-se o efeito de diferentes períodos (0h, 24h, 48h e 72h) de estresse térmico sobre a qualidade física e química da carne de frangos de corte e a incidência de Campylobacter spp., Listeria monocytogenes e Salmonella spp. e a população de Bactérias láticas, Escherichia coli e Enterobacteriaceas totais. Foram utilizados 500 pintainhos da linhagem Cobb 500®, dos quais 100 animais foram criados em temperatura termoneutra, ideal para cada fase de criação, constituindo o grupo controle, e os outros 400 animais foram criados em uma câmara climática à temperatura de 32°C ± 2°C, considerada de estresse térmico para as aves. Foi avaliada a qualidade física e química da carne aos 21, 35 e 42 dias e foi feita também uma avaliação microbiológica dos animais. Utilizou-se um delineamento inteiramente casualizado, em esquema fatorial 2 x 4 (temperaturas e duração do estresse), com 4 repetições. As médias obtidas foram comparadas pelo teste de Tukey a 5% de significância. O estresse térmico afetou as propriedades qualitativas da carne, especialmente a oxidação lipídica, capacidade de retenção de água, força de cisalhamento, valor R e pH. As diferentes temperaturas de criação não interferiram na incidência Campylobacter spp., Listeria monocytogenes e Salmonella spp. e na população de Bactérias láticas, Escherichia coli e Enterobacteriaceas totais / Abstract: It was evaluated the effect of different periods (0h, 24h, 48h and 72h) of thermal stress on the physical and chemical quality of broilers meat, the incidence of Campylobacter spp., Listeria monocytogenes and Salmonella spp., and the count of lactic-acid bacteria, Escherichia coli and Enterobacteriaceae. It was used 500 Cobb 500® chicks, of which 100 animals were reared in thermoneutral temperature, optimal for every rearing stage, constituting the control group. The other 400 animals were reared in a climate chamber under temperature conditions of 32° C ± 2°C, considered as thermal stress to birds. It was evaluated the physical and chemical quality of the meat at 21, 35 and 42 days old, and it was also made a microbiological evaluation of the animals. This experiment was carried out in a completely randomized design with a factorial of 2x4 (temperature and periods of stress respectively), and 4 replicates. The means were compared by Tukey test at 5% significance level. The thermal stress affected the qualitative properties of the meat, especially the lipid oxidation, the water retention capacity, the shear force, the R value, and the pH. The different rearing temperatures did not affect the incidence of Campylobacter spp., Listeria monocytogenes and Salmonella spp., neither the count of lactic-acid bacteria, Escherichia coli and Enterobacteriaceae / Mestre

Orientador: Wilma De Grava Kempinas / Coorientador: / Banca: Alaor Aparecido Almeida / Banca: Iraceles Aparecida Laura / Banca: Luis Fernando Barbisan / Banca: Yuri Sinzato / Resumo: O procloraz (PCZ) é um fungicida antagonista do receptor de andrógeno amplamente utilizado na agricultura. A exposição pré e peri-natal durante a diferenciação sexual é deletéria para a prole masculina, resultando em malformações de órgãos genitais, redução do peso dos órgãos reprodutores e maior retenção de mamilos em adultos. Considerando-se que a literatura sobre a ação do PCZ sobre o epidídimo é escassa e que é neste órgão que acontece o processo de maturação dos espermatozoides, justifica-se a realização do presente estudo, que pretendeu investigar se a exposição a baixas doses de PCZ, durante durante o período de trânsito dos espermatozoides no epidídimo, pode alterar a morfofisiologia deste órgão e a qualidade espermática em ratos adultos. Para tanto, foram utilizados 40 ratos da linhagem Wistar, com idade inicial de 90 dias divididos em quatro grupos experimentais (10 ratos cada): 0 (veículo), 10, 15 e 30mg/Kg/dia de PCZ diluído em óleo de milho (1mL/Kg) e administrado oralmente (gavage) durante quatro dias. Foram avaliados parâmetros morfofuncionais do trato genital masculino, dosagens hormonais, avaliações espermáticas, além de análises histopatológicas do testículo e epidídimo. Não houve diferença estatisticamente significativa entre os grupos controle e tratados em relação aos parâmetros avaliados. Os resultados indicam que a exposição a baixas doses de PCZ, nestas condições experimentais, não compromete a morfofisiologia do epidídimo e a qualidade espermática em ratos adultos / Abstract: Prochloraz (PCZ) is a fungicide and androgen-receptor antagonist that is used worldwide in horticulture and agriculture. Pre- and perinatal exposure to this pesticide during sexual differentiation is deleterious for the male offspring, resulting in genital organ malformation, reduced reproductive organ weights and increased nipple retention in adults. Given that the literature on the effects of PCZ on the epididymis is scarce and that sperm maturation takes place in this organ, the present investigation aimed to determine whether low PCZ doses, administered during the sperm transit through the epididymis, can alter the morphophysiology of this organ and sperm quality in rats. For this, adult male Wistar rats, 90 days old, were assigned into four different groups (10 rats each): 0 (vehicle), 10, 15 and 30mg/Kg/day of PCZ diluted in corn oil (1mL/Kg) administered orally for four days. Morphofunctional parameters of the male reproductive tract, hormonal levels, sperm evaluations, and histopathologic analysis of testis and epididymis were assessed. There were no statistically significant differences between the treated and control groups in relation to the evaluated parameters. The results reported herein show that PCZ exposure, in these experimental conditions, does not compromise epididymal morphophysiology or sperm quality in the adult rat / Mestre

Orientador: Yara Marcondes Machado Castiglia / Banca: Norma Sueli Pinheiro Módolo / Banca: Leandro Gobbo Braz / Banca: Artur Udelsmann / Banca: Fernanda Leite / Resumo: Introdução: O parecoxibe tem comprovada eficácia analgésica no tratamento da dor, entretanto seus efeitos adversos renais não estão esclarecidos. Se por um lado os inibidores da ciclooxigenase-2 geram danos ao rim por alterar a dinâmica vascular renal, por outro lado bloqueiam a inflamação, e admite-se que a inflamação esteja relacionada com prejuízos ao rim. Em casos de hipoperfusão renal, como em situação de hemorragia e hipovolemia, há diminuição direta do aporte de nutrientes e a isquemia estimula a produção de mediadores inflamatórios. O objetivo desta pesquisa foi avaliar se a dose única de parecoxibe influi na ocorrência de apoptose ou necrose em rins de ratos submetidos à hemorragia. Métodos: Vinte e quatro ratos Wistars adultos anestesiados com sevoflurano foram distribuídos aleatoriamente em quatro grupos (n=6): grupo placebo/ sem hemorragia (plac/ sh); grupo parecoxibe/ sem hemorragia (PCX/ sh); grupo placebo/ hemorragia (plac/ H) e grupo parecoxibe/ hemorragia (PCX/ H). Receberam bolus endovenoso em dose única de parecoxibe, 20mg/kg, ou placebo de acordo com a distribuição por grupos. Os animais dos grupos com hemorragia sofreram sangria correspondente a 30% da volemia durante 20 min. Após 80 min da administração do bolus de parecoxibe ou placebo e 30 min do fim da hemorragia, foi realizada nefrectomia bilateral para avaliação de necrose ou apoptose pela citometria de fluxo. Resultados: Os grupos que receberam parecoxibe (PCX/ sh e PCX/ H) apresentaram maior quantidade de necrose, menor quantidade de apoptose e maior quantidade de células viáveis renais pela citometria de fluxo. Conclusão: A dose única de parecoxibe gerou necrose renal, mas associou-se à proteção do órgão contra apoptose e à maior quantidade de células viáveis precocemente após hemorragia / Abstract: Introduction. Parecoxib has proven analgesic efficacy in the treatment of pain, however its adverse renal effects are unclear. The cyclooxygenase-2 inhibitors generate damage to the kidney through renal vascular dynamic changes, on the other hand they block the inflammation, and it is believed that inflammation is related to kidney damage. In cases of renal hypoperfusion, as in situation of hemorrhage and hypovolemia, there is direct reduction of nutrient input and ischemia stimulates the production of inflammatory mediators. The aim of this study was to evaluate whether a single dose of parecoxib influences the occurrence of apoptosis or necrosis in kidneys of rats submitted to hemorrhage. Methods. Twenty-four adult Wistar rats anesthetized with sevoflurane were randomly distributed into four groups (n=6): placebo/ no hemorrhage (plac/ nh), parecoxib/ no hemorrhage (PCX/ nh); placebo/ hemorrhage (plac/ H) and parecoxib/ hemorrhage (PCX/ H). The animals received single intravenous bolus of parecoxib, 20mg/kg, or placebo according to the group distribution. The animals in groups with hemorrhage suffered bleeding corresponding to 30 % of volemia during 20 min. Eighty min after the administration of parecoxib or placebo and 30 minutes after the end of the hemorrhage period, bilateral nephrectomy was performed to assess necrosis or apoptosis by flow cytometry. Results. The groups which received parecoxib (PCX/ nh and PCX/ H) showed a higher amount of renal necrosis, minor amounts of apoptosis, and higher amount of viable cells by flow cytometry. Conclusion. A single dose of parecoxib generated renal necrosis, but was associated with kidney protection against apoptosis and with increased number of viable cells early after hemorrhage / Doutor

Orientador: Luiz Cláudio Nogueira Mendes / Banca: Ricardo Velludo Gomes de Soutello / Banca: João Barbudo Filho / Resumo: Objetivou-se com esse experimento avaliar o efeito na temperatura corpórea de ovinos lanados, em diversos pontos do corpo, antes e após tosquia, realizada em dez animais de cada grupo vinte dias após o início do experimento, em três condições de manejo: sem sombreamento (SS), com sombreamento parcial (SP) e com sombreamento total (ST). Foram utilizadas quarenta e cinco fêmeas ovinas mestiças Suffolk, com idade superior a 24 meses, identificada individualmente, não tosquiada há pelo menos três anos, criadas todas a pasto, divididas aleatoriamente em três grupos. O manejo dos animais quanto a instalações, piquetes, conduta de aferição das temperaturas, alimentação, suplementação mineral foi idêntico para os três tratamentos. Foram realizadas mensurações diárias das temperaturas com uso de termômetro infravermelho, sendo a luz infravermelha posicionada nas regiões da fronte, nuca, porção interna e externa da lã e períneo; a temperatura retal foi obtida com termômetro clínico de mercúrio. As aferições foram realizadas em três momentos do dia: 7h, 14h, e 17h, durante quarenta dias. A temperatura ambiente e umidade relativa do ar foram anotadas utilizando-se um termohigrômetro. Observou-se diferença significativa nos valores médios de temperatura retal dos animais tosquiados no Grupo SS, no momento 7h; nas médias das temperaturas externas da lã houve diferença significativa entre o Grupo ST e os demais, no momento 7h, e, entre os três grupos no momento 14h; as médias das temperaturas aferidas na fronte foram significativamente diferentes no Grupo SS em relação aos demais, nos momentos 7h, 14h e 17h, nos animais tosquiados, sendo que nos animais com lã o Grupo ST diferiu significativamente dos outros dois no momento 7h, e o Grupo SS diferiusignificativamente dos demais no momento... (Resumo completo, clicar acesso eletrônico abaixo) / Abstract:The objective of this experiment was to evaluate the effect on body temperature of wool sheep in various parts of the body before and after shearing in three management conditions: with no shading (NS), with partial shading (PS) and total shading (TS). Were used forty-five Suffolk crossbred ewes, aged 24 months, identified individually, not shorn at least three years, created all the pasture, divided randomly into three groups. The management of animals and facilities, paddocks, conduct of measurement of temperature, food, mineral supplementation was identical for the three treatments. Measurements were performed daily temperatures with a non-contact infrared thermometer on the forehead, neck, internal and external of the wool, the perineum, the rectal temperature was obtained with the mercury thermometer. Measurements were performed at three times of the day: 7h, 14h, and 17h, for forty days. Ambient temperature and relative humidity were recorded using a thermohygrometer. There was significant difference in mean rectal temperature of animals shorn in the NS group at the time 7am, in the mean external temperatures of the wool was no significant difference between group TS and the other at the time 7 am, and between the three groups in time 14h, the mean temperatures measured on the forehead was significantly different in the NS group compared to the other, at times 7h, 14h and 17h, shorn animals, and animals with wool in the TS group differed significantly from the other two at the time 7am and the NS group was significantly different from other moments in 14h and 17h, in the neck region, average temperatures were significantly different between the three groups, at times 7am and 14pm. In animals with and without wool, the temperatures of the perineal region were significantly different in the NS.. (Complete abstract click electronic access below) / Mestre

Orientador: Mariana Gobbo Braz / Coorientador: José Reinaldo Cerqueira Braz / Banca: Yara Marcondes Machado Castiglia / Banca: Maria Angela Tardelli / Banca: João Paulo Marcondes / Banca: Clarissa Scolastici / Resumo: Apesar da eficácia e segurança demonstradas no uso clínico dos anestésicos inalatórios, existem ainda algumas questões a serem respondidas sobre genotoxicidade e efeitos no equilíbrio redox celular. Poucos estudos têm avaliado os danos no material genético ou o estresse oxidativo em pacientes submetidos a procedimento cirúrgico sob uso do anestésico sevoflurano. Para melhor entender os possíveis efeitos tóxicos deste agente, o presente estudo objetivou avaliar os danos oxidativo no DNA, a peroxidação lipídica e a defesa antioxidante plasmática durante e após a anestesia geral balanceada mantida com sevoflurano, em 15 pacientes adultos sem comorbidades, os quais foram submetidos a cirurgias eletivas de pequeno porte. As amostras de sangue venoso foram coletadas antes da anestesia; após a indução anestésica e imediatamente antes da cirurgia; 2 horas após o início da anestesia e no dia seguinte a cirurgia. Os danos no DNA foram avaliados em linfócitos periféricos utilizando o teste do cometa com as enzimas formamidopirimidina-DNA glicosilase (fpg) e endonuclease III (endo III) para detecção de lesões em purinas e pirimidinas oxidadas, respectivamente. O malonaldeído (MDA) e a defesa antioxidante plasmática foram detectados por fluorescência. Os resultados mostraram que não houve aumento nos danos do DNA ou oxidação de bases entre os momentos avaliados. A anestesia balanceada com sevoflurano não alterou os níveis de MDA e a defesa antioxidante do plasma manteve-se inalterada durante e após a anestesia. Em conclusão, o presente estudo demonstrou, pela primeira vez, que o sevoflurano não leva à oxidação de material genético ou de lipídios e não altera a capacidade antioxidante do plasma durante e após a anestesia balanceada em pacientes sem comorbidades submetidos a cirurgias minimamente invasivas / Abstract: Despite of the anesthetics effectiveness and safety in clinical use, there are some questions to be answered concerning their genotoxicity and effects on cellular redox balance. Only a few studies have evaluated DNA damage or oxidative stress in patients during surgical procedure with the volatile anesthetic sevoflurane. To further understand the possible toxic effects of this agent, the current study aimed to evaluate oxidative DNA damage, lipid peroxidation and plasma antioxidant defense during and after general balanced anesthesia maintained with sevoflurane in 15 adult patients without comorbidities who underwent elective minor surgery. The venous blood samples were collected at baseline-before anesthesia; after anesthesia induction and immediately before surgery; 2 h after the beginning of anesthesia; and on the day following surgery. DNA damage was detected in peripheral lymphocytes using the comet assay, and the enzymes formamidopyrimidine-DNA glycosylase (fpg) and endonuclease III (endo III) were used to recognize oxidized purine and pyrimidine lesions, respectively. Plasma malondialdehyde (MDA) and antioxidant defense were detected by fluorescence. The results showed no increase in DNA damage or base oxidation among the time points evaluated. Balanced anesthesia with sevoflurane did not alter MDA levels, and plasma antioxidant defense was unchanged during or after anesthesia. In conclusion, this study showed, for the first time, that sevoflurane does not lead to oxidation in genetic material or lipids, and does not alter the antioxidant status during or after balanced anesthesia in patients without comorbidities undergoing minimally invasive surgeries / Doutor

Orientador: Elaine Marisa Ganem / Banca: Yara Marcondes Machado Castiglia / Banca: Lais Helena Navarro e Lima / Banca: Luciana Calvalcante Lima / Banca: Ana Maria Menezes Caetano / Resumo: Introdução O alívio da dor é uma das atribuições do anestesiologista. Dentre os fármacos utilizados com esta finalidade inclui-se a cetamina (bloqueador do receptor Nmetil D aspartato). Ela pode ser administrada por diversas vias dentre as quais a subaracnoidea e a peridural. Resultados de pesquisas clínicas e experimentais mostraram que a cetamina S (+) foi eficaz no alívio da dor pós-operatória quando introduzida no espaço peridural. Contudo, ainda pouco se sabe sobre sua administração no espaço subaracnoideo. Foram descritas lesões neurológicas no tecido medular de seres humanos e animais quando se utilizou a cetamina com conservantes, no espaço subaracnoideo e, as mesmas lesões foram descritas, em animais, com o fármaco desprovido de conservantes. Objetivo: avaliar os efeitos que a cetamina S (+) a 5% sem conservantes, administrada pela via subaracnoidea em punção única, determina sobre a medula espinal e as meninges de coelhos. Método: Vinte coelhos adultos jovens, fêmeas, pesando entre 3500 a 5000 gr com comprimento de coluna vertebral entre 34 e 38 cm foram divididas, por sorteio, em dois grupos (G): G1 solução fisiológica 0,9%, G2 cetamina S (+) 5% em volume de 5μg por cm de coluna (1,8 μl). Após anestesia venosa com cetamina e xilazina foi realizada punção subaracnoidea em S1-S2 guiada por ultrassom e injetada a solução sorteada. Os animais permaneceram em cativeiro por 21 dias sob observação clínica e foram sacrificados por decapitação e retirada a porção lombo-sacral da medula espinal para exame histológico [Hematoxilina e eosina (HE) e imuno-histoquímica para proteína glial fibrilar ácida (GFAP)]. Resultados: nenhum animal apresentou lesão histológica de tecido nervoso (raizes e medula) e meninges. Conclusão: Neste modelo experimental em coelhos a cetamina S (+) 5% sem conservante não desencadeou lesão neurológicas ou histológica na medula espinal e meninges / Abstract: Background: Pain relief is one of the tasks of the anesthesiologist . Among the drugs used for this purpose include the ketamine (blocker of N-methyl D aspartate receptor). It can be administered by various routes among which spinal and epidural. Results of clinical and experimental studies have shown that ketamine S (+) was effective in relieving postoperative pain when introduced into the epidural space. Almost nothing is known about his administration in the subarachnoid space. Neurological lesions were described in the medullary tissue of humans and animals when using ketamine S(+) 5% preservative free, the subarachnoid space, the same lesions have been reported in animals with the drug devoid of preservatives. Objective: To evaluate the effects of ketamine S (+) 5% preservative free, administered by the intrathecal route in single puncture , determines on the spinal cord and meninges of rabbits. Method: Twenty young adult female rabbits, weighing 3500-5000 g with entre34 spine length and 38 cm were divided by lot into two groups (G ): 0.9% saline G1 , G2 ketamine S (+) 5% by volume of 5μg per cm column (1,8 μl). After intravenous anesthesia with ketamine and xylazine spinal puncture was performed in S1 - S2 ultrasound guided and injected a random solution. The animals remained in captivity for 21 days under medical observation and were sacrificed by decapitation and removal of the lumbosacral portion of the spinal cord for histologic examination [hematoxylin and eosin (HE)] and immunohistochemistry for glial fibrillary acidic protein (GFAP). Results: No animal showed histological lesions of nerve tissue (roots and cord) and meninges. Conclusions: In this experimental model in rabbits ketamine S (+) 5% preservative free triggered no neurological or histological lesions in the spinal cord and meninges / Doutor

Orientador: Yara Marcondes Machado Castiglia / Banca: Leandro Gobbo Braz / Banca: Selma Maria Michelin Matheus / Banca: Leopoldo Muniz da Silva / Banca: Giane Nakamura / Resumo: / Abstract: / Doutor

Dissertação (mestrado) - Universidade Federal de Santa Catarina, Centro de Ciências Biológicas, Programa de Pós-Graduação em Neurociências, Florianópolis, 2011 / Made available in DSpace on 2012-10-26T07:25:40Z (GMT). No. of bitstreams: 1 291802.pdf: 1475983 bytes, checksum: 286ced70d413df7d52effecb7dbadf31 (MD5) / A síndrome da dor complexa regional (SDCR) pode ter início após um trauma, geralmente em uma extremidade, resultando em dor, disfunção da regulação vasomotora e sudomotora, mudanças tróficas na pele e anormalidades motoras. A SDCR pode ocorrer na ausência ou presença de lesão nervosa (tipo I ou II, respectivamente). Apesar de estudada, a SDCR ainda necessita de uma definição precisa que engloba o entendimento de sua patofisiologia. Diversos estudos demonstram que o exercício físico regular é capaz de beneficiar, neste contexto, positivamente a saúde diminuindo a dor ocasionada pela SDCR tipo I. Desta forma, os objetivos deste estudo foram: (1) caracterizar o modelo de SDCR tipo I em camundongos (Swiss) adultos machos através de análises bioquímicas, farmacológicas e comportamentais e (2) observar alguns efeitos do exercício físico de natação de alta intensidade neste modelo experimental. Para tanto, sob anestesia (hidrato de cloral # 7%, 0,6 mg/kg), os animais foram submetidos à isquemia prolongada através de um torniquete na pata traseira direita por um período de 3 horas que foi logo em seguida removido para permitir a reperfusão, induzindo a dor pós isquemia crônica (DPIC). O nervo tibial foi analisado através de microscopia óptica e foi detectada ausência de dano nervoso, demonstrando que o modelo trata da SDCR tipo I. Os animais submetidos à isquemia apresentaram inicialmente sinais de inflamação, com hiperemia e edema que duraram quatro a cinco dias, bem como hipersensibilidade ao frio (placa fria, 10 °C) por um período de quatro semanas, quando comparados aos animais naive. A hipersensibilidade mecânica (testada através de filamentos de von Frey) também foi evidente por quatro semanas e foi diminuída por anti-inflamatórios como ibuprofeno e dexametasona se tratada agudamente. Entretanto, em estágios crônicos, apenas os anti-neuropáticos (morfina ou gabapentina) e o antioxidante N-acetil-L-cisteína (NAC) foram capazes de reduzir a hipersensibilidade. No sexto dia após a lesão, a isquemia e reperfusão (IR) também aumentou os níveis de tióis, mas não os de citocinas na pele da pata e na medula dos camundongos. Na segunda fase do trabalho, foram observados os efeitos da natação sobre a DPIC, assim, comparou-se os grupos que realizaram o exercício de natação por 30 minutos durante cinco dias antes (NIR), após (IRN) ou antes e após a IR (NIRN). O exercício de natação aumentou a hiperemia e o grupo IRN apresentou diminuição do edema da pata. Além disso, todos os grupos que foram submetidos ao exercício apresentaram redução da hipersensibilidade mecânica. O grupo NIRN também apresentou redução da hipersensibilidade térmica ao frio. Em conclusão, este estudo descreve primeiramente o perfil farmacológico, bioquímico e comportamental em camundongos com DPIC, modelo de SDCR tipo I; num segundo momento, mostra que o exercício de natação crônico de alta intensidade induz efeito anti-hipernociceptivo, sugerindo que este pode ser uma abordagem efetiva no tratamento da SDCR. / Complex regional pain syndrome-type I (CRPS-I) initiates after a trauma, usually in one of the limbs in which the patient develops pain, dysfunction of vasomotor regulation and sudomotor, trophical changes on skin and motor unction abnormalities. CRPS-I does not cause nerve injury while complex regional pain syndrome-type II damages the nerves. Although studies on CRPS can be found in the literature, a formal and precise definition and also a better understanding of its pathophisiology is required. Additionally, many studies show that regular exercising can positively bring health benefits including reduction of pain caused by CRPS-I. Thus, the objectives of this study were: (1) characterization of an animal model of CRPS type-I (called chronic post-ischemic pain # CPIP in mice) using biochemical, pharmacological and behavioral analysis and (2) observation of the effects of high intensity swimming exercise on animal model. CPIP was induced following prolonged hind paw ischemia by placing a tourniquet proximal to the ankle joint for three hours in an anesthetized mouse and removing it to allow reperfusion. Light-microscopic examination of the tibial nerve taken from the region proximal to the tourniquet revealed no signs of nerve damage. Mice presented initial inflammation, hyperemia and edema that lasted four or five days, as well as cold hypersensitivity (cold plate, 10 °C) for a period of four weeks. Mechanical hypersensitivity (von Frey hairs) was also evident for four weeks and could be relieved by anti-inflammatory drugs like ibuprofen and dexamethasone if treated acutely. However, in chronic stages, only antineuropathic drugs (morphine or gabapentine) or antioxidant N-acetyl-Lcysteine (NAC) were able to reduce hypersensitivity. CPIP also increased thiols levels but did not affect the levels of pro-inflammatory cytokines in both hind paw skin and spinal cord in mice. Furthermore, swimming exercise changed the pattern of hyperemia and edema and reduced both mechanical and cold hypersensitivity in CRPS-I mice. In conclusion, this study describes the pharmacological, biochemical and behavioral analysis in a model CRPS-I applied in mice; and also indicates that the exercise of swimming has some benefits in CPIP, suggesting that it can be an effective approach to treat CRPS-I.

Dissertação (mestrado) - Universidade Federal de Santa Catarina, Centro de Ciências da Saúde. Programa de Pós-Graduação em Farmácia. / Made available in DSpace on 2012-10-21T05:55:22Z (GMT). No. of bitstreams: 1 195296.pdf: 2670800 bytes, checksum: c49992a8a9b75af144b3c2287202d155 (MD5) / A agricultura moderna tem se tornado cada vez mais dependente da mecanização e do uso de insumos como os agrotóxicos. A utilização destes produtos em larga escala, combinada às diferentes formas pelas quais o ser humano pode ser exposto aos mesmos, tem resultado em freqüentes contaminações humanas e ambientais. A literatura científica tem associado a exposição crônica aos agrotóxicos com conseqüências para a saúde humana, tais como alterações hematológicas, imunológicas e o desenvolvimento de neoplasias. O glifosato é um herbicida sistêmico, pós-emergente e não seletivo, derivado da glicina, amplamente utilizado no Brasil para o controle de cerca de 70 espécies de plantas daninhas perenes e 80 espécies de anuais e normalmente é comercializado na forma de sal de isopropilamina. Toxicologicamente é classificado como produto da Classe IV - Pouco Tóxico, sendo sua DL50 para ratos de 4.870 mg/kg de peso corporal. Quanto a periculosidade ambiental pertence a Classe III - Produto Perigoso. Dados da literatura referentes aos efeitos deste produto sobre a saúde humana são contraditórios e em alguns aspectos como o imunológico, escassos. Em consonância com o exposto o objetivo deste trabalho foi avaliar o efeito da exposição crônica ao glifosato sobre o fígado, sangue periférico, medula óssea e sistema imunológico, em ratos. Para isso três grupos de animais receberam o agrotóxico por via oral em doses equivalentes a 1/1000, 1/100 e 1/10 da DL50 do produto, em intervalos de 48 horas, por um período de 75 dias. No grupo controle foi administrado água. Ao término do período foram coletadas amostras de sangue, fígado, medula óssea e linfonodos. Foram realizadas as seguintes análises: controle do ganho de peso, hemograma; dosagem de uréia, medida da atividade sérica das enzimas aspartato aminotranferase (AST) e alanina aminotransferase (ALT); análises histológicas do fígado e da medula óssea; contagem de células CD4+ e CD8+ no sangue periférico e linfonodos. Os animais tratados apresentaram redução no ganho de peso, alterações no hemograma, aumento dos níveis séricos das enzimas e da uréia, aumento da reticulina e do número de células de Kupffer no fígado, redução de células CD4+ e CD8+ no sangue periférico, redução de células CD4+ e aumento de células CD8+ no linfonodo e redução da relação CD4+/CD8+ neste último, o qual apresentou-se hipertrofiado. Os resultados demonstraram que a exposição ao glifosato compromete vários parâmetros do sangue periférico, a função hepática e o sistema imune.