Coordenação de Aperfeiçoamento de Pessoal de Nível Superior / Exercise can represent a physical stress that disrupts the homeostasis. Elevated muscle oxygen consumption increases reactive oxygen species (ROS) and inflammatory proteins production, leading to oxidative stress and systemic inflammation. Nowadays, both caffeine, a commonly compound present in many commercial beverages and medicines, and the non-steroidalanti-inflammatory drugs (NSAIDs), including diclofenac, have been used in sports competitions events. Considering that athletes intent to improve their sports performance, mainly on high intensity competitions and short duration that can lead to inflammation and pain, a great number of athletes consume caffeine and NSAIDs due they ergogenic effects or avoid inflammation and loss of performance. However, little is known about the physical exercise and concomitant use of caffeine/diclofenac. Considering the sport specificity, most authors have focused exercise in skeletal muscle studies. In view of the important role of liver during physical activities, one of the goals of this work was to analyze the effect of caffeine and diclofenac on cell damage, hepatic inflammation and oxidative stress markers in exercised rats. In two papers, we highlight the effect of caffeine on the oxidative damage, inflammation and tissue adaptation in liver, muscle and plasma of training rats. The experimental protocol included four groups: sedentary-saline, sedentary-diclofenac, exercise-saline, and exercise-diclofenac. The exercised groups performed a 4-week aerobic swimming training protocol and were treated with saline or caffeine (6 mg/kg). We found significant changes on citrate synthase (CS), superoxide desmutase (SOD), glutathione peroxidase (GPx) and acetylcholinesterase (AChE) enzyme activities and aspartate aminotransferase (AST) and thiobarbituric acid reactive substances (TBARS) levels after training. These modifications were reverted by caffeine treatment. In the manuscript, we highlight the effects of diclofenac (10 mg/kg) on the inflammation induced by an acute exercise. Rats were divided in 4 groups: control-saline (CS), control-diclofenac (CD), exercise-saline (ES) and exercise-diclofenac (ED). The animals from the C and E groups received saline, while the groups CD and ED received diclofenac treatment during seven days previous to the exercise bout, which consisted in an acute bout of eccentric exercise lasting 90 min. We identified an increase in both gene expression and levels of proteins TLR4, MyD88, TRIF, NFκB, p65, IL-6, TNF-α and iNOS in the exercised groups. Diclofenac treatment blunted these responses exercised-induced. Taken together, the data indicate that diclofenac and caffeine interfere on oxidative and inflammation responses induced by physical exercise, altering the adaptive mechanisms of tissues under exercise. / O exercício físico pode representar um tipo de estresse por alterar a homeostase corporal. O elevado consumo de oxigênio pelo músculo esquelético durante o exercício físico aumenta a produção de espécies reativas de oxigênio (EROs) e proteínas inflamatórias, desencadeando estresse oxidativo e inflamação sistêmica. Atualmente, a cafeína, um composto presente em diversas bebidas e medicamentos, e os anti-inflamatórios não-esteroidais (AINEs), incluindo o diclofenaco, têm sido amplamente usados em competições esportivas. Considerando que os atletas treinam com o objetivo de melhorar o seu desempenho esportivo, principalmente em provas de alta intensidade e curta duração e que essas podem levar à sensação de dor e processo inflamatório, um grande número desses atletas usa tanto cafeína e AINEs como recursos ergogênicos ou até mesmo para evitar perdas de performance em suas provas. No entanto, pouco se sabe sobre os efeitos da associação entre treinamento físico e o uso concomitante de cafeína/diclofenaco nos tecidos. Levando em consideração a especificidade esporte, a maioria dos estudos são referentes a associação exercício físico e músculo esquelético. Entretanto, as respostas adaptativas ao exercício físico não são restritas ao tecido muscular. Considerando o importante papel do fígado durante a atividade física, um objetivo desta tese foi analisar os efeitos da cafeína e, em um segundo momento, do diclofenaco, sobre marcadores hepáticos de estresse oxidativo, dano tecidual e inflamação em ratos treinados. Nos artigos destacamos o papel da cafeína em modular as respostas de dano, estresse oxidativo, inflamação e adaptação causadas pelo treinamento físico em fígado, músculo e plasma. O protocolo experimental foi realizado com 4 grupos distintos: sedentário-salina, sedentário-cafeína, exercício-salina e exercício-cafeína. Os grupos exercício foram submetidos a 4 semanas de treinamento aeróbio de natação e os grupos tratados foram suplementados com cafeína (6 mg/kg), durante o treinamento. Identificamos mudanças significativas na atividade das enzimas citrato sintase (CS), superóxido desmutase (SOD), glutationa peroxidase (GPx) e acetilcolinesterase (AChE), e nos níveis da aspartato aminotransferase (AST) e substâncias reativas ao ácido tiobarbitúrico (TBARS) após treinamento. Todas essas alterações foram revertidas pelo tratamento com cafeína. No manuscrito destacamos o papel modulador do diclofenaco sobre a inflamação gerada por exercício agudo. O protocolo consistiu em uma sessão de 90 mim de exercício excêntrico agudo em esteira em ratos tratados previamente com salina ou diclofenaco (10mg/kg) (grupos: controle-salina, exercício-salina, controle-diclofenaco, exercício-diclofenaco). Após o exercício, foi identificado um aumento na expressão gênica e níveis da proteínas TLR4, MyD88, TRIF, NFκB p65, IL-6, TNF-α e iNOS. Essas respostas geradas pelo exercício excêntrico foram bloqueadas pelo tratamento com diclofenaco. Os dados obtidos nos permitem concluir que o diclofenaco e a cafeína interferem nas respostas adaptativas de cunho oxidativo/inflamatório geradas pelo exercício físico, podendo assim alterar os mecanismos de hormesis dos tecidos ao exercício físico.

Coordenação de Aperfeiçoamento de Pessoal de Nível Superior / The regular practice of physical exercise is linked to a good life quality. However, each physical bout has consequences named reactive oxygen species (ROS) production, low-grade inflammation, delayed onset muscle soreness (DOMS), impaired performance and the fatigue. Those factors cause adaptation on skeletal muscle, brain and liver and also, in a chronic practice, contribute to physical condition improvement and sport performance, causing an delay on fatigue. Besides, there are evidences for use of Non-Steroidal Anti-inflammatory Drugs (NSADs) with the objective of diminishing soreness and achieve the same objective. Considering that athletes get training with objective of improve their performance, principally in high intense and short duration exercises and because this could lead to soreness and low-grade inflammation, a great number of athletes uses NSADs to avoid diminishing performance. In this sense, the objective of this thesis was investigating the effects of aerobic training in rats on time to exhaustion in three exhaustive bouts. Inflammatory markers and ROS production acetylcholinesterase (AChE) activity enzyme was investigate and how ibuprofen administration acts on same parameters, on DOMS and in exhaustive bouts in the cortex and muscle. Another objective was evaluated the training adaptations on liver, on oxidative stress markers and mitochondrial viability and how this organ reacts against exhaustive exercise in rats. The manuscript showed that physical exercise (swimming for 6 weeks) mitigates the acetylcholinesterase (AChE) activity enzyme on cerebral cortex and on levels of Tumoral Necrosis Factor alpha (TNF-α) and Interleukin 1 beta (IL-1β) per se on skeletal muscle. Besides, the ibuprofen administration (15 mg/kg, 9 days), per se and in combination with training, increase time to exhaustion on third exhaustive bout, diminished the AChE activity on cerebral cortex and the TNF-α e IL-1β content on skeletal muscle and in total reactive species content in both tissues. On the article, physical exercise (swimming for 6 weeks) increased reduced glutathione (GSH) and reduced/oxidized glutathione ratio (GSH/GSSG) content and Superoxide dismutases (SOD) activity, decreased lipidic peroxidation (TBARS) levels and increased mitochondrial viability (MTT) on liver. Besides, the adaptations caused by aerobic training preserved high GSH levels, protected oxidized glutathione (GSSG) levels, against TBARS and Protein carbonilation increases in addition to the maintenance of MTT reduction, increased membrane potential and protects ROS production. Considering data on this thesis, ibuprofen administration could has used as ergogenic aid on exhaustive bouts delaying fatigue and aerobic training causes mitochondrial adaptations on liver that support exhaustive bouts. / A prática regular de exercícios físicos está intimamente ligada a uma boa qualidade de vida. Entretanto, cada sessão de treino tem como consequência a produção de espécies reativas de oxigênio (EROs), o processo inflamatório sub-clínico, a dor muscular tardia (DMT), diminuição do desempenho e a fadiga. Esses fatores causam adaptações na musculatura esquelética, cérebro e fígado e, consequentemente, de uma forma crônica, contribuem para a melhora do condicionamento físico e do desempenho esportivo o que protela o aparecimento da fadiga. Além disso, existem evidências do uso de anti-inflamatórios não esteroidais (AINEs) no sentido de diminuir a sensação de dor para atingir o mesmo objetivo. Considerando que os atletas treinam com o objetivo de melhorar o seu desempenho esportivo, principalmente em provas de alta intensidade e curta duração e que essas podem levar à sensação de dor e processo inflamatório, um grande número desses atletas usa AINEs para evitar perdas em suas provas. Neste sentido, o presente trabalho teve como objetivo investigar os efeitos do treinamento aeróbico em ratos sobre o tempo à exaustão em três testes exaustivos. Foram avaliados os marcadores inflamatórios e de estresse oxidativo, atividade da enzima acetilcolinesterase (AChE), assim como a administração de ibuprofeno age nos mesmos parâmetros e na DMT no córtex e músculo. Outro objetivo desse trabalho foi avaliar as adaptações do treinamento físico no fígado, nos marcadores de estresse oxidativo e viabilidade mitocondrial e como esse órgão reage frente a exercícios à exaustão em ratos. No manuscrito demonstrou-se que o treinamento aeróbico (natação 6 semanas) causou uma diminuição da atividade da enzima acetilcolinesterase (AChE) no córtex e do conteúdo de Fator de Necrose Tumoral alfa (TNF-α) e Interleucina 1 Beta (IL-1β) per se no músculo. Além disso, verificou-se que a administração de ibuprofeno (15 mg/kg, por 9 dias), per se e em combinação com o exercício, aumentou o tempo à exaustão, causou uma diminuição da atividade da AChE no córtex, diminuição do conteúdo TNF-α e IL-1β no músculo e no conteúdo espécies reativas totais nos dois tecidos. No artigo verificou-se que o treinamento aeróbico (natação 6 semanas) causou aumento no conteúdo de glutationa reduzia (GSH) e da razão glutationa reduzida/oxidada (GSH/GSSG), na atividade da enzima superóxido dismutase, diminuiu a peroxidação lipídica e aumentou a viabilidade mitocondrial no fígado. Além disso, as adaptações causadas pelo treinamento mantiveram os níveis elevados de GSH, protegeu do aumento dos níveis de GSSG, e do aumento de peroxidação lipídica e de carbonilação proteica, além de manter a redução de metiltetrazol, aumentar o potencial de membrana e de proteger de um grande aumento de produção de ERO. Considerando os dados apresentados no presente estudo, conclui-se que a administração de ibuprofeno pode ter um papel ergogênico na realização de testes exaustivos, adiando a fadiga e que o fígado sofre adaptações mitocondriais pelo treinamento aeróbico que auxiliam na realização dos mesmos testes.

The anti-inflammatories no esteroidais (AINEs) they are the drugs of larger prescription all over the world, for humans and for animals. They combat the inflammation, the pain, the temperature increase, could also inhibit the aggregation plaques. They act inhibiting the production of the acid araquidônico and ciclooxigenases (COXs) decreasing like this, the prostaglandins production. They become separated in inhibitors no selective for COX-1 and 2, being those the most traditional; and in selective inhibitors for COX-2, considered more modern drugs. AINEs no selective they reduce the production of all of PGs, constituent or not. Already the selective ones just inhibit harmful PGs, that you/they act in the inflammatory reaction, preserving PGs that maintains, for instance, the protection to the stomach and the renal perfusão. In that study the hepatic function of Rattus norvegicus was evaluated after the use of AINE no selective, cetoprofeno and of selective AINE, valdecoxib. The doses administered to the animals were calculated according to the scaling allometric. The allometric is a method that allows to extrapolate dosage indications of more common species and known for species where studies farmacokinects of the drug was not accomplished in subject, taking into account, among other, the corporal size, the metabolism and the basal tax. After the use of AINEs, the animals were appraised for biochemical methods of alanina amino transferase (ALT), aspartato amino transferase (AST) and alkaline fosfatase (FA), and also, for macroscopic and microscopic evaluation of the liver and right kidney, in different times, after you finish them administrations of the drugs, according to the group which the animal belonged. Among other observations it can be told, that the cetoprofeno, can cause the death of mice, according to the allometric already in the second day of administration of the drug; and that the AINE valdecoxib, doesn't produce macroscopic and microscopic alterations worthy of note, in organs as the liver and kidney of Rattus norvegicus / Os antiinflamatórios não esteroidais (AINEs) são as drogas de maior prescrição em todo o mundo, tanto para humanos como para animais. Combatem a inflamação, a dor, a hipertermia, podendo também inibir a agregação plaquetária. Atuam inibindo a produção do ácido araquidônico e ciclooxigenases (COXs) diminuindo assim, a produção de prostaglandinas. Dividem-se em inibidores não seletivos para COX-1 e 2, sendo esses os mais tradicionais; e em inibidores seletivos para COX-2, considerados drogas mais modernas. AINEs não seletivos diminuem a produção de todas as PGs, constitutivas ou não. Já os seletivos inibem apenas as PGs deletérias, que atuam na reação inflamatória, preservando PGs que mantém, por exemplo, a proteção ao estômago e a perfusão renal. Nesse estudo avaliou-se a função hepática de Rattus norvegicus após a utilização do AINE não seletivo, cetoprofeno e do AINE seletivo, valdecoxib. As doses administradas aos animais foram calculadas segundo a escala alométrica. A alometria é um método que permite extrapolar indicações posológicas de espécies mais comuns e conhecidas para espécies onde não foram realizados estudos farmacocinéticos da droga em questão, levando em conta, entre outros, o tamanho corporal, o metabolismo e a taxa basal. Após a utilização dos AINEs, os animais foram avaliados por métodos bioquímicos de alanina amino transferase (ALT), aspartato amino transferase (AST) e fosfatase alcalina (FA), e também, por avaliação macroscópica e microscópica do fígado e rim direito, em diferentes tempos, após as ultimas administrações das drogas, conforme o grupo a qual o animal pertencia. Entre outras observações pode-se relatar, que o cetoprofeno, pode causar a morte de ratos, segundo a alometria já no segundo dia de administração da droga; e que o AINE valdecoxib, não produz alterações macroscópicas e microscópicas dignas de nota, em órgãos como o fígado e rim de Rattus norvegicus

Conselho Nacional de Desenvolvimento Científico e Tecnológico / The effect of level of forage intake on blood flow and oxygen consumption (Experiment 1), and mesenteric infusion of ammonium bicarbonate (NH4HCO3), L-alanine or L-arginine on oxygen consumption and net flux of metabolites (Experiment 2) through the splanchnic (portal-drained viscera [PDV] plus liver (ST)) tissues were evaluated in sheep surgically implanted with chronic indwelling catheters into the mesenteric, portal and hepatic veins. In both experiments, blood flow was estimated by downstream dilution of p-aminohippurate. In experiment 1, three adult male Polwarth wethers (42±4.4 kg body weight (BW)), housed in metabolism cages and offered Tifton (Cynodon sp.) hay were used in a 3 x 3 Latin Square design. Treatments consisted of hay allowances of 7, 14 or 21 g dry matter (DM)/kg BW/day, offered in four equal daily meals, every 6 h. Blood flow across PDV was linearly (P<0.05) related to OM intake, whereas the hepatic-arterial and total ST blood flow were no affected. Oxygen expenditure by PDV was directly (P<0.05) related to OM intake, while oxygen consumption by the liver was not affected. Oxygen expenditure was linearly (P<0.05) related to blood flow across tissues for PDV, liver and total ST. The proportion of metabolizable energy (ME) intake spent as heat by PDV and total ST reduced when ME intake increased. In addition, this reduction occurred in a curvilinear manner as the difference between PDV and ST heat production reduced at increased ME intake. In experiment 2, four multicatheterized Polwarth wethers (40 ± 3.8 kg BW) fed 14 g DM of oat (Avena sativa) plus ryegrass (Lolium multiflorum Lam) hay/kg BW/day of Tifton hay were used in a 4 x 4 Latin Square design. Treatments were mesenteric vein infusion of 500 μL/min of saline solution (control) or a solution containing NH4HCO3, L-alanine or L-arginine. The net flux of glucose and urea through PDV and ST were not affected by treatments. Portal appearance and liver removal of N-NH3 were higher (P<0.05) with the NH4HCO3 infusion. The PDV and ST net flux of oxygen were not affected by treatments, whereas the hepatic oxygen consumption was higher in control treatment (P<0.05). The hypothesis that ureagenesis and/or gluconeogenesis increases hepatic energy spenditure was not observed in the present study. Methodological aspects are included in results discussion. / Foi avaliado o efeito do nível de consumo de forragem sobre o fluxo de sangue e utilização de O2 (Experimento 1), e da infusão mesentérica de bicarbonato de amônio (NH4HCO3), L-alanina ou L-arginina (Experimento 2) sobre a utilização de O2 e fluxo de metabólitos pelo sistema visceral (tecidos drenados pela veia porta (TDVP) e o fígado) em ovinos implantados cirurgicamente com catéteres permanentes nas veias mesentérica, porta e hepática. Em ambos experimentos o fluxo de sangue foi estimado pela técnica de diluição de p-aminohipurato. No experimento 1, três ovinos machos da raça Polwarth (42±4.4 kg de peso corporal (PC), alojados em gaiolas de metabolismo e alimentados com feno de Tifton (Cynodon sp.) foram utilizados em um delineamento Quadrado Latino 3 x 3. O feno foi oferecido nas quantidades de 7, 14 ou 21 g matéria seca (MS)/dia/kg de PC em quatro porções diárias iguais, a cada 6 h. O fluxo de sangue nos TDVP aumentou linearmente (P<0,05), mas o fluxo de sangue hepático-arterial e visceral total não foram afetados pelo aumento no consumo de forragem. O gasto de O2 pelos TDVP foi positivamente (P<0,05) relacionado com o consumo de matéria orgânica (MO). O gasto de O2 relacionou-se linearmente com o fluxo de sangue (P<0,05) nos TDVP, fígado e sistema visceral. A proporção de energia metabolizável (EM) consumida gasta como calor pelos TDVP e fígado diminuiu com o aumento no consumo de EM de forma curvilinear, sendo que a diferença entre a produção de calor visceral e dos TDVP reduziu com o aumento no consumo de EM. No experimento 2, quatro ovinos Corriedale (40 ± 3.8 kg PC), implantados com catéteres permanentes nas veias mesentérica, porta e hepática, alimentados com 14 g MS de feno de aveia (Avena sativa) e azevém (Lolium multiflorum Lam)/dia/kg de PC, foram utilizados em um delineamento Quadrado Latino 4 x 4. Os tratamentos consistiram da infusão na veia mesentérica de 500 μL/min de solução salina (controle) ou de uma solução contendo NH4HCO3, L-alanina ou L-arginina. Os fluxos portal e visceral total líquido de glicose e N-uréia não foram afetados significativamente pelos tratamentos. O fluxo de O2 pelos TDVP não diferiu entre tratamentos. Contudo, houve maior (P<0,05) gasto de O2 pelo fígado no tratamento controle. A hipótese de que a ureagênese e/ou a neoglicogênese impactam o gasto de energia pelo fígado não foi comprovada no presente estudo. Aspectos metodológicos são considerados na discussão destes resultados.

Submitted by Luciana Sebin (lusebin@ufscar.br) on 2016-09-19T12:55:56Z No. of bitstreams: 1 TeseHABSP.pdf: 4918857 bytes, checksum: fde7822ef1d8c23c0e0c60d9ccaf8152 (MD5) / Approved for entry into archive by Marina Freitas (marinapf@ufscar.br) on 2016-09-20T18:13:37Z (GMT) No. of bitstreams: 1 TeseHABSP.pdf: 4918857 bytes, checksum: fde7822ef1d8c23c0e0c60d9ccaf8152 (MD5) / Approved for entry into archive by Marina Freitas (marinapf@ufscar.br) on 2016-09-20T18:13:44Z (GMT) No. of bitstreams: 1 TeseHABSP.pdf: 4918857 bytes, checksum: fde7822ef1d8c23c0e0c60d9ccaf8152 (MD5) / Made available in DSpace on 2016-09-20T18:13:53Z (GMT). No. of bitstreams: 1 TeseHABSP.pdf: 4918857 bytes, checksum: fde7822ef1d8c23c0e0c60d9ccaf8152 (MD5) Previous issue date: 2015-12-18 / Fundação de Amparo à Pesquisa do Estado de São Paulo (FAPESP) / In a previous study conducted by our group, it was noticed that fluoride (F) can induce changes in the expression of several liver proteins. Reports in the literature suggest that the changes caused by F in the body are dose- and time-dependent. The objective of this study was to analyze the effect of different F concentrations, exposure time to this ion and concomitant exposure to a high calorie diet in the metabolism of lipids and protein expression in the liver of rats. The study was divided into 2 steps. The first step included 72 21-day-old male Wistar rats that were divided into 2 groups (n=36) according to the diet administered (AIN-93M and Presence). Each group was further divided according to the duration of the treatment (20 or 60 days). In addition, each these was divided into 3 subgroups (n=6), according to the concentration of F administrated in the drinking water, as follows: 0 mg/L (control), 15 mg/L or 50 mg/L. After the experimental period, the animals were anesthetized and the liver and blood were collected. F analysis in plasma and liver tissue was done. Part of the liver was fixed for histological analysis. Lipids were analyzed in plasma and triglycerides were analyzed in the liver. Expressions of proteins were evaluated in the liver by Western blotting. In the second step the only Presence diet were use and the groups experimental the same as previously described. At the end of experimental period, liver and plasma were collected. F concentration in plasma and liver were analyzed. Liver proteins were extracted and prepared for mass spectrometry analysis. Proteins were sequenced and identified. The analysis of F concentrations indicated a doseresponse increase in plasma, regardless the time of exposure to F and type of diet. F concentrations in the liver were higher in the groups receiving 50 ppm F in respect to control. Administration of F altered the lipid profile, with a reduction in TGA in plasma and increase in HDL when the hypercaloric diet was used. The expression of GRP78, ERP29 and SOD2 and Apo-E was altered by F, under the influence of time and type of diet administered. For the groups receiving 50 mgF/L, it was observed an increase in the concentration of proteins related to the defense against oxidative stress and ER stress. For the group that received the concentration of 15 mgF/L, changes in structural proteins, mitochondrial proteins and proteins related to cell proliferation were observed, depending on the time of administration. The results suggest an adaptive mechanism of liver upon exposure to F, which seems to be related to the activation of proteins related to maintenance of homeostasis and that fight against oxidative stress and ER stress caused by this ion. / Em trabalho prévio realizado pelo nosso grupo foi observado que o fluoreto (F) pode provocar alterações na expressão de várias proteínas hepáticas. Relatos na literatura sugerem que as alterações causadas pelo F no organismo são dose e tempo-dependentes. Assim, o objetivo deste trabalho foi analisar o efeito da administração de diferentes concentrações de F, do tempo de exposição a este íon e da exposição concomitante a uma dieta hipercalórica no metabolismo de lipídios e expressão de proteínas hepáticas em ratos. O trabalho foi realizado em 2 etapas. Na primeira, foram utilizados 72 ratos Wistar machos com 21 dias, que foram divididos em 2 grupos (n=36) de acordo com o tipo de dieta (AIN-93M ou Presence), então subdividido em 2 grupos (n=18) de acordo com o tempo de tratamento (20 ou 60 dias). Cada grupo foi dividido em 3 subgrupos (n=6), de acordo com a dose de fluoreto a ser administrada através da água de beber, a saber: 0 mg/L, 15 mg/L ou 50 mg/L. Decorridos os períodos experimentais o fígado e o sangue foram coletados. Foi realizada a análise de F no plasma e tecido hepático. Parte do fígado foi fixado para a confecção das lâminas para análise histológica. No plasma foi realizada a análise de perfil lipídico e no fígado, de triglicerídeos. Foi avaliada a expressão das proteínas hepáticas por Western Blotting. Na segunda etapa foi realizada apenas com a ração presence com os mesmos grupos experimentais da primeira etapa. Ao final do período experimental, o fígado e o plasma foram coletados. A concentração de F no plasma e no fígado foram analisada. Foi realizada a extração de proteínas e preparação das proteínas do fígado para espectrometria de massa, sendo então sequenciadas e identificadas. A análise das concentrações de F indicaram um aumento dose-resposta no plasma, independente do período administrado ou tipo de dieta. Já as concentrações de F no fígado foram maiores nos grupos que receberam 50 mg/L de F em relação ao controle. A administração de F alterou o perfil lipídico, com uma redução no TGA no plasma e aumento do HDL. As inclusões lipídicas no fígado foram reduzidas no grupo que recebeu 50 ppm F por 20 dias em conjunto com a dieta hipercalórica. A expressão da GRP78, ERP29, SOD2 e Apo-E foram alteradas pelo F, sob influência do tempo e dieta administrada. Para os grupos que receberam a concentração de 50 ppm F foi observado um aumento na concentração de proteínas relacionadas à a defesa contra o estresse oxidativo e do RE. Para o grupo que recebeu a concentração de 15 ppm F houve alterações estruturais, mitocondriais e relacionadas à proliferação, verificando-se um efeito depende do tempo. Desta forma, podemos concluir que o fígado possui um mecanismo de adaptação à ação do F e que o mesmo parece estar relacionado ao acionamento de proteínas referentes à homeostasia e contra o estresse oxidativo e do RE provocado por este íon. / FAPESP: 2011/17263-9

Made available in DSpace on 2015-05-14T12:59:52Z (GMT). No. of bitstreams: 1 arquivototal.pdf: 1129921 bytes, checksum: 37f8fc894c14f9259858a469ffccab56 (MD5) Previous issue date: 2012-02-14 / Coordenação de Aperfeiçoamento de Pessoal de Nível Superior - CAPES / Distilled sugarcane spirit is a genuine Brazilian beverage produced by distillation after fermentation of sugarcane and is appreciated not only in Brazil but worldwide. Although sugarcane spirit consumption is an important drive to increase alcoholism in Brazil, little is known about its chronic consumption on anxiety/anxiolytic effects. In the present study, we investigated whether the chronic consumption of sugarcane spirit is responsible for inducing anxiolytic-like effects. Male 3-3.5 month-old Swiss mice were exposed to the two-bottle free-choice paradigm for six weeks. Mice in group A were treated with sugarcane spirit + distilled water (n=16); in group B with ethanol + distilled water (n=15); and in group C (control) with distilled water + distilled water (n=14). The content of ethanol in beverages offered to groups A and B was 2% in the first week, 5% in the second week and 10% in the 4 remaining weeks. At the end of the treatments, animals were submitted to the elevated plus maze and the hole board test for assessment of anxiety-related behaviors. Serum aspartate aminotransferase (AST) and alanine amino transferase (ALT) levels were determined. The concentrations of ethanol, volatile acidity, esters, aldehydes, furfural, higher alcohols (n-propylic, isobutylic and isoamylics), methanol, copper and lead of the sugar cane were also determined. Time spent in open arms was increased in mice exposed to chronic ethanol (32±8 vs 7±2 s, p<0.05) or sugarcane spirit (36±9 vs 7±2 s, p<0.05), when compared to the control group. Conversely, the time spent in the closed arms was significantly decreased in animals drinking ethanol (183±6 vs 214±4 s, p<0.05) or sugarcane spirit (150±8 vs 214±4 s, p<0.05), when compared to the control group. In addition, the ratio of the time spent in the open arms over the total time spent in both closed and open arms was significantly increased (ethanol 34±8 vs 6±2 s; sugarcane spirit 43±12 vs 6±2 s, p<0.05. In the hole board test, mice treated with ethanol or sugarcane spirit showed an increase in the number of head-dipping behaviors, when compared to the control condition (control group: 16±1; ethanol: 27±2; sugarcane spirit: 31±3, p<0.05). In addition, motor activity in the hole board test was also increased in both ethanol and sugarcane spirit groups, when compared to the control condition (control group: 21±2; ethanol: 34±2; sugarcane spirit: 40±4, p<0.05). The chemical composition analysis showed that the concentrations of ethanol, volatile acidity, esters, aldehydes, furfural, higher alcohols (n-propylic, isobutylic and isoamylics), methanol, copper and lead in the sugarcane spirit were below the upper limits allowed by the Ministry of Agriculture regulations for the production of spirits. In conclusion, here we report that chronic consumption of sugarcane spirit produces liver injury and anxiolytic-like effects in mice. The more pronounced liver injury caused by sugarcane spirit as suggested by the AST/ALT ratio might have been caused by other organic compounds present in the sugarcane spirit while the anxiolytic-like effect seems to be caused by both ethanol and other compounds present in sugarcane spirit. The mechanisms by which sugarcane spirit leads to more rapid liver injury than does ethanol should be examined in future investigations. / A aguardente de cana-de-açúcar, uma bebida genuinamente brasileira obtida por fermentação seguida de destilação do mosto de cana de açúcar (Saccharum officinarum, L.), é apreciada não só no Brasil, mas mundialmente. Embora o consumo da aguardente de cana-de-açúcar seja um fator importante para o aumento do alcoolismo no Brasil, pouco se sabe sobre o seu consumo crônico na ansiedade ou efeitos ansiolíticos. No presente estudo, investigou-se se o consumo crônico da aguardente de cana-de-açúcar é responsável por induzir efeitos ansiolíticos. Camundongos Suíços machos com 3-3,5 meses de idade foram expostos ao paradigma de livre escolha com duas garrafas por seis semanas. Camundongos do grupo A foram tratados com aguardente de cana-de-açúcar + água destilada (n = 16); do grupo B com etanol +água destilada (n=15); e do grupo C (controle) com água destilada + água destilada (n = 14). O conteúdo de etanol nas bebidas oferecidas aos grupos A e B foi de 2% na primeira semana, de 5% na segunda semana e 10% nas 4 semanas restantes. No final dos tratamentos, os animais foram submetidos aos testes do labirinto em cruz elevado e da placa perfurada para avaliação dos comportamentos relacionados com a ansiedade. Os níveis séricos de aspartato aminotransferase (AST) e alanina aminotransferase foram determinados. As concentrações de etanol, acidez volátil, ésteres, aldeídos, furfural, álcoois superiores (n-propílico, isobutílico e isoamílico), metanol, cobre e chumbo da agurdente de cana-de-açúcar também foram determinados. O tempo gasto nos braços abertos foi aumentado em camundongos expostos ao consumo crônico de etanol (32±8 vs 7±2 s, p<0.05) ou de aguardente de cana-de-açúcar (36±9 vs 7±2 s, p<0.05), quando comparado ao grupo controle. Por outro lado, o tempo gasto nos braços fechados diminuiu significativamente nos animais que consumiram etanol (183±6 vs 214±4 s, p<0.05) ou aguardente de cana-de-açúcar (150±8 vs 214±4 s, p<0.05), quando comparado ao grupo controle. Além disso, a razão entre o tempo gasto nos braços abertos sobre o tempo total gasto em ambos os braços abertos e fechados foi significativamente aumentado (etanol 34±8 vs 6±2 s; aguardente de cana-de-açúcar 43±12 vs 6±2 s, p <0,05). No teste de placa perfurada, os camundongos tratados com etanol ou aguardente de cana-de-açúcar mostraram um aumento no número de mergulhos, quando comparado ao grupo controle (grupo controle: 16±1; etanol: 27±2; aguardente de cana-de-açúcar: 31±3, p<0.05). Além disso, a atividade motora no teste da placa perfurada também foi aumentada em ambos os grupos etanol ou aguardente de cana-de-açúcar, quando comparado ao grupo controle (grupo controle: 21±2; etanol: 34±2; aguardente de cana-de-açúcar: 40±4, p<0.05). A análise da composição química mostrou que as concentrações de etanol, acidez volátil, ésteres, aldeídos, furfural, álcoois superiores (n-propílico, isobutílico e isoamílico), metanol, cobre e chumbo na aguardente de cana-de-açúcar estavam abaixo do limite superior permitido pelos regulamentos do Ministério da Agricultura para a produção de bebidas destiladas. Em conclusão, aqui relatamos que o consumo crônico de aguardente de cana-de-açúcar produz lesão hepática e efeitos ansiolíticos em camundongos. A lesão hepática mais acentuada causada pela aguardente de cana-de-açúcar, como sugerido pela relação AST/ALT pode ter sido causado por outros compostos orgânicos presentes nesta bebida, enquanto o efeito ansiolítico parece ser causado tanto pelo etanol como pelos outros compostos presentes na aguardente de cana-de-açúcar. Os mecanismos pelos quais a aguardente de cana-de-açúcar leva a lesão hepática mais rápida do que o etanol devem ser examinados em futuras investigações.

Está bem estabelecido que o diabetes melito está associado a uma série de distúrbios clínicos que envolvem a alteração no metabolismo de carboidratos, proteínas e lipídios. Tem-se observado aumento importante da morbidade e mortalidade associadas a esta doença, sendo que dentre as causas, em ambos os tipos de diabetes (1 e 2), têm-se o aumento de fatores de risco, como o sobrepeso ou obesidade e o estilo de vida sedentário. A erva-mate (Ilex paraguariensis) tem apresentado grande potencialidade para utilização preventiva e terapêutica no diabetes graças à atividade biotiva dos seus compostos (metilxantinas, polifenóis e saponinas), capazes de alterar o metabolismo tecidual energético tanto em protocolos experimentais com animais de laboratório quanto humanos. Assim sendo, o objetivo deste trabalho foi elucidar o efeito da administração do chá de mate em ratos Wistar diabéticos, tendo como foco o metabolismo tecidual muscular e hepático. Para tanto, ratos Wistar machos foram submetidos a indução do diabetes experimental com injeção de estreptozotocina (65 mg/kg, i.p.) e posteriormente tratados com o extrato aquoso de erva-mate através da água de beber por 30 dias. Ao final do tratamento, os animais foram eutanasiados e os tecidos (soro, músculo, fígado e tecido adiposo retroperitoneal e epididimal) foram coletados para análise. / There is a well known relationship between metabolic disturbances and clinical events related to diabetes and a dangerous prevalence increase worldwide for both types of this disease (diabetes type 1 and 2). This enhancement is caused by overweight, sedentary lifestyle and other risk factors associated to occidental habits. Yerba-mate (Ilex paraguariensis) has been presented a potential use to preventive and therapeutical aspects of diabetes due to its bioactive fractions (methylxanthines, saponins and polyphenols), which have a capability to improve energetic metabolism in murine models and human. The aim of this study was to elucidate the effect of yerba-mate on hepatic and muscle energetic metabolism of diabetic rats. To perform the diabetes inducing protocol Wistar rats received streptozotocin (65mg/kg i.p.), then the mate treatment protocol was performed daily and offered as a drink tea. After a 30-day treatment, the animals were weighed and euthanized to evaluate metabolic parameters on liver, adipose tissue, muscle and serum.

Submitted by Franciele Moreira (francielemoreyra@gmail.com) on 2018-09-04T14:51:59Z No. of bitstreams: 2 Dissertação - Antônio Ferreira Garcia Neto - 2018.pdf: 2308172 bytes, checksum: d20521dd121eebd70319e9435511febd (MD5) license_rdf: 0 bytes, checksum: d41d8cd98f00b204e9800998ecf8427e (MD5) / Approved for entry into archive by Luciana Ferreira (lucgeral@gmail.com) on 2018-09-05T11:09:44Z (GMT) No. of bitstreams: 2 Dissertação - Antônio Ferreira Garcia Neto - 2018.pdf: 2308172 bytes, checksum: d20521dd121eebd70319e9435511febd (MD5) license_rdf: 0 bytes, checksum: d41d8cd98f00b204e9800998ecf8427e (MD5) / Made available in DSpace on 2018-09-05T11:09:44Z (GMT). No. of bitstreams: 2 Dissertação - Antônio Ferreira Garcia Neto - 2018.pdf: 2308172 bytes, checksum: d20521dd121eebd70319e9435511febd (MD5) license_rdf: 0 bytes, checksum: d41d8cd98f00b204e9800998ecf8427e (MD5) Previous issue date: 2018-07-27 / Fundação de Amparo à Pesquisa do Estado de Goiás - FAPEG / Best zootechnical indexes are important in beef cattle breeding. It is allied to the satisfactory conditions of creation and sanity. If not observed, metabolic imbalances may occur. The post mortem relationship between ruminal disturbances, hepatic abscesses and foot diseases was evaluated in beef cattle finished in pasture in a southwestern state of Goias. Then, an evaluation of the financial losses was carried out due to ruminal condemnations of cattle slaughtered in southwestern state of Goias. About the relationship, 970 male bovines, Nelore, 25 to 36 months of age, were evaluated by ante-mortem and post-mortem examination of the hoof, liver and rumen. It was considered the presence or absence of diseases. Data analyzed by the chi-square test (p <0.05). In the financial study, we considered the findings of 1,275 male bovine animals, Nellore, 25 to 36 months of age, 597 confined and 678 to pasture. Data analyzed by descriptive statistics. 363 cattle with hoof diseases, hepatic abscesses or ruminal disorders. 52 with hoof diseases, nine with hepatic abscess and 302 with ruminal alterations. Of these, 27 with two associated diseases. None with three simultaneous lesions. Ruminal lesions were found in 47 confined animals and 29 to pasture. The mean rumen weight with lesion was 4.55 kg and the mean rumen weight healthy was 4.50. The total condemned weight was 345.50 kg, 213.50 of confined cattle and 132 of pasture. The loss was R $ 2,245.75 (US $ 688.88), if sold domestically, or R $ 3,154.41 (US $ 967.62), if exported. There was no postmortem relationship between ruminitis, hepatic abscess and hoof diseases in the evaluated animals. The financial impact of ruminal condemnations was significant. / Melhores índices zootécnicos são prementes na bovinocultura de corte. Alia-se às condições satisfatórias de criação e sanidade. Se não observados, desequilíbrios metabólicos podem ocorrer. Avaliou-se a relação post mortem entre os lesões ruminais, abscessos hepáticos e enfermidades podais em bovinos terminados a pasto em um frigorífico no sudoeste goiano. Sequencialmente, promoveu-se uma avaliação dos prejuízos financeiros devido as condenações ruminais de bovinos abatidos no sudoeste goiano. Sobre a relação, avaliou-se 970 bovinos machos, raça Nelore, 25 a 36 meses de idade, pelo exame ante mortem e post mortem dos pés, fígado e rúmen. Considerou- se a presença ou ausência das lesões. Dados foram analisados pelo teste qui-quadrado (p<0,05). No estudo financeiro, considerou-se os achados de 1.275 bovinos machos, Nelore, 25 a 36 meses de idade, 597 confinados e 678 a pasto. Dados foram analisados por estatística descritiva. 363 bovinos com lesões podais, abscessos hepáticos ou distúrbios ruminais, sendo 52 com lesões podais, nove com abscesso hepático e 302 com alterações ruminais. Desses, 27 com duas enfermidades associadas e nenhum com três lesões simultâneas. Constatou-se lesões ruminais em 47 animais confinados e 29 a pasto. O peso ruminal médio lesionado foi 4,55 quilos e os saudáveis 4,50. O peso total condenado foi 345,50 quilos, 213,50 de bovinos confinados e 132 a pasto. O prejuízo foi R$ 2.245,75 (U$ 688,88), se vendidas nacionalmente, ou R$ 3.154,41 (U$ 967,62), se exportadas. Não houve relação post mortem entre ruminite, abscesso hepático e enfermidades podais nos animais avaliados. O impacto financeiro pelas condenações ruminais foi expressivo.

O transplante de fígado é uma modalidade terapêutica utilizada em pacientes portadores de doença hepática terminal, quando não há mais nenhum outro tratamento capaz de reverter as alterações da doença no organismo. A complexidade desta modalidade terapêutica exige a formação de uma equipe multidisciplinar para o atendimento do paciente e familiares. O enfermeiro é responsável pelo planejamento da assistência de enfermagem, no período perioperatório; entretanto, observamos a escassez de produção científica nesta área, o que nos motivou para a realização deste estudo. A prática baseada em evidências consiste no referencial teórico-metodológico adotado, e a revisão integrativa da literatura é o método de pesquisa selecionado. O presente estudo teve como objetivo buscar e avaliar as evidências disponíveis na literatura sobre o conhecimento científico produzido, relacionado ao cuidado de enfermagem prestado ao paciente adulto submetido ao transplante de fígado, no período perioperatório. As bases de dados Lilacs, Medline e Cinahl foram utilizadas para a busca dos estudos, cuja amostra foi de 20 artigos científicos. Os resultados evidenciaram que o enfermeiro atua nas diferentes fases do período perioperatório, por meio da realização de cuidados de enfermagem direcionados para o preparo do paciente visando o procedimento anestésico-cirúrgico, a prevenção e a detecção precoce de complicações pós-operatórias, e para a orientação do paciente em relação a recuperação e reabilitação dos pacientes. Além disso, o enfermeiro atua no suporte nutricional e emocional do paciente, e desempenha, ainda, um importante papel no ensino da terapêutica imunossupressora, e na conscientização dos pacientes para a adesão ao regime terapêutico. Ao finalizarmos este estudo esperamos ter fornecido subsídios para a melhoria da prática perioperatória e estimulado os enfermeiros no desenvolvimento de pesquisas relacionadas ao transplante de fígado. / Liver transplantation is a therapeutic modality applicable to patients affected by end-stage hepatic diseases when there is no other available treatment capable of reversing the alterations in the organism caused by them. The complexity of this therapeutic modality requires the establishment of a multidisciplinary team for patient and family support. The nurse is responsible for planning the nursing assistance to be given during the perioperative period; nevertheless, we observed a lack of scientific production in this field, which stimulated the accomplishment of this study. Evidence based practice consists in the theoretical and methodological basis and the integrative literature review in the selected research method adopted for this work. The present study aimed at searching and evaluating the evidences available in literature concerning the scientific knowledge produced regarding nursing care delivered during the perioperative period to adult patient submitted to liver transplantation. Lilacs, Medline and Cinahl databases were searched for studies, which resulted in a sample composed of 20 scientific papers. The results evidenced that the nurse plays an important part in the different stages of the perioperative period, delivering nursing care addressed to preparing the patient to the anesthetic-surgical procedure, prevention and early detection of postoperative complications, and to the patient education regarding his recovery and rehabilitation. In addition, the nurse acts in the nutritional and emotional support of the patient and also fulfills an important role in instructing patients about the immunosuppressive therapeutics and making them aware of the need of adhering to the therapeutics regimen. Our expectation is that this study provides resources required for the improvement of perioperative practice and stimulates the nurses to conduct researches related to liver transplantation.

Lesão hepática é uma das complicações decorrentes de pancreatite aguda (PA) e mostra uma correlação positiva com a gravidade da doença. Recentemente foi demonstrado que tratamento com solução hipertônica (SH) reduz inflamação e mortalidade na PA. O presente trabalho investigou os efeitos de SH na modulação do estresse oxidativo, apoptose e remodelamento tecidual no fígado durante a PA. Ratos machos foram divididos em quatro grupos: C animais que não foram submetidos à PA ou tratamento; past animais submetidos à indução de PA e que não receberam tratamento; pas animais submetidos à PA e tratados com solução fisiológica (NaCl 0.9%); pah animais submetidos à indução de PA e que receberam SH (NaCl 7.5%). PA foi induzida pela injeção retrógrada de ácido taurocólico (2.5%) no ducto bilo-pancreático. Após 4, 12 e 24 horas os animais foram sacrificados para coleta das amostras de interesse (fígado e plasma) submetidas a ensaios para análise de expressão (western blot e PCR) de Óxido Nítrico Sintase induzível (iNOS), metaloproteinases (MMP) -2 e -9, Heat Schock Protein (HSP) 47, 60, 70 e 90, colágenos tipos I e III, caspases 2 e 9, APAF-1 e AIF, formação de nitrotirosina (imunohistoquímica), peroxidação lipídica (TBARs), atividade de alaninoaminotransferase (ALT), produção de nitrito/nitrato (Reação de Griess) e das citocinas TNF-, IL-1, IL-6 e IL-10 (ELISA). O tratamento com SH reduziu significantemente o estresse oxidativo hepático com a redução da expressão gênica de iNOS (p<0,01 vs. pas), dos níveis de nitrito/nitrato (P<0,01 vs. pas), liberação de ALT (p<0,01 vs. pas) e inibição da formação de peroxinitrito após 12 horas da indução de PA. Conseqüentemente, a expressão de HSP70 não foi ativada devido à proteção hepática causada pela administração de SH. A expressão e atividade de MMP-9 aumentaram significativamente nos grupos pas e past, entretanto o tratamento com SH manteve os níveis basais (p<0,05 vs. past, pas). Aumento da expressão de HSP47 e alterações na expressão de colágeno indicaram intenso remodelamento de matriz extracelular nos grupos não tratados ou tratados com solução fisiológica, permanecendo semelhante ao controle no grupo pah. Não ocorreram mudanças significativas na expressão das proteínas envolvidas no processo apoptótico. A SH diminui o estresse oxidativo no período crítico da PA, resultando na diminuição da lesão hepática e do remodelamento tecidual, mantendo dessa forma a integridade de matriz extracelular / It has been shown an hepatic injury following pancreatitis and a positive correlation with severity of the disease. Hypertonic Solution (HS) reduced morbidity and mortality in experimental pancreatitis. We hypothesize that hypertonic solution resuscitation of acute pancreatitis (AP) may exert antiinflammatory effects by modulating hepatic oxidative stress, apoptosis and matrix extracellular remodeling in liver. Wistar rats were divided in four groups: C- control animals not subjected to insult or treatment; NT- subjected to pancreatitis induction and receiving no treatment; NS- subjected to pancreatitis induction and receiving normal saline (0.9% NaCl); HSsubjected to pancreatitis induction and receiving hypertonic saline (7.5% NaCl). AP was induced by retrograde infusion of 2,5% sodium taurocholate into the pancreatic duct transduodenally. At 4, 12 and 24 h following pancreatitis induction, liver tissue samples were assayed in order to analyse expression of metalloproteinases (MMPs) -2 and -9, iNOS, collagens (type I and III), Heat Shock Proteins (HSPs) 47, 60, 70 and 90, caspases -2 and -7, APAF-1 and AIF, production of the cytokines TNF-, IL-1, IL-6 and IL-10, Nitrite/nitrate and ALT, Lipid peroxidation and formation of Nytrotirosine. Hypertonic solution resuscitation significantly modulates the oxidative stress in liver by reduction of iNOS gene expression (p<0,01 vs. NS), nitrite and nitrate levels (p<0,01 vs. NS), lipid peroxidation (p<0,05 vs. NT), ALT release (p<0,01 vs. NS) and peroxinitrite inhibition after 12 hours of pancreatitis induction. Consequently, the HSP70 production has not been activated due to the hypertonic solution effect in hepatic protection. At 4 h and 12 h, MMP-9 expression and activity increased in the NS and NT groups, although remaining at basal levels in the HS group (p<0.05 vs. past, pas). At 12 h, MMP-2 expression increased in the NS group (p<0.05 vs. c) but not in the HS group. At 4 h after pancreatitis induction, HSP47 expression increased in the NS and NT groups. Greater extracellular matrix remodelling occurred in the NS and NT groups than in the HS group, probably as a result of the hepatic wound-healing response to repeated injury. However, the collagen content in hepatic tissue remained at basal levels in the HS group. The proteins involved in apoptosis remained unchanged in all groups. Hypertonic saline is hepatoprotective, since it decreases oxidative stress in the critical time resulting in diminished liver damage, reducing hepatic remodelling, maintaining the integrity of the hepatic extracellular matrix during pancreatitis. Hypertonic saline-mediated regulation of MMP expression might have clinical relevance in pancreatitis-associated liver injury