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Urease de Helicobacter pylori : atividade pró-inflamatória e efeitos em células epiteliais gástricasUberti, Augusto Frantz January 2014 (has links)
O patógeno gástrico Helicobacter pylori é uma espiroqueta microaerofílica que infecta o estômago humano, causando gastrite, úlcera e até câncer gástrico. Esta bactéria produz grandes quantidades da enzima urease, essencial para a sobrevivência deste organismo no ambiente ácido do estômago. No entanto, nosso grupo já demonstrou que ureases possuem propriedades independentes de sua atividade ureolítica em modelos mamíferos, através de rotas mediadas por derivados de lipoxigenases. Neste trabalho avaliamos o potencial pró-inflamatório da urease de H. pylori, além de seus efeitos em células epiteliais gástricas. A urease induz edema de pata em camundongos com intensa infiltração de neutrófilos. In vitro, a urease a 100 nM foi quimiotática para neutrófilos humanos, induzindo a produção de espécies reativas de oxigênio. Neutrófilos ativados por urease mostraram um aumento de meia-vida, com a inibição de apoptose sendo acompanhada por alterações nos conteúdos das proteínas Bcl-XL e Bad. Estes efeitos da urease persistem na ausência de atividade enzimática. Os efeitos de edema de pata em camundongos, quimiotaxia e proteção contra a apoptose em neutrófilos humanos foram revertidos na presença de inibidores de lipoxigenase, como esculetina e AA861. Neutrófilos expostos a urease mostraram elevados níveis de 5-lipoxigenase, e nenhuma alteração nos níveis de ciclo-oxigenases. Também observamos que a urease é endocitada por células AGS de epitélio gástrico, que ocorre via endossomos EEA1 e Lamp1-positivos e é dependente de colesterol. Adicionalmente, a urease induz a migração de células AGS em um experimento que simula o ensaio de wound-healing. A urease também estimula a expressão de GM-CSF. Juntos, estes dados indicam que a urease, além do papel na sobrevivência no ambiente ácido do estômago, tem um papel importante nas doenças inflamatórias estomacais causadas por H. pylori. / The gastric pathogen Helicobacter pylori produces large amounts of urease, whose enzyme activity enables the bacterium to survive in the stomach. We have previously shown that ureases display enzyme-independent effects in mammalian models, most through lipoxygenases-mediated pathways. Here, we evaluated potential pro-inflammatory properties of H. pylori urease and its effects in epithelial gastric cells. Urease induced paw edema with intense neutrophil infiltration. In vitro 100 nM urease was chemotactic to human neutrophils, inducing production of reactive oxygen species. Urease-activated neutrophils showed increased lifespan, with inhibition of apoptosis accompanied by alterations of Bcl-XL and Bad contents. These effects of urease persisted in the absence of enzyme activity. Urease-induced paw edema, neutrophil chemotaxis and apoptosis inhibition reverted in the presence of the lipoxygenase inhibitors esculetin or AA861. Neutrophils exposed to urease showed increased content of lipoxygenase(s) and no alteration of cyclooxygenase(s). We observed that the endocytosis occur via EEA1 and Lamp1 endosomes, and is dependent of lipid rafts. Additionally, the urease induces the migration of AGS cells in an experiment that simulates the wound healing assay. Urease also stimulates the over-expression of GM-CSF by AGS cells. Altogether, our data indicate that the urease, besides allowing the bacterial survival in the stomach, could play an important role in the pathogenesis of the gastrointestinal inflammatory disease caused by H. pylori.
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Avaliação do risco de esofagite péptica endoscópica em pacientes com dispepsia funcional após a erradicação do Helicobacter pyloriOtt, Eduardo Andre January 2002 (has links)
Em países onde a prevalência do Helicobacter pylori (Hp) vem declinando, tem-se constatado elevação na incidência da doença do refluxo gastroesofágico (DRGE). O possível papel protetor do Hp na DRGE foi sugerido, mas tem sido questionado na literatura. Na dispepsia funcional, onde o benefício do tratamento do Hp é incerto, o risco de desenvolvimento de esofagite péptica é controverso. O presente estudo foi realizado com o objetivo de avaliar o risco de desenvolvimento de esofagite péptica endoscópica em pacientes com dispepsia funcional doze meses após a erradicação do Hp. Neste ensaio clínico randomizado, controlado com placebo, foram incluídos 157 pacientes submetidos à endoscopia digestiva alta no Hospital de Clínicas de Porto Alegre, no período de janeiro de 1998 a maio de 2001, nos quais o diagnóstico de dispepsia funcional foi estabelecido (critérios de Roma II). Randomização duplo-cega foi realizada para a utilização de Lansoprazol + antibióticos (grupo antibiótico) ou Lansoprazol + Placebos (grupo controle) por 10 dias. A erradicação do Hp foi estabelecida pelo teste da urease e exame histológico. Esofagite péptica endoscópica foi definida segundo a classificação de Los Angeles por dois endoscopistas “cegos”. A idade média dos pacientes estudados foi de 40,4 anos, dos quais 87% da raça caucasiana. Cento e trinta e oito pacientes completaram o estudo após um período mediano de 14 meses de acompanhamento. A taxa de erradicação do Hp foi de 93,4% no grupo antibiótico (71/76) e de 1,6% (1/62) no grupo controle. Diagnósticos endoscópicos de esofagite péptica, todos de intensidade leve (grau A), foram estabelecidos em 12,5% (9/72) dos pacientes que erradicaram o Hp versus 9,1% (6/66) daqueles que permaneceram infectados (risco relativo= 1,38; IC 95%: 0,52 – 3,65). Os resultados permitem concluir que a erradicação do Hp não é fator de risco para o desenvolvimento de esofagite péptica endoscópica nessa população predominantemente caucasiana de dispépticos funcionais. / In countries where the prevalence of the Helicobacter pylori (Hp) has been declining, one has noticed the increase in the incidence of the gastroesophageal reflux disease (GERD). The possible protecting role of the Hp in the GERD has been suggested although questioned by the literature. In the functional dyspepsia where the benefit from the Hp treatment is uncertain, the risk of reflux oesophagitis is controversial. The aim of this study was to evaluate the risk of reflux oesophagitis in patients with functional dyspepsia twelve months after the Hp eradication. This randomized, placebo-controlled trial included 157 patients submitted to gastrointestinal endoscopy in the Hospital de Clinicas de Porto Alegre, Brazil, between January 1998 and May 2001. Functional dyspepsia was diagnosed according to the Rome II criteria. Double-blind randomization was performed to 10 days of Lansoprazole + antibiotics (antibiotic group) or Lansoprazole + Placebos (control group) . The Hp eradication was established by urease test and histological examination. Reflux oesophagitis was defined according to the Los Angeles classification by two “blind” endoscopists. The average age of the studied patients was 40,4, 87% out of them were of the Caucasian race. One hundred and thirty-eight patients completed the study after an median follow-up period of 14 months. The eradication rate of the Hp was of 93,4% in the antibiotic group (71/76) and of 1,6% (1/62) in the control group. Endoscopic diagnoses of reflux oesophagitis, all of them of mild intensity (grade A), were established in 12,5% (9/72) of the patients who eradicated the Hp versus 9,1% (6/66) of those who remained infected (relative risk = 1,38; CI 95%: 0,52 – 3,65). The results allow concluding that Hp eradication is not a risk factor for reflux oesophagitis in this predominantly Caucasian population of functional dyspeptic subjects.
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Infecção por HELICOBACTER PYLORI em crianças com dor abdominal crônica e sua associação com a gastrite endoscópica nodularBahú, Maria da Graça Soares January 2000 (has links)
A infecção por Helicobacter pylori (Hp) é uma das infecções bacterianas mais comuns em todo o mundo. As maiores prevalências da infecção foram encontradas nos países em desenvolvimento, onde, em geral são altas já na infância. O método diagnóstico considerado mais acurado para a infecção por Hp, em crianças, é o exame endoscópico com biópsias gástricas. Alguns autores referem que o único aspecto macroscópico que pode predizer a infecção é o da presença de nodosidades na mucosa gástrica. Este aspecto é denominado de gastrite endoscópica nodular. A especificidade da gastrite endoscópica nodular para a infecção por Hp, entretanto, recentemente foi questionada por outros autores. Realizamos um estudo transversal em uma amostra de crianças (um a 12 anos) com dor abdominal crônica, que preenchiam os critérios para a realização de endoscopia digestiva alta, no Hospital da Criança Conceição e no Hospital de Clínicas de Porto Alegre, de setembro de 1997 a setembro de 1999. O objetivo principal foi verificar a associação entre a infecção por Hp e a gastrite endoscópica nodular nessas crianças. A amostra foi constituída de 185 crianças de ambos os sexos, com baixa renda familiar, cujos pais apresentavam baixo nível de escolaridade. Foi realizado estudo histológico das lâminas de biópsia gástrica (no mínimo cinco fragmentos, corados com H-E ou Giemsa), conforme o Sistema Sydney modificado. A infecção por Hp foi caracterizada pela presença de Hp na lâminas de biópsias gástricas dos pacientes e a gastrite folicular, pela presença de folículos linfóides bem formados, em mucosa gástrica inflamada. A prevalência da infecção por Hp nas crianças com dor abdominal crônica foi de 27% (IC 95%: 20,8-34,0). Foi demonstrada uma associação muito forte entre a infecção por Hp e a gastrite endoscópica nodular nessas crianças (P<0,001; RP = 29,7). Houve um aumento da prevalência tanto da infecção por Hp como da gastrite endoscópica nodular com a idade dos pacientes. A gastrite endoscópica nodular , embora tenha demostrado uma baixa sensibilidade (44,0%), apresentou um valor preditivo positivo de 91,7% para a infecção por Hp. Tanto o teste de urease, como a gastrite endoscópica nodular mostraram-se muito específicas, 94,5% e 98,5%, respectivamente, para o diagnóstico da infecção. Quando se combinou o teste de urease com o aspecto de gastrite endoscópica nodular, encontrou-se, uma sensibilidade muito baixa (34,7%), mas uma especificidade de 100% para a infecção por Hp. A sensibilidade do teste de urease, isolado, para a infecção foi de 60,4% e o seu valor preditivo positivo de 80,5%. O aspecto endoscópico (gastrite endoscópica nodular) teve associação com o microscópico (gastrite folicular) (P<0,001). Houve uma forte e significativa associação entre a infecção por Hp e a gastrite crônica ativa ( P<0,001; RP = 10,8). O mesmo foi demonstrado entre a gastrite nodular e a gastrite crônica ativa (P<0,001; RP = 8,6). Também foi verificado um nítido aumento das razões de prevalência da gastrite crônica ativa e da gastrite endoscópica nodular, com a acentuação dos graus de densidade de Hp. Finalmente, foi demonstrada a importante correlação entre o grau de intensidade da gastrite, verificado no exame histológico, e a gastrite endoscópica nodular (r = 0,97; P<0,001). A prevalência da infecção por Hp encontrada em Porto Alegre, nas crianças, foi menor do que a de outras cidades brasileiras e similar àquela registrada em algumas cidades do primeiro mundo. A presença de nodosidade na mucosa gástrica foi a alteração, à endoscopia, mais freqüentemente verificada nas crianças com infecção por Hp. Considerando a baixa prevalência da infecção encontrada na nossa amostra, a presença de gastrite endoscópica nodular significa uma elevada probabilidade de infecção por Hp, dado o alto valor preditivo verificado. O achado negativo para a gastrite endoscópica nodular, entretanto, não exclui a possibilidade da presença de infecção por Hp. Uma maior colonização bacteriana da mucosa gástrica estaria associada ao aparecimento da gastrite endoscópica nodular, já que a sua prevalência aumentou com os graus de densidade de Hp, assim como ocorreu com a gastrite crônica ativa. E quando ocorre, nas crianças, há maior probabilidade de se tratar de uma gastrite mais ativa e mais intensa. / Helicobacter pylori infection is one of the most common bacterial infections worldwide. Highest prevalence is found in developing countries, where high infection rates are usually found among children. The most accurate diagnostic method for H. pylori infection in children is the endoscopic examination with gastric biopsies. Several authors report that the only macroscopic aspect capable of predicting infection is the presence of gastric mucosa nodules. This aspect has been named endoscopic nodular gastritis. However, other authors have recently questioned the specificity of endoscopic nodular gastritis for H. pylori infection. From September 1997 to September 1999, we carried out a crossover study with a group of children (one to 12 years old) who presented with chronic abdominal pain and matched the criteria to undergo high digestive endoscopy at the Hospital da Criança Conceição and at Hospital de Clínicas de Porto Alegre. Our main objective was to check the association between H. pylori infection and endoscopic nodular gastritis in these children. Our series comprised 185 boys and girls from low-income households and whose parents had little formal education. Gastric biopsy slides were histologically examined (at least 5 biopsy specimens stained with hematoxylin and eosin or Giemsa) in accordance with the modified Sydney System. H. pylori infection was identified by the presence of H. pylori on the patient’s gastric biopsy slides, and follicular gastritis was characterized by the presence of lymphoid follicles in the inflamed gastric mucosa. The prevalence of H. pylori infection in children with chronic abdominal pain was 27% (CI 95%: 20.8-34.0). H. pylori infection was significantly associated with endoscopic nodular gastritis in these children (P<0.001; PR: 29.7). The prevalence rate for both H. pylori infection and endoscopic nodular gastritis increased with the patient’s age. Although endoscopic nodular gastritis presented low sensitivity (44.0%), it had a high positive predictive value (91.7%) for H. pylori infection. Both urease test and endoscopic nodular gastritis had high specificity (94.5% and 98.5%, respectively) for the diagnosis of infection. When the urease test was associated with the endoscopic nodular gastritis aspect, sensitivity was very low (34.7%), but specificity was 100% for H. pylori infection. When used alone, the urease test showed sensitivity of 60.4%, and positive predictive value of 80.5%. The endoscopic aspect (endoscopic nodular gastritis) was associated with the microscopic aspect (follicular gastritis) (P<0.001). There was a strong and significant association between H. pylori infection and chronic active gastritis (P<0.001; PR=10.8). The same was observed for endoscopic nodular gastritis and chronic active gastritis (P<0.001; PR=8.6). We also observed a clear increase in the prevalence rates of chronic active gastritis and endoscopic nodular gastritis as a result of higher H. pylori density. Finally, we demonstrated the important correlation between the intensity of gastritis observed at histologic examination and endoscopic nodular gastritis (r=0.97; P<0.001). The prevalence rate of H. pylori infection in children in Porto Alegre was lower than in other Brazilian cities, but similar to some cities in developed countries. At endoscopy, the presence of nodules in the gastric mucosa was the most frequent finding in children with H. pylori infection. Endoscopic nodular gastritis had a high predictive value and, as our sample presented a low prevalence rate of the infection, was indicative of a high probability of H. pylori infection. The absence of endoscopic nodular gastritis does not, however, exclude the possibility of H. pylori infection. A larger bacterial colonization of the gastric mucosa may be associated with the finding of endoscopic nodular gastritis as its prevalence increases with H. pylori density, similarly to what occurs in chronic active gastritis. When endoscopic nodular gastritis is observed in children, there is a higher probability that the gastritis is more active and intense.
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Desenvolvimento e otimização de métodos de biolgia molecular para o diagnóstico de Leichmania chagasi e Helicobacter pyloriSolange Evans Osses, Ingrid January 2006 (has links)
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Previous issue date: 2006 / Neste trabalho foram desenvolvidos e otimizados métodos diagnósticos para dois agentes patogênicos com uma alta incidência no Brasil e cujos diagnósticos se baseiam principalmente em métodos invasivos como são o Helicobacter pylori e Leishmania chagasi (L. chagasi). A bactéria gram (-) Helicobacter pylori e a principal causa de ulcera péptica e gastrite maligna no mundo. Seu diagnostico e realizado preferencialmente por meio de endoscopia e biopsia de tecido gástrico. A bactéria e eliminada pelas fezes o que permitiria um diagnostico não invasivo e de controle de cura se implementar PCR de amostras de pacientes antes e durante o tratamento de doença. Não entanto as fezes possuem uma serie de inibidores o que tem dificultado o desenvolvimento de métodos de PCR para seu diagnostico. Aqui comparamos métodos de obtenção de DNA de fezes baseados em fervura das amostras descritos anteriormente por Holland (2000), com método de Lise Alcalina , modificado com o uso de Triton X-100 melhorando a obtenção de DNA eliminando a presencia de inibidores. Posteriormente DNAs provenientes de amostras de fezes de 10 pacientes foram utilizados em reações de PCR com alvos específicos descritos anteriormente para Helicobacter pylori (urec, RNAr e vac); 5 das amostras amplificaram de maneira especifica concordando com o diagnostico Giemsa (+) de biopsia de tecido gástrico de pacientes com dispepsia.
L. chagasi, protozoário responsável de causar a leishmanioses visceral, no Brasil apresenta uma alta incidência e ampla distribuição, com formas graves e letais quando associada a quadros de ma nutrição e infecções concomitantes. O diagnostico e realizado principalmente por punção aspirativa de baço, fígado, medula óssea ou linfonodos permitindo a visualização do parasita no material. No presente trabalho desenvolvemos PCR simples usando diferentes DNAs parasitários de tripanosomatideos e oligonucleotideos PIA 3 e DEB 8 específicos para L. chagasi.. Os dois pares de oligonucleotideos resultaram serem específicos para L.chagasi, sendo a sensibilidade de 10 pg para PIA3 e de 1 pg para DEB8. Com o objetivo de diferenciar o diagnostico de Leishmaniose visceral e Leishmanioses tegumentar foi desenvolvida PCR múltipla utilizando alvos específicos para leishmania subgênero Viannia, denominados LV1 junto com os alvos específicos para L. chagasi . Os 4 oligonucleotideos não competeram entre sim na reação e mantiveram a especificidade e sensibilidade das PCR simples.
Posteriormente um analise de bioinformática dos bancos de dados dos genes de Tripanosomatideos do portal GeneDB do Sanger Centre foi realizado na procura de um gene órfão de L. infantum para ser usado no diagnostico de L chagasi. 7.078 proteinas hipotéticas de L. infantum, foram comparados com 11.812 de T cruzi, 7557 de T brucei e 5.364 de L major. Através das ferramentas omni blast e Protogim, conseguimos seleccionar 93 proteinas hipotéticas de L infantum. Por critérios de tamanho, localização celular e outros, 5 putativos alvos foram escolhidos para serem testados in vitro. O gene Linj 20074, resultou ser altamente especifico e com sensibilidade de 1pg. Genes órfãos se apresentam como promissores alternativas para diagnostico ou alvo quimioterapicos em doenças parasitarias
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Envolvimento dos genes rdxA e frxA de Helicobacter pylori na resistencia aos antibioticos metronidazol e furazolidonaBenvengo, Yune Helena Borges 30 August 2005 (has links)
Orientador: Ronilson Agnaldo Moreno / Dissertação (mestrado) - Universidade Estadual de Campinas, Faculdade de Ciencias Medicas / Made available in DSpace on 2018-08-06T13:11:27Z (GMT). No. of bitstreams: 1
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Previous issue date: 2005 / Resumo: A infecção por Helicobacter pylori é uma das mais comuns em todo o mundo estando relacionada ao câncer gástrico, gastrite crônica, úlceras, adenocarcinomas e linfomas gástricos. O metronidazol foi muito usado como componente de terapias contra H. pylori. No entanto metronidazol é um composto mutagênico e a resistência a esse antimicrobiano é muito comum. Isso estimulou o interesse em antimicrobianos que tivessem resistência incomum para H. pylori. No Brasil, onde o índice de resistência para metronidazol foi determinado em 42%, a furazolidona passou a ser usada nas terapias de erradicação. A furazolidona e o metronidazol, são compostos classificados como nitro-heterocíclicos ou nitroaromáticos e possuem mecanismos de ação similares. O mecanismo de resistência da H. pylori ao metronidazol foi relacionado com alterações nos genes NAD(P)H nitroredutase oxigênio insensível (rdxA) e NAD(P)H flavina oxidorre- dutase (fixA) produtores de nitroredutases que reduzem o metronidazol gerando produtos intermediários os quais tem ação tóxica. Devido a algumas linhagens apresentarem resistência simultânea para metronidazol e furazolidona foi sugerido que os mecanismos de resistência para essas drogas poderiam ser os mesmos. Entretanto linhagens.construídas em laboratório com os genes rdxA e frxA inativados não apresentaram resistência a furazolidona. Nesse estudo foi utilizado o método de transformação natural, feitos com os produtos de PCR dos genes rdxA e frxA de oito amostras brasileiras resistentes simultaneamente aos dois antimicrobianos para verificar o envolvimento dos genes rdxA e fdxA com a resistência ao metronidazol e a furazolidona. Das oito amostras utilizadas foram obtidos foram obtidos seis transformantes de diferentes produtos de PCR do gene rdxA, resistentes ao metronidazol. Não foram obtidos transformantes com o gene fixA resistentes ao metronidazol, nem transformantes resistentes a furazolidona com nenhum dos dois genes. Os resultados .obtidos nesse trabalho indicam que à resistência ao metronidazol esta relacionada ao gene rdxA , mas não ao frxA, e sugere que o gene rdxA influencia a concentração inibitória mínimade furazolidona, mas não confere resistência / Abstract: Helicobacter Pylori infection is one of the most common infections worldwide and recognized as the major cause of peptic ulcer disease, risk factor for gastric adenocarcinoma and primary gastric Iymphoma. Metronidazole has often used in combination therapies against H. pylori. However, metronidazole is highly mutagenic and resistance to this drug is very common.These stimulated the use the altematives drugs that resistance was uncommon in H. pylori. In Brazil, where the levei of resistance for metronidazole was detected in 42%, the nitrofuran furazolidone passed to be one of the components therapies. Metronidazole and furazolidone are classified as nitroeterocyclic and nitroaromatic compounds, hence the modes of drug action are similar and nitroreduction is required for activation these. The mechanism of metronidazole resistance among H. pylori strains has been reIated to alterations in gene products having metronidazole nitroreductase activity, like the oxygen insensitiveNAD(p)H nitroredutase (RdxA), and NAD(p)H flavin oxidoredutase (FrxA). Due some strains present simultaneous resistance for furazolidone and metronidazole suggests that the resistance mechanismfor these drugs may be the same. However, frxA and rdxA knockout mutations constructed in laboratory reference strains are not resistant to furazolidone, which indicates that mutations in others genes were also need for resistance. We used natural transformation with PCR products of eigth brazilian clinical isolates, simultaneous resistant to this these two drugs, for verifify the involvement of the genes rdxA and ftxA with resistance to metronidazole and furazolidone drugs. Our results showed that metronidazole resistance are associated with rdxA gene, but not fixA, and suggest the involvement of rdxA gene in increased leveI of furazolidone minimum inhibitoryconcentration , but not coffer resistance / Mestrado / Mestre em Farmacologia
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Efeito do tratamento com inibidores de secreção acida na infecção por Helicobacter Pylori em camundongos / Effects of a one-week treatment with acid gastric inhibitors on Helicobacter Pylori infected miceMarostica, Marta Contieri 30 August 2007 (has links)
Orientadores: Nelci Fenalti Hoehr, Alessandra Gambero / Dissertação (mestrado) - Universidade Estadual de Campinas, Faculdade de Ciencias Medicas / Made available in DSpace on 2018-08-09T07:18:18Z (GMT). No. of bitstreams: 1
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Previous issue date: 2007 / Resumo: O mecanismo pelo qual o H. pylori provoca a inflamação gástrica inclui a secreção de substâncias pró-inflamatórias pela bactéria e a estimulação da liberação de citocinas induzida pelo contato direto entre a bactéria e as células epiteliais gástricas. A resposta inicial à infecção por H. pylori é predominantemente neutrofílica e estes, liberam mediadores inflamatórios e enzimas proteolíticas que induzem o dano gástrico. Estresse oxidativo ocorre em pacientes infectados com H. pylori onde a expressão de enzimas como a óxido nítrico sintase induzida (iNOS), superóxido dismutase e catalase encontram-se aumentadas. A iNOS participa da resposta inflamatória e promove a apoptose de células na mucosa gástrica. Durante a infecção por H. pylori, observa-se níveis reduzidos da expressão de Bcl-2 e o aumento da expressão de Bax na mucosa gástrica, sugerindo que uma tendência pró-apoptótica na infecção. A erradicação pode ser alcançada pela combinação de antibióticos associada a uma droga anti-ácida. As duas maiores classes de inibidores de secreção ácida são: os inibidores de bomba protônica, como o omeprazol, e os antagonistas de receptor de histamina H2, como a ranitidina. Várias evidências experimentais têm mostrado que o omeprazol apresenta efeitos anti-ulcerogênicos adicionais. Deste modo, o objetivo deste trabalho foi avaliar o efeito do tratamento com omeprazol e ranitidina em um modelo animal de infecção por H. pylori, enfocando possíveis propriedades adicionais destes fármacos Para este estudo foram utilizados camundongos machos C57BL/6 com 4 semanas de idade. Os camundongos receberam por via oro-gástrica suspensão de H. pylori. Na 11ª semana de inóculo, os animais foram tratados (i.p.) com omeprazol (100 mg/kg), ranitidina (100 mg/kg) ou veículo (PBS) durante 7 dias sempre no mesmo horário. As duas drogas inibiram a produção de ácido gástrico no tratamento agudo, porém no tratamento por uma semana, apenas o omeprazol inibiu a secreção ácida. Os animais tratados com omeprazol apresentaram um aumento significativo nos níveis de colonização gástrica e elevado nível de MPO. Ambas as drogas diminuíram as lesões da mucosa provocada pela infecção. O tratamento com omeprazol restaurou a produção de Bcl-2 na mucosa gástrica e não alterou a produção de Bax. O omeprazol não protegeu a mucosa gástrica contra o dano ao DNA gerado pela infecção e o tratamento com ranitidina aumentou os níveis de dano oxidativo ao DNA. Não observamos a presença de propriedades anti-neutrofílicas, atribuídas ao omeprazol, após uma semana de tratamento, sugerindo que essas propriedades são restrita a ensaios in vitro. Entretanto, o omeprazol restaurou a produção de Bcl-2 na mucosa gástrica, sugerindo uma atividade anti-apoptótica dessa droga / Abstract: H. pylori induces gastric inflammation characterized by secretion of pro-inflammatory substances by bacteria and the stimulation of cytokine release by the gastric epithelial cells. The initial response to the H. pylori infection is predominantly by neutrophils and these cells liberate inflammatory mediators and enzymes that induce the gastric damage. Oxidative stress also occurs in infected patients where induced nitric oxide sintase (iNOS), superoxide dismutase and catalase expression were increased. Nitric oxide participates in the inflammatory response and promotes apoptosis of gastric mucosa cells. Eradication therapy can be achieved with antibacterial agents in association with anti-acid drugs. There are two major classes of gastric acid inhibitors: the proton pump inhibitors, such as omeprazole, and the histamine H2 receptor antagonists, such as ranitidine. Some experimental evidence demonstrates that omeprazole has additional pharmacological properties. Thus, the aim of this study was to evaluate the effect of omeprazole and ranitidine treatment on H. pylori-infected mice, focusing on possible additional pharmacological properties. For this study, male C57BL/6 mice that received H. pylori suspension were used. After the 11th week, the mice were treated intraperitoneally (i.p.) with omeprazole (100 mg/kg), ranitidine (100 mg/kg) or vehicle (PBS) for 7 days. Both drugs inhibited the gastric acid production after acute administration; however after one week of treatment just omeprazole inhibited gastric acid secretion. Omeprazole-treated mice presented an increase in H. pylori and MPO levels in gastric mucosa. Both drugs reduced the mucosa damage provoked by H. pylori infection. Omeprazole treatment restored the Bcl-2 production in the gastric mucosa and did not modify Bax production. Omeprazole did not reduce the DNA damage in the gastric mucosa while ranitidine treatment increased it. We conclude that some additional omeprazole-related properties, such as antineutrophil properties, were not observed in H. pylori-infected mice after one week of treatment. However, the antiapoptotic activity of omeprazole could be attributed to an ability to modify the protein expression of Bcl-2, decreased by H. pylori infection / Mestrado / Patologia Clinica / Mestre em Ciências Médicas
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Estudo soroepidemiológico da bactéria Helicobacter pylori em populações ribeirinhas amazônicas e a validação de um ensaio copromolecular para determinação da infecçãoSilva, Jocilene Guimaraes 23 July 2012 (has links)
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Previous issue date: 2012-07-23 / FAPEAM - Fundação de Amparo à Pesquisa do Estado do Amazonas / The Amazonian riverine communities seem to have all of the conditions of sanitation and
socioeconomic suspicions for the conditioning to the infection for Helicobacter pylori,
bacterium associated to the etiopatogenia of several diseases gastrointestinais. In Brazil,
they are registered on average, fifteen thousand cases of cancer of the digestive system a
year, with a percentile adult in the north area. Once the H. pylori is considered one of the
etiological agents of this malignitude, the objective of this study was to determine the
prevalence of the infection for H. pylori and to accomplish the rising of epidemic variables
and of susceptibility related to the bacterial infection in riverine communities, and to
validate a rehearsal copromolecular for diagnosis of the infection. The accomplished study
was of the type traverse, contemporary, analytical and observacional, understanding a
sample of 200 individuals, of which they were collected blood, saliva and feces, besides
the application of a questionnaire epidemic employee, with subjects driven to his/her
identification, obtaining data on the conditions socioeconomic, hygienic, sanitary and
symptoms. For detection sorologic of antibodies of the type IgG anti-H. pylori were used
plasma samples that were tested for systemic antibodies of the type IgG anti-H. pylori
through a rehearsal immunological, using the Kit Ridascreen Helicobacter IgG (RBiopharm
AG, Germany); for detection it activates of the H. pylori, it was used the
samples of feces that were tested through the Kit MKBIO H. pylori (MK BIO GMBH,
DIMA, Germany). Besides the detection of antibodies and antigens for H. pylori, they
were also applied techniques of molecular biology, in the fecal samples, to confirm the
diagnosis of the infection, for direct detection of bacterial DNA, using the primers
RNAr16S that amplify a fragment gene of 1200bp of the gender Helicobacter and the
primers p1 and p2, which amplify a fragment gênico of 298 pb that codifies a protein
antigenic of 26kDa species specify of the H. pylori. This research had about central point
to the infection for the bacterium H. pylori, that was detected through three diagnosis
methods: The sorologia, fecal antigen and PCR. The sorologia went to the chosen
technique to relate with the epidemic aspects regarding the study, and the obtained results
revealed a frequency of soropositive of 83,5% (167/200). The analysis of the epidemic
variables related to the bacterial infection demonstrated a larger frequency of infected
individuals female, in the age group from 0 to 17 years, in addition 97,4% of the
population that ingested water without treatment were positive the infection. The
comparison of the prevalence of the infection, obtained through the three different
detection methods, they were high, however the detection copromolecular was what
detected a smaller number of positive individuals (113/200), although it presents the
largest indexes of sensibility 79% and specificities 100%. The detection copromolecular
demonstrated to be an important tool in the detection of the bacterial infection, making
possible in these populations the application of a test high sensibility and specificity, could
be applied in the precocious detection of the patogen. / e sócio-econômicas suspeitas para o condicionamento à infecção por Helicobacter
pylori, bactéria associada à etiopatogenia de várias doenças gastrointestinais. No Brasil,
são registrados em média, quinze mil casos de câncer do aparelho digestivo por ano,
com um maior percentual na região norte. Uma vez que o H. pylori é considerada um
dos agentes etiológicos desta malignitude, o objetivo deste estudo foi determinar a
prevalência da infecção por H. pylori e realizar o levantamento de variáveis
epidemiológicas e de suscetibilidade relacionados à infecção bacteriana em
comunidades ribeirinhas, e validar um ensaio copromolecular para diagnóstico da
infecção. O estudo realizado foi do tipo transversal, contemporâneo, analítico e
observacional, compreendendo uma amostra de 200 indivíduos, dos quais foram
coletados sangue, saliva e fezes, além da aplicação de um questionário epidemiológico
empregado, com questões dirigidas à sua identificação, obtendo dados sobre as
condições socioeconômicas, higiênicas, sanitárias e sintomatologia apresentada. Para
detecção sorológica de anticorpos do tipo IgG anti-H. pylori específicos foram
utilizados amostras de plasma que foram testadas para anticorpos sistêmicos do tipo IgG
anti-H. pylori através de um ensaio imunoenzimático, usando o Kit Ridascreen
Helicobacter IgG (R-Biopharm AG, Alemanha); para detecção ativa do H. pylori, foi
utilizado as amostras de fezes que foram testadas através do Kit MKBIO H. pylori (MK
BIO GMBH, DIMA, Alemanha). Além da detecção de anticorpos e antígenos para H.
pylori, também foram aplicadas técnicas de biologia molecular, nas amostras fecais,
para confirmar o diagnóstico da infecção, por detecção direta do DNA bacteriano,
utilizando os primers RNAr16S que amplificam um fragmento gênico de 1200bp do
gênero Helicobacter e os primers P1 e P2, os quais amplificam um fragmento gênico de
298 pb que codifica uma proteína antigênica de 26kDa espécie especifica da H. pylori.
Esta pesquisa teve como ponto central à infecção pela bactéria H. pylori, que foi detectada
através de três métodos de diagnóstico: A sorologia, o antígeno fecal e PCR. A sorologia
foi à técnica escolhida para relacionar com os aspectos epidemiológicos referentes ao
estudo, sendo que os resultados obtidos revelaram uma frequência de soropositividade de
83,5% (167/200). A análise das variáveis epidemiológicas relacionadas à infecção
bacteriana demonstrou uma maior frequência de indivíduos infectados do sexo
feminino, na faixa etária de 0 a 17 anos, além do que 97,4% da população que ingeriam
água sem tratamento foram positivos a infecção. A comparação da prevalência da
infecção, obtidas através dos três diferentes métodos de detecção, foram elevadas, no
entanto a detecção copromolecular foi o que detectou um menor número de indivíduos
positivos (113/200), embora apresente os maiores índices de sensibilidade 79% e
especificidades 100%. A detecção copromolecular demonstrou ser uma ferramenta
importante na detecção da infecção bacteriana, possibilitando nestas populações a
aplicação de um teste de elevada sensibilidade e especificidade, podendo ser aplicada na
detecção precoce do patógeno.
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Reinfecção pelo Helicobacter pylori em pacientes brasileiros com úlcera péptica, em seguimento de 5 anos / Helicobacter pylori reinfection in brazilian patients with peptic ulcer disease, a five year follow-upFernando Marcuz Silva 29 June 2009 (has links)
Introdução: A reinfecção pelo Helicobacter pylori em países em desenvolvimento parece ser maior do que nos países desenvolvidos. O retratamento da bactéria e o controle periódico de cura são necessários, quando elevadas taxas de reinfecção são verificadas. O objetivo do trabalho foi determinar a taxa anual de reinfecção, em pacientes brasileiros com úlcera péptica, num seguimento de cinco anos. Métodos: Pacientes com úlcera péptica, diagnosticada por endoscopia digestiva alta e infecção pelo Helicobacter pylori documentada por histologia, teste da urease, reação em cadeia da polimerase e teste respiratório, foram tratados para erradicação da bactéria. A cura da infecção foi verificada com os mesmos exames, três meses após o término do tratamento. Avaliação clínica e teste respiratório foram realizados aos seis e nove meses. Com um ano de seguimento, endoscopia, exame histológico, teste da urease, reação em cadeia da polimerase e teste respiratório foram novamente realizados. Até o quinto ano de seguimento, foram feitas consultas semestrais e testes respiratórios anuais. Na inclusão dos pacientes e nos reinfectados foram estudados 15 diferentes genes da bactéria. Resultados; Cento e quarenta e sete pacientes foram seguidos: 19 por um ano, oito por dois anos, quatro por três anos, cinco por quatro anos e 98 por cinco anos, num total de 557 pacientes/ano. Não ocorreu reinfecção no primeiro ano. No segundo ano, dois pacientes se reinfectaram, no terceiro quatro pacientes, no quarto três pacientes e no quinto um paciente, num total de 10 reinfecções. A taxa anual de reinfecção por pacientes/ano foi de 1,8%. Conclusão: O Brasil, um país em desenvolvimento com alta prevalência da infecção pelo Helicobacter pylori, apresenta uma taxa de reinfecção semelhante à dos países desenvolvidos / Introduction: The Helicobacter pylori reinfection rate seems to be higher in developing countries, than in developed ones. If a high reinfection rate is verified, periodical exams and bacterial retreatment would be necessary. The objective of this study was to determine the annual reinfection rate of Helicobacter pylori, in Brazilian patients with peptic ulcer disease, in a five year follow-up. Methods: Patients, with peptic ulcer disease diagnosed by upper digestive endoscopy and Helicobacter pylori infection verified by histological examination, rapid urease test, polymerase chain reaction and urea breath test, were treated for bacterial eradication. The infection cure was determined by the same proceedings, three months after the treatments end. Clinical evaluation and urea breath test were performed at sixth and ninth months of the follow-up. At one year of the follow-up, upper digestive endoscopy, histological examination, rapid urea test, polymerase chain reaction and urea breath test were repeated. Up to the fifth year of follow-up semester clinical evaluation and annual urea breath test were performed. All the patients included in the study and all the reinfected patients were tested for fifteen different genes of the Helicobacter pylori. Results: One hundred and forty-seven patients were followed: nineteen patients for one year, eight patients for two years, four patients for three years, five patients for four years and ninety-eight patients for five years. The total of patients/years follow-up was 557. Reinfection did not occur in the first year of the follow-up. In the second year, two patients became reinfected; in the third year, four patients; in the fourth, three and in the fifth, one patient. The total of reinfected patients was 10. The annual reinfection rate was 1,8%. Conclusion: Brazil, a developing country, presents a high prevalence of Helicobacter pylori infection. Nonetheless, the reinfection rate is similar to the developed countries.
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Avaliação clinica, endoscopica e histopatologica tardia de doentes submetidos a gastrectomia parcial por ulcera pepticaCoelho Neto, João de Souza, 1969- 01 September 2002 (has links)
Orientador : Nelson Adami Andreollo / Dissertação (mestrado) - Universidade Estadual de Campinas, Faculdade de Ciências Médicas / Made available in DSpace on 2018-08-01T06:39:22Z (GMT). No. of bitstreams: 1
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Previous issue date: 2002 / Resumo: A descoberta e a associação do Helicobacter pylori (HP) com as úlceras pépticas em 1983 trouxe mudanças sobre a fisiopatologia, etiologia e o tratamento desta doença. Alguns anos se passaram para que a comunidade médica e científica aceitassem amplamente que a úlcera péptica pudesse ter uma causa infecciosa. O conceito de que sem ácido não há úlcera norteou por muito tempo a tática terapêutica que passou pelas cirurgias como as gastrectomias e as vagotomias até chegar aos dias de hoje com o uso de potentes inibidores da bomba de prótons e associações antibióticas. O objetivo deste trabalho foi avaliar tardiamente os doentes submetidos à gastrectomia parcial como tratamento da úlcera péptica em época em que o HP ainda não era erradicado de forma intencional. A avaliação incluiu o estudo dos sintomas do pós-operatório em comparação com os pré-operatórios, tabagismo e etilismo, e a incidência de síndromes pós-gastrectomias; avaliação endoscópica incluindo, o tipo de cirurgia realizada e os achados macroscópicos da mucosa do coto gástrico, duodeno ou jejuno dependendo do tipo de reconstrução; avaliação histopatológica, incluindo a pesquisa de HP por dois métodos: histológico e teste de urease; e a possível associação do HP presente no estômago remanescente com as avaliações clínica, endoscópica e histopatológica pós-operatórias. Cinqüenta e nove doentes gastrectomizados por úlcera péptica entre os anos de 1985 e 1993 na UNICAMP foram convocados a comparecer no GASTROCENTRO, 44 (74,6%) eram do sexo masculino e tinham idade média de 55 anos com variação de 31 a 77 anos, passaram por entrevista clínica e por exame endoscópico, onde foram colhidos fragmentos de biópsia para teste de urease e para análise histopatológica, incluindo a pesquisa do HP. Além disto, foi pesquisada a presença do HP nas peças cirúrgicas ressecadas para constatação da presença ou não da bactéria no pré-operatório. Na avaliação clínica os resultados mostraram que 96% dos doentes apresentaram boa (Visick II) ou ótima (Visick I) evolução clínica pós-operatória tardia. Os sintomas pós-operatórios mais comuns foram dispepsias leves e independentes da presença ou não do HP. Algumas síndromes pós-gastrectomia como diarréia, anemia e dumping ocorreram em respectivamente em 11 (18,6%), dois (3,4%) e dois (3,4%) casos. A reconstrução tipo BI trouxe melhores resultados clínicos tardios com significância estatística (p<0.05) quando comparado com as reconstruções tipo BII e Y de Roux. Na avaliação endoscópica, a maioria dos doentes (52,5%) apresentou exame normal, enquanto os demais apresentaram gastrites enantematosa (37,3%), erosiva (8,5%). Recidiva da úlcera foi diagnosticada em dois doentes (3,4%). Na análise histopatológica foi observado uma incidência elevada de gastrite crônica (98,3%). A presença de HP ocorreu em 86% nos doentes antes da cirurgia e em 89,8% no pós-operatório tardio. As conclusões mostraram que os doentes gastrectomizados, apresentaram boa evolução clínica pós-operatória tardia. A gastrectomia parcial com reconstrução tipo BI foi a que trouxe melhores resultados clínicos a longo prazo. O HP apesar de estar presente no coto gástrico em 89,8% dos doentes não influenciou de forma negativa nos resultados clínicos, endoscópicos ou histopatológicos no pós-operatório tardio / Abstract: After the discovery of Helicobacter pylori (HP) and this relationship with the etiology and physiopathology of peptic ulcer in 1983, a lot has changed about the treatment of the duodenal and gastric ulcers. Many years have passed until the medical and scientific community accepted that peptic ulcer could have an infectious cause. That saying: no acid, no ulcer; guided the treatment for many years and these peptic ulcers were treated by surgery only, like antrectomy or hemigastrectomy plus vagotomy, that can eliminate the gastric acid production. Vagotomy with drainage procedures (without resection), have followed. Later, other physiological procedures were employed, like high selective vagotomy, where the ulcer recurrence is still high. The antacids and histamine receptor blocks were the first drugs used with good results. Later, the protons inhibitors pumps were introduced, which were stronger than the others. The objectives of this research were to evaluate later on those patients who underwent partial gastrectomy as a treatment for peptic ulcer, at that time when their did not use any antibiotic therapy to eradicate the Helicobacter pylori. The clinical evaluation included the late postoperative symptoms and comparing to the preoperative period, post gastrectomy syndromes like dumping, diarrhea, alkaline gastritis and nutritional aspects, smoking and alcoholism; endoscopic evaluation included surgery reconstruction and gastric stump, duodenum and jejunum mucosa aspects, histopathological evaluation included looking for Helicobacter pylori by using two different methods: histology and urease test. Fifty-nine patients, 44 (74,6%) male, median age 55,5 year old (range from 31 to 77 year old), who underwent a clinical interview and a high digestive endoscopy, where biopsies were collected from the gastric stump for urease test and histological analysis. Paraffin blocks from the surgical specimen were reanalyzed in order to find out if the patients did have or did not have Helicobacter pylori before surgery. The final results show that most of the patients had good and very good clinical evolution (Visick I e II) in 96%. The most common symptoms on late post operative are mild dyspepsia with or without HP, and an acceptable number of patients presented post gastrectomy syndromes like diarrhea, anemia and dumping. The Billroth I reconstruction had the best clinical results on statistical rate. On endoscopic view, 52,5% showed normal results and the other showed endoscopic enanthema gastritis, reflux alkaline gastritis or erosive gastritis. Ulcer recurrences were diagnosed in two patients (3,4%), and both had positive HP. In the histological analysis, a large number of chronic gastritis was found (98,3%). Most of the patients had HP (86%) before surgery and also in the postoperative time (89,9%). The conclusions showed that the patients had a very good clinical evolution. The Billroth I reconstruction had the best clinical results. The HP is still present on gastric stump in late postoperative time, and we believe that it does not bring any negative influence to surgical results / Mestrado / Cirurgia / Mestre em Cirurgia
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Prevalencia da infecção pelo Helicobacter pylori em crianças ate 12 anos de idadeParente, José Miguel Luz, 1959 03 August 2018 (has links)
Orientador: Jose Murilo Robilotta Zeitune / Dissertação (mestrado) - Universidade Estadual de Campinas, Faculdade de Ciências Médicas / Made available in DSpace on 2018-08-03T19:54:13Z (GMT). No. of bitstreams: 1
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Previous issue date: 2003 / Resumo: O Helicobacter pylori (H. pylori) é uma bactéria com características de bacilo Gram negativo, de forma espiralada ou curvada, possuindo até cinco flagelos unipolares, e que desencadeia um processo inflamatório crônico ativo da mucosa gástrica, levando, como conseqüência, ao desenvolvimento de inúmeras doenças gastro-duodenais, principalmente a doença ulcerosa péptica, o carcinoma gástrico e o linfoma tipo MALT. Foi conduzido um estudo epidemiológico do tipo observacional de corte transversal com o objetivo de detectar a prevalência da infecção pelo H. pylori em crianças até 12 anos de idade, residentes em bairros de uma mesma área urbana da cidade de Teresina, contudo pertencentes a dois grupos populacionais distintos do ponto de vista de renda familiar e disponibilidade de infra-estrutura básica domiciliar, caracterizando dois grupos, um de baixa renda e precárias situações sócio-econômicas e de infra-estrutura sanitária, e outro de alta renda e boas condições sanitárias, denominados grupo I e grupo II, respectivamente. Nesta pesquisa, foram estudados os seguintes aspectos em relação à infecção ativa pelo H. pylori: a prevalência em função da faixa etária, a distribuição da prevalência de acordo com o gênero, a sua relação com renda familiar e com diferentes condições de disponibilidade de infra-estrutura sanitária. O universo populacional que participou do estudo foi formado por 303 crianças, sendo 169 do grupo I e 134 do grupo II. Em relação ao gênero, 163 eram do sexo masculino e 140 do sexo feminino. Como método diagnóstico, foi utilizado um teste não invasivo, que pesquisou a presença de um antígeno específico do H. pylori presente nas fezes dos indivíduos infectados, denominado HpSA, através da técnica de ELISA. Os resultados deste estudo indicaram que a prevalência global da infecção pelo H. pylori foi de 38,0%, tendo sido muito elevada no grupo I, qual seja, 55,0%, enquanto no grupo II foi muito baixa, atingindo apenas 16,4%. Os resultados obtidos isoladamente nos dois grupos foram semelhantes aos dados observados nos países subdesenvolvidos e industrializados, respectivamente, indicando que nesta população existiam condições que favoreceram a aquisição da infecção nas populações com baixa renda familiar e precárias condições higiênico-sanitárias. As demais análises da pesquisa também indicaram que a infecção ocorreu precocemente na infância, em ambos as populações, já nos primeiros anos de vida, havendo aumento progressivo com a idade, nos anos seguintes durante a infância. Em relação ao gênero, o resultado global do estudo demonstrou que a infecção pelo H. pylori ocorreu igualmente em ambos os sexos. Os fatores de risco associados à infecção pelo H. pylori, determinados neste estudo, foram baixa renda familiar e aqueles associados a precárias condições de infra-estrutura domiciliar, quais sejam, ausência de pavimentação da rua, moradias construídas precariamente, ausência ou precariedade de pisos nas residências, ausência ou deficiência de esgotamento sanitário e ausência de coleta do lixo domiciliar / Abstract: Helicobacter pylori (H. pylori) is a small curved and S-shaped Gram negative bacilli, with up to five sheathed flagelae arising from one end. The bacteria has been associated to some histological changes and gastroduodenal diseases, among which active chronic gastritis, duodenal ulcer, gastric adenocarcinoma and mucosa-associated lymphoid tissue (MALT) lymphoma. A cross-sectional study was conducted in the urban area of Teresina, a city situated in the Northeast of Brazil, the poorest region of the country. The aims of this study were to determine (a) the prevalence of active H. pylori infection in asymptomatic children, in 0.5¿12-year-olds, (b) the age-distribuition pattern during childhood, and (c) the relationships with factors such as SES (including family income, housing and sanitary conditions) and gender. Data collect was carried out in a community base, by sampling, at random, in a zone of the city inhabited by population groups with different SES and available sanitary infrastructure, though they have lived in adjacent areas. This zone includes concentrated areas of high and middle classes families along with powerty areas in shantytowns with mud wallet dwellings for the very low income families. The global population that participated in this study was constituted of 303 children, divided in two groups: group I, composed of 169 children from low income families, and group II composed of 134 from families with higher incomes and standards of living. Of the eligible study population, 163 (53,8%) were males and 140 (46,2%) females. The diagnostic method used in this study was a noninvasive enzyme linked imuneassay (ELISA) that detects H. pylori specific antigen (HpSA) in selected faeces samples, employing anti-HpSA policlonal antibody absorbed in microwells. Overall 303 stool samples analysed, 115 (38.0%) were HpSA positive. Low income population (group I) presented greater prevalence rates, equivalent to 55.0%, while in high income population (group II) the prevalence was only 16.4%. In both groups, it was very clear that H. pylori infection occurs early in childhood since a very young ages and increases gradually with age. It was found that the prevalence rates, in accordance with gender, was not considered statistically significant. This study has shown that low family income, precarious conditions of living, housing and sanitary infrastructure can play an important role in H. pylori infection acquisition. On the other hand, there was a clear relationship between low H. pylori prevalence with high standards of living. In fact, the low prevalence observed in high SES group, similar to the rates showed in developed countries, may be linked to improvements in hygiene pratices and standards of living / Mestrado / Medicina Interna / Mestre em Ciências Médicas
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