Submitted by Pós Imunologia (ppgimicsufba@gmail.com) on 2017-02-14T17:04:39Z No. of bitstreams: 1 TESE-TATIANE SANTANA SALES.pdf: 2251188 bytes, checksum: 871fe88b233e8e23e585f22cc3a33431 (MD5) / Approved for entry into archive by Delba Rosa (delba@ufba.br) on 2017-03-23T12:58:11Z (GMT) No. of bitstreams: 1 TESE-TATIANE SANTANA SALES.pdf: 2251188 bytes, checksum: 871fe88b233e8e23e585f22cc3a33431 (MD5) / Made available in DSpace on 2017-03-23T12:58:12Z (GMT). No. of bitstreams: 1 TESE-TATIANE SANTANA SALES.pdf: 2251188 bytes, checksum: 871fe88b233e8e23e585f22cc3a33431 (MD5) / FAPESB / Na caprino-ovinocultura do nordeste brasileiro observa-se alta prevalência da infecção por Corynebacterium pseudotuberculosis que resulta na Linfadenite Caseosa, gerando prejuízos econômicos significativos. O nematódeo gastrointestinal Haemonchus contortus também infecta os pequenos ruminantes, resultando em prejuízos econômicos e produtivos. Dessa forma, é importante a compreensão da interferência da infecção pelo H. contortus na possível modulação imune contra C. pseudotuberculosis em caprinos. Uma vez que a infecção por C. pseudotuberculosis desenvolve uma resposta Th1 predominante e que o H. contortus, induz uma expressiva estimulação Th2. O presente estudo avaliou a indução de resposta imune humoral e celular contra o Corynebacterium pseudotuberculosis em caprinos co-infectados pelo nematóide Haemonchus contortus. Assim, nos diferentes grupos experimentais, caprinos foram inoculados ou não com 107 UFC de uma linhagem de alta virulência (C57) de C. pseudotuberculosis, por via subcutânea, e com aproximadamente 10.000 larvas infectante L3 de H. contortus por via oral. Foram acompanhados por um período de oito meses até serem necropsiados. Utilizou-se o teste ELISA e westen blotting para o acompanhamento da cinética da resposta e da reatividade específica por anticorpos da classe IgG e a dosagem de IFN- para avaliação da reatividade in vitro, em culturas de sangue periférico estimuladas com antígenos destes dois patógenos. A técnica parasitológica de OPG e a morfométrica das células inflamatórias na mucosa abomasal foram realizadas para avaliação in loco da infecção pelo nematódeo. Os resultados evidenciaram expressivos níveis de anticorpos e uma reduzida produção da citocina IFN- contra o C. pseudotuberculosis nos animais co-infectados, que manifestaram lesões nos linfonodos internos e em algumas vísceras e alta carga parasitária. Ainda nos animais co-infectados observou-se níveis menos expressivos de IgG anti-H. contortus. Quanto ao reconhecimento antigênico através do wesrtern blotting, identificou-se oito proteínas de C. pseudotuberculosis e cinco proteínas do helminto. A ocorrência da resposta imune inata foi observada através da análise morfométrica da mucosa abomasal, onde foram identificados os linfócitos, eosinófilos, plasmócitos e macrófagos em todos os grupos; e uma população de mastócitos expressiva nos grupos infectados com este verme. Com os resultados obtidos conclui-se que as respostas imunes inata e adaptativa contra o H. contortus implicam numa significativa estimulação de mecanismos Th2. Os resultados também sugerem que tal estimulação module negativamente a resposta Th1 contra o C. pseudotuberculosis, entretanto, torna-se necessário novos estudos para a melhor compreensão desta modulação. / In goat and sheep breeding in northeastern Brazil, observed a high prevalence of infection with Corynebacterium pseudotuberculosis resulting in caseous lymphadenitis, causing significant economic losses. Gastrointestinal nematode Haemonchus contortus also infect small ruminants, resulting in economic and production losses. Thus, it is important to understand the interference of infection with H. contortus in possible immune modulation against C. pseudotuberculosis in goats. Once infection with C. pseudotuberculosis develops a predominantly Th1 response and H. contortus, induces a significant stimulation of Th2. This study evaluated the induction of humoral and cellular immune response against Corynebacterium pseudotuberculosis in co-infected goats by Haemonchus contortus. Thus, the different experimental groups, goats were inoculated with or without 107 CFU of a highly virulent strain (C57) of C. pseudotuberculosis, subcutaneously, and approximately 10.000 infective larvae L3 H. contortus orally. They were followed by a period of eight months before being necropsied. We used ELISA and Westen blotting for monitoring the response kinetics and specific reactivity of antibodies of the IgG and IFN- dosage for evaluation of in vitro reactivity in peripheral blood cultures stimulated with antigens of these two pathogens. The parasitological technique OPG and morphometric of inflammatory cells in the abomasal mucosa were performed to on-site evaluation of nematode infection. The results showed significant levels of antibodies and a reduced production of IFN- cytokine against C. pseudotuberculosis in co-infected animals, which showed lesions in lymph nodes and internal in some viscera and high parasite load. Also in co-infected animals there was less significant levels of IgG anti-H.contortus. As for the antigen recognition by westen blotting, it identified eight proteins of C. pseudotuberculosis and five proteins helminth. The occurrence of the innate immune response was observed using the morphometric analysis of the abomasal mucosa were identified where lymphocytes, eosinophils, plasma cells and macrophages in all groups; and a population of mast cells in significant with this worm groups infected. With the results obtained it is concluded that the innate and adaptive immune responses against H. contortus imply a significant stimulation of Th2 mechanisms. The results also suggest that such stimulation negatively modulates the Th1 response against C. pseudotuberculosis, however, it is necessary to further studies to better understand this negative regulation.

Submitted by Pós Imunologia (ppgimicsufba@gmail.com) on 2017-02-14T19:10:47Z No. of bitstreams: 1 tese Danielle versão impressão.pdf: 1369230 bytes, checksum: 604c9e73ccec35bb56dba2e4a42c429b (MD5) / Approved for entry into archive by Delba Rosa (delba@ufba.br) on 2017-06-07T13:17:53Z (GMT) No. of bitstreams: 1 tese Danielle versão impressão.pdf: 1369230 bytes, checksum: 604c9e73ccec35bb56dba2e4a42c429b (MD5) / Made available in DSpace on 2017-06-07T13:17:53Z (GMT). No. of bitstreams: 1 tese Danielle versão impressão.pdf: 1369230 bytes, checksum: 604c9e73ccec35bb56dba2e4a42c429b (MD5) / FAPESB / Corynebacterium pseudotuberculosis é o agente causador da linfadenite caseosa em caprinos e ovinos caracterizado por formação de granulomas nos linfonodos superficiais e em órgãos internos. Diversas tentativas já foram realizadas para o desenvolvimento de candidatos vacinais que sejam capazes de induzir uma resposta imune protetora eficaz. O presente estudo avaliou indicadores da resposta imune inata e adaptativa em ovinos inoculados com uma linhagem de baixa virulência de C. pseudotuberculosis e a seus antígenos secretados. Cinco ovinos foram inoculados com a dose 109 UFC de uma linhagem de baixa virulência (T1) de C. pseudotuberculosis, cinco com 250μg de antígenos secretados em um meio quimicamente definido (MQD) e três animais foram utilizados para compor o grupo controle. Os animais foram desafiados com uma dose de 2x105 UFC de uma linhagem virulenta de C. pseudotuberculosis, e posteriormente necropsiados. Foram utilizados testes ELISA para identificação de IgM e IgG específica, e dosagem de IFN- para avaliação dos mecanismos humoral e celular. A técnica de PCR em tempo real foi utilizada para avaliação da expressão do RNAm de TNF-α, IL-1β e dos TLRs 2, 4, 9 em células de linfonodos inguinais. Com este experimento, conclui-se que o aumento na produção de IgG e uma maior expressão de RNAm de TNF-α e dos TLRs 2,4 e 9 em células de linfonodos inguinais podem estar associados a uma menor chance de surgimento de lesões em animais inoculados com a cepa de baixa virulência (T1). Os níveis de IFN- estiveram associados à progressão clínica da enfermidade no grupo MQD. / Corynebacterium pseudotuberculosis is the causative agent of caseous lymphadenitis in goats and sheep, which induces the formation of caseous lesions in subcutaneous lymph nodes and in internal organs. Several attempts have already been made for the development of vaccine candidates capable of inducing an effective protective immune response. The present study aimed to evaluate indicators of innate and adaptive immune response in sheep inoculated with a strain of low virulence of C.pseudotuberculosis and their secreted antigens. Five animals were inoculated with a dose 109 CFU of C. pseudotuberculosis of low virulence strain (T1), five with 250μg of secreted antigens in a chemically defined medium (CDM) more 1,5 mg saponins from Quillaja saponaria saponin as adjuvant and three animals were used to compose the control group. Animals were challenged with a dose of 2x105 CFU of virulent strain of C. pseudotuberculosis, and later necropsied. ELISA tests for identification of specific IgM and IgG and dosage of IFN -  were used to evaluate the humoral and cellular response. The technique of real-time PCR was used to evaluate the mRNA expression of TNF - α , IL - 1β and TLRs 2 , 4 , 9 . In this experiment, it was concluded that the increase in IgG production and increased mRNA expression of TNF- α and TLRs 2,4 and 9 may be associated with a lower chance of lesions in animals inoculated with a strain of low virulence of C.pseudotuberculosis. The levels of IFN -  were associated with clinical progression of the disease in MQD group.

Submitted by Pós Imunologia (ppgimicsufba@gmail.com) on 2017-02-14T16:02:01Z No. of bitstreams: 1 Tese ELISABETE LOPES CONCEIÇÃO.pdf: 1470553 bytes, checksum: a38beb6dfeaae41d703bf5282cabb0a3 (MD5) / Approved for entry into archive by Uillis de Assis Santos (uillis.assis@ufba.br) on 2017-06-20T20:34:44Z (GMT) No. of bitstreams: 1 Tese ELISABETE LOPES CONCEIÇÃO.pdf: 1470553 bytes, checksum: a38beb6dfeaae41d703bf5282cabb0a3 (MD5) / Made available in DSpace on 2017-06-20T20:34:44Z (GMT). No. of bitstreams: 1 Tese ELISABETE LOPES CONCEIÇÃO.pdf: 1470553 bytes, checksum: a38beb6dfeaae41d703bf5282cabb0a3 (MD5) / Capes / O Mycobacterium tuberculosis e o vírus da imunodeficiência humana (HIV) agem em sinergia prejudicando a resposta imune para eliminação de ambos os patógenos. Fatores genéticos dos hospedeiros podem ser determinantes para o risco de progressão da tuberculose (TB) e infecção pelo HIV. Algumas variações genéticas têm sido associadas a diferenças no potencial para indução de apoptose e a alterações na produção de citocinas, tais como os polimorfismos de base única (SNPs) TNF-308G>A, DDX39B -22 G>C e -348C>T. Outra característica que acompanha a evolução da infecção é o estresse oxidativo sistêmico e o aumento da peroxidação. A Heme oxigenase-1 (HO-1) é o principal agente anti-oxidante expresso no tecido pulmonar, uma enzima de resposta ao estresse que degrada moléculas heme para a liberação de íons ferro, monóxido de carbono (CO) e biliverdina (BV). O presente trabalho propôs investigar fatores genéticos e imunológicos relacionados à imunopatogênese da TB e co-infecção TB-HIV. Para a realização do trabalho foram realizados: 1) uma revisão sistemática da literatura sobre os polimorfismos genéticos envolvidos nas vias e morte e associados com TB, 2) um estudo observacional de corte transversal para determinar a frequência de polimorfismos em voluntários monoinfectados com TB latente ou ativa e coinfectados com TB-HIV. Para este último foram recrutados 109 pacientes com tuberculose pulmonar (PTB), 60 pacientes coinfectados com HIV (TB-HIV) e 74 indivíduos com infecção tuberculosa latente (LTBI), e 3) Uma coorte avaliando os níveis de HO-1 e MMP-1 em pacientes com TB. Na revisão sistemática os polimorfismos dos genes do TNF, TNFR, IL-1 e P2RX7 estavam associados com tuberculose. No estudo de corte transversal a frequência do genótipo TNF-308G foi maior para o grupo LTBI comparado com TB e TB-HIV. A produção de TNF foi maior 8 entre os pacientes com PTB portadores do genótipo TNF -308GG. Os níveis de IL- 1α e IL-1β também foram mais elevados entre os pacientes com PTB portadores dos genótipos DDX39B -22CC e DDX39B -348CC. Não houve relação entre a produção de citocinas e a extensão da doença. Na coorte, os pacientes com TB apresentaram uma dicotomia na resposta de HO-1 MMP-1 com dois fenótipos, HO-1hiMMP-1lo e MMP-1 HO-1loMMP-1hi. Nosso estudo sugere que polimorfismos envolvidos na via de morte podem estar associados com susceptibilidade para o desenvolvimento da tuberculose, contudo, a frequência dos alelos e genótipos para os polimorfismos estudados não diferiram na co-infecção pelo HIV. O mecanismo entre o estresse oxidativo e remodelamento do tecido pode ter aplicabilidade clínica nos estágios da progressão da TB. / Mycobacterium tuberculosis and human immunodeficiency virus (HIV) act synergistically damaging immune response to eliminate both pathogens. Genetic factors of the host can be decisive for the risk of progression of tuberculosis (TB) and HIV infection. Some genetic changes have been associated with differences in potential for induction of apoptosis and changes in cytokine production such as single nucleotide polymorphisms (SNPs) TNF-308G> A, DDX39B -22 G> C and -348C> T. Another feature that monitors the infection is systemic oxidative stress and increased peroxidation. The heme oxygenase-1 (HO-1) is the primary anti-oxidant expressed in lung tissue, a response of the enzyme to stress that degrades heme molecules to the release of iron ions, carbon monoxide (CO), and biliverdin (BV) . This study proposed to investigate genetic and immunological factors related to TB immunopathogenesis and co-infection TB-HIV. To carry out the work were performed: 1) a systematic review of the literature on genetic polymorphisms involved in the pathways and death associated with TB, 2) an observational cross-sectional study to determine the frequency of polymorphisms in volunteers monoinfected with latent TB or active and co-infected with TB-HIV. For the latter were recruited 109 patients with pulmonary TB (PTB), 60 patients co-infected with HIV (HIV-TB) and 74 individuals with latent tuberculosis infection (LTBI), and 3) a cohort evaluating the levels of HO-1 and MMP- 1 in patients with TB. In the systematic review of TNF polymorphisms of genes, TNFR, IL-1 and P2RX7 were associated with tuberculosis. In the cross-sectional study the frequency of TNF-308G genotype was higher for LTBI group compared with TB and TB-HIV. The production of TNF was higher among patients with PTB patients TNF -308GG genotype. IL-1α and IL-1β were also higher among patients 10 with genotypes of PTB patients DDX39B -22CC and DDX39B -348CC. No relation between the production of cytokines and the extent of disease. In cohort, patients with TB presented a dichotomy in HO-1 MMP-1 response with two phenotypes, HO- 1hiMMP-1lo HO-1 and MMP-1loMMP-1hi. Our study suggests that polymorphisms involved in the death pathway may be associated with susceptibility to the development of tuberculosis, however, the frequency of alleles and genotypes for the studied polymorphisms did not differ in co-infection with HIV. The mechanism of oxidative stress and remodeling of the tissue may have clinical applicability in the progression of TB staging.

Submitted by Pós Imunologia (ppgimicsufba@gmail.com) on 2017-02-14T15:24:05Z No. of bitstreams: 1 DISSERTAÇÃO - Samara Alves Sá Teles.pdf: 1106383 bytes, checksum: 1bb15f702feb2f073001225aaae2d132 (MD5) / Approved for entry into archive by Delba Rosa (delba@ufba.br) on 2017-06-29T13:56:29Z (GMT) No. of bitstreams: 1 DISSERTAÇÃO - Samara Alves Sá Teles.pdf: 1106383 bytes, checksum: 1bb15f702feb2f073001225aaae2d132 (MD5) / Made available in DSpace on 2017-06-29T13:56:29Z (GMT). No. of bitstreams: 1 DISSERTAÇÃO - Samara Alves Sá Teles.pdf: 1106383 bytes, checksum: 1bb15f702feb2f073001225aaae2d132 (MD5) / CAPES / Com o aumento da prevalência de doenças inflamatórias, em especial as alérgicas, a busca por estratégias terapêuticas visando à melhoria de vida dos indivíduos doentes tornou-se um vasto campo de pesquisa. Neste âmbito, o uso de helmintos e derivados que possuem potencial imunomodulatório tem se mostrado eficiente na inibição da inflamação em modelos experimentais dessas doenças. Objetivo: Produzir e analisar, in silico, o antígeno recombinante do Trichuris trichiura homólogo ao fator inibidor de migração de macrófagos (rTt-MIF) e avaliar seu efeito em cultura de células monomorfonucleares de sangue periférico (CMSP) de indivíduos atópicos e não atópicos. Métodos: A análise in silico da proteína foi realizada utilizando diversas ferramentas de bioinformática. A sequência codificadora do antígeno recombinante foi sintetizada e clonada em um plasmídeo de expressão, a partir do qual foi realizada a expressão heteróloga da proteína em sistema procarioto, com posterior purificação por cromatografia de afinidade e determinação do conteúdo proteico e de endotoxina. Após teste cutâneo e dosagem de IgE por ImunoCAP, foram selecionados 12 indivíduos não atópicos e 14 indivíduos atópicos cujo sangue periférico foi coletado para realizar o cultivo de células monomorfonucleares. As células foram cultivadas sob três condições: estímulo do rTt-MIF, meio de cultivo sem estímulo e estimuladas por Pokeweed ou LPS. Após o cultivo, os sobrenadantes foram coletados para realização da dosagem das citocinas IL-10, IFN-γ, IL-5 e IL-17A. Resultados: A molécula caracterizada como estável e solúvel foi produzida, obtida na quantidade de 2,4 mg/mL com 1,9 EU/mL. O rTt-MIF induziu o aumento da produção de IL-10 pelas células dos indivíduos atópicos (P=0,0001) e dos não atópicos (P=0,0005). Em relação às citocinas IFN-γ, IL-5 e IL-17, o rTt-MIF não induziu a produção destas pelas células dos indivíduos atópicos e não atópicos. Conclusão: A ação do rTt-MIF sobre o cultivo de células momonucleares do sangue periférico, de aumentar a produção de IL-10 e não induzir a produção de IFN-γ, IL-5 e IL-17A, mostra o potencial imunomodulador dessa molécula, com possível efeito de reduzir a elevação de eosinófilos, neutrófilos e citocinas inflamatórias. / With the increasing prevalence of inflammatory diseases, in particular allergies, the search for therapeutic strategies aiming to improve life quality of sick individuals has become a vast field of research. In this context, the use of helminths and their derivatives that demonstrate potential immunomodulatory effect has been effective in inhibiting inflammation in experimental models of inflammatory diseases. Objective: To produce and analyze in silico the recombinant antigen from Trichuris trichiura homologous to the macrophage migration inhibitory factor (rTt-MIF) and evaluate its effect on peripheral blood mononuclear cells culture (PBMC) of atopic and non-atopic individuals. Methods: Bioinformatics tools made the analysis in silico. The Tt-MIF codifying sequence was synthesized and cloned into a plasmid, allowing the heterologous expression of the protein in a prokaryotic system, with subsequent purification by affinity chromatography and protein and endotoxin quantifications. After prick test and IgE dosage by ImmunoCAP test, 12 non-atopic individuals and 14 atopic individuals were selected, whose peripheral blood were collected to obtain the mononuclear cells (PBMC) for in vitro culture. Cells were stimulated with the rTt-MIF, as negative control cells were cultivated without stimuli and, as positive control, cells were cultivated with Pokeweed or LPS. After the culture, the supernatants were assayed to quantify IL-10, IFN-γ, IL-5 and IL-17A. Results: The protein characterized as soluble and stable was produced and obtained in the amount of 2,4 mg/mL with 1,9 EU/mL. The rTt-MIF induced a stimulatory effect on IL-10 production by cells from atopic individuals (P=0.0001) and by cells from non-atopic individuals (P=0,0005). The rTt-MIF did not induce the production of IFN-γ, IL-5 and IL-17A by cells from atopic and non-atopic individuals. Conclusion: The effects of rTt-MIF increasing IL-10 production and not inducing the production of IFN-γ, IL-5 and IL-17A on human PBMC cultures are indicative of its immunomodulatory potential, with possible effect of decreasing eosinophilic and neutrophilic presence and inducing immune regulation.

Submitted by Pós Imunologia (ppgimicsufba@gmail.com) on 2017-02-20T16:04:48Z No. of bitstreams: 1 Tese_Leonardo N Santos_2015.pdf: 2984020 bytes, checksum: 9d50efbbf3adc016e9e13dce54e5a3d2 (MD5) / Approved for entry into archive by Delba Rosa (delba@ufba.br) on 2017-06-07T13:34:06Z (GMT) No. of bitstreams: 1 Tese_Leonardo N Santos_2015.pdf: 2984020 bytes, checksum: 9d50efbbf3adc016e9e13dce54e5a3d2 (MD5) / Made available in DSpace on 2017-06-07T13:34:06Z (GMT). No. of bitstreams: 1 Tese_Leonardo N Santos_2015.pdf: 2984020 bytes, checksum: 9d50efbbf3adc016e9e13dce54e5a3d2 (MD5) / FAPESB / Helmintos modulam a resposta imune do hospedeiro e, consequentemente, protegem contra doenças inflamatórias. Diferentes classes de proteínas recombinantes derivadas destes parasitos, produzidas em sistemas de expressão procarióticos e eucarióticos, têm sido capazes de inibir respostas inflamatórias em modelos experimentais de doenças imunomediadas. A identificação do conteúdo proteico de frações do extrato somático de Trichuris trichiura com efeitos imunomodulatórios foi alcançada através de análises em sistema de cromatografia líquida acoplada à espectrometria de massas em uma abordagem proteômica que indicou proteínas candidatas a serem responsáveis por esta atividade biológica. Os resultados desta abordagem foram confirmados e expandidos pela análise transcriptômica do estágio adulto de T. trichiura usando tecnologia de sequenciamento de nova geração e uma estratégia de montagem de novo, onde vinte transcritos que codificam para as proteínas previamente detectadas foram identificados, sendo que cinco desses estão entre as sequências codificadoras de proteínas mais expressas no verme adulto. Estas análises contribuirão para a anotação funcional da sequência genômica de T. trichiurarecém disponibilizada e viabilizarão a produção de proteínas recombinantes codificadas por estes transcritos que poderãolevar ao desenvolvimento de novos medicamentos para a terapia de doenças alérgicas e autoimunes. / Helminths modulate the host immune response and, consequently, protect it against inflammatory diseases. Different classes of recombinant proteins derived from these parasites, produced in prokaryotic and eukaryotic expression systems, were able to inhibit inflammatory responses in experimental models of immune mediated diseases. The identification of the protein content of Trichuris trichiura somatic extract fractions with immunomodulatory effects was achieved by liquid chromatography coupled to mass spectrometry in a proteomics approach that indicated candidate proteins to be responsible for this biological activity. The results of this approach were confirmed and expanded by transcriptomic analysis of T. trichiura adult worm using next-generation sequencing technology and a de novo assembly strategy, where twenty transcripts that code for previously detected proteins were identified, and five of whom were among the most expressed protein-encoding sequences in the adult worm. These analyses will contribute to the functional annotation of the recently released draft genomic sequence of this nematode and will enable the production of recombinant proteins, encoded by these transcripts, that may lead to the development of new drugs for the treatment of allergy, autoimmune and other inflammatory diseases.

Submitted by Pós Imunologia (ppgimicsufba@gmail.com) on 2017-02-20T17:18:55Z No. of bitstreams: 1 TESE - ROBSON DA PAIXÃO DE SOUZA.pdf: 7064820 bytes, checksum: 057f767f4c31ecf89293575aa9b1c4a3 (MD5) / Approved for entry into archive by Delba Rosa (delba@ufba.br) on 2017-06-28T11:49:31Z (GMT) No. of bitstreams: 1 TESE - ROBSON DA PAIXÃO DE SOUZA.pdf: 7064820 bytes, checksum: 057f767f4c31ecf89293575aa9b1c4a3 (MD5) / Made available in DSpace on 2017-06-28T11:49:31Z (GMT). No. of bitstreams: 1 TESE - ROBSON DA PAIXÃO DE SOUZA.pdf: 7064820 bytes, checksum: 057f767f4c31ecf89293575aa9b1c4a3 (MD5) / A esquistossomose mansoni constitui importante infecção que impacta em aspectos socioeconômicos e de saúde pública. Cerca de 6 milhões de brasileiros estão infectados e destes 5 a 10% podem apresentar as formas mais graves da doença. Entretanto, o desenvolvimento de resistência à infecção pelo Schistosoma mansoni representada por baixa carga parasitária em indivíduos residentes em áreas endêmicas, vem despertando bastante interesse e controvérsia. Através da citometria de fluxo, foram avaliados os perfis dos linfócitos T (CD4 e CD8) e linfócitos B (CD19), grau de ativação celular e produção de citocinas dos padrões de respostas Th1 (IFN-), Th2 (IL-5) e regulatório (IL-10) em indivíduos com diferentes cargas parasitárias e a possível associação no desenvolvimento da resistência à infecção. Além disso, neste estudo foi avaliado a resposta imune dos indivíduios resistentes à infecção participação dos antígenos candidatos vacinais, SWAP, rSm29 e rSm22.6. Foi observado que os indivíduos com baixa carga parasitária apresentam padrão de resposta misto do tipo Th1, Th2 e regulatório. Aliado a isto, os indivíduos resistentes apresentaram maior expressão de moléculas coestimulatórias (CD28 e CTLA-4). Na avaliação das células de memória, os indivíduos com baixas cargas parasitárias apresentam maiores proporções de células memória TCD4+. Por outro lado, sugere-se que a susceptibilidade à infecção e a esteja associada a uma possível exaustão do pool de células de memória central e aumento no compartimento de células de memória efetora. Contudo, não foram observadas diferenças significativas nos fenótipos das células T e B e também na produção de citocinas pelas CMSP após estímulo dos antígenos testados neste estudo. / Schistosomiasis is an important parasite infection that impacts on socio-economic and public health aspects. About 6 million Brazilians are infected and 5 to 10% may experience the most severe forms of the disease. However, the development of resistance to infection by Schistosoma mansoni represented by low parasite burden, in individuals living in endemic areas, is of considerable interest and controversy. Using flow cytometry method were evaluated the profile of T lymphocytes (CD4 and CD8) and B lymphocytes (CD19) and the degree of cellular activation and cytokine production of Th1 (IFN-), Th2 (IL-5) and regulatory (IL-10) patterns in patients with different parasitic loads and possible association with the development of resistance to the infection. Moreover, in this study we evaluated the immune response of resistant individuals to the Schistosoma candidate vaccine antigens, SWAP, rSm29 and rSm22.6. It was observed that individuals with low parasite burden presented a mixed type of imune response, characterized by the Th1, Th2 and regulatory response. Added to this, the resistant individuals had a higher expression of costimulatory molecules (CD28 and CTLA-4). In relation to the memory cells, individuals with low parasitic loads had higher proportions of CD4+ T memory cell. Therefore, it is suggest that susceptibility to infection is associated with a possible exhaustion of the main memory cell pool and increased of effector memory cells compartment. There was, however, no significant differences in the phenotypes of B and T cells and cytokine production by PBMC stimulated by the S. mansoni antigens used in this study.

Submitted by Pós Imunologia (ppgimicsufba@gmail.com) on 2017-03-14T15:46:34Z No. of bitstreams: 1 dissertação DANIELLE MIMOSO.pdf: 901513 bytes, checksum: 7f7c98092741a35d39bc3f951c13e94a (MD5) / Approved for entry into archive by Delba Rosa (delba@ufba.br) on 2017-04-24T12:30:34Z (GMT) No. of bitstreams: 1 dissertação DANIELLE MIMOSO.pdf: 901513 bytes, checksum: 7f7c98092741a35d39bc3f951c13e94a (MD5) / Made available in DSpace on 2017-04-24T12:30:34Z (GMT). No. of bitstreams: 1 dissertação DANIELLE MIMOSO.pdf: 901513 bytes, checksum: 7f7c98092741a35d39bc3f951c13e94a (MD5) / FAPESB / O eixo (HPA) hipotálamo-pituitária-adrenal é ativado em resposta ao estresse.Estudos mostraram que, em algumas infecções os níveis de cortisol, corticosterona e de ACTH estavam aumentados, indicando uma ativação do eixo HPA. Os glicocorticoides são hormônios que afetam o metabolismo e a resposta imunitária de várias formas, incluindo a diminuição da produção de citocinas pró-inflamatórias. A leishmaniose é uma doença causada por protozoários do gênero Leishmania, sendo um grave problema de saúde em várias partes do mundo, incluindo Brasil. Infecção por Leishmania pode levar a um amplo espectro de manifestações clínicas: a leishmaniose cutânea (LC), leishmaniose disseminada (DL), leishmaniose mucosa (LM), leishmaniose cutânea difusa (DCL) ea leishmaniose visceral (LV). No presente trabalho, investigamos se os pacientes com LV tem mudanças nos níveis de ACTH e cortisol e se essas alterações estão relacionadas a alguns marcadores clínicos e/ ou imunológicos da doença. MATERIAL E MÉTODOS Foram avaliados um grupo de pacientes com LV (n = 37) e CTL (n = 34), com idades variando de 2 a 11 anos e índice de massa corporal (IMC) similares.Os Hormônios (ACTH e cortisol) foram quantificados utilizando tecnologia Luminex e citocinas (IL1β, TNF-α, IL-6, IL-8, IL-10, IL-12, IFN-γ) foram determinadas por citometria de fluxo (CBA). RESULTADOS E DISCUSSÃO Os indivíduos com LV apresentaram níveis mais altos de cortisol (14,79 ng / mL ± 11,13) e ACTH (9.040 pg / mL ± 26,42) que os controles (12,00 ng / mL ± 1,831, P = 0,0004 e 1,880 pg / mL ± 48,08, P <0,0001, respectivamente) .O cortisol teve correlação positiva com o tempo de doença (r = 0,4105, P = 0,04), frequência respiratória (r = 0,44 P = 0,015) e IL-6 (r = 0,389, P = 0,0405). O ACTH teve correlação positiva com TNF-α (r = 0,3769, P = 0,040) e IL-1β (r = 0,3762, P = 0,0405). CONCLUSÕES: Nossos resultados indicam que os pacientes com LV tem uma ativação do eixo HPA e que esta pode ser associada com a progressão da doença. A elevação de algumas citocinas como a IL-6 pode estar envolvida nesta ativação e aumento do cortisol. / INTRODUCTION The Hypothalamic-Pituitary-Adrenal (HPA) axis is activated in response to stress. Studies have showed that in some infections there is elevation of cortisol or corticosterone and ACTH, indicating an activation of HPA axis. Glucocorticoids are hormones that affect the metabolism and immune response in several ways, including decreased production of proinflammatory cytokines. Leishmaniasis is a disease caused by protozoans of the genus Leishmania that is a serious health problem in several parts of the world including Brazil. Leishmania infection can lead to a wide spectrum of clinical manifestations: cutaneous leishmaniasis (CL), disseminated leishmaniasis (DL), mucosal leishmaniasis (ML), diffuse cutaneous leishmaniasis (DCL) and visceral leishmaniasis (VL). In the present work, we investigated whether patients with VL have changes in ACTH and cortisol levels and if these alterations are related to some clinical or immunological markers of disease. MATERIAL AND METHODS We evaluated a group of patients with VL (n=37) and healthy volunteers (n=34) with ages ranging from 2 to 11 years and similar body mass index (BMI). Hormones (ACTH and cortisol) were quantified using multiplex bead-based Luminex technology and cytokines (IL1β, TNF-α,IL-6,IL- 8,IL-10,IL-12,IFN-γ) were determinate by cytometric beads array (CBA). RESULTS AND DISCUSSION Individuals with VL exhibited higher levels of cortisol (14.79 ng/mL ±11.13) and ACTH (9.040 pg/mL±26.42) than controls (12.00 ng/mL±1.831, P=0.0004 and 1.880 pg/mL±48.08, P<0.0001, respectively).Levels of cortisol positively correlated with time of disease (r= 0.4105, P=0.04), respiratory frequency (r=0.44 P=0.015) and IL-6 (r=0.389, P=0.0405). ACTH positively correlated with TNF-α (r=0.3769, P=0.040) and IL- 1β (r=0.3762, P=0.0405). CONCLUSIONS: These results indicate that patients with VL have an activation of the HPA axis and that this activation could be associated with the outcome of disease. The elevation of some cytokines as IL-6 could be involved in the HPA activation and increase of cortisol.

Submitted by Hiolanda Rêgo (hiolandar@gmail.com) on 2013-09-17T19:23:45Z No. of bitstreams: 1 Dissertação_ICS_ Raquel Crisóstomo Lima Verde.pdf: 2317368 bytes, checksum: 9ec788fa9a7fd79189cbb5ee2ca7e2f5 (MD5) / Approved for entry into archive by Patricia Barroso(pbarroso@ufba.br) on 2013-09-18T17:40:32Z (GMT) No. of bitstreams: 1 Dissertação_ICS_ Raquel Crisóstomo Lima Verde.pdf: 2317368 bytes, checksum: 9ec788fa9a7fd79189cbb5ee2ca7e2f5 (MD5) / Made available in DSpace on 2013-09-18T17:40:33Z (GMT). No. of bitstreams: 1 Dissertação_ICS_ Raquel Crisóstomo Lima Verde.pdf: 2317368 bytes, checksum: 9ec788fa9a7fd79189cbb5ee2ca7e2f5 (MD5) / National Institutes of Health (NIH); Bolsa de Estudo da Coordenação de Aperfeiçoamento de Pessoal de Nível Superior (CAPES). / Introdução: A infecção pelo vírus linfotrópico humano de células T do tipo 1 é caracterizada por proliferação de linfócitos e elevada produção espontânea de citocinas do tipo Th1, como IFN- e TNF-α. A atopia é uma disfunção do sistema imunológico na qual há produção exacerbada de citocinas do tipo Th2, principalmente IL-4, IL-5 e IL-13, proliferação de linfócitos B, produção elevada de IgE e eosinofilia. Na literatura, a relação da influência do HTLV-1 na resposta imune do tipo Th2 e na prevalência de atopia não estão completamente esclarecidos. Objetivos: Avaliar se a atopia interfere no desenvolvimento e na gravidade das manifestações neurológicas associadas ao HTLV-1. Comparar a produção espontânea de citocinas em pacientes infectados com HTLV-1 com e sem atopia. Metodologia: Foram realizados um estudo de corte transversal e uma coorte retrospectiva. No primeiro foi determinada a prevalência de atopia em portadores de HTLV-1 e em pacientes com HAM/TSP. Adicionalmente foi comparada a produção espontânea de citocinas entre os indivíduos atópicos e não atópicos de cada grupo. Na coorte retrospectiva foi comparado o desenvolvimento de manifestações neurológicas em indivíduos atópicos e não atópicos. Resultados: Não houve diferença estatística na prevalência de atopia entre portadores de HTLV-1 e pacientes com HAM/TSP (p=0,884). Porém, pacientes com HAM/TSP atópicos tiveram uma maior produção espontânea de IL-5 do que os não atópicos (p=0,008), e apresentaram uma elevada produção de IFN-γ (1724±1201pg/ml). Não houve associação entre a presença de atopia e o desenvolvimento de manifestações neurológicas. Porém, houve associação estatísticamente significante entre a presença de rinite alérgica e o desenvolvimento de sinal de Babinsky (p=0,039) e bexiga hiperativa (p=0,007). Conclusões: Apesar de não haver diferença estatística entre a presença de atopia e o desenvolvimento de manifestações neurológicas ou de formas graves da infecção pelo HTLV-1, foi observado que, não só coexistem respostas Th1 e Th2 exacerbadas nos indivíduos infectados pelo HTLV-1, mas também, a doença alérgica pode interferir no curso clínico da infecção pelo HTLV-1. / Salvador

Submitted by Nuzia Santos (nuzia@cpqrr.fiocruz.br) on 2013-06-14T12:31:47Z No. of bitstreams: 1 Dissertação Raquel Gontijo.pdf: 2958488 bytes, checksum: 8dbc875d07ab2eefcee30117ac6d2fbf (MD5) / Made available in DSpace on 2013-06-14T12:31:47Z (GMT). No. of bitstreams: 1 Dissertação Raquel Gontijo.pdf: 2958488 bytes, checksum: 8dbc875d07ab2eefcee30117ac6d2fbf (MD5) Previous issue date: 2013 / Infecções causadas por Leishmania (Viannia) braziliensisapresentam manifestações clínicas diversas e a leishmaniose cutânea localizada (LCL) é a forma clínica mais comum. Na Terra Indígena Xakriabá, localizada no norte de Minas Gerais, 212 casos autóctones de LCL foram registrados no período de 2001 a 2007. O grande número de casos e as particularidades da área reforçam o interesse de investigar aspectos da resposta imune do hospedeiro em relação à infecção.O óxido nítrico (NO) é um potente agente citotóxico presente na resposta imune anti-Leishmania. Na LCL, um dos mecanismos de produção de NO envolve a ligação de IgE ao receptor CD23 de macrófagos num microambiente de citocinas IFN-γou IL-4. Apesar do papel crucial do NO no curso da infecção, tem sido relatada a existência de isolados de L. (V.) braziliensis resistentes à ação dessa molécula. Assim, os objetivos do presente trabalho foram avaliar por citometria de fluxo, o perfil de expressão do marcador de ativação CD23 e de produção de NO intracelular por monócitose o perfil de expressão das citocinas IFN-γe IL-4 por linfócitos T do sangue periférico de indivíduos não infectados (NI, n=10), Teste de Montenegro positivosem lesão (TM +, n=13) e portadores de leishmaniose cutânea localizada (LCL,n=17), considerando o tempo de evolução da lesão (LCL<60 dias, n=7; LCL>60 dias, n=10). Foi feita também a dosagem dos níveis séricos de IgE dos indivíduos participantes. Além disso, investigou-se a possível presença de L. (V.) braziliensis resistentes/susceptíveis ao NO em isolados de pacientes responsivos (C, n=5) e refratários ao tratamento (FT, n=5) com Glucantime®. Para o estudo imunológico foram realizadas culturas de leucócitos do sangue periférico na ausência (CC) ou presença de formas promastigotas vivas de L. (V.) braziliensis (LEISH) ou na presença de antígeno solúvel de L. (V.) braziliensis. A dosagem dos níveis séricos de IgE foi feita utilizando-se kit específico baseado na técnica ELISA sanduíche. Para identificação do perfil de resistência dos isolados foram feitos ensaios de viabilidade utilizando-se a técnica do MTT. Os resultados obtidos com o estudo imunológico mostram que o grupo LCL apresentou maior expressão de CD23 e maior produção de NO por monócitos em relação aosgrupos TM + e NI, além de menor expressão de IFN-γe IL-4 por linfócitos T CD4+ em relação ao grupo TM +. Por outro lado, o grupo TM + apresentou aumento relevante no percentual de altoprodutores das citocinas avaliadas, NO e CD23 quando comparadoao grupo NI. Ao dividirmos o grupo LCL por tempo de lesão, observamos no grupo LCL<60 grande frequência de alto produtores de IL-4, NO e CD23, indicando um perfil misto de ativação/modulação da imunidade inata. Os níveis séricos de IgE total foram menores no grupo LCL quando comparado aos grupos NI e TM + , havendo redução do grupo TM + em relação ao grupo NI. Além disso, dos 10 isolados testados, 8 foram resistentes à ação do NO, sendo que, os 2 sensíveis foram provenientes de indivíduos responsivos ao tratamento com Glucantime®. Diante disso, foi possível inferir queo utras fontes celulares, além dos linfócitos T, podem estar envolvidas na produção de citocinas no grupo LCL e que no grupo TM + há forte indício da participação do mecanismo de ativação de monócitos e indução de NO investigado neste estudo, favorecendoo controle da infecção, impedindo assim, o aparecimento de lesões. Além disso, a existência de isolados de L. (V.) braziliensis resistentes à ação do NO corrobora com achados de outros autores e pode estar diretamente relacionada com a resistência à ação do Glucantime®. / Infections caused by Leishmania (Viannia) braziliensis presents many clinical manifestations and localized cutaneous leishmaniasis (LCL) is the most common clinical form. At the Xakriabá Indigenous Land, located in the northern Minas Gerais, 212 autochtone cases of LCL was reported during theperiod of 2001 to 2007. The elevated number of cases and particularities of thearea reinforces the interest to investigate aspects of the host immune response in relation with infection. Nitric oxide (NO) it’s a potent cytotoxical agent present in theanti-Leishmania immune response. In LCL, one of many mechanisms of NO production involves the IgE bind to the macrophages CD23 receptor in a cytokines IFN-γor IL-4 microenvironment. Despite the crucial role of NO in the infection course, hasbeen related the existence of Leishmania (Viannia) braziliensis isolates resistant to NO action. Thus, the aims of this study was evaluate, by flow cytometry, the expression profile of CD23 activation marker and NO production by monocytes, and the expression profile of cytokines IFN-γ and IL-4 by T lymphocytes subpopulations of peripheral blood of noninfected individuals (NI, n=10), Positive Montenegro Skin Test without lesion (TM+, n=13) and patients with Localized Cutaneous Leishmaniasis (LCL, n=17), considering the evolution time of the lesion (LCL<60 days, n=7; LCL>60 days, n=10). Was made too, the seric IgE levels dosage in the participants. Besides this, was investigated the possible presence of the resistant/susceptible L. (V.) braziliensis isolates from responsive (C, n=5) and refractory (FT, n=5) patients to treatment with Glucantime®. For the immunological study, was realized leucocytes cultures of peripheral blood in the absence (CC) or presence of live L. (V.) braziliensis promastigotes/L. (V.) braziliensis soluble antigen (LEISH). The dosage of seric IgE levels was made using a specific kit based on sandwich ELISA technique. For the resistant/susceptible profile investigation, viability assays was made using the MTT technique. The obtained results with immunological study show that the LCL group present higher CD23 expression and higher NO production by monocytes in relation with TM + e NI groups, besides lower expression of IFN-γe IL-4 by CD4+ T lymphocytes when compared to TM + group. On the other side, TM + group presents relevant increase in the percentage of higher producers of evaluated cytokines, NO and CD23 when compared with NI group. Dividing LCL group for lesion evolution time, was observed in LCL<60 increase frequency of higher producers of IL-4, NO and CD23,indicating a mixed profile of activation/modulation of the innate immunity. The total IgE seric levels was lower in the LCL group when compared to the NI and TM + groups, with a reduction of TM + in relation with NI group. Besides this, of 10 isolates tested, 8 was resistant to NO action and the 2 sensible was obtained from individuals that was responsible to the treatment with Glucantime®. In front this, was possible to infer that other cellular sources, besides T lymphocytes, could be involved in the cytokine production in LCL group and in the TM + group there is a strong possibility for the participation of monocytes activation and induction mechanism and NO induction investigated in this study, favoring the infection control, preventing the occurrence of skin lesions.Besides this, the existence of NO resistant L. (V.) braziliensis isolates, corroborates with other authors findings and could be directly related with Glucantime® treatment resistance.

Submitted by Éder Freyre (eder.freyre@icict.fiocruz.br) on 2014-05-13T19:05:09Z No. of bitstreams: 1 Tese Matheus Fernandes Costa-Silva VERSÃO FINAL.pdf: 5012766 bytes, checksum: f7f611cddfc11239b281f2bab089aae4 (MD5) / Made available in DSpace on 2014-05-13T19:05:09Z (GMT). No. of bitstreams: 1 Tese Matheus Fernandes Costa-Silva VERSÃO FINAL.pdf: 5012766 bytes, checksum: f7f611cddfc11239b281f2bab089aae4 (MD5) Previous issue date: 2013 / Fundação Oswaldo Cruz. Centro de Pesquisas René Rachou. Belo Horizonte, MG, Brasil. / A leishmaniose cutânea (LC) é uma doença inflamatória crônica causada por espécies dermotrópicas pertencentes aos subgêneros Viannia e Leishmania, sendo a L. (V.) braziliensis o principal agente etiológico no Brasil. O estabelecimento e evolução das lesões causadas pela infecção por L. (V.) braziliensis são altamente dependentes da imunidade celular, contudo um estudo que avalia o impacto da interação parasito-monócitos no perfil de resposta imune associado ao estabelecimento/manutenção da infecção em humanos ainda não foi realizado. Nesse contexto, o objetivo do trabalho foi caracterizar biomarcadores imunológicos, no sangue periférico e no infiltrado inflamatório de lesões cutâneas, em indígenas da comunidade Xakriabá portadores de LC (grupo LC) e com teste de Montenegro positivo sem lesão (grupo TM + sL), com intuito de melhor compreender os mecanismos imunológicos envolvidos na progressão dessa patologia, bem como dos eventos associados à resistência à infecção. A análise dos resultados mostrou que pacientes do grupo LC apresentaram menor capacidade em internalizar formas promastigotas vivas de L. (V.) braziliensis em relação ao grupo TM + sL. Além disso, observou-se que pacientes do grupo LC apresentaram perfil ativado, principalmente pelo maior percentual/Índice de Estimulação (IE) da molécula de ativação CD23, com produção de altos níveis de TNF-, provenientes de monócitos que não fagocitaram e fagocitaram formas promastigotas de L. (V.) braziliensis. Contudo, os níveis de TNF- correlacionaram de forma negativa com a produção de NO, sugerindo que essa citocina estaria muito mais associada ao desenvolvimento das lesões do que controle da doença. Por outro lado, pacientes do grupo TM + sL apresentaram maior equilíbrio entre a produção de citocinas inflamatórias (IL-12, IFN-, IL-17) e moduladoras (IL-10, IL-4) e sintetizaram maiores níveis de NO, indicando que esse perfil de resposta imune balanceada e efetora poderia combater a infecção sem provocar dano tecidual. A análise do perfil fenotípico-funcional de monócitos e linfócitos T CD4 + e CD8 + circulantes e de citocinas e quimiocinas no infiltrado inflamatório das lesões mostrou que o tempo de evolução da lesão teve grande influência no perfil de resposta imune dos pacientes do grupo LC. Nesse contexto, observou-se que monócitos e linfócitos T CD4 + e CD8 + circulantes de pacientes do grupo lesão recente apresentaram menor IE das moléculas de ativação CD23 e co-estimulação CD80, acompanhado pela menor produção das citocinas inflamatórias (TNF-, IL-17) e moduladoras (IL-10, TGF- e IL-4) em relação ao grupo lesão tardia. Por outro lado, observou-se que esses pacientes apresentaram maior capacidade fagocítica juntamente com maior IE de monócitos expressando os receptores CD16, TLR-2 e TLR-4 e produção de NO. A análise da resposta imune localizada mostrou que pacientes do grupo lesão recente apresentaram maiores níveis de transcritos de IL12B, IFNG, TNF, IL10, TGFB1, IL4, CCL2, CCL3, CCL5 e CXCL10, bem como maior carga parasitária em relação ao grupo lesão tardia. Os resultados obtidos no presente estudo forneceram informações importantes sobre a infecção causada pela L. (V.) braziliensis, permitindo a identificação e proposição de potenciais biomarcadores associados à resistência à LC (IL-12, IL-17 e NO) e ao desenvolvimento e manutenção da lesão (TNF-α). Além disso, esse foi o primeiro estudo que avaliou aspectos imunológicos da LC em uma população indígena brasileira. / Cutaneous leishmaniasis (CL) is a chronic inflammatory disease caused by dermotropic Leishmania species belonging to the Viannia and Leishmania subgenera, with Leishmania (V.) braziliensis considered the main agent in Brazil. The establishment and evolution time of the lesions caused by L. (V.) braziliensis infection are highly affected by the cellular immunity. However, a study evaluating the impact of parasite-monocyte interactions in the immune response profile associated with the establishment/maintenance of the infection in humans has not been previously performed. In this context, the aim of this study was to characterize immunological biomarkers in peripheral blood as well as in inflammatory infiltrate of cutaneous lesions from patients with CL (CL group) or with positive Montenegro skin test without injury (TM + sL group) living in the Xakriabá indigenous community, Minas Gerais, Brazil, in order to better understand the mechanisms involved in the disease progression as well as events associated with resistance to the infection. The results showed that CL group presented less ability to internalize promastigotes of L. (V.) braziliensis as compared with the TM + sL group. Furthermore, it was observed that patients of the CL group showed activated profile, with high percentage/Stimulation Index (SI) of CD23, and production of high levels of TNF- by monocytes that non phagocytized and phagocytized promastigotes of L. (V.) braziliensis. However, the levels of TNF- were negatively correlated with NO production, suggesting that this cytokine would be much more related to the development of lesions instead of disease control. On the other hand, patients from TM + sL group showed better balance between the production of inflammatory (IL-12, IFN-, IL-17) and modulatory (IL-10, IL-4) cytokines, and synthesized highest levels of NO, indicating that this balanced immune response profile may contribute to the infection resolution without causing tissue damage. The analysis of the phenotypic-functional profile of circulating monocytes, CD4 + , CD8 + T cells, and cytokines and chemokines in the inflammatory infiltrate of the cutaneous lesions showed that the evolution time of lesions had great influence in the immune response profile of the CL group. In this context, it was observed that circulating monocytes, CD4 + and CD8 + T lymphocytes of theith recent lesion group showed a lower SI of CD23 and CD80, accompanied by lower production of inflammatory (TNF-, IL-17) and modulatory (IL-10, TGF- and IL-4) cytokines as compared with late lesion group. On the other hand, it was observed that these patients showed greater phagocytic capability along with the highest SI of monocytes expressing CD16, TLR-2 and TLR-4, and NO production. The analysis of the localized immune response showed that patients of the recent lesion group presented higher transcript levels of IL12B, IFNG, TNF, IL10, TGFB1, IL4, CCL2, CCL3, CCL5 and CXCL10, as well as higher parasite burden as compared with late lesion group. This study has provided important information about the infection caused by L. (V.) braziliensis allowing the identification of potential biomarkers associated to the resistance to CL (IL-12, IL-17 and NO) and to the development and maintenance of the lesion (TNF-α). Furthermore, this was the first study that evaluated immunological aspects of CL in a Brazilian indigenous population.