Made available in DSpace on 2014-06-11T19:32:54Z (GMT). No. of bitstreams: 0 Previous issue date: 2009-10-02Bitstream added on 2014-06-13T19:03:37Z : No. of bitstreams: 1 michelin_af_dr_jabo.pdf: 583485 bytes, checksum: 8655fd78317ab77631a7e5c9a5fdbdb3 (MD5) / Coordenação de Aperfeiçoamento de Pessoal de Nível Superior (CAPES) / Fundação de Amparo à Pesquisa do Estado de São Paulo (FAPESP) / A leishmaniose visceral canina é causada pela Leishmania (Leishmania) chagasi que é transmitida por flebotomíneos. A evolução clínica desta parasitose depende de uma complexa interação entre o parasita e a resposta imune do hospedeiro. Os cães infectados, que constituem o principal reservatório doméstico desse parasita, podem permanecer assintomáticos ou tornarem-se sintomáticos. O objetivo deste estudo foi quantificar as citocinas TNF- IL-4 e IL-10, em extratos de baço e fígado, de cães naturalmente infectados por L. (L.) chagasi e investigar a ocorrência de associação com a densidade parasitária nestes órgãos. Quarenta cães provenientes da cidade de Araçatuba, estado de São Paulo, área endêmica para leishmaniose visceral canina, soropositivos para L. (L.) chagasi, de acordo com ELISA indireto, foram divididos em dois grupos com 20 cães assintomáticos e 20 sintomáticos, com pelo menos três sinais da doença. Um grupo de 12 cães saudáveis, provenientes de área não endêmica, soronegativos para Leishmania spp., testados por ELISA indireto e que não apresentaram amplificação do DNA para L. (L.) chagasi, fizeram parte do grupo controle negativo. Após eutanásia dos cães, os fragmentos de baço e fígado foram coletados para a quantificação das citocinas, através de ELISA de captura, e determinação da densidade parasitária por PCR em tempo real. Nos animais infectados, os níveis de TNF- , IL-4 e IL-10, no baço e no fígado, foram superiores aos dos animais do grupo controle. A comparação entre os dois órgãos, nos cães infectados, mostrou que o fígado foi o principal produtor dessas citocinas. O nível de TNF- e a densidade de parasitas, no fígado, foram mais elevados nos cães sintomáticos, quando comparado com os cães... / Canine visceral leishmaniasis is caused by Leishmania (Leishmania) chagasi that is transmitted by phlebotominae. The clinical evolution of this parasitosis depends on a complex interaction between the parasite and the immune response in the host. Infected dogs, the main domestic reservoir of this parasite, may remain asymptomatic or may become symptomatic. The aim of this study was to quantify the TNF-, IL-4, and IL-10 cytokines in spleen and liver extracts from asymptomatic and symptomatic dogs naturally infected with L. (L.) chagasi and to investigate the association with the parasite density in these organs. A total of 40 dogs from the city of Araçatuba, São Paulo state (an endemic area for canine visceral leishmaniasis), all L. (L.) chagasi positive according to indirect ELISA, were divided into two groups, each containing of 20 asymptomatic dogs and 20 symptomatic dogs presenting at least three signs of the disease. A group of 12 healthy dogs from the non endemic area and negative for Leishmania spp, as indicated by indirect ELISA, and PCR negative for L. (L.) chagasi, were used as negative controls. After euthanasia, fragments from the spleen or liver were collected to quantify the cytokines, with ELISA capture assay, and to check parasite density by real time PCR. In infected dogs, the levels of TNF- , IL-4, and IL-10 were higher than in control animals, for the two organs. Cytokine levels in the spleen and liver of infected dogs revealed the liver as the main cytokine-producing organ during infection. The level of TNF- was higher in the liver of symptomatic dogs, where parasite density was higher than in asymptomatic dogs. The levels of IL-4 and IL-10 did not differ between symptomatic and asymptomatic dogs. A weak association between parasite density and IL-10 production was seen in the liver of asymptomatic... (Summary complete electronic access click below)

Orientador: Vanderlan da Silva Bolzani / Coorientador : Marilia Valli / Banca: Nivaldo Boralle / Banca: Amanda Danuello Pivatto / Resumo: Na presente pesquisa foram sintetizados vários derivados piridínicos objetivando a descoberta de constituintes com atividade antiparasitária potencial. Estes compostos foram planejados a partir do alcaloide (-)-espectalina isolado de Senna spectabilis (Fabaceae), empregando alguns processos usuais da química medicinal como a simplificação molecular, isosterismo clássico e funcional. Deste procedimento experimental, foram sintetizados 18 substâncias, sendo todas obtidas por meio de reações simples, a partir de compostos comerciais. Das substâncias sintéticas produzidas, 14 foram submetidas à avaliação para atividade em Trypanosoma cruzi, visando potenciais antichagásicos, e em Leishmania infantum para identificar potenciais leishmanicidas. Os compostos testados mostraram-se inativos na inibição destes protozoários. Contudo, dois análogos (48 e 52) apresentaram atividade inibitória das cepas de Plasmodium falciparum, com CI50 = 5,0 µM e índice de seletividade bastante interessante (IS >50). / Abstract: In the present research, several pyridine derivatives were synthesized aiming at the discovery of new constituents with potential antiparasitic activity. All compounds were planned from the (-)-spectaline alkaloid isolated from Senna spectabilis (Fabaceae), employing some usual medicinal chemistry procedures, such as molecular simplification, classical and functional isosterism. From this experimental procedure, 18 compounds were synthesized, and all of these were obtained by means of simple reactions, from commercial compounds. Of the synthetic substances produced, 14 were evaluated for activity in Trypanosoma cruzi, aimed at the search for potential antichagasics, and against Leishmania infantum to identify potential leishmanicidal derivatives. All compounds tested were inactive to the inhibition of these protozoa. However, two analogues (48 and 52) showed inhibitory activity against Plasmodium falciparum strains, with IC50 = 5.0 μM and an interesting selectivity index (IS> 50). / Mestre

Orientador: Simone Baldini Lucheis / Resumo: A família Trypanosomatidae inclui protozoários flagelados com dois gêneros de importância médica e veterinária: Leishmania, causador das leishmanioses e Trypanosoma, responsáveis pelas tripanossomíases de relevância epidemiológica, ambos com o envolvimento de hospedeiros mamíferos e vetores em seu ciclo de vida. O gato doméstico passou a ser considerado um hospedeiro reservatório de Leishmanias, após comprovação por xenodiagnóstico, da transmissibilidade de formas promastigotas de Leishmania infantum para o vetor flebotomíneo. Devido a inespecificidade dos achados clínicos na Leishmaniose Felina (LF), à semelhança dos aspectos clínicos dessa enfermidade com outras comuns em gatos, e à provável resistência felina a infecção, é possível que, dentro de uma área endêmica para leishmaniose ocorra um percentual elevado de indivíduos infectados, mas sem apresentarem sinais clínicos, e a falta de diagnóstico precoce da LF nessas áreas pode implicar com que o animal continue a representar risco potencial de transmissão de leishmanias aos vetores. Assim sendo, pretendeu-se investigar possíveis associações entre sorologia positiva para L. infantum, com o parasitismo tecidual em sangue, órgãos e células conjuntivais de gatos de região endêmica para LV. Foram incluídos neste estudo 36 gatos adultos, cedidos pelo Centro de Controle de Zoonoses (CCZ) de Bauru - São Paulo, com 31 animais apresentando pelo menos um tipo de alteração clínica. A partir dos diagnósticos sorológicos, verificou-se... (Resumo completo, clicar acesso eletrônico abaixo) / Abstract: Trypanosomatidae family includes flagellate protozoa of two genera of medical and veterinary importance: Leishmania, the causative agent of leishmaniasis and Trypanosoma, responsible for trypanosomiasis of epidemiological relevance, with the involvement of mammalian hosts and vectors in their life cycle. Nowadays, the domestic cat is considered a host reservoir of leishmanias, after proving by xenodiagnosis, the transmissibility of promastigotes of Leishmania infantum to the phlebotomine vector. Due to the lack of specificity of the clinical findings in Feline Leishmaniasis (FL), similar to the clinical aspects of this disease with other common ones in cats, and to the probable feline resistance to infection, it is possible that, within an endemic area for leishmaniasis, a high percentage of individuals with no clinical signs, and lack of early diagnosis of FL in these areas may imply that the animal continues to pose a potential risk of transmission of leishmaniasis to the vectors. Thus, it was intended to investigate possible associations between positive serology for L.infantum, with tissue parasitism in blood, organs and conjunctival cells of cats from endemic region to visceral leishmaniasis. Thirty-six adult cats, assigned by the Zoonoses Control Center (ZCC) of Bauru-SP, with 31 animals presenting at least one type of clinical alteration, were included in this study. From the serological diagnoses, the positivity was verified in 26 animals, and (66.7%) (24/36) were rea... (Complete abstract click electronic access below) / Doutor

O óleo de copaíba é um produto natural encontrado principalmente na região amazônica, onde é utilizado na medicina popular como tratamento para inflamações e como cicatrizante. A espécie Copaifera multijuga Hayne demonstrou um potencial efeito anti-inflamatório em relação a outras espécies de Copaífera L., tendo como principal responsável o composto majoritário β-cariofileno. Nosso grupo de pesquisa vem estudando a veiculação deste óleo em nanoemulsões e desenvolveu uma formulação que contém uma elevada proporção de óleo de copaíba no núcleo oleoso (20 % w/v), sem prejuízo da estabilidade do sistema. A partir desta formulação, seguiram-se os estudos de avaliação da permeação cutânea, de otimização da formulação e de avaliação de atividade anti-inflamatória, apresentados neste trabalho. Um método em cromatógrafo a gás acoplado à espectrômetro de massas no modo headspace (HS-CG/EM) foi validado a fim de analisar β-cariofileno em mostras de pele provenientes do teste de permeação cutânea com nanoemulsões de óleo de copaíba. O método mostrou-se específico, linear, preciso e exato. O teste de permeação cutânea demonstrou que apenas com a nanoemulsão é possível detectar β-cariofileno na camada da derme, enquanto que, com o óleo, somente no estrato córneo. A seguir, foram testados dois tensoativos catiônicos na formulação da nanoemulsão para verificar se a carga positiva na interface da gotícula poderia promover a permeação cutânea do β-cariofileno. O tensoativo brometo de cetiltrimetilamônio provou ser mais eficiente em concentrações consideradas seguras para o uso tópico, revertendo o potencial zeta para valores adequados, sem interferir no tamanho de gotícula e índice de polidispersão. O tensoativo oleilamina também reverteu o potencial zeta, porém somente em concentrações muito elevadas, podendo ser consideradas tóxicas. O teste de permeação cutânea demonstrou que a incorporação de tensoativos catiônicos aumenta a retenção de β-cariofileno na epiderme em três vezes, enquanto que, na derme, não há diferença estatística entre as formulações aniônica e catiônica. Após, as nanoemulsões escolhidas foram incorporadas em hidrogéis de Carbopol®, Natrosol® e quitosana com vistas ao espessamento e adequação da viscosidade ao uso tópico. O hidrogel com quitosana 8 apresentou-se instável, com aumento de tamanho de gotícula e índice de polidispersão, apesar de não ter afetado o potencial zeta. Os hidrogéis de Carbopol® e Natrosol® apresentaram bons resultados de caracterização físico-química, porém somente o hidrogel de Natrosol® foi escolhido para os estudos de permeação cutânea e atividade anti-inflamatória in vivo, devido ao seu caráter neutro. No estudo de permeação cutânea das nanoemulsões incorporadas em hidrogel, houve um aumento na retenção de β-cariofileno na derme em relação às nanoemulsões, e houve a facilitação de permeação até o fluido receptor. Por fim, o estudo da atividade in vivo das formulações selecionadas demonstrou que o óleo de copaíba apresenta atividade anti-inflamatória e que a sua incorporação em nanoemulsões aumenta este efeito. No entanto, ambas nanoemulsões, tanto negativamente quanto positivamente carregadas, apresentaram resultado semelhante para a inibição do edema. Quando compara-se a permeação cutânea das formulações verifica-se que na derme não há diferença estatística, o que pode justificar a semelhança do grau de inibição da inflamação no teste in vivo. Em relação à atividade das nanoemulsões incorporadas em hidrogéis, pode-se verificar que no teste de edema de pata apenas a formulação carregada positivamente teve um efeito mais pronunciado, enquanto no edema de orelha as formulações obtiveram um perfil equivalente ao controle cetoprofeno, porém não potencializaram o efeito do óleo. Quanto ao estudo com os parasitos causadores da Leishmaniose, os testes in vitro mostraram que os tratamentos (óleo de copaíba, β-cariofileno e suas nanoemulsões) foram mais eficazes contra as espécies L. major e L. donovani em comparação às espécies L. amazonensis e L. braziliensis. O teste in vivo mostrou que todos os tratamentos foram capazes de reduzir a área da ferida dos camundongos infectados com L. major. No entanto, eles não conseguiram recuperar totalmente os animais. / Copaiba oil is a natural product found especially in the Amazon region, where it is used as treatment for inflammations and as wound healer in the popular medicin. The species Copaifera multijuga Hayne showed a potential anti-inflammatory effect in relation to other Copaifera L. species, mainly due to its major compound, β-caryophyllene. Our research group studied the oil incorporation in nanoemulsions and developed a formulation containing a high copaiba oil proportion in the oil core (20% w/v) without loss of system stability. Based in this nanoemulsion, we present in this study the skin permeation, the formulation optimization and the anti-inflammatory activity. A method in gas chromatograph coupled with mass spectrometer in headspace mode (HS-GC/MS) was validated to analyze β-caryophyllene in skin samples from the skin permeation assay. The method proved to be specific, linear, precise and accurate. Skin permeation test showed that only with the nanoemulsion is possible to detect β-caryophyllene in the dermis layer, while with the oil, only in the stratum corneum. After, two cationic surfactants were tested in the nanoemulsion to prove if the positive charge on the droplet interface could promote β-caryophyllene permeation. Cetyltrimethylammonium bromide proved to be more effective at concentrations considered safe for topical use, reversing the zeta potential to suitable values, without interfering with droplet size and polydispersity index. Oleylamine also reversed the zeta potential, but only at very high concentrations, that may be considered toxic. Skin permeation test showed that the incorporation of cationic surfactants increases β-caryophyllene retention in the epidermis by three fold, whereas in the dermis, there is no statistical difference between the cationic and anionic nanoemulsions. Afterward, the chosen nanoemulsions were incorporated in Carbopol®, Natrosol® and chitosan hydrogels in order to adjust the viscosity for topical use. Chitosan hydrogel presented instability, with an increase in droplet size and polydispersity index, although it has not affected the zeta potential. Carbopol® and Natrosol® hydrogels showed good results in physicochemical characterization, but only Natrosol® hydrogel was chosen for the following skin permeation 10 and anti-inflammatory activity in vivo studies due to its neutral character. In nanoemulsions thickened-hydrogel skin permeation study, there was an increase in the β-caryophyllene retention in the dermis compared to nanoemulsions, and promoted permeation to the receptor fluid. Finally, in vivo anti-inflammatory activity from selected formulations showed that the copaiba oil has anti-inflammatory activity and that its incorporation into nanoemulsions increases this effect. However, both negative and positively charged nanoemulsions, showed similar results for inhibition of edema. When the nanoemulsions’ skin permeation is compared, it is found that in the dermis there is no statistical difference, which may explain the similarity degree of inflammation inhibition in the in vivo test. Regarding to the activity of the nanoemulsions incorporated in hydrogels, it can be verified that in paw edema assay, only the positively charged formulation had a more pronounced effect, whereas in the ear edema the formulations obtained a profile equivalent to the control, ketoprofen, but did not potentiate the effect of the oil. As for the study with the parasites causing Leishmaniasis, in vitro tests showed that the treatments (copaiba oil, β-caryophyllene and their nanoemulsions) were more effective against L. major and L. donovani compared to L. amazonensis and L. braziliensis. In vivo assay showed that all treatments were able to reduce the wound area of mice infected with L. major. However, they were unable to fully recover the animals from the disease.

Submitted by Maria Creuza Silva (mariakreuza@yahoo.com.br) on 2013-10-10T19:57:31Z No. of bitstreams: 1 Tese Deborah Carneiro. 2013.pdf: 3699535 bytes, checksum: 938444a081cad9abafca70893a495ab2 (MD5) / Approved for entry into archive by Maria Creuza Silva(mariakreuza@yahoo.com.br) on 2013-10-10T19:58:14Z (GMT) No. of bitstreams: 1 Tese Deborah Carneiro. 2013.pdf: 3699535 bytes, checksum: 938444a081cad9abafca70893a495ab2 (MD5) / Made available in DSpace on 2013-10-10T19:58:14Z (GMT). No. of bitstreams: 1 Tese Deborah Carneiro. 2013.pdf: 3699535 bytes, checksum: 938444a081cad9abafca70893a495ab2 (MD5) Previous issue date: 2013 / A Leishmaniose Visceral é uma enfermidade infecto-parasitária, de elevada morbi-mortalidade, ampla distribuição geográfica, prevalecente em condições de pobreza o que contribui para manutenção de exclusão social e o quadro de desigualdade social em saúde. Estas são algumas das razões, que tornam esta doença a mais negligenciada dentre as negligenciadas, especialmente no âmbito da pesquisa científica e terapêutica. Os objetivos deste artigo é apresentar uma atualização sobre a epidemiologia da LV caracterizando os cenários epidemiológicos no mundo e no Brasil, destacando as principais diferenças e similaridades dos ciclos de transmissão dos agentes etiológicos desta protozoose, identificar algumas lacunas no conhecimento cientifico e contribuir para definição da agenda brasileira de prioridades de pesquisa. Realizou-se uma ampla revisão de literatura incluindo publicações desde as primeiras décadas do século XX até 2012. Observou-se no decorrer das décadas que a dinâmica e circunstâncias de transmissão dos protozoários Leishmania vêm sendo sucessivamente modificadas, em consequência da sua expansão geográfica para além dos focos naturais. Por sua vez, fatores como plasticidade do vetor, abundância de fontes/reservatórios, intensa mobilização populacional entre áreas endêmicas/indenes (impulsionadas por conflitos armados ou correntes migratórias), imunossupressão, co-infecção Leishmania/HIV, e limitações inerentes aos programas de controle, vêm contribuíndo para o aumento expressivo da incidência da doença em várias partes do mundo. Apesar das iniciativas de Governos e Organismos (nacionais e internacionais) para fortalecimento dos programas de controle voltados para esta leishmaniose, não se tem obtido o êxito esperado na redução da sua incidência e dispersão geográfica, evidenciando a baixa efetividade das medidas de controle disponíveis. Entende-se que no estado da arte atual as metas propostas de eliminação desta doença não parecem exequíveis a curto prazo. / Salvador

Orientador: Maria Isabel Nogueira Cano / Resumo: Parasitos do gênero Leishmania pertencem à família Trypanosomatidae, os quais causam a leishmaniose, doença tropical negligenciada, que pode se apresentar em três formas clínicas: cutânea, mucocutânea e visceral. O Brasil é um dos países mais afetados pela doença, devido principalmente às condições socioeconômicas, às mudanças climáticas e ambientais. Pesquisas relacionadas à biologia da Leishmania contribuem para o entendimento dos mecanismos fisiológicos do parasito, e assim fornecem a possibilidade de encontrar novos alvos terapêuticos. O estudo dos telômeros de Leishmania se mostram promissores, já que estão relacionados com a estabilidade do genoma. Os telômeros estão localizados nas extremidades dos cromossomos e são responsáveis por proteger os cromossomos assegurando que a informação genética seja corretamente copiada durante a duplicação celular. Os telômeros são elongados por uma transcritase reversa especializada denominada telomerase. A telomerase é uma ribonucleoproteína, constituída por duas subunidades, uma proteína com função de transcriptase reversa denominada TERT, e um componente RNA (TER) que contém a sequência do molde da repetição telomérica copiado pela TERT. Estudos recentes mostram que o TER possui outras funções além de conter apenas um molde para elongamento dos telômeros. Sua estrutura secundária possui domínios com funções de controle da inserção de nucleotídeos pelo TERT, reconhecimento da sequência e ligação de proteínas acessórias. Recentemente... (Resumo completo, clicar acesso eletrônico abaixo) / Abstract: Parasites of the Leishmania genus belong to the Trypanosomatide family, which present peculiar and particular characteristics. Among them are the species that cause leishmaniasis, a neglected tropical disease that can be expressed in three different clinical forms: cutaneous, mucocutaneous and visceral. Brazil is one of the most affected countries, due mainly to socioeconomic conditions, climate change and environmental alterations. Research related to the biology of Leishmania contributes to the understanding of the important physiological mechanisms of the parasite, and thus provide new therapeutic targets against the disease. The study of Leishmania telomeres appears promising since they related are to the genome stability. Telomeres are nucleoprotein structures located at the ends of the chromosomes and are responsible for protecting the chromosomes ensuring that the genetic information copied is correctly during cell duplication. DNA polymerase does not elongate telomeres as the rest of the genetic material, and thus maintained are by the action of a specialized reverse transcriptase named telomerase. Telomerase is a ribonucleoprotein minimally composed by two subunits, a protein with reverse transcriptase function TERT, and an RNA component (TER) that contains the telomeric repeat template sequence copied by TERT. Recent studies shown that TER has other functions besides being just a template for telomeres elongation. Its secondary structure has domains with control fun... (Complete abstract click electronic access below) / Mestre

Submitted by Jos? Henrique Henrique (jose.neves@ufvjm.edu.br) on 2018-09-13T13:48:58Z No. of bitstreams: 2 license_rdf: 0 bytes, checksum: d41d8cd98f00b204e9800998ecf8427e (MD5) amanda_oliveira_baracho.pdf: 1018229 bytes, checksum: 7da405c92d90a6056df94d878fc77113 (MD5) / Approved for entry into archive by Rodrigo Martins Cruz (rodrigo.cruz@ufvjm.edu.br) on 2018-10-02T16:26:57Z (GMT) No. of bitstreams: 2 license_rdf: 0 bytes, checksum: d41d8cd98f00b204e9800998ecf8427e (MD5) amanda_oliveira_baracho.pdf: 1018229 bytes, checksum: 7da405c92d90a6056df94d878fc77113 (MD5) / Made available in DSpace on 2018-10-02T16:27:10Z (GMT). No. of bitstreams: 2 license_rdf: 0 bytes, checksum: d41d8cd98f00b204e9800998ecf8427e (MD5) amanda_oliveira_baracho.pdf: 1018229 bytes, checksum: 7da405c92d90a6056df94d878fc77113 (MD5) Previous issue date: 2018 / Universidade Federal dos Vales do Jequitinhonha e Mucuri (UFVJM) / A leishmaniose visceral ? uma doen?a parasit?ria de transmiss?o vetorial causada por protozo?rios do g?nero Leishmania, com elevado grau de letalidade e que atinge milh?es de pessoas no mundo. A busca por produtos alternativos para a elimina??o do vetor tem como objetivo minimizar os impactos causados pelos inseticidas qu?micos sint?ticos utilizados pelos programas de controle, sendo cada vez mais frequente a pesquisa em produtos de origem bot?nica com atividade inseticida. Organismos vegetais s?o capazes de produzir compostos org?nicos de comprovada toxicidade frente aos insetos e, diante disto, avaliou-se neste trabalho a atividade inseticida de extratos de Caryocar brasiliense, planta nativa do Cerrado popularmente conhecida como ?pequi?, sobre flebotom?neos da esp?cie Lutzomyia longipalpis, principal transmissora da leishmaniose visceral. Extratos hidroetan?licos, etan?licos e ciclohex?nicos de folhas e cascas de C. brasiliense foram preparados e dilu?dos em solu??o de Tween 80 a 3% para a obten??o de concentra??es a 50, 100, 200 e 400 mg.mL-1, para a realiza??o dos ensaios biol?gicos. Os flebotom?neos foram coletados em uma localidade rural do munic?pio de Diamantina/MG. Um n?mero amostral de 30 flebotom?neos foi posto em contato com os extratos e a mortalidade foi avaliada ap?s 1, 2, 4, 16, 24 48 e 72 horas de exposi??o, bem como grupos controle negativos (?gua destilada e Tween) e positivo (cipermetrina). A identifica??o dos constituintes qu?micos dos extratos tamb?m foi avaliada. Ap?s 72h de experimento, foram registradas mortalidades de 93,3% pelo extrato hidroetan?lico da casca a 400 mg.mL-1, 66,3% pelo etan?lico da casca a 50 mg.mL-1 e 81,1% pelo ciclohex?nico de folhas a 200 mg.mL-1. Os extratos hidroetan?licos da casca mostraram-se estatisticamente semelhantes ? a??o da cipermetrina em 72h de experimento, indicando que este extrato foi o mais eficiente quanto ? atividade inseticida. Foram identificados triterpenos, esteroides, taninos, flavonoides, alcaloides e saponinas nos extratos. Os resultados obtidos sugerem que os extratos hidroetan?licos de C. brasiliense, sobretudo das cascas, s?o promissores na busca por compostos naturais com atividade inseticida sobre Lu. longipalpis. / Disserta??o (Mestrado) ? Programa de P?s-gradua??o em Biologia Animal, Universidade Federal dos Vales do Jequitinhonha e Mucuri, 2018. / Visceral leishmaniasis is a vector-borne disease caused by a protozoan of the genus Leishmania with high lethality rate that reaches millions of people worldwide. The impacts caused by synthetic insecticides used in control programs are well known. In this context, research on alternative products for vector control, especially products of botanical origin, has been frequent in order to minimize the impacts of synthetic ones. Plants are capable to produce organic compounds with insect toxicity. Here, the insecticidal activity of Caryocar brasiliense extracts, a native plant of Brazilian savannah, popularly known as "pequi", on Lutzomyia longipalpis, the main vector of visceral leishmaniasis, was tested. Hydroethanolic, ethanolic and cyclohexanic extracts of leaves and barks of C. brasiliense were prepared and diluted in Tween 80 (3%) to obtain concentrations of 50, 100, 200 and 400 mg.mL-1 for the biological tests. Phlebotomine sandflies were collected in a rural locality of Diamantina (Minas Gerais state, Brazil). Thirty sand flies were exposed to the extracts and mortality was evaluated after 1, 2, 4, 16, 24 48 and 72 hours of exposure, as well as negative control groups (distilled water and Tween) and positive (cypermethrin). Chemical compounds of the extracts were also evaluated. Mortalities rates of 93.3% were observed for the hydroethanolic extract of the bark at 400 mg.mL-1, 66.3% for the ethanolic bark at 50 mg.mL-1 and 81.1% for the cyclohexane of leaves at 200 mg.mL-1. The hydroethanolic extracts of the bark showed to be statistically similar to the action of cypermethrin in 72h of the experiment, indicating that this extract was the most efficient as an insecticide. Triterpenes, steroids, tannins, flavonoids, alkaloids and saponins were identified in the extracts. The results obtained suggest that the hydroethanolic extracts of C. brasiliense, especially of the bark, are promising for the use of natural compounds to control Lu. longipalpis.

Submitted by Jos? Henrique Henrique (jose.neves@ufvjm.edu.br) on 2018-09-12T18:39:06Z No. of bitstreams: 2 license_rdf: 0 bytes, checksum: d41d8cd98f00b204e9800998ecf8427e (MD5) yrllan_ribeiro_sincura.pdf: 1372727 bytes, checksum: 658bffd6fd52f41fbd207a828e8d098a (MD5) / Approved for entry into archive by Rodrigo Martins Cruz (rodrigo.cruz@ufvjm.edu.br) on 2018-10-02T16:31:44Z (GMT) No. of bitstreams: 2 license_rdf: 0 bytes, checksum: d41d8cd98f00b204e9800998ecf8427e (MD5) yrllan_ribeiro_sincura.pdf: 1372727 bytes, checksum: 658bffd6fd52f41fbd207a828e8d098a (MD5) / Made available in DSpace on 2018-10-02T16:31:44Z (GMT). No. of bitstreams: 2 license_rdf: 0 bytes, checksum: d41d8cd98f00b204e9800998ecf8427e (MD5) yrllan_ribeiro_sincura.pdf: 1372727 bytes, checksum: 658bffd6fd52f41fbd207a828e8d098a (MD5) Previous issue date: 2018 / Universidade Federal dos Vales do Jequitinhonha e Mucuri (UFVJM) / A leishmaniose visceral (LV) ? uma doen?a altamente letal quando n?o tratada e de car?ter reemergente. ? transmitida atrav?s da picada do flebotom?neo f?mea da esp?cie Lutzomyia longipalpis, inseto com grande distribui??o nas Am?ricas. O controle vetorial ? realizado atrav?s da aplica??o de inseticidas piretr?ides sint?ticos residuais de a??o r?pida sobre os insetos como a ?-cipermetrina e a deltametrina. Nos ?ltimos tempos tem se observado o surgimento de popula??es resistentes o que tem aumentado o interesse pela descoberta de novas mol?culas que possam ser utilizadas no controle de vetores. As plantas s?o um importante e promissor campo de pesquisa, uma vez que j? produzem mol?culas com a??o inseticida. Este estudo objetivou analisar a a??o inseticida de extratos de folhas e cascas de Protium heptaphyllum sobre Lutzomyia longipalpis selvagens. Para isso foram confeccionados extratos hidroalco?licos, etan?licos e ciclo- hex?nicos das folhas e cascas de Protium heptaphyllum. Nestes foram realizados estudos fitoqu?micos para prospec??o de classes de compostos secund?rios com a??o biol?gica. Os bioensaios foram realizados em potes pl?sticos adaptados e utilizou-se flebotom?neos Lu. longipalpis selvagens, oriundos da comunidade de Aroeira em Diamantina-MG. Obtivemos como resultado dos estudos fitoqu?micos, diversas classes de metab?litos secund?rios como terpenos, esteroides, taninos, flavonoides, alcaloides e saponinas, com destaque para os extratos de folhas onde foi observado um maior n?mero de classes em rela??o ?s cascas. Os bioensaios realizados evidenciaram uma a??o inseticida dos extratos hidroalco?licos e ciclo- hex?nicos que tiveram resultados estatisticamente semelhantes ? ?-cipermetrina. Apesar de composi??o qu?mica semelhante as demais, os extratos etan?licos apresentaram uma baixa atividade sobre os insetos. Com isso, conclu?mos que Protium heptaphyllum, possui atividade inseticida sobre Lu. longipalpis. Dessa forma, este estudo contribui com o desenvolvimento de m?todos de controle de insetos mais eficientes e menos agressivos aos humanos e outros animais. / Disserta??o (Mestrado) ? Programa de P?s-gradua??o em Biologia Animal, Universidade Federal dos Vales do Jequitinhonha e Mucuri, 2018. / Visceral leishmaniasis (VL) is a highly lethal disease when untreated and reemerging. It is transmitted through the bite of the female sand fly Lutzomyia longipalpis, a large-dose insect in the Americas. Vector control is performed through the application of fast acting residual synthetic pyrethroids on insects such as cypermethrin and deltamethrin. In recent times has been observed the emergence of resistant populations which has increased interest in the discovery of new molecules that can be used in the control of vectors. Plants are an important and promising field of research, since they already produce molecules with insecticidal action. This study aimed to analyze the insecticidal action of leaves and bark extracts of Protium heptaphyllum on wild Lutzomyia longipalpis. Hydroalcoholic, ethanolic and cyclohexanic extracts of the leaves and bark of Protium heptaphyllum were made. In these, phytochemical studies were found to identify groups of individuals with biological action. The bioassays were carried out in adapted plastic pots and wild Lu. longipalpis were used, originating from the community of Aroeira in Diamantina-MG. We obtained as a result of the phytochemical studies, several classes of secondary metabolites such as terpenes, steroids, tannins, flavonoids, alkaloids and saponins, especially leaf extracts where a greater number of classes were observed in relation to the bark. The bioassays performed showed an insecticidal action of hydroalcoholic and cyclohexane extracts that had statistically similar results to cypermethrin. Despite chemical composition similar to the others, the ethanolic extracts presented a low activity on the insects. From this investigation, we conclude that Protium heptaphyllum has insecticidal activity on Lu. longipalpis. Thus, this study contributes to the development of insect control methods that are more efficient and less aggressive to humans and other animals.

Submitted by Ana Maria Fiscina Sampaio (fiscina@bahia.fiocruz.br) on 2013-10-15T12:18:31Z No. of bitstreams: 1 sarah_falcao. Avaliação...2013.pdf: 3048010 bytes, checksum: 6d0d112498f296909639914a28ec6b23 (MD5) / Made available in DSpace on 2013-10-15T12:18:32Z (GMT). No. of bitstreams: 1 sarah_falcao. Avaliação...2013.pdf: 3048010 bytes, checksum: 6d0d112498f296909639914a28ec6b23 (MD5) Previous issue date: 2013 / Universidade Federal da Bahia. Salvador, BA, Brasil / Fundação Oswaldo Cruz. Centro de Pesquisas Gonçalo Moniz. Salvador, BA, Brasil / A leishmaniose tegumentar americana (LTA) tem como principal agente etiológico a L. braziliensis e é uma das afecções dermatológicas que merece mais atenção, por seu alto coeficiente de detecção e sua capacidade de produzir deformidades. O neutrófilo é considerado a primeira linha de defesa contra agentes infecciosos ou substâncias estranhas e o seu rápido recrutamento para os tecidos é fundamental para o sistema imune inato. No modelo murino de infecção por L. braziliensis, mostramos um constante recrutamento de neutrófilos para o sítio de infecção. Baseados nesses resultados, nós formulamos uma hipótese que os neutrófilos desempenham um papel importante durante os estágios iniciais de infecção com L. braziliensis. Assim, conduzimos experimentos com neutrófilos recrutados com tioglicolato e neutrófilos derivados de medula óssea. Inicialmente, observamos que os neutrófilos são prontamente infectados com parasitas opsonizados com soro fresco. O contato entre neutrófilos e L. braziliensis ativou os neutrófilos, aumentando a expressão de CD18 e diminuindo a expressão de CD62L. Essa ativação levou à produção de superóxido, secreção de elastase e liberação de TNF-a. O contato com L. braziliensis não impediu a apoptose dos neutrófilos e a destruição dos parasitas internalizados. Utilizando anticorpos específicos para neutrófilos, observamos o aumento significativo no número de parasitas em animais depletados de neutrófilos. Em paralelo, o contato dos neutrófilos com L. braziliensis levou à secreção de quimiocinas, capazes de induzir o recrutamento de células dendríticas. Os neutrófilos, portanto, desempenham um papel importante no combate ao parasita no período inicial da infecção por L. braziliensis. / L. braziliensis is the main etiological agent of American Cutaneous Leishmaniasis, a disease that deserves further attention due to the high detection rate and ability to produce deformities. The neutrophil is considered the first line of defense against infectious agents or foreign substances and their rapid recruitment into tissues is critical for the innate immune system. In a murine model of infection with L. braziliensis, we showed a constant recruitment of neutrophils to the site of infection. Based on this finding, we hypothesized that neutrophil may a play an important role during the initial stages of L. braziliensis infection. Experiments were conducted used thyoglycolate-recruited and bone marrow-derived neutrophils. We initially observed that neutrophils are readily infected by fresh serum-opsonized parasites. Neutrophil upon L. braziliensis interaction, neutrophil became activated, increasing the expression of CD18 and decreasing the expression of CD62L. This activation led to the production of superoxide, neutrophil elastase secretion and release of TNF-a. Neutrophil infection with L. braziliensis did not prevented neutrophil apoptosis or destruction of internalized parasites. Using a neutrophil depleting antibody, we detected a significant increase in parasites numbers in neutrophil-depleted mice. In parallel, the contact of neutrophils with L. braziliensis led to secretion of chemokines, able to induce the recruitment of dendritic cells. Therefore, we can conclude that neutrophils play an important role in combating parasite during initial infection by L. braziliensis

Submitted by Ana Maria Fiscina Sampaio (fiscina@bahia.fiocruz.br) on 2013-10-16T19:35:07Z No. of bitstreams: 1 Vinicius Pinto Costa Rocha. Avaliação da atividade antileishmania...2012.pdf: 1625526 bytes, checksum: 4407e0cb5e7b4ade8175d66ca2a59a34 (MD5) / Made available in DSpace on 2013-10-16T19:35:07Z (GMT). No. of bitstreams: 1 Vinicius Pinto Costa Rocha. Avaliação da atividade antileishmania...2012.pdf: 1625526 bytes, checksum: 4407e0cb5e7b4ade8175d66ca2a59a34 (MD5) Previous issue date: 2012 / Fundação Oswaldo Cruz. Centro de Pesquisas Gonçalo Moniz. Salvador, BA, Brasil / A leishmaniose compreende um complexo de doenças causadas por parasitos do gênero Leishmania, e é endêmica em 88 países, com uma população de 350 milhões de indivíduos sob o risco de contrair a infecção. O tratamento convencional da leishmaniose é realizado com antimoniais pentavalentes, e está associado a inúmeros efeitos adversos e falha terapêutica. Dessa forma, a busca por novas alternativas terapêuticas para esta doença é de extrema relevância. O presente estudo tem como objetivo avaliar a atividade antileishmania de fármacos antimaláricos in vitro e em modelo murino de leishmaniose tegumentar causada por Leishmania amazonensis. Os fármacos antimaláricos testados foram o artesunato, a cloroquina, a hidroxicloroquina, a mefloquina e a primaquina. Destes, a cloroquina e a hidroxicloroquina não reduziram, de forma significativa, o crescimento de formas promastigotas do parasito na concentração de 50 μM. Entretanto, estes dois fármacos foram eficazes em reduzir o número de amastigotas em macrófagos murinos, apresentando valores de IC50 de 0,78 ± 0,08 μM e 0,67 ± 0,12 μM, respectivamente. A mefloquina apresentou valor de IC50 de 8,4 ± 0,70 μM contra promastigotas do parasito, enquanto que, contra formas amastigotas o IC50 foi 1,56 ± 0,19 μM. A análise ultraestrutural de células infectadas e tratadas com a cloroquina ou com a mefloquina mostrou o acúmulo de corpos multivesiculares no citoplasma do parasito. Este resultado sugere o comprometimento da via endocítica da Leishmania após o tratamento com estas moléculas. O tratamento oral de camundongos CBA infectados com L. amazonensis reduziu a lesão e o parasitismo nos animais infectados. Diferente destes resultados, o tratamento com a mefloquina não reduziu o parasitismo nos animais infectados, apesar de ter reduzido o tamanho da lesão. Com base nestes resultados é possível concluir que a cloroquina pode representar uma alternativa terapêutica ao tratamento convencional da leishmaniose tegumentar. / Leishmaniasis comprises a complex of diseases caused by parasites of the genus Leishmania and is endemic in 88 countries, with a population of 350 million individuals at risk of contracting the infection. The conventional treatment of leishmaniasis based on pentavalent antimonials is associated with several adverse effects and treatment failure. Thus, the search for new therapeutic alternatives for this disease is extremely relevant. This study aims to evaluate the antileishmanial activity of antimalarial drugs in vitro and in a murine model of cutaneous leishmaniasis caused by Leishmania amazonensis. The antimalarial drugs tested were artesunate, chloroquine, hydroxychloroquine, mefloquine and primaquine. Of these, chloroquine and hydroxychloroquine did not reduce, significantly, the growth of promastigotes of the parasite at a concentration of 50 μM. However, these two drugs were effective in reducing the number of amastigotes in murine macrophages, with IC50 values of 0.78 ± 0.08 μM and 0.67 ± 0.12 μM, respectively. Mefloquine had an IC50 value of 8.4 ± 0.70 μM against promastigote forms, whereas the IC50 against amastigotes was 1.56 ± 0.19 μM. The ultrastructural analysis of infected cells and treated with chloroquine or mefloquine showed accumulation of multivesicular bodies in the cytoplasm of the parasite. This result suggests the involvement of the endocytic pathway of Leishmania after treatment with these molecules. Oral treatment of CBA mice infected with L. amazonensis reduced lesion size and parasitism in infected animals. In contrast, treatment with mefloquine did not reduce the parasite load in infected animals, although it did reduce the size of the lesion. Based on these results we conclude that chloroquine may represent a therapeutic alternative to conventional treatment of cutaneous leishmaniasis.