Dissertação (mestrado) - Universidade Federal de Santa Catarina. Programa de Pós-Graduação em Biotecnologia. / Made available in DSpace on 2012-10-22T17:13:27Z (GMT). No. of bitstreams: 1 227245.pdf: 1488333 bytes, checksum: 88d229625a1edbecf284a7ff53ddf459 (MD5)

Dissertação (mestrado) - Universidade Federal de Santa Catarina, Centro de Ciências Biológicas. Programa de Pós-Graduação em Biotecnologia. / Made available in DSpace on 2013-07-16T02:33:10Z (GMT). No. of bitstreams: 1 221671.pdf: 1617048 bytes, checksum: 77a2bd52bbb1ed100d298f80791a574e (MD5) / A Lagoa da Conceição representa um complexo de elevada importância econômica para a comunidade local, destacando-se a tradicional pesca artesanal dos camarões-rosa, Farfantepenaeus paulensis e Farfantepenaeus brasiliensis (Crustacea, Decapoda, Penaeidae). Em função do processo acelerado de expansão urbano, aliado a um turismo desordenado, a Lagoa tem testemunhado uma exploração irracional dos seus recursos naturais, com impactos sobre os recursos pesqueiros na região. A utilização de biomarcadores bioquímicos tem sido sugerida como ferramenta na avaliação ecotoxicológica de ambientes aquáticos. Dentre eles, destacam-se a família de isoenzimas de conjugação, glutationa S-transferase (GST), e as proteínas metalotioneínas (MT). O objetivo deste estudo foi avaliar a atividade da GST em brânquias e hepatopâncreas de F. brasiliensis e em brânquias de F. paulensis, transplantados para três áreas na Lagoa da Conceição: Canto da Lagoa (CA), Canal da Barra (CB) e Costa da Lagoa (CO) no inverno de 2003 e no verão de 2004, onde permaneceram por 2 (t1), 7 (t2) e 15 (t3) dias. Os níveis de MT nestes dois tecidos foram também determinados para a espécie F. paulensis. A atividade da GST foi maior no inverno nas brânquias de ambas espécies. Não foi observada variação sazonal na atividade da GST no hepatopâncreas destes animais. Nenhuma diferença significativa na atividade da GST foi observada entre machos e fêmeas. A variação sazonal da atividade da GST nos camarões coletados em diferentes locais da Lagoa da Conceição pode estar relacionada com uma variação sazonal no aporte de contaminantes neste ecossistema. Por outro lado, é possível que tal variação esteja relacionada a parâmetros biológicos intrínsecos da espécie. Além disso, tais variações poderiam influenciar a expressão diferencial das isoformas de GST. Não foi observada diferença estatística nos níveis de metalotioneínas (MT) em brânquias e hepatopâncreas de F. paulensis, entre as áreas e os tempos de exposição in situ. Por outro lado, os níveis de MT foram maiores no hepatopâncreas, e em fêmeas. Correlação positiva moderada foi observada entre os níveis de MT, peso e comprimento total. As implicações da utilização de GST e MT como biomarcadores em estudos ecotoxicológicos, utilizando estas espécies de peneídeos são discutidas.

Dissertação (mestrado) - Universidade Federal de Santa Catarina, Programa Multicêntrico de Pós-Graduação em Ciências Fisiológicas, Florianópolis, 2011 / Made available in DSpace on 2012-10-26T07:25:07Z (GMT). No. of bitstreams: 1 290266.pdf: 2213401 bytes, checksum: 81bab09f73e2140f2d26245b98527869 (MD5) / As defesas antioxidantes e os sistemas de detoxificação podem ser modulados frente a contaminantes ambientais, dependendo do tempo e da intensidade da exposição, podendo levar a danos oxidativos. O objetivo deste trabalho é avaliar a resposta antioxidante e de adaptação celular de tilápias do Nilo (Oreochromis niloticus) expostas a ambientes contaminados na Bacia do Rio Cubatão do Norte, Joinville, SC, principal pólo industrial de Santa Catarina. O estudo foi desenvolvido em outubro de 2009 e de 2010, onde as tilápias (<2 g/L, grupos de 10) foram expostas em gaiolas (1,2x1,0x0,8 m) por 2 ou 7 dias em três diferentes pontos (S1, S2 e S3) da Bacia do Rio Cubatão do Norte, sendo o grupo referência (REF) uma fazenda de cultivo. Os dados representam a média + E.P.M. As análises no sedimento mostraram a presença de contaminantes de origem antrópica, tais como hidrocarbonetos policíclicos aromáticos (HPAs), alquilbenzeno lineares e esteróis. O nível de contaminantes obedece a seguinte ordem: S2>S3>S1=REF. Os níveis de HPAs e biliverdina na bile, de HPAs no sedimento, a atividade 7-etoxi-resorufina-O-desetilase (EROD) e a expressão do citocromo P450 1A (CYP1A), mostraram uma correlação positiva entre si. A elevação dos níveis de metabólitos de HPAs na bile indica um aumento na capacidade de metabolização e eliminação destes compostos. A maior metabolização poderia ser explicada pela indução da atividade da EROD associada ao aumento da expressão de CYP1A, especialmente no ponto S2. O decréscimo nos níveis de tióis do fígado e sangue, bem como, o aumento dos danos ao DNA indicam que após 2 dias de exposição houve aumento nos índices de estresse oxidativo nos animais dos 3 pontos de estudo, o que foi corroborado pelo aumento da clivagem da poli (ADP-ribose) polimerase 1 (PARP1, 7 dias, S2). A restauração parcial do estado tiólico e de vários outros parâmetros, além da reversão nos danos ao DNA e a indução de peroxirredoxina 6 (Prx6, S2), indicam que houve uma resposta adaptativa aos 7 dias de exposição. As atividades tiorredoxina redutase (TrxR, 2 dias), glutationa redutase (GR, 7 dias) e colinesterásica (2 dias) diminuíram no ponto S1. Em 2009, as maiores alterações foram encontradas após 2 dias de exposição e relacionadas à depleção de grupos tióis, enquanto que as alterações enzimáticas aconteceram predominantemente em 2010, sugerindo uma diversidade de contaminantes e/ou de seu aporte. Este estudo mostrou que protocolos utilizando respostas antioxidantes, danos oxidativos e indução de CYP1A como biomarcadores de contaminação aquática foram complementares e eficientes em discriminar o grau de contaminação entre os vários pontos de estudo. Os dados comprovam que animais que habitam a região da Bacia do Rio Cubatão do Norte estão expostos a contaminantes de origem antrópica e que estes têm ação negativa sobre os indivíduos, necessitando de medidas corretivas a curto e longo prazo. / Antioxidant defenses and detoxification systems may be modulated against environmental contaminants, depending on timing and intensity of exposure and may lead to oxidative damage. The aim of this study was to evaluate the antioxidant response and cellular adaptation of tilapia (Oreochromis niloticus) exposed to contaminated environments at Cubatão Basin, Joinville, SC, the main industrial area of Santa Catarina. The study was performed in October for two consecutive years (2009 and 2010). Tilapias (<2 g / L, 10 groups) were exposed in cages (1,2 x1,0x0,8 m) for 2 or 7 days in 3 different sites (S1, S2 and S3) of Cubatão Basin, and the reference group (REF) at a fish farm. Data are expressed as the mean ± SEM. The analysis in sediment showed contaminants of anthropogenic origin, such as polycyclic aromatic hydrocarbons (PAHs), linear alkylbenzene and sterols. A degree of contamination could be established: S2> S3> S1 = REF. The levels of PAHs and biliverdin in bile, PAHs in the sediment, 7-O-etoxiresorufina deetilase (EROD) activity and cytochrome P450 1A (CYP1A) expression presented good correlation. The high levels of PAH metabolites in bile indicates an increased ability to metabolize and dispose these compounds. The increased metabolization could be explained by the induction of EROD activity associated with increased CYP1A expression, especially at the site S2. The decrease in the levels of liver and blood thiols as well as an increase in DNA damage after 2 days of exposure are indicative of oxidative stress in animals from 3 studied sites, which is corroborated by the increased poly (ADP-ribose ) polymerase 1 (PARP1) cleavage (7 days, S2). The partial restoration of the thiol status and several other parameters, the reversal of DNA damage and peroxiredoxin 6 induction (Prx6, S2), indicate that there was an adaptive response after 7 days of exposure. The thioredoxin reductase (TrxR, 2 days), glutathione reductase (GR, 7 days) and cholinesterase (2 days) activities decreased at site S1. In the year 2009, most changes were found after 2 days of exposure and related to thiol status, whereas the enzyme changes occurred predominantly in 2010, suggesting a variety or diverse dosing of contaminants. This study showed that protocols using antioxidant responses, oxidative damage and CYP1A induction as biomarkers of aquatic contamination were complementary and efficient in discriminating the degree of contamination between the various sites of study. The data show that animals living in the Cubatão Basin, Joinville, SC, are exposed to contaminants of anthropogenic origin, producing a negative influence on individuals which requires corrective measures at short and at long term.

Tese (doutorado) - Universidade Federal de Santa Catarina, Centro de Ciências Biológicas. Programa de Pós-Graduação em Bioquímica / Made available in DSpace on 2012-10-26T12:14:42Z (GMT). No. of bitstreams: 1 304357.pdf: 2170729 bytes, checksum: 35b85f190a731919625c8f6462322d57 (MD5) / A contaminação dos ambientes costeiros apresenta-se como uma realidade na extensa costa brasileira. Dejetos e subprodutos das mais variadas atividades antrópicas, como os provenientes da atuação da indústria do petróleo e da ineficiência na coleta e tratamento do esgoto doméstico, provocam danos variados aos organismos expostos. Esses compostos químicos podem causar alterações biológicas de caráter molecular, celular, fisiológico ou ecológico, resultando em efeitos negativos não apenas para as comunidades naturais, como para os organismos destinados ao consumo humano. Desta forma, a identificação dessas alterações pode ser usada como biomarcador de contaminação aquática. O presente estudo contribui fornecendo informações para o estabelecimento de ferramentas sensíveis e viáveis para estudos ecotoxicológicos, através da avaliação de repostas de biomarcadores bioquímicos clássicos e da identificação de novos genes potenciais candidatos a biomarcadores. Para tal, ostras do mangue, Crassostrea brasiliana, foram expostas a diferentes contaminantes ambientais. São apresentados os resultados de biomarcadores bioquímicos em brânquia e glândula digestiva de ostras expostas por 96 horas a quatro concentrações da fração de óleo diesel acomodada em água (FAA). As respostas das enzimas antioxidantes e de fase II do sistema de biotransformação de xenobióticos, em conjunto com aspectos químicos, demonstraram que a ostra é capaz de bioacumular hidrocarbonetos alifáticos e aromáticos, além de responder a essa bioacumulação de forma concentração-dependente. Esses dados indicam um papel promissor dessa espécie como bioindicadora em programas de biomonitoramento ambiental. Entretanto, como muito pouco é conhecido sobre a biologia molecular de C. brasiliana, bibliotecas subtrativas de cDNA foram construídas. Esta metodologia possibilitou a identificação de 23 novos genes nessa espécie, comparando ostras expostas à FAA de óleo diesel por 24 horas e o grupo controle. Destes genes, três (protease específica de ubiquitina 25 - USP25, precursor de dominina, nucleosídeo difosfato quinase B - NDPK-B) foram validados por PCR quantitativo em tempo real (qPCR), representando genes de interesse para estudos ecotoxicológicos em C. brasiliana. Ainda, com o intuito de aumentar as informações gênicas de C. brasiliana, a técnica de pirosequenciamento utilizando a plataforma 454 foi aplicada em ostras expostas à FAA de óleo diesel, ao fenantreno e ao esgoto doméstico. A partir desta abordagem metodológica de sequenciamento em grande escala, a montagem de novo das leituras geradas produziu o primeiro transcriptoma referência de C. brasiliana. Como resultado, 7.401 novos genes foram identificados, destacando-se os genes codificadores de proteínas possivelmente envolvidas no sistema de biotransformação de xenobióticos e no sistema de defesa antioxidante. Por fim, com o intuito de avaliar a utilidade dos dados gerados pelo banco de ESTs, o nível de transcrição de seis genes CYP-like e quatro GST-like, previamente identificados no transcriptoma referência, foram testados por qPCR, fornecendo subsídios para o entendimento dos mecanismos moleculares de toxicidade exercidos pelo fenantreno, um hidrocarboneto policíclico aromático (HPA) prioritário. Para tal, ostras foram expostas a duas concentrações de fenantreno (100 ?g.L-1 e 1000 ?g.L-1) por 24 horas. Os resultados obtidos indicam o papel de CYPs e GSTs no metabolismo de HPAs, uma vez que o tratamento induziu um aumento no nível dos transcritos. A maior resposta da brânquia, se comparada à glândula digestiva, sugere papéis diferenciados no metabolismo de xenobióticos destes tecidos, no qual o papel da brânquia é destacado. Os dados apresentados nessa tese demonstram a aplicabilidade do uso de biomarcadores bioquímicos e moleculares em estudos ecotoxicológicos utilizando a ostra C. brasiliana como bioindicador de contaminação aquática. Em última instância, os resultados constituem importantes fontes de informação para o biomonitoramento de águas contaminadas por derivados de petróleo e esgoto doméstico ao longo da costa brasileira.

Dissertação (mestrado) - Universidade Federal de Santa Catarina, Centro de Ciências Biológicas, Programa de Pós-Graduação em Biotecnologia e Biociências, Florianópolis, 2013 / Made available in DSpace on 2013-12-05T23:03:33Z (GMT). No. of bitstreams: 1 320337.pdf: 2088380 bytes, checksum: b82e99715a833e8a5eb4c51e691ed579 (MD5) Previous issue date: 2013 / Diversas áreas costeiras no Estado de Santa Catarina estão associadas a zonas de cultivo de ostras, pesca e lazer, sendo que algumas destas estão contaminadas por esgoto sanitário. Tecnologias vêm sendo desenvolvidas na tentativa de monitorar a contaminação nestes ambientes, dentre as quais, podemos destacar os biomarcadores e a ostra Crassotrea gigas como organismo sentinela. Neste estudo encontramos diferença significativa na trasncrição de genes de citocromo P450 (CYP356A2, CYP2AU2, CYP30C1, CYP3071A1 e CYP26F1) em amostras de glândula digestiva de ostras expostas por diferentes períodos a um local contaminado por esgoto sanitário. Também avaliamos os níveis de transcrição dos genes CYP356A2, CYP2AU2 e CYP30C1, em diferentes tecidos de ostras C.gigas, após um dia de exposição, sendo que os três genes responderam a presença de contaminantes. Essas informações permitem um avanço na caracterização da indução destes genes por contaminantes, bem como, através da execução deste projeto aprofundamos nossos conhecimentos relacionados aos níveis de transcrição de isoformas de genes de CYPs, uma vez que os genes CYP307A1, CYP3071A1 e CYP26F1 foram analisados pela primeira vez em diferentes tecidos de ostras C. gigas presentes em local contaminado por esgoto sanitário <br> / Abstract: Several coastal areas in the State of Santa Catarina are associated with oyster farming, fishing and leisure and some of these are contaminated by sanitary sewage. Technologies have been developed in an attempt to monitor contamination in these environments, among which we can highlight the biomarkers and the oyster Crassostrea gigas as sentinel organism. In this study we found significant differences in the transcription of cytochrome P450 genes (CYP356A2, CYP2AU2, CYP30C1, CYP3071A1 and CYP26F1) in samples of digestive gland of oysters exposed for different periods of exposure to a sanitary sewage contaminated site. We also assessed the levels of transcription of genes CYP356A2, CYP2AU2 and CYP30C1 in different tissues of oyster exposed for one day at the contaminated site, and the three genes were responsive to the contaminants. This information allows an advance in characterization of these genes by inducing contaminants, and by performing this design deepened our knowledge related to levels of transcript isoform of CYP genes, once the genes CYP307A1, CYP3071A1 and CYP26F1 were analyzed for the first time in different tissues of oyster C. gigas present in sewagecontaminated site.

Dissertação (mestrado) - Universidade Federal de Santa Catarina, Centro de Ciências Agrárias. Programa de Pós-Graduação em Aquicultura, Florianópolis, 2013. / Made available in DSpace on 2013-12-05T23:21:49Z (GMT). No. of bitstreams: 1 317910.pdf: 1019650 bytes, checksum: 8bf9bbc989b48438cb538f63c3cc698b (MD5) Previous issue date: 2013 / Os ecossistemas marinhos brasileiros de estuários e baías recebem altas cargas de contaminantes contendo complexas misturas de xenobióticos. Entretanto, concentram grande parte dos cultivos de moluscos bivalves do país. O objetivo deste trabalho foi avaliar respostas bioquímicas e moleculares em ostras Crassostrea brasiliana (=Crassostrea gasar) coletadas em locais de cultivo e ambiente natural das baías da Babitonga e Guaratuba, localizadas ao Sul do Brasil. Para isso, a atividade enzimática (SOD, CAT, GPx, GST, G6PDH e GR), o nível de peroxidação lipídica e o nível de transcritos dos genes CYP2AU1, CYP 2C8-like, SULT 1C1-like, GPx-like, SOD-like, CAT-like, GST microsomal-like, GST ômega-like, FABP-like e ALAd-like foram analisados em brânquias, e o índice de dano de DNA foi analisado em hemolinfa através do ensaio do cometa. Todas as respostas foram comparadas às concentrações de hidrocarbonetos policíclicos aromáticos (HPAs), alquilbenzeno lineares (ABLs) e bifenilas policlorados (BPCs) de tecidos de ostra e sedimento dos locais de coleta. O local B-Amb1, apresentou maiores concentrações de HPAs e ABLs, altos índices de dano de DNA quando comparado a G-Cult1 e G-Cult2, bem como altos níveis transcricionais de GST microsomal-like (em relação a G-Cult2 e B-Cult1), alta atividade SOD (comparada a B-Amb1) e GST (comparada G-Cult1 e G-Cult2), e baixa atividade GR (comparada a G-Cult2 e G-Cult3), o que pode estar relacionado à presença de contaminantes orgânicos e a um desequilíbrio no estado redox dos animais. G-Cult1 apresentou maior atividade CAT quando comparada a G-Cult2, bem como altos níveis transcricionais do gene da CAT-like, quando comparados a G-Cult3, o que pode estar relacionado a fatores ambientais e biológicos. G-Cult2 e G-Cult3 bem como B-Amb2 e B-Cult1, apresentaram respostas semelhantes entre si. Os resultados indicam que os locais de coleta podem ser classificados como de baixos a médios níveis de contaminação, e que mesmo assim foi possível associar os biomarcadores bioquímicos e moleculares aos contaminantes orgânicos analisados em tecidos de ostras e sedimento.<br>

Tese (doutorado) - Universidade Federal de Santa Catarina, Centro de Ciências Físicas e Matemáticas, Programa de Pós-Graduação em Química, Florianópolis, 2013. / Made available in DSpace on 2013-12-05T23:38:51Z (GMT). No. of bitstreams: 1 320903.pdf: 4872102 bytes, checksum: da0dee6d38ebf63247246eb1c7628829 (MD5) Previous issue date: 2013 / Os biomarcadores geoquímicos são compostos relacionados com os precursores biológicos específicos, permitindo a obtenção de informações sobre as mudanças ambientais que ocorreram ou ainda ocorrem nos ecossistemas aquáticos e terrestres. O litoral do Estado de Santa Catarina possui grande variedade de ecossistemas, incluindo matas, manguezais, rios e lagoas. A Lagoa do Ribeirão, em Paulo Lopes, pertence ao complexo sistema de lagoas costeiras de Santa Catarina, e foi o ambiente de estudo deste trabalho. Foram coletados perfis sedimentares (50 a 70 cm) na lagoa e avaliados os parâmetros de granulometria, CHNS, íons Na+, K+, Mg2+ e biomarcadores geoquímicos. A avaliação dos dados obtidos com a análise de componentes principais e de agrupamento indica a presença de três ambientes distintos nesta região. Nos perfis mais superficiais (até a profundidade de 21 cm aproximadamente), ocorreu a predominância de água doce, caracterizado principalmente pelas maiores quantidades de areia, de biomarcadores de plantas superiores como alcanos de cadeia longa, campesterol, estigmasterol e de plantas de manguezais, evidenciado pela presença de taraxerol, friedelina e ß-amirina. A forte e inversa correlação não linear entre os biomarcadores de plantas superiores e de manguezais com os íons Na+, K+ e Mg2+ indica a presença de ambiente de água doce na região. As profundidades de 21 a 24 cm indicam uma região de transição do ambiente de água doce para o ambiente marinho, caracterizado principalmente pelo acúmulo das maiores quantidades dos biomarcadores determinados. A baixa quantidade de sais solúveis nestas profundidades pode estar relacionada à lixiviação promovida pela água doce. A partir de 27 cm de profundidade, os dados obtidos indicam a predominância de ambiente marinho, sendo observadas as menores quantidades de biomarcadores geoquímicos de fontes terrestres e os aumentos significativos das quantidades de Na+, K+ e Mg2+, da fração granulométrica silte+argila e enxofre total. A forte correlação não linear dos íons Na+, K+ e Mg2+ com a presença de dinosterol e ß-sitosterol indica a presença de algas marinhas na região, evidenciando a presença de água marinha na região. A distribuição espacial da fração granulométrica areia foi mais evidente na região oeste da lagoa, sugerindo a formação de um banco de areia no local. As quantidades de biomarcadores geoquímicos neste local foram, em geral, menores quando comparados com os demais locais da lagoa. As maiores quantidades de biomarcadores geoquímicos e a fração silte+argila foram determinadas nas regiões leste, sudeste, sul e sudoeste da lagoa. Estas regiões estão mais próximas aos morros da Serra do Tabuleiro, a entrada do rio Paulo Lopes e a saída do rio da Lagoa, permitindo o maior aporte de nutrientes e biomarcadores para a local onde está situada a lagoa. <br> / Abstract : The geochemical biomarkers are related compounds with specific biological precursors, allowing to obtain information about the environmental changes that have occurred in aquatic and terrestrial ecosystems. The coastline of the state of Santa Catarina has a great variety of ecosystems, including forests, wetlands, rivers and lakes. The Lagoa do Ribeirão, in Paulo Lopes, belongs to the complex system of coastal lagoons of Santa Catarina, and was the setting of this study. Sediment profiles with 50 to 70 cm depth were collected in the lagoon with several being evaluated: particle size, CHNS, Na+, K+ and Mg2+ ions and geochemical biomarkers. Interpretation of the principal component analysis and the cluster analysis data reveal the presence of three distinct environments in the region. The top profile (from surface to a depth of approximately 21 cm) was dominated by high amounts of sand, biomarkers of higher plants such as long-chain n-alkanes, campesterol, stigmasterol and plant mangroves, evidenced by the presence of taraxerol, friedelin and ß-amyrin. The strong and inverse non-linear correlation (rs Spearman) for biomarkers of higher plants and mangroves to Na+, K+ and Mg2+ ions indicates the presence of a brackish environment in the region. The depth interval 21-24 cm represents a transitional region of the brackish to the marine environment, mainly characterized by the presence of high content of certain marine biomarkers. The low amount of soluble salts in these depths may be related to leaching promoted by brackish water. From 27 cm depth down core, the predominance of the marine environment was revealed by the lower amounts of land-derived biomarkers and the significant increase in Na+, K+ and Mg2+ ions, particle size fraction of clay+silt and total sulfur. The strong non-linear correlation (rs Spearman) with Na+, K+ e Mg2+ ions and the presence of ß-sitosterol and dinosterol are indicative of seaweed in the region, corroborating the marine predominance. The spatial distribution of the sand grain size fraction was more evident at the western part of the lagoon, suggesting the formation of a sandbar. Compared to the other parts of the lagoon, the amount of geochemical biomarkers was lower in this part of the lagoon. Higher abundance of biomarkers and clay+silt was determined at the east, southeast, south and southwest regions of the lagoon. These regions are closer to the hills of the Serra do Tabuleiro, and the input river Paulo Lopes and the output river Rio da Lagoa, allowing higher concentration of nutrients and organic biomarker compounds.

Dissertação (mestrado) - Universidade Federal de Santa Catarina. Programa de Pós-Graduação em Biotecnologia. / Made available in DSpace on 2012-10-20T21:49:09Z (GMT). No. of bitstreams: 1 193681.pdf: 1147048 bytes, checksum: 4850114a798d1e7505fd423c121df3ef (MD5) / Joinville, a maior cidade do estado de Santa Catarina, possui mais de 200 indústrias altamente poluidoras. Estudos prévios realizados nesta região pela Fundação do Meio Ambiente (FATMA) observaram que em alguns rios, particularmente o "Rio do Braço" mostraram alta toxicidade para Daphnia magna e Danio rerio. O objetivo deste estudo foi analisar alguns biomarcadores de contaminação em tilápias (Oreochromis niloticus) engaioladas e colocadas em dois pontos do "Rio do Braço" (RB1 - perto de efluentes industriais; RB2 - aproximadamente um Km distante do local de despejo), e um local de referência (REF1 - "Fundação Municipal 25 de Julho"). Após sete dias, os animais foram mortos para a obtenção de sangue, cérebro e fígado. No fígado foram analisadas a expressão da isoforma CYP1A e da glicoproteína-P (PgP), as atividades das enzimas colinesterase (ChE), glutationa S-transferase (GST) e catalase (CAT). No sangue foi analisada a concentração de hemoglobina. No plasma foram analisadas as atividades das enzimas alanina aminotransferase (ALT), aspartato aminotransferase (AST) e a capacidade antioxidante. Nos eritrócitos foi analisada a atividade da d-aminolevulinato desidratase (d-ALA-D), e no cérebro foi analisada a atividade da colinesterase (ChE). Todos os peixes colocados em RB1 morreram antes de 8 horas de exposição, provavelmente devido às condições anóxicas observadas neste local. Os animais mantidos em RB2 apresentaram níveis significativamente maiores da atividade da CAT (129%), GST (26,7%) e CYP1A (448%) hepáticas e AST (23%) e ALT (67%) plasmáticas que nos animais da região referência. Nenhuma diferença foi observada nos níveis de PgP, na atividade da ChE na fração S9 hepática e cerebral entre os peixes mantidos no Rio do Braço e os animais referência. Porém, a ChE da fração Triton solúvel (TSF) foi maior (136,2%) no fígado dos peixes mantidos em RB2. Nenhuma diferença estatística foi observada na atividade enzimática da d-ALAD, na concentração de hemoglobina e na capacidade antioxidante do plasma dos peixes mantidos nos locais REF1 e RB2. Com base nestes resultados podemos concluir que os organismos mantidos no "Rio do Braço" foram expostos a uma condição de estresse químico, evidenciado pelos elevados níveis hepáticos de CYP1A, CAT e GST (biomarcadores de exposição a compostos orgânicos no ambiente) e plasmáticos das AST e ALT (indicadores de lesão tecidual).

Dissertação (mestrado) - Universidade Federal de Santa Catarina. Programa de Pós-Graduação em Biotecnologia. / Made available in DSpace on 2012-10-21T19:15:43Z (GMT). No. of bitstreams: 1 205688.pdf: 466872 bytes, checksum: cf8715db53c38f431f2a9162a9cefee9 (MD5) / Este trabalho apresenta uma avaliação preliminar do potencial da quitosana, na forma de microesferas, como um agente remediador de efluente da mineração de carvão. Em adição, o processo foi monitorado para avaliar a toxicidade do efluente usando análises físico-químicas, testes de toxicidade aguda com microcrustáceos (A. salina e D. magna), teste de inibição de crescimento de raiz de cebola (Allium cepa), índice somático do fígado (ISF) biomarcadores de estresse oxidativo, dano ao DNA e atividade da enzima delta aminolevulínico desidratase (ALA-D) em tilápia do Nilo (Oreochromis niloticus). Os peixes foram expostos por 7, 15 e 30 dias em água sem cloro (CN), a 10% do efluente de mineração sem remediação (ENR) e 50% do efluente remediado com microesferas de quitosana (ERMQ). Após os períodos de exposição os peixes foram mortos e os fígados foram retirados para determinação dos níveis de glutationa reduzida (GSH), de substâncias que reagem com o ácido tiobarbitúrico (TBARS), da atividade das enzimas antioxidantes, como da catalase (CAT), superóxido dismutase (SOD), glutationa S-transferase (GST) e atividade da ALA-D. O dano ao DNA foi avaliado no sangue e no fígado. A remediação foi capaz de elevar o pH do efluente de 2,1 para 7,7 e remover aproximadamente 100% da maioria dos metais do efluente, com exceção do Mn. Os resultados da toxicidade aguda revelaram que o efluente mostrou alto grau de toxicidade para A. salina (CL50 = 6,01%) e para D. magna (CE50 = 9,85%). Contudo a remediação reduziu substancialmente a toxicidade do efluente para ambos microcrustáceos. Foi observada uma queda no crescimento das raízes de cebolas expostas ao efluente. Após a remediação, as raízes mostraram um aumento de 21% quando comparado aos controles. A exposição ao ENR causou um significativo aumento no tamanho do fígado dos peixes após 30 dias de exposição. Por outro lado, após remediação nenhuma diferença significante foi observada no ISF. Os níveis de TBARS foram significativamente maiores no fígado de peixes expostos ao ENR em 7 e 15 dias quando comparado ao CN. A concentração de GSH estava abaixo dos valores do CN para o ENR após 7 e 15 dias. Aumentos da atividade da CAT foram observados durante todos os tempos avaliados nos peixes expostos ao ENR. O maior aumento da atividade da GST foi observado nos peixes exposto ao ENR após 30 dias. O dano ao DNA esteve aumentado no fígado e no sangue após exposição ao ENR. Nenhuma alteração significativa foi observada na atividade da ALA-D nos peixes expostos ao ENR. Contudo, após a remediação do efluente nenhuma diferença foi observada nos níveis de TBARS e GSH, na atividade das enzimas CAT, SOD, GST e ALA-D, e no dano ao DNA, quando comparado ao CN. Os resultados indicam fortemente que microesferas de quitosana podem ser usadas como uma alternativa para a remediação de efluentes de mineração de carvão. Adicionalmente, o uso de biomarcadores utilizados neste estudo, exceção a ALA-D, constituem uma ferramenta bastante útil na avaliação da toxicidade e dos processos de tratamento de efluentes de mineração de carvão.

Dissertação (mestrado) - Universidade Federal de Santa Catarina, Centro de Ciências Agrárias. Programa de Pós-Graduação em Aquicultura. / Made available in DSpace on 2012-10-19T23:11:12Z (GMT). No. of bitstreams: 1 186491.pdf: 525604 bytes, checksum: a00c4635444a2c34b920e3de95cc4060 (MD5) / Visando implementar a utilização de biomarcadores de contaminação aquática com a ostra-do-mangue Crassostrea rhizophorae no estado de Santa Catarina, o presente trabalho teve por objetivo avaliar a atividade das enzimas catalase (CAT), glutationa S-transferase (GST) e acetilcolinesterase (AChE) nas brânquias de animais cultivados durante 7, 9 e 11 meses em três locais no complexo estuarino lagunar (Barranceira, BAR; Morro Grande, MG; Santa Marta, SM) em Laguna, SC e em uma região referência (Santo Antônio de Lisboa, SAL) no município de Florianópolis, SC, bem como determinar a concentração de metais- traço (As, Cd, Cu, Cr, Mn, Ni, Pb, Sn, V e Zn) nas partes moles destes mesmos animais. No complexo lagunar, foram encontrados niveis mais elevados para os metais Cd, Cu, Zn e Mn em todos os periodos de estudo, sendo que para o metal traço Mn, as maiores concentrações foram observadas somente em SM, nos períodos correspondentes a 7, 9 e 11 meses de cultivo, e em BAR no período de 11 meses. As atividades da CAT, GST e AChE foram maiores na região referência SAL nos períodos de 9 e 11 meses de cultivo, quando comparadas àquelas determinadas para as ostras cultivadas nas diferentes unidades da região do complexo estuarino no mesmo período. Nos períodos de 7 e 11 meses, as concentrações mais elevadas de metais-traço Cd, Cu, Mn e Zn nas partes moles dos animais foram associadas a uma menor atividade das enzimas estudadas. A ausência de diferença de atividade da CAT e GST entre a região referencia e os pontos do complexo lagunar no periodo de 9 meses foi associada às diferentes necessidades de osmoconformação entre os animais, uma vez que o maior índice pluviometrico foi observado dez dias antes da coleta deste período, fato que contribuiu para a diminuição da salinidade em todos os pontos de coleta em relação ao periodo anterior. Por outro lado, outros fatores podem estar relacionados com as atividades enzimáticas encontradas, uma vez que as maiores atividades destas enzimas estão associadas às maiores salinidades apontadas na região referencia e aos maiores comprimentos dos animais, e ainda, às maiores concentrações dos metais As, Cr, Sn e V nas partes moles dos animais na regoão referencia no periodo de 7 meses. Considerando que a influência dos fatores ambientais, dos fatores endógenos e da biodisponibilidade de metais traço sobre os mecanismos bioquímicos que modulam a atividade das enzimas biomarcadoras é ainda pouco conhecida, a necessidade de estudos sobre estes parâmetros é enfatizada. Desta forma, a ausência de variação na atividade das enzimas analisadas ao longo do experimento nas unidades do complexo estuarino de Laguna poderia ser interpretada dentro de um contexto molecular integrado, visando não só compreender a inter-relação destes parâmetros e as necessidades de osmoconformação dos animais, como também otimizar o uso de biomarcadores nesta espécie de molusco.