Tese (doutorado) - Universidade Federal de Santa Catarina, Centro de Ciências da Saúde, Programa de Pós-Graduação em Enfermagem, Florianópolis, 2014. / Made available in DSpace on 2015-03-18T20:57:01Z (GMT). No. of bitstreams: 1 332266.pdf: 2184209 bytes, checksum: 554e730a75d97b7c2dda321da393d384 (MD5) Previous issue date: 2014 / O objetivo deste estudo foi avaliar os efeitos da intervenção fisioterapêutica a idosas submetidas a tratamento cirúrgico para câncer de mama. Caracterizado por abordagem quanti-qualitativa, sendo a revisão integrativa outro método de investigação utilizado. A abordagem quantitativa volta-se a um estudo de caráter série de casos. O referencial teórico associado à abordagem qualitativa baseia-se na antropologia da saúde. A pesquisa ocorreu junto a pacientes oriundas de tratamento cirúrgico realizado na Maternidade Carmela Dutra (MCD), sendo a amostra inicial composta por nove mulheres, cinco finalizaram a intervenção. O laboratório de Biomecânica da Universidade do Estado de Santa Catarina (UDESC) foi o local para a realização das avaliações físicas, sendo feitas no primeiro encontro (AV1), após 15 atendimentos (AV2) e após 30 atendimentos (AV3). Foram verificadas a condição cutânea e linfática, amplitude de movimento, circunferência dos segmentos superiores, sensibilidade cutânea e aspectos de dor. A intervenção foi iniciada após a AV1, ocorrendo de uma a duas vezes por semana, com duração de uma hora, sendo feitos 30 atendimentos no ambulatório de fisioterapia da MCD. Foi realizada entrevista semiestruturada ao final dos 30 encontros. A revisão integrativa ocorreu através da seleção bibliográfica nas bases: Literatura Latino-Americana em Ciências da Saúde (LILACS), Sistema Online de Busca e Análise de Literatura Médica (MEDLINE), PUBMED, Scientific Electronic Library Online (SCIELO), Cumulative Index to Nursing and Allied Health Literature (CINAHL) e Scopus; através da combinação dos descritores (DeCS): mastectomy, physiotherapy, aged; mastectomía, fisioterapia, anciano; mastectomia, fisioterapia, idoso. Foram incluídos 21 estudos para compor a revisão integrativa. Na análise dos dados quantitativos, utilizou-se estatística descritiva. Para as comparações das variáveis da avaliação física entre segmentos, assim como nos três momentos de avaliação, foi utilizada estatística inferencial através do teste U de Mann-Whitney, nível de significância de 0,05. Para os dados qualitativos, a técnica de análise foi a proposta operativa de Minayo (2004), também utilizada para a análise dos dados da revisão integrativa. Como resultados, houve melhora do aspecto cicatricial e da condição dérmica. Sobre a circunferência dos segmentos superiores, na avaliação inicial, não houve diferença superior a 1,5 cm entre segmentos e praticamente todos os valores do membro atribuído à cirurgia foram maiores que o membro contralateral, sem significância estatística. Para a condição da sensibilidade cutânea, ao início, os limiares percebidosforam altos e na avaliação final foi evidente a melhora do padrão da sensibilidade cutânea, inclusive cicatricial. Para a amplitude de movimento do ombro, na primeira avaliação, todos os valores do membro homolateral à cirurgia foram inferiores ao membro contralateral, com diferença estatisticamente significativa. Na avaliação final, os valores do segmento homolateral à cirurgia, mesmo com aumento em relação ao início, permaneceram inferiores ao segmento contralateral. Sobre a dor, na avaliação inicial, ocorreu o seu maior relato, sendo atribuída, principalmente, ao fator sensitivo. Na avaliação intermediária houve redução expressiva (domínio sensitivo p=0,049 e escore total p=0,036), e três das cinco participantes que terminaram a intervenção já não a apresentavam. Os resultados qualitativos foram apresentados através de dois eixos temáticos ?Enfrentamento do diagnóstico e tratamento do câncer de mama de mulheres idosas? e ?O processo do tratamento fisioterapêutico de mulheres idosas com câncer de mama e suas repercussões?. Considera-se, ao final do estudo, a importância do atendimento a estas mulheres, com melhora de variáveis físicas que destacam o efeito positivo da fisioterapia a este grupo. Um fator que chamou atenção foram as desistências (quatro participantes), o que demonstrou que um suporte familiar e acompanhamento aos atendimentos foi essencial na finalização da intervenção. Através dos resultados quantitativos, assim como pelas percepções referenciadas pelas mulheres, é importante repensar a assistência, focando a intervenção para possíveis potencialidades destas mulheres, trabalhando através de um atendimento integral, envolvendo fatores culturais que demonstraram o que era primordial na assistência, como a recuperação funcional e a possibilidade do trabalho doméstico. Outro ponto é pensar em atendimentos com tempo de acompanhamento mais curto, pois neste grupo de mulheres, com 15 atendimentos houve melhora expressiva de sua condição física inicial. Porém, este atendimento mais curto não deve estar distante do acompanhamento sistemático, e devem ser considerados fatores essenciais para o sucesso da assistência, como um vínculo adequado.<br> / Abstract : The objective of this study was to evaluate the effects of a physiotherapeutic intervention for elderly women undergoing surgical treatment for breast cancer. It is characterized by quanti qualitative approach, being an integrative review, another research method used. The quantitative approach returns to a study with multicase character. The theoretical framework associated with the qualitative approach is based on the Anthropology of Health. The study was conducted with patients from surgical treatment performed in the Maternity Carmela Dutra (MCD), being the sample composed of 9 women and 5 finilized interventation. The Biomechanics laboratory of the State University of Santa Catarina (UDESC) was the location for the implementation of physical assessments, being made in the first meeting (AV1), after 15 visits (AV2) and after 30 visits (AV3). At all times, the skin condition, range of motion, circumference of upper segments, skin sensitivity and aspects of pain were checked. The proposed intervention was initiated after the AV1, occurring 1 to 2 times per week, with a duration of 1 hour, being made 30 visits in outpatient physiotherapy at the MCD. Semi-structured interviews were carried out at the end of the 30 meetings. The integrative review occurred through the selection in bibliographic databases: Latin American Literature in Health Sciences (LILACS), Online System of Search and Analysis of Medical Literature (MEDLINE), PUBMED, Scientific Electronic Library Online (SCIELO), Cumulative Index to Nursing and Allied Health Literature (CINAHL) and Scopus; through the combination of the descriptors (DeCS): mastectomy, physiotherapy, aged; mastectomía, physiotherapy, anciano; mastectomy, physiotherapy, elderly. There were 21 studies included, which composed the integrative review. In the analysis of the quantitative data, descriptive statistics were used. For the comparisons of the variables of the data in the physical assessment between segments, as well as at the three assessment points, was used inferential statistics using the Mann-Whitney U-test, significance level of 0.05. For qualitative data, the technique of analysis was the proposal operative Minayo (2004), also used for the data analysis of the integrative review. As a result, there was improvement of healing aspect and skin condition. On the circumference of the segments, in the initial evaluation there was no, in terms of average difference greater than 1.5 cm between segments. Almost all the values of the member assigned to surgery were larger than the contralateral limb, without significance. For the skin sensitivity condition, at the beginning, the perceived thresholds werehigh. In the final evaluation, there was a clear improvement in the pattern assigned to skin sensitivity, including healing. For the range of motion of the shoulder, at the first evaluation, all the values of the limb ipsilateral to surgery were lower than the contralateral limb, with statistically significant difference. In the final evaluation, the values of the segment ipsilateral to surgery, even with an increase in relation to the beginning, remained lower than the contralateral segment. Regarding pain, in the initial evaluation, occurred the greatest report, being attributed mostly to sensory factor. In the mid-term evaluation there was a significant reduction of pain complaint (sensory domain (p= 0.049) and total score (p= 0.035), and 3 of the 5 participants who completed the intervention no longer had pain at this time. The qualitative results were presented by two thematic axes "Coping with the diagnosis and treatment of breast cancer in elderly women" and "The process of physiotherapeutic treatment of older women with breast cancer and its effects". Is considered at the end of the study, the importance of attending to these women, with improvement of physical variables, highlighting the positive effect of physical therapy for this group. A factor that drew attention was the withdrawals, which demonstrated that a family support and monitoring the care was essential in the completion of 30 sessions. Thus, by means of the quantitative results, as well as the perceptions referenced by women, focusing on intervention for possible potential of these women, working through a comprehensive care, involving cultural factors that showed what was of the utmost importance in assisting in this older group, such as the functional recovery and the possibility of domestic work. Another point is to think about visits with a shorter follow-up time, because in this group of women, with 15 visits there has been significant improvement in their physical condition. However, this shorter service should not be far from systematic monitoring, and should be considered essential factors for the success of the assistance as an adequate bond.

LOBO, Marina Duarte Pinto. Análise proteômica de plasma de pacientes com câncer de mama utilizando lectinas vegetais e label-free LC-MSE. 2016. 158 f. Tese (doutorado em bioquímica)- Universidade Federal do Ceará, Fortaleza-CE, 2016. / Submitted by Elineudson Ribeiro (elineudsonr@gmail.com) on 2016-03-22T18:19:32Z No. of bitstreams: 1 2016_tese_mdplobo.pdf: 3396858 bytes, checksum: 435f82cac31daba0ee12e7449cc2f46a (MD5) / Approved for entry into archive by José Jairo Viana de Sousa (jairo@ufc.br) on 2016-05-18T18:29:19Z (GMT) No. of bitstreams: 1 2016_tese_mdplobo.pdf: 3396858 bytes, checksum: 435f82cac31daba0ee12e7449cc2f46a (MD5) / Made available in DSpace on 2016-05-18T18:29:19Z (GMT). No. of bitstreams: 1 2016_tese_mdplobo.pdf: 3396858 bytes, checksum: 435f82cac31daba0ee12e7449cc2f46a (MD5) Previous issue date: 2016 / The breast cancer presents one of the most commonly diagnosed types of cancer among women worldwide and in Brazil, after nonmelanoma skin cancer. It’s a clinically and biologically heterogeneous disease. Therefore, early detection of breast cancer, a reliable characterization of the disease and an accurate diagnosis are crucial to reducing mortality. The aim of this work was perform a qualitative and quantitative analyzes of plasma proteins from healthy women and from women with ductal breast cancer in different stages. For this, initially, plasma samples were depleted of IgG and albumin and then pooled into samples representative for each study group. The pools were then fractionated by immobilized plant lectins (frutalin and DAL)-affinity chromatography. Subsequently, the pools and chromatographic fractions were digested and submited to and data-independent label-free mass spectrometric analysis. The use of affinity chromatography with plant lectins prior to analysis by mass spectrometry was essential to reduce sample complexity and extend the dynamic range of proteins, and frutalin showed the best results from fractionation. A sum of all analyzes performed revealed the identification of about 445,000 peptides and more than 30,000 proteins, with redundancy between isoforms of the same group and between groups. Furthermore, in addition to fractionation, the chromatography of affinity with plant lectins were effective in isolating specific glycoforms that reflect an altered glycosylation pattern associated with the disease. Several differentially expressed proteins, some of which changes in glycosylation were identified, such as apolipoprotein A2, apolipoprotein C3, complement factors (C3, C4b and C4A), clusterin, 1-2-α-acid glycoprotein, haptoglobin, hemopexin, serum paraoxonase arylesterase, plasma retinol binding protein, plasminogen and vitronectin. Among the proteins identified, some are related to the breakdown of the extracellular matrix, lipid metabolism, oxidative stress and other characterized as acute phase proteins. Finally, the data of differential expression and possible changes in the glycosylation patterns of proteins contributes to the development of a protein profile, subject to later validation, presenting an association with the development and characterization of breast cancer in its different stages. / O câncer de mama representa o tipo de câncer mais comum entre as mulheres no mundo e no Brasil, depois do câncer de pele não melanoma. Caracterizando-se como uma doença clínica e biologicamente heterogênea, a detecção precoce do câncer de mama, uma caracterização fidedigna da doença e um diagnóstico preciso são de fundamental importância para redução da mortalidade. Assim, o objetivo do presente trabalho foi realizar análises qualitativas e quantitativas de proteínas plasmáticas de mulheres saudáveis e mulheres com câncer de mama tipo ductal, em diferentes estágios. Para isso, inicialmente, as amostras de plasma foram depletadas de albumina e IgG e depois reunidas em pools representativos para cada grupo em estudo. Os pools foram então fracionados por meio de cromatografias de afinidade em matrizes de Sepharose 4B imobilizadas com as lectinas vegetais α-galactose-ligante de Artocarpus incisa - Frutalina e glucose/manose-ligante de Dioclea altíssima – DAL. Posteriormente, tantos os pools como as frações cromatográficas obtidas foram digeridas e submetidas à análise independente de dados (MSE) e quantificadas (label-free) por espectrometria de massas. A utilização das cromatografias de afinidade com lectinas vegetais a priori da análise por espectrometria de massas foi fundamental para reduzir a complexidade das amostras e estender o intervalo dinâmico de proteínas, e frutalina apresentou os melhores resultados de fracionamento. Um somatório de todas as análises realizadas revelou a identificação de cerca de 445.000 peptídeos e mais de 30.000 proteínas, com redundância entre isoformas do mesmo grupo e entre grupos. Ademais, além de fracionar, as cromatografias de afinidade com lectinas vegetais foram eficientes em isolar glicoformas específicas que refletem um padrão de glicosilação alterado associado à doença. Diversas proteínas diferencialmente expressas, algumas delas com mudanças na glicosilação, foram identificadas, tais como apolipoproteína A2, apolipoproteína C3, fatores do sistema complemento (C3, C4b e C4A), clusterina, α-1-2-ácido glicoproteína, haptoglobina, hemopexina, paraoxonase arilesterase sérica, proteína plasmática de ligação ao retinol, plasminogênio e vitronectina. Dentre as proteínas identificadas, algumas estão relacionadas com a decomposição da matriz extracelular, metabolismo lipídico, estresse oxidativo e outras caracterizam-se como proteínas de fase aguda. Finalmente, os dados de expressão diferencial e possíveis alterações de glicosilação das proteínas contribuem para o desenvolvimento de um perfil protéico, alvo para posterior validação, que apresenta uma associação com o desenvolvimento e a caracterização do câncer de mama em seus diferentes estágios.

Dissertação (mestrado) - Universidade Federal de Santa Catarina, Centro de Ciências da Saúde, Programa de Pós-Graduação em Farmácia, Florianópolis, 2015. / Made available in DSpace on 2016-04-19T04:13:42Z (GMT). No. of bitstreams: 1 336041.pdf: 3290695 bytes, checksum: c2bff10428a13ab49f61c13dd059c7ca (MD5) Previous issue date: 2015 / O câncer de mama é o segundo tipo de câncer mais frequente, atingindo 1.7 milhões de mulheres no mundo. É caracterizado pelo crescimento e proliferação celular desordenado, podendo ocorrer migração das células tumorais, invasão e metástase para outros tecidos e órgãos. Os tratamentos convencionais para o câncer não atingem somente as células tumorais, mas também os tecidos saudáveis apresentando uma série de efeitos adversos que podem levar a complicações severas. Com o avanço do entendimento da genética do câncer e a identificação de genes alvos, a aplicação do efeito de RNA de interferência (RNAi) apresenta-se como alternativa viável para a melhora do prognóstico. A estratégia anti-angiogênica com a introdução de siRNA contra proteína-chave da angiogênese surge como opção entre os genes alvo superexpressos no câncer de mama. Porém, o sucesso da aplicação de RNAi na terapêutica depende do desenvolvimento de nanocarreadores de siRNA efetivos no transporte e na proteção da molécula contra a rápida degradação na circulação. Desta forma, neste trabalho foram preparados dois tipos de suspensão de nanopartículas carreadoras em diferentes pHs (NP1 e NP2), constituídos de 3 componentes (SPIONs, CaP e copolímero PEG-PAsp) responsáveis por realizar funções distintas desde a formação das nanopartículas até a liberação controlada no citoplasma de células de carcinoma de mama. As nanopartículas foram caracterizadas por espalhamento dinâmico de luz, apresentando diâmetro hidrodinâmico médio entre 120 nm e 140 nm em distribuição por intensidade, e índice de polidispersão (PdI) entre 0,05 e 0,15. A avaliação do tamanho e da morfologia por microscopia eletrônica de transmissão corroborou os resultados de caracterização pela comparação com o histograma em número. As nanopartículas se apresentaram com alto potencial magnético, verificado pela capacidade de magnetização dos mesmos, sugerindo estruturas cristalinas de magnetita e maghemita. De acordo com os estudos de citoxicidade realizados por MTT, ambas NP1 e NP2 não foram citotóxicas em células de câncer de mama MDA-MB 231. A avaliação da eficácia em promover o escape endossomal e entregar o siRNA para o silenciamento foi estudada por microscopia confocal e RT-qPCR. A microscopia confocal confirmou a habilidade dos sistemas nanocarreadores em promover o escape endossomal, enquanto que a partir do ensaio de qPCR foi possível observar a redução da expressão do gene VEGF em cerca de 60% em relação aos controles. Diante deste cenário, as nanopartículas carreadoras NP1 e NP2 apresentam-se como alternativas viáveis para aplicação do efeito de RNA de interferência invivo, devido a sua capacidade de carreamento ativo de siRNA no campo magnético, ausência de citotoxicidade, e eficiência na entrega ao citoplasma celular para o silenciamento do gene VEGF objetivando a terapia anti-angiogênica contra o câncer de mama.<br> / Abstract : Breast cancer is the second most common cancer, affecting 1.7 million women. It is characterized by disordered cell growth and proliferation, tumor cells migration, invasion and metastasis. Conventional cancer treatments affect not only tumor cells but also healthy tissue presenting a series of adverse effects that may lead to severe poisoning. With the advancement of the understanding of the cancer genetics and the identification of target genes, application of interference RNA (RNAi) effect is presented as a viable alternative to a better prognosis. The anti-angiogenic strategy with the introduction of siRNA against key protein of angiogenesis appears as an option between the target genes overexpressed in breast cancer. However, the successful application of RNAi depends exclusively on the development of effective siRNA nanocarriers to transport and to protect the molecule against rapid degradation in the blood circulation. Thus, in this work were prepared two kinds of nanoparticles at different pHs (NP1 and NP2), consisting of 3 components (SPIONs, CaP and PEG-PAsp copolymer) responsible for performing different functions from the formation of nanoparticles to controlled release in the cytoplasm of breast carcinoma cells. The nanoparticles were characterized by dynamic light scattering, with hydrodynamic average diameter between 120 nm and 140 nm by intensity distribution and polydispersity index (PdI) of 0.05 to 0.15. The evaluation of the size and morphology by transmission electron microscopy confirmed the characterization results by comparison with the histogram in number. Nanoparticles presented high magnetic potential, verified by magnetizing capacity thereof, suggesting crystal structures of magnetite and maghemite. According to the cytotoxicity by MTT studies, both NP1 and NP2 are not cytotoxic in the MDA-MB 231 breast cancer cells. The efficacy in promoting endosomal escape and deliver siRNA for silencing was studied by confocal microscopy and RT-qPCR. Confocal microscopy confirmed the ability of nanocarriers to promote endosomal escape, while the qPCR assay was possible to observe a reduction in the expression of VEGF gene in about 60% compared to controls. In this scenario, the NP1 and NP2 nanoparticles are presented as a viable alternative carrier for application in RNA interference in vivo, due to its capacity of carrying siRNA by active targeting with application of a magnetic field, lack ofcytotoxicity, and efficiency in delivery to cell cytoplasm to silencing of VEGF gene with the objective of anti-angiogenic therapy against breast cancer.

Dissertação (mestrado) - Universidade Federal de Santa Catarina, Centro de Ciências da Saúde, Programa de Pós-Graduação em Nutrição, Florianópolis, 2015. / Made available in DSpace on 2016-04-19T04:20:04Z (GMT). No. of bitstreams: 1 337962.pdf: 9658370 bytes, checksum: 52c1eac9d5ceeaccda034c154a00faee (MD5) Previous issue date: 2015 / Introdução: O tratamento para o câncer de mama pode provocar alterações negativas no consumo alimentar e na qualidade da dieta das pacientes, podendo influenciar na recidiva da doença. Diante disso, ações de assistência e melhoria da qualidade da dieta de pacientes com câncer de mama, como intervenções nutricionais educativas, tornam-se importantes. Em 2007, o World Cancer Research Found (WCRF) em conjunto com o American Institute for Cancer Research (AICR) publicou importante guia com recomendações nutricionais e de atividade física para prevenção do câncer. Neste sentido, considerando que intervenções nutricionais em mulheres com câncer de mama focam suas metas em diversos componentes da alimentação, os quais têm sido relacionados a fatores de risco e proteção para o desenvolvimento de tumor primário e recidiva da doença, a avaliação da adesão a recomendações oficiais, bem como a análise da efetividade de intervenções nutricionais sobre a qualidade da dieta, torna-se essenciais. Objetivo: Avaliar o efeito de um programa de intervenção nutricional educativa sobre as características nutricionais e de atividade física conforme as recomendações do WCRF/AICR e sobre a qualidade da dieta de mulheres em tratamento adjuvante para o câncer de mama. Métodos: Realizou-se um ensaio clínico não randomizado com Grupo Intervenção (GI; n=18) e Grupo Comparação (GC; n=78), avaliados no momento do diagnóstico cirúrgico e após o término do tratamento e/ou intervenção. O GI foi submetido a intervenção nutricional educativa durante 12 meses com orientações para consumo =400g/dia de alimentos de origem vegetal e =500g/semana de carnes vermelhas ou processadas, através de ligações quinzenais, palestras, aula de culinária e materiais informativos. As características nutricionais e de atividade física foram avaliadas conforme as recomendações do WCRF/AICR (2007) e a qualidade da dieta foi avaliada através do Índice de Qualidade da Dieta Revisado (IQD-R), validado para a população brasileira. Resultados: O GI melhorou a adesão às recomendações do WCRF/AICR quanto à redução significativa no consumo de alimentos de origem animal (-44,4%) e no consumo de bebidas alcoólicas (-0,2g etanol/dia) e ainda, aumentou, porém não significativamente o consumo de frutas e vegetais, sendo que a mudança no consumo foi significativamente maior no GI (+220,8g/dia) comparada a do GC (+28,2g/dia). O GI aumentou significativamente a pontuação total do IQD-R (+5,7 pontos, p=0,021), enquanto o GC não apresentou alterações. Na análise por componentes do IQD-R, após a intervenção, o GI aumentou significativamente a pontuação dos componentes frutas totais (+1,9), frutas integrais (+1,1), gordura saturada (+2,5) e quilocalorias provenientes das gorduras sólidas, bebidas alcoólicas e açúcar de adição (Gord_AA) (+5,0), e reduziu significativamente a pontuação do componente carnes, ovos e leguminosas (-3,3), a qual deu-se pela redução significativa do consumo de alimentos embutidos e carne bovina. Entre os grupos observou-se diferença significativa na pontuação total, sendo que o GI apresentou maior aumento (6,2 (IIQ: 1,6; 10,0) vs. GC: 0,4 (IIQ: -4,9; 5,0) pontos), e ainda, na pontuação de frutas totais, frutas integrais e Gord_AA, com maiores pontuações para o GI. Em ambos os grupos a maioria das mulheres é sedentária, não atendendo à recomendação do WCRF/AICR, e não foram observadas diferenças significativas intra ou intergrupos. Com relação aos parâmetros antropométricos, o GC observou-se aumento do índice de massa corporal (+1,1Kg/m2; p<0,001) e também na circunferência da cintura (+2,0cm, p=0,005), enquanto que o GI não apresentou alterações significativas. Conclusão: A intervenção nutricional educativa contribuiu positivamente para melhorar a adesão às recomendações do WCRF/AICR e a qualidade global da dieta e ainda, contribuiu para a manutenção dos parâmetros antropométricos de mulheres com câncer de mama durante o tratamento antineoplásico.<br> / Abstract : Background: The breast cancer treatment can changes food consumption and diet quality of women, and that may influence the disease recurrence. Thus, assistance measures and improvements in the diet quality of women with breast cancer, as educational nutritional interventions, becomes relevant. In 2007, the World Cancer Research Fund/American Institute for Cancer Research (WCRF/AICR) published an important guide with physical activity and nutritional guidelines for cancer prevention. Therefore, considering that nutritional interventions in women with breast cancer focus their goals in various diet components, related to risk and protection factors for the development of primary tumors and disease recurrence, the adherence assessment to official guidelines, as well as the effectiveness evaluation of educational interventions on diet quality, becomes relevant. Purpose: To evaluate the effect of an educational nutritional intervention on physical activity and nutritional characteristics according to World Cancer Research Fund/American Institute for Cancer Research (WCRF/AICR) guidelines and in the diet quality of women during breast cancer treatment. Methods: It is a nonrandomized clinical trial with intervention group (IG, n=18) and comparison group (CG, n=78), evaluated at baseline and after treatment or nutritional intervention. The IG was subjected to an intervention targeting the consumption of at least 400g/day of fruits and vegetables and intake of no more than 500g/week of red or processed meat, by biweekly phone calls, personal meetings and monthly bulletins. The physical activity and nutritional characteristics were evaluated according to the WCRF/AICR (2007) guidelines and the diet quality was evaluated by the Brazilian Healthy Eating Index (B-HEI), validated for the Brazilian population. Results: The IG improved the adherence to WCRF/AICR guidelines, as well as the significant decrease in the consumption of animal foods (-44.4%) and alcoholic drinks (-0.2g ethanol/d), and increase, but no significantly, the consumption of plant foods, however, between groups, the change was significant and higher in IG (+220.8g/day) compared to the CG (+28.2g/day). The IG showed improvement in the diet quality, because increased significantly the total score of B-HEI (+5.7 points, p=0.021), while the CG showed no changes. At the analysis of the components of the B-HEI, after intervention, the IG improved the diet quality through significant increase in score of components total fruit (+1.9), whole fruits (+1.1), saturated fat (+2.5) and calories derived from solid fats, alcohol and added sugar (SoFAAS) (+5.0) in relation to total energy value, and the IG presented significant decrease in the score of component meat, eggs and legumes (-3.3), represented by the significant decrease in consumption of processed meat and beef. Between groups, significant differences were observed in the total score of B-HEI, and the IG showed greater increase (6.2 (IIQ: 1.6; 10.0) vs. CG: 0.4 (IIQ: -4.9; 5.0)), and also in the score change of components total fruit, whole fruits and SoFAAS, with higher scores for IG. In both groups, most women were sedentary, haven't been adhering to the recommendations of the WCRF/AICR, and no significant differences intra or intergroup was observed. Furthermore, the CG presented increase in body mass index?s mean (+1.1kg/m2; p<0.001) and waist circumference (+2.0cm, p=0.005), while no change was observed in the IG. Conclusions: The educational nutritional intervention contributed positively to improve the adherence to WCRF/AICR guidelines and the global diet quality and still, contributed to anthropometric parameters maintenance of women during breast cancer treatment.

Tese (doutorado) - Universidade Federal de Santa Catarina, Centro de Ciências Físicas e Matemáticas, Programa de Pós-Graduação em Química, Florianópolis, 2015. / Made available in DSpace on 2016-12-27T03:03:17Z (GMT). No. of bitstreams: 1 339553.pdf: 2557996 bytes, checksum: 1a96a4fa0eed946c0771e8b13f863e12 (MD5) Previous issue date: 2015 / Em função da limitação na detecção de tumores primários com agentes de contrastes (ACs) com quelatos de Gd3+, a agência Food Drug Administration liberou há dez anos o uso de nanopartículas (NPs) superparamagnéticas de Fe3O4 e ?Fe2O3, apelidadas do inglês como SPIONs e recobertas por polímeros para pesquisas e testes clínicos nos Estados Unidos e Europa como ACs para investigação de tumores malignos. Ao contrário dos compostos de Gd3+, as SPIONs são metabolizadas pelo organismo, e para que não se aglomerem ou causem embolismo as mesmas devem ser recobertas com materiais orgânicos ou inorgânicos (sílica) desde que sejam biocompatíveis e não apresentem citotoxicidade, constituindo um ferro fluído solubilizado em meio hidrofílico. De modo que o presente trabalho teve como objetivo sintetizar pelo método de cooprecipitação, caracterizar e testar in vitro SPIONs de Fe3O4 recobertas pelo biopolímero pheomelanina para aplicações em nanomedicina. As SPIONs constituindo as NPs de magnetita recobertas por pheomelanina (Fe3O4@Pheo) foram completamente caracterizadas por técnicas físico-químicas, tais como, espectroscopia de infravermelho, termogravimetria, espalhamento de luz dinâmico, espectrofotometria por fotoelétrons de raios X, microscopia eletrônica de transmissão, magnetização por amostra vibrante, análise elementar, espectrometria por absorção atômica, e difração de raios-X de pó. Os resultados comprovaram que apesar de certa limitação quanto à monodispersividade e valor de magnetizaçao das SPIONs , o método de cooprecipitação conseguiu atender às exigências para aplicações biomédicas. Uma vez que, as NPs de Fe3O4@Pheo apresentaram índice de polidispersividade abaixo do limite (PDI < 0,2), e o tamanho do core (10-13 nm) indicou que as NPs são superparamagnéticas e que as mesmas foram estabilizadas via ligação covalente entre o óxido de ferro (Fe-O) com os grupos catecolatos e tióis da pheomelanina em meio aquoso. Além disso, os resultados associados às medidas de tempo de relaxamento T1 e T2 apontaram que as NPs exibiram potencial como AC negativo T2 (elevado valor de relaxividade transversa, ou seja, r2 = 218 mM-1.s-1 em relação a r1 = 1,6 mM-1.s-1) para a investigação de câncer de mama usando imagem por ressonância magnética (IRM). E, por fim, os testes in vitro das NPs de Fe3O4@Pheo atenderam às condições de não-citotoxicidade (viabilidade celular até concentração de 100 ppm) em células MCF-7. Além disso, as características de biocompatibilidade também foram atingidas e comprovadas pelos resultados apresentados nos ensaios in vitro de uptake nessas células.<br> / Abstract : Due to the limitations associated with early tumour detection using contrast agents (CAs) based on chelates of Gd3+, around ten years ago the Food and Drug Administration (FDA), a US regulatory agency, authorized the use of superparamagnetic iron oxide nanoparticles (SPIONs) of Fe3O4 and ?Fe2O3. Subsequently, SPIONs coated with polymers have been designed and used in research and clinical studies in the United States and Europe as CAs for the detection of malignant tumours. In contrast to compounds containing Gd3+, SPIONs are metabolized by the organism, and in order to prevent embolism being caused by these nanoparticles they need to be coated with organic or inorganic materials (such as silicon) which are biocompatible and are not cytotoxic, for instance, a ferrofluid dispersed in a hydrophilic medium. In this context, the aim of this study was to synthesize, using the coprecipitation approach, characterize and test in vitro SPIONs of Fe3O4 coated with the biopolymer pheomelanin for application in nanomedicine. These SPIONs comprised of nanoparticles (NPs) with a magnetite coating of pheomelanin (Fe3O4@Pheo) were thoroughly characterized by physical-chemistry techniques including infrared spectroscopy, thermogravimetric, dynamic light scattering, X-ray photoelectron spectroscopy, transmission electronic microscopy, vibrating sample magnetization, elemental analysis, atomic absorption spectrometry and X-ray powder diffraction. Although some of the results indicated limitations (saturation magnetization and low monodispersivity) of the SPIONs of Fe3O4@Pheo prepared by the coprecipitation method, they did fulfil the requirements for biomedical applications. The polydispersivity index of the NPs of Fe3O4@Pheo did not exceed the limit (PDI < 0.2) and the core size (10-13 nm) demonstrated that the NPs are superparamagnetic and they were stabilized via covalente or electrostatic bonding between the iron oxide (Fe-O) on the surface and the cathecolate and thiol groups of the pheomelanin in aqueous medium. In addition, the results obtained for the relaxation time (T1 and T2) indicated that the NPs exhibited potential as a negative (T2) CA, that is, they showed a high value for transverse relaxivity (r2 = 218 mM-1.s-1) in comparison to the longitudinal relaxivity (r1 = 1.6 mM-1.s-1) for the detection of breast cancer using magnetic resonance imaging (MRI). Furthermore, the in vitro testing of the NPs of Fe3O4@Pheo indicated that they satisfy the requirements for non-cytotoxicity (cellular viability up to 100 ppm) toward MCF-7 cells. Appropriate biocompatibility characteristics were also verified by the results obtained from the in vitro assays carried out to determine the uptake by MCF-7 cells.

Made available in DSpace on 2014-06-11T19:32:13Z (GMT). No. of bitstreams: 0 Previous issue date: 2011-06-01Bitstream added on 2014-06-13T21:03:44Z : No. of bitstreams: 1 prando_ec_dr_botib.pdf: 1650912 bytes, checksum: 61a3213e2810a3629780bb8a28aa87c8 (MD5) / Coordenação de Aperfeiçoamento de Pessoal de Nível Superior (CAPES) / Atualmente, o silenciamento de genes supressores de tumor por mecanismos epigenéticos é reconhecido como uma característica importante das células tumorais. Estudos recentes mostraram que as alterações da metilação do DNA não estão restritas a genes discretos, mas podem afetar ilhas CpG consecutivas em algumas regiões genômicas, levando à hipótese de que mecanismos epigenéticos coordenados poderiam silenciar simultaneamente a expressão de vários genes. A perda da expressão da isoforma A do gene RASSF1, localizado em 3p21.3 (uma região cromossômica frequentemente deletada no câncer), constitui um dos principais exemplos de genes que são inativados tanto por mecanismos genéticos quanto epigenéticos no câncer, incluindo os carcinomas mamários. Este estudo teve como finalidade investigar a ocorrência de alterações epigenéticas em um agrupamento gênico em 3p21.3 contendo vários genes candidatos a supressores tumorais. Foram selecionados 10 genes contíguos (SEMA3B, HYAL3, HYAL1, HYAL2 TUSC2, RASSF1, ZMYND10, NPRL2, TMEM115 e CACNA2D2) e um painel de 17 linhagens celulares derivadas de carcinomas mamários (BT-20, BT-474, BT-483, BT-549, Hs578T, MCF7, MDA-MB-134 IV, MDA-MB-231, MDA-MB-361, MDA-MB-415, MDA-MB-436, MDAMB- 453, MDA-MB-468, SK-BR-3, T-47D, ZR-75-1 e ZR-75-30), uma linhagem epitelial derivada de doença fibrocística benigna da mama (MCF10A) e duas linhagens derivadas de epitélio mamário normal (184A1 e 184B5). Inicialmente, os níveis de expressão foram quantificados por qRT-PCR (quantitative real time Reverse Transcriptase-Polymerase Chain Reaction) após o tratamento das linhagens com as drogas 5-aza-2’-desoxicitidina (5AzadC), um agente desmetilante, e tricostatina A (TSA), um inibidor das desacetilases de histonas em... / Currently, the silencing of tumor suppressor genes by epigenetic mechanisms is recognized as an important feature of tumor cells. Recent studies have showed that aberrant DNA methylation patterns are not restricted to discrete genes, but also could affect consecutive CpG islands in some genomic regions, which suggested that epigenetically coordinated mechanisms could lead to the simultaneous silencing of cancer-related genes. The loss of expression of the isoform A of the RASSF1 gene, mapped at 3p21.3 (a chromosomal region frequently deleted in cancer), is listed among those genes inactivated by both, genetic and epigenetic mechanisms in human cancer, including breast carcinomas. The purpose of this study was to investigate the occurrence of epigenetic alterations in a gene cluster at 3p21.3 which contains several candidates to tumor suppressor genes. It was selected 10 contiguous genes (SEMA3B, HYAL3, HYAL1, HYAL2 TUSC2, RASSF1, ZMYND10A, NPRL2, TMEM115 and CACNA2D2) and a panel of 17 breast cancer cell lines (BT-20, BT-474, BT- 483, BT-549, Hs578T, MCF7, MDA-MB-134 IV, MDA-MB-231, MDA-MB-361, MDA-MB-415, MDA-MB-436, MDA-MB-453, MDA-MB-468, SK-BR-3, T-47D, ZR-75-1 and ZR-75-30), one cell line derived from benign fibrocystic disease of the breast (MCF10A) and two cell lines derived from normal mammary epithelium (184A1 and 184B5). Initially, the expression levels were quantified by qRT-PCR (quantitative real time Reverse Transcriptase-Polymerase Chain Reaction) after the treatments of the cell lines with the 5-aza-2'-deoxycytidine (5Azadc), a DNA demethylating agent and trichostatin A (TSA) a histone deacetylase inhibitor, relative to the untreated controls. The results obtained showed that RASSF1 transcripts were detected in all cell lines; however, the expression of RASSF1A isoform was detected only in the Hs578T and... (Complete abstract click electronic access below)

Made available in DSpace on 2014-06-11T19:32:50Z (GMT). No. of bitstreams: 0 Previous issue date: 2004Bitstream added on 2014-06-13T19:22:31Z : No. of bitstreams: 1 andrade_jc_dr_botfm.pdf: 2650759 bytes, checksum: 3247fedde23c0a35497a64d9285fa833 (MD5) / Universidade Estadual Paulista (UNESP) / O objetivo deste trabalho foi estudar através do exame Imunoistoquimico, a correlação entre alguns fatores Anatomopatológicos (tipo histológico e grau nuclear) e alguns fatores biológicos (receptores hormonais de estrógeno e de progesterona, proteína c-erbB-2 e proteína p53, no carcinoma de Paget da mama, doença rara e especial. No período entre Janeiro de 1980 a Dezembro de 1998 foram tratados no Instituto Brasileiro de Controle do Câncer, 6.303 casos de câncer de mama, deste total 98 casos foram diagnosticados como carcinoma de Paget, cuja incidência foi de 1,55%. Estudamos retrospectivamente 60 casos, sendo que 38 deles foram excluídos da análise, devido a limitação e escassez da amostra no material disponível, a idade das pacientes variou entre 26 e 84 anos, com média de 55,4 anos, as informações clínicas e terapêuticas foram obtidas dos prontuários das pacientes considerando, idade na época do diagnóstico, tamanho do tumor quando palpável, estadiamento clínico, e o tipo de cirurgia realizada. As amostras de tecido mamário foram recuperadas dos arquivos do Departamento de Anatomia Patológica do I.B.C.C. / MATTOSINHO. Após a revisão histológica, realizada por dois patologistas os casos foram classificados em quatro grupos: Grupo A- Doença de Paget (forma pura) n = 09 Grupo B- Doença de Paget + neoplasia ductal “in situ”, n = 12 Grupo C- Doença de Paget, neoplasia ductal invasora, n = 30 Grupo D- Doença de Paget + neoplasia ductal “in situ”+ neoplasia ductal invasora, n = 09. Entre as variáveis anatomopatológicas, o grupo C prevaleceu com 30 casos (50%). O grau nuclear (GN-II) predominou com 45 casos (75%). Em relação as variáveis biológicas o receptor de estrógeno negativo predominou com 41 casos (68,3%), seguido pelo receptor de progesterona negativo com 40 casos (66,7%), podemos dizer que... / The objective of this paper was to study the immunohistochemical efects of Paget’s disease, a rare and special carcinoma of the breast, by correlating anatomopathological (histological and nuclear grade) and biological (estrogen and progesterone hormonal receptors, c-erbB-2 protein and p53 protein) factors. Between January 1980 and December 1998, 6303 cases of breast cancer were treated at the Brazilian Institute of Cancer Control; 98 of these were diagnosed with Paget’s carcinoma, an incidence of 1.55%. We retrospectively studied 60 of these cases; 38 were excluded due to lack of available sample material. Patient age varied between 26 and 84 years (mean 55.4), clinical and therapeutic information were obtained from patient’s medical records considering age at time of diagnosis, tumor size when palpable, clinical stage, and type of surgery performed. Samples of breast tissue were retrieved the Anatomical Pathology Department, I.B.C.C. / MATTOSINHO. After histological review, by two different pathologists, they were classified into four groups: Group A- Paget’s disease (pure form) n = 09 Group B- Paget’s disease + “in situ” duct neoplasia n = 12 Group C- Paget’s disease, invasive duct neoplasia n = 30 Group D- Paget’s disease + “in situ” duct neoplasia + invasive duct neoplasia n = 09.Invasive duct neoplasia was the most prevalent anatomopathological variable (Group C, n = 30, 50%). Nuclear grade (GNII) was found in 45 cases (75%). In relation to the biological variables, the negative estrogen receptor was predominant with 41 cases (68.3%), followed by the negative progesterone receptor with 40 cases (66.7%); this correlation had good concordance by the Kappa test. The c-erbB-2 protein was positive in 53 cases (88.3%) and p53 was negative in 47 cases (78.3%). From these results, we concluded that there was no statistical... (Complete abstract click electronic address below)

Orientadora : Drª Giseli Klassen / Coorientador : Prof. Dr. Emanuel M. de Souza / Tese (doutorado) - Universidade Federal do Paraná, Setor de Ciências Biológicas, Programa de Pós-Graduação em Ciencias Biológicas (Microbiologia, Parasitologia e Patologia Básica). Defesa: Curitiba, 14/10/2016 / Inclui referências : f. 68-88 / Área de concentração: Patologia / Resumo: O câncer de mama é o tipo de câncer que mais acomete as mulheres em todo o mundo, tanto em países desenvolvidos como em países em desenvolvimento. É uma doença heterogênea, com diferenças em suas características clínicas, moleculares e biológicas. Tradicionalmente, os marcadores de imunohistoquímica em conjunto com os parâmetros clínico-patológicos são usados para classificar esse tipo de câncer e prever a evolução da doença. Dentre os subtipos moleculares de câncer de mama, os carcinomas triplo negativo (TNG) são definidos pela ausência de expressão de receptores hormonais e do gene HER2. Cerca de e 80% dos TNG apresentam o fenótipo basal, por expressar proteínas que caracterizam células mesenquimais e são denominados como o subtipo basalóide (BLBC) de câncer de mama. Os TNG são os subtipos mais agressivos de câncer de mama, com pior prognóstico, e ausência de terapia específica. Estudos anteriores do grupo de pesquisa, evidenciaram que o gene ADAM33, pode ser silenciado por hipermetilação do DNA no câncer de mama. Diversas proteínas da família ADAM já foram relacionadas ao desenvolvimento e progressão de tumores. Diante dessas observações, a expressão diferencial do gene ADAM33 motivou ao nosso grupo de pesquisa investigar se a proteína ADAM33 poderia ser utilizada como um biomarcador no câncer de mama. No presente estudo, foram produzidos anticorpos monoclonais contra a proteína ADAM33 para que esse pudesse ser utilizado em ensaios de imunohistoquímica em amostras parafinadas de câncer de mama. Para isso, após a obtenção de um hibridoma secretor e ensaios de caracterização de anticorpo monoclonal, esse foi utilizado, juntamente com um painel de marcadores moleculares (RE, PR, HER2, EGFR, CK 5/6, CK14, CK17, c-Kit e Ki- 67) em 212 amostras de tumores de mama. E pode-se comparar os escores da proteína ADAM33 com os dados clínico-patológicos das pacientes, para determinar sua importância como um marcador de prognóstico ou preditivo para o câncer de mama. A baixa expressão da proteína ADAM33 foi relacionada com TNG e BLBC, e com uma menor sobrevida global e sobrevida livre de metástases. O achado mais importante deste trabalho é que a baixa expressão de ADAM33 no câncer de mama tem um valor prognóstico independente. A diminuição da expressão dessa proteína está associada ao risco de desenvolvimento de metástases e morte. Assim, a avaliação de ADAM33 por IHQ poderia ser utilizado como um marcador de prognóstico para os subtipos TNG e BLBC. / Abstract: Breast cancer is the most common cancer in women around the world. It is a heterogeneous disease with differences in its clinical, molecular and biological features. Traditionally, immunohistochemical markers together with clinicopathologic parameters are used to classify breast cancer and to predict disease outcome. Triplenegative breast cancer (TNBC) is a particular type of breast cancer that is defined by a lack of expression of hormonal receptors and HER2 gene. About 80% of TNBC also have a basal-like phenotype (BLBC) with expression of cytokeratin 5/6 and/or EGFR, characterized by protein expression of mesenchymal cells. TNG are the most aggressive subtypes of breast cancer with worse prognosis and lack of specific therapy. In that regard, the ADAM33 gene is silenced by DNA hypermethylation in breast cancer, which suggests that ADAM33 might be useful as a molecular marker. In the present study, we have produced monoclonal antibodies against the ADAM33 protein and have investigated role of ADAM33 protein in 212 breast tumor samples breast cancer. We compare clinicopathological information and the expression of a panel of IHC markers (ER, PR, HER2, EGFR, CK 5/6, CK14, CK17, c-Kit and Ki67) with the ADAM33 protein scores to determine whether ADAM33 protein is clinically efficient as a prognostic or predictive marker for breast cancer. We compare the ADAM33 protein scores with clinicopathological data from 212 patients to determine their importance as a predictor and prognostic marker for breast cancer. The low expression of ADAM33 protein was related to TNBC and BLBC, and with a lower overall survival and metastasis-free survival. The most important finding of this study is that low ADAM33 expression in breast cancer has an independent prognostic value. Decreasing the expression of this protein is associated with risk of development of metastases and death. Thus, the evaluation of ADAM33 protein by IHC could be used as a prognostic marker for TNBC and BLBC subtypes.

Resumo: O câncer de mama é o tipo mais comum e a principal causa de morte por câncer entre as mulheres no mundo todo. As metástases contribuem com 90% das causas de morte por câncer. O estudo de novos marcadores moleculares de câncer estão em amplo e atual desenvolvimento, tanto para diagnóstico como prognóstico da doença. Diversos estudos tem mostrado o papel de eventos epigenéticos entre eles a metilação do DNA, em regiões promotoras de genes como um evento importante no processo de tumorigênese em diversos tipos de câncer. No câncer de mama já foram descritos um grande número de genes envolvidos com controle da proliferação, adesão e migração celular que podem ser silenciados por mecanismos epigenéticos. O gene CXCL12 codifica para uma quimiocina ou citocina quimiotática, que é comprovadamente silenciado por metilação de sua região promotora em câncer gástrico, de cólon intestinal e de mama. O produto deste gene esta envolvido no processo migratório como molécula ligante de células tumorais que superexpressam o receptor CXCR4 e que migram e colonizam secundariamente pulmões ossos, fígado ou linfonodos que tem altos níveis de CXCL12. Nesse trabalho estudamos detalhadamente a região promotora do gene CXCL12 que contém 5 regiões ricas em dinucleotídeos CpGs (ilhas de CpG). As ilhas de CpG 1 ,2, 3 e 5 foram amplificadas, clonadas e sequenciadas a partir de DNA de sete linhagens tumorais de mama. A ausência ou presença de metilação do DNA de cada região foi correlacionado com a presença ou ausência de expressão do gene CXCL12. A ilha de CpG 1 apresentou-se hipermetilada em linhagens que expressam CXCL12, sendo assim essa região parece não participar do processo de silenciamento desse gene nessas linhagens. A ilha de CpG 2 que contém 1346 pb foi analisada em 2 partes sendo que a parte inicial que contém o nucleotídeo +1 apresentou-se fortemente correlacionada com a expressão do gene. Somente uma linhagem imortalizada, a HB4a apresentou 53,25% de metilação global, o que poderia interferir na expressão do gene. A segunda parte da ilha 2, assim como a ilha de CpG 3 e 5 apresentaram-se hipermetiladas nas linhagens que expressam o gene, e portanto essas regiões provavelmente não interferem na expressão do gene CXCL12 nessas linhagens tumorais. Por outro lado a ilha de CpG 4 localizada a cerca de 1500 pb de distância do início de transcrição e fora da provável região promotora, apresentou-se pouco metilada nas linhagens que expressam o gene e hipermetilada nas linhagens que não expressam CXCL12. Concluímos que as regiões denominadas ilhas de CpG 1 o terço final da Ilha de CpG 2, ilha de CpG 3 e 5 estão metiladas em linhagens que expressam o gene CXCL12 e assim sendo, não são importantes no processo de regulação da expressão desse gene. A Ilha de CpG 4 é a única região diferencialmente metilada e que parece atuar de modo a sinalizar o silenciamento do gene CXCL12.

Orientador : Prof. Dr. Silvio Marques Zanata / Dissertação (mestrado) - Universidade Federal do Paraná, Setor de Ciências Biológicas, Programa de Pós-Graduação em Ciencias Biológicas (Microbiologia, Parasitologia e Patologia Básica). Defesa: Curitiba, 22/03/2011 / Inclui referências : f. 54-57 / Área de concentração / Resumo: O câncer de mama é um mal que acomete mais de 49.000 mulheres anualmente no Brasil. Na decisão terapêutica para esse tipo de tumor, é importante a definição de alguns parâmetros ligados a proteínas presentes ou não no carcinoma. Dentre essas proteínas, destaca-se o receptor ? de estrógeno (hER?). A detecção do receptor de estrógeno é feita através de imunohistoquímica e para essa técnica são usados anticorpos monoclonais anti hER?. Uma vez que o Brasil ainda é totalmente dependente da importação desse insumo, a obtenção de linhagens de hibridomas secretores desses anticorpos torna-se uma questão de soberania. No presente trabalho, foi elaborado todo o processo e ferramentas necessários para a obtenção dos hibridomas. Partindo-se do RNA total de células produtoras desse receptor, foi produzido cDNA a partir do qual o fragmento codificante para hER? foi clonado em plasmídeo para produção de proteína recombinante em sistema heterólogo em E. coli. Essa proteína foi fusionada a uma cauda de histidina que foi utilizada na sua purificação por cromatografia de afinidade a metal imobilizado. O peptídeo purificado foi utilizado como antígeno na imunização de camundongos Balb/C. Animais que apresentaram uma boa resposta imunológica frente ao antígeno de interesse foram eutanasiados e tiveram o seu baço removido para a realização dos ensaios de fusão. Os esplenócitos dissociados foram fusionados a células de linhagens de mieloma através da utilização de polietilenoglicol com o objetivo de se obter hibridomas secretores de anticorpos monoclonais de interesse. Durante o período do trabalho nenhum hibridoma estável foi obtido, no entanto foram desenvolvidas todas as ferramentas necessárias para a obtenção do insumo. Palavras-chave: hER?, receptor de estrógeno, anticorpos policlonais, anticorpos monoclonais, proteinas recombinantes. / Abstract: Breast cancer is a disease that affects more than 49,000 women annually in Brazil. To achieve a therapeutic decision for this type of tumor, it is important to define some parameters linked to proteins present or absent in the carcinoma. Among those proteins, the estrogen receptor ? (hER?) is highlighted. The detection of estrogen receptor ? is made by immunohistochemistry and, for this technique, monoclonal antibodies against hER? are used. Since Brazil is still completely dependent on imports of this material, obtaining hibridoma lines that produce those antibodies becomes an issue of sovereignty. In this study, the hole process and tools necessary to obtain those hybridomas was developed. Starting from the total RNA of cells that produce the receptor, cDNA was produced. The encoding sequence for hER? was cloned into a plasmid from which the recombinant protein was produced in heterologous system in E. coli. This protein was fused to a histidine tag that was used for its purification by Immobilized Metal Affinity Chromatography. The purified peptide was used as antigen to immunize Balb/C mice. Animals that showed a good immune response against the antigen of interest were euthanized and had their spleen removed for fusion assay. The dissociated splenocytes were fused to myeloma cell lines by using polyethyleneglycol in order to obtain hybridomas secreting monoclonal antibodies of interest. During the study, no stable hybridoma was obtained, however have been developed all the tools necessary to obtain the desired material. Key words: hER?, estrogen receptor, polyclonal antibodies, monoclonal antibodies, recombinant proteins.