Submitted by Nuzia Santos (nuzia@cpqrr.fiocruz.br) on 2015-11-20T18:51:23Z No. of bitstreams: 1 fabiana.pdf: 63742461 bytes, checksum: 0ba3064ab0df6fc4dbb19dc66da0ff61 (MD5) / Approved for entry into archive by Nuzia Santos (nuzia@cpqrr.fiocruz.br) on 2015-11-20T18:51:36Z (GMT) No. of bitstreams: 1 fabiana.pdf: 63742461 bytes, checksum: 0ba3064ab0df6fc4dbb19dc66da0ff61 (MD5) / Made available in DSpace on 2015-11-20T18:51:36Z (GMT). No. of bitstreams: 1 fabiana.pdf: 63742461 bytes, checksum: 0ba3064ab0df6fc4dbb19dc66da0ff61 (MD5) Previous issue date: 2015 / Fundação Oswaldo Cruz. Centro de Pesquisa Rene Rachou. Belo Horizonte, MG, Brasil / Este estudo foi realizado em Belo Horizonte (Minas Gerais, Brasil), área endêmica para Leishmaniose visceral (LV), onde a doença vem se expandindo rapidamente, com 1.612 casos registrados nos últimos 10 anos. Nossa pesquisa avaliou o perfil epidemiológico em duas Áreas de abrangência (AA) dos Centros de Saúde (CS) Miramar e Salgado Filho do município de Belo Horizonte, com transmissão recente de LV, buscando compreender a tríade envolvida na transmissão: parasito-vetor-reservatório. Cada AA foi dividida em três trechos, controle, borrifação e manejo, a fim de avaliar o impacto das medidas de controle no número mensal de Lutzomyia longipalpis, através da curva flebotomínica. Em todos os trechos a captura de flebotomíneos e o inquérito canino censitário foram realizados. Durante 24 meses (setembro/2010 a agosto/2012) foram capturados 5194 flebotomíneos, distribuídos em 6 espécies, sendo Lu. longipalpis, vetora da LV, a espécie predominante (96,54%). Houve uma correlação entre a precipitação pluviométrica e o número de Lu. longipalpis capturados, mostrando que o número de espécimes de flebotomíneos capturados aumentou após o período chuvoso. Através do uso da Leishmania Nested PCR e sequenciamento, foram analisados 93 “pools” espécie-específicos. Leishmania infantum e Le. braziliensis foram encontradas em 23 e em 2 dos 26 “pools” de Lu. longipalpis, respectivamente. O DNA de Le. infantum foi encontrado em um “pool” de cada uma das espécies Lu. lloydi e complexo cortelezzii. A taxa mínima de infecção natural de flebotomíneos na área foi alta, 18,8% para Lu. Longipalpis, 20% para complexo cortelezzii e 100% para Lu. lloydi. Em relação às medidas de controle, observamos uma redução estatisticamente significativa no número de flebotomíneos no trecho manejo ambiental, enquanto houve apenas uma tendência de queda no número de flebotomíneos no trecho borrifação. Em relação ao reservatório doméstico, um total de 1408 cães foram examinados em 2011 através de testes sorológicos; 3,6% apresentaram-se soropositivos para LV canina (LVC). Biópsias de linfonodo, pele, baço e aspirado de medula óssea destes animais foram obtidos e analisados através do diagnóstico parasitológico e molecular. A positividade tanto para mielocultura como para o técnica de aposição em lâmina foi de 72.5%. Todas as amostras de baço mostraram-se positivas para LnPCR, indicando a presença de Le. infantum nas 51 amostras. O linfonodo foi o tecido menos sensível na PCR (57%) em relação aos demais. Cães sintomáticos demonstraram uma tendência a ter mais testes positivos. Nossos resultados mostram que as interfaces parasito-vetor e parasitoreservatório são ativas em áreas de médio risco para transmissão de LV, e que ações eficazes e rápidas devem ser implementadas para controlar a expansão da doença. / This study was conducted in Belo Horizonte (Minas Gerais, Brazil), an endemic area for visceral leishmaniasis (VL), where the disease has been expanding rapidly, with 1,612 cases recorded in the last 10 years. Our research assessed the epidemiological profile in two coverage areas (AA) of the Miramar and Salgado Filho Health Centers (HC) in the city of Belo Horizonte, with recent transmission of VL, willing to understand the triad involved in the transmission: parasite-vector-reservoir. Each AA was divided into three sections, control, spraying and management in order to assess the impact of control measures in the monthly number of Lutzomyia longipalpis through the sand fly curve. In all the sections, the capture of sand flies and canine census survey was conducted. For 24 months (from September / 2010 to August / 2012), 5194 sandflies were captured and distributed into 6 species. Lu. longipalpis, vector of LV, was the predominant species (96.54%). There was a correlation between the precipitation and the number of Lu. longipalpis captured, showing that the number of captured sandflies of specimens increased after the rainy season. With the use of Leishmania nested PCR and sequencing, 93 species-specific "pools" were analyzed. Out of the 26 Lu. longipalpis positive “pools”, Leishmania infantum was found in 23 while Le. braziliensis was found in 2. Le. infantum DNA was found in a "pool" of each species Lu. lloydi and cortelezzii complex. The sand flies natural infection minimum rate in the area was high, 18.8% for Lu. Longipalpis, 20% for cortelezzii complex and 100% for Lu. lloydi. Regarding control measures, we observed a statistically significant reduction in the number of sand flies in the environmental management section, while there was only a decreasing trend in the sand flies number in the spraying section. Concerning the domestic reservoir, 1408 dogs were examined in 2011 by serological tests; 3.6% were positive for canine visceral leishmaniasis (CVL). Lymph node biopsies, skin, spleen and bone marrow aspirate were obtained from these animals and analyzed using parasitological and molecular diagnosis. Positivity for both mielocultura as "imprint" was 72.5%. All spleen samples were positive for LnPCR, indicating the presence of Le. infantum in 51 samples. The lymph node was the least sensitive tissue in the PCR (57%), in relation to the others. Symptomatic dogs showed a tendency to have results that are more positive on the tests. Our results show that the vector-parasite and parasite reservoir interfaces are active in areas of medium risk of VL transmission, and rapid and effective actions must be implemented to control the spread of the disease.

Orientador: Sílvia Helena Venturoli Perri / Resumo: A criptosporidiose e a giardíase são doenças gastrointestinais, com distribuição cosmopolita, causada, respectivamente, por um protozoário coccídio intracelular obrigatório e um parasito flagelado, que pode afetar humanos e animais. O objetivo neste projeto foi detectar por meio da técnica TF-Test Coccidia e pela reação em cadeia da polimerase (RCP), a ocorrência do Cryptosporidium spp. e a Giardia spp. em crianças de pré-escola e seus respectivos cães (Canis familiaris) do Município de Araçatuba, São Paulo, de maneira inédita. Para a identificação dos oocistos do parasito supramencionado foi empregada a nova técnica parasitológica TF-Test Coccidia e RCP. A partir da análise destas amostras, verificou-se que 35,00% (35/100) das crianças estavam infectadas por alguma espécie de parasito intestinal, sendo que 5,00% eram positivas microscopicamente para Cryptosporidium spp. e 30,00% para Giardia spp. Nos cães, 3,13% (1/32) foram considerados positivos para Giardia spp., embora nenhum animal apresentasse oocisto de Cryptosporidium spp. nas fezes. Pela PCR 3,00% das crianças foram positivas para Cryptosporidium spp. e 35,00% para Giardia spp.. Enquanto que para os cães, pela mesma técnica molecular, nenhum animal foi considerado positivo para Cryptosporidium spp. e apenas 6,25% foram positivos para Giardia spp.. Dessa forma, foi verificado que a técnica parasitológica TF-Test Coccidia apresentou boa concentração e morfologia dos parasitos encontrados, com baixa quantidade de debri... (Resumo completo, clicar acesso eletrônico abaixo) / Abstract: Cryptosporidiosis and giardiasis are gastrointestinal diseases with cosmopolitan distribution, caused respectively by a compulsory intracellular coccidial protozoan and a flagellated parasite, which can affect humans and animals. The objective of this project was to detect by the technique TF-Test Coccidia and polymerase chain reaction (PCR), the occurrence of Cryptosporidium spp. and Giardia spp. in pre-school children and their respective dogs (Canis familiaris) from the Municipality of Araçatuba, São Paulo. For the identification of oocysts of the parasite the new parasitological technique TF-Test Coccidia and PCR were used. From the analysis of these samples, it was verified that 35.00% (35/100) of the children were infected by some kind of intestinal parasite, and 5.00% were microscopically positive for Cryptosporidium spp. and 30,00% for Giardia spp.. In dogs, 3.13% (1/32) were considered positive for Giardia spp., although no animal presented Cryptosporidium spp. Oocyst. in the stool. By PCR 3.00% of the children were positive for Cryptosporidium spp. and 35.00% for Giardia spp.. While for dogs, by the same molecular technique, no animals were considered positive for Cryptosporidium spp. and only 6.25% were positive for Giardia spp.. Thus, was verified that the parasitological technique TF-Test Coccidia presented good concentration and morphology of the parasites found, with a low amount of debris in the fecal smear. For the first time, Cryptosporidium spp. and Giardia... (Complete abstract click electronic access below) / Doutor

Este trabalho apresenta a distribuição espacial da esquistossomose por meio das geotecnologias, visando melhor caracterizar a distribuição da prevalência da doença e de seus hospedeiros intermediários. O estudo foi realizado nos municípios de Guaranésia e Arceburgo MG, situados no Sul/Sudoeste do Estado de Minas Gerais. Está área é considerada não endêmica para esquistossomose, mas merece atenção pela presença dos hospedeiros intermediários e por importar mão de obra de trabalhadores de áreas endêmicas, o que resulta em risco para estabelecimento de focos de transmissão. Os procedimentos consistiram principalmente da execução de três etapas: i) realização de diagnósticos em trabalhadores, ii) campanhas de campo em busca de caramujos e iii) análise espacial a partir de dados de geotecnologias. Foram realizados 480 exames nos trabalhadores rurais utilizando-se 2 métodos para o diagnostico; Kato-Katz e Lutz/HPJ. A campanha de campo em busca de caramujos procurou abranger os principais pontos na área estudo. Para realização da análise espacial, foram utilizadas imagens Landsat-5/TM de 27/03/2011 e modelos digitais de elevação (MDEs) proveniente da Shuttle Radar Topography Mission (SRTM). As imagens foram obtidas do catálogo de imagem do Instituto Nacional de Pesquisas Espaciais (INPE), e da Universidade de Maryland. O MDE foi obtido do catálogo da National Aeronautics and Space Administration (NASA). Com o modelo digital de elevação foi confeccionado o mapa hipsométrico a fim de caracterizar topograficamente a área de estudo. A elaboração do mapa de drenagem e demais recursos hídricos foi obtido com a vetorização desses elementos tendo como base o MDE e as imagens Landsat. Também foi realizada a elaboração do mapa de uso e ocupação do solo. Os locais onde foram encontrados caramujos e pessoas infectadas foram plotados espacialmente no mapa e foi utilizado o estimador de intensidade kernel. Na campanha de campo foram encontrados 7 focos do vetor B.tenagophila em Arceburgo, totalizando 752 caramujos. Não foi encontrado nenhum molusco infectado. O coeficiente geral de prevalência de enteroparasitos para Arceburgo e Guaranésia foi de aproximadamente 13,5 %, de um total de 480 pessoas, sendo 4,4 % somente para S. mansoni. Através da análise espacial foi possível identificar quatro “áreas quentes” de concentração de caramujos no município de Arceburgo: 3 na zona rural e uma na zona urbana do município, onde foi encontrada a maioria dos caramujos B. tenagophila. Com relação aos casos humanos, observou-se uma área concentrando todos os casos na zona rural de Guaranésia. Os resultados indicam uma tendência espacial para o risco de transmissão da esquistossomose na área de estudo. / This paper presents the spatial distribution of Schistosomiasis through geotechnology aiming to better characterize the distribution of the prevalence of the disease and its intermediate hosts. The study was conducted in the municipalities of Guaranésia and Arceburgo MG, located in the South/Southwest of Minas Gerais. This area is not considered endemic for schistosomiasis, but it deserves attention by the presence of intermediate hosts and to import labor from workers in endemic areas, resulting in risk to establish foci of transmission. The procedures mainly consisted of running three stages: i ) diagnostic for workers , ii ) field campaigns in search of snails and iii ) spatial analysis from data geotechnology. 480 examinations were conducted in farm workers using 2 methods for diagnosis; Kato - Katz and Lutz / HPJ. The field campaign in search of snails sought to cover the main points in the study area. To perform spatial analysis, images were used Landsat-5/TM of 27/03/2011 and digital elevation models (DEMs) from the Shuttle Radar Topography Mission (SRTM). The images were obtained from the image catalog of the National Institute for Space Research (INPE), and the University of Maryland. The DEM was obtained from the catalog of the National Aeronautics and Space Administration (NASA). With the digital elevation model was made the topographic map for characterize topographically the study area. The preparation of the map of drainage and other water resources was obtained through vectorization of these elements based on the DEM and Landsat images. We also carried out the preparation of the statement of use and occupation of land. The locations where they were found and infected snails were plotted spatially on the map and we used the kernel intensity estimator. In the field campaign 7 places with B. tenagophila were found in Arceburgo, totaling 752 snails. No infected snails were found. The overall prevalence of enteroparasites in Arceburgo and Guaranésia was approximately 13.5% for a total of 480 tests and only 4.4% for S. mansoni. The spatial analysis was possible to identify four "hot spots" of snails in the municipality of Arceburgo: 3 in the rurall area and 1 in the urban area, where the most snails B. tenagophila. With respect to human cases, it was observed one area concentrating all the cases in rural Guaranésia. Results indicate a spatial trend in the risk of transmission of Schistosomiasis in the study area. / Coordenação de Aperfeiçoamento de Pessoal de Nível Superior - CAPES

A Tripanossomíase Americana ou doença de Chagas representa uma doença tropical negligenciada causada pelo parasito protozoário Trypanosoma cruzi. A doença de Chagas representa a principal causa de cardiomiopatia não isquêmica em todo o mundo. Embora a quimioterapia com benznidazol seja indicada como referência no tratamento etiológico da doença, após o parasito se instalar em múltiplos órgãos do hospedeiro vertebrado, a cura geralmente não é alcançada. Assim, novas drogas e esquemas terapêuticos têm sido testados na busca por estratégias mais eficientes e toleráveis no tratamento da doença. Devido a sua atividade anti-inflamatória, antioxidante e imunomoduladora, a currumina tem mostrado efeitos promissores no tratamento de doenças parasitárias como malária, leishmaniose e esquistossomose. Entretanto a aplicabilidade da curcumina no manejo terapêutico da doença de Chagas ainda é pouco conhecida. Dessa forma, o presente estudo foi delineado para investigar a influência do tratamento com benznidazol e curcumina sobre o parasitismo sanguíneo e cardíaco, resposta inflamatória, dano oxidativo e remodelamento morfológico do miocárdio em camundongos infectados por T. cruzi. Oitenta e quatro camundongos suiços fêmeas com oito semanas de vida foram igualmente divididos em sete grupos: G1, não infectados; G2 , infectados; G3, infectados + benznidazol (100 mg/kg); G4, infectados + benznidazol (50 mg/kg); G5, infectados + curcumina (100 mg/kg); G6, infectados + benznidazol (100 mg/kg) + curcumina (100 mg/kg); G7, infectados + benznidazol (50 mg/kg) + curcumina (100 mg/kg). Os animais infectados foram inoculados intraperitonealmente com 2000 formas tripomastigotas da cepa Y de T. cruzi. O benznidazol e a curcumina foram oralmente administrados uma vez a dia, durante 20 dias, por meio de gavagem. Os resultados indicaram que a curcumina apresentou efeitos antiparasitários limitados, mas que quando combinada ao benznidazol, essa molécula potencializou a ação terapêutica da quimioterapia de referência. Aparentemente, esse efeito foi mediado por uma maior redução da parasitemia, carga parasitária, processo inflamatório e dano oxidativo cardíaco, bem como bloqueio da reativação da infecção após o término do tratamento. Além de aumentar a sobrevivência e taxa de cura em camundongos infectados, o tratamento combinado também atenuou a toxicidade hepática induzida pelo benznidazol, impedindo a reativação da infecção mesmo quando os animais foram tratados com a metade da dose terapêutica recomenda para o benznidazol. / The American trypanosomiasis or Chagas disease is a neglected tropical disease caused by protozoan parasite Trypanosoma cruzi. Chagas' disease is the leading cause of non-ischemic cardiomyopathy worldwide. Although chemotherapy with benznidazol is recommended as a reference in the etiological treatment of the disease, after the parasite settling in multiple organs of the vertebrate host, healing is usually not achieved. Thus, new drugs and therapeutic schedules have been tested in the search for more tolerable and effective strategies for the treatment of disease. Due to its anti-inflammatory activity, antioxidant and immunomodulatory, the currumina has shown promising effects on the treatment of parasitic diseases such as malaria, leishmaniasis and schistosomiasis. However, the applicability of curcumin in the therapeutic management of Chagas disease is still unknown. Thus, the present study was designed to investigate the influence of treatment with benznidazol and curcumin on blood and cardiac parasitism, inflammatory response, oxidative damage and morphological myocardial remodeling in mice infected with T. cruzi. Eighty-four Swiss female mice eight weeks of life were equally divided into seven groups: G1, uninfected; G2, infected; G3 infected benznidazol + (100 mg / kg); G4 infected benznidazol + (50 mg / kg); G5, infected + curcumin (100mg / kg); G6 infected benznidazol + (100 mg / kg) + curcumin (100mg / kg); G7 infected benznidazol + (50 mg / kg) + curcumin (100mg / kg). The infected animals were inoculated intraperitoneally with 2000 trypomastigotes of T. cruzi Y strain. The benznidazol and curcumin were administered orally once daily for 20 days by gavage. The results showed that curcumin had limited antiparasitic effects, but when combined with benznidazol, this molecule enhanced the therapeutic action of the reference chemotherapy. Apparently, this effect was mediated by a greater reduction in parasitemia, parasite load, inflammation and cardiac oxidative damage and block the reactivation of the infection after completion of treatment. In addition to increasing the survival and cure rate in infected mice, the combined treatment also attenuated hepatic toxicity induced by benznidazol, preventing reactivation of infection even when the animals were treated with half the therapeutic dose recommended for benznidazol.

Orientador: Regina Maria Barretto Cicarelli / Banca: Marcia Graminha / Banca: Alberto José Cavalheiro / Resumo: Trypanosoma brucei é o agente etiológico da tripanossomíase africana ou doença do sono, transmitida por dípteros do gênero Glossina, conhecidos como moscas tsé-tsé. O diagnóstico e tratamento da doença não são satisfatórios, uma vez que para o tratamento está disponível um número de drogas altamente tóxicas e com um efeito limitado, pois dependem da fase da doença, das condições fisiológicas do hospedeiro, da suscetibilidade e variabilidade genética da cepa. Além do alto custo, o tratamento é potencialmente perigoso e está limitado ao surgimento de resistência generalizada aos fármacos utilizados. O diagnóstico é limitado à associação dos sintomas com a doença, muitas vezes é confundido com outras doenças pelo que o paciente não recebe o tratamento adequado. Por isso, tem-se a necessidade de buscar novos fármacos com melhor atividade tripanocida. Neste trabalho, avaliou-se a atividade tripanocida de 38 compostos diferentes e inéditos, como N1,N2-dibenziletano-1,2-diamina (cloridratos de benzil diaminas), N1-benzil,N2-metilferroceniletano-1,2-diamina (cloridratos de diaminas de ferroceno), 2-metoxi/hidroxi-3-(1-alquenil)-1,4-naftoquinonas e seus derivados 2-amina-1,4-naftoquinonas contra as cepas 427 e 29-13 de T. brucei. A eficácia dos compostos foi avaliada pelo método colorimétrico do MTT [brometo de 3-(4,5-dimetiltiazol-2-il)-2,5-difeniltetrazoliom]. Os resultados encontrados foram similares aos das atividades metabólicas das células (parasitas e/ou células HepG2 - linhagem de células de hepatoma, usada como modelo para simular funções hepáticas humanas in vitro), sendo o IC50 (metade da concentração inibitória máxima) calculado por regressão linear para cada composto. Da série anterior, o composto cloridrato de... (Resumo completo, clicar acesso eletrônico abaixo) / Abstract: Trypanosoma brucei is the etiologic agent of sleeping sickness (Human African Trypanosomiasis [HAT]), transmitted by flies of Glossina genus, known as tsetse flies. The diagnostic and treatment of this disease are not satisfactory, since the treatment uses many toxicity drugs with limited effects, because depend on the stage of the disease, morphological diversity, heterogeneous biological behaviour, different clinical courses and the virulence appears to be an intrinsic property of each strain and high genetic variability. Besides the high cost, the treatment is potentially dangerous and limited the emergence of widespread drug resistance. The diagnosis is limited to the association of symptoms with the disease, is often confused with other diseases so the patient does not receive adequate treatment. Thus, the development of new research is necessary in order to generate new drugs with trypanocidal activity. In this work, we evaluated the trypanocidal activity of 38 inedited compounds of N1,N2-dibenzylethane-1,2-diamine hydrochlorides, N1-benzyl,N2-methyferrocenylethane-1,2-diamine hydrochlorides, 2-metoxy/hydroxy-3-(1-alquenyl)-1,4-naphtoquinones and amine derivatives of this compounds (2-amine-1,4-naphtoquinones) against 427 and 29-13 T. brucei parasite strains. The efficacy of these compounds was also measured using the reduction of MTT [3-(4,5-dimethylthiazol-2-yl)-2,5-diphenyltetrazolium bromide]. The results were similar to the metabolic activity of cells (parasites and/or HepG2 - hepatoma cell line used as a model to simulate human hepatic functions in vitro), being the IC50 (half of the maximum inhibitory concentration) calculated by linear regression for each sample. The compounds N-(ferrocenylmetyl)-N'-(4-metoxybenzyl)ethane-1,2-diamine) hydrochlorides and 2-metoxy-3-(2-phenylethenyl)-1,4-naphtoquinone... (Complete abstract click electronic access below) / Mestre

Submitted by Caroline Xavier (caroline.xavier@pucrs.br) on 2017-03-20T14:23:49Z No. of bitstreams: 1 DIS_CATIELI_GOBETTI_LINDHOLZ_COMPLETO.pdf: 610881 bytes, checksum: 802c9e980339f9212a7fbe652acc4378 (MD5) / Made available in DSpace on 2017-03-20T14:23:49Z (GMT). No. of bitstreams: 1 DIS_CATIELI_GOBETTI_LINDHOLZ_COMPLETO.pdf: 610881 bytes, checksum: 802c9e980339f9212a7fbe652acc4378 (MD5) Previous issue date: 2015-03-27 / The Leishmaniasis is a complex of diseases caused by protozoa of the genus Leishmania spp., observed in the promastigote forms (flagellated, extracellular) in invertebrate hosts, and amastigote forms (no scourge, intracellular required) in vertebrates. Nowadays, these diseases are distributed in 88 countries in the Americas, Africa, India, Asia and the Mediterranean. According to the World Health Organization, 500.000 and 1.5 million new cases, respectively of Visceral Leishmaniasis and Cutaneous Leishmaniasis occur annually, and considered one of the infectious and parasitic diseases of major global impact. Transmitted at the moment the blood feeding by the female sandflies (Diptera: Psychodidae), Leishmaniasis is the shown to expand in all regions of Brazil, placing the country among the five most affected in the world. In Brazil, many studies have been carried out to elucidate the species responsible for the transmission of Leishmania spp., and consequently, prescribe important areas of to public health. However, these approaches are uncommon in the Rio Grande do Sul state. This study aimed to investigate the sandfly species occurring in a rural area in Itapu? district, city of Viam?o, metropolitan region of Porto Alegre, and verify the presence of DNA of Leishmania spp. in captured females. The collections were carried out with CDC light traps in intradomicile, peridomicile and forest remnants to verify possible population or species differences among the sites. The captures occurred for three consecutive nights, from May 2013 to April 2014. The sandflies were identified and females were grouped in pools of five animals each, according to the species. A total of 516 phlebotomines were captured, pertaining belonging to the Lutzomyia neivai (37.2%), Lutzomyia migonei (34.5%), Lutzomyia fischeri (21.7%), and Lutzomyia lanei (6.5%). For DNA extraction, 245 females were used. Fragments of 120 bp of conserved region of Leishmania kinetoplast were amplified from samples of Lutzomyia neivai, L. fischeri and L. migonei. / As Leishmanioses s?o um complexo de doen?as causadas por protozo?rios do g?nero Leishmania spp., observados nas formas promastigota (flagelada, extracelular) nos hospedeiros invertebrados, e forma amastigota (aus?ncia de flagelo, intracelular obrigat?rio) nos vertebrados. Atualmente, estas doen?as encontram-se distribu?das em 88 pa?ses nas Am?ricas, ?frica, ?ndia, ?sia e Mediterr?neo. Segundo a Organiza??o Mundial da Sa?de (OMS), estima-se que 500 mil novos casos de Leishmaniose Visceral (LV) e 1,5 milh?es de novos casos de Leishmaniose Tegumentar Americana (LTA) ocorram anualmente, sendo considerada uma das doen?as infecto-parasit?rias de maior incid?ncia mundial. Transmitidas no momento do repasto sangu?neo pelas f?meas de flebotom?neos (Diptera: Psychodidae), as Leishmanioses se mostram em expans?o em todas as regi?es brasileiras, colocando o pa?s entre os cinco mais afetados no mundo. No Brasil, muitas pesquisas t?m sido desenvolvidas no intuito de esclarecer as esp?cies respons?veis pela transmiss?o de Leishmania spp., e consequentemente, apontar ?reas de import?ncia ? sa?de p?blica. A LTA chegou a capital do RS em 2002 e ainda s?o escassos os estudos de esp?cies transmissoras neste Estado. Este estudo teve como objetivo investigar as esp?cies de flebotom?neos ocorrentes em uma localidade rural no distrito de Itapu?, munic?pio de Viam?o, regi?o metropolitana de Porto Alegre, e verificar, a presen?a de DNA de Leishmania spp. nas f?meas capturadas. As capturas foram realizadas com armadilhas luminosas tipo CDC (Center for Diseases Control) em ambiente intradomiciliar, peridomiciliar e mata, a fim de verificar poss?veis diferen?as populacionais e/ou espec?ficas entre os locais. As capturas ocorreram durante tr?s noites consecutivas, no per?odo de Maio de 2013 a Abril de 2014. Os flebotom?neos coletados foram identificados taxonomicamente e as f?meas foram agrupadas em pools de cinco indiv?duos cada, de acordo com esp?cie. Um total de 516 flebotom?neos foi capturado, pertencentes ?s esp?cies Lutzomyia neivai (37,2%), Lutzomyia migonei (34,5%), Lutzomyia fischeri (21,7%), e Lutzomyia lanei (6,5%). Para extra??o de DNA foram utilizadas 245 f?meas. Foram amplificados fragmentos de 120 pares de bases referentes ? regi?o conservada do kDNA de Leishmania em amostras de Lutzomyia neivai, Lutzomyia fischeri e Lutzomyia migonei.

Made available in DSpace on 2013-08-07T18:41:56Z (GMT). No. of bitstreams: 1 000432505-Texto+Completo-0.pdf: 1390397 bytes, checksum: 39fab4614d11925a0667ad6e40789290 (MD5) Previous issue date: 2011 / Classical parasitological methods are not sensitive enough to detect most of the infected individuals in low intensity transmission areas like in Esteio, Rio Grande do Sul. To optimize methods for detection of eggs in feces, when they are rare events, the estrategy was to examine large amounts of feces. A novel diagnostic method for isolation of Schistosoma mansoni eggs in feces, and an initial evaluation of its performance is now reported Helmintex. Is a concentration method with sequential steps of spontaneous sedimentation, sieving, ether-acetate centrifugation method (Ritchie) and a final step where eggs are isolated through interaction with paramagnetic beads in a magnetic field, and the sediments retained at the wall are collected and examined under a microscope. The objective of the second part of the investigation was to evaluate TaqMan Real Time PCR as an alternative for microscopic analysis as the detection procedure for final sediment resulting from Helmintex. To evaluate the new concentration method, S. mansoni eggs were added to 30 grams of normal feces to produce suspensions ranging from 0. 1 to 1. 34 eggs per gram of feces (epg) and the feces were submitted to all steps of concentration method. All the sediment was analysed by light microscopy and at least 1 egg was found in 20% (0. 1 epg); 50% (0. 24); 50% (0. 34); 60% (0. 67); 80% (1. 0) and 100% (1. 34) of the seeding experiments. For evaluation of the TaqMan Real Time PCR as an alternative for detection of eggs in feces after the concentration Helmintex method, primers and probe targeting the cytocromo-C oxidase subunit 1 gene were designed for amplification S. mansoni specific DNA. Four procedures for DNA extraction were evaluated. Suspensions in distilled water and feces were prepared containing 1, 10, 20, 40 and 80 eggs. S. mansoni DNA was extracted from 1000 eggs for determination of a standard curve to estimate the DNA concentration and determine the limits of the detection. DNA was amplified from all the spiked egg suspensions, including the samples with only 1 egg. Illustra Tissue and Cell GenomicPrep Mini Spin Kit (GE Healthcare) presented the best extraction performance. The standard curve for DNA concentration from 1000 eggs had a detection limit at 1 pg but with 13. 8 % of the reproductibility and 100 pg at 100 % of reproductibility. The novel S. mansoni detection method, named Helmintex may significantly improve diagnosis of infections with low intensity of infection, with two alternatives for the detection step: microscopic analysis and Real Time PCR Improved diagnostic methods are a main stem in the current worldwide efforts to reduce morbidity of schistosomiasis and its dissemination. / Em focos de introdução recente da esquistossomíse, como Esteio na região metropolitana de Porto Alegre, a parasitose ocorre com baixas prevalências e cargas parasitárias, resultando em dificuldades para o diagnóstico parasitológico, em virtude da sensibilidade inadequada dos métodos clássicos. O principal objetivo deste trabalho foi otimizar o desempenho de métodos de diagnóstico, em situações que os ovos nas fezes são um evento raro. A estratégia foi examinar grandes quantidades de fezes, o que resultou na descrição e avaliação de um novo método de diagnóstico para detecção de ovos de Schistosoma mansoni nas fezes denominado Helmintex. Este é um método de concentração, onde as fezes passam por uma sequência de sedimentação espontânea, tamisagem, centrifugação com acetato de etila (Ritchie) e uma etapa final onde os ovos são isolados através de interação com partículas paramagnéticas em um campo magnético. Após a concentração, na etapa de detecção dos ovos todo o sedimento resultante é analisado através de microscopia óptica. Na segunda etapa deste trabalho o objetivo foi avaliar o desempenho da PCR em tempo real (tecnologia Taqman) como alternativa de método de detecção no sedimento final do Helmintex, substituindo a análise microscópica. Para realização da primeira etapa, ovos de S. mansoni foram adicionados em 30 g de fezes negativas para a infecção, formando suspensões de 0,1 a 1,34 ovos por grama de fezes (opg), e as fezes foram submetidas a todas as etapas de concentração do método. Para cada suspensão testada foi encontrado pelo menos 1 ovo em 20% (0. 1 opg); 50% (0. 24); 50% (0. 34); 60% (0. 67); 80% (1. 0) e 100% (1. 34) das tentativas testadas para cada suspensão. Para a avaliação do desempenho da PCR,"primers" e sonda para o gene da citocromo-C oxidase subunidade 1 foram desenhados para a amplificação do DNA de S. mansoni. Para a extração do DNA foram avaliados 4 protocolos diferentes. Foram preparadas suspensões de ovos em água destilada e fezes, contendo 1, 10, 20, 40 e 80 ovos. E amostras de 1000 ovos foram extraídas para a construção de uma curva padrão da estimativa de concentração de DNA, para verificação do limite de detecção da reação. A amplificação do DNA do parasito pode ser vista em todas as suspensões testadas, inclusive a que continha 1 ovo. Dos 4 protocolos de extração avaliados, o Illustra Tissue and Cell GenomicPrep Mini Spin Kit (GE Healthcare), um kit de extração comercial, foi o que apresentou o melhor rendimento. A curva padrão construída a partir de 1000 ovos apresentou um limite de detecção de 1 pg com reprodutibilidade de 13,8%. Considerando 100% de reprodutibilidade, a reação apresentou limite de detecção de 100 pg. O novo método Helmintex descrito neste trabalho representa grande avanço no diagnóstico da esquistossomíse em infecções com baixas cargas parasitárias, além disso, apresentam-se 2 opções de métodos de detecção (visualização microscópica e amplificação de DNA dos ovos pela PCR em tempo real). Estes avanços contribuem para o esforço em curso de reduzir mundialmente a morbidade e a disseminação das áreas de transmissão das esquistossomíases.

Made available in DSpace on 2014-06-11T19:32:52Z (GMT). No. of bitstreams: 0 Previous issue date: 2009-11-16Bitstream added on 2014-06-13T19:22:39Z : No. of bitstreams: 1 pedrassani_d_dr_jabo.pdf: 2839127 bytes, checksum: e29898c79545e32be78e2f67b76b1d9d (MD5) / Universidade do Contestado-Campus Canoinhas

Tese (doutorado)—Universidade de Brasília, Faculdade de Medicina, Programa de Pós-Graduação em Medicina Tropical, 2016. / Texto liberado parcialmente pelo autor. Conteúdo liberado: resumo/abstract. / Submitted by Fernanda Percia França (fernandafranca@bce.unb.br) on 2016-05-18T18:45:40Z No. of bitstreams: 1 2016_ThaísTâmaraCastroeSouzaMinuzzi_Parcial.pdf: 3601274 bytes, checksum: 9befef0356375dfb586a6c49fc449ac1 (MD5) / Approved for entry into archive by Patrícia Nunes da Silva(patricia@bce.unb.br) on 2016-05-27T12:35:48Z (GMT) No. of bitstreams: 1 2016_ThaísTâmaraCastroeSouzaMinuzzi_Parcial.pdf: 3601274 bytes, checksum: 9befef0356375dfb586a6c49fc449ac1 (MD5) / Made available in DSpace on 2016-05-27T12:35:48Z (GMT). No. of bitstreams: 1 2016_ThaísTâmaraCastroeSouzaMinuzzi_Parcial.pdf: 3601274 bytes, checksum: 9befef0356375dfb586a6c49fc449ac1 (MD5) / O conhecimento atualizado da distribuição e infecção natural de triatomíneos sinantrópicos é fundamental para vigilância e controle da doença de Chagas. No Brasil, a detecção de Trypanosoma cruzi em triatomíneos é realizada por microscopia óptica (MO) do conteúdo intestinal, que pode apresentar diversas limitações quanto à sua sensibilidade e especificidade. Objetivos: Analisar a ocorrência de triatomíneos e suas taxas de infecção natural por T. cruzi e outros tripanossomatídeos no estado de Goiás (GO) e Distrito Federal (DF), estimar a sensibilidade da MO para detecção de T. cruzi em triatomíneos e analisar a transmissão de T. cruzi em ambientes onde colônias de triatomíneos infectados forem detectadas. Métodos: Os espécimes (adultos e ninfas) capturados no intra e peridomicílio e resultados dos exames parasitológicos a fresco e lâminas coradas foram obtidos por meio do LACEN/SES/GO e DIVAL/DF. O DNA foi extraído de amostras do intestino para realização das PCRs (cPCR e qPCR) utilizando quatro marcadores moleculares (TCZ, kDNA, rDNA 18S e rDNA24sα). Também, foi avaliada a infecção por T. cruzi em colônia de P. megistus (nestedcPCR) e em amostras sanguíneas provenientes de primatas neotropicais não-humanos (nestedqPCR) encontrados no Zoológico de Brasília (ZooB). Resultados: Foram analisados 2715 triatomíneos provenientes de 12/30 regiões administrativas do DF e 95/246 municípios de GO. Houve predomínio de T. sordida em GO e no DF P. megistus foi mais frequente, com taxas de infecção por flagelados similares a T. cruzi de 4,6% e 1,6%, respectivamente. A MO revelou 144/841 triatomíneos positivos para tripanossomatídeos, resultando em uma taxa de infecção de 17,1%. A qPCR, específica para T. cruzi, revelou 347 positivos (41,2%). A sensibilidade da MO para T. cruzi, tendo como referência a TCZ qPCR, foi estimada em 23,6% e a da rDNA24sα cPCR foi estimada em 58,5%. Blastocrithidiatriatomae e T. rangeli foram detectadas nos triatomíneos assim como infecções mistas por T. cruzi e B. triatomae. As taxas de infecção por T. cruzi nas espécies de triatomíneos variaram de 19 a 67% sendo maiores para T. pseudomaculata e em triatomíneos vivos e frescos. O sequenciamento revelou TcI em P. megistus e T. sordida e TcII em P. megistus e T. pseudomaculata. No ZooBT. cruzi foi encontrado em P. megistus (44/50) e em primatas (17/26) de seis gêneros e oito espécies, sendo que um Mico chrysoleucus e um Saguinusniger apresentaram alta parasitemia. Discussão e Conclusão:Os resultados mostram uma baixa sensibilidade da MO para a detecção de tripanosomatídeos em triatomíneos e infecções por pelo menos três espécies de tripanossomatídeos, o que reforça a necessidade de métodos de alta especificidade para o desenvolvimento de estratégias de vigilância adequadas dos vetores da doença de Chagas. O método de TCZ qPCR pode ser considerado um padrão referência para detecção de T. cruziem triatomíneos. ________________________________________________________________________________________________ ABSTRACT / The current knowledge of the distribution and natural infection of synanthropictriatomines is essential for surveillance and control of Chagas disease. In Brazil, optical microscopy (OM) has been used to detect Trypanosoma cruzi in triatomines, but this technique can present several limitations in terms of sensitivity and specificity. Objectives: Analyze the occurrence of triatomines and their natural infection rates for Trypanosoma cruzi in state of Goiás (GO) and the Federal District (DF),estimate the sensitivity of OM to detect T. cruzi in triatomines, and analyze T. cruzi transmission foci in environments where infected triatomine colonies were detected. Methods: The specimens (adults and nymphs) captured in the intra and peridomicile and results of parasitological fresh and stained slides were obtained from LACEN/SES/GO and DIVAL/DF. DNA was extracted from the intestine samples for the PCRs (cPCR and qPCR) using four molecular markers (TCZ, kDNA, 18S and rDNA24sα). Also, T. cruzi infections were assessed in a Panstrongylusmegistuscolony and from blood samples of nonhuman primates found in the Brasilia Zoo (ZooB). Results:2715 triatomines were analyzed from 12/30 administrative regions of the DF and 95/246 municipalities of GO. In GO, T. sordida predominate while in the DF P. megistus was more frequent, with infection rates by flagellates similar to T. cruzi of 4.6% and 1.6%, respectively. OM revealed 144/841 trypanosomatid-positive triatomines, resulting in a 17.1% infection rate. The T. cruzi TCZ qPCR, showed 347 positive (41.2%). The sensitivity of T. cruzi-OM with reference to TCZ qPCR was estimated at 23.6% and rDNA24sα cPCR was estimated at 58.5%. Triatomines were infected by Blastocrithidiatriatomae and T. rangeli. However, mixed infections with T. cruzi and B. triatomae were found. Infection rates by T. cruzi in triatomine species ranged 19-67% and were higher for T. pseudomaculata and alive and fresh triatomines. The sequencing of some samples confirmed the identification of B. triatomae and revealed TcI in P. megistus and T. sordida, and TcII in P. megistus and T. pseudomaculata. In ZooB, T. cruzi was found in 44/50 P. megistus and 17/26 primates (six genera and eight species); one Micochrysoleucus and one Saguinusniger showed high parasitaemia. Discussion and Conclusion: The results show a low sensitivity of OM for trypanosomatids detection in triatomines and infections for at least three trypanosomatid species, which reinforces the need for highly specific methods for the development of appropriate surveillance strategies of the vectors of Chagas disease. It also suggests that the TCZ qPCR method could be considered as a reference standard for detection of T. cruziin triatomines.

Tese (doutorado)—Universidade de Brasília, Faculdade de Medicina, 2007. / Submitted by Diogo Trindade Fóis (diogo_fois@hotmail.com) on 2009-09-03T16:01:21Z No. of bitstreams: 1 Tese Doutorado Marcus.pdf: 4994142 bytes, checksum: b25f311dc2b967f1d606e9486703e4e4 (MD5) / Approved for entry into archive by Tania Milca Carvalho Malheiros(tania@bce.unb.br) on 2009-09-04T12:49:04Z (GMT) No. of bitstreams: 1 Tese Doutorado Marcus.pdf: 4994142 bytes, checksum: b25f311dc2b967f1d606e9486703e4e4 (MD5) / Made available in DSpace on 2009-09-04T12:49:04Z (GMT). No. of bitstreams: 1 Tese Doutorado Marcus.pdf: 4994142 bytes, checksum: b25f311dc2b967f1d606e9486703e4e4 (MD5) Previous issue date: 2007-03-08 / A plaquetopenia é uma reconhecida complicação hematológica da infecção malárica, porém, sua patogênese ainda é incerta. Os objetivos deste trabalho foram estimar a freqüência e as manifestações clínicas da plaquetopenia na malária, e avaliar o papel dos imunocomplexos circulantes (ICC) e da agregação plaquetária in vitro. O estudo foi realizado em Manaus (Amazonas), entre 2004 e 2006, com seleção aleatória de pacientes com diagnóstico microscópico e molecular de malária vivax (n=142) e malária falciparum (n=26), após exclusão de pacientes com outras doenças. Foram analisadas as características dos pacientes, além da parasitemia, hemograma, exames bioquímicos do sangue e testes de coagulação. Os ICC foram dosados (n=48) e após a eluição da IgG dos ICC, em pacientes com plaquetopenia grave, verificou-se sua capacidade de ligação in vitro a plaquetas normais (n=2), e sua capacidade de destruição plaquetária in vivo, após injeção intraperitoneal em camundongo C57BL/6 sadio (n=1). Plaquetas incubadas com ICC de pacientes com malária e plaquetopenia foram submetidas à fagocitose por células THP-1 (n=3). Avaliou-se também a agregação de plaquetas normais, na presença de lisado de hemácias parasitadas por P. vivax e por P. falciparum, e de esporozoítos lisados de P. vivax. Nos pacientes com malária vivax complicada, realizou-se o seqüenciamento das subfamílias dos genes vir. Observou-se plaquetopenia (plaquetas<150.000/μL) em 70,8% dos pacientes (IC95% 66,7-74,9%). A plaquetopenia grave (plaquetas<50.000/μL) foi encontrada em 8,9% (IC95% 4,6-13,2%), sendo que em 26,6% desses pacientes se observaram sangramentos leves. Todos os pacientes com formas complicadas de malária falciparum (n=3) ou malária vivax (n=2) apresentavam plaquetopenia grave. Não se detectou diferença entre média ou freqüência de plaquetopenia entre os pacientes com malária vivax (119,8 x 1000/μL; 71,8%) ou com malária falciparum (122,6 x 1000/μL; 65,4%). As variáveis que estiveram associadas à plaquetopenia, de forma independente, foram o gênero masculino, a primoinfecção e a alta parasitemia. O sangramento esteve associado à malária grave. Identificou-se correlação inversa entre plaquetimetria e o volume plaquetário médio, na malária vivax (r=-0,527; p<0,01), entretanto, não houve associação entre plaquetimetria e ICC (r=-0,148; p=0,355). Não se detectou a ligação in vitro de IgG (ICC) a plaquetas normais, e não houve queda na contagem de plaquetas do camundongo, após injeção de IgG (ICC). A incubação de plaquetas normais com ICC inibiu sua fagocitose in vitro. Verificou-se intensa agregação de plaquetas normais, na presença de lisado de P. vivax e de P. falciparum . Não se identificou qualquer polimorfismo dos genes vir nos parasitos isolados das formas complicadas de malária vivax. Conclui-se que a plaquetopenia é uma complicação freqüente na malária, com pouca repercussão clínica, mesmo entre pacientes com plaquetopenia grave, o que pode ser explicado pela liberação de megaplaquetas compensatórias, pelos megacariócitos, e pela maior ativação das plaquetas por formas sangüíneas de Plasmodium spp. A associação de alta parasitemia e de primoinfecção com a plaquetopenia sugere que a patogênese desta complicação é multifatorial. Os ICC parecem não contribuir para a queda da contagem de plaquetas na malária, e não se demonstrou a presença de auto-anticorpos plaquetários nos casos estudados. _______________________________________________________________________________ ABSTRACT / Thrombocytopenia is a well-known hematological complication of malaria, although its pathogenesis is still unclear. The objectives of the present work were to estimate the frequency and the clinical manifestations of thrombocytopenia in malaria, and to investigate a possible role for the circulating immune complexes (CIC) and of platelet aggregation in vitro in the generation of thrombocytopenia. The work was carried out in Manaus (Amazonas) from 2004 to 2006, by randomly selecting patients with a microscopic and molecular diagnosis of P. vivax malaria (n=142) and P. falciparum malaria (n=26), after excluding patients with other diseases. Individual and clinical features of the patients were studied, including the degree of parasitemia, blood cell counts, biochemical parameters, and coagulation indices. The CIC were quantified (n=48), and after IgG was eluted from the CIC of patients with severe thrombocytopenia. The in vitro effects of IgG binding to normal platelets in vitro (n=2), as well as in vivo, following intraperitoneal injection in a C57BL/6 healthy mouse (n=1) were assessed. Platelets incubated with CIC from patients with malaria and thrombocytopenia were examined for phagocytosis by THP-1 cells (n=3). Aggregation of normal platelets in the presence of lysates of blood stages of P. vivax and P. falciparum , and P. vivax sporozoite lysates was also noted. In the patients with complicated vivax malaria, subfamilies of vir genes were sequenced. Thrombocytopenia (platelets<150,000/μL) was found in 70.8% of the patients (IC95% 66.7-74.9%). Severe thrombocytopenia (platelets<50,000/μL) was found in 8.9% (IC95% 4.6-13.2%), and in 26.6% of these patients mild bleeding was seen. All of the patients with complicated falciparum malaria (n=3) or vivax malaria (n=2) presented severe thrombocytopenia. There was no difference between the median platelet count or frequency of thrombocytopenia in the patients with vivax (119.8 x 1000/μL; 71.8%) or falciparum malaria (122.6 x 1000/μL; 65.4%). Independent variables which were associated with thrombocytopenia included male gender, primary infection, and high parasitemia. The bleeding was associated with severe malaria. An inverse relationship between platelet count and median platelet volume for vivax malaria was identified (r= -0.527, p<0.01). Overall, there was no association between platelet count and CIC (r= -0.148; p=0.355). In vitro binding of IgG (CIC) to normal platelets was not detected, and there was no platelet destruction in the mouse after injection of IgG (CIC). Incubation of normal platelets with CIC inhibited their phagocytosis. Intense aggregation of normal platelets in the presence of lysates of P. vivax and P. falciparum was seen. No polymorphisms of the vir genes were identified in the parasites isolated from patients with severe vivax malaria. Taken together, data reported here show that thrombocytopenia is a frequent complication of malaria, with few clinical consequences, even in patients with severe thrombocytopenia. This could be explained by the release of large platelets from megakaryocytes, and the prominent activation of platelets by blood forms of Plasmodium spp. The association of high parasitemia and primary infection with thrombocytopenia suggests a multifactorial pathogenesis for this complication. The CIC do not appear to contribute to the decreased platelet counts seen in malaria, and auto-antibodies against platelets were not detected in the cases studied. __________________________________________________________________________________ RESUMEN / La plaquetopenia es una complicación hematológica reconocida en malaria aunque su patogénesis es todavía incierta. Los objetivos de este trabajo fueron estimar la frecuencia y las manifestaciones clínicas de la plaquetopenia en malaria, así como el de evaluar el papel de los inmunocomplejos circulantes (ICC) y de La agregación plaquetária in vitro. El estudio fue realizado en Manaus (Amazonas), entre 2004 y 2006, a través de la selección aleatoria de pacientes diagnosticados por microscopia y PCR de malaria vivax (n=142), malaria falciparum (n=26), y excluyendo los pacientes con otras enfermedades. Fueron analizados los aspectos individuales y clínicos de los pacientes además de la parasitemia, hemograma, examen bioquímico de sangre y pruebas de coagulación. Los ICC fueron dosificados (n=48) y después de la elución de IgG de los ICC de pacientes con plaquetopenia grave se verificó su capacidad de ligación in vitro a plaquetas normales (n=2), y de su capacidad de destrucción plaquetária in vivo después de la inyección intraperitoneal en ratón C57BL/6 sano (n=1). Las plaquetas incubadas con ICC de pacientes con malaria y plaquetopenia fueron sometidas a fagocitosis por células THP-1 (n=3). Se evaluó también la agregación de plaquetas normales en La presencia de un lisado de glóbulos rojos parasitados por P. vivax y P. falciparum , así como de esporozoitos lisados de P. vivax. En los pacientes con malaria vivax complicada, se realizó el secuenciamiento de las subfamilias de los genes variantes, vir. Se observó plaquetopenia (plaquetas<150.000/μL) en 70,8% de los pacientes (IC95% 66,7-74,9%). La plaquetopenia grave (plaquetas<50.000/μL) fue detectada em 8.9% (IC95% 4,6-13,2%), siendo que en 26.6% de esos pacientes se observaron sangramientos leves. Todos los pacientes con formas complicadas de malaria falciparum (n=3) o malaria vivax (n=2) presentaron plaquetopenia grave. No se detectó diferencia entre media o frecuencia de plaquetopenia en los pacientes com malaria vivax (119,8 x 1000/μL; 71,8%) y malaria falciparum (122,6 x 1000/μL; 65,4%). Las variables que estuvieron asociadas a plaquetopenia, de forma independiente, fueron el género masculino, la primo-infección y la alta parasitemia. El sangrado estuvo asociado a malaria severa. Se identificó correlación inversa entre plaquetimetria y el volumen plaquetário medio, en la malaria vivax (r=-0,527; p<0,01); sin embargo, no hubo asociación entre plaquetimetria y ICC (r=-0,148; p=0,355). No se detectó la ligación in vitro de IgG (ICC) a plaquetas normales y no hubo queda en el conteo de plaquetas del ratón después de la inyección de IgG (ICC). La incubación de plaquetas normales con ICC inhibió su fagocitosis in vitro . Se verificó intensa agregación de plaquetas normales en la presencia de lisados de P. vivax y P. falciparum. No se identificaron secuencias vir subfamilia-especifica de parásitos obtenidos de pacientes con malaria vivax complicada. Se concluye que La plaquetopenia es una complicación frecuente en malaria, con poca repercusión clínica, incluso entre pacientes con plaquetopenia grave, lo que puede ser explicado por la liberación de megaplaquetas, por los megacariocitos y por la mayor activación de plaquetas por formas sanguíneas de Plasmodium spp. La asociación de la alta parasitemia y de la primo-infección con la plaquetopenia sugiere que la patogénesis de esta complicación es multifactorial. No parece que los ICC contribuyan para La disminución de plaquetas en malaria y no se demostró la presencia de autoanticuerpos plaquetários en los casos estudiados.