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Nova configuração de um reator compartimentado anaeróbio/aeróbio para o tratamento de esgoto sanitário de baixa carga / New configuration of an anaerobic/aerobic baffled reactor for the treatment of low strength sanitary sewageSilva, Julliana Alves da [UNESP] 30 January 2015 (has links) (PDF)
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000829007.pdf: 1337174 bytes, checksum: 048435f654d48a3db75d0e6b50eb566f (MD5) / Coordenação de Aperfeiçoamento de Pessoal de Nível Superior (CAPES) / Fundação de Amparo à Pesquisa do Estado de São Paulo (FAPESP) / Esta pessoa avaliou o desempenho de um sistema que combinou os processos anaeróbio e aeróbio para o tratamento de esgoto sanitário de baixa carga orgânica, utilizando uma nova configuração de reator compartilhamento anaeróbio/aeróbio, operado sob diferentes Tempos de Detenção Hidráulica (TDHA). A combinação dos processos anaeróbio e aeróbio visa aproveitar as vantagens de cada um, minimizando possíveis aspectos negativos, já a configuração em compartilhamento visa à implantação do sistema em pequenas áreas urbanas e rurais. Foi utilizado um reator compartimentado construído com tubulação de Policloreto de vinila (PVC), composto por quatro câmaras, sendo três anaeróbias e uma aeróbia, sendo que a esta última (câmara aeróbia) foi adicionada uma camada constituída por aneis de bambu, além do fornecimento de ar por meio de um compressor e difusores de ar microporosos. O desempenho do sistema foi avaliado em quatro diferentes TDHs (33; 22; 16,5 e 8,25 horas para o sistema completo), aqui caracaterizado como fases, por meio de análises físico-químicas, bacteriológicas e microbiológicas. A eficiência média de remoção de matéria orgânica em temos de Demanda Química de Oxigênio chegou a 77% e a maior eficiência de remoção foi obtida com TDH de 22 horas (79%). Em termos de Demanda Bioquímica de Oxigênio, a eficiência média de remoção foi de 70%. A eficiência de remoção de Sólidos em Suspensão esteve em torno de 90%. o reator avaliado apresentou estabilidade operacional, alta remoção de matéria orgânica, sólidos em suspensão e com relação à remoção de Nitrogênio, o RCAA, não atingiu os padrões exigidos pela Legislação Federal no que diz respeito à remoção de N-Amoniacal, porém as baixas concentrações de Nitrato e Nitrito ocorridas na ultima fase de monitoramento, podem inferir a possibilidade de remoção de Nitrogênio pela desnitrificação, o que pode ser promissor na... / This research evaluated the performance of a system that combined anaerobic and aerobic processes, for the treatment of low strength sanitary sewage using a new configuration of anaerobic/aerobic baffled reactor, which operated under different hydraulic retention periods (HRP). The combination of the anaerobic/aerobic processes aimed to take the maximal advantages of each, minimizing the negative aspects, and the configuration through clambers aimed to built the system in small urban and rural areas. The baffled reactor was built using Polyvinyl Chloride (PVC) and it was composed by four chambers (three anaerobics and one aerobic). In the aerobic chamber was added a bamboo ring layer, with constant air supply, provided by an air compressor and diffuser. The system's performance was evaluated under four different HRPs (33; 22; 16,5 and 8,25 hours for the complete system), divided in Phases. Regarding the organic matter average removal percentages, in terms of Chemical Oxygen Demand, the reactor reached a average removal of 77% and the highest removal percentage was obtained with a HRP of 22 hours (79%). The Biochemical Oxignen Demand average percentage was 70% and the Total Suspended Solids was 90%. The reactor in question showed operation stability, effective organic matter and optimal solids removal. Regarding the Nitrogen removal, the reactor did not reached the standards required by the Federal Legislation. However the low Nitrate and Nitrite concentrations occurred in the last phase of monitoring, which may infer the possibility of nitrogen removal, in the ammonia form, through desnitrification. This may be promising to Ammonia Nitrogen removal if an extra anaerobic chamber is installed, after the aerobic chamber. Regarding the microorganism community evaluated through molecular biology techniques (PCR and DGGE), it was observed a big diversity settlement of the Bacteria Domain communities, having the inoculum a considerable influence...
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Ocorrência de Angiostrongylus cantonensis (Nematoda, Angiostrongylidae) em Achatina fulica (Mollusca, Gastropoda) na Baixada SantistaGuerino, Laura Rocha [UNESP] 26 February 2014 (has links) (PDF)
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000828361.pdf: 2321021 bytes, checksum: 942618e7aef880679b1a5900df78de46 (MD5) / Fundação de Amparo à Pesquisa do Estado de São Paulo (FAPESP) / Angiostrongylus cantonensis é o agente etiológico da meningoencefalite eosinofílica, também chamado de verme do pulmão do rato. Mundialmente, a expansão desse nematóide está ligada à dispersão e colonização pelo caracol gigante africano (Achatina fulica). O objetivo deste trabalho foi verificar a ocorrência de larvas de A. cantonensis em moluscos A. fulica naturalmente infectados, nos nove municípios que compõem a Baixada Santista. Foram capturados 540 exemplares na área urbana dos municípios: São Vicente, Santos, Praia Grande, Cubatão, Mongaguá, Itanhaém, Peruíbe, Guarujá e Bertioga. A técnica utilizada para a obtenção de larvas foi a de Wallace & Rosen e sedimentação, por 3 h, pelo método de Baermann. Após a sedimentação, o material foi observado em microscópio estereoscópico de campo claro, para visualização das larvas que foram posteriormente congeladas a -70°C. O DNA foi extraído e submetido à PCR-RFLP (reação em cadeia da polimerase e polimorfismo de tamanho de fragmentos de restrição) direcionada para a região espaçadora transcrita interna dois (ITS2-rDNA) e clivada com a enzima ClaI. Para as análises morfológicas e morfométricas foram utilizadas 60 larvas, sendo 30 em estágio L2 e 30 em L3. No total, foram analisados 90 pontos (bairros), dos quais 73 (81,11%) apresentaram moluscos com larvas de nematóides. Dos 540 caracóis analisados, 204 (37,77%) apresentaram larvas de nematóides, sendo que 79 (38,72%) foram submetidos às análises moleculares; constatou-se a infecção por A. cantonensis em 63 (79,75%) moluscos. O número de larvas por molusco variou de 1 a 9.723 em exemplares que apresentavam 61,0 e 70,0 mm de comprimento de concha, respectivamente. Não foram observadas diferenças significativas entre o número de larvas de A. cantonensis e o comprimento das conchas dos indivíduos adultos jovens e adultos e nem entre as médias de larvas encontradas entre indivíduos ... / Angiostrongylus cantonensis is the causative agent of eosinophilic meningoencephalitis, also called rat lungworm. Worldwide, the expansion of this nematode is linked to the dispersal and colonization by giant African snail (Achatina fulica). The aim of this work was to verify the occurrence of larvae of A. cantonensis in mollusks A. fulica naturally infected in nine cities that compose the Baixada Santista region. About 540 specimens were collected in urban areas of the following cities: São Vicente, Santos, Praia Grande, Cubatão, Mongaguá, Itanhaém, Peruibe, Guarujá and Bertioga. The technique used for obtaining larvae was based on Wallace & Rosen and sedimentation for 3 h using the method of Baermann. After sedimentation, the material was observed under bright-field stereoscopic microscope for viewing larvae that were subsequently frozen at -70°C. DNA was extracted and submitted to PCR - RFLP (polymerase chain reaction and restriction fragment length polymorphism) directed to the internal transcribed spacer region two (ITS2 - rDNA) and cleaved with ClaI enzyme. For morphological and morphometric analyses, 60 larvae were used, 30 in stage L2 and 30 in stage L3. Overall, 90 points (neighborhoods) were analyzed, of which 73 (81.11 %) showed mollusks with nematode larvae. Of the 540 snails examined, 204 (37.77 %) showed nematode larvae, and 79 (38.72 %) were submitted to molecular analyses, and infection by A. cantonensis was found in 63 (79.75 %) mollusks. The number of larvae per mollusk varied from 1 to 9723 in specimens showing 61.0 and 70.0 mm in shell length, respectively. No significant differences were observed between number of larvae of A. cantonensis and the shell length of young adults and adults, nor between the average number of larvae found between young adults and adults. Significant differences were found when comparing the number of young adult and adult individuals ...
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Pesquisa de Toxoplasma gondii (Nicolle & Manceaux, 1909) em sêmen, testículos e epidídimos de gatos (Felis catus) primoinfectadosTeixeira, Weslen Fabricio Pires [UNESP] 18 December 2014 (has links) (PDF)
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000837180.pdf: 2272798 bytes, checksum: 3d9bcb9da2787aa858c4ebae597f9f22 (MD5) / Este estudo teve como objetivo pesquisar a presença de T. gondii no sêmen, testículos e epidídimos de gatos experimentalmente infectados por este coccídio. Para tanto, doze felinos machos, sem raça definida, em idade reprodutiva e sorologicamente negativos para T. gondii foram selecionados e distribuídos em três grupos experimentais, GI: inoculados com 600 cistos teciduais de T. gondii (cepa P), GII: inoculados com 2x105 taquizoítos (cepa RH), e GIII: não inoculados (grupo controle). Anteriormente à inoculação (dias -7 e 0) e no 7º, 14º, 21º, 28º, 42º, 56º e 70º dias pós-inoculação (DPI), todos felinos, foram submetidos a exames clínicos, sorológicos (RIFI) e hematológicos (hemograma e parasitemia pelo T. gondii). As colheitas de sêmen (eletroejaculação), foram realizadas nas referidas datas, sendo posteriormente realizada a pesquisa do T. gondii por meio da nested PCR e bioprova em camundongos. No 70º DPI, os doze felinos foram orquiectomizados, sendo em seus testículos e epidídimos avaliada a presença do parasito (nested PCR, bioprova em camundongos, análises histopatológicas e imunohistoquímicas). Todos os felinos inoculados com T. gondii (GI e GII), soro-converteram à infecção toxoplásmica e apresentaram picos parasitêmicos em diferentes datas experimentais pós-inoculação. Os felinos inoculados com a cepa RH (GII) apresentaram títulos sorológicos mais elevados que os inoculados com a cepa P (GI). Nestes animais (GII) também foram diagnosticados mais picos parasitêmicos e alterações clínicas que nos felídeos pertencentes ao grupo I. Em nenhuma data experimental foi diagnosticada (bioprova e nested PCR) a presença de T. gondii nas amostras seminais colhidas dos felinos (GI, GII e GIII), nem tampouco nos testículos e epidídimos colhidos destes animais (nested PCR, bioprova, análises histopatológicas e imunohistoquímicas). Tais resultados possibilitam inferir... / This study aimed to investigate the presence of T. gondii in semen, testicles and epididymis of cats experimentally infected with this coccidia. Therefore, twelve mongrel male cats of reproductive age and serologically negative for T. gondii were selected and divided into three experimental groups, GI: inoculated with 600 tissue cysts of T. gondii (P strain), GII : inoculated 2x105 tachyzoites (strain HR), and GIII: not inoculated (control group). Prior to inoculation (days -7 and 0) and days 7º, 14º, 21º, 28º, 42º, 56º and 70º post-inoculation (PID), all cats underwent clinical, serological (IFA) and haematological (blood count and parasitemia by T. gondii) examinations. Semen samples were obtained (eletroejaculation) those dates, and later held the T. gondii search by nested PCR and bioassay in mice. On 70º PID, the twelve cats were castrated, and their testicles and epididymis were evaluated for the presence of the parasite (PCR, bioassay in mice, and histopathological and immunohistochemical analyzes). All cats inoculated with T. gondii (GI and GII), seroconverted to T. gondii infection and showed parasitemia peaks in different experimental days post inoculation. The cats inoculated with the RH strain (GII) had higher titers than those inoculated with the P strain (GI). In these animals (GII) were also diagnosed more parasitemia and clinical changes compared to those belonging to Group I. In no trial date was diagnosed (bioassay and nested PCR) the presence of T. gondii in semen samples taken from the cats (GI, GII and GIII), nor their testis and epididymis (PCR, bioassay, histopathological and immunohistochemical analyzes). These results make it possible to infer that sexual transmission in domestic cats is not an important route of infection in the spread of toxoplasmosis among cats
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Epidemiologia molecular de rotavírus em rebanhos bovinos no estado de São Paulo no período de 2006 a 2010Siqueira, Heloisa Pinto de Godoy [UNESP] 23 February 2015 (has links) (PDF)
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000836886_20170327.pdf: 64217 bytes, checksum: 393504d20ec7ab99c209ce9343eb843a (MD5) Bitstreams deleted on 2017-03-31T12:19:17Z: 000836886_20170327.pdf,. Added 1 bitstream(s) on 2017-03-31T12:20:20Z : No. of bitstreams: 1
000836886.pdf: 1309134 bytes, checksum: c44c8eb5c08f968e0157c6ac0f5dcec8 (MD5) / Os rotavírus são os principais agentes causadores de diarreias em várias espécies animais e nos seres humanos, causando grandes prejuízos econômicos e de saúde pública. Uma característica marcante desse vírus é a grande diversidade genotípica das estirpes circulantes. Informações sobre genotipagem são imprescindíveis para estabelecer mecanismos de vigilância epidemiológica da infecção por rotavírus. O presente trabalho teve como objetivo discutir a epidemiologia de rotavírus na espécie bovina por meio de estudos desenvolvidos entre os anos 2006 e 2010, no Laboratório de Rotavirose da Faculdade de Ciências Agrárias e Veterinárias da Universidade Estadual Paulista Júlio de Mesquita Filho (FCAV/Unesp). Foram obtidas 803 amostras de fezes de bezerros, na faixa etária de 1 a 90 dias, com e sem diarreia, de 48 rebanhos de gado bovino leiteiro e de corte localizados no Estado de São Paulo. As amostras foram caracterizadas com base nos testes de eletroforese em gel de poliacrilamida (PAGE) e transcrição reversa seguida da reação em cadeia da polimerase (RT-PCR). O teste de PAGE indicou animais positivos em 33,3% (16/48) dos rebanhos e 6,1% (49/803) das amostras analisadas. Nos rebanhos leiteiros foram detectados animais infectados por rotavírus nas diferentes faixas etárias de até 90 dias de idade, enquanto nos rebanhos de corte alta frequência (22,8%) de amostras positivas foi verificada em bezerros entre 1 e 15 dias (P<0,05). A análise do perfil do genoma no PAGE identificou sete eletroferótipos, característicos de rotavírus do grupo A, indicando grande diversidade genômica do rotavírus nos rebanhos estudados. A caracterização molecular dos genótipos G (VP7) e P (VP4) pela RT-PCR identificou o genótipo G6P[5] como o mais comum. Foram construídos mapas que analisaram a distribuição espacial dos rotavírus detectados. O trabalho de identificação do rotavírus é de grande valia, uma vez que... / Rotavirus is the major causative agent of diarrhea in several animal species and humans, causing large economic and public health damage. A striking feature of this virus is the great genotypic diversity of circulating strains. Genotyping information is essential to establish surveillance mechanisms of rotavirus infection. This study aimed to discuss the epidemiology of rotavirus in cattle through studies conducted between 2006 and 2010, the Rotavirus Disease Laboratory of the Faculty of Agriculture and Veterinary Sciences of the Universidade Estadual Paulista Julio de Mesquita Filho (FCAV / UNESP), 803 samples of feces of calves were obtained, ranging in age from 1 to 90 days, with and without diarrhea, 48 herds of dairy and beef cattle in the State of São Paulo. The samples were characterized on the basis of electrophoresis tests on polyacrylamide gel (PAGE) and then reverse transcription polymerase chain reaction (RT-PCR). The PAGE test indicated positive animals in 33.3% (16/48) of the herds and 6.1% (49/803) of the samples. In dairy herds infected animals were detected rotavirus in different age groups (P> 0.05), while in the high frequency cut herds (22.8%) of positive samples was observed in calves between 1 to 15 days (P <0,05). The genome profile analysis in PAGE identified seven eletropherotypes characteristic of rotavirus group A, indicating a high genomic diversity of rotavirus in the herds. The molecular characterization of genotype G (VP7) and P (VP4) by RT-PCR identified the genotype G6P [5] as the most common. Maps were constructed to analyze the spatial distribution of detected rotavirus. Rotavirus identification work is of great value, since it is evident that different genotypes agent is spread in São Paulo presenting different forms of production
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Determinação molecular da viabilidade do Mycobacterium leprae: uma comparação com outras abordagens metodológicasSartori, Beatriz Gomes Carreira [UNESP] 27 February 2015 (has links) (PDF)
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000841573_20160227.pdf: 52441 bytes, checksum: 0714a4aabbfd4b8f2757a9be67d70414 (MD5) Bitstreams deleted on 2016-02-29T12:16:21Z: 000841573_20160227.pdf,. Added 1 bitstream(s) on 2016-02-29T12:17:22Z : No. of bitstreams: 1
000841573.pdf: 695270 bytes, checksum: c6651c2f2a1c320f918fa825c4fb2418 (MD5) / O acesso às informações sobre a hanseníase, seu diagnóstico e tratamento com a Poliquimioterapia (PQT) se constituem como elementos chave da estratégia para seu controle. Resultado da infecção pelo Mycobacterium leprae (M. leprae), a hanseníase é uma doença crônica que acomete pele e nervos e a impossibilidade de cultivo do M. leprae em meio de cultura axênico, tem dificultado os estudos in vitro e o desenvolvimento de ensaios clínicos mostram-se complicados pela lenta progressão do bacilo. Assim, um método sensível e específico para a detecção da viabilidade do M. leprae adicionaria um critério imparcial aos meios já disponíveis, possibilitando ainda o diagnóstico em estágio mais precoce da doença. O presente estudo teve por finalidade a avaliação da viabilidade bacilar por meio da detecção de RNAr 16S específico para o M. leprae com a normalização das quantidades totais de micobactérias a partir da quantificação do DNA total de M. leprae. Foi utilizada como padrão a inoculação em coxim plantar de camundongos (Técnica de Shepard). Foram avaliados pacientes antes do tratamento, suspeitos de recidivas e pacientes em fim de tratamento. A inoculação foi altamente positiva nos pacientes não tratados quando comparados com os dos grupos recidiva e fim de tratamento. Os resultados sugerem que existe uma boa correlação entre os dados obtidos com a inoculação e o ensaio molecular, uma vez que também foi possível detectar níveis de RLEP e 16S rRNA nestas amostras. Esta metodologia poderá, futuramente, ajudar no monitoramento da eficácia do tratamento e na busca de novas possibilidades para o estudo da interação parasito-hospedeiro / Access to information about the disease, its diagnosis and treatment with multidrug therapy (MDT) are constituted as key elements of the strategy for its control. Result of infection by Mycobacterium leprae (M. leprae), leprosy is a chronic disease that affects the skin and nerves and the impossibility of cultivating M. leprae in axenic culture medium, has hampered in vitro studies and the development of clinical trials show is complicated by the slow progression of the bacillus. Thus, a sensitive and specific method for detection of viable M. leprae add a fair criterion to the means already available, allowing diagnosis even in early stage disease. This study aimed at evaluating the bacterial viability by specific 16S rRNA detection for M. leprae with the normalization of the total quantities of mycobacteria from the quantification of total DNA of M. leprae. It was used as a standard inoculation into the footpads of mice (Shepard Technique). Patients were evaluated prior to treatment and relapses in patients suspected to treatment. The inoculation was highly positive in untreated patients compared to the relapse groups and end of treatment. The results suggest that there is a good correlation between the data obtained from inoculation and molecular assay, since it was also possible to detect levels of 16S rRNA and RLEP these samples. This methodology may in the future help monitor the effectiveness of treatment and the search for new possibilities for the study of host-parasite interaction
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Multiplicação de Diaphorina citri e de Candidatus Liberibacter asiaticus em híbridos de citros indicados como porta-enxertoBaia, Ana Dulce Botelho [UNESP] 03 March 2015 (has links) (PDF)
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000843406.pdf: 1189340 bytes, checksum: 7b3c890f6719ea226d3e0cc9593afda4 (MD5) / Huanglongbing (HLB) ou greening é uma doença que, no Brasil, está associada às bactérias Candidatus Liberibacter asiaticus e a Ca. L. americanus, ambas transmitidas pelo inseto Diaphorina citri Kuwayama (Hemiptera: Liviidae). O HLB uma doença altamente destrutiva e de difícil controle, sendo atualmente Ca. L. asiaticus a mais frequentemente encontrada nos pomares. Nenhuma variedade explorada comercialmente é resistente ao patógeno ou ao inseto vetor. Visando suprir as necessidades dos produtores por porta-enxertos mais produtivos e que promovam redução no volume da copa, diversos híbridos têm sido testados para uso comercial nos últimos anos. Sobre esses novos híbridos nada se sabe sobre seu potencial em limitar o desenvolvimento da bactéria do HLB ou do inseto vetor, características que poderiam ser úteis no manejo da doença. Em vista disso, o objetivo do presente trabalho foi avaliar taxas de multiplicação de Ca. L. asiaticus e de D. citri em cinco novos híbridos indicados para uso como porta-enxertos. Para fins de comparação foram também incluídos no estudo os porta-enxertos comerciais limoeiro 'Cravo', o citrumeleiro 'Swingle', Poncirus trifoliata, a tangerineira 'Sunki', variedade de laranja doce 'Valência', e a planta ornamental murta (Murraya exotica). A multiplicação de D. citri foi determinada em brotos jovens sadios pela contagem diária do número de ovos, ninfas e adultos gerados do acasalamento de dois casais confinados por 72 horas ou até que ovos fossem visualizados. A multiplicação de Ca. L. asiaticus foi avaliada por meio de PCR quantitativo em raízes e na parte aérea das plantas seis meses após a inoculação do caule por enxertia de ramos doentes, Influência dos genótipos foi detectada tanto na multiplicação do inseto como na multiplicação da bactéria. Maior número de ovos foi encontrado no híbrido 81G513 e na laranjeira 'Valência', e menor número em... / Huanglongbing (HLB), or greening, is a disease that in Brazil is associated to the Candidatus Liberibacter asiaticus and Ca. Liberibacter americanus, both transmitted by the insect Diaphorina citri Kuwayama (Hemiptera: Liviidae). HLB is a disease highly destructive and of difficult control. Nowadays Ca. L. asiaticus ismost frequently found in citrus orchards. No commercial variety is resistant to the pathogen or insect vector. In order to satisfy grower necessity for more productive rootstocks and that promote smaller canopies to facilitate harvesting, several new hybrids have been tested for planting in the last years, For these hibrids no information exist on their potential in limiting the multiplication of the HLB bacteria or the vector, which could be used in disease management. In view of this, the objective of the present work was to evaluate multiplication rates of Ca. L. asiaticus and D. citri on five new hybrids suitable for use as rootstocks. For comparison purposes, the commercial rootstocks 'Cravo' Rangpur lime, 'Swingle' citrumelo, Poncirus trifoliata, and 'Sunki' mandarin, the sweet orange variety 'Valencia', and the ornamental orange jasmine Murraya exotica also were included in the study. D. citri multiplication was determined in healthy young shoots by daily counting of the number of eggs, nymphs and adults generated from two adult mating pairs, after confining them for 72 hours on the shoots or until eggs were observed. Ca. L. asiaticus multiplication was evaluated by quantitative PCR on the aerial part and roots of the plants, six months after stem graft inoculation. Influence of genotypes was observed on the multiplication of the insect as well as on the multiplication of the bacteria. The higher number of eggs was found on the hybrid 81G513 and on the orange 'Valencia', and the lower number of eggs on P. trifoliata. Nymph viability was higher on orange jasmine and P. trifoliata and lower on the ...
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Caracterização do groundnut ringspot virus (grsv) e seu vetor (Frankliniella schultzei) em melancia / Characterization of groundnut ringspot virus (grsv) and its vector (frankliniella schultzei) in watermelonLeão, Evelynne Urzêdo [UNESP] 30 March 2015 (has links) (PDF)
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000844621.pdf: 1255228 bytes, checksum: 98151853c54471172f5b1bca62465aa1 (MD5) / A melancia (Citrullus lanatus) é considerada uma das cucurbitáceas mais importantes no mundo e o Brasil é o quarto maior produtor, com área total cultivada de 90.000 ha e produção média de cerca de dois milhões de toneladas. No Brasil, há várias espécies de vírus descritas em melancia pertencentes ao gênero Potyvirus, Cucumovirus, sendo Zucchini lethal chlorosis virus a única espécie até então relatada no gênero Tospovirus. Considerando a alta incidência de plantas de melancia exibindo sintomas causados por vírus durante as safras 2012/2013 e a presença de tripes no campo, este trabalho teve como objetivo a identificação e caracterização do vírus e do vetor associado a sua transmissão. No primeiro capítulo intitulado Citrullus lanatus is a new natural host of Groundnut ringspot virus in Brazil, foi relatada a ocorrência de Groundnut ringspot virus (GRSV) em melancia ocasionando mosaico, deformações e lesões necróticas em folhas e manchas necróticas nos frutos. O GRSV foi coletado durante os anos de 2012 e 2013 nas regiões produtoras dos municípios de Presidente Prudente e Marília. O isolado de GRSV de melancia apresentou um círculo de hospedeiros semelhante aos isolados de GRSV provenientes de solanáceas, com a excessão de não infectar tomateiro cv. Santa Clara e Mariana. Espécimes de tripes coletados no campo foram capazes de transmitir o GRSV para melancia, pimentão e espécies de Nicotiana. Este foi o primeiro relato de infecção natural de melancia por GRSV. No segundo capítulo intitulado A Taqman real-time RT - PCR assay for detection of Groundnut ringspot virus foi possível detectar o GRSV por PCR quantitativo (qPCR) em amostras de melancia e em tripes individuais coletados no campo. A detecção do GRSV por qPCR poderá servir como uma ferramenta útil nos ... / Watermelon (Citrullus lanatus) is considered one of the most important cucurbits in the world and Brazil is the fourth largest producer, with a total cultivated area of 90.000 ha and average production of about two million tons. In Brazil, viruses described in watermelon belong to the genus Potyvirus and Cucumovirus and Zucchini lethal chlorosis virus is the only species of Tospovirus genre described on this culture. Considering the high incidence of watermelon plants showing symptoms caused by virus during the 2012/2013 seasons and the presence of thrips in the field, the virus and the vector associated with the disease was identified and characterized. In the first chapter entitled Citrullus lanatus is a new natural host of Groundnut ringspot virus in Brazil, the species of tospovirus Groundnut ringspot virus(GRSV) was reported causing mosaic, deformation and necrotic lesions on leaves and fruits of watermelon. The GRSV was collected during the years 2012 and 2013 in producing areas of Presidente Prudente and Marília. GRSV from watermelon, differently from GRSV strains found on solanaceas, didn't infected tomato plants cv. Santa Clara and Mariana. Thrips specimens collected in the field were able to transmit GRSV to watermelon, peppers and Nicotiana species. This was the first report of natural infection of watermelon by GRSV. In the second chapter entitled A Taqman real-time RT - PCR assay for detection of Groundnut ringspot virus a quantitative PCR test was developed to efficiently detect GRSV from watermelon and from individual thrips. The test might be useful to detect GRSV and for further studies with this virus. The third chapter Efficient detection of Frankliniella schultzei (Thripidae: Thysanoptera) by real-time PCR reports the efficient detection of Frankliniella schultzei by the analysis of the mitochondrial gene cytochrome oxidase I (mtCOI). Thrips samples were ...
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Análise celular e molecular da ação do peptídeo Ac2-26 da proteína anti-inflamatória Anexina A nas células de carcinoma de colo de úteroMoreira, Heloisa Trindade [UNESP] 20 February 2015 (has links) (PDF)
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000844441_20160316.pdf: 330288 bytes, checksum: 4d8a5156d9dbac0537ee8e042b7b843a (MD5) Bitstreams deleted on 2016-03-18T13:35:50Z: 000844441_20160316.pdf,. Added 1 bitstream(s) on 2016-03-18T13:36:32Z : No. of bitstreams: 1
000844441.pdf: 1139763 bytes, checksum: b28078769422821d10d451ed98f64059 (MD5) / Coordenação de Aperfeiçoamento de Pessoal de Nível Superior (CAPES) / Fundação de Amparo à Pesquisa do Estado de São Paulo (FAPESP) / Conselho Nacional de Desenvolvimento Científico e Tecnológico (CNPq) / INTRODUÇÃO: O câncer de colo de útero, também chamado de câncer cervical, é o segundo tipo de câncer mais frequente em mulheres mundialmente, sendo a quarta causa de morte por câncer em países em desenvolvimento. A carcinogênese de colo de útero está relacionada com alterações genéticas, infecção pelo Papilomavirus Humano (HPV), angiogênese e processos inflamatórios. A anexina-A1 (ANXA1), proteína de 37 kDa, que é expressa pelas células tumorais atua como moduladora do processo inflamatório. Os dados disponíveis sugerem que essa família de proteínas pode ter, além de seu importante papel no processo inflamatório, um envolvimento significativo no câncer, por meio de cascatas de sinalização que incluem genes relacionados com o ciclo celular, a diferenciação e a apoptose. OBJETIVOS: Em função da importância do efeito anti-inflamatório do peptídeo Ac2-26 nas células carcinogênicas, o presente trabalho teve como objetivo geral investigar a influência desse anti-inflamatório nas células SiHa. MATERIAIS E MÉTODOS: Utilizamos a linhagem celular SiHa (derivada das células de carcinoma epidermóide de cérvice), tratada com o peptídeo Ac2-26 na concentração de 10μg/mL por 2, 4, 24, 48 e 72 horas. Avaliamos morfologia; proliferação e migração celular; apoptose, necrose e apoptose tardia; citocinas pró inflamatórias; expressão protéica e dos genes COX-2, EP3, EP4, MMP2, MMP9, TIMP1 e TIMP2; nas amostras controle e tratadas com o peptídeo Ac2-26, pelas técnicas de microscopia de luz, Citometria de fluxo, Magipix, Western Blotting e PCR quantitativo em tempo real. RESULTADOS: Nas células de carcinoma de colo uterino observamos que não houve alteração na morfologia celular após o tratamento com peptídeo Ac2-26, entretanto houve a redução da proliferação e migração celular. No ensaio de citômetro de fluxo não houve indução de apoptose, apoptose... / INTRODUCTION: Cervical cancer is the second most common cancer in women worldwide and is the fourth leading cause of cancer deaths in developing countries. The cervical carcinogenesis is related to genetic alterations, infection by the Human Papillomavirus (HPV), angiogenesis and inflammation. Annexin-A1 (ANXA1), 37 kDa protein, which is expressed by tumor cells acts as a modulator of the inflammatory process. Evidence suggests that this protein family may have, in addition to its important role in the inflammatory process, significant involvement in cancer, through signaling cascades that include genes related to cell cycle, differentiation and apoptosis. OBJECTIVES: Because of the importance of the anti-inflammatory effect of Ac2-26 peptide in carcinogenic cells, this study aimed to investigate the influence of anti-inflammatory in SiHa cells. MATERIALS AND METHODS: SiHa cell line (derived from squamous cell carcinoma of cervix), treated with Ac2-26 peptide at a concentration of 10μg/mL for 2, 4, 24, 48 and 72 hours. We evaluate morphology; cell proliferation and migration; apoptosis, late apoptosis and necrosis; pro-inflammatory cytokines; protein expression and COX-2 genes, EP3, EP4, MMP2, MMP9, TIMP1 and TIMP2; control and the samples treated with the peptide Ac2-26, by light microscopy techniques, flow cytometry, magipix, Western blotting and quantitative PCR in real time. RESULTS: In cervical carcinoma cells observed that there was no change in cell morphology after treatment with peptide Ac2-26, however, there was a reduction in cell proliferation and migration. In the test flow cytometry there was no induction of apoptosis, late apoptosis or necrosis, but the test Magpix decreased interleukin 6 (IL-6) in SiHa cells treated with the peptide Ac2-26. The effect of treatment carried out with the exogenous protein did not affect the expression of Annexin A1 endogenous protein, but showed...
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Staphylococcus aureus: resistência de virulência e tipagem de MRSA pelas técnicas de MLST e spa typingSouza, Camila Sena Martins de [UNESP] 19 February 2014 (has links) (PDF)
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000768735.pdf: 1378869 bytes, checksum: 208d6f9ea0a8b866c4aaf52ade9bcdc9 (MD5) / Staphylococcus aureus se destaca por sua patogenicidade e alta frequência, permitindo que este agente seja capaz de produzir doenças tanto em indivíduos sadios quanto em imunocomprometidos por sua fácil disseminação. O objetivo deste trabalho foi caracterizar a distribuição de clones de S. aureus sensíveis e resistentes à meticilina (MSSA/MRSA) em 50 isolados provenientes de pacientes com infecções de pele da Seção de Dermatologia do Hospital das Clínicas da Faculdade de Medicina (FMB) de Botucatu, 50 isolados de idosos de Instituições de Longa Permanência (ILP) de Bauru e 50 isolados provenientes de detentos do Centro de Ressocialização (CR) de Avaré. Os isolados de S. aureus foram submetidos à técnica de E-test para determinação da Concentração Inibitória Mínima (CIM). Para determinação do perfil de virulência e resistência à oxacilina nos 150 isolados de S. aureus foram realizadas reações em cadeia da polimerase (PCR) para a detecção dos genes mecA, cassete cromossômico estafilocócio mec (SCCmec), genes codificadores das enterotoxinas (sea, seb e sec-1), toxinas esfoliativas A e B (eta e etb), toxina 1 da síndrome do choque tóxico (tst), leucocidina de Panton-Valentine (lukS-PV e lukF-PV), hemolisinas alfa e delta (hla e hld) e biofilme (icaA e icaD). O perfil clonal dos isolados MSSA e MRSA foi caracterizado por Pulsed Field Gel Electrophoresis (PFGE), e os clones de MRSA foram submetidos a tipagem molecular por Multilocus Sequence Typing (MLST) e spa typing. Os resultados revelaram maior prevalência de MRSA nas instituições de longa permanência, além de apresentarem CIM90 64μg/mL para oxacilina e CIM90 > 256 μg/mL para clindamicina. Das 150 amostras de S.aureus ... / Staphylococcus aureus is distinguished by its high pathogenicity and frequency, allowing that this agent is capable of producing diseases in both healthy individuals and immunocompromised due to its easy dissemination. The aim of this work was to characterize the distribution of clones of S. aureus sensitive and resistant (MSSA/MRSA) in 50 isolates from patients with skin infections of Section of Dermatology of the University Hospital of the Botucatu Medical School Hospital of the (FMB), 50 isolates of elderly residents of nursing homes of Bauru and 50 isolates from inmates of Detention Center of Avare. The isolates of S. aureus were subjected to the technique of E-test for determination of Minimum Inhibitory Concentration (MIC). To determine the virulence profile and oxacillin resistance in 150 isolates of S. aureus was used Polymerase Chain Reaction (PCR) for the detection of mecA gene, staphylococcal cassette chromosome mec (SCCmec), genes encoding enterotoxins (sea, seb and sec-1), exfoliative toxins A and B (eta e etb), toxic shock syndrome toxin 1 (tst), Panton-Valentine leukocidin (lukS-PV and lukF-PV), alpha and delta hemolysin (hla and hld) and biofilm (icaA and icaD). The clonal profile of MRSA and MSSA isolates were characterized by Pulsed Field Gel Electrophoresis (PFGE), and MRSA clones were subjected to molecular typing Multilocus Sequence Typing (MLST) and spa typing. The results revealed a higher prevalence of MRSA in institutional settings, besides having MIC90 64μg/mL for oxacillin and MIC90 > 256 mg/mL for clindamycin. Of the 150 samples of S. aureus studied, 20 (13.3%) were mecA carriers, being detected seven isolates harboring SCCmec type IV nine carrying the SCCmec type II, only one isolate carrying the SCCmec type I and 3 isolates were not typed by the protocol used. Among the virulence factors, enterotoxin A was the most prevalent in all sources. Is important to note, 10% of isolates from Center Resocialization ...
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Condições do humor aquoso, quanto à contaminação, na facoemulsificação com implante de lente intraocular em cãesLacerda, Luciana de Cenço Corrêa de [UNESP] 24 January 2014 (has links) (PDF)
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000790830.pdf: 1275790 bytes, checksum: ee43ae79b4dc2bfb622479f1f9fcbf29 (MD5) / O tratamento cirúrgico para a catarata, pela facoemulsificação, é atualmente o mais aceito e praticado. A utilização de lentes intraoculares (LIO), indicadas para a correção da emetropia e para a profilaxia da opacificação da cápsula posterior, pode, todavia, ensejar contaminação advinda da cavidade nasal e da conjuntiva palpebral, além do ambiente, da equipe cirúrgica, de materiais e de instrumentais. Com o trabalho, objetivou-se a identificação de linhagens de bactérias presentes nas secreções nasal e conjuntival e no humor aquoso de cães submetidos à facoemulsificação com implante de lentes intraoculares, bem como a caracterização da diversidade genética entre as populações encontradas, empregando-se o sequenciamento da região 16S rDNA de microrganismos, após seleção de diferentes grupos pela Rep-PCR, com o primer BoxA1 associado ao BoxC1R. Encontraram-se bactérias dos gêneros Enterobacter, Staphylococcus, Streptococcus e Pantoea e a espécie Staphylococcus aureus. Pela PCR-RFLP, utilizando-se a enzima MboI, identificaram-se espécies de Staphylococcus, como o S. pseudointermedius. Foram encontrados dois exemplares de Staphylococcus aureus coagulase positivo, pela PCR, confirmados pelo teste bioquímico da coagulase. Os isolados foram submetidos à Rep-PCR com marcadores moleculares Rep1R-I associado ao Rep2, Eric2 e BoxC1R. Encontrou-se alta variabilidade genética entre eles, notadamente quanto ao gênero Staphylococcus. O sequenciamento da região 16S rDNA e a Rep-PCR foram factíveis na detecção da diversidade genética. Oito isolados do gênero Enterobacter em secreção conjuntival e, ao mesmo tempo, no humor aquoso, apresentaram distância genética de 0.000. Cinco por cento dos pacientes submetidos à facoemulsificação com implante de LIO apresentaram contaminação do humor aquoso, por Enterobacter spp / Phacoemulsification is the surgical treatment most commonly performed and accepted for cataracts. The use of artificial intraocular lens (IOL), indicated to achieve emetropy and as an aid on the prophylaxis of posterior capsule opacification, may, however, give rise to contamination arising from the nasal cavity and palpebral conjunctiva, in addition to the environment, the surgical staff, materials and instrumental. The goal of this research was to identify strains of bacteria present in the nasal and conjunctival secretions and aqueous humor of dogs undergoing phacoemulsification with implantation of intraocular lenses, as well as the characterization of genetic diversity among populations found using it sequencing of 16S rDNA of microorganisms, after selection of different groups by Rep-PCR with the primer BoxA1 associated BoxC1R. This study founded genders of bacteria like Enterobacter, Staphylococcus, Streptococcus and Pantoea and Staphylococcus aureus species. PCR-RFLP, using the enzyme MboI, identified Staphylococcus species such as S. pseudointermedius. Two copies of coagulase positive Staphylococcus aureus, founded by PCR, were confirmed by biochemical coagulase test. All of isolates was submitted by Rep-PCR with molecular markers Rep1R-I associated with Rep2, Eric2 and BoxC1R. It was found high genetic variability among them, especially regarding the gender Staphylococcus. Sequencing of 16S rDNA and Rep-PCR were effective in detecting genetic diversity. Eight isolates of gender Enterobacter in the conjunctival secretion and, at the same time, in aqueous humor, showed genetic distance of 0.000. Five percent of patients submitted to phacoemulsification with IOL implantation showed contamination in aqueous humor, by Enterobacter spp
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