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Fatores de risco e análise espacial para a leishmaniose visceral no município de Juazeiro - Bahia - Brasil

Gomes, Ana Amélia Domingues [UNESP] 02 April 2013 (has links) (PDF)
Made available in DSpace on 2014-06-11T19:31:10Z (GMT). No. of bitstreams: 0 Previous issue date: 2013-04-02Bitstream added on 2014-06-13T20:41:30Z : No. of bitstreams: 1 gomes_aad_dr_jabo.pdf: 3448071 bytes, checksum: e06fcab0cf2240038b895eecb48138d0 (MD5) / O objetivo do presente estudo foi determinar a presença de anticorpos anti-Leishmania sp. no soro e de DNA de Leishmania infantum chagasi no sangue periférico das diversas espécies de animais domésticos, residentes em um raio de 250 metros de distância de seres humanos portadores de leishmaniose visceral (LV), bem como avaliar as características ambientais, em uma região da cidade de Juazeiro (BA), na tentativa de determinar os possíveis fatores de risco para a ocorrência da doença. Para tanto, após a seleção de 21 casos humanos de LV distribuídos em seis bairros do município, realizou-se a sorologia e a reação em cadeia de polimerase em tempo real (qPCR) de soro e sangue total, respectivamente, de 498 animais, sendo 383 (76,91%) da espécie canina, 84 (16,87%) felina, 15 (3,00%) caprina, 12 (2,42%) equídea e 4 (0,80%) ovina. A prevalência de LV, considerando-se os resultados sorológicos e da qPCR, foi de 6,43% (32/498), sendo 5,75% (22/383) na população de cães e 11,90% (10/84) na de gatos. Vinte cães (5,22%) e 10 (11,90%) gatos foram sororreagentes e as outras espécies não apresentaram anticorpos anti–Leishmania sp. Apenas dois (0,40%) dos 498 animais apresentaram DNA do parasita no sangue, ambos da espécie canina e sem a presença de anticorpos séricos anti–Leishmania sp. Os gatos apresentaram duas vezes mais chances de se tornarem portadores da LV que os cães (OR=2,21; IC=1,1-4,87; p=0,043), e os felinos domiciliados apresentaram um risco 9,57 vezes maior de se infectarem que os gatos semidomiciliados (OR=9,57; IC=2,21-41,37; p=0,0006). O acesso a rua não foi associado com a doença em cães, e o sexo e a faixa etária não constituíram um risco para os animais contraírem esta zoonose. A presença de mais de um animal por domicílio aumentou em 3,46 vezes as chances de infecção na população... / The aim of the present study was to determine the presence of antibodies anti-Leishmania sp. in serum and DNA of Leishmania infantum chagasi in peripheral blood of domestic animals living within a 250 m perimeter from human cases of visceral leishmaniasis (VL), as well as to evaluate the environmental characteristics, in the region of the city of Juazeiro, Bahia, in an attempt to determine possible risk factors for the occurrence of the disease. For this, after the selection of 21 human cases of VL distributed in six neighborhoods of Juazeiro, serology and real time polymerase chain reaction (qPCR) in whole blood were performed in 498 animals, being 383 (76.91%) dogs, 84 (16.87%) cats, 15 (3%) goats, 12 (2.42%) equids, and 4 (0.8%) sheep. The prevalence of VL, considering serological and qPCR results, was 6.43% (32/498), being 5.75% (22/383) dogs and 11.9% (10/84) cats. Twenty (5.22%) dogs and 10 (11.9%) cats were seroreactive and the others species did not present antibodies anti-Leishmania sp. Only two (0.40%) out of 498 animals presented the parasite DNA in blood, both dogs without the presence of anti- Leishmania antibodies. Cats were two times more likely to have VL than dogs (OR = 2.21; 95% CI, 1.1 - 4.87; p = 0.043), and the domiciled cats were more likely to be positive for VL than semi-domiciled (OR=9.57; 95% CI, 2.21 - 41.37; p=0.0006). Access to the street was not associated to the disease in dogs, and sex and gender did not constitute a risk factor for the development of VL. The presence of more than one animal per household increased in 3.46 times the odds of infection in the population (OR=3,46; IC=1,49-8,06; p=0,0025). No significant association was found between the number of people per household, the distance from human VL cases, the type of house walls, the number of rooms, or the presence... (Complete abstract click electronic access below)
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Ação da luz ultravioleta e da riboflavina na inativação da Leishmania infantum chagasi em sangue canino conservado em bolsas para transfusão

Sacco, Soraya Regina [UNESP] 13 November 2013 (has links) (PDF)
Made available in DSpace on 2014-06-11T19:31:11Z (GMT). No. of bitstreams: 0 Previous issue date: 2013-11-13Bitstream added on 2014-06-13T18:41:57Z : No. of bitstreams: 1 000740733.pdf: 2604673 bytes, checksum: 0a046e576f0e604892305395adc3f265 (MD5) / É de extrema importância para a medicina transfusional que haja segurança no procedimento de transferência de hemocomponentes, minimizando a ocorrência da transmissão de patógenos. O presente trabalho visa caracterizar as possíveis alterações hematológicas e bioquímicas, ocorridas durante o período de 21 dias de armazenamento das amostras de sangue canino colhidas em bolsas plásticas para transfusão, investigando ainda a eficiência do tratamento destas bolsas com luz ultravioleta e riboflavina na inativação de Leishmania infantum chagasi. Para isto, realizou-se hemograma, teste de fragilidade osmótica, determinação da concentração sérica de sódio e potássio, testes sorológicos e moleculares, comparando-se um grupo de bolsas de sangue colhidas de cães parasitados com L. infantum chagasi, com um grupo de bolsas de sangue obtidas de cães hígidos. Após as análises laboratoriais in vitro, o sangue canino parasitado foi submetido ao tratamento com riboflavina e luz UV por 30 e 45 minutos e inoculado em hamsters. O sangue de cães com leishmaniose armazenado em bolsas para transfusão demonstrou: anemia, hiperproteinemia, trombocitopenia, hipercalemia, diminuição do pH, 100% das RIFIs positivas (título 1:640) e PCR convencional positiva em 20% dos animais, demonstrando a importância do hemograma, exames bioquímicos e dos testes laboratoriais de diagnóstico da leishmaniose na seleção dos doadores. O sangue parasitado não perdeu a capacidade de produzir a infecção após o período de armazenamento. Os hamsters inoculados com sangue tratado com riboflavina e luz UV por 30 e 45 minutos apresentaram PCR positiva, apesar de não apresentarem sinais e sintomas clínicos da enfermidade. Na qPCR pode-se identificar que a associação da riboflavina com a luz UV reduziu o número de leishmanias, diminuindo a carga parasitária, porém não eliminou completamente os parasitas / Providing safety during the transfusion of blood products is of major importance in transfusion medicine; this requires a proper blood to minimize the occurrence of pathogen transmission. The present work aims to characterize the possible hematological and biochemical changes that occurr during the 21 days of storage of canine blood samples collected in plastic bags for transfusion and to investigate the treatment efficiency of these bags with ultraviolet light and riboflavin in inactivating Leishmania infantum chagasi. Total blood count, osmotic fragility test, determination of serum sodium and potassium, serological and molecular tests were performed comparing a group of bags of blood taken from dogs infected with L. infantum chagasi, with a group of bags of blood obtained from healthy dogs. After this, the parasitized canine blood was subjected to the treatment with riboflavin and UV light for 30 to 45 minutes and inoculated in hamsters. The blood of dogs with leishmaniasis stored in bags for transfusion showed anemia, hyperproteinemia, thrombocytopenia, hyperkalemia, decreased pH, 100 % of RIFIs positive (1:640 title) and conventional PCR positive in 20% of animals, demonstrating the importance of blood count, biochemical tests and laboratory tests for the diagnosis of leishmaniasis in blood donor selection. The parasitized blood has not lost the ability to produce infection after the storage period. Hamsters inoculated with blood treated with riboflavin and UV light for 30 and 45 minutes were PCR positive, although not presenting clinical signs and symptoms of the disease. The qPCR can identify that the combination of riboflavin with UV light reduced the number of Leishmania, reducing the parasitic load, but did not completely eliminate parasites
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Novo gene cry8 de Bacillus thuringiensis: caracterização e avaliação da patogenicidade ao bicudo da cana-de-açúcar, Sphenophorus levis Vaurie, 1978 (Coleoptera: Curculionidae)

Rossi, Juliana Regina [UNESP] 12 June 2011 (has links) (PDF)
Made available in DSpace on 2014-06-11T19:32:16Z (GMT). No. of bitstreams: 0 Previous issue date: 2011-06-12Bitstream added on 2014-06-13T20:43:08Z : No. of bitstreams: 1 rossi_jr_dr_jabo_parcial.pdf: 88852 bytes, checksum: f0badc33849f0f480aac58f70772e600 (MD5) Bitstreams deleted on 2015-01-16T10:37:50Z: rossi_jr_dr_jabo_parcial.pdf,Bitstream added on 2015-01-16T10:38:35Z : No. of bitstreams: 1 000671176.pdf: 1093299 bytes, checksum: d1fd5a36d749654ea04ac75ca09f863d (MD5) / Coordenação de Aperfeiçoamento de Pessoal de Nível Superior (CAPES) / A caracterização molecular de 46 isolados de Bacillus thuringiensis foi realizada por meio da técnica de PCR com os oligonucleotídeos iniciadores gerais Gral-cry8(d)/Gral-cry8(r), resultando na identificação do isolado BT_I622 como portador do gene cry8 (coleóptero-específico). O fragmento obtido de aproximadamente 376 pares de base (pb), localizado na porção inicial do gene, foi clonado em vetor pGEM®-T Easy, sequenciado e analisado por bioinformática. A determinação da sequência completa do gene cry8 presente no isolado BT_I622, foi realizada pela estratégia de “primer walking” com a utilização de oligonucleotídeos específicos. Os iniciadores foram elaborados através do programa Primer3, com base nas sequências de genes cry8 depositadas no banco de dados público GenBank (NCBI) e, por meio da análise das sequências geradas com o par de oligonucleotídeos gerais utilizados inicialmente na caracterização dos isolados. As amplificações com diferentes combinações de iniciadores resultaram na obtenção de fragmentos em torno de 1420, 3302, 628, 1580, 508 e 510 pb, os quais foram clonados, sequenciados e analisados pelos programas Phred/Phrap/Consed visando a montagem do gene. A sequência contendo 3531 pb foi comparada ao GenBank pela ferramenta BLASTn, apresentando 98% de similaridade com o gene cry8Ka2. Paralelamente, a sequência de aminoácidos deduzida (1176 aa) revelou 75% de identidade com a proteína Cry8Ba1 na análise com o algoritmo BLASTp, demonstrando que o isolado BT_I622 é portador de um novo gene cry8. Os bioensaios indicaram que as larvas de Sphenophorus levis são sensíveis a nova proteína Cry8 de B. thuringiensis / The molecular characterization of 46 Bacillus thuringiensis isolates was carried out using the PCR technique with primers designed to detect cry8 genes (Gral-cry8(d)/Gral-cry8(r)), resulting in the identification of the isolate BT_1622 as a cry8 gene carrier (coleopteran specific). The ca. 376 base pairs (bp) fragment obtained was located in the initial part of the gene, which was cloned into the plasmid pGEM®-T Easy, sequenced and analyzed by bioinformatics. The complete sequence determination of this gene found within isolate BT_1622 was done using the “primer walking” strategy. The primers were designed using the software Primer3, comparing to previously sequenced cry8 genes found in the public database GenBank (NCBI) and analyzing the sequences generated with the pair of general primers used initially in the characterization of isolates. The amplifications with different primer combinations resulted other fragments of this gene with 1,420; 3,302; 628; 1,580; 508 and 510 bp, which were cloned, sequenced and analyzed using the software Phred/Phrap/Consed to obtain the full gene. The 3,531 bp sequence was compared to the GenBank using the BLASTn tool, and showed 98% of similarity with the gene cry8Ka2. Also, the deduced amino acid sequence (1,176 amino acids) showed 75% identity to the Cry8Ba1 using the algorithm BLASTp, demonstrating that the isolate BT_1622 carriers a new cry8 gene. The bioassay results indicated that the Sphenophorus levis larvae are sensitive to the new Cry8 protein of B. thuringiensis
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Caracterização molecular de acessos de capim-colchão (Digitaria nuda) e resposta à ametrina

Vieira, Viviane Cristina [UNESP] 06 July 2007 (has links) (PDF)
Made available in DSpace on 2014-06-11T19:32:16Z (GMT). No. of bitstreams: 0 Previous issue date: 2007-07-06Bitstream added on 2014-06-13T19:21:44Z : No. of bitstreams: 1 vieira_vc_dr_jabo.pdf: 991037 bytes, checksum: 6e39ae9e1779bebf699c04fe2aa8cca6 (MD5) / Coordenação de Aperfeiçoamento de Pessoal de Nível Superior (CAPES) / As plantas daninhas da família Poaceae são as principais plantas que infestam a cultura de cana-de-açúcar. As espécies de gramíneas conhecidas por capim-colchão, estão entre as de maior ocorrência nas lavouras de cana-de-açúcar no Brasil. Atualmente o uso do controle químico está sendo o mais empregado para controle de Digitaria, porém há alguns relatos de falha no controle, principalmente com referência a herbicidas pertencentes ao grupo das triazinas, que bloqueiam a cadeia fotossintética, no fotossistema. As técnicas moleculares estão sendo bem recomendadas para análise da diversidade genética em plantas daninhas. Para a caracterização molecular vinte iniciadores foram utilizados para o RAPO e, para o PCR¬RFLP utilizou-se de dois iniciadores específicos P1 e P2 e a enzima de restrição Mael. O seqüenciamento foi realizado com o amplicom produzido com os iniciadores P1 e P2. Para o tratamento químico utilizou-se a ametrina. Com isso, esse trabalho teve como objetivos: caracterizar dez acessos de Digitaria spp. por marcadores RAPO e PCR¬RFLP, sequenciar uma região conservada do gene psbA e verificar possíveis associações entre o polimorfismo desse gene e a resposta fenotípica à ametrina. Pela análise molecular não houve variabilidade genética entre os acessos e todos apresentaram a mesma resposta fenotípica ao herbicida utilizado. Com esses resultados, concluiu-se que o capim-colchão dos dez acessos estudados pertence à espécie Digitaria nuda e não foi observada relação entre a ocorrência de polimorfismo e a suscetibilidade à ametrina, provavelmente porque todos os acessos estudados foram controlados na dose recomendada do herbicida. / The weed of family Peaceae are the most important infesting sugarcane crop plants. The gramineous species known as crabgrass are among the ones with high occurrence in Brazil sugarcane crop. Presently the use of chemical control is being the most common way used for the control of Digitaria, but with few controlling occurrences fails, with emphasis for those herbicides belonging to triazine group which block the photosynthetic chain at the photosystem II leveI. Molecular techniques are being recommended for the analysis of the genetic diversity such weed. For the molecular characterization twenty primers were used for RAPO and for the PCR¬RFLP a set of two specific primers P1 and P2 were used together with restriction enzyme Mael. The ONA sequencing was performed with an amplicon sample produced with the primers P1 and P2. For the chemical treatment control ametryn was selected. Thus this work had objectives as follows: to characterize ten accessions of Digitaria spp. by RAPO and PCR-RFLP markers, and to sequence a conserved region of the psbA gene so as to investigate the possible polymorphic associations of this gene in response to the phenotypic response to ametryn. For the molecular analysis it did not have genetic variability among the accessions and all had presented the same phenotypic response to the used herbicide. Based on the obtained results, it is concluded the crabgrass that ten collected accessions belong to the species Digitaria nuda, and it was not observed any relation among the polymorphism and susceptibility to ametryn probably because all the studied accessions had been controlled in the recommended dose of the herbicide.
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Leptospira spp. e Brucella spp. em tartarugas-da-Amazônia (Podocnemis expansa) do Vale do Rio Araguaia - GO

Alves Júnior, José Roberto Ferreira [UNESP] 10 January 2013 (has links) (PDF)
Made available in DSpace on 2014-06-11T19:32:51Z (GMT). No. of bitstreams: 0 Previous issue date: 2013-01-10Bitstream added on 2014-06-13T21:05:05Z : No. of bitstreams: 1 alvesjunior_jrf_dr_jabo.pdf: 5094071 bytes, checksum: 78091e8c21aa8e379414fb323846824c (MD5) / No Brasil, alguns estados, como Mato Grosso e Goiás, que possuem regiões alagadiças e pouco exploradas, têm a bovinocultura de corte extensiva como um dos pilares da economia. Isso faz com que bovinos e animais selvagens compartilhem o mesmo ambiente, facilitando uma possível transmissão cruzada de doenças infectocontagiosas entre eles e até mesmo para humanos. Com o objetivo de identificar anticorpos e detectar o DNA de Leptospira spp. e Brucella spp. nos diferentes materiais oriundos de tartarugas-da-amazônia (Podocnemis expansa) e do meio onde vivem, foram examinados 600 Testudines. As técnicas de diagnóstico sorológico empregadas foram a soroaglutinação microscópica (SAM), utilizada para a identificação de anticorpos anti-Leptospira, e a prova do antígeno acidificado tamponado (AAT), o teste da polarização fluorescente (TPF) e a reação de fixação de complemento (RFC), utilizados para a identificação de anticorpos anti- Brucella. Já a detecção de DNA dos agentes foi realizada pela reação em cadeia da polimerase (PCR). Empregando-se a SAM observou-se que 483 (80,5%) amostras foram reagentes ao teste. Quatro amostras foram reagentes na AAT, porém no TPF e na RFC, não houve reagentes. Detectou-se DNA de Leptospira spp. e Brucella spp. nos materiais oriundos dos animais e no ambiente onde vivem. Tal achado demonstra que há possibilidade da P. expansa ser hospedeiro natural da Leptospira spp. assim como da Brucella spp., permitindo a disseminação do agente para animais domésticos, outras espécies selvagens e humanos / In Brazil, States such as Mato Grosso and Goiás, having flooded and little explored regions, maintain beef cattle as a pillar of their economies. This results in both cattle and wild animals sharing the same environment, and thus facilitating the potential cross transmission of infectious diseases among them and even to humans. With the goal of identifying antibodies and detecting the DNA of Leptospira spp. and Brucella spp. in various tissues and fluids from giant Amazon turtles (P. expansa) and the environment where they live, 600 Testudines were examined. The serological diagnostic techniques employed included the microscopic agglutination test (MAT) for the identification of anti-Leptospira antibodies, and the rose bengal plate test (RBPT), the fluorescence polarization assay (FPA) and the complement fixation test (CFT) for the identification of anti-Brucella antibodies. The detection of DNA was carried out by polymerase chain reaction (PCR). The MAT results showed that 483 (80.5%) of the samples tested were reagents to Leptospira spp. Four samples were reagents in RBPT, but in FPA and CFT, there weren`t reagents. The DNA of these bacteria was detected in the biologic material from tested animals and in the environment where they live. This demonstrates the possibility of P. expansa being a natural host of Leptospira spp. as well as a natural host of Brucella spp. thus allowing dissemination of the agents to domestic animals, other wildlife and humans
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Vacina irradiada de Toxoplasma gondii em rats wistar: análise molecular da carga parasitária tecidual, transmissão congênita e eliminação do agente pelo leite

Camossi, Lucilene Granuzzio [UNESP] 17 May 2013 (has links) (PDF)
Made available in DSpace on 2014-06-11T19:32:52Z (GMT). No. of bitstreams: 0 Previous issue date: 2013-05-17Bitstream added on 2014-06-13T20:44:09Z : No. of bitstreams: 1 000738028.pdf: 1911096 bytes, checksum: 107327a17db129713052a243c7622095 (MD5) / A toxoplasmose se destaca pela elevada importância médica, veterinária e zootécnica, e seu controle tornou-se um desafio para a saúde pública em todo o mundo, sinalizando a prioridade em buscar na vacinação uma estratégia para conter a infecção. Este estudo foi realizado com o objetivo de avaliar a proteção conferida pela pré-imunização, com vacina constituída de taquizoítos irradiados a 255 Gy, com raios γ, em ratas Wistar, contra desafios orais por diferentes estágios infectantes do Toxoplasma gondii. Nos experimentos foi investigada a proteção vacinal contra formação de cistos cerebrais, cistos na musculatura esquelética, transmissão congênita e eliminação do agente pelo leite. A vacina foi administrada por via oral, com uso de adjuvante, em três doses com intervalos de 15 dias, antes do acasalamento das ratas. Constatada a gestação, realizou-se o desafio oral das ratas com bradizoítos, oocistos e taquizoítos de T. gondii. Foram utilizadas ratas Wistar em idade reprodutiva, que foram distribuídas em dois experimentos, composto por oito grupos cada. No experimento I cada grupo foi formado por seis ratas e, no experimento II, por cinco ratas. Os animais em cada experimento foram distribuídos da seguinte forma: Grupo 1: imunizado e desafiado com bradizoítos (ME-49) de T. gondii; Grupo 2: desafiado com bradizoítos (ME-49) de T. gondii; Grupo 3: imunizado e desafiado com oocistos (ME-49) de T. gondii; Grupo 4: desafiado com oocistos (ME-49) de T. gondii; Grupo 5: imunizado e desafiado com taquizoítos (RH) de T. gondii; Grupo 6: desafiado com taquizoítos (RH) de T. gondii; Grupo 7: apenas imunizado, Grupo 8: não imunizado e não desafiado. Semanalmente, desde a imunização, foram realizadas análises sorológicas e hematológicas. Após a parição (experimento I), as ratas e neonatos foram eutanasiados para determinação da carga parasitária no cérebro e na musculatura esquelética... / Toxoplasmosis has high medical and veterinary importance, their control has become a challenge to public health worldwide, signaling the priority in seeking vaccination strategy to contain the infection.The objective of the present study was to evaluate the efficacy of Toxoplasma gondii (T. gondii) tachyzoites irradiated vaccine, administered in experimentally inoculated Wistar female rats by oral challenges against different infectious stage of Toxoplasma gondii for blocking the production of T. gondii cysts in brain and muscle tissues, congenital transmission and also the elimination of the parasite in milk. Vaccine was administered orally, plus aluminium hidroxy as adjuvant, with three doses of 15 days interval. One week after pregnancy confirmation, challenge was done by gavage with T. gondii cysts, oocysts and tachizoites. Wistar rats in reproductive stage were distributed in two studies, composed by eight groups of six animals each (experiment I) an five animals each (experiment II), as follows: Group 1: immunized and challenge with bradizoites of ME-49 T. gondii strain; Group 2: non- immunized and challenged bradizoites of ME-49 T. gondii strain; Group 3: immunized and challenged with oocysts of ME-49 T. gondii strain; Group 4: non- immunized and challenged with oocysts of ME-49 T. gondii strain; Group 5: immunized and challenged with tachizoites of RH T. gondii strain; Group 6: non- immunized and challenged with tachizoites of RH T. gondii strain; Group 7: only immunized, Group 8: non- immunized and non-challenged. Weekly, after vaccination serological and hematological were performed. After parturition (Experiment I), the rats and newborns were euthanized, tissues and organs were collected for parasite load evaluation by Real Time PCR, intestinal tissue was collected for subsequent histological examinations, immunological involved in immune response against T. gondii. During lactation ...
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Estudo da origem do cromossomo 21 extra em portadores de Síndrome de Down.

Silva, Wellington dos Santos 27 September 1996 (has links)
Made available in DSpace on 2016-06-02T20:21:18Z (GMT). No. of bitstreams: 1 DissWSS.pdf: 515117 bytes, checksum: 52e40005397c190fb4fad0e716b3bec9 (MD5) Previous issue date: 1996-09-27 / Down syndrome is usually due to meiotic nondisjunction leading to trisomy 21.The origin of nondisjunction in trisomy 21 has so far been studied using cytogenetic heteromorphisms and DNA polymorphisms. Short sequence repeats have recently been described as an abundant class of DNA polymorphisms in the human genome, which can be typed using the Polymerase Chain Reaction (PCR) amplification. Analysis of these polymorphisms may provide a more accurate understanding of the meiotic stage of nondisjunction in trisomy 21 than that previously provided by chromosomal heteromorphisms. The following DNA polymorphisms located in pericentromeric region of human chromosome 21. Were typed D21S13E, D21S16 and D21S120. The other polymorphism studied was HMG14-GT2 which map to the terminal band 21q22.3. In the present stud such markers were used in order to the determine the parental origin and the meiotic stage of the additional chromosome 21 in 32 cases of Down syndromy. Seven families were informative showing that nondisjunction ocurred in meiosis I and three were from maternal origin using HMG14-GT2 polymorphism. In the other molecular systems the families are not informatives. / A trissomia do cromossomo 21, mais conhecida como síndrome de Down, geralmente resulta da falta de disjunção cromossômica durante a meiose. A origem da não disjunção vem sendo estudada através do uso de heteromorfismos citogenéticos e pelo estudo dos polimorfismos de DNA. Pequenas seqüências repetitivas foram descritas como uma classe abundante de polimorfismos de DNA no genoma humano as quais podem ser tipadas através da técnica de reação de polimerase em cadeia (PCR). A análise destes polimorfismos provê um conhecimento maior sobre a origem e o estágio meiótico da não disjunção. Neste trabalho foram utilizados os marcadores D21S13E, D21S16 e D21S120, localizados na região pericentromérica do cromossomo 21, além do HMG14-GT2, localizado na região 21q22.3, para estudar a origem e o estágio meiótico da não disjunção do cromossomo 21 extra em 32 famílias com um filho portador de síndrome de Down. Entre estas, 7 famílias (22%) foram informativas, mostrando que a não disjunção ocorreu na meiose I, e 3 casos foram de origem materna, comprovados através do estudo do sistema HMG14-GT2. Para os outros sistemas moleculares estudados no presente trabalho, nenhuma família se mostrou informativa.
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Prevalência e identificação de linhagens de hemoparasitas em populações brasileiras e africanas de Bulbucus ibis (Ardeidae, Pelecaniiformes, Aves)

Villar, Cynthia Martins 22 March 2013 (has links)
Made available in DSpace on 2016-06-02T20:21:32Z (GMT). No. of bitstreams: 1 5451.pdf: 3223679 bytes, checksum: 330bb99725d861546288b6adcca1e31b (MD5) Previous issue date: 2013-03-22 / Universidade Federal de Sao Carlos / The cattle egret (Bubulcus ibis), native from Africa, invaded the American continent by the end of the XIX century, initiating the process of colonization through the north of South America and spreading throughout the continent. Haemoparasites are found in all continents in the world, with the exception of Antarctica, and in preliminary tests it was verified they are present in the cattle egret population. The objectives of this work were to estimate the prevalence of the haemoparasites Plasmodium and Haemoproteus on African and Brazilian populations of B. ibis and to identify the repertoire of the lineages in these populations. Blood samples and blood slides were acquired from B. ibis nestlings in six brazilian populations and in 15 african populations, located at the west coast, totalling around 859 individuals. For the molecular diagnosis, fragments of the cytochrome B gene of the Plasmodium spp. and the Haemoproteus spp. were amplified. The DNA of the parasite in the infected individuals was sequenced and the identification of the genus and the lineages present was performed through phylogenetic analysis via the bayesian method using the Mr. Bayes software. These results were partially confirmed by the morphological diagnosis. The prevalences in Africa for the Plasmodium genus decreased from Senegal and Guinea-Bissau to South Africa, while Brazilian prevalences increased from Pará to Rio Grande do Sul. The diversities of African lineages of Plasmodium spp. were higher in regions close to and above the Equator line; the highest Brazilian diversity was also found near the Equator. The G pair to pair statistical test did not reveal difference between the prevalences of African and Brazilian cattle egret populations, both for the Plasmodium and for the Haemoproteus genera. Significant difference was detected relative to the richness of the lineages of the Plasmodium genus found in Africa and Brazil, partially confirming the predictions of the Enemy Release Hypothesis. Some evidence points to African countries near and above the Equator line as African source-founder populations of the cattle egret that colonized Brazil. / A garça-vaqueira (Bubulcus ibis), nativa da África, invadiu o continente americano no final do século XIX, iniciando o processo de colonização pelo norte da América do Sul e se espalhando por toda a área do continente. Os hemoparasitas são encontrados em todos os continentes do mundo, com exceção da Antártida e em testes preliminares verificamos que estão presentes na população de garça vaqueira. Os objetivos desse trabalho foram estimar a prevalência dos hemoparasitas, Plasmodium e Haemoproteus, nas populações de B. ibis africanas e brasileiras e identificar o repertório das linhagens nessas populações. Amostras de sangue e lâminas foram obtidas de ninhegos de B. ibis em seis populações brasileiras e em 14 populações africanas, localizadas na costa oeste, totalizando cerca 859 indivíduos. Para o diagnóstico molecular, foram amplificados fragmentos do gene do citocromo B do Plasmodium spp e do Hemoproteus spp . O DNA do parasita dos indivíduos infectados foi sequenciado e a identificação do gênero e das linhagens presentes foi feita por análise filogenética pelo método bayesiano no programa Mr. Bayes. Esses resultados foram parcialmente confirmados com o diagnóstico morfológico. As prevalências da África para o gênero Plasmodium decresceram de Senegal e Guiné Bissau para a África do Sul, ao passo que as brasileiras aumentaram do Pará para o Rio Grande do Sul. As diversidades das linhagens africanas de Plasmodium spp. foram maiores nas regiões próximas e acima à linha do Equador; a maior diversidade brasileira foi encontrada próximo ao Equador também. O teste estatístico G par a par não revelou diferença entre as prevalências das populações de garças vaqueiras africanas e brasileiras, tanto para o gênero Plasmodium quanto para o Haemoproteus. Foi detectada diferença significativa com relação à riqueza das linhagens do gênero Plasmodium encontradas na África e no Brasil, confirmando parcialmente as previsões da Hipótese da Liberação do Inimigo. Algumas evidências apontaram para os países africanos próximos e acima da linha do Equador como populações fonte-fundadora africana de garças vaqueiras que colonizaram o Brasil.
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Ocorrência de microrganismos oportunistas e superinfectantes em crianças com 6, 12 e 18 meses de idade e suas mães

Bianco, Karina Gerhardt [UNESP] 01 September 2009 (has links) (PDF)
Made available in DSpace on 2014-06-11T19:33:00Z (GMT). No. of bitstreams: 0 Previous issue date: 2009-09-01Bitstream added on 2014-06-13T21:05:38Z : No. of bitstreams: 1 bianco_kg_dr_araca.pdf: 593186 bytes, checksum: 17495f8ff3d7eb5b38f94d38fa706d98 (MD5) / Coordenação de Aperfeiçoamento de Pessoal de Nível Superior (CAPES) / A primeira infância é a fase mais importante para o estabelecimento de condições de saúde, desenvolvimento da microbiota bucal e para o estabelecimento de hábitos. Desde que a grande maioria das infecções graves que acometem as crianças está associada a microrganismos superinfectantes e multirresistentes a antimicrobianos, cujo estabelecimento na cavidade bucal de bebês não é adequadamente descrito, foi objetivo do estudo, analisar a presença de um grupo desses microrganismos em crianças com seis meses de idade e suas mães, ao longo de doze meses de acompanhamento, bem como a presença de genes de resistência aos principais antimicrobianos nas amostras clínicas oriundas das mães e seus bebês. Para tanto, 68 pares de bebês e suas mães foram selecionados. Após levantamento de dieta dos bebês e das condições socioeconômicas das famílias, realizava-se a coleta de saliva e biofilme subgengival das mães e saliva das crianças, para avaliação microbiológica. Esses procedimentos foram repetidos, em todos os pares, quando os bebês completaram doze e dezoito meses de idade, acrescentando-se nessas ocasiões a coleta do biofilme dental das crianças. A detecção dos diferentes microrganismos oportunistas era realizada pela amplificação do DNA dos microrganismos alvo empregando-se as reações em cadeia da DNA polimerase (PCR). As condições de saúde da mucosa bucal e gengiva foram satisfatórias para os bebês, enquanto a maioria das mães era portadora de gengivite ou periodontite. Crianças cujas mães tinham gengivite mostraram maior freqüência desses patógenos na saliva e no biofilme. Os principais microrganismos oportunistas detectados em mães e crianças foram os membros da família Enterobacteriaceae, além de Enterococcus spp., E. faecalis, Helicobacter spp. e Helicobacter... / Early childhood is the most important phase for the establishment of health conditions, development of oral microbiota and the establishment of habits. As the vast majority of infections that affect children is associated with superinfecting microorganisms and multi-resistant ones to antibiotics, whose establishment in the oral cavity of babies is not adequately described, the objective of this study was to analyze the presence of a group of these microorganisms in children aged six months of age and their mothers over twelve months of monitoring, as well as the presence of resistance genes to key antimicrobials in clinical samples derived from mothers and their babies. For this, 68 pairs of infants and their mothers were selected. After surveying the diet of babies and families' socioeconomic conditions, it was performed the collection of the mothers’ saliva and subgingival biofilm and their children’s saliva for microbiological evaluation. These procedures were repeated in all pairs, when babies completed twelve and eighteen months of age, adding on these occasions the collection of their dental biofilm. The detection of different opportunistic microorganisms was performed by amplification of target DNA of microorganisms through the chain reactions of DNA polymerase (PCR). Health conditions of oral mucosa and gingiva were satisfactory for the babies, while most of the mothers was a carrier of gingivitis or periodontitis. Children whose mothers had gingivitis showed increased frequency of these pathogens in saliva and biofilm. The main opportunistic microorganisms detected in mothers and children were members of the family Enterobacteriaceae, and Enterococcus spp., E. faecalis, Helicobacter spp. and Helicobacter pylori. Other infectious agents such as cytomegalovirus and Epstein-Barr virus were rarely detected in these... (Complete abstract click electronic access below)
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Diferenciação molecular entre Salmonella enterica subsp enterica sorovar Pullorum e Salmonella enterica subsp enterica sorovar Gallinarum

Ribeiro, Simone Alves Mendes [UNESP] 15 February 2008 (has links) (PDF)
Made available in DSpace on 2014-06-11T19:33:26Z (GMT). No. of bitstreams: 0 Previous issue date: 2008-02-15Bitstream added on 2014-06-13T20:48:11Z : No. of bitstreams: 1 ribeiro_sam_dr_jabo.pdf: 714385 bytes, checksum: 8dea9f3890502c7e3fa86484716ab25e (MD5) / Coordenação de Aperfeiçoamento de Pessoal de Nível Superior (CAPES) / A Salmonella Pullorum (SP) é muito semelhante à Salmonella Gallinarum (SG), agentes da Pulorose e Tifo aviário, respectivamente, sendo responsáveis por perdas econômicas no setor avícola. São salmonelas de composição antigênica similar e a distinção de ambas tem sido baseada em provas bioquímicas. Entretanto, este procedimento é laborioso e o surgimento de estirpes com comportamento bioquímico atípico tem estimulado a procura por outros métodos de diagnóstico, como os testes moleculares. No presente estudo, analisou-se o método descrito na literatura envolvendo o gene rfbS em conjunto com testes desenvolvidos com base nos genes speC e speF. O gene rfbS codifica a enzima que atua na parede celular de bactérias e tem sido utilizado para diferenciar SP e SG. Com o propósito de padronizar a PCR para ser utilizada na rotina laboratorial, empregou-se dois métodos de extração de DNA e diferentes concentrações de reagentes. Entretanto, tendo em vista a dificuldade de padronização encontrada desde o início, foi concomitantemente desenvolvida a PCR para os genes speC e speF. Estes dois últimos estão relacionados com a produção da enzima ornitina-descarboxilase, a qual é ativa em SP e inativa em SG. Após testes inicias, foi possível padronizar a PCR do gene speC com posterior utilização da técnica de tratamento enzimático com a enzima de restrição Eco RI. Tanto para o gene rfbS quanto para os genes speC e speF, os resultados encontrados permitiram a diferenciação de 13 amostras de SP e 20 de SG isoladas no Brasil e duas cepas ATCC. Sendo assim, as ações sanitárias e a tomada de decisão no campo podem ser conduzidas de maneira rápida e segura. / Salmonella Pullorum (SP) is very similar to Salmonella Gallinarum (SG). They are respectively agents of Pulorosis and Avian Typhoid, both diseases responsible for economic losses to poultry production. Due to the fact that both salmonellas have similar antigenic composition, their differentiation has been based in biochemical tests. However, this fact that this kind of procedure is very troublesome and the occurence of strains showing atypical behavior have stimulated the search for others diagnostic methods, such as molecular tests. In the present study, a method described in the literature using gene rfbS was analyzed together with tests developed based on genes speC and speF. Gene rfbS encodes an enzyme that acts on the cell wall of bacteria and has been used in the differentiation between SP and SG. In order to standardize the PCR procedure to be used in laboratory routine, two methods for DNA extraction were used, as well as different concentrations of the reagents. However, due to the difficulty in the standardization observed from the beginning of the study, a PCR procedure was developed for genes speC and speF. These genes are related to the production of the enzyme ornithine-descarboxilase, active in SP and inactive in SG. After the initial tests, PCR of gene speC was standardized, and later on it was coupled with the enzymatic treatment with restriction enzyme Eco RI. Results obtained for gene rfbS as well as for genes speC and speF enabled differentiation of 13 SP and 20 SG strains isolated in Brazil and two strains ATCC. So, the sanitary actions and the decisions in the livestock can to be conduced with safety and rapidity.

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